JPH0428717B2

JPH0428717B2 -

Info

Publication number: JPH0428717B2
Application number: JP57502412A
Authority: JP
Inventors: Sarii An Horitsuku; Maikuru Furanshisu Horitsuku
Original assignee: MASACHUUSETSUTSU JENERARU HOSUPITARU ZA
Current assignee: MASACHUUSETSUTSU JENERARU HOSUPITARU ZA
Priority date: 1982-06-30
Filing date: 1982-06-30
Publication date: 1992-05-15
Also published as: EP0112332B1; JPS59501264A; WO1984000107A1; EP0112332A4; ATE90564T1; EP0112332A1

Description

請求の範囲１動物におけるカルシウム及びリン代謝を維持
する上で生物学的に活性な下記一般式で表わさ
れる合成化合物：（式中、炭素Ｃ−22及びＣ−23間の結合は単一
或いは二重結合であり、R²は水素、メチル或い
はエチルであり、Ｘは水素及び−OR¹よりなる群
から選ばれ、R¹は、グルコース、マンノース、
ガラクトース、グロース、アロース、アルトロー
ス、イドース、タロース、フラクトース、アラビ
ノース、キシロース、スクロース、セロビオー
ス、マルトース、ラクトース、トレハロース、ゲ
ンチオビオース、メリビオース、ラフイノース、
ゲンチアノース、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、Ｎ−ア
セチル−Ｄ−マンノサミン、Ｎ−アセチルノイラ
ミン酸、Ｄ−グルコサミン、リキソシルアミンお
よびＤ−ガラクトサミンよりなる群から選ばれる
グリコシドであり、化合物当りのグリコシド単位
の総数が３以下である）。２Ｃ−３位の結合がβである、請求の範囲第１
項記載の化合物。３Ｃ−１位のＸがOR¹である場合、Ｃ−１位に
おける結合がαである、請求の範囲第１項記載の
化合物。４Ｃ−22及びＣ−23間の結合が単一であり、
R²＝Ｈである、請求の範囲第１項記載の化合物。５次式で表わされる、請求の範囲第１項記載の
化合物：６次式で表わされる、請求の範囲第１項記載の
化合物：７次式で表わされる、請求の範囲第１項記載の
化合物：８次式で表わされる、請求の範囲第１項記載の
化合物：９次式で表わされる、請求の範囲第１項記載の
化合物：１０次式で表わされる、請求の範囲第１項記載
の化合物：１１次式で表わされる、請求の範囲第１項記載
の化合物：１２次式で表わされる、請求の範囲第１項記載
の化合物：１３ R¹がグルコースである、請求の範囲第１
項記載の化合物。１４化合物がビタミンD₃−3β−Ｄ−グルコシ
ドである、請求の範囲第１項記載の化合物。１５化合物が25−（グルコシド）−ビタミンD₃
である、請求の範囲第１項記載の化合物。１６化合物が１，25−ジヒドロキシビタミン
D₃−3β−Ｄ−グルコシドである、請求の範囲第
１項記載の化合物。１７化合物が25−ヒドロキシビタミンD₃−
3β−Ｄ−グルコシドである、請求の範囲第１項
記載の化合物。１８化合物が１−ヒドロキシ−25−グルコシド
−ビタミンD₃である、請求の範囲第１項記載の
化合物。明細書技術分野本発明はビタミンＤの水溶性合成グリコシド類
及びカルシウム代謝の制御におけるその用途に関
する。背景技術ビタミンD₃欠乏、即ちビタミンD₃の代謝にお
ける障害は、くる病、腎臓骨ジストロフイー、及
び関連した骨病並びに、一般的に、低−及び高カ
ルシウム血症状態などの病気を引起こす。従つ
て、ビタミンD₃及びその代謝物質は、血液のカ
ルシウム濃度を制御することにより骨構造の正常
な発育を維持する上に極めて重要である。ビタミンD₃は肝臓において速かに25−0H−D₃
に転換される。低カルシウム血症に応答して、ビ
タミンの主たる循環代謝物である25−0H−D₃
は、腎臓において1α，25−（OH）₂D₃に更に代謝
される。1α，25−（OH）₂D₃は、D₃或いは25−
OH−D₃のいずよりも迅速に作用する。更に、こ
のビタミンのジヒドロキシ形態物は非経口的に、
且つ毎日投与されるならば、生体内でD₃よりも
５〜10倍強力であり、このビタミンのモノヒドロ
キシ形態よりも２〜５倍強力である（J.L.Napoli
及びH.F.Deluca，“Blood Calcium Regulators”
及びそこに引用されている文献、バーガー
（Burger）の「医化学」（Medicinal Chemistry）
第４版、第部、Manfred Wolf編、Wiley−
Interscience，1979年、725〜739頁）。ビタミンD₂、ビタミンD₃或いは１；１，25；
１，24，25；24，25；25，26；或いは１，25，26
の位置においてヒドロキシル化されているそれら
の代謝物は水不溶性化合物である。薬品が水性環
境或いは胃腸管腔において比較的不溶性である場
合には、投与後の溶解性が薬品吸収における律速
段階となり得る。他方、水溶性薬品においては、
溶解が迅速に起こり、従つて、血液を通しての活
性部位への輸送を容易にする。従つて、親水性及
び／又は水溶性であり、なお且つ水不溶性薬品の
正常な生物学的特性を保つビタミンＤ（D₃又は
D₂）の形態物を提供することが望まれている。南アメリカの植物Solanum malacoxylon（以
下「S.m.」と称する）の葉からの抽出物が、１，
25（HO）₂D₃と異り、そしてグリコシダーゼ酵素
で処理すると１，25（OH）₂D₃及び水溶性未同定
断片を生成する水溶性成分を含有していることが
確認されている〔例えば、M.R.Haussler等、
Life Sciences，18巻1049−1056（1976年）；R.H.
Wasserman等、Scien−ce 194巻、853−855
（1976年）；J.L.Napoli等、The Journal of
Biologi−cal Chemistry，252巻、2580−2583
（1977年）〕。グリコシダーゼで処理すると１，25ジヒドロキ
シビタミンD₃を生成する極めて類似した水溶性
成分がCestrum diurnum〔以下「c.d.」と称す
る；M.R.Hughes等、Nature，268巻、347−349
（1977年）〕という植物に見出されている。これら
のS.m.或いはC.d.からの水溶性抽出物は1α，25−
ジヒドロキシビタミンD₃のそれに類似した生物
学的活性を有する。これらの植物からの水溶性成分のグリコシダー
ゼ処理の際に放出された水溶性断片の構造に関す
る今日までに存在する唯一の証拠は曖味である。
前記刊行物の著者等は、酵素的証拠、水溶性及び
化学検出試薬の使用に基づいて、その構造はおそ
らくグリコシドであると結論付けている〔N.
Peterlik及びR.H.Wasserman，FEBS Lett，56
巻：16−19（1973年）〕。しかしながら、ハンフリ
ーズ（Humphreys）〔Nature（London）New
Biology 246巻：155（1973）〕は、モリツシユ
（Molish）炭水化物試験がこの成分に対して陰性
であることを実証し、この結論について疑問を投
げかけた。酵素反応放出前の水溶性ビタミンD₃含有成分
の分子量は、1000より相当大きいこと知られてい
るので〔D.J.Humphreys，Nature（London）
New Biology 246巻：155（1973年）〕、酵素加水
分解により放出された水溶性複合断片の分子量は
584よりも相当に大きいと計算することができ、
ジヒドロキシビタミンD₃の分子量は416である。
この様に酵素加水分解により放出される水溶性断
片が事実グリコシドであるならば、それは、３個
を越えるグリコシド（グリコピラノシル或いはグ
リコフラノシル）単位を有するものであろう。更に、酵素反応放出の結果は、各種の構造と十
分に一致するものである。例えば、M.R.
Haussler等〔Life Sciences 18：1049−1056
（1976年）〕は、Charonia Iampusに由来する混
合グリコシダーゼを用いてこの水溶性成分を加水
分解することを開示している。この酵素は、現実
には下記の如き酵素の混合物である（Miles
Labo−ratories，1977年カタログ）：β−グルコ
シダーゼ（11単位）、α−マンノシダーゼ（33単
位）、β−マンノシダーゼ（5.2単位）、α−グル
コシダーゼ、β−グルコシダーゼ（4.8単位）、β
−ガラクトシダーゼ（44単位）、α−ガラクトシ
ダーゼ（26単位）、α−フコシダーゼ（24単位）、
β−キシロシダーゼ（8.2単位）、β−Ｎ−アセチ
ルグルコサミニダーゼ（210単位）、α−Ｎ−アセ
チルガラクトサミニダーゼ（41単位）、及びβ−
Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼ（25単位）。
ピーターリカ（M.Peterlik）等〔Biochemical
and Biaphysical Research Communicat−ions
70巻：797−804（1976年）〕は、シグマ化学
（Sigma Chemical）社製のβ−グルコシダーゼ
（アーモンド）を用いたS.m.抽出物の研究におい
て、更にβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、及びα−Ｄ
−マンノシダーゼ活性〔シグマ化学社、1981年２
月カタログ；更にJ.Schwartz等Archiv−es of
Biochemistry and Biophysi−cs、137巻：122−
127（1970年）参照〕をも含有した酵素を利用し
た。要するに、これらの著者により観察された結果
は、広範囲の構造に合致するものであり、そのい
ずれも良く特性化付けられていないが、たとえグ
リコシド類と証明されたにせよ、ビタミンＤ単位
当り少なくとも３個を越えるグリコシド単位を含
有するものである。従つて、低カルシウム血症に対して活性であ
り、カルシウム及びリンのホメオスタシス
（homeosta−sis）を維持する、明確に定義され
良く特性付けられたビタミンＤの水溶性形態物に
ついての需要が存続している。発明の開示従つて、本発明の目的は、ビタミンD₃、ビタ
ミンD₂及びそれらのヒドロキシル化代謝物の良
く特性付けられ、明確に定義された合成水溶性形
態物を提供することにある。本発明の他の目的は、低カルシウム血症に対し
て活性であり、動物体内においてカルシウム及び
リンホメオスタシスを維持する活性を有する前記
ビタミンＤ類の水溶性形態物を使用することであ
る。更に本発明の別の目的は、前記ビタミン類を含
有する薬剤組成物を提供することである。更に又、本発明の別の目的は、前記ビタミンＤ
の水溶性形態物を使用することにより動物におけ
る低カルシウム血症及びカルシウム及びリン代謝
障害を治療する方法を提供することである。以下の説明により容易に明らかとなるように、
これら及びその他の本発明の目的は、下記一般式
（）で表わされる動物におけるカルシウム及び
リンホメオスタシスを維持することに生物学的に
活性である合成化合物を提供することにより達成
された：（式中、炭素Ｃ−22及びＣ−23間の結合は単一
或いは二重結合であり、R²は水素、−CH₃或いは
−CH₂CH₃であり、Ｘは水素及び−OR¹よりなる
群から選ばれ、R¹は水素或いは残基当り１〜20
個のグリコシド単位を含有する直鎖或いは分岐鎖
グリコシド残基であり、該R¹の少なくとも１個
はグリコシド残基である）。発明を実施するための最良の態様本発明は、明確に定義され且つ実質的に純粋
な、特性付けられたビタミンD₃及びD₂の合成の
水溶性形態物並びにこれらのビタミン類のヒドロ
キシル化誘導体を初めて提供するものである。本
発明の化合物は多くの場合において結晶性のもの
である。それらは従来の部分的に精製され、特性
付けの貧弱な1α，25−ジヒドロキシビタミンD₃
の推定された「グリコシド」に対して明確な進歩
を示すものである。本発明の化合物は下記一般式（）を有するも
のである：（式中、炭素Ｃ−22及びＣ−23間の結合は単一
或いは二重結合であり、R²は水素、−CH₃或いは
−CH₂CH₃であり、Ｘは水素及び−OR¹よりなる
群から選ばれ、R¹は水素或いは残基当り１〜20
個のグリコシド単位を含有する直鎖或いは分岐鎖
グリコシド残基であり、該R¹の少なくとも１個
はグリコシド残基である）。グリコシド単位はグリコピラノシル或いはグリ
コフラノシル並びにそれらのアミノ糖誘導体を意
味する。上記の残基は、それらのホモポリマー、
ランダム或いは交互或いはブロツク共重合体であ
る。グリコシド単位は、遊離ヒドロキシ基、或い
は

【式】（R³は水素、低級アルキル、アリール或いはアラルキルである）でアシル化されたヒ
ドロキシ基を有する。好ましくは、R³はC₁−C₆
アルキルであり、最も好ましくはアセチル或いは
プロピオニル、フエニル、ニトロフエニル、ハロ
フエニル、低級アルキル置換フエニル、低級アル
コキシ置換フエニルなど、或いはベンジル、ニト
ロベンジル、ハロベンジル、低級アルキル置換ベ
ンジル、低級アルコキシ置換ベンジルなどであ
る。一般式（）の化合物がＣ−22位に二重結合を
有する場合には、それらはビタミンD₂の誘導体
であるのに対し、その位置の結合が単一であり且
つC₂₄アルキルがない場合には、それらはビタミ
ンD₃の誘導体である。後者の方が好ましい。本発明の化合物は１，３，24，25或いは26位に
少なくとも１個のグリコシド残基を含有する。し
かしながら、それらは又１以上５以下のその様な
グリコシド残基を同時に含有してもよい。好ましい化合物は、ビタミンD₃或いはD₂，１
−ヒドロキシ−ビタミンD₃或いはD₂，１，25−
ジヒドロキシ−ビタミンD₃或いはD₂，25−ジヒ
ドロキシ−ビタミンD₃或いはD₂，25，26−ジヒ
ドロキシ−ビタミンD₃或いはD₂，１，24，25−
トリヒドロキシ−ビタミンD₃或いはD₂及び１，
25，26−トリヒドロキシ−ビタミンD₃或いはD₂
から誘導されるものである。これらの中で最も好
ましいものはビタミンD₃或いはD₂，１−ヒドロ
キシ−ビタミンD₃或いはD₂及び１−25−ジヒド
ロキシ−ビタミンD₃或いはD₂である。ビタミン類の多ヒドロキシル化形態物の場合
（例えば、１，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₃は
１，３及び25位に３個のヒドロキシ基を含有す
る）、本発明の好ましい化合物は、複数個のヒド
ロキシ基の全部未満のものがグリコシル化されて
いるもの、最も好ましくは複数のヒドロキシ基の
１個のみがグルコシル化されているものである。これらのグリコシド類は20個までのグルコシド
単位を含有することができる。しかしながら、好
ましいものは、10個未満、最も好ましいのは３個
以下のグリコシド単位を有するものである。具体
例としては、グリコシド残基中に１或いは２個の
グリコシド単位を含有するものが挙げられる。グリコピラノース或いはグリコフラノース環或
いはそれらのアミノ誘導体は完全に或いは部分的
にアシル化されていてもよく、或いは完全に脱ア
シル化されていてもよい。完全或いは部分的にア
シル化されたグリコシド類は、脱アシル化物質の
合成のための特定の中間体として有用である。可能性のあるグリコピラノシル構造の中には、
グルコース、マンノース、ガラクトース、グロー
ス、アロース、アルトロース、イドース、或いは
タロースなどがある。フラノシル構造の中には、
好ましいものとして、フラクトース、アラビノー
ス、セロビオース、アルトース、ラクトース、ト
レハロース、ゲンチオビオース及びメリビオース
より誘導されたものが挙げられる。トリグリコシ
ド類の中で好ましいものは、フラクトース、アラ
ビノース、或いはキシロースから誘導されたもの
である。好ましいジグリコシド類の中には、スク
ロース、セロビオース、マルトース、ラクトー
ス、トレハロース、ゲンチオビオース、及びメリ
ビオースなどがある。トリグリコシド類の中で好
ましいものはラフイノース、或いはゲンチアノー
スである。アミノ誘導体の中には、Ｎ−アセチル
−Ｄ−ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−グル
コサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−アンノサミン、Ｎ
−アセチルノイラミン酸、Ｄ−グルコサミン、リ
キソシルアミン、Ｄ−ガラクトサミンなどがあ
る。１個を越えるグリコシド単位が単一ヒドロキシ
基上に存在する場合には（即ち、ジ或いはポリグ
リコシド残基）、個々のグリコシド環は１−１，
１−２，１−３，１−４，１−５或いは１−６結
合により、最も好ましくは１−２，１−４及び１
−６により結合されていてもよい。個々のグリコ
シド環同志の結合はα或いはβである。ビタミンD₃或いはD₂分子に付着したヒドロキ
シ基或いはグリコシド残基の酸素結合の立体配置
はα（紙面の外側）或いはβ（紙面の内側）のいず
れでも良い。３−ヒドロキシ或いはＣ−３におけ
るグリコシドキシ基の立体配置がβであり、独立
に或いは同持にＣ−１のヒドロキシ或いはグリコ
シドキシ基の立体配置がαであることが好まし
い。又、Ｃ−24の廻りの立体配置がＲであるのが
好ましい。Ｃ−24において、Ｘ＝Ｈであり、R²
＝CH₃或いは−CH₂CH₃である場合には、Ｃ−24
における立体配置は好ましくはＳであるのがよ
い。本発明の化合物の具体例を下記に示す：ビタミンD₃，3β−（β−Ｄ−グルコピラノシ
ド）；ビタミンD₃，3β−（β−Ｄ−フラクトフラノシ
ド）；ビタミンD₃，3β−（β−セロビオシド）；ビタミンD₃，3β−（β−マルトシド）；ビタミンD₃，3β−（β−ラクトシド）；ビタミンD₃，3β−（β−トレハロシド）；ビタミンD₃，3β−ラフイノシド；ビタミンD₃，3β−ゲンチオビオシド； 1α−ヒドロキシ−ビタミンD₃，3β−（β−Ｄ−
グルコピラノシド）； 1α−ヒドロキシ−ビタミンD₃，3β−（β−Ｄ−
フラクトフラノシド）； 1α−ヒドロキシ−ビタミンD₃，3β−（β−セル
ビオシド）； 1α−ヒドロキシ−3β−（β−マルトシル）ビタ
ミンD₃； 1α−ヒドロキシ−3β−ラフイノシル−ビタミ
ンD₃； 1α−ヒドロキシ−3β−ゲンチオビオシル−ビ
タミンD₃； 1α−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−ビタミン
D₃； 1α−（β−Ｄ−フラクトフラノシル）−ビタミ
ンD₃； 1α−（β−セロビオシル）−ビタミンD₃； 1α−（β−マルトシル）−ビタミンD₃； 1α−（β−ラクトシル）−ビタミンD₃； 1α−（β−トレハロシル）−ビタミンD₃； 1α−ラフイノシル−ビタミンD₃； 1α−ゲンチオビオシル−ビタミンD₃； 1α，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₃，3β−（β
−Ｄ−フラクトフラノシド）； 1α，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₃，3β−（β
−Ｄ−グルコピラノシド）； 1α−（β−Ｄ−グリコピラノシル）−25−ヒド
ロキシ−ビタミンD₃； 1α−（β−Ｄ−フラクトフラノシル）−25−ヒ
ドロキシ−ビタミンD₃； 1α−ヒドロキシ−25−（β−Ｄ−フラクトフラ
ノシル）−ビタミンD₃； 1α−ヒドロキシ、25−（β−セロビオシル）−
ビタミンD₃； 1α−ヒドロキシ、25−（β−マルトシル）−ビ
タミンD₃； 1α−ヒドロキシ、25−（β−ラクトシル）−ビ
タミンD₃； 1α−ヒドロキシ、25−（β−トレハロシル）−
ビタミンD₃； 1α−ヒドロキシ、25−ラフイノシル−ビタミ
ンD₃； 1α−ヒドロキシ、25−ゲンチオビシル−ビタ
ミンD₃。上記誘導体の全ては又、ビタミンD₂を用いて
調製することもできる。本発明のビタミンＤ類のグリコシド誘導体は当
業者に公知の標準的合成方法により調製すること
ができる。これらの方法は出発ビタミンD₃或い
はD₂が１以上のヒドロキシ基を含むか否かによ
つて異る。ビタミンが唯一のヒドロキシ基を有す
る場合には、合成は簡単である。即ち、モノヒド
ロキシル化ビタミン（３位でヒドロキシル化）を
ベンゼン或いはトルエンなどの不活性な非極性溶
媒の還流溶液中において炭酸銀で処理し、これに
末端環（即ち、所謂単一環）のＣ−1′位において
適当な離脱基（L.G.）を有する完全にアシル化さ
れたグリコシド或いは完全にアシル化された直鎖
或いは分岐鎖グリコシドポリマーを添加する。次
の反応に従つて縮合が起こるが、ここでは例示の
みを目的として単一グリコシドについてのみ示さ
れている：この反応系列において、R³は前記の通りであ
り、LGは２分子求核置換反応において置換され
ることのできる臭素、塩素、ヨウ素、ｐ−トルエ
ンスルホニルなどの通常の離脱基である。ビタミンD₃或いはD₂をグリコシドポリマーと
反応させる場合には、グルコピラノシド或いはグ
リコフラノシド環中の１個以上のOCOR³基は、
グリコシド単位の総数が20を越えないことを条件
として、完全にアシル化されたグリコシド単位で
置換される。反応は室温乃至還流条件において１〜10時間行
ない、その後冷却及び過して銀塩を除去する。
液を乾燥し、不活性溶媒を留去する。得られた
生成物を高性能液体クロマトグラフイー、ケイ酸
クロマトグラフイー、薄層予備クロマトグラフイ
ーなどの標準的な近代的精製方法の任意のものに
より精製することができる。通常二つの生成物の
混合物が得られ、それらは環結合点におけるα及
びβグリコフラノシル或いはグリコピラノシル誘
導体である。これらは通常上記クロマトグラフ法
により分離することができる。個々の生成物を分離後、グリコシド残基は、メ
タノール中ナトリウムメトキシド或いはメタノー
ル中アンモニアなどの塩基内において脱アシル化
する。更に高性能クロマトグラフイーによる精製
を通常行い、高度に精製された生成物を得る。出発ビタミンＤ（D₃或いはD₂）が２個のヒドロ
キシ基（例えば、１−ヒドロキシビタミンD₃、
或いは25−ヒドロキシビタミンD₃）を有する場
合には、これらの一つは、縮合後且つグリコシド
残基の脱アシル化前、中、或いは後に最終的には
除去することのできる保護基で選択的に保護され
る必要がある。これは３個以上のヒドロキシ基が
ビタミン出発物質中に存在する場合にもあてはま
り、これらの内の全部未満のものがグリコシル化
されることを必要とする。出発物質中のヒドロキシ基の選択的保護は、有
機化学の当業者に周知の標準的保護及び脱保護反
応を用いて行うことができる。ビタミンＤ分子上の各ヒドロキシ基はそれらが
一級（例、26−OH）、二級（例、24−OH、3β−
OHなど）或いは三級（例、25−OH）のヒドロ
キシル官能基のいずれかであるという事実により
異つた反応性を有するので、選択性を達成するこ
とができる。更に、立体的考慮により、3β−OH
は、隣接ヒドロキシル官能基であると共にC₁₀上
の環外C₁₉メチレン官能基によつて立体的に妨げ
られている1α−OHとは異つた反応性を有する。
これらの反応性の好例はホリツク（Holick）等
により、Biochemistry：10巻、2799，1971年に
例示されており、この文献には、１，25−（OH）
₂−D₃のトリメチルシリルエーテル誘導体をHC1
−MeOH中において温和な条件下にヒドロキシ
ル化して１，25−（OH）₂−D₃の３，25−ジシリ
ルエーテル及び25−モノシリルエーテル誘導体を
得ることができることが示されている。更に、３
及び１のヒドロキシルが保護されている１，25−
（OH）₂−D₃を得るためには、１，25−（OH）₂−
D₃の25−モノシリルエーテル誘導体をアセチル
化して１，25−（OH）₂−D₃−１，３−ジアセチ
ル−25−トリメチルシリルエテールを形成するこ
とができる。アセテート類は酸加水分解に対して
極めて安定であるので、この誘導体を酸加水分解
して１，３−ジアセトキシ−25−ヒドロキシビタ
ミンD₃を得ることができる。代替的手法は単に
１，25−（OH）₂−D₃をピリジン中の無水酢酸中
において室温で24〜48時間アセチル化して１，３
−ジアセトキシ−25−ヒドロキシビタミンD₃を
得ることであろう。 25−ヒドロキシビタミンD₃に対して25−ヒド
ロキシル基を保護するためには、次のことを行う
ことができる：即ち、25−OH−D₃は無水酢酸及
びピリジン中において還流条件下に24時間で完全
にアセチル化することができる。３−Acは室温
において12時間ケン化（95％MeOH−水中の
KOH）により選択的に除去することができる。一度所望の保護ビタミンＤ誘導体が調製される
と、これを炭酸銀と反応させるか上記反応式の
如きグリコシド或いはポリグリコシド残基と反応
させ、次いで脱アシル化、脱保護基及び精製を行
う。炭酸銀以外のものを用いた方法も採用でき、
例えば、K.Igara−shi、“Advances in
Carbohydrate Chemistry and Biochemistry”
34巻、243−283、或いはC.D.Warren等Carboh−
ydrate Research、82巻：71−83（1980年）の記
載を挙げることができる。容易に利用可能な出発ビタミンＤ誘導体として
は、下記のものが挙げられる：ビタミンD₃；ビタミンD₂；１−ヒドロキシ−ビタミンD₃；１−ヒドロキシ−ビタミンD₂； 25−OH−ビタミンD₃； 25−OH−ビタミンD₂；１，24−（OH）₂−ビタミンD₃；１，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₃；１，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₂； 24，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₃； 25，26−ジヒドロキシ−ビタミンD₃； 24，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₂；１，24，25−トリヒドロキシ−ビタミンD₃；１，25，26−トリヒドロキシ−ビタミンD₃。ある種の物質、例えば、25，26−ビタミンD₂，
１，24，25−トリヒドロキシビタミンD₂或いは
１，25，26−トリヒドロキシビタミンD₂は当分
野において未だ十分に同定されていないが、しか
し、合成的に調製されるならば使用することが可
能である。第一（或いは唯一）のグリコシド環のＣ−1′位
に離脱基を有するアシル化グリコシドは、例え
ば、フレツチヤー（H.G.Fletcher Jr.）の
“Methodsin Carbohydrate Chemistry”２巻：
228（1963年）或いはボナー（W.A.Bonner）の
“Journal of Organic Chemistry”26巻：908−
911（1961年）、或いはルミユー（R.U.Lemieux）
の“Methods in Carb−ohydrate Chemistry”、
第巻、221，222に記載されている方法により調
製することができる。オリゴサツカライド中間体は、例えば、ルミユ
ー〔R.U.Lemieux、J.of Amer.Chem.Soc.97
巻：4063−4069（1975年）〕、フレシエツト〔J.M.
J.Frechet，“Polymer−Suppo−rted Reactions
in Organic Synth−esis”（1980年）407−434〕、
或いはケネデイ〔J.F.Kennedy、“Carbohydrate
Che−mistry”７巻：496−585（1975年）〕の方法
により調製することができる。市販の糖類としては次のものが挙げられる
（Pfa−nstiehl Laboratories，Inc，）：ペントー
ス類、例えば、Ｄ−アラビノース、Ｌ−アラビノ
ース、Ｄ−リキソース、Ｌ−リキソース、Ｄ−リ
ボース、Ｄ−キシロース、Ｌ−キシロースなど、
ヘキソース類、例えば、デキストロース、Ｄ−フ
ラクトース、Ｄ−ガラクトース、α−Ｄ−グルコ
ース、β−Ｄ−グルコース、Ｌ−グルコース、レ
ブロース、Ｄ−マンノース、Ｌ−マンノース、Ｌ
−ソルボースなど、ヘプトース類、例えば、Ｄ−
グルコヘプトース、Ｄ−マンノヘプツロース、セ
ドヘプツロザンなど、ジサツカライド類、例え
ば、セロビオース、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピ
ラノシル−Ｄ−アラビノース、ゲンチオビオー
ス、ラクトース類、α−ラクツロース、マルトー
ス、α−メリビオース、スクロース、トレハロー
ス、ツラノースなど、トリサツカライド類、例え
ば、メレチトース、ラフイノースなど、テトラサ
ツカライド類、例えば、スタキオースなど、ポリ
サツカライド類及びその誘導体、例えば、アラビ
ン酸、チテイン、チトザン、デキストリン、シク
ロ−デキストリン類、グリコーゲン、イヌリンな
ど。或いは又、全合成経路（保護、縮合及び脱保
護）をプロビタミンＤであるΔ^5,7ステロイドジエ
ンを出発物質として用いて行うことができる。グ
リコシル化後、このプロビタミンを光化学的に開
環し、得られたプロビタミンを熱的に再配列して
グリコシル化ビタミンを得る。ビタミンＤの活性形態物は、１，25−ジヒドロ
キシビタミンD₃であることが知られている。〔J.
L.Napoli及びH.F.DeLuca，“Burger's
Medicinal Chemistry”第４版、第部、728ff
頁〕。１，25−ジヒドロキシ−ビタミンD₃グリコ
シドが低カルシウム血症状態の治療に或いは動
物、特にヒトにおけるリン及びカルシウム代謝の
制御に使用される場合には、動物の内因性グリコ
シダーゼ酵素が直接的にこのビタミンの活性形態
物を放出する。他方、このビタミンの非ヒドロキ
シル化誘導体が使用される場合には（例えば、ビ
タミンD₃グリコシド）、ヒドロキシル化ビタミン
の酵素による放出に続いて、活性１，25−ジヒド
ロキシビタミンを形成するために、肝臓、次いで
腎臓においてヒドロキシル化が行われる。本発明の水溶性グリコシル化ビタミンＤ複合体
は、親水性の良好な水溶性誘導体乃至優れた水溶
性の誘導体を包含する。それらは、一般的に、従
来ビタミンD₃、ビタミンD₂或いはそれらのヒド
ロキシル化誘導体が必要とされていた任意の用途
に使用することができる。本発明の複合体の利点
は、それらの水溶性にあり、従つて、例えば、塩
水或いは水性緩衝液のような水性媒体における投
与の容易性にある。これは、これらの複合体をビ
タミンＤ放出インラインポンプ、静脈内分配器な
どの装置において利用することを可能にする。そ
の他の利点としては、脂肪悪吸収症候群の治療並
びに腸における生物学的に活性形態のビタミン
D₃の放出、例えば、１，25−（OH）₂−D₃グリコ
シド→腸→１，25−（OH）₂−D₃→生物学的作用
などが挙げられる。本発明の複合体は、動物、特にヒトにおけるカ
ルシウム及びリンのホメオスタシス及び代謝の制
御を行う任意の手段により投与することが可能で
ある。例えば、投与は局所的、非経口的、皮下、
皮内、静脈内、筋肉内或いは腹腔内に行うことが
できる。これらとは別に、或いは同時に、投与は
経口的に行うこともできる。投与量は、受容者の
年令、健康及び体重、同時に行われる治療の種
類、治療の頻度及び所望とされる効果の性質に応
じて異る。一般的には、活性成分化合物の投与量
は体重Kg当り約0.1μｇ〜１mgである。通常、所望
の結果を得るためには、治療のための１回以上の
施用において、施用当り0.1μｇ〜10μｇ／Kgが有
効である。本発明の化合物の更に予想外の性質は、それら
のあるものが、骨からのカルシウム放出によりも
たらされるカルシウム動員を起こすことなく腸を
通じてのカルシウム吸収の促進を示すことであ
る。骨放出によるカルシウム動員は、１，25−ジ
ヒドロキシビタミンD₃の共通の特徴である。本
発明の化合物のあるものにおけるそれの選択的不
存在は、腸のカルシウム輸送を刺戟することによ
つて血清カルシウム濃度の増大を促進することに
より好ましい治療結果をもたらす。重い骨の病を
有する患者にとつて、彼等の既に消耗した骨から
のカルシウムを動員するという犠牲によつて血清
カルシウム濃度を維持することは不利なことであ
る。本発明の化合物は、経口投与用に、錠剤、カプ
セル、粉末包或いは液体溶液、懸濁液或いはエリ
キシルなど、或いは非経口用途のために、溶液或
いは懸濁液などの無菌調剤液の投与形態で使用す
ることができる。その様な組成物において、活性
成分は、通常、組成物の全重量の少なくとも１×
10^-6重量％、しかも90重量％以下の量で常に存在
する。不活性な薬学的に許容可能な担体を使用す
るのが好ましい。その様な担体としては、95％エ
タノール、植物油、プロピレングリコール類、塩
水緩衝液などが含まれる。以上、一般的に本発明を説明したが、特定の具
体例を参照することにより更に完全に理解するこ
とができる。これらの例は例示のみを目的として
示されるものであり、特に断りのない限り、本発
明を限定する趣旨のものではない。例１ビタミンD₃，3β−グリコシドの調製落下漏斗及び蒸留頭部を付属した100mlの三つ
首丸底フラスコ内において、147mg（0.382ミリモ
ル）のビタミンD₃が溶解された5mlの乾燥ベンゼ
ン中にベツカー（Becker）〔Biochem.Biophys.
Act：100：574−581（1965）〕の方法に従つて新
らたに調製された1.00ｇ（3.63ミリモル）の乾燥
炭酸銀を懸濁させた。この溶液を沸とうさせた。
その時点において、25mlのベンゼンに溶解した
上記レミユー（Lemieux）の方法に従つて調製
された647mg（1.57ミリモル）のテトラ−Ｏ−ア
セチル−β−Ｄ−グルコピラノシルブロマイドを
滴下した。ベンゼンの蒸留を継続し、約1/2時間
後に更に炭酸銀（約1g）を反応液に添加した。
反応後、薄層クロマトグラフイー（20：80v／ｖ
酢酸エチル／ヘキサン）を行つた。従たる生成物
は0.24のR_fを有し、主たる生成物は0.20のR_fを有
した。２時間後に反応液を冷却し、ガラスウール
を通して過して銀塩を除去した。液を無水硫
酸ナトリウム上で乾燥し、ベンゼンを窒素下に留
去した。得られ黄色油を予備μ−Porasil高圧液
体クロマトグラフカラム（寸法８mm×30cm、流速
2ml／分、溶媒15/85ｖ／ｖ酢酸エチル／ヘキサ
ン）にかけた。主たる生成物、９，10−セココレ
スタ−５，７，10（19）−トリエン−3β−イル−
2′，3′，4′，6′−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ
−グルコピラノシドの保持時間は58分であり、ビ
タミンＤ中のトリエン発色団に特性的な265nmの
最大吸光度及び228nmの最小吸光度を示した。そ
の質量スペクトルは親分子イオンのピークをｍ／
e714，2.5％（M⁺）に含み、ピークを383，５％
（Ｍ−ピロニウムイオン）；366，28％（Ｍ−ピロ
ニウムイオン−水）⁺；351，18％；331，15％（ピ
ロニウムイオン）⁺；271，2.5％；253，14％；
169，100％；（C₈H₉O₄）⁺；109，63％（C₆H₅O₂）
^＋；及び60，20％（ギ酸メチル或いは酢酸）に作
つた。従たる生成物、９，10−セココレスタ−
５，７，10（19）−トリエン−3β−イル−2′，3′，
4′，6′−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシドの保持時間は45分であり、又265nmに
おける最大吸光度及び228nmにおける最小吸光度
を示した。その質量スペクトルはｍ／e714の分子
イオンを示した。 58分の保持時間を有する主たる生成物を次いで
ナトリウムメトキシド及びメタノールを用いて脱
アシル化した。無水メタノール中に溶解した化合
物にナトリウム金属の小片を添加した。1/2時間
後溶液を稀酢酸で中和した。この溶液を窒素下に
乾燥し、次いで逆相高圧液体クロマトグラフカラ
ム（Radial PakA column Waters Associates，
寸法0.8×10cm、流速1ml／分、溶媒98/2ｖ／ｖメ
タノール／水）にかけた。生成物、９，10−セコ
コレスタ−５，７，10（19）トリエン−3β−イル
−β−Ｄ−グルコピラノシドの保持時間は12.5分
であり、ビタミンＤ発色団に典型的なλ_nax
265nm、λ_nio228nmのUVスペクトルを示した。ビタミンD₃，3β−グルコシド、ビタミンD₃，
3α−グルコシド及びビタミンD₃，3βグルコシド
アセテートの生物学的活性の試験を行つた。
Holtzmann社（米国、ウイスコンシン州、
Madison）から得られた雄の乳離れしたばかりの
ラツトにリンは適性であるがカルシウムの低い
（0.02％）ビタミンＤ欠乏の食飼を３−1/2週間与
えた。５匹の動物群に経口的に4μｇ、1μｇ、0.5μ
ｇ、0.25μｇビタミンD₃−3β−グルコシド、1μｇ
のビタミンD₃−3α−グルコシド或いは2μｇのビ
タミンD₃−3β−グルコシドアセテートを50μlの
95％エタノールに溶解したもの或いは稀釈剤単独
を投与した。24時間後に動物を殺し、小腸及び血
液を集めた。腸カルシウム輸送研究を裏返し腸袋
技術により行い、血液は血清カルシウム測定に使
用した。結果を下表に示す。

【表】アセテート