JPH04178328A

JPH04178328A - 血管新生阻害剤

Info

Publication number: JPH04178328A
Application number: JP2305688A
Authority: JP
Inventors: Satoshi Kawanaka; 聡川中; Munehiko Donpou; 宗彦鈍宝; Hiroshi Nakajima; 宏中島
Original assignee: Unitika Ltd
Current assignee: Unitika Ltd
Priority date: 1990-11-08
Filing date: 1990-11-08
Publication date: 1992-06-25
Also published as: DE69120024D1; EP0485232B1; DE69120024T2; US5401725A; EP0485232A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）この発明は、血管新生阻害剤に関するものである。さら
に詳しくは、この発明は、悪性腫瘍に対する化学療法剤
として、あるいはまた、血管異常増殖に起因する種々の
疾患に対する予防または治療薬として有用な血管新生阻
害剤に関するものである。

（従来の技術）従来より、悪性腫瘍の進行や転移、あるいは、リュウマ
チ性関節炎、糖尿病網膜症、未熟児網膜症、老人性黄、
央部変性、血管新生性線内症、創傷治癒時の過剰搬痕形
成等の疾患は、血管（とくに末梢毛細血管）の異常増殖
に起因することか知られている。

このため、これらの疾患に対する予防または治療薬とし
て、血管新生阻害作用を有する物資を有効成分とする種
々の血管新生阻害剤が開発されている。

このような血管新生阻害物質としては、これまでにも、
たとえばメトロキシプロゲステロン（芦野、他：インタ
ーナショナル・ジャーナル・カンサー（Ｉｎｔ、　Ｊ、
　Ｃａｎｃｅｒ）　１９８９．４４．８５９）　、硫酸
化プロタミン（小川　他、エクスペリメンタル・パソロ
シー（Ｅｘｐ、　Ｐａｔｈｏｌ、）　１９８６．３０．
１４３）、ヘパリンとコルチゾンの併用（Ｊ、Ｆｏｌｋ
ｍａｎ　　他、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）　１９８
３，２２１．７１９）　、プレドニゾロン・アセテート
（Ｊ、　Ｂ、　Ｒｏｂｉｎ、　　アチーブ・オブ・オプ
サルモロジー（Ａｒｃｈ、　Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ、）１
９８５、１０３．２８４）　、ハービマイシンＡ（特開
昭６３−２９５５０９号公報）、網膜色素上皮細胞由来
ペプチド（特開昭６１−２４６１３２号公報）、硫酸化
多糖体（特開昭６３−１１９５００号公報）、フェノー
ル誘導体（特開昭６４−８５９４２号公報）等が報告さ
れている。

（発明が解決しようとする課題）しかしながら、これらの血管新生阻害物質は、その血管
新生阻害効果か不十分であったり、また毒性等の副作用
を有するため、上記疾患の予防または治療薬としては必
ずしも満足のいくものではなかった。

この考案は以上の通りの事情に鑑みてなされたものであ
り、従来の血管新生阻害剤の欠点を解消し、安全でしか
も優れた効果を有する新しい血管新生阻害剤を提供する
ことを目的としている。

（課題を解決するための手段）この発明は、上記の課題を解決するものとして、下記の
一般式（式中Ｘはリン酸基または水酸基を示す）で表わされる
３−ホスホアデノシン５′−ホスホサルフェートまたは
アデノシン５′−ホスホサルフェート、あるいは各々の
薬理的に許容し得る塩を有効成分としてなることを特徴
とする血管新生阻害剤を提供する。

以下、この発明の血管新生阻害剤について、その構成お
よび作用、効果を詳しく説明する。

この発明の血管新生阻害剤は、その有効成分として３−
ホスホアデノシン５′−ホスホサルフェート（以下ＰＡ
ＰＳと略記する）またはアデノシン５′−ホスホサルフ
ェート（以下、ＡＰＳと略記する）を用いる、このうち
、ＰＡＰＳは広（自然界に分布する硫酸基供与体であり
、またＡＰＳはＰＡＰＳ生合成の中間体である。これら
の硫酸化アデノシンヌクレオチドはいずれも生体内に微
量に存在し、たとえばＰＡＰＳは軟骨でのコンドロイチ
ン硫酸、皮膚でのケラタン硫酸、角膜でのケラタン硫酸
、マスト細胞でのヘパリン、脳でのスルファチド、肝臓
や腸でのフェニル硫酸やステロイド硫酸等の生合成に関
与していることが知られている。

このように、ＰＡＰＳは糖鎖またはタンパク質の硫酸化
に関与することはよく知られているが、ＰＡＰＳまたは
ＡＰＳの血管新生阻害作用については全く報告されてお
らず、この発明の発明者らによって初めて見い出された
新たな作用である。

すなわち、ＰＡＰＳまたはＡＰＳは、従来の血管新生阻
害物質に比べ優れた血管新生阻害作用を有し、しかも自
然物であるため毒性が極めて低いという特徴を有してい
る。

これらのＰＡＰＳまたＡＰＳを有効成分とする血管新生
阻害剤を調整する場合には、ＰＡＰＳまたはＡＰＳは市
販のもの、あるいは酵素合成したものを用いることがで
きる。また、必要に応じて薬理的に許容され得る塩とし
て用いることもでき、たとえばスルホ基がカリウム、ナ
トリウム等のアルカリ金属塩あるいはアンモニウム塩で
あってもよい。これらの塩は公知の常法によって容易に
製造することができる。

次に、この発明の血管新生阻害剤は、その使用目的に応
じて、単独または賦形剤あるいは担体と混合して注射剤
、経口剤、または座剤として投与することができる。こ
れらの製剤化は公知の方法を用いて行なうことができ、
たとえば経口用固形製剤に調製する場合には、ＰＡＰＳ
またはＡＰＳ等の有効成分に賦形剤および必要に応じて
結合剤、崩壊材、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を
添加し、これを常法により錠剤、火剤、カプセル剤、あ
るいは顆粒剤等に製剤化する。また、液状製剤を調製す
る場合には、有効成分に矯味剤、安定化剤等を加え、液
剤または注射剤等に製剤化することができる。

このようにして調製した血管新生阻害剤の投与形態中に
配合する有効成分の含有量は、使用目的、症状、あるい
は剤形等により異なるか、０．０１〜１００Ｗ／ｗ％、
好ましくは０．０５〜８０　ｗ／ｗ％の範囲とする。

また、その−日当りの投与量は、使用目的、投与回数、
剤形、あるいは被投与者の症状、年齢、体重等により異
なるが、通常、有効成分が体重１府当り０．１〜１５０
０■、好ましくは１〜５００■の範囲とする。なお、こ
れらの投与量を１日に２〜４回に分けて投与することも
できる。

以下、実施例を示し、この発明の血管新生阻害剤につい
てさらに詳しく説明する。

実施例ＩＤ、　　Ｈ，Ａｕ５ｐｒｕｎｋ他の方法（アメリカン・
ジャーナル・オブ・パソロシー（Ａｍ、　Ｊ、　Ｐａｔ
ｈｏｌ）　。

１９７５、９７．５９７）に従い、市販のＰＡＰＳおよ
びＡＰＳ　（シグマ社）についてその血管新生阻害作用
を検討した。

３日令の鶏受精卵漿尿膜上にＰＡＰＳまたはＡＰＳを、
各々１．　１０．１００　、または１０００μｇ滴付し
、２日後の血管新生の様子を観察した。

結果は第１表に示した通りである。なお、表中の（＋）
、（＋＋）および（＋＋＋）の表示は、ＰＡＰＳまたは
ＡＰＳを処理しないコントロール群に比較した血管新生
抑制率を表わしたものであり、各々、１０〜３０％（＋
）　、３０〜７０％（＋＋）　、７０〜１００％（＋＋
＋）の抑制率を示している（以下、第２表も同様）。

この第１表からも明らかな通り、市販のＰＡＰＳおよび
ＡＰＳは、いずれも１０μｇの投与量で軽度な効果を示
し、１００μｇ以上の投与量で完全な血管新生阻害効果
を示した。

第　　　１　　　表実施例２ペニシリウムクロソゲナム粗酵素液を酵素源とするＡＴ
ＰスルフリラーゼとＡＰＳキナーセを用い、ＰＡＰＳお
よびＡＰＳを酵素合成した。

すなわち、１００ｇのベニシリウムクロソゲナム粗酵素
液を３０〜５５％飽和硫安分画し、沈澱を５０ｍＭトリ
ス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，５）に透析し、さらにこの緩
衝液に１０ｍＭ硫酸マグネシウム、５　ｍＭＡ　Ｔ　Ｐ
マグネシウム、２０単位インオーガニックピロホスファ
ターゼを混合して、３０°Ｃの温度で２時間反応させた
後、煮沸した。次いで、この上清をＤｏｗｅｘ　１カラ
ム５ｅｐｈａｄｅｘＧ　−１０カラムに通し、Ｗｈａｔ
ｍａｎ　３　Ｍ　Ｍによるペーパー電気泳動を行なって
ＰＡＰＳを得た。また、ＡＰＳはこのＰＡＰＳを酸分解
することによって得た。

次に、このようにして酵素合成したＰＡＰＳおよびＡＰ
Ｓの血管新生阻害効果を、実施例１と同様の手続で試験
した。

結果は第２表に示した通りであり、酵素合成により得た
ＰＡＰＳおよびＡＰＳは、実施例１に示した市販のもの
と同様に、１〜１０００μｇの範囲で投与量依存的に血
管新生を抑制した。

第　　　２　　　表実施例３Ｍ、　Ａ、　Ｇｉｍｂｒｏ口ｅ他の方法（ジャーナル・
ナショナル・カンサー・インイスティチュート（Ｊ、　
Ｎａｔ。

Ｃａｒ、　Ｉｎ５ｔ、）　、１９７４．５２．４１３）
に従い、ウサギ角膜内での血管新生に対する市販のＰＡ
ＰＳおよびＡＰＳの血管新生阻害効果を検討した。

まず、ウサギの角膜中央部をメスによって約２ｒｎｍ切
開して角膜壁に沿ったスポットを形成し、次いでこのス
ポット内に、Ｒ，Ｌａｎｇｅｒ他の方法（ネイチャー　
（Ｎａｔｕｒｅ）　、１９７９．２６３．７９７）に従
い予め作製したプロスタグランジンＥ１１０μｇまたは
塩化第一銅２００μｇとＰＡＰＳまたはＡＰＳ　（シグ
マ社）を各々１００μｇまたは１．Ｏｎ＋ｇ含有する除
放性ペレットを挿入設置した。

その結果、ＰＡＰＳおよびＡＰＳは、１００μｇおよび
１．Ｏｍｇのいずれの投与量においても、プロスタグラ
ンジンＥ１または塩化第一銅によって惹起される血管新
生を７日後まで完全に抑制することが観察された。

実施例４５０％ジメチルスルホキシドにＰＡＰＳまたはＡＰＳを
溶解して製剤化した血管新生阻害剤について、その実験
的糖尿病性網膜症に対する治療効果を検討した。

まず、６週令の雄性ウィスター系ラットの尾静脈よりス
トレプトドシン６５■／ｋｇを投与し、さらにその約３
ケ月後に３，３′−イミノジプロピオニトリルを投与し
て、ガラス体中に毛細血管の異常増殖（増殖性網膜炎）
が観察されたラットを選別し、−群を１０匹として以下
の薬物投与実験に供した。

薬剤投与群には、１．５．３．０．４．５．または６．
０■／ｋｇの血管新生阻害剤を、また対照群には５０％
ジメチルスルホキシド０．１−／　１０　ｇを１０日間
連続して網膜炎ラットの腹腔内に投与し、各群について
ガラス体中の毛細血管増殖の程度を観察した。なお、比
較例として、従来の血管新生阻害物質であるメトロキシ
プロゲステロンアセテート（ＭＰＡ）についても同様の
試験を行なった。

その結果は第３表に示した通りである。なお、表中の（
−）の表示は、対照群と比較して薬剤投与による病態の
改善かみられなかったことを示し、（＋）、　　（＋＋
）、および（＋’　＋　＋　）は、各々、１０〜３０％
、３０〜７０％、および７０〜１００％の病態改善効果
を示している。

この第３表からも明らかな通り、ＰＡＰＳまたはＡＰＳ
を有効成分とするこの発明の血管新生阻害剤は、１．５
ｍｇ／ｋｇ投与群で１０％、３．０ｍｇ／ｋｇ投与群で
７０％、４．５および６．０■／ｋｇ投与群では８０％
以上の病態改善効果が認められ、いずれの投与量におい
てもＭＰＡを有効成分とする従来の血管新生阻害剤に比
べ、優れた治療効果を示した。

第　　　３　　　表次に、この発明の血管新生阻害剤の毒性についての試験
例を示す。

試験例５０％ジメチルスルホキシドにＰＡＳＰまたはＡＰＳを
各々５００〜３５００■／　ｋｇの範囲で溶解させた注
射剤を調製し、これをラットに非経口投与（静注または
脂性）した。

その結果、上記のいかなる投与量においても中毒例およ
び致死例は認められなかった。

（発明の効果）以上詳しく説明した通り、この発明によって、有効性お
よび安全性に優れ、悪性腫瘍の進行や転移の阻止、ある
いは種々の自己免疫疾患の治療と予防を目的とする薬物
療法等に有用な血管新生阻害剤が提供される。

Claims

【特許請求の範囲】１）下記の一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｘはリン酸基または水酸基を示す）で表わされる３−ホスホアデノシン５′−ホスホサルフ
ェートまたはアデノシン５′−ホスホサルフェート、あ
るいは各々の薬理的に許容し得る塩を有効成分としてな
ることを特徴する血管新生阻害剤。