JPH02304068A

JPH02304068A - 置換された１，４，７，１０‐テトラアザシクロトリデカン

Info

Publication number: JPH02304068A
Application number: JP2093273A
Authority: JP
Inventors: Helmut Dr Maecke; ヘルムート・メツケ
Original assignee: Hoechst AG
Current assignee: Hoechst AG
Priority date: 1989-04-11
Filing date: 1990-04-10
Publication date: 1990-12-17
Also published as: EP0392423A3; EP0392423A2; DE3911816A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】発明、明は物質を放射性核種特に慾、耐性テクネチウム
、レニウムまたはインジウムで標識する□ のに適す、る置換された１、４，７，１．０７テトラア
ザシクロトリデカンに関する。

放射性核種は産業上様々の用途を有する。例えば等質性
の試験、希釈汁析による量または体積の測定、流量の側
布および連、統操業している一７＝生産プラント内の滞溜時間の記録にまで広がっている。

し、かじながら通常は単に放射性核種を混合するだけで
は不充分であ１す、逆に例えば系内における特定の成分
を「追跡コする場、合放射性核種を物理的にまたはより
良好、には、化学的、に検査しようとする成分の少なく
とも一つの化合物に結合させそして可能ならばこれを閃
連する化合物の物理的および化学的な特性に影響を、及
ぼすことなく行う必要が有る。

近年化学的化合物を放射性核種で、標識する必要が増、
大している。特に医療診、断の、領、５域４に於て、体
内でｐｐｍかそれ以下の低い濃度でしか発生５しない物
質によっても病理学的状態を示すことができる場合、も
はや放射性標識された物質なしですますことはできない
。　　　　　　　　　。

特にテクネチウム−９９ｍは核医学的診断において最も
重要な放射性核種となって、きているかこれはその好ま
しい５物理的性質すなわち粒子線がないこ２と、γエネ
ルギーが１４０ＫｅＶである。ことおよび半減期が６時
間であることそして、それらに伴っての放射線量、の低
さか、ら工ある。

テクネチウム、−！１１　’ｊ、ｍは核種発生器から得
られ、初めはパーテクネテートの彎態であり例えば甲状
腺および脳のシンチグラフィーに適している。

チク、ネチウ、、、Ｌ、　−、，９（Ｊｍを用いる他の
器官のシンチグラフィーは一方、ではチフィ・チウムと
結合工き、しか、も他方では高い選択、性をもって標的
器官に１放射性核種を集中させることができる特定の「
、輸送物質」・を用いて行うことができる。

−５器、宣特異的な、、「輸注物質」をテクネチウム−
９９ｍで、標−ス、、るには、核種発生器から溶出され
るビ（−テクネチウムを初めにより低次の酸化状、態に
変換・する必要がある。この還元された形態においてテ
クネチウムは器官特異的な物質と多かれ少なかれ安定な
化合物を形成する。骨のシンチグラフイーには、例えば
Ｔｃ−９９ｍ／燐酸誘導体、とりわけ有機ホスホン酸が
用いられる。従ってヨーロッパ特許第２４８５号に記載
される標識化単位中の器官特異的な「輸送物質」は３，
３−ジホスホン−１，２−プロパンジカルボン酸のナト
リウム塩である。ヨーロッパ特許第１０８，２５３号に
はＲＥＳ、特に肝臓のシンチグラフィー像形成にＴｃ−
９９ｍ／　トリおよびテトラホスホン酸が記載されてい
る。ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）とＴ
ｃ−９９ｍとの錯体は腎臓疾患および脳の病理学的経過
の診断法に使用される。

特定の物質をテクネチウム−９９ｍで標識したり日常的
な医療上の要求に適する試験キットを調製するための種
々の特殊な方法が開発されておりまた記述されている。

生物学的に興味ある高分子特にポルフィリン、デキスト
ラン、シトクロムおよびミオグロビンのための標識キッ
トの調製方法が記載されており（Ｇ、Ｄ、　Ｚａｎｅｌ
ｌｉ。

Ｄ、Ｅｌｌｉｓｏｎ、Ｍ、Ｐ、Ｂａｒｒｏｗｃｌｉｆｆ
ｅ、Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ。

Ｃｏｍｍｕｎｓ　８．１９９−２０６．１９８７）ここ
では標識される物質はバラアミノ安息香酸および塩酸中
の５ｎＣ１２２の溶液と共に凍結乾燥される。このキッ
トは前厄って充分な緩衝液例えばクエン酸塩／塩化ナト
リウム緩衝液ｐＨ９，５で希釈されたＴｃ−９９ｍ発生
器からの溶離液を加えることにより再構成され、標識さ
れる。しかしこの方法は酸に感じやすい物質には適さな
い。

他の方法（Ｅ、に、Ｊ、　Ｐａｕｗｅｌｓ、　Ｒ，１，
Ｊ、　ＦｅｉＬｓｍａ。

Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ＩｎＬ、　Ｐ
ｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ、　ＷＯ３６／　０３０１
０）ではＴｃ−９９ｍ−バーテクネテートを初めに１４
０℃で４時間濃塩酸溶液中で加熱することにより還元し
そしてアミノ基例えばジメチルホルムアミドを含有する
化合物と結合させる。

難溶性結晶物質として沈殿する反応性ＴＣ−９９ｍ標識
中間体は緩衝溶液例えば炭酸ナトリウム溶液中で標識さ
れる化合物と１時間室温でインキュベートすることによ
り反応させる。この方法は錫無しで行うが骨の折れる方
法であるので日常的に使用するには殆ど適さない。

蛋白質特に抗体を標識するには２つの異った方法が知ら
れている。直接法では還元したテクネチウム−９９ｍを
蛋白質上のドナー基（アミノ、アミド、チオール等）に
より結合させる。

この方式はヨーロッパ特許第５６３８号および米国特許
第４，４７８，８１５号に記載されている。そこではジ
スルフイツド橋の還元による開裂および添加されたＴｃ
−９９ｍ−パーテクネテートの還元を同時に行うために
スズ（Ｉ［）塩が過剰に使用される。一般的には−３−
５結合の開裂には比較的長いインキュベーション時間（
２４時間）を必要とし、その間にＦ（ａｂ’）ｚ　７ラ
グメントが部分的にＦ（ａｂ’）７ラグメントに開裂さ
れる。最近の文献の記載〔例えばＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ２７　　（１９８
６）、６８５〜９３および１３１５〜２０およびＩｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａ、Ｉ　　Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｒ　
　Ｎｕｃｌｅａｒ　　ＭｅｄｉｃｉｎｅＢｉｏｌｏｇｙ
　１２　（１９８５）　３〜８〕には、これら２種の７
ラグメントの比率は「スズ化反応」に依存していること
、および２種の成分の比率の変化はＴｃ−９９ｍ標識後
はごくわずかであり主成分はＴｃ−９９ｍ標識されたＦ
（ａｂ’）であることが示されている。すべての場合に
、標識されたＦ（ａｂ’）フラグメントは後は精製され
なければならないがこれは反応時間が少くとも３０分間
あるにもかかわらずパーテクネテートの定量的変換が達
成されないからである。

ヒト血清蛋白質をＴｃ−９９ｍ標識するための迅速な化
学的方法（Ｄ、Ｗ、　Ｗｏｎｇ、　Ｆ、　Ｍｉｓｈｋｉ
ｎ、　Ｔ、　ＬｅｅｓＪ、　Ｎｕｃｌ、　Ｍｅｄ、　２
０．９６７−７２．１９７９）においてバーテクネテー
トは酸性溶液中で錫（Ｉ［）イオンで還元され次に還元
されたテクネチウムは蛋白質と反応する。

放射性同位元素による物質の安定な標識は、２官能性錯
化剤の助けにより達成することができる。

米国特許第４．４７９，９３０号は、ＤＴＰＡおよびＥ
ＤＴＡの環状無水物はＩｎ−ｌ１ｌおよびＧａ−６７の
みならずＴｃ−９９ｍ用のキレート剤であると述べてい
る。ヨーロッパ特許第３５．７６５号には蛋白質のテク
ネチウム−９９ｍ７の錯化剤としてデフエロキサミン（
ｄｅｆｅｒｏ−ｘａｍｉｎｅ）の使用が記載されている
。国際特許出願ｗｏ　８５／３０６３号においては部分
的に還元された抗体のジスルフィド橋をテトラクロロニ
トリドテクネテートのナトリウム塩（これはパーテクネ
テートとアジ化ナトリウムとの反応により予め調製され
ねばならない）と反応させている。ヨーロッパ特許出願
第１９４８５３号においては、同様に還元により抗体フ
ラグメント中に生成される遊離のチオール基をキレート
形成性錯体としての〔（７−マレイミドヘプチル）−イ
ミノービス（エチレンニトリロ）〕テトラ酢酸との結合
に使用している。抗体にの錯体の結合は錯体化合物のマ
レイミド基中の二重結合とＳＨ基との反応を介して行な
われるが一方放射性金属イオンはニトリロジ酢酸残基を
介して錯形成される。

メタロチオネイン、すなわち分子量６０００を有し、分
子中のシスティン含有量が高い金属結合性蛋白質は抗体
中５の錯化剤として紹介されている（Ｇ、Ｌ、　　Ｔｏ
ｌｍａｎ、　　Ｒ，Ｊ、　　Ｈａｄｊｉａｎ、　　Ｍ、
Ｍ。

Ｍｏｒｅｌｏｃｋ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｎｕｃｌ、
　Ｍｅｄ、　２５．２０゜１９８４）。抗体−メタロチ
オネ、イン複合体はＴｃ−９９ｍグルコヘプトネートで
変換することによりテクネチウムで標識されている。し
かしながらこの交換は不完全なので引き続き精製が必要
である。ビスチオセミカルバゾンリガンドのいくつかも
２官能性キレート剤として同様に記述されている（Ｙ、
　Ａｒａｎｏ、、　Ａ、　Ｙｏｋｏｙａｍａ、　Ｈ，Ｍ
ａｇａｔｅｔ　ａｌ、、　Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｎｕｃｌ、
　Ｍｅｄ、　Ｂｉｏｌ、　１２．４２５〜３０１９８６
）。ｐ−カルポキシエチルフェニルグリオキサルジ（Ｎ
−メチルチオセミカルバゾン）はヒト血清アルブミンと
複合されている。Ｔｃ−９９ｍ標識したｌ：ｌ錯体はあ
る種の不安定性を示すがｌ：ｌより大きい比率を有する
錯体では肝臓への蓄積性が増加することが示されている
。

追加の官能基を介してジアミドージメル力ブチドＮｘＳ
ｘリガンドの蛋白質へのカップリングが起こる（Ａ、Ｒ
，Ｆｒｉｔｚｂｅｒｇ、　Ｓ、　Ｋａｓｉｎａ、　Ｊ、
Ｍ、　Ｒｅｎ。

ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｎｕｃｌ、　Ｍｅｄ、　２７．
９５７”９５８．１９８６）。

すなわち例えば４，５−ジ（Ｓ−エチルカルボニルメル
カプトアセトアミド）ペンタノイル−Ｎ−ヒドロキシス
クシンイミドは抗−メラノーマ抗体と反応し、得られた
複合体を５０℃、Ｉ）１８でＴｃ−９９ｍ酒石酸塩溶液
でインキュベートする。１時間後には、テクネチウムの
７８％が酒石酸塩から抗体へ移されている。

診断にテクネチウム−９９１＋を広く使用するためには
、この核種を検査すべき器官に選択的に輸送する必要が
ある。患者を不必要な照射に曝らすことのないようにテ
クネチウム−９９ｍを他の器官または器官系からすばや
く消失させるべきであり、または他の器官または器官系
に導入してはならない。主としてこの目的のために用い
られる物質は、テクネチウム−９９ｍで直接標識し易く
かつ高い器官特異性を有するものであった。しかしなが
ら高い器官特異性を有するが直接には標識できない多数
の物質も存在する。

これらはタンパク質（フィブリノーゲン、ヒト血清アル
ブミン）、酵素（ストレプトキナーゼ、乳酸デヒドロゲ
ナーゼ）、糖（デキストラン、グルコース）であるかま
たは重合体であり得る。

これには脂肪酸のような低分子量の物質も包含され、こ
れらは心臓のエネルギー要求が高いので心筋組織中に集
中する。これらの物質を標識できるようにするため、こ
れらを錯化剤と結合させると、テクネチウム−９９ｍと
堅く結合できるようになる。

テクネチウムおよびレニウム同位体を錯化するのに適す
るとして知られている錯化剤はシフラム（ｃｙｃｌａｍ
）等の大環状アミンである。適当な条件下でのチク不チ
ウムシクラム錯体の錯体化は９９％である。テクネチウ
ム／アミン錯体の詳細についてはり、Ｅ、　　Ｔｒｏｕ
ｔｎｅｒ、　　Ｊ、　　Ｓｉｍｏｎ、　　Ａ、Ｒ。

Ｋｅｔｒｉｎｇ、　Ｗ、Ａ、　Ｖｏｌｋｅｒｔ、　Ｒ，
Ａ、　Ｈｏｌｍｅｓ、　Ｊ。

Ｎｕｃｌ、　　Ｍｅｄ、　　２１（１９８０）、４４３
またはＳ、Ａ、　　Ｚｕｃｋｍａｎ。

Ｇ、Ｍ、　Ｆｒｅｅｍａｎ、　Ｄ、Ｅ、　Ｔｒｏｕｔｎ
ｅｒ、　Ｗ、Ａ、　ＶｏｌｋｅｒＬ。

１ｉ！、Ａ、　Ｈｏｌｍｅｓ、　　Ｄ、Ｇ、　ｖａｎ　
ｄｅｒ　Ｋｅｅｒ、　　Ｅ、Ｋ。

Ｂａｒｅｒｉｅｌｄ、　　Ｉｎｏｒｇ、Ｃｈ、２０（１
９８１）、　３３８６またはＪ、　Ｓｉｍｏｎ、　Ｄ、
　Ｔｒｏｕｔｎｅｒ、　Ｗ、Ａ、　ＶｏｌｋｅｒＬ、　
Ｒ，Ａ。

Ｈｏｌｍｅｓ、　Ｒａｄｉｏｃｈｅｍ、　Ｒａｄｉｏａ
ｎａｌ、　Ｌｅｔｔ、　４７（１９８１）　、１１１に
述へられている。置換されたシフラムも知られており、
窒素−１および炭素＝６のいずれでも置換される（Ａ、
Ｒ，Ｋｅｔｒｉｎｇ、　Ｄ、Ｅ。

Ｔｒｏｕｔｎｅｒ　　ｅｔ　　ａｌ、、　　Ｉｎｔ、　
　Ｊ、　　Ｎｕｃｌ、　　Ｍｅｄ、　　Ｂｉｏｌ。

１１　　（１９８４）、１１３またはＪ、　　Ｓｉｍｏ
ｎ、　　Ｄｉｓｓ、　　ＡｂｓｔｒＩｎｔ、　　Ｂ　４
２（１９８１）、６４５またはＭ、　　５ｔｒｕｄｅｒ
、　　Ｔ、ＡＫａｄｅｎ、　　Ｈｅ１ｖ、　　Ｃｈｉｍ
、　　Ａｃｔａ　　６９（１９８６）、　２０６７ま　
ｊこはＥ、　Ｋｉｍｕｒａ、　Ｒ，Ｍａｃｈｉｄａ、　
Ｍ、　Ｋｏｄａｍａ、　、１．　Ａｍ。

Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、　　１０６　　Ｃ］９８４）、５４
９７）　　。

アミンおよび他のリガンドを蛋白質上に複合化するこれ
までのあらゆる試み（Ｆｒｉｔｚｂｅｒｇ　ｅｔａｌ、
、　　Ｊ、　　Ｎｕｃｌ、　　Ｍｅｄ、　　２７　　（
１９８６）、９５７またはＴｏｌｍａｎ　ｅｔ　ａｌ、
、　Ｊ、　Ｎｕｃｉ、　Ｍｅｄ、　２５　（１９８４）
、２０またはＡｒａｎｏ　ｅｔ　　ａｔ、、　　Ｉｎｔ
、Ｊ、　　Ｎｕｃｌ。Ｍｅｄ。

Ｂｉｏｌ、　　］２　（１９８６）　　４２５参照）か
ら得られた生成物はｉｎ　　ｖｉｖｏでの高い安定性を
要求されてもわずかに一部分応じるかまたは全く応しら
れないものであった。

ＤＥ−Ａ第３，７２８．６００号には放射性核種のため
の錯化剤どして同様に適当なＮ−アルキル、Ｎ−アリー
ルおよびＣ置換されたシフラムが記載さ＝１９− れている。

本発明は４個の窒素原子がアルキルホスホネートおよび
／または−アセテートおよび／または一スルホネートお
よび／またはフェルレートおよび／または一カテコレー
トおよび／またはザリシレ−１・により好ましく置換さ
れ、しかも標識されるべき物質に結合しうる基を１２位
に有する１、４，７，１．０−テトラアザシクロトリデ
カンを見出したものである。

本発明による１、４．７．１０−テトラアザシクロトリ
デカンは放射性核種を錯化するのに極めて適しでいる。

これらの化合物は放射性核種である１１１１０、６８Ｇ
ａ、　”Ｇａｓ　９°ｙ、　１５３３ｍ、　６２Ｆｅ１
９９ｍＴｃ、　　Ｉｎ２にｄ、　　Ｉ’６Ｒ１ｅまたは
１８８Ｒｅ、　　またはＧｄ。

ＦｅもしくはＭｎのようなＮＭＲ造影剤として使用出来
る金属を錯化するのに好んで用いられる。

本発明のシクロトリデカンの助けにより標識することが
できる「物質」とは主に「輸送物質」として医療診断で
用いることができる化合物、すなわち通常、抗体、抗体
フラグメント例えばＦ（ａｂ’）２またはＦ（ａｂ’）
フラグメント、蛋白質例えばフィブリノーゲン、ヒト血
清アルブミン、ステロイド、脂質、酵素例えばストレゾ
［・キナーゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ、糖例えばデキス
トラン、グルコースまたはポリマーのような高い器官特
異性を有する化合物を意味する。

しかしながら他方では一般に本発明のシクロトリデカン
の助けによって大環状アミンの側鎖−にの１２位の官能
基と反応し化学結合を形成するような物質を標識するこ
ともできる。これは生産プラントにおける化学物質を「
モニターコしてその濃度、流速、滞溜時間等を測定する
ために提案されている。

したがって本発明は下記式（Ｉ）〔式中、ＺはＣＨ，またはＣＯであり、Ｒ１は式−Ｘ−ＮＨｆｆｉ、−Ｘ−ＮＯ３、−Ｘ−ＮＣ
Ｓ、　−Ｘ−ＣＯＯＨ。

−Ｘ−ＯＨ，−Ｘ−Ｎ、＋または−ｘ−ｃｏｃａの基で
あるかまたは式Ｘ−ＨａＤ、（ここでＨａＱはフッ素、
塩素、臭素またはヨウ素であり、Ｘは炭素数１〜４０個
のアルキレン基、オルト−、メタ−もしくはパラ−フェ
ニレン基、またはオルト−、メタ−もしくはパラ−フェ
ニレン０１〜Ｃ２−アルキル基である）であり、そしてＲ２はＨまたは−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ”　（ここでｎは１
または２であり、そして異なっているか、または２個、３個またはすべてのＲ２
基は同一である〕で表わされる１、４，７．１０−テトラアザシクロトリ
デカンに関する。

本発明は更に詳しくは上記式（Ｉ）〔式中、ＺはＣ１，であり、Ｘはパラフェニレン基、パラフェニレンメチル基または
炭素数１〜２０個を有するアルキレン基であり、ＨａＱは塩素、臭素またはヨウ素であり、ｎはｌであり
、Ｒ３は−ＣＯＯＨ１−ＰＯＪｚまたは一３Ｏ，Ｈであり
、３個またはすべてのＲ２基は同一である〕で表わされ
る１、４，７．１０−テトラアザシクロトリデカンに関
する。

特に好ましいのは上記式（Ｉ）（式中、ＺはＣＨ，であり、Ｘはパラフェニレン基、パラフェニレンメチル基または
炭素原子ｌ−９個を有するアルキレン基であり、またはＨａＱは塩素、臭素またはヨウ素であり、ｎはｌであり
、Ｒ３は−ＣＯＯＨまたはＰＯ，Ｈ！であり、すべてのＲ
２基は同一である）で表わされるｌ。

４．７．１０−テトラアザシクロトリデカンである。

本発明の化合物ではＲ２置換基のうち１個は常にＨとは
異なったものであるのが好ましい。

本発明はさらに、下記式（Ｉ［）（式中Ｒ４はＣｌ−Ｃ３−アルキルである）のジアルキ
ルマロネートをまず下記式（１）％式％（）（式中Ｒ１は式■で特定した意味を有し、Ａは塩素また
は臭素である）の化合物と反応させ、次いで得られた下
記式（ＩＶ）の化合物を下記式（Ｖ）のトリエチレンテトラミンと反応さぜ、式（Ｖ１）の化
合物を得、１１．１３位のＣＯ基をＣＨ２基に還元するかま
たは還元せず、次いで得られた式（■）の化合物を式（
■）の化合物Ａ−Ｒ”　　　　　　　　　（■）（式中Ａは塩素または臭素でありＲ２は式１について特
定した意味を有する）ど反応させて式■の化合物を得る
ことからなる本発明の１．４，７．１０−テトラアザシ
クロトリデカンの製造方法に関する。

本発明はさらに放射性核種を錯化するための本発明のシ
クロ］・リゾカンの使用および物質を標識するためのこ
れらの錯体の使用に関する。

同様に本発明はこれらの標識された物質の使用、特に医
療診断における使用に関する。

炭素原子２個以上を有するアルキル基は直鎖および分枝
鎖いずれでもよい。アルキレン基Ｘは炭素原子４０個ま
での、好ましくは２０個までの、特に好ましくは８個ま
での直鎖アルキレンである。

本発明のシクロトリデカンは官能基を有する置換基を１
２位に持っている。本発明のシクロＩ・リゾカンはこの
官能基の助けにより標識されるべき物質に結合している
。この複合体を適宜精製しｌ；のち（例えば蛋白質また
はポリマーの場合は限外が過または透析により、ステロ
イドまたは脂質のような低分子量物質の場合はカラムク
ロマトグラフィーによって）所望の核種を錯形成の目的
で加える。例えばテクネチウム−９９ｍをバーテクネテ
ートの形態で加えそしてレニウム−１８６または−１８
８をバーレネートの形態で加える。そして適当な還元剤
を加えそれぞれパーテクネテ−１−およびバーレネート
を還元して錯形成に必要な酸化段階とする。これらの順
序は任意または同時で良い。標識された物質は適宜再精
製される。

また、はじめにシクロトリデカンの放射性核種錯体を調
製し次にこの錯体と物質とを反応させ複合体を得ること
も可能である。

本発明の１．４，７．１０−テトラアザシクロトリデカ
ンを調製するための最良の方法は置換されたマロン酸誘
導体（ＩＶ）をトリエチレンテトラミン（Ｖ）と反応さ
せ所望により存在する２つのＣＯ基を還元し、続いて所
望のＲ２基を分子中に導入する方法である（反応スキー
ムｌ参照）。

適宜置換されたマロン酸誘導体は例えばジアルキルマロ
ネート好ましくはジエチルマロ、ｔ−−トを式■、Ａ−
Ｒ’（ＩＩ［）（式中Ａは塩素または臭素でありＲ１は
上記式Ｉで特定した意味を有する）の化合物と反応させ
ることにより得られる。どの反応は好ましくはテトラヒ
ドロフランのような溶媒の存在下で同時に塩基例えばリ
チウムジイソプロピルアミドのようなプロトン除去剤の
作用下に実施される。反応温度は−８０〜＋２０℃好ま
しくは−７０〜−１Ｏ℃である。反応時間は１０分〜２
時間好ましくはｌＯ分〜１時間である。

ここで得られた式■の置換されたマロンｒａＷＩ！導体
を下記反応工程でトリエチレンテトラミン（Ｖ）と反応
させる。この反応もメタノール、エタノール、イソプロ
パツールのような溶媒中で実施するのが好ましい。この
反応の温度は５０゜から反応混合物の沸点の範囲好まし
くは沸点である。反応時間は１２〜２４０時間好ましく
は２４〜１７０時間である。

分子中に゛存在する２個のケト基を所望によりメチレン
基に還元′することができる。この目的のために１１．
１３−ジオンを好ましくはＴＨＦのような溶媒中でＬｉ
ＡＱＨ，またはＢＨ３のような還元剤と混合する。この
反′応は５０℃から反応混合物の沸点間の温度好ましく
は沸点で行わ□れる。反応時間は５〜４８時間好ましく
は１２〜２４時間である。

適宜Ｒ２−置換したシクロトリデカンへ変換するために
１１．１３−ジオンまた゛は還元された生成物のいずれ
かを式■の化合物と混合する。これは好ましくは水、イ
ソプロパツールまたはジメチルホルムアミドのよ６な溶
媒の゛存在下にＫＯＨ１ＮａＯＨ％ＮａｚＣＯ１または
Ｌｉ匹０．のような塩基を同時に存在させて実施するの
が好ましい。反応温度は５０℃から反応混合物の沸点ま
で好ましくは６０〜８０℃である。反応時間は２０分〜
１４０分好ましくは６０〜１２０分である。

得られた最終生成物は例えばイオン交換クロマトグラフ
ィーによって精製できる。本発明の化合物の調製に必要
な出発物質は購入可能でありまた文献に知られた方法で
容易に調製できる。

本発明の１３員環のシフラムの錯体安定性は既知の構造
的に関連する１２員環および１４員環のシフラムより高
いか更に相当高いということは全く予想外でありだ。こ
れは１２員環シクラム（ＤＯＴＡ　；ドデカテトラアセ
テート）と１４員環シクラム（ＴＥＴＡ　；テトラデカ
テトラアセテート）〔第１図参照；　ＤＴＰＡ　（ジエ
チレントリアミンペンタ酢酸）はもう一つの比較物質と
して第１図に示しである〕との比較実験から明らかであ
る。

これらの比較実験ではｌ　ｌ　ｌ　Ｉｎは既知の１２−
および１４員環のシフラムおよび本発明の実施例１のシ
フラムのいずれとも錯化しそしてそれぞれの場合におい
て続いてトランスフェリン（これは優れた錯化剤として
知られる）への１１１１ｎ交換をヒト血清中３７℃で調
べた。わずか１２時間後でも１４員環シクラムとのｌ　
ｌ　ｌ　Ｉｎ交換は顕著であった（１２時間後に１４員
環シクラムによって錯体中に予め結合された目ＩＩｎの
約１０％が離れるかまたはトランスフェリンと錯化した
）がこの１２時間後に１２員環シクラムおよび本発明の
１３員環シクラムではほとんどｌ　ｌ　ｌ　Ｉｎ交換が
認められなかった（１２員環シクラムでは約０．３％で
あり本発明の１３員環シクラムでは０．１％以下）。

本発明の１３員環シクラムが１２員環シクラムより優れ
ており、まして１４員環シクラムより優れていることは
暴露時間をさらに長くすると明らかである。すなわち１
２０時間後には１４−員環シフラムの場合３０％以上の
ｌ１ｌｌｎが交換され、１２員環シクラムの場合でも約
４％であるのに対し、本発明の１３員環シクラムからは
ほんの約１％の１１１１０が交換されたにすぎない（第
１図参照）。

さらに反応時間が長くなっても、ｌ　ｌ　ｌ　Ｉｎ交換
速度は本発明の１３員環シクラムの場合実質的にもはや
増加しなかったが、１２員環シクラムおよび１４員環シ
クラムでは１１１１０交換のさらなる増加が認められた
。

第２図にパラニトロベンジルジエチレントリアミンテト
ラ酢酸と比較した本発明のシクロトリデカンの１１１１
ｎ錯体の安定性について示しＩこ　。

本発明を以下実施例によりさらに詳述する。

実施例　１１２−置換シフラム１２−（ｐ−ニトロベンジル）−Ｃ
４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−１，４゜
７．１０−テトラアセテートの製造ａ）　　ジエチルモノ−ｐ−二トロベンジルマ口不一一
トの製造スキーム：バッチ：　０．１８１モル収　　量　＝　６５％　（３４，７ｇ）予め窒素でパー
ジした撹拌機イ」三ツロフラスコをよく乾燥させた中に
無水テ１−ラヒドロフラ−３５＝ン２１０ｍｆｆとリチウム塩基どを窒素下で入れた。

ここでＴＨＦ　　１００ｍ１２中に溶解したマロン酸エ
ステルを室温で４０分かげて滴下ロートを使用して滴加
した。混合液を静かに暖め、未溶解のリチウムジイソプ
ロピルアミドを溶解させた。橙褐色になった反応溶液を
ドライアイス／イソプロパツールを用いて一６２℃まで
冷却した。

Ｔ　ＨＦ中に溶解したｐ−ニトロベンジルプロミドを４
０分間で滴加しながら激しく撹拌した。この混合物を一
６２°Ｃで１時間撹拌し次に生成した固型物（融点２３
５°Ｃ）を冷やで枦去した。炉液を回転蒸発器中で蒸発
さゼた。残留物をエタノール約３００ｍ１２中で約６５
°Ｃで溶解させた。これは不溶性固型物（融点１６０°
Ｃ１ジ置換副生成物）であり、熱いうちに吸引しながら
限外濾過して除去した。炉液を冷蔵庫中に入れて結晶化
さゼた。

生成物は淡黄色結晶で３４　、７ｇ得られ、融点は５７
〜５８°Ｃであった。

同定：融点　５８℃ ＩＲ：　１７４０ｃｍ−’　　　Ｃ＝０１５３０Ｃ＋＋
＋−’　　　ａｓＮｏ２１３５０ｃｍ−’　　　ｓｙｍ
Ｎｏ２ ’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１２３）　　　　Ｌｌ　　ｄ　　
２ＨＢｚ７．４　　ｄ　　２ＨＢｚ４．１　　ｑ　　４ｔ（−り□−ＣＨ３３，６ｔ　　］
、ＩＨＣＨ３，３ｄ　　ＩＨＡｒ−ＣＨｚ−Ｃ１１，２ｔ　　６１１−ＣＨ２−リｊ元素分析値：　　計算値（％）　実測値（％）Ｃ５６，
９５、５６，８Ｈ５，８０５゜８ ’Ｎ　　　４．７４　　　　５．０ＴＬＣ：　　　　　ＣＨＣ４３／　ＭｅＯＨ／　ＮＨｓ
　（２：２＋１）Ｒｆ　：　　０．８９Ｅ　［ＯＨＲｆ：モノ置換生成物　０．９３ジ置換生成物　　０ｂ）１２−（ｐ−ニトロベンジル）　−１，４，７，１
０−テトラアザシクロトリデカン−１１，１３−ジオン
の製造バッチ７０．０６７モルエタノール　　　　　　２００＋ｎＱ前記前駆体をエタノール中に溶解し、次に還流下で７日
間煮沸した。

゛７日間で沈積物（生成物）が形成し、その反応溶液を
冷却後、濾過して収集した。アセトンで洗浄すると微細
な淡黄色粉末が得られた。

収量：理論値の２５％（５，９ｇ）同定：融点：約２００℃以上で分解。

ＴＬＣ系：　Ｎｅｏｎ／　ＣＨＣｆｆａ／　ＮＨｓ　（
２：２：１）Ｒｆ−０，９元素分析値：　　　　計算値　　　実測値Ｃ−５４，３
６％　　５４．２３％Ｈ’６．７１％　　　６．８０％Ｎ　　　１９．８１％　　１９．８９％Ｈ２０１，１７
％　　　１．１７％ＮＭＲスペクトル５７．３　　　　脂肪族ＣＨｃ）　　１２−（ｐ−＝トロベンジル）　−１，４，７
，１０−テトラアザシクロトリデカンの製造バッチ：　０．０２１２モルＴＨＦ中　ＢＨ３２２０ｍＱ（０，２２０モル）乾燥Ｔ
ＨＦ　　　　　　　’　　１００＋ｎ＋２□前駆体を乾
燥ＴＨＦ　１’Ｏ’ＯｍＱ中に懸濁し次にＴＨＦ中のＢ
Ｈ３を徐々に加えた（Ｈ２形成）。反応液を還流温度ま
で加熱するとアミドが徐々に溶解する。

１．　　、　　　　　．１反応時間：還流下２４時間ＭｅＯＨ２００＋＋＋Ｑを極くわずかずつ熱い反応液中
に加え過剰のＢＨ３を除去する。

次いで反応溶液を蒸発乾固し、ＭｅＯＨで再び３回取り
出す（ホウ酸エステルの除去）。濃＋（（Ｊ３００ｍ（
ｌを蒸発７した反応溶液に加え、次いで３時間還流した
。

この反応溶液を体積が３分のｌになるように濃縮の後、
ＭｅＯＨ２００ｒｎ（２を加え放令した。白色沈澱が形
成しこれを濾過し、冷ＭｅＯＨで洗浄した（生成物）。

収量：理論値の６７％（６，９ｇ）同定：　ＣＨＣＱｓ／　ＭｅＯＨ／　ＮＨ３２／　２／
　ｌを用いた。

フレーム形スポット（ｕｖ陽性）：Ｒｆ−０元素分析値
：　　　　計算値　　　実測値Ｃ３９，２２％　　３９
．３％Ｈ６，９１％　　　７．０％Ｎ　　　１４．２９％　　１４．１％Ｈ２０４，６４％　　　４．６％ＣＩ２　　２８．９４％　　２９．１％ＮＭＲスペクト
ルニー３．５　　　　ｍ　１６Ｈ−ＣＨ２−３７，９２１脂
肪族ＣＨｄ）１２−（ｐ−二トロペンジル）　−１，４，７，１
０−テトラアザシクロトリデカン−１，４，７，１０−
テトラアセテートの製造バツチ：実施例１ｃからの１２−（ｐ−二トロベンジル
）−テトラアザシクロトリデカン２．０９　（４−２８Ｘ　１０−３モル）を蒸留水３０
ｍｍとＫＯ３６Ｍに溶解しｐＨ１ｏ、５とした。

ブロモ酢酸３．０ｇ（２，１４Ｘ　１０−２モル）を蒸
留水２０ｔｔｒＱに溶解した。

１２−（ｐ−ニトロベンジル）−テトラアザシクロトリ
デカン塩酸塩を蒸留水３０ｒｎＱに溶解し６Ｍ＋（０）
１でｐＨ１０，５に１１１整した。

反応液を７５°Ｃに加熱し、蒸留水２０ｍＤ、に溶解し
たブロモ酢酸を２０分かけて滴加した。

ｐＨをｐｔ＋安定剤と６ＭＫＯＨを使用して定常に保っ
た。反応溶液を次に２時間撹拌し、続いて蒸発乾固した
（約９．５ｇ残留）。

後処理：イオン交換クロマトグラフィーにより生成物から塩と副
生物を除去した。

イオン交換体：　Ｄｏｗｅｘ　Ｉ　Ｘ　４　２０−５０
メツシユ、ホルメート型カラム：　　２．５Ｘ　３６ｃｍ検　　出　：　　ＵＶ　　２７５ｎｍ固型物を蒸留水３０ｍＱに取り出し枦去した。約１５ｍ
１２のみをカラムに充填しそして蒸留水で溶離しｊこ。

第１ビーク：無機塩第２ピーク：副生物（トリアセテートＦＡＢ−ＭＳ　＋
Ｍ”Ｈ＝　４９６）生成物を０．１Ｍギ酸でイオン交換体から溶出した（第
３ピーク　ＦＡＢ−ＭＳ　：　Ｍ”Ｈ−５５４）元素分
析値：　Ｃ２４Ｈ３ＳＮＳＯＩ０　・０．６４ｔ（Ｂｒ
　・ｏ、９Ｈ２゜計算値（％）実測値（％）Ｃ４８，０８４７，６Ｈ６，３２６，６Ｈ！Ｏ２，７２，７Ｎ　　　　１１．７　　　　　］、１．６７Ｂｒ　　　
　８．５４　　　　８．６ＮＭＲスペクトル２．５　　　　　ｔ　　ＩＨ脂肪族２．７〜３．９　　　　　ｍ　２６Ｈ脂肪族１３Ｃ（Ｄ
ｚｏ、１０１ＭＨｚ）　　１７９．７　　　−ＣＯＯＨ
１７８、，２，−ＣＯＯＨ実施例　２１２−（ｐ−二トロベンジル）　−１，４，７，ＩＯ−
テトラアザシクロトリデカン−１，４，７，１０−テト
ラメチルホスホネートの製造１２−（ｐ−ニトロベンジル）−１，４，７，１０−テ
トラアザシクロトリデカン塩酸塩（実施例１ｃから）１
．４９と水２０ｍＱ中のホウ酸２ｇおよび濃塩酸２０ｍ
Ｑを沸点近くまで昇温した。ＣＨ２Ｏ（水中３５％）′
１５ｍｆｆを１時間かけて流加した。この混合物を還流
しながら２時間煮沸しさらにＣＨ２Ｏ’　１５ｍ＜２を
加えた。次に還流しながら一晩煮沸した。反応混合物を
次に蒸発させ、そして黄色固整物を無水エタノール（５
０ＩｌｌＱ）で抽出した。このＥＬＯＨ溶液を１０ｍＱ
まで減、じた。さらに固型物０．、．２５ｙ　ｙがイン
プロパツールの添加後生成した。合わせた固型物を水に
溶解し′そしてアニオン交換体（Ｄｏｗｅｘ　１×４）
と０．１〜０．５Ｍの傾斜ギ酸とで溶離した。

三つのフラクションを２７０　ｎ　ｍで検査すると第２
のフラクションはトリ置換生成物にそして第３のフラク
ションはテトラ置換生成物に一致しＩこ。

’Ｈ−ＮＭＲ，３６０ＭＨｚ　＋第３フラクション７．５　　　ｄ　　　２　芳香族プロトン８．２　　　
ｄ　　　２　　芳香族プロトン２．６〜３．８ｍ　　２
７プロトン第２７ラクシヨン？、５　　　ｄ　　　２　　芳香族プロトン８．２　　
　ｄ　　　２　芳香族プロトン２．６〜３．８ｍ　　２
５プロトン実施例　３実施例１からの化合物と１６３にｄ３＋錯体との合成実
施例１からの物質４０１１１９および０．１Ｍ酢酸ナト
リウム緩衝液（ｐＨ−５）　ＩＯ＋＊ｌ１（７）”３Ｇ
ｄＣｆｆｉｓ（７）１００μＣｉを８０℃で一晩保った
。このインキュベーション期間の後、遊離したＧｄ３＋
イオンはもはや認められなかった。

第３図にｐＨ１，１の胃液中における前記Ｇｄ錯体の安
定性を示した。遊離するか弱＜’（ｓｔｉｌ１）結合し
た＋５ｓＧｄｓ＋の分離はカチオン性交換体上で実施し
た。

【図面の簡単な説明】

第１図は比較実験におけるヒト血清中でのトランスフェ
リンへのインジウム交換率を示す。第２図は本発明化合物と他の比較化合物のインジウム錯
体の安定性を示す。第３図はｐＨ１，ｌの胃液中におけるＧｄ、錯体の安定
性を示す。特許出願人　　ヘキスト・アクチェンゲゼルシャフト外
２名

Claims

【特許請求の範囲】１）下記式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）〔式中、ＺはＣＨ＿２またはＣＯであり、Ｒ＾１は式−Ｘ−ＮＨ＿２、−Ｘ−ＮＯ＿２、−Ｘ−Ｎ
ＣＳ、−Ｘ−ＣＯＯＨ、−Ｘ−ＯＨ、−Ｘ−Ｎ＿２＾＋
または−Ｘ−ＣＯＣｌの基であるか、または式Ｘ−Ｈａ
ｌ（ここでＨａｌはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素で
あり、Ｘは炭素数１〜４０個のアルキレン基、オルト−
、メタ−、またはパラ−フェニレン基、またはオルト−
、メタ−もしくはパラ−フェニレンＣ＿１〜Ｃ＿２−ア
ルキル基である）であり、そしてＲ＾２はＨまたは−（ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｒ＾３（ここで
ｎは１または２であり、そしてＲ＾３は−ＣＯＯＨ、−ＰＯ＿３Ｈ＿２、−ＳＯ＿３Ｈ
、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式
、表等があります▼または▲数式、化学式、表等があり
ます▼である）であり、そして４個のＲ＾２基は異なっ
ているかまたは２個、３個、またはすべてのＲ＾２基は
同一である〕で表わされる１，４，７，１０−テトラアザシクロトリ
デカン。２）下記式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）〔式中、ＺはＣＨ＿２であり、Ｘはパラフエニレン基、パラフェニレンメチル基または炭素数１〜２０個を有するアルキレン基で
あり、Ｈａｌは塩素、臭素またはヨウ素であり、ｎは１であり、Ｒ＾３は−ＣＯＯＨ、−ＰＯ＿３Ｈ＿２または−ＳＯ＿
３Ｈであり３個またはすべてのＲ＾２基は同一である〕
で表わされる請求項１記載の１，４，７，１０−テトラ
アザシクロトリデカン。３）下記式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）（式中、ＺはＣＨ＿２であり、Ｘはパラフェニレン基、パラフエニレンメチル基または炭素数１〜８個を有するアルキレン基であ
り、Ｈａｌは塩素、臭素またはヨウ素であり、ｎは１であり、Ｒ＾３は−ＣＯＯＨまたはＰＯ＿３Ｈ＿２であり、すべ
てのＲ＾２基は同一である）で表わされる請求項１または２に記載の１，４，７，１
０−テトラアザシクロトリデカン。４）少なくとも１個のＲ＾２置換基がＨとは異なる請求
項１〜３のいずれか１項に記載の１，４，７，１０−テ
トラアザシクロトリデカン。５）下記式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼（II）（式中Ｒ＾４はＣ＿１〜Ｃ＿３−アルキルである）のジ
アルキルマロネートを下記式（III）Ａ−Ｒ＾１（III）（式中Ｒ＾１は式 I で特定した意味を有し、Ａは塩素
または臭素である）の化合物と反応させ、次いで得られ
た下記式（IV） ▲数式、化学式、表等があります▼（IV）の化合物を下記式（Ｖ） ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）のトリエチレンテトラミンと反応させ、式（IV） ▲数式、化学式、表等があります▼（VI）の化合物を得、１１、１３位のＣＯ基をＣＨ＿２基に還
元するかまたは還元せず、次いで得られた式（VII） ▲数式、化学式、表等があります▼（VII）の化合物を式（VIII）の化合物Ａ−Ｒ＾２（VIII）（式中Ａは塩素または臭素でありＲ＾２は式 I につい
て請求項１で特定した意味を有する）と反応させることからなる請求項１記載の式 I の１，
４，７，１０−テトラアザシクロトリデカンの製造方法
。６）請求項１記載の化合物と少なくとも１個の中心原子
を含有する錯体化合物。７）中心原子が＾１＾１＾１Ｉｎ、＾６＾８Ｇａ、＾６
＾７Ｇａ、＾９＾０Ｙ、＾１＾５＾３Ｓｍ、＾５＾２Ｆ
ｅ、＾９＾９ｍＴｃ、＾１＾８＾６Ｒｅ、＾１＾８＾８
Ｒｅ、＾１＾５＾３Ｇｄ、Ｇｄ、Ｆｅ、Ｍｎから選択さ
れる請求項６記載の錯体化合物。８）請求項６または７記載の少なくとも１つの錯体化合
物と輸送物質からなる複合体。９）輸送物質が抗体、抗体フラグメント、蛋白質、ステ
ロイド、脂質、酵素、糖、ポリマーから選択される請求
項８記載の複合体。１０）（ａ）標識されるべき輸送物質を請求項１記載の
式 I の化合物と反応させ、次に得られた生成物を放射性核種と混合するか、または（ｂ）初めに請求項１記載の式 I の化合物を放射性核
種と混合し、次いで得られた生成物を標識されるべき輸送物質と反応させることからなる放射性核種で輸送物質を標識するための方
法。１１）請求項８または９記載の複合体の医療診断におけ
る使用。１２）請求項８または９に記載の複合体を少なくとも１
種を含む試験用キット。１３）請求項１記載の式 I の化合物と輸送物質とから
なる複合体を含む試験用キット。