JPH0338589A

JPH0338589A - 抗生物質ｌｌ‐ｅ１９０８５

Info

Publication number: JPH0338589A
Application number: JP2168597A
Authority: JP
Inventors: Guy T Carter; ガイ・トマス・カーター; Joseph J Goodman; ジヨセフ・ジエイコブ・グツドマン; David P Labeda; デビツド・ポール・ラベダ; Susan D Conner; スーザン・ダイアン・コナー; Brian Lee Buckwalter; ブライアン・リー・バツクウオルター
Original assignee: American Cyanamid Co
Current assignee: Wyeth Holdings LLC
Priority date: 1989-06-29
Filing date: 1990-06-28
Publication date: 1991-02-19
Also published as: IE902343A1; EP0405151A1; AU5799290A; IL94540A0

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は温血動物の生長速度を高め、動物の飼料利用効
率を改善し、授乳反すう動物の授乳を高め、そしてひつ
じの羊毛生産量を高めるための方法及び組成物に関する
。更に本発明は食べられる飼料及び生長速度を高め、温
血動物の飼料利用効率を改善し、授乳反する動物の授乳
を高め、そしてひつじの羊毛生産量を増大させるのに十
分な量の抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその生理学
的に許容しうる塩を含んでなる動物飼料組成物に関する
。

本発明は、ＬＬ　−Ｅ１９０８５ｇ　、　ＬＬ　−Ｅ１
９０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０＆５７、ＬＬ−Ｅ１９０８
５ζ及びＬＬ−Ｅ１９０８５ηと表示される新規な抗生
物質、その発酵による製造、その粗溶液からの回収及び
濃縮法、及びその精製法に関する。本発明はその範囲内
に希釈形、粗製厚物、及び純粋形での上記抗生物質を包
含する。これらの新規な試剤の、特別な微生物に及ぼす
効果は、その化学的及び物理的性質を含めて、従来記述
されている抗生物質試剤と本発明の試剤とを区別する。

未だに完全に推定されてはいないけれど、抗生物質ＬＬ
−Ｅ１９０８５の構造式は次のように提案される：１９０８５１ＣＯＣＨｉＣＨ（ＣＨｓ）ｔＣＯＣＨ（ＣＨｓ）ｚ（、ＯＣＨ。

Ｃ０ＣＨ＊ＣＨ（ＣＨ３）＊２ＣＨ３ＣＨ。

ＣＨｓＣＨｓ抗生物’［ＬＬ　−Ｅ１９０８５αの物理化学的特性は
次の通りである：ａ）分子式’　　Ｃ５ａＨ３１Ｎ０１＊　；ｂ）分子量
：　　６６９　ＦＡＢＭＳ　（Ｍ＋３Ｈ）中＝Ｍ／Ｚ　
６７２．２１η６；Ｃ）元素分析：　　Ｃ，６４，５５
；　ｎ、　４．４６；　Ｎ、　１．９２；ジクロルメタ
ン）；ｅ）紫外吸収スペクトル： λｗａｘ　ｎｍ　　ｇ　　Ｏ，ｌＮ　ＨＣｌ”２２４ｎ
＋ｍ５５ｎｍ２８ｎｍ２０ｎｍ λｍａｘ　ｎｍ　　ｔ　　Ｏ，ｌＮ　ＮＮａＯＨ−２η
ｎ４０ｎｍ（２７，７００）、（２１，９００）、（１６，４００）、（４，２３０）（７６、１００）、（１５，１００）、３９９ｎｍ λｍａｘ　ｎｍ　　ｔ　ＣＨ３０Ｈ”２２２ｎ＋。

４０ｎｍ５５ｎｍ３２１ｎＩ１１８４ｎｍ（１２，９００）（３８，２００）、（３０，１００）、（３０，１００）、（２４，５００）、（８，０５０）ｆ）ｇ）赤外吸収スペクトル：（ＫＢｒ錠剤法）、λｍａｘ　（ｃｍ−’）　１８００
．η４２．１６９０．１６２１．１４２２．１２７３：
プロトン核磁気共鳴スペクトル：　　（ＣＤＣＱ、）、
次のような主要なピークを呈示 δ　　　　　Ｈ数　　　Ｍ　　　　Ｊ（Ｈｚ）１３．４
７　　　１　　　　　δ ８．２０　　　１　　　　ｄ　　　　８．５７．９２　
　　１　　　　ｄ　　　　８．５７．５８　　　１　　
　　ｓ７．１９　　　１　　　　ｓ７．０９　　　１　　　　ｓ４．７８　　　　］、　　　　ｄ　　　１１．６４．４
５　　　１　　　　ｄ　　　１１．６４．０２　　　３
　　　　ｓ３．９９　　　３　　　　ｓ３．４８　　　１　　　　ｄ　　　１２．８δ　　　　
　Ｈ数　　　！！　　　４非０３．３５　　　　　１　
　　　　　δ１２．８２．２１　　　　　２　　　　　
　ｄ　　　　　６．８２．１０　　　　　　１　　　　
　　　ｍｌ、３３　　　　　３　　　　　　ｓｌ、３０　　　　　３　　　　　　ｓＯ，９５５６ｄ　　　　　６．４８ｈ）Ｃ−１３核磁気共鳴スペクトル：　（（：ＤＣＱ、
）、次のような主要なピークを呈示 δ　　　Ｍ　　　　　ａＭ　　　　　δ１８１．２　　
　ｓ　　　　１３４．８　　ｓ　　　　６５．０η８．
１　　　ｓ　　　　１３２．ｌ　　ｄ　　　　６２；３
η２．１本　　ｓ　　　　　　１２９．７　　　ｓ　　
　　　　５６．８η１．５　　　ｓ　　　　１２４．４
　　ｄ　　　　５６．５１６５．８　　　ｓ　　　　１
２０．８　　ｓ　　　　４２．９１６２．１　　　ｓ　
　　　１１９．９　　ｓ　　　　４１．９１５５−５　
　　ｓ　　　　１１９．５　　ｓ　　　　２５．８１５
３．４　　　ｓ　　　　１η．７　　ｄ　　　　２５．
５１５０．８　　　ｓ　　　　ｌＱ７．３　　ｓ　　　
　２２．４１．４８．７　　　ｓ　　　　１０４．９　
　ｄ　　　　２２．３１４０．７　　　ｓ　　　　１０
０．４　　ｄ　　　　２０．２１３７．７　　　ｓ　　
　　９３．４　　ｓ本２つの重なった共鳴抗生物質ＬＬ　−Ｅ１９０８５βの物理化学的特性は次
の通りである：分子式’　　Ｃｓ５Ｈｚ＊Ｎ０１ｘ　；分子量＝６５５紫外吸収スペクトル：λｍａｘ　（ＣＨ，ＣＮ１０．０
５　ＭｐＨ４，５ＮＨ４０ＡＣ３／２）　２５８ｎｍ、
　３２５ｎｍ、　３８５ｎａ＋；赤外吸収スペクトル、
：λｍａｘ　（ｃｒａ−→３４３４ブロード、　２９２
４．１８０４．η５２．１６９３．１６２１゜１４２６
．１２７２；プロトン核磁気共鳴スペクトル：　　（ＣＤＣＱｓ）、
次のような主要なピークを呈示 δ　　　　堕　　％　　　　Ｊ（Ｈｚ）１３．５０　　
　１　　　ブロード８．２６　　　１　　　　ｄ　　　　８．５７．９４　
　　１　　　　ｄ　　　　８．５７．６６　　　１　　
　９７．２１　　　１　　　９７．１４　　　　　１　　　　　９４．７７　　　１　　　　ａ　　　　１１．６４．４７
　　　１　　　　ｄ　　　　１１．６４．０４　　　３
　　　５ｆ）Ｈ数４．０２　　　　３３．５０　　　　１３．３６　　　　１２．５５　　　　１１．３３　　　　３１．７７　　　　３１．１９　　　　３１．１８　　　　３１（ＰＬＣ本保持時間：２．４分Ｊ（Ｈｚ）１４．８１４．８７．０７．０７．０本ＨＰＬＣ分析系。この系はＣ１ｌ逆相カラム（２，１＋
ｎｍＸ　１０１０００１からなり、６０％ＡＣＮ及び４
０％０．０５Ｍ　（ｐＨ４，５）　ＮＨ，ＯＡｃにより
０．５ｍ（２／分で流出。３２５ｎｏ＋での吸収により
検知。

抗生物ｆｆｔＬＬ−Ｅ１９０８５γの物理化学的特性は
以下の通りであった：ａ）ｂ）分子式：％式％）紫外吸収スペクトル： λＷａＸ（Ｃ１，ＣＮ１０．０５鮎ｄ）ｅ）ｆ）ｐＨ４，５ＮＨ４０ＡＣ３／２）２５８ｎｍ、３２５ｎ
ｍ、３８５ｎｍ；赤外吸収スペクトル：λｍａｘ　（Ｋ
Ｂｒ）　Ｃｍ”’：３４３３ブロード、２９２５．１８
０５．η４５．１６９４．１６２１、　＋４２６．１２
７２；プロトン核磁気共鳴スペクトル：　　（ＣＤＣ１２，）
、次のような主要なピークを呈示 δ　　　　　填　　　Ｍ　　　バ且０１３．４６　　　１　　　ブロード８．２６　　　１　　　　ｄ　　　　８．６７．９４　
　　１　　　６　　　８．６７．６６　　　１　　　　
　ｓ７．２１　　　　１　　　　　ｓ７．１４　　　１　　　５４、．３１　　　　１　　　　ｄ　　　　１１．５４．
０２　　　３　　　　ｓ３．５０　　　１　　　　ｄ　　　　１４−９３．３６
　　　１　　　　ｄ　　　　１４．９２．１０　　　３
　　　　ｓ１．８２　　　３　　　５１．７５　　　　ｄ　　　　５ＨＰＬＣ＊保持時間：１．６分本ＨＰＬＣ分析系：上述のＬＬ−Ｅ１９０８５βの場合
と同一の条件抗生物Ｉｆ　ＬＬ　−Ｅ１９０８５この物理化学的特性
は以下の通りである：ａ）ｂ）Ｃ）ｄ）ｅ）分子式’　　Ｃ５ａＨｚｅＮＯ＋ｚ　；分子量：６５５紫外吸収スペクトル：λｍａｘ　（ＣＨ３ＣＮ１０．０
５１４ｐＨ４−５ＮＨ４０ＡＣ３／２）：　　２５８ｒ
＋ａ＋、　３２４ｎｍ、　　３８０ｎｍ４２０ｎｍ；赤外吸収スペクトル：　（ＫＢｒ）λｒａａｘ　（ｃｍ
−’）：３４２９（ブロード）、２９６０．１８０５．
η４５．１６９３．１６２６．１４２Ｌ　１２７９；プロトン核磁気共鳴スペクトル：　　（ＣＤＣ（Ｉｎ）
、δ　　　　堕　　！　　　　Ｊ（Ｈｚ）１３．４５　
　　１　　　　ｓ８．２２　　　１　　　　ｄ　　　　８．５７．９１　
　　１　　　　ｄ　　　　８．５７．７５　　　１　　
　　ｄ７．２６　　　１．　　　　ｓ７．１４　　　１　　　　ｓ δ　　　　　Ｈ数　　　Ｍ６．２０　　　１　　ブロード４．７６　　　　　１　　　　　　ｄ４．４５　　　　　１　　　　　　ｄ４．０６　　　　　３　　　　　　ｓ３．４８　　　　　１　　　　　　ｄ３．３５　　　　　１　　　　　　ｄ２．２０　　　　　２　　　　　　ｄ２．１０　　　１　　７重線１．８１　　　　　３　　　　　　ｓ＋、７５　　　　　３　　　　　３．９５０　　　　６　　　　　　ｄ１３核磁気共鳴スペクトル：バ並０１１．５１１゜５１４．８１４．８６．６６．６６．６ δ　　　　　　　　　　δ １８１．４　　　　　１３７．５ η８．０　　　　　１３４．６ η２．８　　　　　１３２．２ η１．７　　　　　１２９．７ η１．６　　　　　１２４．２１Ｇ５．６　　　　　１２０．１１６１．６　　　　　１’１９．７１５４．７　　　　　１１９．６１５３．５　　　　　１η．７１５０．２　　　　　１０８．４ δ １００．２９３．４６４．９６２．３５６．５４２．８旧、７２５．６２５．４２２．２本 δ 車２つの重なったシグナルｇ）ＨＰＬＣ本保持時間＝１．９分＊　ＨＰＬＣ９折系：上述Ｌ　タＬＬ−ＥＩ９０８５β
の場合と同一の条件抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５ηの物理化学的特性は次の
通りである：ａ）分子式：％式％）分子ト８５ＨＲＦＡＢＭＳ：（Ｍ＋３Ｈ）”＝Ｍ／Ｚ５８８．１４
７９ｉＣ）比施光度：［、］２６生６３°（Ｃ，１９）ＤＭＳＯｉｄ）紫外吸収スペクトル：λｗａｘ（ＭｅＯＨ／ＣＨｚＣＩｘ１：ｌ）　２２３　（３７，８００）、３２１　（２１
，７００）、３０２　（２１，７５０）；ｅ）赤外吸収スペクトル：　　（ＫＢｒ）λｍａｘ　ｃ
ｍ−’：３４３７（ブロード）、２９２３．η９８．１
６９１゜１６２３．１４２７．１２７６；ｆ）プロトン核磁気共鳴スペクトル：（ＣＤＣ（ｌ　ｓ　／　ＭＤＳＯｄ　ａ　）、δ　　　
　ＨＱ　　　Ｍ　　　Ｊ（Ｈｚ）８．２４　　　　１　
　　　ｄ　　　　８．５７．９６　　　　１　　　　ｄ
　　　　８．５７．６３　　　　１　　　　ｓ７．２３　　　　１　　　５７−η　　　　１　　　　ｓ５．２３　　　　１　　ブロード４．３３　　　　１　　ブロード　１０．１４．０４　
　　　３　　　　ｓ４．０２　　　　３　　　　ｓ３．９０　　　　１　　ブロード　１０．１３．５１　
　　　１　　　　ｄ　　　　１４．７３．３７　　　　
１　　　　ｄ　　　　１４．７１．７７　　　　３　　
　３１．７１　　　　３　　　　ｓｇ）　Ｃ−１３核磁気共鳴スペクトル：（ＤＭＳＯ−ｄ
ｓ／ＣＤＣ：Ｉｓ）、ｈ） δ　　　　　　　　　　δ １８０．９　　　　　１３７．３ η７．７　　　　　１３５．２７３．０　　　　　１３２．２７１．９　　　　　１２９．６６５．８　　　　　１２３．９６１．４　　　　　１２０．２５５．６　　　　　１１９．３５３．８　　　　　１１９．２５０．８　　　　　　＋η．６４８．６　　　　　　＋０７．４４０．３ＨＰＬＣ本保持時間＝１．２分 δ １０４．４１００．７９３．３６５．８６３．４５６．７５６．１４１．４２５．３１９．０町ＰＬＣ分析系。上述したＬＬ−Ｅ１９０８５βの場合
と同一の条件。

抗生物質試剤ＬＬ　−Ｅ１９０８５　ａ、ＬＬ−Ｅ１９
０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５７、ＬＬ−Ｅ１９０８５
ζ及びＬＬ−Ｅ１９０８５　？　１４、タンザニア国マ
ニアラ（Ｍａｎｙａｒａ）で集めた土壌試料から分離し
た培養物の天然選別分離物である微生物培養物の１好気
性発酵Ｊこよって製造される。

この培養物はシクロモノスポラ・シトレア（Ｍｉｃｒｏ
ｍｏｎｏｓｐｏｒａ　ｃｉｔｒｅａ）の新しい亜種とし
て分類学的に特徴づけられ且つ同定される。

この新しい亜種は、アメリカン・サイアナミド社（Ａｍ
ｅｒｒｃａｎ　Ｃｙａｎａｍｉｄ　Ｃｏ、）メディカル
・リサーチ・デイビジョン（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ、　Ｐｅａｒｌ　Ｒｉｖｅ
ｒ、　ＮＹ）の培養物フレクションに、培養物番号ＬＬ
−Ｅ１９０８５として保持されている。

この新しい微生物の活性培養物は、米国農業省北部研究
センター、発酵研究所、ＡＲＳカルチャーコレクション
（ＡＲ５Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ、　Ｆ
ｅｒｎ＋ｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、　
Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃ
ｈ　Ｃｅｎｔｅｒ、　Ｕ、Ｓ、　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ。

１８１５　Ｎｏｒｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　５ｔｒ
ｅｅｔ、　Ｐａｏｒｉａ、　ＩＬ６１６０４）とのブタ
ベスト条約の協定のもとに預託されており、その永久保
存に加えられている。その預託によれば、それは種表示
ＮＲＲＬ　１８３５１号として指定される。

技術的に良く知られた方法を用いることにより、培養物
ＬＬ−Ｅ１９０８５の培養上の、生理学的な、及び形態
学的な特徴について観察を行なった。ＬＬ−Ｅ１９０８
５のミクロモノスポラ属への種の同定は、形態学的に且
つ化学的に確かめた。この種の生長菌糸上に単胞子を生
成した。気中菌子は観察されなかった。電子Ｓａ鏡の検
査は、胞子がいぼ状であることを示した。全細胞分析は
、ＬＬ−Ｅ１９０８５がジアミノピメリン酸のメン異性
体並びに痕跡量のＬ異性体を含むことを示した。この種
は全細胞の糖加水分解物中にキシロースと痕跡量のアラ
ビノースの存在を示しｔ；。それ故にＬＬ−Ｅ１９０８
５はミクロモノスポラ・シトレアの亜種であると考えら
れる。

ＬＬ　−Ｅｌ　９０８５の形態学における比較データを
第１及び■表に示す。生理学的データを第■及び■表に
示す。

第■表車括弧内の数値は、Ｋ、　Ｌ、ケリー（Ｋｅｌｌｙ）及び
り、　Ｂ、シャット（Ｊｕｄｄ）、色０名称の国際語と
辞典（Ｃｏｌｏｒ、　Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ　Ｌａｎｇｕ
ａｇｅ　ａｎｄ　Ｄｉｅｔｉｏｎａｒｙ　ｏｆ　Ｎａｍ
ｅｓ）　、米国標準局明細書４４０号、１９７６年（Ｗ
ａｓｈｉｎｇｔｏｎ、　Ｄ、Ｃ，）及び付随するインタ
ーンサイエテイ色協議会（Ｉｎｔｅｒ−５ｏｃｉｅｔｙ
Ｃｏｌｏｒ　Ｃｏｕｎｃｉｌ）、米国標準局標準カラー
チャートからとった色である。

第■表のイースト僅かな可溶性の暗褐色の顔料第■表アラビノースセルロースフルクトースグルコースイノシトールマンニｉ・−ルラフィノーステムノーススクロースキシロース第■表カゼインキサンチンハイポキサンチンチロシン第■表（つづき）下記の加水分解アデニンゼラチンジャガイモの殿粉エスクリン生理学的下記の産生ナイトレート・リダクターゼホスファターゼウレアーゼ下記の上での生長ケリシン５％塩化ナトリウムリンチーム汁下記の脱カルボキシル酢酸塩安息香酸塩クエン酸塩乳酸塩マレイン酸塩ムコン酸塩シュウ酸塩プロピオン酸塩ピバリン酸塩第■表（つづき）下記の脱カルボキシルコハク酸塩酒石酸塩下記からの酸アドニト−ルアラビノースセロビオースデキストリンデュルントールエリスリトールフルクトースガラクト−スグルコースグリセロースイノシ（・−ルラクトースマルトースマンニト−ルマンノース α−メチル−Ｄ−グルコシドメリビオースラフィノースラムノース第■表（つづき）下記からＱ、１酸ケリシンソルビトールスクローストレハロースキシロース β−メチル−〇−キシロシド生長ｏ０ｃ４２°Ｃ４５°Ｃ＋＋＋＋＋＋新しい抗バクテリヤ剤ＬＬ　−Ｅ１９０８５ａ　、　Ｌ
Ｌ　−Ｅ１９０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、ＬＬ−
Ｅ１９０８５ζ及びＬＬ、−Ｅ１９０８５７の製造に対
して、本発明はこの特別な微生物に或いは例示の目的だ
けで示した上記生長及び顕微鏡的特性に十分答える有機
体に限定されはしないというこを理解すべきである。事
実種々の手段例えばＸ線照射、紫外線照射、Ｎ′−メチ
ル−Ｎ′ニトロ−Ｎ−ニトログアニジン、アクチノファ
ージなど・＼の露呈によって上記微生物から作られた突
然変異体の使用を含むことが望ましく且つそれが意図さ
れる。

抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５σ、ＬＬ−Ｅ１９０８５β
、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、ＬＬ−Ｅ１９０８５ζ及びＬ
Ｌ−Ｅ１９０８５ηの試験管内での抗バクテリヤ活性は
米国の地勢域を示す各医学センターから得られる臨床学
的単離物に対するる標準的な寒天希釈法によって決定し
た。各培養物の接種物は約１〜５ＸＩＯ’のコロニー形
成単位であり）、これをステイアーズ（５ｔｅｅｒｓ）
の反復接種具により、抗生物質をミューラー（Ｍｕｌｌ
ｅｒ）−ヒントン（Ｈｉｎｔｏｎ）寒天中に含むプレー
トに適用した。この寒天培地には、微生物の生長に必要
とされる場合約５％のヒツジの血を補充した。結果を第
７表に示す。

筈ヱ弯ＬＬ−Ｅ１９０８５αの試験管内抗バクテリヤ活性黄色
ブドウ球菌黄色ブドウ球菌黄色ブドウ球菌黄色ブドウ球菌黄色ブドウ球菌黄色ブドウ球菌黄色ブドウ球菌表皮ブドウ球菌スタライロコツカスーサフｉコフイチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　５ａｐｈｒｏｐｈｉ
ｔｉｃｕｓ）β−溶血連鎖球菌 β−溶血連鎖球菌 β−溶血連鎖球菌 β−溶血連鎖球菌肺炎連鎖球菌肺炎連鎖球菌腸内球菌ＡＴＣＣ２５９２３Ｓ＋ｏｉｔｈＶＧＨ８４８４− ４５Ｃ８３８３−１２７Ｃ８３８３−１３１Ｃ８３−１３２ＳＳＣ８２−５７ＩＱ　８３−５８ＶＧＨ８４−５０２０３ＶＧＨ８４−６０ＶＧＨ８４−６１ＶＧＨ８４−６２Ｖ−１Ｋ　８４−２１ＶＧＨ８４−６５０、１２０、１２５＜０．０６５１．０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６＜０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６ ≦０．０６＜０．０６ ≦０．０６第７表　（−）つき）腸内球菌腸内球菌腸内球菌腸内球菌大腸菌肺炎桿菌エンテロバクタ−・クロアカニ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ）モルガ
ネラ・モルガニイ（Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ　ｍｏｒｇａｎｉｉ）霊菌緑膿菌シトロバクタ−・テシベリウス（ＣｉｔｒｏｂａｃＬｅｒ　ｄｉｖｓｒｓｉｓ）尋常変
形菌アルカリゲネス種（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｓｓｐ、）エラシア・ルビ
デア（ｅｒｒａｔｉａ　ｒｕｂｉｄｅａ）バクテリオイド・７ラギリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ）バクテ
リオイド・ブルガリスＶＧＨ８４−６８Ｉｏ　８３−２８１０８３８３− ４０Ｃ８３−７２Ｎｏ、　３１１ＤＶＧＩ（８４−３７ＶＧＨ８４−１１Ｋ　８４−１４２−４−４ＭＯＲ８４−３ ≦０．０６ ≦０．０６０．１２ ≦０．０６〉１２８〉１２８〉１２８〉１２８〉１２８〉１２８〉１２８ＣＭＣ８４−３５＞１２８ＩＳＧ　８６−３４　　　　＞１２８ＵＨＬ　８６−４ＡＴＣＣ２５２８５ＡＴＣＣ２９３２７＜１２８＜０．０６第ｖ表　（つづき）バクテリオイド・ゼータ（Ｂａｃ＋ｅｒｏｉｄｅｓ　ｔｈｅｔａ）バクテリオイ
ド・ゼータウエルチ菌クロストリジウム・デイファレンシス（Ｃ１ｏｓｔｒｉｄｉｕｕｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｓｉｓ
）ペプトコックス・マグナス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｍａｇｎｕｓ）ベプトコッ
クス・マグナス（Ｐｅｐｔｏｃｃｃｃｕｓ　＋ｎａｇｎｕｓ）ペブトコ
ックス・アサクロリチス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ａｓａｃｒｏｌｙｔｉｓ）
大腸菌黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ２９７４１ＡＴＣＣ２９７４２４ＡＴＣＣ１３１２４＜０．０６ＡＴＣＣη８５８ＩＣ０，０６ＡＴＣＣ２９３２８＜０．０６ＡＴＣＣ１４９５６＜Ｏ，０ａＡＴＣＣ２９７４３＜０．０６ＡＴＣＣ２５９２２＞１２８ＡＴＣＣ２９２１３＜０．０６抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその塩は胃が１つの
及び反すうの動物の処置に有用である。更に該抗生物質
は餉料効率を改善し且っ温血動物例えば牛、ヒツジ、肝
、ヤギ、ウサギ、馬、猫、犬、毛皮を産生ずる生物例え
ばミンク及び狐、家きん例えばニワトリ、アヒル、カモ
、七面鳥及び動物園での動物種の体重増加を誘導するの
に特に有効である。

本発明によれば、抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はそ
の塩は、軽口的又は非経口的に動物に投与しうる。

それは動物の飼料と混合して或いはそれの上塗りとして
投与してもよい。また該動物に大丸薬、錠剤、丸薬、飲
薬、経口用ゲルなどの形で投与しても、又は動物の飲料
水に入れて与えてもよい。

飼料又は飲料水で経口的に投与する場合、生長速度は高
め且つ宿主動物の飼料利用効率を改善するためには、飼
料又は飲料水中抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその
塩が一般に約０，０１〜Ｉ　０００ｐｐｍであることが
効果的である。飼料又は飲料水において経口投与する場
合、授乳反すう動物の授乳量を増加させるためには、飼
料又は飲料水中の該抗生物質が一般に約０．００１−１
Ｏ０ｐｐであることが効果的である。

ヒツジの羊毛生産量の増加は、抗生物質Ｌ１．−Ｅ１９
０８５η又はその塩を、該ヒツジの飼料又は飲料水中或
いはそれと共に約０．０１”　１０００ｐｐｍノ濃度で
経口投与することにまり達成できる。また羊毛の生産は
、該抗生物質を約０．０００１−１００　ｍｇ／体重ｋ
ｇ／日でヒツジに与えるのに十分な量で抗生物質ＬＬ−
Ｅ１９０８５ηをヒツジに投与することによって増大さ
せうる。

本発明の抗生物質は体重が数グラムから数千ｋｇはどの
大きいものであってよい胃が１つ及び反すうの動物の処
置に有用であるから、該動物を処置するのに必要な抗生
物質の有効量は動物の発育段階と共に及び種に応じて変
化するであろう。

上述した動物の所望の生長速度の促進及び飼料効率を提
供する動物の飼料組成物は、上述した抗生物質又はその
塩或いは該抗生物質を含む動物の飼料補充物を、活性化
合物の該飼料中の所望の濃度を与えるのに十分な量で適
当な動物飼料と混することによって製造できる。

動物の飼料補充物は、抗生物質約１．０〜７５重量％を
適当な担体又は希釈剤約９９〜２５］を量％と混合する
ことによって製造される。飼料補充物の製造に用いるの
に適当な担体又は希釈剤は次のものを含む：アルファル
７ア粉、ダイズ粉、綿実油料、亜麻仁油料、塩化ナトリ
ウム、トウモロコシ粉、砂糖きびの糖蜜、尿素、青粉、
魚粉、トウモロコシの穂軸粉、塩化カルシウム、及び他
の同様の物質。飼料補充物への担体又は希釈剤の使用は
、補充物を混入する最終飼料中への活性成分の分布の均
一性を促進する。斯くしてそれは活性成分の飼料中への
適当な分布を保証することにより重要な機能を果す。

補充物を飼料に対する上塗りとして用いる場合、それは
活性物質の、上塗りした飼料の表面にわたる均一性を確
実にする助けとなる。

非経口的投与の場合、抗生物質はペースト及び錠剤の形
で製造することができ、普通高められた生長速度及び／
又は改良された飼料利用効率が望ましい動物の頭又は耳
の皮膚の下に埋め込み物として投与される。

実際には、非経口的投与は一般に活性戊分約０．０００
１＝１００ｍｇ／体重ｋｆｉを動物に投与するのに十分
な量を注射することを含む。

ペースト調製物は抗生物質を製薬学的に許容しうる油例
えば南京豆油、ゴマ油及びトウモロコシ油中に分散させ
ることによって製造できる。

抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５ηを有効量で含有する錠剤
は上述した抗生物質を希釈剤例えばカーボワックス、生
分解性重合体、カナラバロウなどと混合することによっ
て製造しうる。滑剤例えばステアリン酸マグネシウム又
はステアリン酸カルシウムは所望により錠剤化工程を改
善するために添加しうる。

勿論、１つより多い錠剤を動物に投与して、増大した生
長速度を与え及び／又は動物による飼料の利用効率を改
善しうろことは認識される。更に動物体内への適当な薬
剤放出速度を維持するために、処置期間中に更なる埋植
物を周期的に導入することのできることも発見された。

一般的な発酵条件ミクロモノスポラ・シトレア種ＬＬ−Ｅ１９０８５の培
養は、多独類の液体培養媒体中で行いうる。抗生物質Ｌ
Ｌ−Ｅ１９０８５σの製造に有用な媒体は同化しうる炭
素源例えば殿粉、砂糖、糖蜜、グリセロールなど；同化
しうる窒素源例えば蛋白質、蛋白質加水分解物、ポリペ
プチド、アミノ酸、トウモロコシ浸漬液むど：及び無機
のアニオン及びカチオン例えばカチオン、ナトリウム、
アンモニウム、カルシウム、サルフェート、カーボネー
ト、ホスフェート、クロライドなどを含む。痕跡量の元
素例えばホウ素、モリブテン、銅などは媒体の他の構成
分の不純物として供給される。ばつ気は無菌の空気を発
酵媒体の表面中又は上に強制的に送ることによって行な
われる。消泡剤は必要に応じて添加することができる。

有機体の生長は普通約２４〜３７°Ｃ１好ましくは約２
８０℃で行なわれる。

次の実施例は本発明を詳細に記述する。

実施例１接種物の調製接種物を生育させるＩこめに用いた典型的な媒体は次の
処方に従って調製した：デキストロースデキストリンイースト抽出物ＮＺ　　アミンＡ本炭酸カルシウム消泡剤水１．０％２．０％０．５％０．５％０．１％０．３％合計１００％にする十分量木カゼインの膵臓そしゃく物、シェフイールド・ケ　ミ　
ブ７／し　（Ｓｈｅｆｆｉｅｌｄ　　Ｃｈｅｗ＋１ｃａ
ｌ、　　Ｎｏｒｖｉｃｈ。

ＮＹ）の登録商標。

この媒体を無菌にし、５００ｍ１２の７ラスコ中ｌＱＱ
ｍＱ部分に、培養物ミクロモノスポラ・シトラ工種ＬＬ
−Ｅ１９０８５の寒天傾斜からの菌糸体かき取り物を接
種した。次いで接種したフラスコを回転振とう機上に置
き、３２°Ｃで約４８時間激しく撹拌して１次接種物を
得た。

次いでこの１次接種物の１００一部分を用いて上述の無
菌媒体ｌＯＱに接種し、これを７２時間ばつ気しつつ３
２°Ｃで培養して２次接種物を得た。

次いでこの２次接種物の１０１２部分を用いて、タンク
中の上記無菌媒体２６０Ｑに接種した。この媒体を、ｌ
　８０　ｒｐｍで駆動された羽根で撹拌し、２００α／
分で無菌空気を流し、モして消泡剤５０−を添加しなが
ら約４８次間３２°Ｃで培養し、３次接種物を得た。

実施例２及菫発酵媒体を次の処方に従って調製した：デキストリンデキストロースニュートリソイ（ＮｕＬｒｉｓｏｙ）トウ七ロコシ浸漬汁炭酸カルシウム３．０％０．５％１．５％０．５％０．５％消泡剤０．３％水　　　　　　　全体１００％にする十分量タンク中の
上記媒体２８０　Ｏｆｆ部分を無菌にし、次いで実施例
１に記述したように準備した３次接種物３００１２を接
種した。ばっ気を無菌空気６．５１２／マツシュＱ／分
の速度で行ない、撹拌を約１１０ｒｐｍで駆動する羽根
によって行なった。

温度を２８°Ｃに維持し、消泡剤を必要に応じて添加し
た。発酵は１２９時間後に終了した。

実施例３抗生物質ＬＬ　−Ｅ１９０８５　ａの単離実施例２に記
述した如く製造した全収穫マツシュの１５　（ｌ　ＯＱ
部分を、トルエン１５１２と３０分間混合し、次いで珪
藻土２５０ボンドを添加した。

１５分間混合後、この混合物を濾過し、を濾過残渣を水
１５０ｆ２でｅＩｃ浄した。このｔ濾過残渣を、アセト
ン２０８Ｑ、塩化メチレン４１６Ｑ及び１．５Ｎ塩酸２
０Ｑの混合物中で２時間スラリーにし、次いで濾過した
。濾過残渣を塩化メチレン約η５Ｑで洗浄し、洗浄液と
が液を一緒にした。次いで濾過残渣を本釣８００ａ＋１
＋で洗浄し、この洗浄液も上記洗浄液及び炉液と一緒Ｉ
こし、混合した。塩化メチレン層を分離し、同量の水で
洗浄した。この塩化メチレン層を分離し、１００ｆｆま
で濃縮し、いずれかの水性相が存在するならば新しい塩
化メチレンで再抽出し、Ｉｊｔ後に約１〜３ａまで濃縮
しＩ；。

この塩化メチレン抽出物を、最初にヘキサン：塩化メチ
レン（９：ｌ）及び次いでヘキサンのみで繰返しそしゃ
くして脂肪不純物を除去して褐色の粉末を得ｔ；。

実施例２に記載したように行なった発酵からの、合計で
２０ｇ及び平均１０〜３０％＋７）　ＬＬ　−Ｅ１９０
８５ａを有するいくつかのそのような部分的に精製した
調製物を一緒にし、逆相クロマトグラフィーで精製した
。このカラムは粒径４０ミクロンのＣ１，の結合した相
充填物１５＋２の床からなった。

仕込み物をアセトニトリル：テトラヒドロ７ラン（１：
　１）５００−中でカラムに導入した。カラムをアセト
ニトリル：　０．ＩＭ　ｐＨ４，５の酢酸アンモニウム
緩衝液（８：　２）からなる移動相を用いて１．０４　
／分の流速で展開した。画分を凡そ１２分の間隔で集め
た。画分６及び７を一緒にし、蒸発させて、前述した特
性を有する純粋なＬＬ−Ｅ１９０８５σ２．７９を得た
。

実施例４抗生物質ＬＬ　−ＥＩ９０８５β及びＬＬ−ＥＩ９０８
５γの単離タンク発酵からのＬＬ　−Ｅ１９０８５　ａ
の精製に由来する種々の副画分からこれらの少戊分を単
離した。

原料の塩化メチレン（ＣＨユＣＩ、）からのクロマトグ
ラフィー、全マツシュのシリカゲル上での抽出、及びＣ
Ｈ，ＣＩ２中アセトンの混合物での流出は、β及びγに
富む画分を与えた。この物質をアセトニトリル（ＡＣＮ
）に溶解し、逆相クロマトグラフィーＮＢ　７４１１Ｃ
９９によって分離した。このカラムはＣ０の結合したシ
リカを充填した２１．４ｍｍＸ２５ｃ−のものであった
。カラムをＡＣＮ　６０％、０゜０５Ｍ　ｐＨ４，５Ｎ
Ｈ４ＯＨ４０％で流出させた。画分を分析用ｈｐｌｃに
も基づいて一緒にし、β及びγを得　Ｉこ　。

実施例５抗生物質ＬＬ　−Ｅ１９０８５　Ｉ７の単離Ｅ１９０８
５σを精製するためｊこ用いた大型のｃｌｓカラムから
の早い画分を用いてη成分を得た。原料全ＡｃＮｉ：溶
解し、ＡＣＮ　５０％、　　０．０５Ｍ　ｐＨ４。

５８Ｈ４０ＡＣ５０％で流出させる２１．４１１ＩｍＸ
２５ＣＩｌのＣ１，カラムにより分離した。両分を分析
用ｔｌｐｌｃに基づいて一緒にし、Ｅ１９０８５ηを得
た。

実施例６ＬＬ−Ｅ１９０８５この単離Ｅ１９０８５σのシリカゲルでの精製からの副画分はＥ
１９０８５ζに富んだ（ＮＢ７４ｉ１Ｃ７３）　、ζを
含有する両分を、ＣＪＣ１＊で、続イテアセトン５％、
ＣＨＩＣＩ。

９５％で流出させるシリカゲル［１５０９のウォレン（
Ｗｏｌｅｎ）、２．５Ｘ５０ｃｍカラム］でのクロマト
グラフィーに再度供した。両分を分析用ｈｐｌｃに基づ
いて一緒にし、蒸発乾固してＥ１９０８５ζを得た。（
７５８０Ｃ１５１）実施例７ヒヨコの生長を増大させ且つこれにより飼料利用効率を
改善することに対する抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５ηの
評価この試験では、日令１日のビーターソンＸアーバー・ア
クレス（Ｐｅｔｅｒｓｏｎ　Ｘ　Ａｒｂｏｒ　Ａｃｒｅ
ｓ）のヒヨコを、かご当り雄５羽及び雌５羽の同体重の
群に分けた。カゴは処置当り６回の同一の試験ができる
ような処置群にした。抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５ηを
飼料中２５ｐｐｍ及び５０ｐｐｍで試験し、薬剤を含ま
ない飼料をとるヒヨコに対して評価した。

ヒヨコの体重を、試験の開始時とそれから１週間々隔で
試験の終了まで測定した。全試験期間中ヒヨコは飼料と
水に自由に近づくことができた。

ヒヨコに与えた時に飼料を秤量し、過剰な試料を集め且
つかごをきれにした時に秤量した。

この試験に用いた家さんの飼料は次の通りであつ　を二
　二ビタミン−アミノ酸プレミクス０．５％痕跡量の鉱物０．１％塩化ナトリウム燐酸二カルシウム粉砕した石英石安定化した脂肪脱水したアルファルファ、η％蛋白質トウモロコンのグルテン粉、４１％蛋白質ニシンの魚粉
、６０％蛋白質ダイズ油料、４４％蛋白質粉砕した黄色いトウモロコシ０．３％１．２％０．５％４．０％２．０％５．０％５．０％３０．０％１００．０％にする量上記飼料組成物中のビタミン−アミノ酸プレミクスは次
の調製物から製造した。量の表示は最終飼料組成物１ｋ
ｇ当りの単位に関するものである。

ブチＩし化ヒドロキシトルエンｄＱ−メチオニンビタミンＡビタミンＤ３リポフラビンビタミ＞−Ｅニアシン１２５．０１１９５００．０　ｍｇ３３００．０１．Ｕ。

１１００．０１．Ｃ，ＩＪ。

４．４　ｍｇ２．２１．Ｕ。

２７．５　ｍｇパントテン酸コリンクロライドヨウ酸メナジオン硫酸水素ナトリウムビタミンＢ１□ 粉砕した黄色のトウモロコシ８．８　ｍｇ５００．０　ｍｇ１．４３１１１９１．１０１９１１．０１１１９５．０　ｍｙ得られたデータを下表に示す。この表から、抗生物質Ｌ
Ｌ−Ｅ１９０８５ηはヒヨコの体重を改善し且つ薬剤を
与凡てな対照物よりも飼料の利用効率を増大させること
が理解できる。

表１、Ｌ　−Ｅ　１９０８５７７の評価対照物本発明の特徴及び態様は以下の通りである：構造式［式中、Ｒ。

はＨｌＣＯＣＨ，、又はＣ０ＣＨ（ＣＨｓ）ｚであり、そして２はＣ８゜である】を有する化合物。

２、構造式Ｏ［式中、Ｒ，はＣ０ＣＨ＊ＣＨ（ＣＨｓ）ｘであり、そ
してＲ８はＨである］を有する化合物。

３　、　ＬＬ−Ｅ１９０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ
、ＬＬ−Ｅ１９０８５ζ、及びＬＬ−Ｅ１９０８５ηか
らなる群から選択される化合物の抗バクテリヤ有効量を
温血動物に投与することを含んでなる該動物のバクテリ
ヤ感染の処置法。

４、微生物ミクロモノスポラ・シトレア種ＮＲＲＬ１８
３５１又はその突然変異体を、実質的な抗生物質活性が
媒体に付与されるまで炭素、窒素及び無機塩の同化しう
る物質源を含む液体媒体中で好気的に発酵させ、次いで
これから抗生物質を回収することを含んでなるＬＬ−Ｅ
１９０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、ＬＬ−Ｅ１９０
８５ζ、及びＬＬ−Ｅ１９０８５ηからなる群か選択さ
れる抗生物質の製造法。

５、微生物ミクロモノスポラ・シトレア種ＮＲＲＬ１８
３５１又はその突然変異体の活性培養物を接種した炭素
、窒素及び無機塩の同化しうる物質源を含む液体媒体を
好気的に発酵させ、該発酵培養物を５０　”　１５０時
間約２４〜３７℃の温度に維持し、このマツシュ（ｍａ
ｓｈ）を収穫し、そして抗生物質を抽出することを含ん
でな上記３に挙げた如き抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５β
、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、ＬＬ−Ｅ１９０８５ζ、及び
ＬＬ−Ｅ１９０８５ηの製造法。

６、抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその生理学的に
許容しうる塩の生長速度を高める量を温血動物に投与す
ることを含んでなる該動物の生長速度を向上させる方法
。

７、該抗生物質を、該動物の飼料又は飲料水中又はそれ
と共に、約０．０１−１０００ｐｐ＋ｎの濃度で該動物
に経口投与することを含んでなる上記６の方法。

８、該抗生物質を、該動物に約０．００１−１００１１
＋ｇ／体ＩＥｔｋｇ／日の抗生物質を与えるのに十分な
量で動物に非経口的に投与することが含んでなる上記６
の方法。

９、抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその生理学的に
許容しうる塩の飼料効率を高める量を、温血動物に投与
することを含んでなる該動物の飼料利用効率を向上させ
る方法。

１０、食べられる動物飼料及び抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０
８５η又はその生理学的に許容しうる塩約０．００１−
１Ｏ００ｐｐを含んでなる温血動物の生長速度を高める
動物飼料組成物。

１１、食べられる動物飼料及び抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０
８５η又はその生理学的に許容しうる塩約０．０１−１
０００　ｐｐｍを含んでなる飼料利用効率を高めるため
の動物飼料！１戊物。

Claims

【特許請求の範囲】１、構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＿１はＨ、ＣＯＣＨ＿３、又はＣＯＣＨ（Ｃ
Ｈ＿３）＿２であり、そしてＲ＿２はＣＨ＿３である］を有する化合物。２、構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＿１はＣＯＣＨ＿２ＣＨ（ＣＨ＿３）＿２で
あり、そしてＲ＿２はＨである］を有する化合物。３、ＬＬ−Ｅ１９０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、Ｌ
Ｌ−Ｅ１９０８５ζ、及びＬＬ−Ｅ１９０８５ηからな
る群から選択される化合物の抗バクテリヤ有効量を温血
動物に投与することを含んでなる該動物のバクテリヤ感
染の処置法。４、微生物ミクロモノスポラ・シトレア種ＮＲＲＬ１８
３５１又はその突然変異体を、実質的な抗生物質活性が
媒体に付与されるまで炭素、窒素及び無機塩の同化しう
る物質源を含む液体媒体中で好気的に発酵させ、次いで
これから抗生物質を回収することを含んでなるＬＬ−Ｅ
１９０８５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、ＬＬ−Ｅ１９０
８５ζ、及びＬＬ−Ｅ１９０８５ηからなる群か選択さ
れる抗生物質の製造法。５、微生物ミクロモノスポラ・シトレア種ＮＲＲＬ１８
３５１又はその突然変異体の活性培養物を接種した炭素
、窒素及び無機塩の同化しうる物質源を含む液体媒体を
好気的に発酵させ、該発酵培養物を５０〜１５０時間約
２４〜３７℃の温度に維持し、このマツシユを収穫し、
そして抗生物質を抽出することを含んでなる特許請求の
範囲第３項記載に挙げた如き抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８
５β、ＬＬ−Ｅ１９０８５γ、ＬＬ−Ｅ１９０８５ζ、
及びＬＬ−Ｅ１９０８５ηの製造法。抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその生理学的に許容
しうる塩の生長速度を高める量を温血動物に投与するこ
とを含んでなる該動物の生長速度を向上させる方法。７、抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその生理学的に
許容しうる塩の飼料効率を高める量を、温血動物に投与
することを含んでなる該動物の飼料利用効８、食べられ
る動物飼料及び抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８５η又はその
生理学的に許容しうる塩約０．０１〜１０００ｐｐｍを
含んでなる温血動物の生長速度を高める動物飼料組成物
。９、食べられる動物飼料及び抗生物質ＬＬ−Ｅ１９０８
５η又はその生理学的に許容しうる塩約０．０１〜１０
００ｐｐｍを含んでなる飼料利用効率を高めるための動
物飼料組成物。