JPH0330667A

JPH0330667A - コレステロール及び酸化コレステロールの吸着能を有する酸性多糖類を生産するキャンディダ・ケフィール及びキャンディダ・テヌス、その生産する酸性多糖類

Info

Publication number: JPH0330667A
Application number: JP1165077A
Authority: JP
Inventors: Kenji Watanabe; 渡邊　乾二; Makoto Nakamura; 良中村
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1989-06-27
Filing date: 1989-06-27
Publication date: 1991-02-08

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産Ｕす胆Ｗ土狂本発明は、コレステロール及び酸化コレステロールの吸
着能を有する酸性多糖類を生産するキャンディダ・ケフ
ィール及びキャンディダ・テヌス、その生産する酸性多
糖類及びその製造法並びにこの培養上清、酸性多糖類等
を有効成分とするコレステロール及び酸化コレステロー
ル吸着剤に関する。

本発明の吸着剤は、食品中に存在するコレステロールあ
るいは変異原物質である酸化コレステロールといった生
体有害物質を吸着する作用を有するので、これらを食品
中から除去したり、消化管内から体外への排出を促進す
る目的で飲食品に添加することのできる機能性食品素材
として利用することができる。また食品や生体試薬等か
らこれらの物質を分別、分画し、定性、定量する目的の
試薬としても利用することができる。

従　の　術　び　゛　しようとする課本発明者等は、ロドコッカス属＜Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕ
ｓ　ｓｐ、）やバシルス属（ＢａｃｉＬｔｕｓ　ｓｐ、
）の微生物が、水溶性多糖類を生産し、これが水不溶性
のコレステロールを吸着して水可溶性とすることを報告
してきた。しかし、乳用酵母がこのような性質を有する
水溶性多ｔｌ［を生産するという報告はなされていない
。本発明者等は、多数の乳用酵母について有用な性質を
もつ水溶性多糖類の生産能についての検討を行ったもの
である。

課　をｒｏするための千Ｆ本発明者は、多数の乳関連ストックカルチャーの酵母あ
るいは乳製品より分離した酵母について、コレステロー
ル添加培地での培養過程において、コレステロール吸着
性成分を産生ずる酵母の検索を行った。その結果、アル
コール性発酵乳飲料のシードカルチャーとして用いられ
るケフィール粒から分離されたキャンディダ・テヌス＜
Ｃａｎｄｉｄａ　ｔｅｎｕｉｓ）及びキャンディダ・ケ
フィール（Ｃａｎｄｉｄａ　ｋｅｆｙγ）がこのような
活性のある株であることを見出し、活性成分の精製と諸
性質の解析を行って本発明を完成するに至った。さらに
、本発明では、変異原物質である酸化コレステロールも
吸着することにより、本活性成分が脱変異原作用を有す
るが否かについてもあわせて検討を行った。

すなわち、本発明は、（１）　　コレステロール及び酸化コレステロールの吸
着能を有する酸性多糖類を生産するキャンディダ・ケフ
ィールまたはキャンディダ・テヌス。

＋２）　　′ＲＸ工研菌寄第１０７３１である請求項＋
１）に記載のキャンディダ・ケフィール。

（３）微工研菌寄第１０７７０である請求項（１）に記
載のキャンディダ・テヌス。

（４）　　キャンディダ・ケフィールまたはキャンディ
ダ・テヌスを培養して得られる培養上清を有効成分とす
ることを特徴とするコレステロール及び酸化コレステロ
ール吸着剤。

（５）　　キャンディダ・ケフィールまたはキャンディ
ダ・テヌスを培養し、培養上清から酸性多Ｉ！類を採取
することを特徴とする酸性多ｔｌ！類の製造法。

（６）　　キャンディダ・ケフィールまたはキャンディ
ダ・テヌスを培養し、培養上清から採取される次の構成
糖を示す酸性多Ｉ！類。

（ｉ）キャンディダ・ケフィールの構成糖ガラクトース
とウロン酸から成る酸性多糖類（１））キャンディダ・テヌスの構成糖ガラクトース、
グルコース、ウロン酸から成る酸性多糖類（７）　　キャンディダ・ケフィールまたはキャンディ
ダ・テヌスが生産する酸性多ｔＪ！ｉを有効成分とする
ことを特徴とするコレステロール及び酸化コレステロー
ル吸着剤に関する。

本発明におけるケフィール粒から分離されたキャンディ
ダ・テヌスＳＢＴ　５２８７　＜Ｃａｎｄｉｄａ　ｔｅ
ｎｕｉｓ）は次のような菌学的性質を有する。

形状・大きさ　　　　長卵円形２〜４×５〜１０μ増殖
形式　　　　　　　出芽子嚢胞子偽菌糸　　　　　　　　　十アルブチン分解性硝酸塩資化性カロチノイド色素生産性糖発酵性　グルコースガラクトースシュクロースマルトースラクトース糖質化性　ガラクトースシュクロースマルトースセロビオースラクトースメリビオースラフィノース沈澱細顆粒状スムース＋ →− ＋メレチ旨ス　　　　　　　＋キシロース　　　　　　　　＋アラビノース　　　　　　　± リボース　　　　　　　　　＋ラムノース　　　　　　　　　＋また、同様にケフィール粒がら分諦されたキャンディダ
・ケフィールＳＢＴ　５２８６（ｃａｎｄｌｄａｋｅｆ
ｙｒ）は次のような菌学的性質を有する。

形状・大きさ　　　　長卵円形３〜８×５〜１３μ増殖
形弐　　　　　　　出芽子嚢胞子　　　ゴロドコヮ培地マソククラーク培地人参培地馬鈴薯培地沈澱　　　　細顆粒状カロチノイド色素生産性澱粉様物質生産性硝酸塩資化性糖発酵性　グルコースガラクトースシュクロースマルトースラクトースラフィノーストレハロースメリビオースイヌリン糖質化性　ガラクトースラフィノースシュクロースマルトースキシロースセロビオースアラビノーストレハロース＋＋＋＋＋リポースラクトース　　　　　　　　十本発明者等は、これらの性質をもとに、「Ｔｈｅｙｅａ
ｓｔｓ　−ａ　ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　５ｔｕｄｙＪ　（
Ｎ、Ｊ、Ｗ、Ｋｒｅｇｅｒ−νａｎ　Ｒ４ｊ　ｔｔｌｒ
　１９８４）に従って検討した結果、前者をキャンディ
ダ・テヌスＣＣａｎｄｉｄａ　ｔｅｎｕｉｓ）　、後者
をキャンディダ・ケフィールＣＣａｎｄｉｄａ　ｋｅｆ
ｙｒ）と同定した。しかし、通常のキャンディダ・テヌ
ス、キャンディダ・ケフィールは、コレステロール及び
酸化コレステロールの吸着能を有する酸性多糖類を産生
じないのに対し、本発明のものは酸性多糖類を産生じ、
この性質は継代培養によって変化しないことから本発明
のキャンディダ・テヌス、キャンディダ・ケフィールは
通常のキャンディダ・テヌス、キャンディダ・ケフィー
ルの変異株と考えられる。

本発明者等は、上記した性質を有する菌株を、他の公知
の株と区別するため、工業技術院微生物工業技術研究所
に前者は受託番号微工研菌寄第１０７７０　（Ｆ　Ｅ　
ＲＭ　ｐ−１０７７０）後者は受託番号徽工研菌寄第１
０７３１　（Ｆ　ＥＲＭ　ｐ４０７３１）として寄託し
た。

本発明では、これらの菌株の自然変異株、あるいは紫外
線照射、コバルト６０照射、化学変異誘導剤処理等の人
工的変異処理で変異させた人工変異株であってもそれが
コレステロール及び酸化コレステロールの吸着能を有す
る酸性多糖類を生産する限り、利用可能である。

本発明では、これらの酵母がコレステロール吸着活性を
示すか否かについて次の実験を行って検討した。

すなわち、ラクトース４．０％、ポリペプトン１．０％
、酵母エキス０．５％、にｌ１２ＰＯｔ　０．５％及び
ＭｇＳＯ４・７１）□００．２％よりなりｐＨ６，０に
調整した液体培地に、コレステロールを０．１％添加し
、１０　ｄずつ試験管に分注、キャンディダ・テヌスま
たはキャンディダ・ケフィールの菌株を前培養から３白
金耳づつ接種し、３７℃で振盪培養を行い、菌体当りの
コレステロール吸着量、培養上清におけるコレステロー
ル吸着量及び培養上清中の糖含量を測定した。

この結果、培養後４日間は菌体に吸着されるコレステロ
ールが増加し、その後減少するが、培養上清におけるコ
レステロール吸着量は４日目から増加する。一方、培養
液中の糖含量は培養後−度戚少するが４日目前後から次
第に増加してくる。

このような変化から、培地成分としてのＰｉ類がまず消
費され、その後、コレステロール吸着能を有する酸性多
ＩＩ！ｍが産生されてくることによってコレステロール
が吸着され、結果的に培養上清のコレステロール吸着量
が増大するものと思われた。

そこで本発明では、キャンディダ・ケフィールまたはキ
ャンディダ・テヌスの培養上清について、実施例１の方
法によってこの事実を確認した。この事実は、第１表に
示されるようにキャンディダ・テヌス、キャンディダ・
ケフィールに特異的にみられ、その他の酵母ではほとん
どみられなかった。また、コレステロールの加熱酸化生
成物であるコレスタン−３β、５α、６β−トリオール
（以下ＣＴという）、２５−ハイドロキシコレステロー
ル（以下ＨＣという）についても同様の事実を確認した
。

そして、本発明では、実施例２の方法によってキャンデ
ィダ・テヌス培養上清からＤＥＡＥ−セファロースクロ
マトグラフィによって酸性多糖類を単離し、その物性値
及びコレステロール、酸化コレステロール吸着能を検討
した。

また、実施例３の方法によってキャンディダ・ケフィー
ルの培養上清についてコレステロールを吸着する酸性多
糖区分を分画した。

以下に本発明の実施例を示し、本発明の詳細な説明する
。

第１表コレステロールを吸着する多ｔＩ！類を産生ずる酵母（
ｍｇ／　ｔｕｂｅ）　” ＣＣａｎｄｉｄａ　ｔｅｎｕｉｓ）　ＳＢＴ　５２８７
キヤンデイダ・テヌスＣＣａｎｄｉｄａ　ｔｅｎｕｉｓ）　ＩＰＯ０７１６０
゜１７キヤンデイダ・リボリテイカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ＬｙｐｏＬｙｔｉｃａ）　ＩＦＯ０
７１７０，１６キヤンデイダ・リボリテイカ（Ｃａｎｄｉｄａ　ＬｙｐｏＬｙｔｉｃａ）　ＩＦＯ０
７４６０，０９キャンディダ・リポリテイカ＜Ｃａｎｄｉｄａ　ｔｙｐｏＬｙｔｉｃａ）　ＩＦＯ０
７０７０、Ｏ６キヤンデイダ・ケフィールＣＣａｎｄｉｄａ　ｋｅｆｙｒ）　ＳＢＴ　５２８６３
．００ン主）本コレステロールｌＱｍｇ／ｌｕｂｅ実施例１ｉｌｌ培養上清の調製；キャンディダ・ケフィールＳＢＴ　５２８６またはキャ
ンディダ・テヌスＳＢＴ　５２８７を、ラクトース４，
０％、ポリペプトン１．０％、酵母エキス０．５％、Ｋ
ｌｌ□ＰＯ４０，５％及びＭｇ５ｏ４７ＨｚＯ０，２％
よりなり、ｐｌ＋　６．０に調整された培地に接種し、
３７°Ｃで４日間振盪培養し、培養液を６０００ｒｐｍ
で３０分間遠心分離して菌体を濾別し、培養上清を得た
。

（２）培養上清のコレステロール及び酸化コレステロー
ル量能；この培養上清にエタノールを６６％濃度まで添加し、生
じた沈澱を７００Ｏｒｐｍで１２分間遠心分離すること
によって除去した後、その上清を中型試験管にＯ，ｉ　
３．５−ずつ分取し、全体量を５０ｄ　’Ｊン酸緩衝液
（ｐ）Ｉ　７．０）で５−とじた。これにコレステロー
ルを５ｍｇずつ添加、３７゛Ｃで一夜振盪し、振盪後吸
着されていない不溶性コレステロールを濾別して得られ
る濾液を、凍結乾燥し溶液中に移行してくるコレステロ
ール量をピアソン等の方法によって測定した。この結果
を第１図に示す。この結果、培養上清ＩＱｍＺ当り３〜
４ｍｇのコレステロルを吸着することが明らかとなった
。

また、変異原物質であるＣＴ、ＨＣに対する脱変異原作
用については、サルモネラ・チヒムリウムＣ５ａｔｍｏ
ｎｅＬＬａ　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）ＴＭ０１株（以
下ＴＭ０１株という）を用いたＡｗｅｓ法によってその
効果を判定した。常法のＡｍｅｓ法を行うに当り、１４
９８株生育培地中に上記培養上清を１〜５　ｍｌ添加し
た時のコロニー出現率を対照と比較した結果を第２図に
示す。この結果、培養上清を１−以上添加することによ
り、ＴＭ０１株のコロニー出現率はｌ（Ｃで５０％前後
、ＣＴで２５％前後まで低下し、明らかに培養上清に脱
変異原作用のあることが認められた。

また、このような上清のコレステロール吸着活性は、ｐ
Ｈ４〜１０の範囲で比較的安定していることを確認した
。

実施例２（１）酸性多塘類の調製；キャンディダ・テヌスから得られた実施例１の上清に、
エタノールを７０％濃度まで添加し、生ずる沈澱を７０
０Ｏｒｐｍ　、１２分間遠心分離して分取した。

この沈澱画分を酢酸緩衝液（ｐＨ６，０）に溶解し、Ｄ
ＥＡＥ−セファローズＣＬ−６Ｂクロマトグラフィにか
けた。０．５−１．０Ｍ　ＮａＣ１水？容液で溶出して
得られる溶出液を透析し、凍結乾燥することにより粗酸
性多糖類を得た。さらにこの粗酸性多糖類！類をセファ
ローズＣＬ−４Ｂクロマトグラフにかけ、溶出物を凍結
乾燥することによって精製酸性多糖類を得た。この粗製
酸性多糖類の収率は、培養上清１０−あたり２．０〜２
．２ｍｇであった。

また、このクロマトグラフのン容出フラクションを第３
図に示す。

本発明をなす活性はフラクション（４）に認められた。

（２）精製酸性多糖類〔フラクション（４）〕の物性値
（ｉ）吸光度フェノール硫酸法によると通常の糖と同様に４９０ｎｍ
に吸光度を示す。

（ｉｉ　）電気泳動フラクション（４）をセルローズ・アセテート電気泳動
にかけると第４図に示すような単一スポットを示す。

（ｉｉｉ）　”ＣＮＭＲフラクション（４）の”ＣＮＭＲは第５図のとおり。

フラクション（４）の酸性多糖区分を加水分解してガス
クロマトグラフィーにかけた結果を第６図に示す。構成
糖中の中性糖としてガラクトースとグルコースが認めら
れた。また、本フラクションはセチルトリメチルアンモ
ニウムブロマイドの添加によって沈澱が生じること、カ
ルバゾール硫酸法ニよって特異的な呈色が認められるこ
とがらウロン酸の存在が確認された。

実施例３（１）酸性多糖区分の分画；キャンディダ・ケフィールから得られた実施例１の培養
液を６００Ｏｒｐｍ、３０分間遠心分離して菌体を除去
した後、ｐＨ７，５に調整した。この培養上清を試験管
に分注後、コレステロールを０．１％添加し、３７℃で
１夜振盪した後に不溶性コレステロールを濾過し、得ら
れた濾液をｐｌ＋　３．０に調整して水中に１夜放置し
て沈澱を生成させた。これを６００Ｏｒｐｍで３０分間
遠心分離し上滑と沈澱とに分けた。上清及び沈澱のコレ
ステロール含量を測定したところ上清中にはその乾燥重
量に対して０μｇであるのに対し、沈澱画分中には７７
μｇ存在し、上清にはコレステロールは全く吸着されな
いのに対し、沈澱画分にのみコレステロールが吸着され
ることが認められた。そこで、沈澱をｐＨ７，５で水に
溶解し、流水透析した後、凍結乾燥してコレステロール
を吸着している酸性多糖区分を得た。

（２１Ｂｉｏ−ｇｅｌ−Ｐ−１５０カラムクロマトグラ
フィー；１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）で膨潤さ
せたＢｉ。

ｇｅｔ−Ｐ−１５０（Ｂｉｏ　Ｒａｄ社製）をカラム（
２，５Ｘ　６４ｃｍ）に充填し、約２００艷の同緩衝液
で平衡化・洗浄を行った。前記酸性多糖区分を同緩衝液
に溶解し、カラムにかけ同緩衝液で溶出させた。各溶出
画分中の糖をフェノール硫酸法で、またコレステロール
をピアソンらの方法によって定量した。その溶出パター
ンを第７図（脱コレステロール化前）及び第８図（脱コ
レステロール化後）に示す。コレステロール及び糖の含
量からみた場合、各試料はＦｒ、Ａ、　Ｆｒ、Ｂ、、Ｆ
ｒ、Ｃの３フラクシヨンに分れた。

さらにこれらコレステロールを吸着している状態の酸性
多糖区分及びコレステロールを遊離、除去した後の酸性
多糖類をカラム処理し、得られた各フラクションとコレ
ステロールを再び混合振盪させ、各Ｆｒ、に吸着させた
場合のコレステロール含量を第２表に示す。

第２表Ｆｒ、Ａ　　　Ｆｒ、Ｂ　　　Ｆｒ、Ｃ脱コレステロー
ル化前　３５７　　　８６　　　８４脱コレステロール
化後　２０８．６’　　　６．３　　６．１この表から
みて、Ｆｒ、Ａが他のフラクションに比べてコレステロ
ール吸着活性が高い。

ｆ３１Ｐｒ、ＡのＢｉｏ−ｇｅｌ−Ｐ−１５０カラムク
ロマトグラフィー；Ｆｒ、　Ａの単一物質を得るために本画分をさらに流水
透析、凍結乾燥を行った後、上記（２）の方法によって
Ｂｉｏ−ｇｅｌ−Ｐ−１５０カラムクロマトグラフイで
再クロマトを行った。得られた各フラクションの糖、コ
レステロール、蛋白質及び２８０ｎｍにおける吸光度を
測定した。なお、糖及びコレステロールは、上記（３）
と同じ方法で、蛋白質はＬｏｗｅｒｙ法によって測定し
た。

その結果を、第９図に示す。

第９図では、糖と蛋白質との最初のピークははり重なる
が、コレステロールは最初のピークにだけ検出されたの
で、このフラクションをＦｒ、Ａ’とした。

さらにＦｒ、Ａ’　を上記方法（２）によって再度旧〇
−ｇｅｌ−Ｐ−１５０カラムクロマトグラフィーにかけ
たところ、第１０図に示すような溶出パターンが得られ
、糖、蛋白質、コレステロールのピークが−ａした。こ
のフラクションをＦｒ、　Ａ“とじた。このフラクショ
ンがコレステロール吸着活性が最も高かった。

（４）　　Ｓ　Ｄ　Ｓ　−Ｐ　Ａ　Ｇ　Ｅ電気泳動７．
５％ＳＤＳを含むミニスラブゲルを用いて５ＤＳ−ＰＡ
ＧＥ電気泳動をＦｒ、　Ａ、　Ｆｒ、　Ｂ　ＳＦｒ、　
Ｃ及びＦｒ、Ａ“について行った。

すなわち、各フラクションの乾燥型！ｔ１ｍｇを水４０
ｔｔｌに溶解し、１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，０
）１０μｍｌを加え、１００℃で３分間加熱後、その１
０μｌをＯ０１％ＳＤＳを含むトリス−グリシン緩衝液
を用いて１０顛＾、２時間３０分泳動させた。糖の検出
はＰＡＳ染色で、蛋白質の検出はツマ−シーブリリアン
トプル−Ｒ２５０染色で行った。その結果、Ｆｒ、　Ａ
は糖が泳動距離に応じてゲルの上、中及び下部の３箇所
に認められ、また、最下部の糖と同位置に蛋白質が存在
した。Ｆｒ、　ＢはＦｒ、　Ａと同様の泳動像を示した
が、各スポット共全体に薄くテーリングしているのが認
められた。Ｆｒ、　Ｃは下部１ケ所にのみ糖が認められ
、また、同位置に蛋白質も存在していた。

一方、Ｆｒ、　Ａ”は、ゲル上部に１ケ所、濃い糖のス
ポットが検出され、その位置には蛋白質が認められなか
った。

このことから、最もコレステロール吸着活性の高いＦｒ
、　Ａ”は低分子の蛋白質が混在している状態であると
いえる。このことは、Ｆｒ、　ＡまたはＦｒ、　Ａ”を
プロテアーゼ処理してもコレステロール吸着に何ら影響
を及ぼさないことからも確認できた。

Ｆｒ、　Ａ及びＦｒ、　Ａ”は、セチルトリメチルアン
モニウムブロマイドの添加によって沈澱を生じること、
また、カルバゾール硫酸法によって特異的な呈色が認め
られることがらウロン酸の存在が確認され、また、ガス
クロマトグラフィーによる分析の結果、中性糖はガラク
トースであることが認められたことから、本活性画分は
ガラクトースとウロン酸から成る酸性多糖類であるとい
える。

実施例４酸性多糖類のコレステロール及び酸化コレステロール吸
着能：実施例１に準じ、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）
５ｍｊにコレステロールを５ｍＢ、精製酸性多糖類を１
ｍｇ添加、対照として各種多糖類を１０ｍｇづつ添加し
、３７℃で一夜振盪した後、多糖類に吸着したコレステ
ロールを測定した。

第１）図にキャンディダ・テヌスＳＢＴ　５２８７株か
ら得ら゛れた酸性多Ｉｌｌのコレステロール吸着活性を
、その他の多ｔｉｎのそれと比較した結果を示す。この
結果から酸性多糖類のコレステロール吸着活性が、〔１
〕アミロース、β−シクロデキストリン等、〔２〕アラ
ビヤゴム等、〔３〕キチン等のそれに比べて著しく高い
ことが判明した。

実施例５吸着剤としての用途；実施例２及び３による酸性多糖類１０Ｂと乳糖５００１
）１ｇを加えて錠剤とした。本錠剤を毎日経口的に飲用
すると健康上有用である。

本発明において、これを吸着剤として利用するには、培
養上清は加熱殺菌し、そのまま、または濃縮し、あるい
は凍結乾燥して、また酸性多糖類はそのまま使用できる
。

これらを錠剤にしたり、飲料、肉製品、パン、麺類等の
飲食品に添加して使用する。使用量は１日成人当り１０
〜１００ｍｇが適当である。またこれらの物質は毒性は
ほとんどない。

光皿凹須果本発明によるキャンディダ・ケフィール、キャンディダ
・テヌスはコレステロール及び酸化コレステロールを吸
着する性質のある酸性多糖類を高収率に生産する。そし
て得られる培養上清、酸性多ｔｔｊ類は、コレステロー
ル及び酸化コレステロルを吸着するので、コレステロー
ル等を含む食品等に添加してコレステロール等を除去す
ることもできるし、あるいはこれを飲料、カプセル剤等
に加工して飲用し、健康を維持することもできる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、キャンディダ・テヌスの培養上清の容量とコ
レステロール吸着量との関係を、第２図は、培養上清の
容量と脱変異原作用との関係を、第３図は、酸性多ＩＪ
！ｌのカラムクロマトグラフによる溶出状態を、第４図
はそのセルローズ・アセテート電気泳動図を、第５図は
”ＣＮＭＲを、第６図はそのガスクロマトグラフをそれ
ぞれ示す。第７図は、キャンディダ・ケフィールの培養液にコレス
テロールを加えて生ずる沈澱画分を水に溶解後Ｂｉｏ−
ｇｅｔ−Ｐ−１５０カラムクロマトグラフィにかけた場
合の溶出パターンを、第８図は、この両分を脱コレステ
ロール化した後の溶出パターンを示す。図中、○−○は
糖を、Ｘ−Ｘはコレステロールをそれぞれ示す。第９図は、上記Ｂｉｏ−ｇｅｌ−Ｐ−１５０のＦｒ、　
Ａを再度Ｂｉｏ−ｇｅｌ−Ｐ−１５０カラムクロマトグ
ラフィーにかけた溶出パターンを、第１０図はそのＦｒ
、Ａ’　を再々度Ｂｉｏ−ｇｅｌ−Ｐ−１５０カラムク
ロマトグラフィーにかけた溶出パターンをそれぞれ示す
。図中、Ｏ−〇、×−×は第８図及び第９図と同様であ
り、△−△は蛋白質を、また・−・は２８０ｎｍにおけ
る吸光度をそれぞれ示す。第１）図は、多糖Ｒ（１０ｍｇ１５ｍｆ）のコレステロ
ール吸着活性を示す。図において〔１〕はアミロース、セルロース、β−サイクロデキス
トリン、デキストラン、イヌリン、コンニャクマンナン
、プルラン、可溶性澱粉のそれを、〔２〕はアラビヤゴム、カラギーナン、グリコゲン、ロ
ーカストビーンガム、ペクチン、キサンタンガムのそれ
を、〔３〕はキチン、ヒアルロン酸ナトリウム塩、アルギン
酸ナトリウムのそれを、〔４〕はキャンディダ・テヌスＳＲ↑５２８７の酸性多
Ｗ類のそれをそれぞれを示す。・−−−一一一・コレスタン−３β、５α、６β−トリオール−−−−０２５−ハイドロキシコレステロール第２図糖（ｍｇ／ｌ０ｍ１　） −４２２− 糖（ｍｇ／１０ｍ１　）コ　　し　　ス　　テ　　ロ　　−　　ル　　（ｍｇ／
１０ｍ１　　　）（ｎＡ。８０

Claims

【特許請求の範囲】（１）コレステロール及び酸化コレステロールの吸着能
を有する酸性多糖類を生産するキャンディダ・ケフィー
ルまたはキャンディダ・テヌス。（２）微工研菌寄第１０７３１である請求項（１）に記
載のキャンディダ・ケフィール。（３）微工研菌寄第１
０７７０である請求項（１）に記載のキャンディダ・テ
ヌス。（４）キャンディダ・ケフィールまたはキャンディダ・
テヌスを培養して得られる培養上清を有効成分とするこ
とを特徴とするコレステロール及び酸化コレステロール
吸着剤。（５）キャンディダ・ケフィールまたはキャンディダ・
テヌスを培養し、培養上清から酸性多糖類を採取するこ
とを特徴とする酸性多糖類の製造法。（６）キャンディダ・ケフィールまたはキャンディダ・
テヌスを培養し、培養上清から採取される次の構成糖を
示す酸性多糖類。（ｉ）キャンディダ・ケフィールの構成糖ガラクトース
とウロン酸から成る酸性多糖類（ｉｉ）キャンディダ・テヌスの構成糖ガラクトース、グルコース、ウロン酸から成る酸性多糖
類（７）キャンディダ・ケフィールまたはキャンディダ・
テヌスが生産する酸性多糖類を有効成分とすることを特
徴とするコレステロール及び酸化コレステロール吸着剤
。