JPH02504074A - 新規分光蛍光測定法およびその方法にとって価値ある化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 新規分光蛍光測定法およびその方法に とって価値ある化合物 発明の分野 本発明は蛍光性プローブにより特異的に標識されうる構造（標的構造）を検出す るのに２種またはそれ以上の蛍光性プローブを使用する新規な分光蛍光測定法を 提供するものである。この方法はよく知られた多重標識の概念に該当する。本発 明はまた分光蛍光測定法においてプローブとして直接に使用できるかもしくはグ ローブの合成用中間体として使用できる新規化合物をも提供するものである。こ れら化合物はまｔ；他の用途をも有しうる。 これら新規化合物にはキレート形成構造またはそのエステル、塩、およびキレー ト形成性へテロ原子の１つまたはそれ以上がキレート体に変換されているような そのキレート体が包含される。 時間−分解性蛍光測定はパルス光線励起後に生ずる発光の寿命をある波長で監視 する蛍光法である。時間−分解性蛍光の利点を利用しうるには、標識がバックグ ラウンドシグナルを生ずる成分の蛍光寿命よりかなり長い蛍光寿命を有する発蛍 光団でなければならない。ユーロピウムのようなある種のランクニドキレートの 蛍光半減期は慣用の蛍光標識のそれより５〜６単位の規模で長い。 ランクニド蛍光の崩壊時間および強度はその金属をキレートする配位子の構造、 およびその周囲の物理的環境の如何に非常に左右される。ランタニドキレートは すでに種々の生物学的アッセイに広く応用されている。しかしながらこれまでで 唯一の商業的方法においては、蛍光シグナルを発生させるのに２段階操作が用い られる。これらの方法はランタニドキレートで標識された反応体の生物特異的な アフィニティ反応、続く金属イオンの放出および新たな強力な蛍光性キレートの 形成からなる（Ｄａｋｕｂｕ等、　Ｃｌ１ｎ−Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ａｎａｌ、　 １４．７１〜］０１　（１９８４）ａｎｄ　Ｌ６ｖｇｒｅｎ等、　　Ｉｎ：　Ａ ｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ　Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ、　Ｅｄ：ＣＯ口ｉｎｓ、　 Ｗ、Ｐ、、　Ｊｏｈｎ　１ＨＩｅｙ　＆　５ｏｎｓ　Ｌｔｄ、　（１９８５）　 ２０３〜１７）。これは良好な吸収およびエネルギー転移性質、強いキレート形 成容量および同じ配列子に対して標識されｔ；分子と強度な共有結合を形成しう る能力を組み合わせることの困難さにより説明されうる。 現在存在する免疫学的またはハイブリッド形成アンセイの大部分は固形支持体上 での反応を利用するが、技術的目的には均質な溶液中における蛍光を検出するこ とが好ましい。それゆえ、このように蛍光性マーカーはとにかく固形マトリック スから放出されねばならないので前記２段階系は広範に応用できよう。蛍光性ラ ンタニドキレートは非常に有望な標識と認められている。イムノアッセイにおい てマーカーとして使用された場合、それらはｌ目Ｉに通常水されると少くとも同 じレベルの感度で検出できよう。これは、もし適正に実現されたならば、今まで 伝統的な蛍光標識が用いられてきた領域でそれらをマーカーとして用いる可能性 を開くものであろう。かかる応用分野で可能な候補をあげれば次のとおりである 。 １）ホモジニアス蛍光測定イムノアッセイ２）核酸整理配列 ３）蛍光顕微鏡 ４）核酸検出用ホモジニアス／＼イブリダイゼーションアツセイ ５）血球計算 ６）核酸およびタンパク質フィンガープリンティング化学的に異なる配位子かも なるこれ迄記載されｌ；蛍光キレートは多くの点で相異なるが、大抵の場合それ らの蛍光崩壊時間は時間−分解蛍光アッセイにそれらを使用できるに充分に長い 。高い安定性定数および強い蛍光、すなわち高い量子収率が蛍光キレートにとっ て望ましいことは通常認識されているが、しばしば論議される他のいくつかの性 質はなお論議すべき事項である。それらのうちの一つは発せられる光がその標識 を包囲する環境の如何によることである。我々の意見ではこれは否定的な予測で きない作用と見るべきでなく、蛍光キレートを新規な領域、例えば種々の種類の ホモジニアスアツセイの分野で使用できるものとなす新しい性質と見るべきであ る。研究の大部分がより蛍光性が高くかつより安定なキレートの開発に集中され てきていることは文献から明らかである。ある種のキレートの励起対発光の局面 が調査される場合、彼らの唯一の目的は比較的長波長の最大励起を有し一方では 同時に希土類金属に典型的な大きなストークスシフトを保存するキレートを開発 することであった。我々の知るところでは、励起スペクトルもしくは発光スペク トルが異なる点で蛍光性質が実質的に異なるが、しかし一つの同じ金属の誘導体 である一群のキレートの開発を目的とする系統的な研究に関する報告は存在しな い。もし励起スペクトルの形状が実質的に相互に一致しないならば、上記のこと はかかるキレートを同じ実験で多重標識として同時に使用する可能性をもたらす ものであろう。伝統的な有機蛍光マーカーと用いる多重標識法はよく確立された 方法である。普通に受容されている欠点は、用いられている標識の蛍光崩壊速度 が比較的速やかであり、従って実質的にバンクグランド問題を生ずることである 。ある種の希土類金属の崩壊時間の長い蛍光キレートを使用すると、単にバンク グランドシグナルが崩壊した後にマーカー蛍光を効果的に測定できるゆえにこの 問題を劇的に減少させうろことは早期に示されている。ある実験にとっては、標 識された成分を測定する前にそれを分離することが必要または好ましくそして全 成分の多重標識が選択された方法である場合は、それらの物理化学的性質におけ る相異度が最小限である標識を用いることが好都合である。例えば、上の要件− 常に実現容易というわけではない−は核酸整理配列を非同位元素的手段により行 う場合に存在する困難の主ｔこるものであった（　１ｏｏｄ他、１９８６．　Ｎ ａｔｕｒｅ　６７４−６７９）。化学的構造に関して実質的に相異しないが、巾 広い励起または／および発光波長スペクトルを有する蛍光マーカ一群が明らかに 必要とされている。しばしば充分には強調されないもう一つの問題点は、発光さ れた蛍光光線が、発蛍光団を生物学的物質に結合せしめるために発蛍光団に連結 された官能性反応基の種類の如何により左右されることである。以前に、４，７ −ジフェニル−１，１０−フェナントロリン−２，９−ジカルボン酸のユーロピ ウムキレート中の側基フェニル環系に１個のニトロ基を導入すると蛍光が６０％ 減少することは示されている（ヨーロンツク特許出願（ＥＰ−Ａ）１７１．９７ ８）。このニトロ基を還元するとアミノ基の導入をもたらすこととなり、このア ミノ基はキレートの残りとｊｒ型結合によりその電子を共有するものであって蛍 光をさらに大きく減少させ、事実未置換化合物の蛍光の０．２７％しか保持され ていない。近年、置換４−フェニルピリジンを発色団として用いるもう一つの種 類の蛍光キレートが発表されている（　ＥＰ−Ａ−１９５、４１３）。これら化 合物の他のすべての蛍光キレートに対する優越性が特許請求されておりそして何 等蛍光データは提示されていないので、我々はそれらの値を実際に検査しようと 決を有する化合物を合成し、そしてそれらの蛍光特性を測定した。ここでも我々 は基本構造（１）が（ＩＩ）および（Ｉ［Ｉ）に変換されると蛍光光線の強度が 減少するという同じ傾向を見比した。特に、Ｅｕ”−？レートの形態の化合物（ ＩＩ）は（Ｉ）の蛍光の８％そして化合物（ＩＩ＋）は１．８％しか示さない。 適当なＴｂ３＋キレートではさらに大きな相異が注目された。この場合キレート 化された化合物（Ｉ［）は（Ｔ）のテルビウムキレートの蛍光に比較してたった ０、００６％の蛍光しか示さない。それゆえ、好首尾に用いられる反応基は、そ れが可能ならば、分子の残余とのその電子的相互作用が無視されうるような様式 でその反応基が発色団から−好ましくは脂肪族炭素鎖によって一分離される位置 に常に結合されるべきであることは明白である。もしこれが正しくなされるなら ば、簡単な非反応性のキレ−ト（何ら付加的な反応基を有しない）で観察される 蛍光特性はかかる反応基がキレートに結合されているかもしくはかくの如く官能 化されたキレートが生物学的物質を結合する場合に本質的に同じなままで残存す るであろうことが保証されよう、幾つかの芳香族構造物が光吸収単位すなわち発 色団として作用することが提案されている。 すでに前記したように（ＥＰ−Ａ−１７１，９７８）フェナントロリンは示唆さ れている。クリブタートの発色部分であるフェナントロリンはフランス特許出願 （ＦＲ−Ａ）−２，５７０，７０３にも提示されている。他の発色ユニット例え ば官能化されたピリジン（ＥＰ−Ａ−１９５，４１３、ヨーロッパ特許（ＥＰ） −２０３，０４７）、置換７ユノール（ＥＰ−Ａ−６８，８７５）　、未置換チ ルピリジン（Ｊ、　Ａｍ、、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　８６　（２３）、　５１ １７−５１２５．１９６４）　、インドール−およびベンジル−ＥＤＴＡ　ＣＰ ｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄＰｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇ）’　３９　（６ ）、　７６３〜７６９．１９８４）およびｐ−アミノサリチル酸（Ａｎａｌｙｓ ｔ　　］、０９．　１４４９〜１４５０．　１９８４）のようなものも示唆され ている。ビピリジンは優れた発色団であることが知られているがしかしそれ自身 は非常にキレート化剤としては劣る。クリプタートキレート形成系中（ＦＲ−Ａ −２，５７０，７０３）のみならずその他のキレート形成系ｃ　ＷＯ−Ａ−８７ ／　０４５２３）中に１個またはそれ以上のビピリジンを導入する試みがなされ ている。 本発明に密接に関連するのはビピリジンの誘導体である酸性コンブレクソン（ｃ ｏ＋ｎｐｌｅｘｏｎｅ）の記載である。Ｃｈｅｎ＋。 がらこの会誌ｌ；はビピリジンシリーズで最も簡単な配位子しか記載されておら ず、蛍光性希土類金属キレートは何ら記載されていない。願えてこの会誌はかか る配位子を何らか他の分子に結合させる可能性について何も示唆していない。 発明の記述 本発明の主なる観点の一つは検体中における特定の化学構造の存在に関する分光 蛍光測定アッセイ用の改良された多重標識法である。本発明のこの観点の特徴は 少くとも２種の蛍光性ランタニドキレートを同時にプローブとして使用すること である。用いられるプローブはそれらの最大励起および／または発光波長が異な るのでそれらを独立に測定できる。異なる配位子を有するキレートは励起波長が 異なるであろうし、そして異なる希土類金属を有するキレートは発光波長が異な るであろう。キレート形成されたランタニドはＥｕ”、Ｔｂ”、Ｓｍ”まｌ；は ｐｙ３＋である。本発明のこの観点は１個のプローブを用いる本明細書中に前記 されたと同じ一般的な種類の分光蛍光測定技術に適用できる。ヘテロジニアスハ イブリダイゼーションアツセイおよびヘテロジニアスイムノアツセイも包含され る。いくつかの方法では過剰のグローブ除去を必要とするが、それ以外のものは そうではない（例えばホモジニアス法）。一般に、適用可能なアッセイは２段階 、すなわち（１）標的構造に特異的に結合する蛍光グローブにより該構造を標識 し、そして（２）そのプローブからの蛍光を測定する、ことからなる。検出され る蛍光パターンは標的構造の存在と関連していよう。この２段階の順序は種々の 種類のイムノアッセイの場合におけるように分離工程および／またはさらなる反 応体の添加のような他の工程が間に入ってきてもよい。 本発明の化合物は式（ｒＶ） 鋭化合物 弐■ に示される共通構造を有しておりそして通常のその類似体、例えば酸、エステル 、塩、および１種またはそれ以上のキレート形成性へテロ原子を含むキレート体 をも包含する。 本発明化合物のうち、適当な希土類金属キレートのペアにおいてその一方をもう 一方の存在下に選択的に励起させうるに充分にそれらの励起スペクトルが相異す るであろうベアのいくつかを選択することができる。ここに記載されている化合 物の大部分は、既に記載されていて種々に適用されている蛍光キレートのそれに 匹敵する比較的高い蛍光を示している。その上、ビピリジン、ビビリミジンまた は密接に関連する系の誘導体であるここに記載されたキレートのすべては分子量 、疎水性または電気泳動移動度のようなそれらの生物物理学的性質に関してほん の少ししか相異せず、このことはそれらが多重標識を包含する実験に用いられる 場合には決定的に重要である。 本発明は種々の生物学的に活性な分子に結合させるのに必要な特徴である、反応 性官能基のかかるキレートへの結合法を提供するものである。さらに、この反応 性官能基はそれが活性形において生物学的分子に結合する前または後のいずれに おいてもキレートの蛍光が変化しないような様式でキレートに連結される。我々 はこのことを２つの官能基すなわち反応性の基とキレート形成性発色団部分とを 相互に分離する脂肪族鎖を介して、または脂肪族部分および芳香族部分の両方か らなるリンカ−系を介して分子のキレート形成性発色団部分中に反応性の基を導 入することにより達成した。この解決法は光線吸収性芳香族系に連結された置換 基によりかなりの変化が惹起されうる点にかんがみて、もしピリジンまたはビビ リミジン部分の電子状態が完全無欠に保持されるならば唯一の受容されうる方法 であった。また、キレート形成部分の蛍光が反応性部分が結合されて存在するこ とは無関係であるという特徴はもう一つの長所である。すなわちそのことにより 所定のキレートのマーカーとしての有用性が純粋ｌこその基本構造（官能性反応 基を有しないキレート）の物理化学的性質に基づいて予測可能となりうるからで ある。 式（ＴＶ）において、ｎは整数０，１または２、好ましくは１であり、そして− −−−は基Ｘ−Ｙが親化合物の任意の場所の水素と置換する置換基であることを 明示する（例えばｘ−ｙがＲ３、Ｒ２、Ｒ３、ＲイＲ，およびＲ，）任意のもツ ノ上にある置換基であるかまたは任意のものと置換する置換基である場合も含む ）。ｎが０である場合は本発明化合物は式（ＩＶ）の親化合物である。 Ｂはｉ）複素環の間の電子を非局在化させ、そしてｉｊ）同時に２個の示されて いる環窒素をキレート化された金属イオンに配位させて５−または６−員環を形 成させうる架橋である。これらの基準を満たす架橋基の例には、直接結合、−０ −１−ＮＨ−または−ＣＯ−があげられる。我々の実験データでは、直接結合お よび−Ｃ〇−が好ましい。 Ａ３、Ａ３、Ａ１、ＡいＡ、およびＡ、のすべては、我々の好ましい化合物であ る２、２′−ビピリジンまたは２，２′−ケトビピリジン構造を生ずる炭素原子 であることができる。Ａ１、Ａ３、］５、ＡいＡ、およびＡ、はまた１個の窒素 原子を表わすこともできる。好ましい態様においては％　Ａｌ、Ａ、、Ａ、の１ 個のみおよび／またはＡいＡ、、Ａ、の１個のみ、例えばＡ、もしくはＡ、およ び／またはＡ、もしくはＡ、が窒素原子である。Ｂが直接結合である場合、これ は２−ビリジノー２′−ピリミジンまたは２，２′−ビビリミジンま！；は相当 するビビリミシン化合物の構造に相当する。２．２′−ビビリミシンは通常対称 的であるがしかし我々が用いる合成法では非対称、ビビリミジンを排除するもの ではない、ここにあげた窒素原子は遊離で存在しうるしまたはＮ−オキサイドに 酸化されることもできる。 Ｒ１−Ｒ２のそれぞれはそれらが結合しているＡが窒素である場合には存在せず 、そして各Ａが炭素である場合Ｒ。 〜Ｒ５は下記のものから選択される、すなわちａ）水素、 ｂ）直鎖、分校状または環状であることができ、そして場合によりキレート形成 に関与しない付加的な構造例えば芳香環系、エーテル、チオエーテル、エステル 、アミド、アミノ（第一、第二または第三）、カルボキシ、ハロ、シアン等、お よびヘテロ原子を有する他の構造を含有することができる炭化水素基例えばアル キル、アルケニル、アルキニルおよび芳香族基（アリール）、 Ｃ）　シアノ、ハロおよびニトロ、およびｄ）　カルボン際（ＣＯＯＨ）、アミ ド（ＣＯＮＨ２）、アミノ（Ｎ）Ｉｚ）、ヒドロキシ（Ｏ）］）および、これら ４種の基において水素が前記ｂ）項記載の炭化水素基で置換されたもの、および さらにアミンおよびヒドロキシ基の場合には水素がアシル基ＲＣＯ（式中Ｒは前 記ｂ）項記載の炭化水素基である）で置換されていることもできる置換形。 アルキルの例をあげればＩ２債未満の炭素原子を有する低級アルキルである。 芳香族基の例をあげればフェニル、キノリル、ナフチル、ピリジル、ピリミジル 等でこれらすべては付加的な置換基をも含有しうる。式（ＩＶ）において、１個 まｌ；は２個のへテロ芳香環に直接結合するかまたはカルボニルもしくは窒素原 子を介して結合したアルケニル、アルキニルまたは芳香族系を選択することによ り、共役電子系が３個、４個もしくはそれ以上の芳香環または炭素原子に拡大さ れうる。 中心Ｊ二ある芳香族系中の任意の位置にある窒素は酸化されｌ；形態、例えばＮ −オキサイドとしても存在できる。 ２およびＺ′は同一または相異なるキレート形成性構造を表わし、そのそれぞれ は遊離電子対を有する少くとも１個、好ましくは２または３個以上のへテロ原子 を含有していてこれらへテロ原子は前掲の複素環式芳香環の窒素原子と一緒にな って金属イオンをキレート化しうるように位置している。効果的なキレート形成 性へテロ原子の例をあげればアミノ窒素原子（第一、第二および第三アミン）、 負に荷電した酸素原子例えばカルボキシレートアニオン（Ｃｏｏ−）、エノラー トアニオン（Ｃ＝Ｃ−０−）、ホスヘートまたはホスホネートにおける酸素原子 である。もう一つの良好なキレート形成性構造はヒドロキサメート基（ＣＯＮＯ Ｈ）である。効果的なキレート形成にとってはまた２個のキレート形成性へテロ 原子を連結する架橋に対しである種の立体要件が課せられる。これらのへテロ原 子は相互から２原子の距離をおいていなければならないが、３Ｗ子の距離も受容 されうる。大抵の場合、架橋は１．２または３個の脂肪族炭素原子を含有する。 特に重要な２および２′構造ではＮ−ビスカルボキシメチルおよびＮ−ビスカル ボキシエチルアミノ基および類似のホスヘート（−Ｎ（−ＣＩ２−０−ＰＯニー ）２）およびホスホネート（−Ｎ（−Ｃ）１２−ＰＯ’、−）２）があげられう る。キレ−ト形成性へテロ原子（ＮおよびＯ）は相当するプロトン化された形態 で存在できモしてＯの場合にはまたエステル形例えば低級アルキル（Ｃ＋〜Ｃａ ）エステルまたはベンジルエステルとしても存在しうる。分光蛍光測定上の配慮 から２および２′はＥｕ”、Ｔｂ”＋ｐｙ　！　’）または５Ｉ１１３＋にキレ ートするのが好ましい。 ｘ−Ｙは不活性有機基であってここでＸは不活性で安定な架橋でありモしてＹは （ａ）官能基まｔ；は（ｂ）親化合物に共有結合された後も式（ＴＶ）（ｎ−１ または２）の化合物中に保持される性質を有する有機化合物（Ｙ′）の残基、を 表わす。前記「不活性」なる用語はこの形容詞で特徴づけられる基または架橋が 金属イオンのキレート化に関与するヘテロ原子から４ｉ子距離をおいて近接した キレート形成効果のあるヘテロ原子を何ら有しないことを意味する。寅際に寅施 する際このことは４個の原子が通常４個の炭素原子であることを意味する。「安 定な」なる用語は本発明化合物が用いられた場合に架橋Ｘが変化しない、例えば その架橋が容易に加水分解を受けないことを意味する。式（ＩＶ）においてｘ− Ｙは２および／またはＺ′基例えばＮ−ビスカルボキシメチル基中の水素と置換 下る置換基として存在するのが好ましい。ｘ−ＹはまたＲ、、Ｒ，、Ｒ１、Ｒい Ｒ１およびＲ５のいずれか上の置換基としてまたはいずれかと置換する基として 存在することもでき、モしてＲの１個がｘ−Ｙで置換されているのが好ましい。 式（ＩＶ）の複素環に直接結合している場合は架橋Ｘが脂肪族炭素好ましくはメ チレン基（−ＣＨ，−）を架橋鎖中に有していなければならないという要件に加 え、Ｘまた下記の群、すなわち−ＮＲ−（第二および第三アミン）、−ＣＯＮＲ −および−ＮＲＣＯ−（置換アミド）、　−５−５−（脂肪族ジスルフインド） 　、　−Ｓ−（脂肪族チオエーテル）　、−０−（エーテル）、−ＣＯＯ−およ び−ｏｏｃ−ｃエステル”）　、−Ｎ−Ｎ−（ジアザ）および１〜１２個の炭素 原子を有する直鎖、分校状または環状でありうる純粋な炭化水素鎖、のうちから 選択される少くとも１個の構造要素をも含有しうる。この炭素鎖は純粋に脂肪族 であるかまたは純粋に芳香族（フェニル、ナフチル、キノリル、ピリジルおよび ビピリジルを含む）であることができるが、両方の種類の構造物例えばアルキル アリール、および前記キレート形成に関与しない他の不活性官能基をも有するこ とができる。前記置換アミド中の記号Ｒは水素が好ましいが、アルキル例えば５ より少ない炭素原子を有するアルキルであることもできる。 同じことは−ＮＲ−中のＲにもあてはまる。 Ｙは２種の主なるカテゴリーから選択できる（下記ＡおよびＢ）。 Ａ）　　Ｙは式（ＩＶＸｎ　−０）の化合物中に実質的に保持されるある種の性 質を有する有機化合物（Ｙ′）の残基でありうる。この化合物（Ｙ′）は生物学 的に特異的なアフイニチイ反応に関与しうる生物学的に活性な分子、例えば抗原 （ハブテン）および相同の抗体活性成分、相補性根ＩＩ（ＲＮＡ、　ＤＮＡ）、 レクチンおよび炭水化物構造物、タンパク質ＡおよびＩｇＧ等であることができ る。かかる種類の生物学的に活性な分子はしばしば標的物質（標的分子）と呼ば れる。これらは通常多様な種類の化合物に接合せしめうる官能基を含有するよう 誘導体形成されるかまたは容易に誘導体形成させることができる。 この化合物（Ｙ′）はまたその官能基の一つを介して架橋Ｘに結合された多重官 能性有機化合物であってその残存官能基の少くとも１個がさらに誘導体形成でき るよう遊離のままとなっている化合物であることもできる。 Ｂ）　　Ｙは有機化合物（Ｙ′）の官能基Ａと化学的に反応してＹ′と式（ＩＶ ）の化合物との間に共有結合を形成しうるように選択された官能基であることが できる。Ｙの選択はＡの如何によるものでありそしてその逆も言えるが、しかし 当業者が相互に反応性の基を適正に選択しうると考えられる。ＹおよびＡは求電 子基および求核基から選択されうる。もしそれらが一対の求電子基または一対の 求核基である場合は例えば（ａ）結合を形成するのに酸化的結合を用いる（例え ば−ＳＨ＋Ｈ５−→−５−Ｓ−）、または（ｂ）対の基の一方を反対の種類の基 に化学的に変換することも可能である。後者の場合の例は二官能性カップリング 剤（活性化剤とも呼ばれる）を用いる活性化である。Ｙが求核基でＡが求電子基 であるかまたはその逆である場合、これら２種の基は通常何ら予め活性化するこ となく相互に反応できる。大抵の求核基は電子欠乏原子（求電子基）と反応しう る電子対を有するペテロ原子を含有する。 適当な官能基の例をあげればインチオシアナト、ブロモアセトアミド、ヨードア セトアミド、スクシンアミド、ピリジルジチオ、メルカプト、カルボキシルおよ びその活性エステル（例えばＮ−ヒドロキシスクシンイミドまたはｐ−ニトロフ ェニル）、ヒドロキシル、アルデヒド、アミン、ジアゾニウム、トシル、メジチ リル、トレキシル（ｔｒｅｘｙｌ）、ホスホジエステルまたはホスホトリエステ ルである。それ以外の官能基は当業者に知られている。 本発明による化合物においては、あげられる全ての基が共存しうろことが肝要で ある。しかしながら、反応性の基Ｙは必ずしも本発明のキレート形と共存する必 要はない。ある種の目的にとっては、その分子のキレート形成部分は例えば、エ ステルの形態で一時的に保護してその保護されｔ；配位子が標的分子に結合でき るようにし、そして脱保護に最終的に所望の標識された生成物を形成できるよう にしてもよい。保護基は知られた原理に従い選択される（例えばＰｒｏｔｅｃｔ ｉｖｅＧｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ；　Ｇｒｅｅ ｎｅ　ＴＮ；　ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ　Ｉｎｃ；　ＬＩＳＡ　（１ ９８１）参照）。基が選択される場合ｌ二考慮Ｉこ入れられるべきファクターは とりわけ、Ｙと反応すべき化合物の安定性、Ｙの反応性およびＹと意図する化合 物との反応で生成する構造の種類である。 本発明の観点の一つには、Ｙとの反応性を有する少くきも１個の官能基Ａを有す る有機化合物（Ｙ′）に鋭化合物の蛍光構造を共有結合させることへの式（ＩＶ ）（ｎ−１）の化合物の使用が包含される。共有結合反応後に、そして前記定義 された酸、エステルまたは塩形態が用いられる場合は、生成物がそれ自体知られ て方法で適当なキレートに変換される。結合の反応条件は官能基（Ｙ）および（ Ａ、）の対　Ｙ　／および用いられる式（ｍＶ）の化合物等の如何によるもので ありそしてそれ自体知られている。本発明のこの観点においてはＡ、〜ＡいＲ３ −ＲいＺ、Ｚ’、ＸＳＹ、ｎおよび一一一一は前記意味を有するが但しＹは官能 基のみでありモしてｎ−１である。 それ自体知られた保護基が結合を実施するのに時として必要とされる。前記教本 を参照されたい。 本発明はその記載の一部をなす添付請求の範囲において明確に限定されている。 ここで本発明を合成および多数の化合物の使用によって説明する。それらの構造 ならびにそれらを製造するための合成経路は５ｊｊ紙に式で示しである。所定の 名称と対応する構造式とが一致しない場合は、後者が優先される。 実施例　１　（スキームｌ　）　、　ｘ＝ｙ＝Ｈ６，６′−ジメチル−２，２′ −ビピリジン（１）Ｇ、Ｒ，Ｎｅｗｋｏｍｅ他、　Ｊ、ｌｎｏｒｇ、　Ｎｕｃｌ 、　Ｃｈｅｍ、、４３．１５２９−１５３１（１，９８１）参照 ６−ブロモ−２−メチルピリジンＣ４９，０ｇ、０．２８５モル）、ベンジルト リエチルアンモニウムクロライド（１１，６ｇ、０．０５０９モル）、蟻酸ナト リウム＜２５．７ｇ、０．４０８モル）、２０％Ｐｄ／Ｃ（１，７ｇ）、３２％ 水酸化ナトリウム（２９Ｄｆｆ）および水（８６ｍ＋２）を２４時間還流させた 。この混合物を枦遇しモして水相をメチレンクロライドで抽出した。溶媒を蒸発 させたのち生成物を蒸留した。 収率：５９％ ｍ−ｐ、　８２〜８３℃（文献８８〜８９°Ｃ）ＵＶ（エタノール中）　　：　 ２９Ｏｎ＋ｎ、　２３７ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣｆｆ５）　： 　２．６１（ｓ、　６Ｈ）　；　７．１１（６，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）　；　 ７．６４（ｔ、　２Ｈ，７，６Ｈｚ）　；　８．１８（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝７．６ Ｈｚ）実施例　２（スキーム２） ２−ブロモ−４−メチルピリミジン（２）Ｄ、Ｄ、Ｂｌｙ他、　Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃ ｈｅｍ、、２７．２９４５〜（１９６２）参照２−アミノ−４−メチルピリミジ ンＣ４０，Ｄｙ、０．３６７モル）、塩化ナトリウム（１８ｈ、１．７５モル） 、亜硝酸ナトリウム（６０，０ｇ、０．８７０モル）および水（１６０ｉ１２） を含有する混合物中に濃臭化水素酸１００ｍ１２をゆっくりと加えた。添加期間 中は温度を０℃より下に保った。−５°Ｃ〜＋５℃で４時間撹拌後温度を室温に 高めそしてこの混合物を濃水酸化ナトリウム溶液で中和した。生成物を水相から クロロホルムを用いて抽出した。溶媒を蒸発させたのち生成物を真空下に蒸留し た。 収率：２３％ ｂ、ｐ、　６９〜７０℃１０．６ｏ＋ｎＵＶ（エタノール中）　　：　２５５ｎ ｒｎ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱｓ）　：　２−５４（ｓ、　３Ｈ）　 ；　７．１７（ｄ、　ｉｌｌ、　Ｊ・５Ｈｚ）　；　８．４２（ｄ、　ＩＨ，５ Ｈｚ）実施例　３（スキーム２） ４．４′−ジメチル−２，２′−ビビリミジン（３）Ｍ、Ｔｉｅｃｃｏ他、　５ ｙｎｔｈｅｓｉｓ　７３６（１９８４）による塩化ニッケル六水和物（８，４ｈ 、３５．７ミリモル）およびトリフェニルホスフィン（３７，ｈｐ、１４３ミリ モル）をジメチルホルムアミド１８０πΩ中に５０℃で溶解させた。この溶液に 窒素を２０分間通じたのち２．３０ｇ（０，０３５２グラム原子）の亜鉛末を煎 えそしてこの混合物を１時間撹拌した。２−ブロモ−４−メチルピリミジン（２ ）　（６，２５ｇ、３６．１ミリモル）を加えそしてこの混合物を５０℃で３． ５時間保持した。 この混合物を希アンモニア溶液５００ｍＱ中に注入したのち有機物質をクロロホ ルムで抽出した。生成物をＩＮ塩酸を用いてクロロホルムから抽出した。塩酸溶 液をアルカリ性となしそし、てクロロホルムで抽出した。溶媒を蒸発させそして 生成物を７ラツシユクロマトグラフイーにより精製した。 収率：１２％ ＬＩＶ（エタノール）：２４８ｎｍ ’）ＩＮＭＲ（６０ＭＨｚ、ＣＤＣＱｓ）＋　２．７２（ｓ、６Ｈ）：　７．２ ８（ｄ、２Ｈ，Ｊ−５Ｈｚ）；　８．８６（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ）実施例　４ ５−ブロモ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（４）Ｇ、Ｒ，Ｎｅｗ ｋｏｍｅ他、　Ｊ、Ｉｎｏｒｇ、　Ｎｕｃｌ、　Ｃｈｅｍ、　４３．１５２９（ １９８１）ｌこよる ２、５−ジブロモ−６−メチルピリジン（１，２５ｇ、５．０ミリモル）、蟻酸 ナトリウム（０，５１ｇ、７．５ミリモル）、１０％Ｐｄ／Ｃ（３０ｍｇ）、ベ ンジルトリエチルアンモニウムクロライド（０，２０９，０，８８ミリモル）８ よび８％水酸化ナトリウム溶液（２，０ｍＱ）を２日間還流した。この混合物を 枦遇しモしテ水相をメチレンクロライドで抽出した。有機相を乾燥し、溶媒を蒸 発させそして生成物を７ラツシユクロマトグラフイーにより精製した（シリカ、 メチレンクロライドン。主生成物はモノブロモ置換化合物であった。 収率：３５％ ＵＶ（エタノール）　　：　２９６ｒ＋ｍ、　２５１ｎｍ、　２４５ｎｍ’ＨＮ ＭＲ（４００Ｍ）Ｉｚ、　ＣＤＣＬ）　：　２．６１（ｓ、　３Ｈ）　：　２． ７３（ｓ、　３Ｈ）　；７．１６（ｄ、　ＩＨ，Ｊ−７，６Ｈｚ）；　７．６７ （ｔ、　ＩＨ，７，６Ｈｚ）；　７．８８（ｄ。 １）！、　Ｊ＝８．５Ｈｚ）　；　８．１２（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□８．５Ｈｚ）　 ；　８．１９（ｄ、　ＩＨ，Ｊ−７，６Ｈｚ） 実施例　５（スキーム３） ３．３′−ジヒドロキシ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（５） Ｊ　、Ｒｅｂｅｋ他、　ｊ、Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ、　Ｃｈｅｍ、、１７．７４ ．９−７５１（１９８０）参照 ６−メチル−３−ヒドロキシピリジン（２３，９９，０，２１９モル）、二酸化 鉛（９８，３ｇ、０．４１１モル）およびトルエン（１１２）を合して５時間還 流した。この熱溶液を濾過して乾燥乾固させた。残留物をヘキサンと還流させそ して熱時濾過しだ。この溶液を蒸発乾固させて生成物を黄色粉末として得Ｉ；。 収率：９．３％ ＬＩＶ（エタノール）　　：　３５０ｎｍ、　２４６ｎ＋ｎ’ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、　ＣＤＣｆｆ、）　：　２．５２（ｓ、　６Ｈ）　；　７．１０（ｄ、 　２Ｈ，Ｊ＝８．２）！ｚ）　；　７．３１（ｄ、　２Ｂ、　Ｊ−８，２Ｈｚ） 実施例　６（スキーム３） ３．３′−ジベンゾイルオキシ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（ ６） ３．３′−ジヒドロキシ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（５８０ ，２２ｇ、１．０２ミリモル）をピリジン１２ｍＱ中に溶解させそしてベンゾイ ルクロライド（０，３０９，２，１３ミリモル）を加えた。室温で１，５時間撹 拌後クロロホルム１００πＱを加え、この溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液１ ００１！＋１２で抽出した。クロロホルム相を乾燥し蒸発乾固させた。生成物を シクロヘキサンから灰色粉末として結晶化させた。 収率：５１％ ＵＶ（エタノール）　　：　２７６ｎｍ、　２３２ｒ＋ｍ’ＨＮＭＲ（４００Ｍ Ｈｚ、　ＣＤＣら）　：　２．３３（ｓ、　６Ｈ）　；　７．１７（ｄ、　２Ｈ ，Ｊ・９１（ｚ）　；　７．４３（ｔ、　　４Ｈ，ｊ＝８Ｈｚ）　；　７．５８ （ｔ、　　２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）　；　７．６０（ｄ、　　２Ｈ，Ｊ＝９）１ｚ） ；　　８．０１（６，４Ｂ、　　Ｊ＝８Ｈｚ）実施例　７（スキーム４） ３．３′−ジカルボキシ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（７） Ｆ、Ｌ、Ｗｉｍｔｎｅｒ他、　Ｏｒｇ、　Ｐｒｅｐ、　Ｐｒｏｃｅｄ、　１５． ３６８（１９８３）による ネオタブロイン塩酸塩（２，５９，１２，１ミリモル）、水酸化ナトリウム（０ ，７６９）、過マンガン酸カリウム（４，５１ｇ）および水（６０＋ｘＯ）を２ ４時間還流させた。濾過後溶媒を半量となるまで蒸発させた。濃塩酸を用いてｐ Ｈ２ｊ：調整しそして活性炭幾分かを加えた。１０分漬水炭を枦去しそして生成 物ヲエタノールで沈澱させた。沈澱した粉末を濾過してエタノールから結晶化さ せた。 収率：２２％ ＵＶ（エタノール）　　：　２７０ｎｍ、　２２６ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨ ｚ、　ＤＭＳＯ）　＋　２．６０（ｓ、　６Ｈ）　：　７．５８（ｄ、　２Ｈ， Ｊ＝８．１Ｈｚ）；　８．３８（６，２Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）実施例　８（スキ ーム４） ３．３′−ビス（カルボニドキシ）　−６，６’−ジメチル−２，２′−ビピリ ジン（８） チオニルクロライド（０，５＋ｎ＋２）を乾燥エタノール１０ｍＱに加えた。１ ５分後、３．３’−ジカルボキシ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン （７４０ｍｇ、２．７ミリモル）を加え、この混合物を一夜還流させた。この混 合物を水中に注入しそしてこの溶液を炭酸水素ナトリウムで中和した。生成物を 酢酸エチルで抽出し、乾燥しそして蒸発させｌ；。 収率：１６％ ｔｊＶ（エタノール中）　　：　２７０ｎｍ、　２２７ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、　　ＣＤＣｌ２５）　　：　　ｌ　、０１（ｔ、　　６）１．　３　・ ７−０Ｈｚ　）：　　２−６３（ｓ、　６Ｂ）；４．０８（ｑ、　４Ｈ，Ｊ＝７ ．０Ｈｚ）　；７．２８（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝８．］Ｈｚ）　：　８．２８（ｃｌ 、　２Ｈ，Ｊ□８．１）１ｚ）実施例　９（スキーム５、Ｒ＝ＣｉＨｓ−ＣＨｓ −ＣＨ＝ＣＨ＝スチリル）５．６−シオキソー１，１０−ジフェニル−デカ−１ ，３，７，９−テトラエン（９） Ｐ、Ｋａｒｒｅｒ他、　Ｈｅ１ｖ、　Ｃｈｉｍ、　Ａｃｔａ−９２８＋　１１８ １−１１８４（１９４５）参照 ２．３−ブタンジオン（３０，０ｇ、０．３４８モル）、トランス桂皮アルデヒ ド（９２，０ｇ、０．６９６モル）、エタノール（１００ｒＡｆｆ）およびピペ リジン（２ｍＱ）の混合物を一夜還流させた。 ０℃に冷却後結晶した生成物を濾過し、冷エタノールで洗いそしてエタノールか ら再結晶した。 収率：２４％ ＵＶ（エタノール中）　　＝　３６７ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００１ＪＨｚ、　ＣＤ ＣＱ３）　＝　６−９３−７−０８　（ｒＱ、　６Ｈ）　；、　７−３４〜７． ４０（＋ｎ、　６Ｈ）　；　７．４９−７．５１（ｄｄ、　４Ｈ，Ｊ□１．５Ｈ ｚ　＆　８．０）１ｚ）；７．５８〜７．６５（ｍ、　２Ｈ） 実施例　１０（スキーム５） ６．６′−ジメチル−４，４′−ジスチリル−２，２′−ビピリジンＦ、Ｋｒ５ ｈｎｋｅ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、　］〜２４（１９７６）参照５．６−シオキ ソー１．１０−ジフェニルデカ−１，３，７，９−テトラエン（９０１５，７ｇ 、５０ミリモル）、アセトニルピリジニウムクロライド（１７，２ｇ、１００ミ リモル）、酢酸アンモニウム（１００ｇ）およびメタノール（５００＋＋＋１２ ）を２時間還流させた。冷却後生成物を濾過し、エタノールで洗いそしてジメチ ルホルムアミドから結晶化させた。 収率：１４％ ＩＪＶ（エタノール中）　　：　３＋、ｉｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨ２，ＣＤＣ Ｌ）　：　２．６８（ｓ、　６Ｂ）　；　７−２０〜７．６１（ｍ。 １６Ｈ）　；　８．３４（ｓ、　２Ｈ）実施例　１１（スキーム６、出発物質） ６−ブロモ−２−ジメトキシメチルビリジン（１１）６−ブロモ−２−ピリジン カルボキシアルデヒド（Ｊ。 Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、９１．（１１）、３５００（１９７０））（１１，３ ８ｇ、６２．２ミ　リモル）全乾燥メタノール（２００ｍＱ）およびオルト蟻酸 トリメチル（２６，５９，２５０ミリモル）の混合物中に溶解させた。 ｐ−トルエンスルホン酸モノ水利物（２５０ｍｇ）を添加したのち混合物を１時 間還流させ、冷却しそしてとリジン（５ｒｘ（１）の添加により中和した。溶媒 を蒸発させそして生成物を減圧下に蒸留すると純粋なジメチルアセタールが無色 液体として得られた。 収率：９６％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ２５）　：　３．３６　（ｓ、　６Ｈ）　 ；　５．２５（ｓ、　ＬＨ）　；７．４６（ｍ、　３Ｈ） 実施例　１２（スキーム６） ビス（６−シメトキシメチルー２−ピリジル）ケトン還流冷却器および滴下ロー トを備えた丸底三ケイフラスコ中で６−ブロモ−２−ジメトキシメチルビリジン （１１Ｘ１４．２ｇ、６１ミリモル）を乾燥ジエチルエーテル（２００ｚ（２） 中に溶解させそして一７０℃に冷却し、その間混合物を磁気撹拌しながら乾燥ア ルゴンを穏やかに通じた。ブチルリチウム（２５，１ｍｆｆ（２，６Ｍ　）　、 ６５．３ミリモル）を滴下しそして反応混合物の温度を一６０℃以下に保つｔ； 。この添加完了後、混合物をさらに１時間撹拌し、そして次に乾燥ジエチルエー テル中に溶解したクロロ蟻酸エチル（４，５２ｇ、−４１，７ミリモル）を温度 が一６０℃をこえないような速度で導入した。黄色懸濁液を一６０℃で４５分間 そして次に一４０℃でさらに１５分間撹拌した。反応をメタノール（２０プＱ） でクエンチしそして反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００πＱ） 中に注入した。エーテル相を分離しモして水相をジクロロメタン１００ｍ（２で ２回抽出した。合一した有機相を蒸発させ、トルエンと共沸させると標記化合物 （１２）の粗製物が得られた。 ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣｆｆ５）　：　３．３８（ｓ、　１２Ｈ）　 ；　５．３０（ｓ、　２Ｂ）　；８．１８〜７．６４（ｍ、　６Ｈ） 実施例　１３（スキーム６） ビス（６−ホルミル−２−ピリジル）ケトン（１３）粗製ビス（６−シメトキシ メチルー２−ピリジル）ケトン（１２）をジオキサン（４０＋ｙｆｆ）および水 （２５プＱ）中に溶解させた。濃塩酸（３ｍｆｆ）を加えそして磁気撹拌下ぶこ ある混合物を１５分間沸騰させた。暗色溶液を次に飽和炭酸水素ナトリウム溶液 （１００ｔ１２）中に注ぎ入れそしてクロロホルム（３Ｘ　ｌｏｈ＋Ｑ）で抽出 しｊ；。抽出液を合一して蒸発させた残留物を短いシリカゲルカラムにかけ４％ ＥｔＯＨ／ＣＨＣＱ！を用いて溶離しそして生成物を含有するフラクションを蒸 発させｌ；。この生成物を熱トルエン（１００ｉＱ）から結晶化させた。 収率：６５％（化合物１１に基づく） ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　　ＣＤＣｆｆ５）　　：　　８．４８〜８−１１（ ’ｍ、　　６Ｈ）　　；　　１０．０７（ｓ。 ２Ｈ） 実施例　１４（スキーム６） ビス（６−ヒドロキシメチル−２−ピリジル）ケトン乾燥ｘ　タ／　−ＪＬ＝　 （５０ＴＡｆｆ）中の化合物（１３Ｘ２．５９．５２．５ミリモル）に乾燥エタ ノール（３０ｍβ）中に溶解した水素化ホウ素ナトリウム（４００ｉ９．５２． ５ミリモル）を０℃で穏やかに撹拌しながら滴下した。このホウ水素化物の約２ ７３が添加されたところで満足できるジオール（１４）／　トリオール比が得ら れた。未反応の還元剤を分解するためにアセトン（２０ｒｎΩ）を加え、この混 合物を蒸発させ、クロロホルム／エタノール（１：　１）に溶解しそして飽和炭 酸水素ナトリウム溶液で抽出した。有機相を蒸発させ、トルエンと共沸させそし てシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：　ＥＬＯ）］／　ＣＨＣＱｓ 　ｌ　：　９　）により精製した。 収率：４８％ ’ＨＮＭＲ（６０Ｍ）ｌｚ、　ＣＤＣＱｓ　＋　ＣＤ！ＯＤ）　：　４−７７Ｃ ｓ、　４Ｈ）　；　７．９８〜７．２７（ｍ、　６Ｈ） 実施例　１５（スキーム８） ６．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド６．６′−ジメチ ル−２，２′−ビピリジン（１，９７ｇ、０．０１０７モル、実施例１）をクロ ロホルム（１０ｍｆｆ）中に溶解した。 ｍ−クロロ過安息香酸（１，８５ｇ、０．０１０７モル）をクロロホルム（４０ プＱ）中に溶解させ、そしてビピリジン溶液に０〜５°Ｃでゆっくりと加えた。 室温で２時間撹拌後この溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で２回そして水で３ 回抽出した。クロロホルム相を乾燥し蒸発させた。生成物をフラッシュクロマト グラフィーにより精製した。 収率ニア０％ ＵＶ（エタノール）　　：　２７０ｎｍ、　２５０ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨ ｚ、　ＣＤＣｌ２５）　：　２．６１（ｓ、　３Ｈ）　；　２．６２（ｓ、　３ Ｈ）　；７．１９（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）；　７．２８（ｄ、　ＬＨ，Ｊ□ ５）１ｚ）；　７．６９（ｔ、　１Ｂ。 Ｊ＝８Ｈｚ）　；　７．９７（ｔ、　１）１．　Ｊ＝５Ｈｚ）　；　８．５３（ ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）実施例　１６（スキーム８） ６．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン−Ｎ、Ｎ’−ジオキサイド（１６） ６．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（１０，ｈ、０．０５４モル）をク ロロホルム（５０ｍｆｆ）中に溶解させた。ｍ−クロロ過安息香酸（２１，０９ ，０，１２２モル）をクロロホルム（２００ｒｎ（１）中に溶解させそして溶液 を合した。室温で一夜撹拌後溶媒を蒸発させそして生成物をフラッシュクロマト グラフィーにより精製した（シリカ、０〜３０％メタノール／クロロホルム）。 収率：６８％ ＵＶＣエタノール中）　　：　２６３ｎｍ、　２２５ｎｌ１１’ＨＮＭＲ（４０ ０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱｓ）　：　２．５８（ｓ、　６Ｈ）　；７−２３（ｔ、　 ２Ｈ。 Ｊ＝８Ｈｚ）；７．３４（ｄｄ、　２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ　＆　２）１ｚ）；７．３ ６（ｄｄ、　２Ｈ。 Ｊ・８Ｈｚ　＆　２Ｈｚ） 実施例　１７（スキーム８） ６．６′−ジメチル−４−ニトロ−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（１ ７） ６．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（１，５０ｇ、０ ．００７４９モル）を濃硫酸（８，０＋＋１２）および発煙硝酸（６，０＋＋＋ Ｑ）中に溶解させそしてこの混合物を１００℃で４時間加熱した。この溶液を氷 水中にゆっくりと注入しそしてｐＨを１０％水酸化ナトリウムを用いて５．５に 調整した。 生成物を濾過して乾燥した。 収率：５３％ ｍ、ｐ、　１６０〜１６３℃ Ｌｌｌエタノール中）　　：　３３７ｎｍ、　２９４ｎｍ、　２３３ｎｍ’ＨＮ ＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣＬ）　：　２．６２（ｓ、　３Ｈ）　：　２．６ ５（ｓ、　３Ｈ）　；７．２７（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□８Ｈｚ）：　７．７５（ｔ、 　ＩＨ，Ｊ□８）１ｚ）；　８．１０（ｄ、　１Ｂ。 Ｊ＝３）Ｉｚ）　；　８．５６（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□８）１ｚ）　：　８．９３（ ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝３Ｈｚ）実施例　１８（スキーム８） ６．６−シメチルー４．４′−ジニトロ−２，２′−ビピリジン−Ｎ。 Ｎ′−ジオキサイド（１８） ６．６′〜ジメチル−２，２′−ビピリジン−Ｎ、Ｎ’−ジオキサイ）’（６， ８４ｇ、Ｑ、０３１６モル）　ヲ濃ｖｉＬ酸（３３，５ｉｆｆ）　８　ヨび発煙 硝酸（２５゜Ｑｏｆｆ）と１００℃で５時間撹拌した。１０％水酸化ナトリウム を用いてｐＨを５．５に調整しｔ；。沈澱した生成物を濾過して真空下に乾燥し た。 収率：４８％ ＵＶ（エタノール中）：３３６ｎｍ ’ＨＮＭＲ（４００ＭＩ（ｚ、　ＤＭＳＯ）　：　２．４８（ｓ、　６Ｈ）　； 　８．５３（ｄ、　２Ｈ，Ｊ胃４Ｈｚ）；　８．６１（ｄ、　２Ｈ，Ｊ□１ｌＨ ｚ）実施例　１９（スキーム８） ４−ブロモ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（１９）６．６′−ジ メチル−４−ニトロ−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（０，５０ｇ、２ ．０ミリモル）をアセチルブロマイド（１０，０＋＋＋Ｑ）および三臭化燐（２ ，５ｍ１２）中に溶解させた。 １．５時間還流後この混合物を氷１００ｇ中に注ぎ入れそして溶液を３０％水酸 化ナトリウム溶液で中和した。この混合物をクロロホルムで抽出し、クロロホル ム相を乾燥しそして蒸発させた。生成物を７ラツシユクロマトグラフイーにより 精製した。 υｖ（エタノール中）　：　２９１ｎｍ、　２４２ｎｍ、　２１７ｎｍ’ＨＮＭ Ｒ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣｆｆａ）　：　２．５９（ｓ、　３Ｈ）　；　２− ６２　（ｓ、　３Ｈ）　；７．１７（ｃｌ、　１Ｈ，Ｊ＝７．６）ｌｚ）　；　 ７．３３（ｄ、　ＩＨ，１−５Ｈｚ）　；　７．６８（ｔ。 ＩＨ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；８．１７（ｄ、ＩＨ，Ｊ□７．６Ｈｚ）；　　８．４ １（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝１．５Ｈ１） 寅ＭｆＩ１２０（スキーム８） ４−アミノ−６，６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（２０）６．６′−ジ メチル−４−二トロー２１２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（１７）（２，０ ｇ、８．２ミリモル）をメタノール（２０ｍρ）中に溶解させた。１０％Ｐｄ／ Ｃ（０，３６ｇ）を加え統いて水素化ホウ素ナトリウム（３，６ｇ、９５ミリモ ル）をゆっくりと加えた。１時間後反応混合物を濾過して溶液を蒸発させた。残 留物をＯ，ＩＮ水酸化ナトリウム溶液に溶解させそして生成物を水相からクロロ ホルムを用いて抽出した。 クロロホルム相を乾燥し蒸発させた。 収率：８０％ ｒｒ＝−ｐ、　１．０１−１０３℃ ＵＶ　（エタノール）　　：　２８４ｎｍ、　２３６ｎ、ｍ’ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ２５）　＝　２−４８（ｓ、　３Ｈ）　；　２．６１（ｓ、 　３Ｈ）　；６．４０（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）　；　７．１２（ｄ、　 ＩＨ，Ｊ・７．６Ｈｚ）　；　７．４７（ｄ。 ＩＨ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；７．６５（ｔ、　ＩＨ，７，６Ｈｚ）；８．１３（ｄ 、　ＩＨ，Ｊ−７，６Ｈｚ） 実施例　２１ ６．６′−ジメチル−４−二トキシ−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（ ２］） ６．６′−ジメチル−４−ニトロ−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（１ ７Ｘ１．Ｏｇ、４．１ミリモル）を、ナトリウム（０，１９ｇ、０．００８３グ ラム原子）およびエタノール２５＋＋＋（２から調製したナトリウムニドキサイ ド溶液に加えた。この混合物を７０℃で３０分間撹拌しｔ：。濃塩酸で中和後反 応混合物を濾過して蒸発乾固させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィーに より精製した（シリカ、０〜５０％メタノール／クロロホルム）。 収率：９０％ ＵＶ（エタノール）　　：　２７２ｎｍ、　２３９ｎｍ’ＨＮＭＲ（４０ＯＮ） ｌｚ、　ＣＤＣｌ２５）　：　１．４５（ｔ、　３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）　　； 　２．５８（ｓ、　３Ｈ）；２．６］（ｓ、　３Ｈ）；４．１４（ｑ、　２Ｈ， Ｊ＝７．０Ｈｚ）　；６．８４（ｄ、　　ＩＨ，Ｊ＝３．４Ｈｚ）；　　７．２ ＱＣｄ、　　ＩＨ，Ｊ＝７．７Ｈｚン；　　７．５４（ｄ、　　ＪＨ。 Ｊ・３．４Ｈｚ）　；　７．７０（ｔ、　Ｊ）Ｊ、　７．７Ｈｚ）；８．６５（ ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝７．７Ｈｚ） 実施例　２２（スキーム８） ６．６′−ジメチル−４−エトキシ−２，２′−ビピリジン６．６′−ジメチル −４−エトキシ−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（２１Ｘ０．９ｈ、３ ．９３ミリモル）をクロロホルム（３４ｍＱ）中に溶解させた。三臭化燐（３， ＯｍＱ）を添加したのちこの混合物を１．５時間還流させた。この溶液を氷に注 ぎ入れ、幾分かのクロロホルムを添加しそして相を分離しｌ；。クロロホルム相 を水で抽出しｔ；。水相を合し、水酸化ナトリウム溶液を用いてアルカリ性とな しそしてクロロホルムで抽出した。有機相を蒸発させ次にシリカゲルクロマトグ ラフィーにかけると純粋な標記生成物が得られた。 収率：６９％ ＵＶ（エタノール）　　：　２８６ｎｍ、　２４３ｎｍ’Ｉ（ＮＭＲ（４００Ｍ Ｈ，ｚ、　　ＣＤＣ（２ｓ）　　：　１．４５（ｔ、　　３Ｈ，Ｊ１１７．０） １ｚ）：　　２．５６（ｓ、３Ｈ）；　　２．６２（ｓ、３Ｈ）；　　Ｃｌ８（ ｑ、２）！、Ｊ＝７．０Ｈｚ）；　　６．６７（ｄ。 ＩＨ，Ｊ□２．ＩＨｚ）；　　７．１４（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；　　７ ．６７（ｔ、ＬＨ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；　　７．７５　（ｄ、ＩＬ　　Ｊ＝２． １Ｈｚ）；　　８．１６　（ｄ、ＩＨ，Ｊ−７，６）１ｚ） 実施例　２３（スキーム９） ４−（２−ヒドロキシエトキシ）−６，６’−ジメチル−２，２′−ビピリジン −Ｎ−オキサイド（２３）水素化ナトリウム（２，０７ｙ、５１．８ミリモル） を１，２−ジヒドロキシエタン（ｌｏｏ＋１ｆｆ）中に加えた。１５分後、６． ６’−ジメチル−４−ニトロ−２，２′−ビピリジン−Ｎ−オキサイド（１７０ ６，３５ｇ、２５，９ミリモル）を加え、この混合物を６０℃で４時間撹拌した 。過剰の１．２−ジヒドロキシエタンを高真空下に蒸発させることにより除去し そして生成物をフランシュクロマトグラフィーにより精製した。 収率ニア９％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＪ）：　２．５２（ｓ、　３Ｂ）；　２．５ ７（ｓ、　３Ｈ）；３．８３〜４．０６（ｎ＋、　４Ｈ）；　６．８０（ｄ、　 １Ｂ、　Ｊ□４Ｈｚ）；　７．１６（ｄ、　ＩＨ。 Ｊ＝８Ｈｚ）；　７．４５　（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□４Ｈｚ）；　７．６６　（ｔ、 　１Ｂ、　Ｊ−８Ｈｚ）；８．２７（ｄ、　Ｉｎ、　Ｊ−８Ｈｚ）実施例　２４ （スキーム９） ４〜（２−ヒドロキシエトキシ）−６，６’〜ジメチル−２，２′−ビピリジン （２４） ４−（２−ヒドロキシエトキシ）　−６，６’−ジメチル−２，２′−ビピリジ ン−Ｎ−オキサイド（２３）　（２，４０ｇ、９．２２ミリモル）をメタノール （７５ｍ１２）中に溶解した。１０％Ｐｄ、／Ｃ（０，５４ｇ）そして次にゆっ くりと水素化ホウ素ナトリウム（３，２４ｇ、８５．６ミリモル）を加えた。　 Ｐｄ／Ｃを炉去して溶媒を蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー （シリカ、５〜５０％メタノール／クロロホルム）により精製した。 収率：９１％ ’）ＩＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＬ）：　２．５７（ｓ、　３Ｂ）；　２． ６１（ｓ、　３）り；３．９８〜４．２５（ｍ、　４Ｈ）；　６．６９（ｄ、　 ＩＨ，Ｊ＝２Ｈｚ）；　７．１４（ｄ、　ＩＨ。 Ｊ＝７Ｈｚ）；　７．６７　（ｔ、　ＩＨ，Ｊ□７Ｈｚ）；　７−８１　（ｄ、 　ＩＨ，Ｊ□２Ｈｚ）；８．１９（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝７１（ｚ）実施例　２５（ スキーム９） ４−（２−ベンゾイルオキシエトキシ）　−６，６’−ジメチル−２，２′−ビ ピリジン（２５） ４−（２−ヒドロキシエトキシ）　−６，６’−ジメチル−２，２′−ビピリジ ン（２４Ｘ１．Ｏｇ、４．１ミリモル）を乾燥ピリジン（２０ｍＬ）中に溶解さ せそしてベンゾイルクロライド（０，６３ｇ、４．５ミリモル）を加えた。３０ 分漬水ロロホルム（５０πΩ）を加えて溶液を飽和重炭酸ナトリウムで抽出した 。クロロホルム相を乾燥し、溶媒を蒸発させそして乾燥トルエンと共沸させた。 生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（シリカ、０〜５０％メ タノール／ジクロロメタン）。 収率：５６％ ｍ、ｐ、８１〜８３℃ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨ２，ＣＤＣ（２り：　　２−５５（ｓ、　　３Ｈ）；　　 ２．６０（Ｓ、　　３Ｈ）；３．９６−４．２２Ｃｍ、　　４Ｈ）：　６．７］ （ｄ、　　ＩＨ，Ｊ□２Ｈｚ）；　７．１３Ｃｄ、　　ｌ）Ｊ。 Ｊ＝８Ｈｚ）；　　７．３６−７．５６　（ｍ、　　３Ｈ）；　　７．６５　（ ｔ、　　ＩＨ，Ｊ＝８Ｈｚ）；７．８６（ｄ、　　ＩＨ，、ｈ２）１ｚ）；　７ ．９８＝８．１４（ｍ、　２Ｈ）；　８．２０（ｄ、　　ＬＨ。 Ｊ＝８Ｈｚ） 実施例　２６（ヌキーム１０．出発物質）４．４’、６．６’−テトラメチル− ２，２′−ビピリジン（２６）この化合物は出発物質として２−ブロモ−４，６ −シメチルビリジンを用いて実施例１に記載の方法と同様にして合成された。 ＵＶ（エタノール）　　：　２８９ｎｍ、　２４１ｎｍ’ＨＮ）ＪＲ（４００Ｍ Ｈｚ、　　ＣＤＣＱｓ）：　２．３５　（ｓ、　　６Ｈ）；　　２．５６　（ｓ 、　　６）］）；６．９４（ｓ、　２Ｈ）；　８．００（ｓ、　２Ｈ）実施例　 ２７（スキーム１０） ４．４′−ビス（２−フェニルエチル）　−６，６’−ジメチル−２，２′〜ビ ピリジン（２７） 液体アンモニア（２０ｍｆｆ）中に溶液の置きを保つに充分なナトリウムを一５ ０°Ｃで加えた。硝酸鉄（ｍ　）　（２０ｍｇ）次にナトリウム（０，１９ｐ、 ０−００８グラム原子）を加えた。４５分漬水、４’、６．６’−テトラメチル −２，２′−ビピリジン（２６）（１，０６ｇ、５．００ミリモル）を少しずつ 加えそしてこの混合物を一５０℃で１．５時間撹拌した。ベンジルブロマイド（ １，８８ｇ、１１．０ミリモル）を−５０°Ｃで２時間で加えた。この混合物を 放置して昇温させそして水（５０πΩ）　、エタノール（２０ｉ（１）およびク ロロホルム（３０＋＋＋１２）を加えた。有機相を飽和硫酸アンモニウム溶液で 抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥しそして蒸発させた。酢酸エチルを添加するこ とにより純粋な化合物が幾分か沈澱した。残りはフラッシュクロマトグラフィー （シリカ、０〜６％メタノール／ジクロロメタン）により精製した。 収率：５３％ ＵＶ（エタノール）　　：　２９０ｎｍ、　２４１ｎｍ’ＨＮＩＪＲ（４００Ｍ Ｈｚ、　ＣＤＣＬ）＝　２．６０（ｓ、　６Ｈ）；　２．９８（ｂｓ、　８Ｈ） ；６．９７（ｓ、　２Ｈ）；　７．１８〜？、３５（ｍ、　ｌ０Ｈ）；　８．０ ７（ｓ、　２Ｈ）実施例　２８（スキーム１０） ４．４′−ビス（２−（ｐ−二トロフェニル）−エチル）−６，６′−ジメチル −２，２′−ビピリジン（２８）４．４′−ビス（２−フェニルエチル）　−６ ，６’−ジメチル−２，２’−ビピリジン（２７Ｘ３．０ｇ、７．６ミリモル） をテトラヒト０７　ラン（３０ｍｆｆ）中に溶解させた。６５％硝酸（０，８１ ｇ）を加え、溶液を蒸発させた。Ｓ硫ｒａ　（２６＋＋＋１２）を加えそして溶 液を６０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を氷２００ｍＱにゆっくりと注ぎ込 んだ。この水溶液を固形炭酸ナトリウムで中和しそしてクロロホルム／エタノー ル溶液で抽出した。有機相を乾燥し蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグ ラフィーにより精製した。 収率：３４％ ＵＶ（エタノール中）　　：　２８５ｎｍ、　２５１ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨ ｚ、　　ＣＤＣｆｆ５）：　　２．５９　（ｓ、　　６）１）；　　３．０５　 （ｂｓ、　　６Ｈ）；６．９５（ｓ、　　２Ｈ）；　　７．３４（ｄ、　　４Ｈ ，Ｊ□９Ｈｚ）；　　８．０８（ｓ、　　２Ｈ）；　　８．１５（ｄ、４Ｈ，Ｊ ＝９Ｈｚ） 実施例　２９ 反応性ハロメチル基をビピリジンまたはビビリミジン中に導入するｌ；めの操作 Ａ）　　Ｎ−ハロスクシンイミドを用いるジメチル化合物の直接ハロゲン化のだ めの一般的操作 Ｇ、Ｒ，Ｎｅｗｋｏｍｅ他、　Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、、４８．５１１２〜５１ １４（１９８３）参照 ジメチル化合物（４，０ミリモル）を四塩化炭素（１００ｍ＋２）中に溶解させ た。Ｎ−ブロモスクシンイミド（９，０ミリモル）８よび触媒量のジベンゾイル ペルオキシドを加え、混合物を一夜還流させた。この混合物を枦遇しそして溶液 を蒸発乾固させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 Ｂ）　ビスアセテートを経てのビスハロメチルビピリジンおよびビビリミジンの 一般的合成操作（スキーム■） ｉ　）　Ｎ、Ｎ’−ジオキサイド合成のｔ；めの一般的操作Ｗ、５ｏｎｔ他、Ｏ ｒｇ、Ｐｒｅｐ、Ｐｒｏｃｅｄ、Ｉｎｔ、　２４３〜２４４（１９８０）参照６ ．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（または類似のジメチル−ビビリミジ ン）（５ミリモル）をクロロホルム（１００７１１（２）中に溶解させた。ｍ− クロロ過安息香酸（１５ミリモル）を加えそして溶液を３時間撹拌した。飽和炭 素水素ナトリウム溶液で抽出後、クロロホルム相を乾燥しそして蒸発乾固させた 。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 ｉｔ　）　Ｎ、Ｎ’−ジオキサイドからジアセテートを合成するための一般的操 作 Ｇ、Ｒ，Ｎｅｗｋｏｍｅ、　Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、、４７＋　４１１６〜４３ ．２０（１９８２）参照６．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン−Ｎ、Ｎ’ −ジオキサイド（３ミリモル）を無水酢＊　（２０ｍｆｆ）中に溶解させそして 溶液を０．５時間還流させた。無水酢酸を蒸発させそして残留物を飽和炭酸水素 ナトリウムとクロロホルムの間に分配した。有機相を乾燥および蒸発させ、そし て生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 ｉ）ジアルコール合成のための一般的操作ジアセテート（１ミリモル）をアセト ン（１０ＨＱ）中に溶解させそしてＩＮ水酸化ナトリウム（１ｈ＋Ｑ）を加えた 。 室温で１時間撹拌後浴液を塩酸で中和した。アセトンを蒸発させモして水相をク ロロホルムで抽出した。クロロホルムを蒸発させそして生成物をフラッシュクロ マトグラフィーにより精製した。 ｉｖ）ジアルコールからのジブロマイドまたはジクロライド合成のための一般的 操作 ジアルコール（１ミリモル）をクロロホルム（１５ｉｆｆ）中に溶解させモして 三臭化燐または三塩化燐（１，５ミリモル）を加えた。２時間還流後この混合物 を冷却して飽和炭酸水素ナトリウムで抽出した。クロロホルム相を乾燥し蒸発乾 固させた。フラッシュクロマトグラフィーにより精製して純粋なジブロマイドを 得た。 Ｃ）　ジＮ、Ｎ’−オキサイドから直接ビスクロロメチル基を導入するための一 般的操作（スキーム■）Ｔ、５ａｋａｒｎｏＬｏ他、　Ｅｓｔｅｒｏｃｙｃｌ、 、２０．９９１〜９９４（１９８３）参照６．６′−ジメチル−２，２′−ビピ リジン−Ｎ、Ｎ’−ジオキサイド（または類似のビビリミジン−Ｎ、Ｎ’−ジオ キサイド）（１ミリモル）を１，４−ジオキサン（２０＊ａ）中に溶解させそし てオキシ塩化燐（７ミリモル）を加えた。この混合物を２時間還流させそして蒸 発乾固させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 実施例　３０ ６．６′−ビス（クロロメチル’）　−２，２’−ビピリジン（３０）Ｇ、Ｒ， Ｎｅｗｋｏｍｅ他、　Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｎ＋、、４８．５１１２−５１１４（ １９８３）参照 実施例２９Ａの一般的な直接ハロゲン化操作による。 ６．６′−ジメチル−２，２′−ビピリジン（ＩＸｏ、２６ｇ、２．３ミリモル ）、Ｎ−クロロスクシンイミド（０，４７ｔｉ、５．５ミリモル）、ジベンゾイ ルペルオキシド（３，６ｍｇ）　＃よびテトラクロロメタン（７，２ｔｊ２）を ２４時間還流させた。この混合物を枦遇しそして溶媒を蒸発させた。生成物をフ ラッシュクロマトグラフィーにより精製した（シリカ、シクロヘキサン／メチレ ンクロライド９：１）。 収率：１２％ ｔｌＶ（エタノール中）　　＝　２８７ｎｍ、　２３８ｎｍ”ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、　　ＣＤＣ（２３）：　　４．７３（ｓ、　　４Ｂ）；　　７−４７（ ｄ、　　２Ｈ，Ｊ−７，５Ｈｚ）；　　７−８０　（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ ）；　　８．３８　（６，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ） 実施例　３１（スキーム１４） ４−ブロモ−６，６′−ビス（ブロモメチル）　−２，２’−ビピリジン（３１ ） （１９）を出発物質として用い、Ｎ−ハロスクシンイミドを用いるジメチル化合 物のハロゲン化のための一般的操作（実施例２９Ａ）による。 ［ＩＶ（エタノール中）＝２９０ｎＩＩ＋”ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣ ｌ２３）：　４−５６　（Ｓ、　３Ｈ）；　４．６２　Ｃｓ、　３Ｈ）；７．４ ９　（ｄｄ、　ＩＬ　Ｊ−７，８＆　Ｊ、０Ｈｚ）；　７．６３　（ｄ、　ＩＨ ，Ｊ・１，７Ｈｚ）；　７．８２（ｔ、　ＩＨ，Ｊ−７，８Ｈｚ）；　８−３５ （ｄｄ、　１Ｈ，Ｊ□７．８　＆ＬＯＨｚ）；　８．５７（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□］ 、７Ｈｚ）実施例　３２（スキーム９） ４−（２−ベンゾイルオキシニドキシ”）−６，６’−ビス（ブロモメチル）− ２，２’−ビピリジン（３２）Ｎ−ハロスクシンイミドを用いるジメチル化合物 の一般的ハロゲン化操作（実施例２９Ａ）および出発物質として化合物（２５） を用いる。 収率：２０％ ”ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱｓ）：　４．５４　（ｓ、　２Ｈ）；　４ ．５９　（ｓ、　２Ｂ）；４．４３〜４．７３（ｍ、　４Ｈ）；　７．０２（ｄ 、　ＩＨ，Ｊ□２Ｈｚ）；　７．４３（ｄｄ、　１Ｂ。 Ｊ□ｌ　＆　８Ｈｚ）；　７．３６〜７．５６　（ｍ、　３Ｈ）；　７．７８　 （５ＩＨ，Ｊ−８Ｈｚ）；　７．９９（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□２Ｈｚ）；　７．９９ −Ｌ１２（ｍ、　２Ｈ）；　８．３８（ｄｄ、１Ｂ、Ｊｌ　　＆　　８）ｌｚ） 実施例　３３（スキーム１０） ｉ）４．４’−ビス−（２−（ｐ−二トロフェニル）−エチル）−６，６’−ジ メチル−２，２′−ビピリジン−Ｎ、Ｎ−ジオキサイド（３３） 実施例２９Ｂｉ）の一般的操作を化合物（２８）に適用。 収率：４６％ ＬＩＶ（エタノール中）　　：　２６９ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣ ｌ２５）：　２．５３　（ｓ、　６Ｈ）；　３．００（ｂｓ、　８）り；７．１ ２　（ｂｓ、　４Ｈ）；　７．３０　Ｃｄ、　４Ｈ，Ｊ□９Ｌｚ）；　Ｌ１７（ ｄ、　４Ｈ，Ｊ＝９Ｈ２） ｉｉ）４．４’〜ビス（２−（ｐ−ニトロフェニル）−エチル）−６，６’−ビ ス（アセトキシメチル）　−２，２’−ビピリジン（３４） Ｎ　、　Ｎ　’−ジオキサイド（３３）から出発して実施例２９Ｂｉｉ）記載の ジアセテート合成のための一般的操作による。 収率：５４％ ｕＢエタノール）　　：　２８６ｎｍ、　２５１ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、 　ＣＤＣＱｓ）＝　２．１７　（ｓ、　６Ｈ）；　３．０９　（ｂｓ、　８Ｈ） ；５．２７（ｓ、　４Ｈ）；　７．１２（ｓ、　２Ｈ）；　７−３４（ｄ、　４ Ｈ，Ｊ・９Ｈｚ）；　８．１６（６，４Ｂ、　Ｊ＝９Ｈｚ）；　８−２３（ｓ、 　２Ｂ）ｉｉｉ）４．４’−ビス（２−（ｐ−ニトロフェニル）−エチル）−６ ，６’−ビス（ヒドロキシメチル）　−２，２’−ビピリジン（３５） ジオール合成のための一般的操作（実施＃２９Ｂ世）を用い出発物質として化合 物（３４）を使用。 収率：９０％ ＵＶ（エタノール）：２８４ｎｍ ’ＨＮＭＲ（６０Ｍ）Ｉｚ、　ＣＤＣＱｓ）：　３．１０　（ｂｓ、　８Ｈ）； 　４．８１　（ｓ、　４）１）；７．２１　（ｓ、　２）り；　７．３４　（ｄ 、　４Ｈ，Ｊ□９１（ｚ）；　８．１７　（ｄ、　４Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）；　８． １７（ｓ、　２Ｈ） ｉｖ）４．４’−ビス（２−（ｐ−二トロフェニル）−エチル）−６，６’−ビ ス（クロロメチル）　−２，２’−ビピリジン実施例２９Ｂｉｖ）記載の一般的 操作を出発物質としての化合物（３５）に適用。 収率：３６％ ｕｖｃエタノール）　　：　２７８ｎｍ、　２５３ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ 、　ＣＤＣＱ３）：　３−１０　（ｂｓ、　８Ｈ）；　４．７０　（ｓ、　４Ｈ ）；７．２６（ｓ、　２Ｈ）；　７．３４　（ｄ、　４Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）；　８ ．１７　（ｄ、　４Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）；　８．２４（ｓ、　２Ｂ） 実施例　３４ ｉ　）　２．２’−ジメチル−４，４′−ビビリミジン−Ｎ、Ｎ’−ジオキサイ ド（３７） この合成は５！施例２９Ｂｉ）記載の一般的記述に従い実施されｔ：。 ２．２′−ジメチル−４，４′−ビビリミジン（１５０ｍｇ、０．８１ミリモル ）　（Ｆ、Ｅｆｆｅｎｂｅｒｇｅｒ、　Ｃｈｅｍ、Ｂｅｒ、　９８．２２６０− ２２６５（４９８６）記載の方法により得る。スキーム７参照）をクロロホルム （２！ｌ＋１２）中に溶解させｌ；。クロロホルム（５π０）中に溶解したｍ− クロロ過安息香酸（４２０ｒｎｇ、２．４ミリモル）をゆっくりと加え、混合物 を一夜撹拌した。溶媒を蒸発させそして生成物を７ラツシユクロマトグラフイー により精製した。 収率ニア２％ ｕｖｃｘタノール）　　：　３６８ｎｍ、　２９５ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨ ｚ、　ＣＤＣｌ２５＋ＣＨｓＯＨ）：　２−８１（ｓ、　６Ｈ）；　８−２９（ ｄ。 ２Ｈ，Ｊ＝７）１ｚ）；　８．５１（ｄ、　２Ｈ，Ｊ□７Ｈｚ）ｉｉ）２．２’ −ビス（クロロメチレン）−４，４’−ビビリミジン（３８） 合成は実施例２９Ｃ記載の一般的記述に従い実施された。 ２．２′−ジメチル−４，４′−ビビリミジン−Ｎ、Ｎ’−ジオキサイド（７０ ｍｇ、０．３２ミリモル）、オキシ塩化燐（３００ＷＬ９．２゜０ミリモル）お よび１．４−ジオキサン（７ηａ）を４時間還流させた。溶媒を蒸発させ、生成 物を短いカラムクロマトグラフィーにより精製した（５％メタノール／クロロホ ルム）。 収率：４１％ ＵＶ　（エタノール）　　：　２８５ｎｍ、　２７６ｎｍ’ＨＮＮＲ（４００Ｍ Ｈｚ、　ＣＤＣｌ２３＞：　４．８５（ｓ、　４Ｈ）；　８．４１（ｄ、　２Ｈ ，Ｊ＝５Ｈｚ）；　９．００（ｄ、　２Ｂ、　Ｊｌ＝５Ｈｚ）実施例　３５ ４．４′−ジメチル−２，２′−ビビリミジン−Ｎ、Ｎ’−ジオキサイド（３９ ） 実施例２９Ｂｉ）の操作に同じ。 ４．４′−ジメチル−２，２′−ビビリミジン（３）　（２１０ｍｇ、１．１３ ミリモル）およびｍ−クロロ過安息香酸（１，４９，８，４ミリモル）をクロロ ホルム（１５ｍＩ２）＝ｔ−に溶解させそして５時間還流させた。不溶のｍ−ク ロロ過安息香酸を枦去し、生成物（３種の異なるＮ、Ｎ’−ジオキサイド）をフ ラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 異性体１： 収率：　２９ｒｎｙ ＵＶ（エタノール中）　　：　３１２ｎｎ＋、　２７４ｎｍ”ＨＮＭＲ（６０Ｍ Ｈｚ、　ＣＤＣ＜ｈ）：　２．６１（ｓ、　６Ｈ）；　７−４２（ｄ、　２Ｈ， Ｊ・５Ｈｚ）；　８．２６（ｄ、　２Ｈ，Ｊ□５Ｈｚ）異性体２： 収率：　５０ｍｇ ＵＶ（エタノール中）　　：　３１６ｎｍ、　２７２ｎｍ’ＨＮＭＲ（６ＯＮＩ （ｚ、　ＣＤＣ（ｌｓ）：　２．５９（ｓ、　６Ｈ）；　７．４４（ｄ、　ＩＨ ，に５Ｈｚ）；　７’、４４　（ｄ、　　ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）；　Ｌ２８（ｄ、 　　ＩＨ，Ｊ＝５Ｈｚ）；　８．４９（ｄ、　］Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ） 異性体３： 収率：　３２Ｘｌ＋９ ＵＶ（エタノール中）　　：　３２０ｎｍ、　２７３ｎＩ１１’ＨＮＭＲ（６０ Ｍ）Ｉｚ、　ＣＤＣｆｆｘ）：　２．５９（ｓ、　６Ｈ）；　７．２９（ｄ、　 ２Ｈ，Ｊ・７Ｈ２）；　８．４７（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝７）Ｉｚ）ｉｊ）４．４’ −ビス（クロロメチレン）−２，２’−ビビリミジン（４０） 実施例２９Ｃ記載の操作による。 ４．４′−ジメチル−２，２′−ビビリミジン−Ｎ、Ｎ’　−ジオキサイド（３ ９）　（１５０＋＋＋ｇ、０．２３ミリモル）（異性体２）を１．４−ジオキサ ン（４ｍＱ）に溶解させモしてオキシ塩化燐（４００μΩ、１．６ミリモル）を 加えた。この混合物を２時間還流させそして次に蒸発乾固させた。幾分かのエタ ノールを加えそして混合物を再び蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラ フィーにより精製した（シリカ、０〜５％メタノール／クロロホルム）。 収率：３１％ ＵＶ（エタノール）：２４８ｎｍ ’ＨＮＭＲ（４０ＯＮＨ２，ＣＤＣｌ２３）：　４−８５（Ｓ、　４Ｈ）ｉ　７ ．７６（ｄ、　２Ｈ，Ｊ・５）１ｚ）；　９．０９（＋ｎ、　２）１）他の２種 の異性体Ｎ、Ｎ’−ジオキサイドも同じ条件下に同じジクロライドを生成した。 実施例　３６（スキーム６） ビス（６−プロモメチルー２−ピリジル）ケトン（４１）ジクロロメタン（１５ ｍＱ）中に懸濁したビス（６−ヒドロキシメチル−２−ピリジル）ケトン（１４ Ｘ４１０１Ｒｇ、１．６８ミリモル）を５０ｒｎＱ丸底フラスコ中室温で撹拌し た。三臭化燐（１，８２９，６，７２ミリモル）を一度に加え混合物を５分間還 流させた。冷却した混合物を飽和炭酸水素ナトリウムとクロロホルムの間に分配 した。有機相を集め、蒸発させ、トルエンと共沸させ、そしてクロロホルムを溶 媒とするフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 収率：８７％ ＬＩＶ（ジクロロメタン中）：２Ｂ２ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０Ｍ）ｔｚ、　ＣＤＣ （ｌｘ）：　４．５５　（ｓ、　４Ｈ）；　８−１６−７．２２　Ｃｍ。 ６Ｂ） ！ｌ！施例　３７（スキーム１２） Ｌ−リジンエチルエステル（４２） チオニルクロライド（５，，０ｍＩ２．８．０６ｇ、６８ミリモル）全氷冷され た乾燥エタノール５ｏｏｌｌＩｆｆ中に滴下した。撹拌された混合物をこの温度 で２０分間保持しそしてＬ−リジン塩酸塩（２０ｇ、１０９ミリモル）を加えた 。 次にこの混合物を３時間還流させそして約２００ｍＱ量となるまでａ縮した。ジ エチルエーテル２００ｍｇを加えそして結晶化した生成物を濾過しだ。 収率ニジ塩酸塩９７％ 実施例　３８（スキーム１．２） ｔａＮ−（４−ニトロベンゾイル）−Ｌ−リジンエチルエステル（４３） 水５０πΩ中に溶解したし一すジンＩ（ＣＩ２　（５ｇ、２７．４ミリモル）を ５　Ｍ　ＮａＯＨで滴定してｐ　Ｈ１０、５となした。反応混合物をはげしく撹 拌しながらｐＨ１０５に保持してジオキサン（５０＋Ｑ）中の４−二トロペンゾ イルクロライド（６，６ｇ、３６ミリモル）および５ＭＮａＯＨをゆっくりと添 加した。 添加完了および桃色消失後、反応混合物を濃ＭＣＩ２でＩＩ）Ｉ２に酸性化しモ してジエチルエーテルで４回抽出した。 水相を濃縮乾固し、乾燥エタノール２００ＴＡｆｆと２回共沸させそして予めチ オニルクロライドｌＯｍＱで処理した乾燥エタノール２５０ｚＱ中に懸濁した。 この混合物を３時間選流させ、濾過し蒸発させた。残留する物質を飽和炭酸水素 ナトリウムおよびクロロホルム／エタノール］：１の間に分配しそして有機相を ｉａｉマグネシウムで乾燥すると粗製物が得られ、これを５％エタノール／りｏ Ｉｌ１７ホルムを溶離剤とするフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 収率：１２％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＩ（ｚ、　ＣＤＣｌ２３）：　８．２５（ｄ、　　２Ｈ，Ｊ ＝９Ｈｚ）；　７．９３　（ｄ。 ２Ｈ，Ｊ□９Ｈｚ）；　６−８７　（ｓ、　ｂｒｏａｄ、　　ＩＨ）　　：　　 ４．１７　（Ｑ、　　２Ｈ，Ｊ□７北）；　３．３０−３．６０（ｍ、　３Ｈ） ；　１．４０〜１．７５（ｍ、　８Ｈ）；　１．２４（ｔ。 ３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ） 実施例　３９（スキーム１２） σ−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−υ−Ｎ−（４−ニトロベンゾイル）− Ｌ−リジンエチルエステル（４４）化合物（４３）　（０，５４９，１，７ミリ モル）をトルエンと共沸させ、乾燥アセトニトリルＣｌ０ｔｈ（１）Ｊ：溶解さ せそしてブロモ酢酸メチルエステル（０，２６５１？、　１．７ミリモル）統い て粉末状乾燥度酸ナトリウム（２，０ｇ）を煎えた。この混合物を３時間還流さ せｔ：。 無機塩を濾過しそしてアセトニトリルを蒸発させると油状の粗製物が得られ、こ れをフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。 収率：６８％ ’ＨＮＩＪＲ（６０ＭＨｚ、　　ＣＤＣｒｌｓ）：　　８−２５（ｄ、　　２Ｈ ，Ｊ＝９１（ｚ）；　　７−９３（ｄ。 ２Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）；、６．６３　（ｓ、ｂｒｏａｄ、ＩＨ）；　　４．１３（ ｑ、２Ｈ，Ｊ□７）１ｚ）；　　３．６８（ｓ、３Ｈ）；　　３．３０〜３．６ ０（ｍ、３Ｈ）；　　１．４０−１．７５（ｍ。 ７Ｈ）；１．２４（ｔ、３Ｈ，Ｊ−７Ｈｚ）実施例　４０（スキーム１２） ω−Ｎ−モノメトキシトリチル−し−リジンエチルエステル（４５） 乾燥トリエチルアミン（１，８ｎ＋１２．１８ミリモル）を乾燥ピリジン２０ｒ ｎΩ中の（４２Ｘ１．５ｇ、６ミリモル）の懸濁液中に加えた。室温で撹拌され ているこの混合物に固形モノメトキシトリチルクロライド（１，９６ｇ、６ミリ モル）　（ＭＭ丁ｒ（、Ｑ）を１時間かかって少しずつ加え、そこでこの混合物 をさらに２時間撹拌した。標準的な重度酸ナトリウム処理Ｊこ統いてクロロホル ムで抽出するとａ　−ＭＭＴｒ異性体が夾雑する粗製物が得られた。 純粋な標記生成物は異性体間のＲｆの相異が大きいのでフラッシュカラムクロマ トグラフィーにより容易に単離された。 収率：４８％ ’）ＩＮＭＲ（４００）ＪＨｚ、　ＣＤＣＱｓ”）：　７．５〜６．７５（ｍ、 　１４Ｈ）；　４．１８（ｑ。 ２Ｈ，Ｊ＝７）１ｚ）；　３．７８（ｓ、　３）１）；　３−４５〜３．３７（ ｍ、　ＩＨ）；　２−１４〜２．１０（ｔ、　２）１．　Ｊ−７Ｈ２）；　１． ７５−１．３５（ｍ、　９Ｈ）；　１．２６（＋、　３Ｂ。 に７Ｈｚ） 実施例　４１（スキーム１２） ａ−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−ω−Ｎ−モノメトキシトリチル−Ｌ− リジンエチルエステル（４６）部分的に保護されたＬ−’、ｌジン誘導体（４５ ）　（１，（ｈ、２、ｉ、３ミ！Ｊモル）を実施例３９記載の方法により生成物 （４６）に変換した。 収率ニア０％ ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣＱｓ＞：　７．４６〜６．７７（ｍ、　１ ４Ｈ）；　４−１９〜４．１４（ｑ、　２Ｈ）；　３．７７（ｓ、　３）１）； 　３．７０（ｓ、　３）１）；　３．３１−３．４５（ｑ、　２）１．　Ｊ＝７ Ｈｚ）；　３．２２−３．２５（ｔ、　１１（）；　２．０９−２．１２　（ｔ 。 ２１（）；　１．３５〜１．７０（＋ｎ、　６）１）；　１．２３−１．２７（ ｔ、　３Ｈ）実施例　４２（スキーム１２） ω−Ｎ〜トリフルオロアセチルーＬ−リジンエチルエステル（４７） 乾燥エタノール１０ｙｎＱ中に溶解した化合物（４２）　（２，ｈ、８．１ミリ モル）を乾燥トリエチルアミンＣ４，０９ｇ、４０．４ミリモル）で処理しｊ； 。生成した撹拌されている懸濁液にトリフルオロ酢酸エチル（１，５ｇ、１０． ５ミリモル）を加え、混合物を６時間還流させｔ；。 次にすべての揮発性物質を蒸発させそして残留物を飽和炭酸水素ナトリウムとク ロロホルム／エタノールｌ：１との間に分配しｔ；。 合一した有機相（５×６０！１ｌＱ）を蒸発させ、トルエンと共沸させそしてフ ラッシュクロマトグラフィーして標記生成物を無色油状物の形態で得た。 収率：８７％ ’ＨＮＮＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ２３）：　７−ＩＯ（ｔ、　ＬＨ，交換 可能）　；　４．２１〜４．１６　（Ｑ、　２Ｈ）；３．４５−３．４０　（ｎ ＋、　　１Ｂ）：　３．３８−３．３１　（ｍ。 ２Ｈ）；　１．８４　（ｓ、　２Ｈ，交換可能）　；　１．８２〜１．４０　（ ｍ、　６Ｈ）；Ｌ２８（ｔ、３Ｂ） 実施例　４３（スキーム１２） σ−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−ω−Ｎ−トリフルオロアセチル−し− リジンエチルエステル（４８）Ｌ−リジン誘導体（４７Ｘ１．Ｏｇ、３．７ミリ モル）を実施例３９の方法と同様にして生成物（４８）に変換した。 収率：８３％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱ、＋ＣＤ３０Ｄ）＋　４．４〜４．０（ｑ 、　２Ｈ）；　３．６８（ｓ、　３Ｂ）；　３．５〜３−１（ＩＩ＋、　５Ｈ） ；　１．８〜１．４（ｍ、　６Ｂ）；　１．２３（ｔ。 ３）］） 実施例　４４（スキーム１２） ω−Ｎ−（４−ヒドロキシブチリル）−Ｌ−リジンエチルエステル（４９） 乾燥エタノール３ＯｒａＱ中のＬ−リジンエチルエステル２　ＨＣＲ（４２）（ ２Ｓ！、８．１ミリモル）を乾燥トリエチルアミン（５，６３ｍＬ　４０．５ミ リモル）およびγ−ブチロラクトン（０，７ｇ、８．１ミリモル）で処理しそし て得られる懸濁液を３時間還流させた。 揮発性物質を蒸発させそしてトルエンと共沸させると粗製物が得られ、これを２ ０％メタノール／クロロホルムヲ溶媒とするフラッシュクロマトグラフィーによ り精製し　ｔこ　。 収率ニア３％ ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣＱｓ　＋ＣＤ５ＱＤ）’　４−３０〜４． ２２ＣＱ、２Ｈ）；３．７２〜３．７７（ｒｎ、　　１Ｈ）；　３．５８〜３． ６５（ｔ、　２）１）；　３．１８〜３．２８（ｍ。 ２Ｂ）；　　２．３０〜２．３６（ｔ、　　２Ｈ）；　　１．４０〜２２−００ （、８Ｂ）；　　］−２８〜１．３４（ｔ、３Ｊ（） 実施例　４５（スキーム１２） ａ−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−ω−Ｎ−（４−ヒドロキシブチリル） −Ｌ−リジンエチルエステル乾燥アセトニトリル２０ｙｎＱ中の化合物（４９８ １，２２ｇ、４．６８ミリモル）を実施例３９と同様の方法で生成物（５ｏ）に 変換させた。 収率：６４％ ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　　ＣＤＣＱｓ）：　　６．２５（ｓ、　　ｂｒｏ ａｄ、　　ＩＨ）；　　４−１６−４．２１（ｑ、　　２Ｈ）；　　３．７３（ ｓ、　　３Ｈ）；　　３．６７−３．６９（ｔ、　　２Ｈ）；　　３−３３〜３ ．４９（ｍ、　　２Ｈ）；　　３−２０〜３．３０　（ｍ、　　３Ｈ）；　　２ ．３４〜２．３７　（ｔ。 ２Ｂ）；　　１．４０−１．９０（＋ｎ、　８Ｈ）；　　１．２６−１．３０（ ｔ、　３Ｈ）実施例　４６（スキーム１３） 官能化されてないテトラエステル合成のための一般的操作 ビス（ハロメチル）化合物（１，０ミリモル）、ジー第三ブチル、シュチルまた はジメチルイミノジアセテート（２，５ミリモル）、炭酸ナトリウム（２５０１ Ｂｇ）およびアセトニトリル（１０＋ｄ）を−夜還流させた。この混合物を濾過 し、溶媒を蒸発させそして生成物を７ラツシユクロマトグラフイーにより精製し た。 実施例　４７（スキーム９） ４−（２−ベンゾイルオキシエトキシ）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（エト キシカルボニルメチル）アミノメチル）−２，２′−ビピリジン（５１） 実施例４６記載のテトラエステル合成の一般的操作を用い、出発物質として化合 物（３２）を使用して合成した。 収率：６３％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣ（ｉｓ）：　１．２３（ｔ、　１２Ｈ，Ｊ＝ ７Ｈｚ）；　３．６５（ｓ。 ８Ｈ）；　４．１０（ｓ、　４Ｈ）；　４．１６（ｑ、　８Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）； 　４．５０−４．７７（ｍ。 ４Ｂ）；　７．２４（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝２Ｈｚ）；　７．５６（ｄ、　ＩＨ，Ｊ ＝８Ｈｚ）；　７．３９〜７．δ０Ｃｒｎ、　３Ｈ）；　７．７９（ｔ、　ＩＨ ，Ｊ＝８）１ｚ）；　７．９７〜８．１６（ｍ。 ２Ｈ）；　８．０２（ｄ、　ＩＨ，Ｊ□２Ｈｚ）；　８．３１（ｄ、　ＬＨ，Ｊ □８）Ｉｚ）実施例　４８（スキーム９） ４−（２−ヒドロキシエトキシ）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカ ルボニルメチル）アミノメチル）　−２，２’−ビピリジン（５２） ４−（２−ベンゾイルオキシエトキシ）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（エト キシカルボニルメチル）アミノメチル−２，２′−ビピリジン（２２０ｇｇ、０ ．３１ミリモル）をエタノール（２０ｉＱ）およびチオニルクロライド（１，５ ＋＋＋１２）を含有する溶液中に加えた。この混合物を一夜還流させそして次に 蒸発させた。残留物をクロロホルム中に溶解させそしてこれを飽和重炭酸ナトリ ウム溶液で抽出した。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（ シリカ、０〜５％メタノール／クロロホルム）。 収率：３６％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨ２，ＣＤＣ（！３）’　１．２５（ｔ、　１２Ｈ，Ｊ＝７ Ｈｚ）；　３．６５（ｓ。 ８Ｈ）；　４．１１（ｓ、　４）１）；　４．１７（ｑ、　８Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ） ；　３．９９−４．３５（ｍ。 ４Ｈ）；　７．２１（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝２Ｈｚ）；　７．５４（ｄｄ、　ＩＨ， Ｊ□２　＆　７Ｈｚ）；７．７７（ｔ、　ＩＨ，Ｊ＝７Ｈｚ）；　７．９０（ｄ 、　ＩＨ，Ｊ＝２Ｈｚ）；　８．２８（ｄｄ。 １）！、　Ｊ・２　＆　７Ｈｚ） 実施例　４９（スキーム１３７：８けると同じ）４．４′−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス （ｔ−ブトキシカルボニルメチル）アミノメチル）−２，２’−ビビリミジン（ ５３）４．４′−ビス（クロロメチル）−２，２’−ビビリミジン（１８，（ｈ り、０．０７９３ミリモル）、ジー第三ブチルイミノジアセテート（７６，３＋ ＋＋９．０．３１ミリモル）、炭酸ナトリウム（２１０１１１ｇ）およびアセト ニトリル（３ＩＩＩＩ２）を−夜還流させた。 この混合物を濾過し、溶媒を蒸発させそして生成物を７ラツシユクロマトグラフ イーにより精製した（シリカ、０〜５％メタノール／クロロホルム）。 収率：４７％ ＵＶ（エタノール中）　　：　２４４ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱ ｓ）：　１−４５（ｓ、　３６）１）；　３．５０（ｓ、　８Ｈ）；４．２３（ ｓ、　４Ｈ）；　７．９７（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ）；　８．９７（ｄ、　２ Ｈ，、Ｊ−５Ｈｚ）実施例５０（スキーム１４） ４−ブロモ−６，６′−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（ｔ−ブトキシカルボニルメチル） アミノメチル）−２，２’−ビピリジン（５４）実施例４６記載の一般的操作を 用い、化合物（３１）を出発物質として使用して合成した。 ＵＶ（エタノール中）　　：　２９１ｎｍ、　２４２ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００１ １ＩＨｚ、　ＣＤ（ｊ２ｓ）：　１．４７（ｓ、　３６Ｈ）；　３．５２（ｓ、 　８）ｉ）；４１０（ｓ、　２Ｈ）；　４．１１（ｓ、　２Ｈ）；　７．６６（ ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；７．７８（ｔ、　］）ｌ、　Ｊ＝７．Ｈｚ）； 　７．８３Ｃｓ、　ＩＢ’）：　８．２７Ｃｄ、　ｌＨ。 Ｊ＝７．６Ｈｚ）；　８．４９（ｓ、　ＩＨ）実施例　５１ ２．２′−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（ｔ−ブトキシカルボニルメチル）−アミノメチ ル）−４，４’−ビビリミジン（５５）実施例４６記載の一般的操作に従い、出 発物質として化合物（３８）を使用。 ＬＩＶ（、：ｎタノール）＋２７６ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００！ｉ！Ｈｚ、　ＣＤ ＣＱｓ）：　１．４５（ｓ、　３６Ｈ）；　３−６８（ｓ、　８Ｈ）；４．３４ （ｓ、　４Ｈ）；　８．３４（ｄ、　２Ｈ，ｊ＝５．１Ｈｚ）；　８．９１（ｄ 、　２Ｈ。 Ｊ＝５−１）１ｚ） 実施例５２ ６．６′−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（ニドキシカルボニルメチル）−アミノメチル− ２−ピリジル）ケトン（５６）実施例４６記載の一般的操作を出発物質としての 化合物（４１）に適用してこの化合物を製造した。 収率：８２％ ＬＩＶ　（ＣＨ，Ｃｆｆ２中）：　２８０ｎｍ’ｌ（ＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　　 ＣＤＣｌ２５）：　　１．２１（ｔ、　　１２）り；　　３．６０（ｓ、　　８ Ｈ）；４．０８（ｓ、４Ｈ）；　　４．１５（ｑ、８Ｈ）；　　７．９５−７． ８０（ｍ、６Ｂ）実施例５３（スキーム２３） 出発物質としてσ、ω−ジアミノ酸の誘導体を用いる反応性配位子またはキレー ト合成のだめの一般的操作ａ）乾燥アセトニトリル（１０ｍＱ）中の適当なジハ ロメチルビピリジンまたはビビリミジン（１ミリモル）を、粉末状乾燥炭酸ナト リウム２ｇの存在下に化合物（４４）、（４６）、（４８）または（５０）の１ 種１ミリモルと室温ではげしく撹拌しながら反応させる。−夜撹拌後、未反応の ジハロメチル誘導体、ミノハロメチルジエステル、およびテトラエステルからな る得られる混合物を蒸発させ、トルエンと共沸させそしてフラッシュクロマトグ ラフイーシテ純粋なモノハロメチルジエステルを得る。 ｂ）　　Ｉられるモノハロメチルジエステル（０，２ミリモル）を乾燥アセトニ トリルと共沸させ、アセトニトリル３ｍＱ中に溶解しそして粉末炭酸ナトリウム １ｇ続いてイミノジ酢酸ジエチルエステル（０，２５ミリモル）を加える。この 混合物を一夜還流させ、枦遇しそして蒸発させる。短いカラムクロマトグラフィ ー後に所望の官能化されたテトラエステルが得られる。 Ｃ）実施例５３ａ）において化合物（４４）を出発物質として用いる場合は、ニ トロ基はエステル基加水分解およびキレート形成に先立ちアミンに還元されねば ならない。これは以下のようにして行われる。 実施例５３ｂ）からの混合物に固形水素化ホウ素ナトリウム（０，３ミリモル） 、統いて乾燥エタノール５ｍ（２中の１０％Ｐｄ／ＣＯ，２９を加える。生成す る混合物を室温で１０分間撹拌しそして飽和炭酸水素ナトリウムおよびクロロホ ルムの間に分配する。有機抽出液を蒸発させｔ；のちフラッシュクロマトグラフ ィーにかけると反応性アミン基を含有するそれぞれのテトラエステルが得られる 。 ｄ）実施例５３ａ）において化合物（５０）を出発物質として用いる場合はその 側鎖ヒドロキシル基はかかる配位子を次に他のヒドロキシル含有物質に結合せし めうるために活性化されねばならない。これは当業者に知られた幾通りかの方法 で実施できる。ここで我々は可能な方法の１つを提示するものであり、それは例 えば固相法により合成されたオリゴヌクレオチドに活性化された配位子を直接結 合させるのに適用できる。 無水ジクロロメタン（１０＋ｎｆｆ）中の実施例５３ｂ）からのヒドロキシテト ラエステルおよびジイソプロピルエチルアミン（４，６ミリモル）の混合物に２ −シアンエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルアミノホスホクロリデート（２ミリモ ル）を加える。室温で１５分間撹拌後この混合物を冷炭酸水素ナトリウム溶液で 洗い、ジクロロメタンで抽出し、蒸発させモして溶離溶媒として石油エーテル／ トリエチルアミン９：１を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精 製した。 実施例５１（スキーム１３） シュチルまたはテトラエチルエステルから出発するテトラ酸合成のための一般的 操作 ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカルボニルメチル）アミノメチル）誘導体（０， ２５ミリモル）をアセトン（１０＋ｘＩ２）中に溶解させた。ＩＮ水酸化ナトリ ウム溶液（１０ｍｆｆ）を加えた。１時間後溶液を濃塩酸で中和しそして塩の大 部分をアセトンの添加により沈澱させた。濾過後浴液を蒸発乾固させた。 実施例５５（スキーム１３） テトラ−ｔ−ブチルエステルから出発するテトラ酸合成のための一般的操作 ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（ｔ−ブトキシカルボニルメチル）アミノメチル）誘導体（ ０，２５ミリモル）をトリフルオロ酢ｒｌＪ　（１０＋＋＋１２）中に溶解させ た。５時間撹拌後トリフルオロ酢酸を蒸発させそして幾らかのジエチルエーテル を加えた。生成物を濾過して乾燥させた。 実施例　５６ ユーロピウムまたはテルビウムキレート合成のだめの一般的操作 テトラ酸（０，２０ミリモル）を水中に溶解させそしてｐ）Ｉを５．Ｑ〜５　、 ５７：調整した。水中に溶解したユーロピウムまたはテルビウムクロライド（０ ，２０ミリモル）を加えた。 ３０分間撹拌したのちｐＨを８．０に調整しそして沈澱を濾過しＩ；。水の大部 分を減圧下に蒸発させそして生成物をア七トンの添加により沈澱させた。 実施例５７（スキーム１４） ビピリジンテトラエステルをフェニルニアニル化するための操作 Ｊ、Ｋａｎｋａｒｅ他、　ＥＰ−Ａ−２０３，０４７参照４−ブロモ−６，６′ −ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（ｔ−ブトキシカルボニルメチル）アミノメチル）　−２ ，２’−ビピリジン（７５０ｍｇ、　１−０ミリモル）または相当する４、４′ −ジブロモ誘導体（４１４＋Ａｇ、　０．５０ミリモル）、ビス（トリフェニル ホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（１４，０ｍｇ、　０．０２０ミリ モル）および銅（１）ヨーダイト（７，６＋ｘｙ、　０．０４．０ミリモル）を 乾燥トリエチルアミン（１５１ＩｌΩ）中に溶解させた。その系に窒素ガスを１ ０分間吹き込んだのち置換アルキン（１，２ミリモル）を加えた。４０〜ｓｏ’ ｃで通常３時間撹拌後浴液を枦遇しそして沈澱を乾燥トリエチルアミンで洗った 。溶媒を蒸発させ、残留物をクロロホルム中に溶解させた。 水で抽出したのちクロロホルム相を乾燥し蒸発させた。 生成物を７ラツシユクロマトグラフイーにより精製しｌ；。 ４−（ｐ−アミノフェニルエチニル）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（ｔ−ブ トキシカルボニルメチル）アミノメチル−２，２’−ビピリジン（５７） ｐ−アミノフェニルアセチレンを置換アルキンとして使用。 ＵＶ（エタノール）　　：　３３８ｎｍ、　３１４ｎｎ＋、　２９４ｎｍ、　２ ３１ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣＱ、）：　　１．４７（ｓ、１８Ｈ ）；　　１．４８（ｓ、１８Ｂ）；３．５３（ｓ、４Ｈ）；　　３．５５（ｓ、 ４Ｈ）；　　４．１２（ｓ、２）１）；　　４−１３Ｃｓ。 ２Ｂ）；　　６．６５（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）；　　７．３６（ｃｉ、２ Ｈ，Ｊ−８，７）１ｚ）；７．６４（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；　　７．６ ７（ｄ、１８．Ｊ＝１．４Ｈｚ）；　　７．７８（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７．８Ｈｚ） ：　　８．３Ｑ（ｄ、１）］、Ｊ＝７．８）１ｚ）；　　８．３７（ｄ、３Ｂ。 Ｊ＝１．４Ｈｚ） 実施例５８（スキーム１４） ４−（ｐ−アミノフェニルエチニル）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボ キシメチル）アミノメチル）−２，２’−ビピリジン（５８） 実施例５５記載の方法に従い化合物（５７）を出発物質として使用。 ＵＶ（水中）　　：　２９７’ｎｍ ’ＨＮＭＲ（４００Ｍ）！ｚ、　ＤＭＳＯ）：　３．６８（ｓ、　４Ｈ）；　３ ．７０（ｓ、　４Ｈ）；４．２２（ｓ、　２Ｈ）；　４．３０（ｓ、　２Ｈ）； 　６．６２（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．３３（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝８． ０Ｈｚ）；　７．６５（ｓ、　１）１）；　７．６６（ｄ、　１）１゜Ｊ□７． ５Ｈｚ）；　８．０１（ｔ、　１．Ｈ，Ｊ□７．５Ｈｚ）；　８．２９（ｄ、　 ＩＨ，Ｊ□７．５Ｈｚ）；　８．３３（ｓ、　ＩＨ） 実施例５９（スキーム１４） ユーロピウムキレートとしての４−（ｐ−アミノフェニルエチニル）−６，６’ −ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル）　−２，２’−ビピ リジン（５９）実施例５６記載のユーロピウムキレート合成のための一般的操作 を化合物（５８）に適用して合成を行った。 ＬＩＶＣ水中）　：　３１７ｎｍ、　２４０ｎｍ莢施例　６０ インチオシアナートキレート合成のための一般的操作）Ｊｉｋｏｌａ他、　ＥＰ −Ａ−０１３９，６７５参照アミノキレート（０，０５ミリモルフを水３ｍＱ中 に溶解させそして炭酸水素ナトリウム（２０＋＋＋９）を加えた。このキレート 溶液をチオホスゲン溶液（クロロホルム（３ｍＱ”）中２０μｍ２）にゆっくり と加えそして３０分間撹拌した。相を分離しモして水相をクロロホルムで抽出し た。水相を少量となるまで蒸発させそして生成物をアセトンで沈澱させ、乾燥し た。 実施例６１（スキーム１４） ４−（ｐ−インチオシアナトフェニルエチニル）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビ ス（カルボキシメチル）アミノメチル）−２，２’−ビピリジン（６０） 実施例６０記載のインチオシアナート合成をキレート（５９）に適用。 ＵＶ（水中）：３１７ｎｍ 実施例６２（スキーム９） 化合物（５２）の（６１）−ホスファイトアミデート誘導体の合成 この合成は出発物質として化合物（５２）を用い、実質的に実施例５３ｄ）記載 の方法に従い実施した。 収率ニア２％ ’）ＩＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　ＣＤＣＪ）：　１．２０（ｄ、　６Ｈ，Ｊ＝２ Ｈｚ）；　１．２１（ｄ。 ６Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ）；　１．２５（ｔ、　６）！、　　Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．２ ７（ｔ、　６Ｈ。 Ｊ□７Ｈｚ）；　　２．６５（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝５Ｊ（ｚ）；　　３．６７（ｓ、 ８Ｂ）；　　３．６０−３．７０（ｍ、２Ｈ）；　　３．８：ｌ”３−９２（ｎ ＋、２Ｈ）３．９３−４．００（ｉｔ、１）１）；　　４．０４−４．１１（ｍ 、　　ＩＨ）；　　４−１０（ｓ、　　２Ｈ）；　　４．１５ぐｓ、　　２Ｈ） ；　　４−１７Ｃｑ、　　８１（。 Ｊ＝７Ｈｚ）；　　４．３０（ｔ、２Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ）；　　７．１８（ｄ、Ｉ ｎ、Ｊ＝２Ｈｚ）；７．５９（ｄ、］Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）；　　７．７６（ｔ、Ｉ Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）；　　７．８９（ｄ、ＬＨ。 Ｊ＝＝２Ｈｚ）；　　８．２９（ｄ、１８．Ｊ＝８Ｈｚ）”ＰＮＭＲ（ＣＤＣＱ ｓ）：　　１４８．９（ｓ）実施例６３（スキーム１０） ４．４’−（ビス（２−（ｐ−二トロフェニル）−エチル）−ａ、ａ′−ヒス（ Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカルボニルメチル）アミノメチル）−２，２’−ビピリ ジン（６２）実施例４６記載のテトラエステル合成のための一般法を化合物（３ ６）に適用。 収率：４５％ ＵＶ（エタノール中）　　：　２８２ｎｍ’）Ｉ’Ｎｌ１ｌＲ（６０ＭＨｚ、　 ＣＤＣｆｆ５）８１．２５（ｔ、　１２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）：　３−０９（ｂｓ。 ８Ｈ）；　３−６２（ｓ、　８Ｈ）；　４．１２（ｓ、　４Ｈ）；　４．１８（ ｑ、　８Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）；７．３５（ｄ、　４．Ｈ，Ｊ・９Ｈｚ）；　７．４ ３（ｓ、　２Ｈ）；　８．１５（ｄ、　４Ｈ。 Ｊ＝９Ｈｚ）；　８−１６（ｓ、　２Ｂ）実施例６４（スキーム１０） ４．４′−ビス（２−（ｐ−アミノフェニル）−エチル）−６，６’−ビス（Ｎ 、Ｎ−ビス（エトキシカルボニルメチル）アミノメチル）　−２，２’−ビピリ ジン（６３）実質的に実施例５３ｃ）の記載に従い、出発物質として化合物（６ ２）を用いて合成した。 収率：２８％ ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣｆｆ５）：　ｌ−２ｂ（Ｌ、　１２）１．　 Ｊ・７北）；　２．９１（ｂｓ。 ８Ｈ）；　　３．７０（ｓ、　　８Ｈ）；　　４−１２（ｓ、　　４Ｈ）；　　 ４．１８（ｑ、　　８Ｈ，Ｊ□７Ｈｚ）；６．６４（ｄ、　４Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ） ；　６．９９（ｃ５．４Ｈ，Ｊ−８北）；　７．３０（ｓ。 ２Ｈ）；　　８−１０（ｓ、　　２Ｈ）実施例６５（スキーム１０） ４．４′−ビス（２−（ｐ−アミノフェニル）−エチル）−６，６′−ビス（Ｎ 、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル−２，２′−ビピリジン（６４） 出発物質として化合物（６３）を用い、実施例５４記載の一般的方法に従って合 成した。 ｌ１Ｖ（水）　：　３００ｎｍ、　２８９ｎｍ、　２３５ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ ＭＨｚ、　ＤＭＳＯ）：　３．００（ｂｓ、　８Ｈ）；　３．３５（ｓ、　８） １）；３．６４（ｓ、　４Ｈ）；　６．６５（ｄ、　４Ｈ，Ｊ□８）１ｚ）；　 ７．０２（ｄ、　４Ｈ。 Ｊ＝８Ｈｚ）；　７．２８（ｓ、　２Ｈ）；　８．１０（ｓ、　２Ｈ）；実施例 ６６（スキーム１０） ユーロピウムキレートとしての４．４′−ビス（２−（ｐ−アミノフェニル）− エチル）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル） −２，２’−ビピリジン（６５） 出発物質として化合物（６４）を用い、ユーロピウムキレ−１成（実施例５６） について記載の一般的操作に従い合成した。 ＵＶ（水）　：　３１０ｎｍ、　２９９ｎｍ、　２３４ｎｍ実施例６７（スキー ム１０） ４．４′〜ビス（２−（ｐ−インチオシアナトフェニル）−エチル）−６，６’ −ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル）　−２，２’−ビピ リジンユーロピウムキレ−インチオシアナートキレート合成（実施例６０）のた めの一般的操作を化合物（６５）に適用して合成。 ＬＩＶ（水）　　：　３１８ｎｍ、　２８０ｎｍ実施例６８（スキーム５） ６．６′−ジメチル−４，４′−ジフェニル−２，２′−ビピリジンＦ、Ｋｒｏ ｅｈｎｋｅ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、　ｌ−２４（１９７６）参照２、．６２ｇ （１０，０ミリモル）の１．６−ジフェニル−３，４−ジオキソ−ブタン−１， ５−ジエン、３．４３ｇ（２０ミリモル）のアセトニルピリジニウムクロライド 、２０ｇの酢酸アンモニウムおよび１００ｍｆｆのメタノールを４時間還流した 。０℃に冷却したのち沈澱した生成物を濾過してメタノールから再結晶した。 収率：４０％ ＵＶ（エタノール）　　：　３０２ｎｍ、　２４６ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ 、　ＣＤＣＬ）：　２．７０（ｓ、　６Ｈ）；　７．４１−７．７９（ｍ。 １２Ｈ）；　８．５０（ｓ、　２Ｈ） 実施例６９（スキーム＋５Ａ） ６．６′−ビス（ブロモメチル）−４，４’−ジフェニル−２，２′−ビピリジ ン（６８） ジメチル化合物のＮ−ハロスクシンイミドを用いるハロゲン化について実施例２ ９に記載の一般的操作に従い合成　しｔこ。 収率：３２％ ＵＶ（エタノール）　　：　２９９ｎｍ、　２５２ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０ＭＨｚ 、　　ＣＤＣｆｆ５）：　　４−７１（ｓ、　　４Ｈ）；　　７．４５−７．７ ４（ｍ。 １２Ｈ）；　　８．６ｇ（ｄ、　　２Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ）実施例７０（スキーム１ ５Ａ） ４．４’−ジフェニル−６−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）　−Ｎ−（１ −（５−（ｐ−ニトロベンズアミド））−１−（エトキシカルボニル）−ペンチ ル）−アミノメチル）−６′−ブロモメチル−２，２′−ビピリジン（化合物（ ６９））および４．４′−シフユニルー６．６′−ビス（Ｎ−（メトキシカルボ ニルメチル）　−Ｎ−（１−（５−（ｐ−ニトロベンズアミド））−１−（エト キシカルボニル）−ペンチル）アミノメチル）　−２，２’−ビピリジン化合物 （７０））実施例５３ａ記載の一般的操作に従い、６，６′−ビス（ブロモメチ ル）−４，４’−ジフェニル−２，２′−ビピリジン（６８）および修飾された イミノジ酢酸エステル（化合物４４）を１：１２の比率で用いた場合にジエステ ル化合物およびテトラエステル化合物の両方が得られた。 化合物（６９） 収率：４１％ ’ＨＮＮＲ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱｓ）：　１．２６（ｔ、　３Ｈ，Ｊ、Ｉ＝ ７Ｈｚ）；　１．５６−１．９０（ｃｏ、　６Ｈ）；　３．３０−３．５４（ｍ 、　３Ｈ）；　３．５４（ｓ、　３Ｈ）；　３．７５（ｓ。 ２Ｈ）；　４−１４Ｃｓ、　２Ｂ）；　４−１９（ｑ、　２Ｈ，Ｊ□７Ｈｚ）； 　４．７０（ｓ。 ２Ｈ）：　　７．３６−７．８５（ｍ、１２Ｈ）；　　７．７８（ｄ、２）１． Ｊ＝９Ｈｚ）；　　８．１２（ｄ。 ２Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）；　　８．６０（ｄ、　　ＩＨ，Ｊ＝２）１ｚ）；　　８． ６３（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝２Ｈｚ）化合物（７０） 収率：２１％ ’ＨＮＭ、Ｒ（６０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱ３）：、　１−２８（ｔ、　６Ｈ，Ｊ・ ７Ｈｚ）；　１．５６−１．９０（ｍ、　１２Ｈ）；　３．２ｇ−３，５０（ｍ 、　６Ｈ）；　３．５６（ｓ、　６）１）；　３．７４（ｓ、　４Ｂ）；　４． ］４（ｓ、　４Ｈ）；　４．２０（ｑ、　４Ｈ，Ｊ□７Ｈｚ）；　７−３６−７ ．８０（ｍ、　１２Ｈ）；　７．８０（ａ、　４Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）；　８．１０ （ｄ、　４Ｈ。 Ｊ・９１（ｚ）；　８．５７（（］、　２Ｈ，Ｊ＝２１（Ｚ）実施例７１（スキ ーム１５Ａ） ４．４′−ジフェニル−６−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）　−Ｎ　−（ １−（５−（ｐ−ニトロベンズアミド））−１＝エトキシカルボニル）−ペンチ ル）−アミノメチル）−６’−（Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカルボニルメチル）ア ミノメチル−２，２′−ビピリジン（７１）この化合物は出発物質として化合物 （６９）およびジエチルイミノジアセテートを用い、実施例５３ｂ記載の一般的 なテトラエステル合成操作に従い合成した。 収率：５１％ ＵＶ（エタノール）　　：　３００ｎｍ、　２５２ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００ＭＨ ｚ、　ＣＤＣＬ）：　１．２１（ｔ、　６Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．２７（ｔ。 ３Ｈ，Ｊ１１７Ｈｚ）；　１．５０−１．９０Ｃｍ、　６Ｈ）；　３．３５−３ ．５０（ｍ、　３Ｈ）：３．５７（ｓ、　３Ｈ）；：　３．７１（ｓ、　６Ｈ） ；　４．１４（ｑ、　６）１．　Ｊ□７Ｈｚ）；４．１８（ｓ、　２Ｈ）；　４ ．１９（ｓ、　２Ｈ）；　７．４５−７．８３（ｍ、　１２Ｈ）；　７．７３（ ｄ、　２Ｈ，Ｊ・８）１ｚ）；　８．１１（ｄ、　２Ｈ，Ｊ・８）１ｚ）；　８ ．５８（ｄ、　２Ｈ。 Ｊ：２Ｈ２） 実施例７２（スキーム１５Ｂ） ４．４′−ジフェニル−６，６′〜ビス（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル ミド））−１−（ニドキシカルボニル）−ペンチル）アミノメチル）−２．２’ −ビピリジン（７２）実施例５３ｃ記載の一般的操作に従い、Ｐｄ／Ｃおよび水 素化ホウ素ナトリウムを用いて化合物（７０）を還元した。 収率ニア５％ １１Ｖ　（エタノール）　　：　２７０ｎｍ，　２５６ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０　 ＭＨｚ，　ＣＤＣＪ）：　１−２５（５　６Ｈ，　Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．４３− １、８７（ｍ，　６Ｈ）；　３．２２−３．５２（ｍ，　６Ｈ）；　３．６１（ ｓ．　６Ｂ）；　３．７１（ｓ。 ４Ｈ）；　４．１６（ｑ，　４Ｈ，　Ｊ−７Ｈｚ）、　４．１９（ｓ．　４Ｈ） ；　６．５５（ｄ，　４Ｈ。 Ｊ＝８Ｈｚ）；　７．３８−７．９１（ｍ．　１２）ｔ）、　７．５３（ｄ，　 ４Ｈ，　Ｊ＝８Ｈｚ）；８、６２（ｄ．　２Ｉ（、　Ｊ・２）１ｚ）実施例７３ （スキーム１５） ４、ｃ−　ジフェニル−６−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）　−Ｎ　−　 （１　−　（５　−　（ｐ−アミノベンズアミド））−ｉ−ｃエトキシカルボニ ル）−ペンチル）−アミノメチル）　＝６’−　（Ｎ，Ｎ−ビス（エトキシカル ボニルメチル）アミンメチル−２．２′−ビピリジン（７３）この化合物は出発 物質として化合物（７１）を用い実施例７２記載の方法と同様にして合成した。 収率ニア９％ ＵＶ（エタノール）　　：　２５２ｎｍ’ＨＮＭＲ（６０　　ＭＨｚ，ＣＤＣｆ ｆ＊）：　　１．２５（ｔ．９Ｌ　　Ｊ＝７）１ｚ）；　　１．４７−１、８７ （ｒｎ，　６）１）；　３．２５−３−４７Ｃｍ，　３］（）；　３−６１（ｓ ，　３Ｂ）；　３−６９（ｓ。 ４Ｊ（）；　　３．７１Ｃｓ．　　２Ｈ）；　　４−１６（ｑ，　　６Ｈ，　　 Ｊ−７Ｈｚ）；　　４−２２（ｓ。 ４Ｂ）；　　６．５７（ｄ，　　２Ｂ，　　Ｊ＝８Ｈｚ）；　　７．３９−７． ９１（ｍ．　　１２Ｈ）；　　７．５３（ｄ．　　２）！，　　Ｊ＝８Ｈｚ）； 　　８．６０（ｄ．　　ＩＨ，　　Ｊ＝２Ｈｚ）；　　８．６３（ｄ，　　ＩＨ 。 ｊ；２Ｈｚ） 実施例７４（スキーム１５） ４、４′−ジフェニル−６、６′−ビス（Ｎ−　（カルボキシメチル）　−Ｎ− 　（１　−　（５　−　（ｐ−アミノベンズアミド））−１−　カルボキシペン チル）アミノメチル”）　−２．２’−ビピリジンおよび相当するユーロピウム キレート（７４）化合物（７２）を出発物質として使用して、テトラエステル加 ′水分解のｔ；めの一般的操作（実施例５５）およびユーロピウムキレート形成 （一般的実施例５６）に従い標記化−合物を得た。 ＵＶ（ナトリウム塩として）：２６１ｎｍＵＶ　（Ｅｕ”錯塩として）　　：　 ３３０ｎｍ，　３１５ｎｍ，　２６８ｎｍ実施例７５（スキーム１５） ４、４′−ジフェニル−６−ＣＮ−Ｃカルボキシメチル）−Ｎ　−　（］　−（ （５　−　（ｐ−アミノベンズアミド））−１−カルボキシペンチル）アミノメ チル）　−６’−（Ｎ，Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル）−２．２ ’−ビピリジンおよび相当するユーロピウムキレート（７５）出発物質として化 合物（７１）を用い、テトラエステル加水分解のための一般的操作（実施例５５ ）およびユーロピウムキレート形成（一般的実施例５６に同じ）に従い標記化合 物を得た。 ＬＩＶ（ナトリウム塩として）　　：　３１０ｎｍ．　２５６ｎｍｔ］Ｖ（Ｅｕ ”錯塩として）　　：　３３０ｎｍ．　３１５ｎｍ．　２６１ｎｍ実施例７６（ スキーム１６） ４−エトキシ−６、６′−ビス（ブロモメチル）−２．２’−ビピリジン（７６ ） 出発物質として化合物（２２）を用い、Ｎ−ハロスクシンイミドを用いるジメチ ル化合物のハロゲン化に関する実施例２９Ａ記載の一般的操作に従いこの化合物 を合成した。 収率：１９％ ＵＶ（エタノール）　　：　２８６ｎｍ，　２２５ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００　Ｍ Ｈｚ．ＣＤＣＩ２ｓ）：　　１．４５（ｔ，Ｊ−７．０　Ｈｚ）；　　４．１９ （ｑ。 Ｊ＝７．０Ｈｚ）；　　ｉｌ．５５（ｓ）；　　４．６０（ｓ）；　　６．９５ （ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ）；　　７．４３（ｄｄ，　Ｊ＝０．９Ｈｚおよび７．６ Ｈｚ）；　７．７７（ｔ，　Ｊ＝７．６Ｈｚ）；　７．９０（ｄ。 Ｊ□２．３Ｈｚ）；　８．３５（ｄｄ，　Ｊ−０．９）１ｚおよび７．６Ｈｚ） 実施例７７（スキーム１６） ４−エトキシ−６−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−Ｎ　−　（１　−　 （５　−　（ｐ−ニトロベンズアミド））−１−エトキシカルボニル）−ペンチ ル）−アミノメチル）−６′−ブロモメチル−２，２′−ビピリジン（７７）実 施例５３ａ記載の一般的操作により合成。出発物質としては４−二トキシ−６、 ６′−ビス（ブロモメチル）−　２．２’−ビピリジン（７６）８よび修飾され たイミノジ酢酸ニスチル（化合物４４）が用いられた。 収率：３８％ ＵＶ（エタノール）　　：　２８６ｎｍ，　２２０ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００　Ｍ Ｈｚ，　ＣＤＣＬ）：　Ｉ−３０（ｔ，　Ｊ□７Ｈｚ）；　１．４５（ｔ。 Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．５５−１．６８（ｍ．）；　１．７５−１．８３（ｍ）； 　３−４５（ｍ）；　３．５０（＋ｎ）；　３．５５（ｄ，　Ｊ＝１５Ｈｚ）； 　３．６４（ｓ）；　３．６６（ｄ，　Ｊ＝１５Ｈｚ）；３、９４（ｄ，　　Ｊ ＝１５Ｈｚ）；　　ＬＯ３Ｃｄ，　　ノー２５Ｈｚ）；　　４．１８（ｑ．　　 Ｊ＝７Ｂｚ＞；４、１９（ｑ．　Ｊ＝７Ｈｚ）；　４−５８（ｓ）；　６．８３ （ｓ）；　７．４５（ｓ）；　７．６２（ｄ。 Ｊ＝７Ｈｚ）；　７．７６（ｔ，　Ｊ＝７Ｈｚ）；　８．００（ｄ，　Ｊ＝９） １ｚ）；　８．２５（ｄ。 Ｊ□９Ｈｚ）；　８．２８（ｄ，　Ｊ＝７Ｈｚ）；　８．３５（ｓ）実施例７８ （スキーム１６） ４−エトキシ−６−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−Ｎ　−　（１　−　 （５　−　（ｐ−ニトロベンズアミド））−ｌ−（エトキシカルボニル）−ペン チル）−アミノメチル−６’−　（Ｎ，Ｎ−ビス（エトキシカルボニルメチル） −アミノメチル−２．２′−ビピリジン（７８）出発物質として化合物（７７） およびジエチルアミノジアセテートを用い、実施例５３ｂ記載のテトラエステル 合成一般操作に従い合成した。 収率：６２％ ＵＶ（エタノール）　　：　２８７ｎｍ．　２２２ｎｍ’ＨＮＭＲ（４００　Ｍ Ｈｚ，　ＣＤＣＱｓ）：　１−２６（ｔ，　Ｊ＝７）ＴＺ）；　１−２８（ｔ， 　Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．４６（ｔ，　Ｊ＝７Ｈｚ）：　１．５９（ｍ）；　１． ７６（ｍ）；　３．３５（！ｌ）；３、４９（ｍ）；　３．５８（ｄ，　Ｊｉ５ Ｈｚ）：　３．６５（ｓ）；　３．６６（ｓ）；　３．６７（ｓ）；　３．７１ Ｃｄ，　Ｊ＝１５Ｈｚ）；　３．９６（ｄ，　Ｊ＝１５Ｈｚ）；　４．０５（ｄ 。 Ｊ□１５Ｈｚ）；　　４．０９（ｓ）；　　４．１４（ｑ、Ｊ・７Ｈｚ）；　　 ４．１７（ｑ、、ｈ７Ｈｚ）：６．８８（ｓ）；　　７．１５（ｄ、Ｊ□２Ｈｚ ）；　　７．５０（ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ）；　　７．７５（ｄ。 Ｊ＝７）Ｉｚ）；　　７．８３（ｄ、Ｊ□２Ｈｚ）；　　８．０ＩＣｄ、Ｊ＝９ Ｈｚ）；　　８．２４（ｄ、ＪＲ７Ｈｚ）；　　８−２６（ｄ、Ｊ＝９）Ｉｚ） 実施例７９（スキーム］６） ４−エトキシ−６−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−Ｎ−（１−（５−（ ｐ−アミノベンズアミド））−１−（エトキシカルボニル）−ペンチル）−アミ ノメチル）−６’　−（Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカルボニルメチル）アミノメチ ル）−２，２’−ビピリジン（７９）この化合物は出発物質として化合物（７８ ）を用いて実施例５３ｃ記載のニトロ基還元一般操作に従い合成した。 収率ニア１％ ＬＩＶ（エタノール）　　：　２８６ｎｍ、、　２２２ｎｒＱ’ＨＮＭＲ（４０ ０ＭＨｚ、　ＣＤＣＱ３”）：　１．２６（ｔ、　Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．２８（ ｔ。 Ｊ＝７Ｈｚ）；　１．４６（ｔ、　Ｊ□７Ｈｚ）；　１−１−６０（；　１．７ ５（＋ｎ）；　３．４１（ｍ）；３．４４（ｍ）；　３．５４（ｄ、　Ｊ＝１５ Ｈｚ）；　３．６２（ｄ、　Ｊ＝１５Ｈｚ）；　３．６４（ｓ）；　３．６９（ ｓ）；　３．９２（ｄ、　Ｊ＝１５Ｈｚ）；　４．０！（ｓ）；　４−０４（ｄ 。 Ｊ・１５Ｈｚ）；　４．１６（ｑ、　Ｊ＝７Ｈｚ）；　４．１７（ｑ、　Ｊ□７ Ｈｚ）；　６．３０（ｓ）；６Ｊ４（ｄ、　Ｊ＝９Ｈｚ）；　７．１６（ｄ、　 Ｊ−２Ｈｚ）：　７．５０（ｄ、　Ｊ−７Ｈｚ）；７．６３（ｄ、　ＪＩ＝９Ｈ ｚ）；　７．７８Ｃｔ、　Ｊ□７Ｈｚ）；　７．８０Ｃｄ、　Ｊ−２Ｈｚ）：８ −２４＜ｓ、　Ｊ−７Ｈｚ） 実施例８０（スキーム１６） ４−エトキシ−６−（Ｎ−（カルボキシメチル）−Ｎ−（１−（５−（ｐ−アミ ノベンズアミド））−１−力ルポキシベンチル）アミノメチル）−６’−（Ｎ、 Ｎ−ビス（カルボキシメチル）−アミノメチル）　−２，２’−ビピリジン（８ ０）および相当するユーロピウムキレート（８１）化合物（７９）を実施例５４ 記載の一般的操作に従い加水分解しそして化合物（８０）から出発して実施例５ ６の記載に従いユーロピウムキレートを形成させた。 ＵＶ（水中でナトリウム塩として）　：　２９５ｎｍ、　２８６ｎｍ、　２２５ ｎｍ［ＩＶ（水中でユーロピウムキレートとして）　　：　３０８ｎｍ。 ２９０ｎｍ、　２３０ｎｍ 実施例８１（スキーム１６） ユーロピウムキレートとしての４−エトキシ−６−（Ｎ−（カルボキシメチル） −Ｎ−（１−（５−（ｐ−インチオシアナトベンズアミド乃−１−カルボキシペ ンチル）アミノメチル）−６’−（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）−アミノ メチル）−２，２’−ビピリジン（８２）化合物（８１）中のアミン基を実施例 ６０記載の一般的操作に従いインチオシアナト基に変換した。 ＵＶ（水）　　＝　３Ｃ１９ｎｍ、　２９０ｎｍ、　２２８ｎｍ突施＠８２（ス キーム６ン ６−（Ｎ−（カルボキシメチル）　−Ｎ−（１−（５−（ｐ−インチオシアナト ベンズアミド））−１−カルボキシペンチル）−アミノメチル）　−６’−Ｎ、 Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル−２，２′−ジピリジルケトンこの 化合物は化合物（８２）合成操作と支質的に同じ操作を用いて製造した。ビス（ ６−プロモメチルー２−ピリジル）ケトン（４１）を実施例７７の記載に従い、 修飾されたイミノジ酢酸（４４）と反応させた。実施例７８−７９−８０記載の 操作に従い、これをユーロピウムキレートのアミノ形に変換した。このアミノ基 を実施例８１記載の操作と同様にしてチオホスゲンと反応させて活性インチオシ アナートキレート（８３）を形成させた。 実施例８３ 多重標識に本発明のランタニドキレートを用いる蛍光測定法 ヒトラミニン（Ｉａｍｉｎｊｎｅ）　８よびケラチンに対するモノクローナル抗 体（］００ｍ９をＥｕキレートのインチオシアナート誘導体（８２）および（８ ３）の１００倍モル過剰でΣす々に標識した。この標識化は５０ｍＭ炭酸塩緩衝 液ｐＨ９，８中で一夜インキユベートすることにより行われた。次にこの標識さ れｔ；抗体をセファデックスＧ５０カラム（１，５Ｘ　３０ｃｍ）でゲル濾過し 、ＮａＣＱ９９／　ＱおよびＮａＮ５０．５ｇ／　”を含有するトリス−ＨＣｌ ２　（５０＋ｎＭ、　ｐＨ７，７５）を用いて溶離することにより、遊離のキレ ートから精製した。結合されたキレートは酸でカチオン解離させたのちＥｕ”を 測定することにより定量した（）Ｉｅｍｍｉｌｉ他、　　Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈ ｅｍ、　　１９８４；１３７：　３３５〜４３）。 組織のクリオスタット切片を過沃素酸基−リジンーバラホルムアルデヒド固定液 中で固定した。免疫蛍光染色は標準的操作に従い行つＩ；、標識された抗体を１ ：１０〜１　二１０００までの希釈度で用い、スライドと＋４℃で一夜インキユ ベーションした。切片をエタノールで脱水しそしてエビイルミネーションフィル ターブロックおよび水銀ランプを備えた蛍光顕微鏡（Ｌａｉｔｚ　Ｄｉａｌｕｘ ）を用いてカバーをはずして観察した。励起には３４０ｎｍ〜３８０ｎｍのバン ドパスフィルターが用いられそして発光には６１３ｎｍの狭いバンドパスを有す るフィルターが用いられた。 キレートの蛍光はＫａｎｋａｒｅ他の方法（ヨーロッパ特許出願８６８５０１７ ２．７ンにより測定した。 キレートの相対的な蛍光は下記式を用いて計算されブこ。 （ここでＩ　ｃｈ＋および１．はキレートの前指数期間であり、モしてＥｕ”（ ａｑＸ標準物として使用）　＋　ＣｔｋｇおよびＣＫｓはそれらの濃度であり、 そしてｋ　ｃ　ｋ　ｔおよびに０．はそれぞれそれらの崩壊定数である。） キレートの蛍光の溶媒効果を検査するには、蛍光をホいくつかのキレートの蛍光 特性を第１表に示す。 スキーム５　　　　　　　（６７）　　Ｒ−フェニル国際調査報告 、、１．、＋、１゜＋、Ａ、８．．８．４．Ｐ・；τ、Ｓ本９１０ＯＣＴニー― −綽ｍｌ＾赫−ミー１１−嶋　ＰＣτ、′Ｓ三ε９．’ＯＯ０７３

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．異なる標的構造を特異的に標識するための２種またはそれ以上の蛍光プロー ブを使用することによる該構造を検出するための分光蛍光測定法において、前記 プローブが最大励起波長および／または発光波長が相異する蛍光性ランタニドキ レート構造を含むことからなる改良。
2. ２．前記プローブの少くとも２種がそれらの最大励起波長において相異すること からなる請求の範囲１記載の方法。
3. ３．前記プローブの少くとも２種がそれらの最大発光波長において相異すること からなる請求の範囲１記載の方法。
4. ４．前記プローブの少くとも１種が下記式（Ｎ）で示される構造を有することか らなる請求の範囲１〜３のいずれかに記載の方法。
5. ５．下記式（ＩＶ）で示される構造を有するキレート形成性化合物または構造（ ＩＶ）の酸、エステル、塩およびそのキレート形成性ヘテロ原子の１個またはそ れ以上がキレート体のどれかに変換されたキレート体。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 親化合物置換基 式ＩＶ ここで上式中、 ｉ）Ａ１〜Ａ６は、炭素原子および窒素原子からなる群がら選択される１個の原 子であり、好ましくはＡ１、Ａ２、Ａ３の１個のみおよび／またはＡ４、Ａ５、 Ａ６の１個のみ、例えばＡ１もしくはＡ３およびＡ４もしくはＡ６が窒素であり 、 ｉｉ）ｎは整数０、１または２、好ましくは１であり、ｉｉｉ）Ｒ１〜Ｒ６のそ れぞれはそれらが結合しているＡが窒素である場合は存在せず、そして炭素原子 である各Ａに関してはＲ１〜Ｒ６はａ）水素およびｂ）炭素一、酸素一および／ または窒素一含有基からなる群から選択され、 ｉｖ）ＺおよびＺ′は同じかまたは相異なる構造を表わし、そのそれぞれは遊離 電子対を有する少くとも１個のヘテロ原子を含有していて該少くとも１個のヘテ ロ原子が式（ＩＶ）に示される複素環のヘテロ原子と一緒になって金属イオンを キレート化できるようになつており、 ｖ）Ｂはａ）式（ＩＶ）に示される複素環の間に電子を非局在化させ、そしてｂ ）式（ＩＶ）中に示される２個の窒素原子をキレート化された金属イオンに同時 に配位せしめて５−または６−員環を形成させうる架橋を表わし、 ｖｉ）−−−−−−は基Ｘ−Ｙが親化合物中の任意の場所にある水素と置換する 置換基であることを明示し、そして ｖｉｉ）Ｘ−Ｙは前記キレート化に対して不活性な有機基を表わし、ここでＸは 不活性かつ安定な架橋でありそしてＹは（ａ）官能基であるか、または（ｂ）前 記架橋が、Ｘ−Ｙが置換基である場合に式（ＩＶ）中に示される後索環の１つか ら前記基Ｙを分離させる脂肪族炭素原子を有するという条件で、Ｙは式（ＩＶ） の化合物（ｎ＝０）に付与される性質を有する有機化合物（Ｙ′）の残基であり 、 ここでさらに、ランタニド以外のキレート形成性金属イオンを有するキレートに 関してはＲ１〜Ｒ６の少くとも１個はｎ＝０、Ｚ＝Ｚ′、Ｚ＝Ｚ′＝−Ｎ−（Ｃ Ｈ２ＣＯＯ−）２およびＡ１〜Ａ６全部が炭素である場合に水素ではないものと する。
6. ６．ＺおよびＺ′が等しいことを特徴とする請求の範囲５記載の化合物。
7. ７．ＺおよびＺ′中の前記少くとも１個のヘテロ原子が、例えば第一、第二およ び第三アミン中におけるような窒素、ＣＯＯ−中におけるような負に荷電した酸 素、ホスホネートおよびホスヘートからなる群から選択されることを特徴とする 請求の範囲５〜６のいずれかに記載の化合物。
8. ８．ＺおよびＺ′中の前記ヘテロ原子の１個が、多くとも２個の炭素原子を有す る脂肪族炭素架橋を介して式（ＩＶ）中の複素環の１つに連結された窒素原子で あることを特徴とする請求の範囲５〜７のいずれかに記載の化合物。
9. ９．ＺおよびＺ′の少くとも１個がＮ−ビスカルボキシメチルアミノ基であるこ とを特徴とする請求の範囲５〜８のいずれかに記載の化合物。
10. １０．ｎ＝１でありそしてＸ−ＹがＲ１〜Ｒ６の１個と置換しており、一方Ｘ− Ｙが結合されているＡが炭素であることを特徴とする請求の範囲５〜９のいずれ かに記載の化合物。
11. １１．Ｘ−ＹがＺおよびＺ′の少くとも一方中の水素と置換したものであること を特徴とする請求の範囲５〜１０のいずれかに記載の化合物。
12. １２．Ｙが生物特異的アフィニティ反応に関与しうる分子の残基であることを特 徴とする請求の範囲５〜１１のいずれかに記載の化合物。