JPH0260598A - 抗生物質の製造 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はバンコマイシン抗生物質の製造における改良に
関する。

バンコマイシンは近接して関連したグリコペプチドの同
族類であるＣＢａｒｎａ　ａｎｄ　Ｗｉｌｌｉａｍｓ。

ｒＡｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、Ｊ、　３
８．３３９（１９８４））。

これらは細菌細胞壁合成の抑制剤であり、ダラム陽性菌
、特にグラム陽性球菌により誘発された細菌感染症の対
抗処置において特に有用である。商業的に最も重要なバ
ンコマイシン族の一員は、バンコマイシン（Ｖａｎｃｏ
ｍｙｃ　ｉｎ）そのものであり、これはＮｏｃａｒｄｉ
ａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　（以前はＳｔｒｅｐＬｏｍ
ｙｃｅｓ　ｏｒｉｅｎＬａｌｉｓと称した）の発酵で産
生されるいくつかのグリコペプチドの複合化合物である
。

一般的にバンコマイシンは両性化合物であり、塩、例え
ば塩酸塩のような酸付加塩を形成する。

本明細書中では「バンコマイシン」という語はバンコマ
イシン族に属する全てのグリコペプチド抗生物質を指し
、［バンコマイシン（Ｖａｎｃｏ−ｍｙｃｉｎ）　Ｊ　
はＮｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓから得られ
た抗生物質を指すが、族全体の名称はここから来ている
（　ＢａｒｎａとＷｉｌｌｉａｍｓの前記文献）。「バ
ンコマイシン」および「バンコマイシン（Ｖａｎｃ。

ｍｙｃｉｎ）Ｊはともに、関連化合物の塩も包含するも
のと理解されたい。

一般的にバンクマイシンは産生微生物の発酵により誘導
されるため、発酵培養液の十分な精製が薬学的使用に適
する形態の抗生物質を得るためには必要となる。現存の
商業的精製方法は各段階に多大な生成物損失を伴う多段
階操作であって、用いるのに費用がかかる。従って発酵
液からバンコマイシンを得るためのより効率的で簡便な
方法が必要とされている。

本発明は、バンコマイシンを溶液中イミダゾール化合物
と接触させると２者が複合化合物を形成し、次にこれが
溶液から析出して高収率で容易に回収できるという発見
に基づいている。

この方法により、バンコマイシンは溶液中に存在する他
の不純物と容易に分離できる。この方法は、全体的また
は部分的に精製された発酵液中に存在するバンコマイシ
ン化合物に適用してもよく、このため抗生物質の精製に
おいて用いるための好都合な方法を提供する。

従って、本発明の１つの観点において、不純物を含むバ
ンコマイシン溶液をイミダゾールと接触させる段階およ
びこれにより生成したパンツマイシンイミダゾール沈澱
を回収する段階を包含する不純物含有溶液からのバンコ
マイシンの分離方法が提供される。

イミダゾール／バンコマイシン複合化合物は新しいもの
であり、本発明の別の要素を構成する。

一般的に、沈澱生成は好ましくは３〜８、例えば４〜６
、好都合には約５のｐＨで行なう。本発明の方法で用い
てよいイミダゾールは、イミダゾールおよびその置換誘
導体、例えばＮ−アルキルイミダゾール、好ましくはＮ
−（Ｃ，〜、）−アルキルイミダゾール、例えばＮ−メ
チルイミダゾールを包含する。このようなイミダゾール
類は、一般的に水溶性である。イミダゾールが特に好ま
しい。

イミダゾールは液体または固体のいずれかであってよく
、両形態を本発明の方法に用いてよい。しかしながらイ
ミダゾールが固体である場合には、使用前にこれを適当
な溶媒、例えば水に溶解するのが好ましい。イミダゾー
ルは比較的に塩基性であり、酸性ｐＨ下の溶液中ではプ
ロトン化された、即ち塩の形態になる。バンクマイシン
含有溶液に添加するイミダゾールの重量は厳密ではない
が、少なくとも溶液中に存在するバンコマイシンの重量
と等しいものであり、例えばバンコマイシン化合物の重
量の２倍〜１０倍、例えば２倍〜６倍が一般的である。

出発溶液中のバンコマイシンの濃度は標準的な検定方法
、例えば高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に
より推定してよい。

バンコマイシン含有溶液は好ましくは抗生物質の水性溶
液であるが、有機溶媒、例えばジメチルスルホキンドの
ような溶媒中の抗生物質溶液であってもよい。

本発明に従って生成した沈澱は従来の方法、例えば濾過
または遠心分離を用いて回収してよい。所望であれば、
沈澱は１つまたはそれより多い溶媒で洗浄してよい。

所望のバンコマイシンは例えば、塩酸のような酸で酸性
化しである例えば水のような適当な溶媒中に本発明に従
って得られた沈澱を再溶解し、バンコマイシンに対する
非溶媒の例えばエタノールのようなアルコールを用いて
抗生物質を再沈澱させることにより、イミダゾールと結
合していない形で回収しうる。次に沈澱したバンコマイ
シンを例えば濾過により採集してよい。

バンコマイシンは塩基型で回収するか、または沈澱する
間に酸が存在する場合は酸付加塩、例えば塩酸塩の形態
で回収してよい。

本発明の方法は、バンコマイシン製造におけるいずれか
の段階において、例えば全発酵液に対して、または例え
ば濾過、抽出、沈澱および／またはクロマトグラフィー
によりあらかじめ精製された全発酵液に対して使用しう
る。出発物質として使用されるバンコマイシン含有全発
酵液は当該技術で良く知られた条件下で知られた産生生
物を用いた発酵により取得しうる。即ち、例えばバンコ
マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）含有全発酵液は、米
国特許第３０６７０９９号に記載の方法を用いてＮｏｃ
ａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎＬａｌｉｓの産生株、例えばＮ
ｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　ＮＲＲＬ　２
４５４の発酵により取得しうる。他のバンコマイシン抗
生物質を含有する発酵液は同様の方法により適切な知ら
れた産生生物から取得しうる。

本発明により生成したバンコマイシン／イミダゾール沈
澱およびそれから得られたバンコマイシンの純度は使用
する出発物質の性質に大きく依存している。従って、予
かしめ精製されていない調製物（例えば全発酵液）を本
発明の方法において用いた場合は、得られる沈澱は最終
生成物中に不必要な不純物をなお含有している。

これらは再溶解、必要な場合は濾過および同じかまたは
異なるイミダゾールを用いた沈澱の反復によるか、まｔ
；は他の技術、例えば吸着クロマトグラフィーおよび／
またはイオン交換クロマトグラフィーのようなりロマト
グラフイーに沈澱を付すことにより除去してよい。しか
しながら、一般的に、本発明の方法において出発物質と
して部分精製バンコマイシンを使用する場合は生成した
沈澱を直接用いて、許容できる純度の所望のバンコマイ
シンを得ることができる。

本発明の方法はバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉ
ｎ）に対して使用するのに特に適していることがわかっ
た。

即ち、本発明の好ましい観点において、不純物の混入し
ているバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）の水
性溶液をイミダゾールと接触させる段階およびこれによ
り生成したバンコマイシン（Ｖａｎ−ｃｏｍｙｃｉｎ）
含有沈澱を回収する段階を包含する、不純物含有バンコ
マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）　水性溶液からバ
ンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）　全分離する
ための方法が提供される。

イミダゾールは例えばＮ−メチルイミダゾールまたは好
ましくはイミダゾールであることができる。バンコマイ
シン含有溶液は望ましくは抗生物質の水性溶液である。

本発明の方法を用いることにより、バンコマイシン（Ｖ
ａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）産生Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉ
ｅｎｔａｌｉｓの株より得た発酵液中に存在するバンコ
マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）の精製に適する方
法が開発された。新しい方法は濾過および吸着クロマト
グラフィーによる発酵抗生物質の初期部分精製を包含し
、次に精製はイミダゾールとの反応により完了する。方
法は操作が単純であり、実質的に不純物を含有しない高
収率のバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）を得
ることができる＠即ち、本発明の別の観点において、以
下の段階；１）バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉ
ｎ）産生Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ株よ
り得られた発酵液を濾過することおよび濾液を採集する
こと、２）濾液を非官能性または中間極性の合成重合体
樹脂と接触させてバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉ
ｎ）　全吸着させること、３）樹脂からバンコマイシン
（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）を溶離させること、４）溶
離したバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）をイ
ミダゾールに接触させることおよびこれにより生成した
沈澱バンコマイシン（Ｖａ−ｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）を回
収すること、および５）沈澱からバンコマイシン（Ｖａ
ｎｃｏ−ｍｙｃｉｎ）を回収すること、を包含するバン
コマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）の調製方法が提
供される。

出発発酵液はＮｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉ’
ｓ　ＮＲＲＬ２４５４のようなバンコマイシン（Ｖａｎ
ｃｏｍｙｃ　ｉｎ）産生Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎ
ｔａｌｉｓ株の培養により取得しうる。培養液を採取し
、次にシカライト（Ｄｉｃａ−１ｉｔｅ）のような珪藻
土フィルターを用いるなどして、アルカリ性ｐＨ例えば
ｐＨ７，２〜９．０の下でこれを濾過することにより固
体不純物および菌糸体が除去されうる。次にか液のｐｕ
を７前後に調整し、次に濾液を非官能性または中間極性
の合成重合体樹脂に適用し、その上にバンコマイシン（
Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）を吸着させる。吸着剤はアク
リルエステル樹脂、例えばアンバーライト（Ａｍｂｅｒ
ｌｉｔｅ）　ＸＡＤ−７またはより好マシくハスチレン
ジビニルベンゼン樹脂、例えばカスチル（Ｋａｓｔｅ１
）　５１１２樹脂であってよい。バンコマイシン（Ｖａ
ｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）は適当な溶媒、例えば酸を含有す
る水性アルコール、例えば塩酸を含有する水性メタノー
ルまたはグロパノールを用いて樹脂から溶離させる。場
合により、樹脂処理は所望であれば異なる樹脂を用いて
２段階で行なってよい。所望であれば、得られた富パン
コマインン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）溶出液を例えば減
圧下の溶媒蒸発により濃縮してよい。所望であれば、バ
ンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）はこの段階で
、例えば酸性アセトニトリルの添加により沈澱してよい
。しかしながら一般的には、溶出液を直接、次の沈澱段
階で使用するのがより好都合である。

次にバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）は、好
ましくは水のような適当な溶媒中の溶液中でイミダゾー
ル化合物と接触させる。バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍ
ｙｃｉｎ）　／イミダゾール複合化合物を沈澱させ、次
に例えば濾過により採取しうる。複合化合物中に存在す
る過剰なイミダゾールはケトン、例えばアセトンのよう
な１つまたはそれより多い溶媒を用いて洗浄することに
より除去してよい。

Ｎ−メチルイミダゾールまたは、好ましくはイミダゾー
ルが方法のこの部分で用いるのに特に適している理由は
、バンコマイシン（Ｖａｎｃ。

ｍｙｃｉｎ）との接触によりバンコマイシン（Ｖａｎｃ
ｏ−ｍｙｃ　ｉｎ）とイミダゾールを含有する結晶が迅
速に生成する為である。これらは容易に採集でき、これ
から実質的に純粋なバンコマイシン（Ｖａｎ−ｃｏｍｙ
ｃｉｎ）が回収される。モル比ｌ：ｌでバンコマイシン
（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）およびイミダゾールまたはＮ
−メチルイミダゾールを含有する結晶は本発明の特に有
用な態様である。

バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）は採集沈澱
から、これを適当な溶媒例えば塩酸のような酸を約ｐＨ
２となる程度に含有している水に再溶解することにより
回収してよい。次にバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ
ｉｎ）　　（例えば塩酸塩として）を、アルコール例え
ばエタノールのようなバンコマイシン化合物に対する適
当な非溶媒の添加により沈澱させ、例えばか過により採
集してよい。

所望であれば、次にバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙ−
ｃｉｎ）を、例えばジエチルエーテルでさらに洗浄して
、塩形態の高純度バンコマイシン（Ｖａｎ−ｃｏｍｙｃ
ｉｎ）を得てよい。

本発明を後述する限定しない実施例によりさらに説明す
る。実施例１および２は発酵培地から結晶形態のバンコ
マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）　ヲ精製するために
設定されたイミダゾール接触段階に基づいた方法を説明
するものである。実施例３および４は予め精製しである
バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）出発物質を
用いた本発明の方法の実施を説明している。

以下の実施例では、バンコマイシン（Ｖａｎｃｏ−ｍｙ
ｃ　ｉｎ）は５ｐｈｅｒｉｓｏｒｂ　Ｃ６（５＋ｕ）カ
ラム１５ｃＩｌｌＸＯ，４６ｃｌ＋（直径）、カラム容
量ファクター１２．５７を用いたＨＰＬＣにより、圧力
４０００ｐｓｉ、流量３　ｍＱ１分の条件で測定した。

移動相はアセトニトリル：オルトリン酸２水素アンモニ
ウム溶液（ＮＨ，Ｈ，ＰＯい０．ＯＩＭ　、ラウリル硫
酸ナトリウム２．８８！？／　（ｌ含有）３５：６５の
、リン酸でｐＨ３としたものを用いた。検出は２２０ｎ
ｒａで行ない、標準物質としてはバンコマイシン（Ｖａ
ｎｃｏｍｙｃｉｎ）　９００μ９／１１ｇ以上を含有す
るバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙ−ｃｉｎ）塩酸塩で
あるパンコシン（Ｖａｎｃｏｃｉｎ）（ＥｌｉＬｉｌｌ
ｙ）を用いた（Ｈ，Ｅ、　Ｓｉｍｍｏｎｓ、　　ｒＦｅ
ｄｅｒａｌＲｅｇｉｓｔｅｒＪ、　　３６（２０）　　
ｐ　　１４０８−　１４０９．　　パー　ト　　１４８
Ｓ、　１９７１）。「パンコシン（Ｖａｎｃｏｃ　ｉｎ
）　ＪはＨＰＬＣでバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ
ｉｎ）のピークとは重ならない他の物質の痕跡を含有し
ている。その主ピークは特に補正することなく、バンコ
マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）塩酸塩１０００／
Ｚ９／　ｍｇに由来するものとして計算に用いた。

実施例　１ 採集培養液（Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎＬａｌｉｓ
　（米国特許第３０６７０９９号参照）４３Ｌのバンコ
マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）産生株の発酵により
得たもの〕を４０％水酸化ナトリウム溶液を用いて、本
来のｐＨ７，５をｐＨ９，０となるように調整し、シカ
ライト（Ｄｉｃａｌｉｔｅ）４７８（２％　ｖ／ｖ）　
フィルターエイドとレッテンメイヤ−（Ｒｅｔｔｅｎｍ
ａｉｅｒ）セルロースベツド（６６ｃｍ直径Ｘ直径、２
５ｃｍ）を用いてが過した。濾過残渣を水に再懸濁し、
同じ濾過床を通して濾過し、濾液と洗液を合計４７Ω得
た。これを塩酸でｐＨ７，２に調整した。

合わせたが過洗液の部分（４５，２５α）を８　Ｑ／　
ｈの流速となるように少しずつカスチル（にａｓｔｅ１
）Ｓｌ１２樹脂のカラム（４ａ１直径約７．５ｃｍＸ　
８６ｃｍ）上に注ぎ込んだ。カラムを水（８Ｑ）および
水性メタノール（２０％、８Ｑ）で洗浄し、メタノール
／水／Ｎ塩酸（５：４二１）を用いて２Ｑ画分として溶
出させた。画分２および３は抗生物質のほとんど（４Ｑ
１バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）検定１０
．２５ｇ／Ｑ）を含有しており、これをｐＨ６（水酸化
ナトリウムで調整）で１０日間保存し、その間に粗製の
暗茶色スラッジが沈澱した（８．６７ｇ、バンコマイシ
ン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）検定０．５３ｇ／　＋９
）。

透明黄色上澄液をｐＨ５（塩酸）とし、減圧下にメタノ
ールを蒸留して濃縮物（２，３Ｑ１バンコマイシ７　（
Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）検定１３．３３９／　Ｑ）を得
た。

この溶液（２，ＩＱ）をｐＨ７，２に合わせ（水酸化ナ
トリウム）、流速１．５１２／　ｈ　チアンパーライト
ＸＡＤ７樹脂カラム（直径４．５ｃｍＸ　ｌｏＯｃｍ）
上へ流し込んだ。カラムを水（３α）で洗浄し、水／プ
ロパンー１−オール／Ｎ塩酸（７：　２　：　１）で溶
離させ、最初の溶出液（２Ｑ）を捨てた後にバンコマイ
シン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）を単一画分（１，７５
＋２）中に採集した。富抗生物質溶出液を水酸化すｌ・
リウムでｐＨ５に調節し、減圧下で蒸留してプロパツー
ルを除去し、体積を１５００ｍＱとした（パンコマイシ
７　（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）検定１７．１ｇ／＋２）
。

濃縮溶出液（９００ｍ１２）試料を塩酸（６Ｎ）でｐＨ
２，５とし、撹拌しながらアセトニトリル（８，１１２
）中に注ぎ入れた。１８°Ｃで１８時間放置後、生成物
を濾過して採集し、アセトニトリルおよびジエチルエー
テルで洗浄し、風乾してバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍ
ｙｃｉｎ）塩酸塩（バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ
　ｉｎ）検定０．８７５１？／ｇ）を得た。

組成バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）塩酸塩（
５，０９）を水（５０＋ｎＱ）に溶解し、水（５０ｍ（
１）中イミダゾール（１０ｇ）の添加の間撹拌した。初
期の沈澱を形成したがこれは２番目の白色沈澱が生じる
と迅速に溶解した。これを濾過して採取し、風乾して約
６ｇの白色結晶を得た（　ＨＰＬＣ検定：イミダゾール
１０モル：バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）　
１モル）。結晶をアセトン（４×２５ｍ＋２）およびジ
エチルエーテル（２５ｍＱ）で洗浄し、真空下に乾燥し
、白色結晶を得た（　４．５ｇ、イミダゾール１モル：
バンコマイシン（Ｖａｎｃｏ−ｍｙｃｉｎ）　１モル◇
バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）検定０．９６
ｇ／ｇ）。

バンコマイシン／イミダゾール結晶（０，５９）を、ｐ
Ｈ２，０となるまで塩酸（６Ｎ）を添加することにより
水（２，５ｍ（２）に溶解し、溶液をエチルアルコール
（２５＋１１）に添加した。０°０２時間後、沈澱を濾
過して集め、ジエチルエーテル（５ｔＩ２）で洗浄し、
真空下に乾燥し、バンコマイシン（Ｖａｎｃｏ−ｍｙｃ
ｉｎ）塩酸塩（０，４４ｇ、バンコマイシン（Ｖａｎ−
ｃｏｍｙｃ　ｉｎ）検定１．０４９／ｇ）を得た。

実施例　２ 実施例１に記載の採集発酵液（３，０４）を水酸化ナト
リウム（６Ｎ）でｐＨ７，４をｐＨ９，０とし、ジカラ
゛イト１２．５Ｘ　１．２５ｃｍの濾過床上で濾過し、
濾過床を水で洗浄した。濾液を塩酸（６Ｎ）でｐＨ７，
２とした。

樹脂５１１２　（ＫａｓＬｅｌ、　１００ｍ１２、内径
２０ｍｍ）のカラムをメタノール性アルカリおよび酸に
よる洗浄および中性になるまでの水による洗浄により、
調製した。濾過された発酵液を２００ｍＱ／　ｈで少し
ずつカラムに流し込み、次に水（１７５１ｎ０．）を流
し、メタノール／水／Ｎ塩酸（５：　４　：　１）でバ
ンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）　’ｒ、　溶離
サセｆこ。

生活性分は１つのバンドとして採集した（１００ｍ（１
゜９．１６５ｍｇ／　ｍＱバンコマイシン（Ｖａｎｃｏ
ｍｙｃ　１ｎ））。

合わせた活性画分（９６ｍ＋２）を水酸化ナトリウム（
６Ｎ）でｐＨ５とし、減圧下で蒸留してメタノールを除
いた。水性残存物を水で５０ｍＱにまで再調節した（バ
ンコマイシン（ＶａｎｃｏＢｃ　ｉｎ）検定１６．９＋
！９／　ｍＱ）。

水中のイミダゾールの溶液（水５ｍＱ中５９）を濃縮液
（４８ｍＱ）に添加し、溶液に本来の結晶を結晶種とし
て入れ、２〜４°Ｃで撹拌した。１８時間後に濾過して
結晶゛を採集し、５％イミダゾール含有水の少量で洗浄
し、風乾した。結晶をアセトン（４Ｘ　５　ｍｆｆ）で
洗浄し、白色の残存物を風乾してバンクマイシン（Ｖａ
ｎｃｏｍｙｃｉｎ）　：イミダゾール複合化合物（ＨＰ
ＬＣでほぼｌ　：　１．６４１．２ｍｇバンコマイシン
（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）　）を得た。

実施例１の記載のようにしてバンコマイシン（Ｖａｎｃ
ｏｍｙｃ　ｉｎ）　／イミダゾール結晶を処理してイミ
ダゾールを除き、バンコマイシン（ｖａｎｃｏ−ｍｙｃ
ｉｎ）塩酸塩を得た。

実施例　３ バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）塩酸塩（「パ
ンコシン（Ｖａｎｃｏｃｉｎ）　Ｊ　、Ｅｌｉ　Ｌｉ１
ｌｙ、　１００ｍ９）を水（１ｍａ）に溶解し、水（ｌ
　ＩＩＱ）中イミダゾール（２００Ｂ）の溶液を添加し
た。直後に生じる重質の白い沈澱は振盪すると溶解し、
透明な溶液から徐々にバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙ
ｃ　ｉｎ）イミダゾール複合化合物の白色結晶が形成し
た。

環境温度で１５分後・、結晶を遠心分離により採集し、
少量の水性イミダゾール溶液（０，５ｍＬ　１０％）で
洗浄し、遠心分離し、デカンテーションし、次に真空下
に乾燥して白色結晶（１４５ｇ）を得た。パンコマイン
ン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ）検定約７０％、ＨＰＬＣ
検定イミダゾールｌＯモル：バンコマイシン（Ｖａｎｃ
ｏｍｙｃｉｎ）　１モル。

実施例　４ バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）塩酸塩（「パ
ンコシン（Ｖａｎｃｏｃｉｎ）　Ｊ　、Ｅｌｉ　Ｌｉ１
ｌｙ、　１００ｍｇ）を水（１＋Ｊ）に溶解し、水（ｌ
　ｍＱ）中Ｎ−メチルイミダゾール（０，２ｍ１２．３
２６ｍｇ）を添加した。

最初の沈澱は溶解し、白色結晶沈澱が残つＩ；。

環境温度で３０分後、生成物を遠心分離により採取し、
少量のＮ−メチルイミダゾール溶液で洗浄し、遠心分離
し、デカンテーションし、真空下で乾燥して白色結晶（
ｌＯＬｍｇ）を得た。バンコマイシン（Ｖａ、ｎｃｏｍ
ｙｃ　ｉｎ）検定約６５％、ＨＰＬＣ検定Ｎ検定子ルイ
ミダゾール：バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃ　ｉｎ
）約１０：１゜特許出願人　　グラクツ・グループ・リ
ミテッド外２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）不純物を含むバンコマイシン溶液をイミダゾールと
   接触させる段階およびこれにより生成したバンコマイシ
   ンイミダゾール沈澱を回収する段階を包含する上記溶液
   からのバンコマイシンの分離方法。 ２）バンコマイシン溶液が水性の溶液である請求項１記
   載の方法。 ３）水性の溶液が水中の溶液である請求項２記載の方法
   。 ４）バンコマイシン溶液が３〜８の範囲のｐＨを有する
   請求項１記載の方法。 ５）バンコマイシン溶液が４〜６の範囲のｐＨを有する
   請求項４記載の方法。 ６）バンコマイシン溶液が約５のｐＨを有する請求項５
   記載の方法。 ７）イミダゾールが水溶性イミダゾールである請求項１
   記載の方法。 ８）イミダゾールがイミダゾールまたはＮ−メチルイミ
   ダゾールである請求項７記載の方法。 ９）バンコマイシンがバンコマイシン（Ｖａｎｃｏ−ｍ
   ｙｃｉｎ）である請求項１記載の方法。 １０）バンコマイシンイミダゾール複合化合物の回収後
   、酸性化されている水に溶解すること、およびこれに対
   する非溶媒の添加によりバンコマイシンを沈澱させるこ
   とにより、そこからバンコマイシンを分離する請求項１
   記載の方法。 １１）塩酸の添加により水を酸性化させておく請求項１
   ０記載の方法。 １２）下記段階： （１）Ｎｏｃａｒｄｉａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓのバンコ
   マイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）産生株より得た発酵
   培養液を濾過すること、および、濾液を採集するこ と； （２）非官能性または中間極性の合成重合体樹脂に濾液
   を接触させてバンコマイシン （Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）を吸収すること； （３）バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）を樹脂
   から溶離させること； （４）溶離したバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ
   ）をイミダゾールと接触させること、および、 これにより得られた沈澱バンコマイシン （Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）イミダゾール複合化合物を回
   収すること； （５）沈澱複合化合物からバンコマイシン （Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）を回収すること、を包含する
   バンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）の調製方法。 １３）合成重合体樹脂がアクリルエステル樹脂またはス
   チレンジビニルベンゼン樹脂である請求項１２記載の方
   法。 １４）段階（３）の溶離液が酸含有水性アルコールであ
   る請求項１２記載の方法。 １５）段階（４）のイミダゾールがイミダゾールまたは
   Ｎ−メチルイミダゾールである請求項１２記載の方法。 １６）バンコマイシンとイミダゾールの複合化合物。 １７）イミダゾールがイミダゾールまたはＮ−メチルイ
   ミダゾールである請求項１６記載の複合化合物。 １８）バンコマイシンがバンコマイシン（Ｖａｎｃｏ−
   ｍｙｃｉｎ）である請求項１７記載の複合化合物。 １９）モル比１：１でバンコマイシン（Ｖａｎｃｏｍｙ
   −ｃｉｎ）とイミダゾールを含有する請求項１８記載の
   複合化合物。 ２０）結晶形態である請求項１９記載の複合化合物。