JPH02275826A - 炭水化物―炭水化物相互作用の阻止による細胞―細胞及び細胞―基質相互作用の阻害 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は一般に、炭水化物−炭水化物相互作用を阻止す
る（ｂｌｏｃｋｉｎｇ）ことによる細胞−細胞相互作用
及び細胞−基質相互作用の阻害（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
）に向けられており、そしてさらに詳しくは転移、微生
物に起因する哺乳類疾患、哺乳類の妊娠及び植物病害の
抑制に関する。

（従来の技術） 細胞−細胞相互作用及び細胞−基質（ｓｕｂｓｔｒａｔ
ｕｍ）（例えば基礎膜）相互作用は広範な種類の生物学
的過程に必須である。最近の研究においてこの課題が受
けた注目のレベルにも拘らず、細胞−細胞相互作用及び
付着の生化学的機構はよく理解されていない。細胞周囲
（ｐｅｒｉｃｅｌｌｕｌａｒ）付着蛋白質（例えば、フ
ィブロネクチン、ラミニン、スロンボスポンジン、Ｎ−
ＣＡＭ、Ｅ−カドヘリン）並びにこれらの細胞受容体は
非特異的細胞付着に重要な役割を演じ、これらの分子は
特異的細胞認識分子ではないようである。細胞表面にお
ける特定の炭水化物鋼は特異的細胞認識の最初の段階の
ために必要な特異性を提供するが、対応する細胞におけ
る炭水化物を認識する分子の特定は不明であった。

Ｔｙｌｅｒ（Ｇｒｏｗｔｈ　　１０　：　７−１９．１
９４７）により及びＷｅｉｓｓ（Ｙａｌｅ　Ｊ、Ｂｉｏ
ｌ、Ｍｅｄ、　　１９　：　２３５−２７８．１９４７
）により提案された細胞−細胞相互作用の生化学的機構
の基本モデルは、細胞が該細胞の表面で発現される抗原
様分子又は抗体様分子に類似する相補的「鍵と鍵穴」構
造を提供するという仮定に基いている。このモデルは特
異的細胞表面炭水化物決定基及びそれらの認識蛋白質、
すなわちレクチン、グリコジルトランスフェラーゼ、及
びグリコジルヒドロラーゼに拡張することができる。動
物細胞表面における炭水化物結合蛋白質の存在及びそれ
らの生理学的及び細胞生物学的意義がしばしば検討され
てきた。しかしながら細胞表面の局在及び機能はある種
のタイプの細胞、すなわち肝細胞、マクロファージ、及
び腫廉細胞に限定されるようである。さらに、大部分の
動物細胞レクチンは細胞質及び核に所在し、そしてそれ
らの機能は常に「エクトバイオロジカル（ｅｋｔｏｂｉ
ｏｌｏｇｉｃａｌ）であるとは限らず、それらの特異性
の多くがガラクトシル構造、ラクトシル構造、又はラク
トサミニル構造に限定される。従って、このモデルを細
胞相互作用の高度に特異的な性質、特に同じタイプの細
胞間の認識に調和せしめることは困難であり、これが細
胞のへテロタイプの集まりから１つのホモタイプの集団
を選択するための基礎を提供する。

細胞−細胞相互作用及び細胞−基質相互作用が必須の役
割を演する１つの分野は、転移コロニー形成に舊る癌の
拡散のそれである。これらの相互作用は、正常細胞への
悪性腫瘍細胞の付着及び腫瘍細胞間の認識のために重要
である。今日の癌療法は、悪性腫瘍を出現させた患者の
約５０％のみを救済することができるに過ぎない。はと
んどのヒト悪性腫瘍において、転移は死亡の主たる原因
である。この理由の１つは、−次腫瘍の治療の時点で遠
くの転移は小さ過ぎて検出されないことである。さらに
、転移コロニーの拡散した開始は一般に転移患者の臨床
症状が明らかになる前に起こる。転移癌のサイズ及び令
のバラツキ、それらの分散した解剖学的位置、並びにそ
れらの不均一な組成がすべて、外科的除去を妨害し、そ
して転移コロニに供給され得る抗癌剤の濃度を制限する
因子である。従って、転移の効果的な抑制方法の必要性
が存在する。

細胞−細胞相互作用及び細胞−基質相互作用が必須の役
割を演する他の分野は、微生物、例えば細菌又はウィル
スに起因する哺乳類疾患の分野である。これらの相互作
用は、哺乳類宿主への微生物の付着（例えば、ｒＡｄｈ
ｅｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｍ＋ｃｒｏｏｒｇａｎ＋ｓｍＰａ
ｔｈｏｇｅｎｉｔｙＪ　、　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　
ｏｆ　ＣＩＢＡ　Ｆｏｕｎｄａｔ＋ｏｎＳｙｍｐｏｓｉ
ｕｍ、　　Ｃ３Ｂｌｌｉｏｔｔら編集、Ｐｉｔｍａｎ　
ＭｅｄｉｃａｌＢａｔｈ、　Ｅｎｇｌａｎｄ、　１９８
１．を参照のこと）及び微生物間の認識において重要で
ある。防御、例えば哺乳類宿主により用いられる物理的
障壁、にも拘らず、微生物はしばしば該宿主に侵入し、
コロニーを形成しそして発病せしめる。多くの個体、例
えば化学療法を受けるものにとって、それらが感染しな
いように保持されることが肝要である。しばしば、抗生
物質が予防的に投与される。しかしながら、抗生物質の
療法以下の量又は療法量での慢性的使用が抗生物質耐性
微生物の選択の危険性を増加せしめる。従って、療法的
に有用な抗生物質を危険にさらすことなく細菌感染を防
止する方法が必要である。

細胞−細胞相互作用又は細胞−基質相互作用が必須の役
割を演する他の分野は妊娠のそれである。

これらの相互作用は卵への精子の付着において重要であ
る。避妊のために種々の組成物及び装具が使用されてい
る。１９７３−１９８２年の１０年間（広範なデーター
が入手できる最も新しい期間）において、米国の女性の
間で経口避妊薬の使用が急速に減少した　（Ｂａｃｈｒ
ａｃｈ、　　Ｆａｍ、Ｐｌａｍ、Ｐｅｒｓ　ｅｃｔ、１
５　；　　２５３−２５９．１９８４）。これは、少な
くとも部分的には、癌、血液凝固、及び関連疾患を含む
、経口避妊薬の使用に伴う合併症に帰せられる。従って
、いわゆる「ピル」の使用は、より効果の低い障避法、
例えばコンドーム、ダイアフラム及び泡、並びに殺減法
の使用により取って代わられた。これらに代るもの、す
なわち子宮内装具（ＩＵＤ）　　も使用に対する健康上
の危険が伴っている。これらの装具の多くが市場から排
除された。伝統的な障壁法はしばしば部分的に、それら
の有効性のために殺精子剤に頼る。一般に、限定された
数の精子抑制化合物のみが避妊薬とて許容されることが
証明されている。最も広く使用されている殺精子剤は不
快であり、これは使用者に刺激又はアレルギー反応を生
じさせることがある毒性化学物質である。従って、使用
者又は彼女の子への健康上の危険を伴わない避妊のため
の可逆的で信頼できる方法の必要性が存在する。

（発明が解決しようとする課題） 細胞−細胞相互作用及び細胞−基質相互作用はまた植物
病害においても重要であるＪこれらの相互作用は植物へ
の植物病原体の付着、及び植物病原体間の認識において
重要である。有害な病原体、例えばアグロバクテリウム
（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）の種、及びシュードモ
ナス・シリンシアー（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉ
ｎｇａｅ）群の構成員が植物に感染しそしてそれを形質
転換する。植物防御機構の存在にも拘らず、癌腫病（ｃ
ｒｏｗｎ　ｇａｌｌ　ｔｕｍｏｒ）及びハーリールーツ
（ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ）のごとき病気〔それぞれ、
アグロバクテリウム・チュメファシエンス（Ａｇｒｏｂ
ａｃｔｅ−により惹起される〕が起きる。これらの及び
他の植物病害はかなりの経済的インパクトを与えている
。従って、作物の生産性及び品質の改良のために植物−
微生物相互作用を操作する必要性が存在する。多数の生
物学的過程において細胞−細胞相互作用及び細胞−基質
相互作用が演じる必須の役割のため、この様な相互作用
が望ましくない状況下でこれらの相互作用を阻害する必
要性が当業界に存在する。本発明はこの必要性を満たし
、そしてさらに他の関連する利点を提供する。

（課題を解決するための手段） 要約すれば、本発明は細胞−細胞相互作用又は細胞−基
質相互作用を阻害するための種々の方法を提供する。本
発明の１つの観点において、生物学的調製物中で細胞−
細胞相互作用又は細胞−基質相互作用を阻害する方法が
提供される。この方法は、生物学的調製物を炭水化物−
炭水化物相互作用を阻止（ｂｌｏｃｋ）する薬剤と共に
インキユベートし、これによって細胞−細胞相互作用又
は細胞−基質相互作用を阻害することを含んで成る。

温血動物における細胞−細胞相互作用又は細胞−基質相
互作用を阻害する方法も提供される。この方法は、炭水
化物−炭水化物相互作用を阻止する薬剤の有効量を温血
動物に投与し、そしてそれによって細胞−細胞相互作用
又は細胞−基質相互作用を阻害することを含んで成る。

本発明の他の観点は温血動物において転移を阻害する方
法を提供する。この方法は、炭水化物−炭水化物相互作
用を阻止する薬剤の療法的有効量を温血動物に投与し、
ここで、炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも１種
が悪性腫瘍細胞に存在する、ことを特徴とする。

本発明はさらに、温血動物における微生物感染を阻害す
る方法に関する。この方法は、炭水化物−炭水化物相互
作用を阻止する薬剤の療法的有効量を温血動物に投与し
、ここで炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一方
の構成員が微生物に存在することを特徴とする。関連す
る観点内で、温血動物における歯垢を抑制する方法が提
供される。この方法は、炭水化物−炭水化物相互作用を
阻止する薬剤の有効量を温血動物に投与し、ここで該炭
水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一方の構成員が
口腔細菌細胞に存在する、ことを特徴とする。

本発明の他の観点は、温血動物における妊娠を抑制する
方法を提供する。この方法は精子と卵との間の炭水化物
−炭水化物相互作用を阻止する薬物と生理的に許容され
るキャリヤー又は稀釈剤とを含んで成る組成物の有効量
を温血動物に投与することを特徴とする。

本発明の関連する観点内で、植物−植物病原体相互作用
を阻害する方法が提供される。この方法は炭水化物−炭
水化物相互作用を阻止する薬剤の有効量を植物に投与し
、ここで該炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一
方の構成員が植物病原体に存在する、ことを特徴とする
。

本発明のこれらの及び他の観点は以後の詳細な記載及び
添付した図面により明らかになるであろ〔具体的な説明
） 第１図（パネルａ、ｂ、ｃ、ｄ及びｅ）はＦ９細胞集合
の顕微鏡写真及び２ｍＭＬＦＰＩＩ及び■の効果を示す
。パネルａ　：　５０ｍＭ　８ＤＴＡの存在下での対照
細胞懸濁液であり、集合は起っていない。バネ）Ｉ’ｂ
　：　０．９ｍＭ　ＣａＣｌ！、及びＱ、　５ｍＭ　Ｍ
ｇ５Ｏ＜を含有するＰＢＳの存在下でのＦ９細胞の集合
。パネルＣ：２ｍＭＬＦＰＩＩの存在下でのＦ９細胞の
集合。パネルｄ　：　２ｍＭ　ＬＦＰＩＩＩの存在下で
のＦ９細胞であり、集合が阻害された。パネルｅ：それ
ぞれ５０ｍＭ　ＥＤＴＡ。

２ｍＭＬＦＰＩ［及び２ｍＭＬＦＰＩＩによるＦ９細胞
集合の阻害の半定量的解析。集合の程度は、定められた
条件下でコールタ−・カウンター（Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｃ
ｏｕｎ−ｔｅｒ）を用いて単一の未集合細胞の数（縦軸
）を計数することにより決定された。パネルｅの横軸に
示すように、細胞を含まない媒体についてのブランク計
数値はＬＦＰ　ＩＩ及びＬＦＰ　ＩＩＩの非存在下（−
）及び存在下（＋）でのｒＰＢｓ　Ｊとして標示されて
いる。二価陽イオンを含有するＰＢＳ中でインキユベー
トされたＦ９細胞（パネルｂにおけるような）はパネル
ｅに右いてｒＦ９細胞ＰＢＳ　Ｊとして標示されている
。５０ｍＭ　ＥＤＴＡ中の細胞（パネルａにおけるよう
な）はｒＰ：ＤＴＡ　Ｆ９細胞」として標示されており
、そしてＬＦＰ　Ｉ［の存在下（パネルＣにおけるよう
な）及びＬＦＰ　ＩＩＩの存在下（パネルｄにおけるよ
うな）での細胞はパネルｅにおいてそれぞれｒ　ＬＦＰ
ＩＩ　Ｆ９細胞」及びｒ　ＬＦＰＩ［Ｉ　Ｆ９細胞」と
して標示されている。値は３回の測定の平均を示し、垂
直な棒は標準偏差を示す。

第２図（パネルａ＋ｂ及びＣ）はＢＩ３黒色腫細胞への
マウスリンパ腫Ｌ５１７８　Ａ＾１２細胞系の付着の顕
微鏡写真及びこの付着に対する種々の試薬の効果を示す
。パネルａ：ＢＩ３黒色腫に付着したＬ５１７８Ａ＾１
２リンパ腫細胞。リンパ腫りローン＾Ａ１２細胞（Ｇｇ
３を発現する）を８１６黒色腫（スピンドル形）上で同
時培養した。次に、培地を除去し、そして細胞を無血清
ＲＰＭＩ　１６４０で２回洗浄した。ＢＩ３黒色腫上に
付着したＡＡ１２　！Ｊノン腫細胞は洗浄に抵抗シタ。

パネルｂ　：　Ｌ５１７８リンハ腫クローンＡＶ２７１
８１胞（Ｇｇ３を発現しない）をインキュベートしたが
、次に洗浄除去された。パネルｃ：ＡＡ１２又はＡＶ２
７細胞と８１６細胞との相互作用に対するＥＤＴＡ、シ
アル酸、シアリルラクトース、抗−ＧＭ３抗体抗体及２
抗−Ｇｇ　３　ＭＡｂ　２Ｄ４の効果。黒色腫細胞への
リンパ腫細胞の付着の程度は、Ｂ１６細胞を３Ｈ−ラベ
ルＡＡ１２細胞又は３Ｈ−ラベルＡＶ２７細胞と共にイ
ンキュベートしそして新鮮な無血清培地で洗浄した後に
残留する３Ｈを測定することにより決定した。

中空棒及び点を付した棒はそれぞれＡＡ１２細胞及びＡ
Ｖ２７細胞の付着を示す。それぞれ１０ｍＭ　ＥＤＴＡ
、５ｍＭシアル酸、５ｍ１Ｊシアリルラクトース、抗−
ＧＭ３抗体ＤＨ２、及び抗−Ｇｇ３　ＭＡｂ　２Ｄ４を
縦軸に示す。

値は３回の測定のの平均を示す。

前記のごとく、本発明は炭水化物−炭水化物相互作用を
阻止することにより細胞−細胞相互作用又は細胞−基質
（ｓｂｓｔｒａｔｕｍ）　（例えば、基礎膜）相互作用
を阻害する方法に向けられる。炭水化物−炭水化物相互
作用は細胞−細胞現象及び細胞−基質現象の少なくとも
２つのタイプ、すなわち、ある細胞と他の細胞又は基質
との付着、及び複数の細胞間の特異的認識にとって重要
である。

細胞付着の過程は多数の段階から成る。最初の段階は２
個の細胞間の特異的認識である。本発明の開示は、二価
陽イオンにより介在される多価炭水化物−炭水化物相互
作用が主たる役割を演することを示す。最初の細胞認識
に続き、Ｃａ’＋感受性付与分子により又はフィブロネ
クチン（ｆｉｂｒｏｎｅ−ｃｔｉｎ）　、ラミニン（Ｉ
ａｍｉｎｉｎ）及びこれらの受容体系から成る細胞周辺
付着ネットワーク蛋白質質により一次的に介在される非
特異的付着が起こる。

細胞付着の第三段階は、細胞間結合（ｉｎｔｅｒｃｅｌ
ｌｕ−Ｉａｒ　ｊｕｎｃｔｉｏｎ）　、例えばギャップ
結合軸ａｐ　ｊｕｎｃ−ｔｉｏｎ）の確立であり、この
場合、特定の構造蛋白質を介して細胞−細胞連絡チャン
ネルが開かれる。

本発明はさらに、２細胞間の特異的認識がある細胞及び
その相手方において高度に発現される同一の又は同一で
ない炭水化物網間の特異的相互作用に依存することを開
示する。本発明において開示されるように、特異的炭水
化物−炭水化物相互作用を阻止する薬剤（以後薬剤と称
する）が細胞−細胞相互作用及び細胞−基質相互作用を
阻害するであろう。これに関して適当な薬剤には、サッ
カラード類、グリココンジュゲート類、及び炭水化物決
定基に対して向けられた抗体類が含まれる。

「サッカラード」なる用はオリゴサッカラード類を包含
する。「抗体」なる語は無傷の分子、その断片、又はそ
の機能的同等物を包含し、そして遺伝子操作され得る。

抗体断片の例にはＦ（ａｂ’　）２゜Ｆａｂ’　、　ｐ
ａｌ）及びＦｖが含まれる。

本発明において使用するための適当なグリココンジュゲ
ートの例はペプチド、例えばリジルリジンに連結された
オリゴサッカラードである。この様なオリゴコンジュゲ
ートは、例えば５ｃｈｔｙａｒｚ及びＧｒａｙ　（Ａｒ
ｃｈ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、１３１　：５
４２．　１９７７）に記載されているように、還元的ア
ミノ化によりリジルリジンに精製されたオリゴサッカラ
ードを連結することにより製造することができる。この
方法は、ｐＨ＞５において選択的にシッフ（Ｓｃｈｉｆ
ｆ）塩基を還元するシアノボロヒドリドの能力に基く。

要約すれば、未還元のオリゴサッカラード、Ｌ−リジル
リジン、　　２ＨＣｊ７　（Ｂａｃｈｅｍ　Ｆｉｎｅ　
Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ。

Ｔｏｒｒａｎｃｅ、　　カリホルニア）及びナトリウム
シアノボロヒドリド（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　
Ｃｏ、、セントルイス。

Ｍｏ）を０．３５：０．０３３　　：１．００のモル比
で混合し、そして０．２　Ｍ　’Ｊノンカリウム（ｐＨ
８，０）中に溶解する。３７℃にて７２時間の後、オリ
ゴサッカライドーリジルリジンコンジコゲートを遊離オ
リゴサッカラード、シアノボロヒドリド、及び緩衝塩か
らＰ２モレキニラーシーブタロマトグラフィ−１こより
分離する。オリゴサラ力ライドーリジルリうンコンジ二
ゲートはボイドボリウムの直後に溶出し、そして１０％
Ｈ２ＳＯ４中０．５％オルシノール（ｏｒｃｉｎｏｌ）
の噴霧を用いるスポット試験により日常的に同定される
。

例えば、ラクト−Ｎ−フコペンタオース（ＬＦＰ）とリ
ジルリジンとのグリココンジュゲートは次の様にして調
製される。ＬＦＰＩ（Ｈハブテン）、■（ｒ、ｅ”ハブ
テン）、及びＩＩＩ　（Ｘハプテン）の混合物を人乳か
らＫｏｂａｔａら（Ｍｅｔｈ、　Ｂｎｚｙｍｏｌ、　５
０　：　２１６゜１９７８）の方法により得る。ＬＦＰ
Ｉ、ｎ及び■（未還元）をアセチル化後にＨＰＴＬＣブ
レー）　（Ｊ、Ｔ。

Ｂａｋｅｒ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、、　Ｐｈｉｌｌ
ｉｓｂｕｒｇ、　Ｎ、Ｊ、）上での分取用薄層クロマト
グラフィーにより酢酸ブチル−アセトン−水（２５：８
：１）の溶剤系を用いて分離する。脱アセチル化の後、
精製されたペンタサッカラードを凍結乾燥しそして一２
０℃にて貯蔵する。上記のようにしてしＦＰＩＩＩをリ
ジルリジンの一級アミノ基に連結する。生ずるＬＦＰＩ
ＩＩ−！Ｊジルリジンコンジュゲートはりジルリジン１
モル当り３モルのオリゴサッカラードを含有する。

前記のように、炭水化物決定基に対する抗体が本発明に
おいて使用するために好ましい。本発においてポリクロ
ーナル抗体を用いることができるが、モノクローナル抗
体（ＭＡｂ）が好ましい。癌に関する本発明の具体例の
ため、適当な抗体には腫瘍関連炭水化物抗原に対して向
けられた抗体が含まれる。腫瘍関連炭水化物抗原の例に
はＬｅＸタイプ、ジーＬｅＸ−タイプ、シアリル化Ｌｅ
Ｘ−タイプ、Ｌｅ’−タイプ、Ｔ、Ｔｎ、及びシアリル
−Ｔｎ−タイプの抗原が含まれる。サルモネラ・ミネソ
タ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｍ１ｎｎｅｓｏｔａ）上に
コートされた精製糖脂質抗原によりマウスを免疫感作す
ることにより、これらの抗原に対してＭＡｂを調製する
ことができる。好ましいＭＡｂには５Ｈ−１，５Ｈ−２
，ＩＢ２．ＡＨ−６，ＰＨ−６，ＮＢＨ−２゜Ｃａ−１
、Ｈｌｌ−８、ＴＫＨ−１及びＴＫＨ−２が含まれる。

これらのＭＡｂは腫瘍関連糖脂質の炭水化物部分に対し
て向けられている。アイソタイプＩｇＧ３の５Ｈ−１は
ＬｅＸの末端５炭水化物残基であるペンタ−Ｌｅｘを認
識する。５）ｌ−２は二量体Ｌｅｘに対して向けられ、
Ｆｌｌ−６はシアリル化ＬｅＸ（Ｆｕｋｕｓｈｉら、Ｊ
、　Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、　　２５９　：　１０５１
１−１７゜１９８３＞に対して向けられ、そしてＡ）Ｉ
−６はＬｅＹに対して向けられる（Ａｂｅら、Ｊ、Ｂｉ
ｏｌ、Ｃｈｅｍ、　２５８　：１１７９３−９７．１９
８３）。ＭＡｂ　１Ｂ２はポリラクトサミン構造の末端
Ｇａｌβ１→４Ｇ１ｃＮａｃと反応する。

ＭＡｂ　ＳＨ−１の製造方法が代表的である。直腸癌か
ら転移したヒト肝腫瘍からＬｅｗｉｓＸ抗原（ＩＩＩ’
Ｐｕｓ　ｎＬｃ’）を精製する。この腫瘍をインプロパ
ツール／ヘキサン／水中で３回ホモジナイズし、そして
濾過する。有機抽出物を蒸発乾燥し、そしてＦｏｌｃｈ
（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、１９１　：８１９．１９５
１）の方法により３回分配する。−緒にした上層を蒸発
せしめ、そしてスペクトラポア（ｓｐｅｃｔｒａｐｏｒ
ｅ）　　３　　（３５００分子量カットオフ）透析チュ
ーブ中で蒸留水に対して透析する。過剰のエタノールを
用いて透析物を蒸発せしめ、そして叶ＡＨ−セファデッ
クスＡ−２５カラム（４Ｘ５０ｃｍ）上でのイオン交換
り９マドグラフイーにかける。サンプルをクロロホルム
／メタノール／水（３０：　６０　：　８）中で適用す
る。ＬｅｗｉｓＸ抗原を含有する未結合の通過画分を集
める。このサンプルを蒸発せしめ、そしてインプロパツ
ール／ヘキサン／水（５０：４０：５から５５　：　２
５　：　２０）から成るイオトロビード（ｉｏｔｒｏｂ
ｅａｄ）系での高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ
）にかける。

両分をオルシノール−硫酸による染色に基いてプールす
る。標準Ｈ１糖脂質とＨ２糖脂質との間で移動する糖脂
質を集め、そしてピリジン−無水酢酸を用いてアセチル
化する。アセチル化された糖脂質を分取用ＴＬＣプレー
トに適用し、ゼしてジクロロエタノール／アセトン／水
（４０：６０：０、０３）で展開する。各単離されたバ
ンドをＮＭＲ及び完全メチル化（ｐｅｒｍｅｔｈｙｌａ
ｔｉｏｎ）分析により分析し、そしてＬｅｘバンドを集
める。

Ｂａ１ｂ／Ｃマウス（雌性、８週令）を精製されたＬｅ
ｗｉｓｘ抗原（ＩＩＩ３Ｆｕｃ　ｎＬｃ４）で免疫感作
する。

抗原（４０濱／　１００４’エタノール）を８００ｄの
リン酸緩衝液（ＰＢＳ）　（：’３７℃プ°注入する。

この溶液をさらに２５０躍の酸処理したＳ、ミネソタ（
肛　シュ虻５ｏｔａ）　（１ｍｇ／ｍｉ！　ＰＢＳ）　
と混合する。この混合物を３７℃にて３０分間インキニ
ベートシ、そして凍結乾燥する。凍結乾燥した粉末を１
ｍｉ’のＰＢＳ中に再懸濁する。マウスを、１０〜１４
日毎に、２５０ｐＩのＰＢＳの抗原懸濁液を尾静脈に注
射することにより免疫感作する。

最後の注射から３日後、動物を頚部脱臼により殺し、そ
して膵臓を無菌的に摘出する。ポリエチレングリコール
を用いてリンパ球をマウス骨髄腫ＳＰ２細胞（５：１）
と融合せしめる。クローンを融合の１１日後にスクリー
ニングする。この段階でクローンは小さいミクロン以下
のポリスチレン粒子上に抗原がコートされているバンデ
ックス（Ｐａｎｄｅｘ）装置を用いてクローンをスクリ
ーニングする。抗原をコートしたビーズを抗体上清と混
合し、次にＦＩＴＣ−ヤギ抗−マウスＩｇＧ及びＩｇＭ
を添加する。この測定法（「パンデックス・アッセイ」
）は伝統的なラジオイムノアッセイ又はＢＬＩＳＡアッ
セイに比べて２〜４倍鋭敏であり、そして他の測定法が
５０〜１００　ｎｇ／ウェルであるのに対してわずか１
０ｎｇ抗原／ウェルを必要とする。このスクリーニング
方法はさらに、Ｌｅｗｉｓ’への高親和性抗体の選択を
促進する。試験結果が陽性のクローンを単一細胞稀釈に
よりクローニングし、そしてさらにＴＬＣ免疫染色によ
り試験する。バンデックス・アッセイ及びＴＬＣ免疫染
色において高い反応性を示すＭＡｂ　Ｓ旧を生産するク
ローンを選択し、そして凍結する。

選択される特定の試薬は阻止されるべき特定の炭水化物
鎮の構造により決定される。脂質又は蛋白質に結合した
炭水化物の構造は、分解、エレクトロン−インパクト・
ダイレクト−プローブ（ｅｌｅｃｔｒｏｎ−ｉｍｐａｃ
ｔ　ｄｉｒｅｃｔ−ｐｒｏｂｅ）　（ＥＩ）及びフィー
ルドデポジション（ｆｉｅｌｄ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ
）（ＦＤ）？ススベクトル法、並びにメチル化分析（Ｎ
ｕｄｅｌｍａｎら、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、　２６１
　：５４８７−５４９５．１９８６）　に基いて決定す
ることができる。分解分析は化学的に及び／又は酵素的
に、例えばグリコシダーゼにより行うことができる。分
解分析により示唆された炭水化物配列はメチル化分析（
Ｈａｋｏｍｏｒｉ、　Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅｍ。

５５　：２０５−２０８．１９６４＞及びこれに続く完
全メチル化された（ｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ）糖の
化学イオン化マス１３８　：１３−２５．１９８７＞に
より確認することができる。

これらの技法に代えて、又はこれらの技法と組み合わせ
て、完全メチル化されたグリカンに対して、又は無傷の
グリカンの適当な分解の後にＥＩマススペクトル法を行
うことができる（Ｋａｎｎａｇｉら、Ｌのグリカン又は
メチル化グリカンの陽子ＮＭＲスペクトル法も有用であ
る。炭水化物配列の均一性は、ＦＤマススペクトル法を
含めての種々の化学的及び物理的基準に基いて証明する
ことができる。

−旦炭水化物配列が決定されれば、特定の炭水化物−炭
水化物相互作用を阻止するための薬剤として、適切なサ
ッカラード、グリココンジニゲート、又は該配列の全部
又は一部に対する抗体を選択することは当業者には明ら
かであろう。

細胞−細胞相互作用又は細胞−基質相互作用の阻害は種
々の生体外及び生体内用途を有する。前記のように、本
発明は生物学的調製物内での細胞−細胞相互作用又は細
胞−基質相互作用を阻害する方法を提供する。この方法
は、生物学的調製物を炭水化物−炭水化物相互作用を阻
止する薬剤と共にインキユベートし、これにより細胞−
細胞相互作用又は細胞−基質相互作用を阻害することを
特徴とする。適当な生物学的調製物には細胞培養物及び
生物学的流体、例えば血清、尿、滑液及び脳を髄液が含
まれる。本発明はまた、ヒトのごとき温血動物における
細胞−細胞相互作用又は細胞−基質相互作用を阻害する
方法を提供する。この方法は温血動物に炭水化物−炭水
化物相互作用を阻止する薬剤の有効量を投与し、これに
よって細胞−細胞相互作用又は細胞−基質相互作用を阻
害することを特徴とする。これらの方法のための適当な
薬剤には前記のものが含まれる。サッカラード及びグリ
ココンジュゲートは一般に、約０．５〜１０　ｍ　Ｍの
最終濃度でインキニベートされ、又は現場で（ｉｎ　５
ｉｔｕ）　　この濃度を達成する濃度で投与されるであ
ろう。

炭水化物−炭水化物相互作用の代表例はＬｅＸそれ自体
１ごよるＬｅＸ（Ｇａｌβ１−４　ＣＦｕｃαｌ　−３
〕Ｇ１ｃＮａｃβ１−Ｒ）のＳ忍識である。ＬｅＸペン
タオシル糖脂質（ＩＩＩ３Ｆｕｃ　ｎＬｃ、）　はヒト
結腸腺癌から調製された。本発明において、ＬｅＸはＬ
ｅＸを認識する構造であることが示される。さらに具体
的には、ＬｅＸを含有するりボゾームはＬｘｘ糖脂質と
有意な相互作用を示したが、しかし他の糖脂質とは相互
作用を示さなかった。なお、糖脂質はプラスチック表面
にコートされたものである。

第二に、ＬｅＸを含有するりポゾームは自己集合するこ
とが観察された。第三に、ＬｅＸ　ＩＪポゾームと固定
化ＬｅＸ糖脂質との相互作用及びＬｅＸリボゾームの自
己集合はいずれもＬＦＰ　ＩＩＩにより阻害された。第
四に、トリチウム標識されたＬＦＰ　ＩＩＩの拡散性（
半透膜を通しての下方ボイデン（Ｂｏｙｄｅｎ）チャン
バーから上方ボイデンチャンバーヘ）がＬｅＸ　ＩＪボ
ゾームにより阻害された。さらに、ＬｅＸ−ＬｅＸ相互
作用は二価陽イオン（Ｃａ２“９Ｍｇ”ａ　に高度に依
存性であり、そしてＢＤＴＡにより阻害された。

炭水化物−炭水化物相互作用の他の代表例はガングリオ
トリアオシルセラミド軸ａｎｇｌ　ｉｏｔｒｌａｏｓｙ
ｌ−ｃｅｒａｍｉｄｅ）　（Ｇｇ　３　；　Ｃａ１ＮＡ
ｃβ１−４Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃβ１−Ｃｅｒ）とシア
ロシルラクトシルセラミド（ｓｉａｌｏｓｙ−１１ａｃ
ｔｏｓｙｌｃｅｒａｍｉｄｅ）　（ＧＭ、　；　　Ｎｅ
ｕＡｃα２−ｅ３Ｇａｌβ１→４Ｇ１ｃβ１→Ｃｅｒ）
との特異的相互作用である。

Ｇｇ３はモルモットの赤血球から調製され（Ｓｅｙａｍ
ａ及びＹａｍａｋａｗａＳＪ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、（東京
）　７５　：８３７−８４２゜１９７４３　、そして０
Ｍ３はイヌの赤血球から調製さｃｈｓｅｌｋｒａｎｋｈ
ｅｉｔｅｎ、　２０　：　１８０−１８３．１９６０）
。本発明において、Ｇｇ３及びＧＭ、は相互に認識する
ことが示される。さらに詳しくは、ＧＭｚを含有するり
ボゾームはＧｇ３と特異的相互作用を示したが、他の糖
脂質とは相互作用を示さなかった。なお、糖脂質はプラ
スチック表面にコートされたものである。Ｇｇ３がコー
トされた固相を抗−Ｇｇ３　ＭＡｂで前処理することに
より、ＧＭｓを含有するりポゾームとの相互作用が阻害
された。６ｇ３／ＧＭ＊相互作用は二価陽イオン（Ｃａ
”　、　Ｍｇ”）　により促進され、そしてＢＤＴＡに
より阻害された。

前記のように、本発明の１つの観点は、温血動物におけ
る転移の抑制方法を提供する。この方法は、温血動物に
炭水化物−炭水化物相互作用を阻止する薬剤の療法的有
効量を投与し、ここで該炭水化物−炭水化物相互作用の
少なくとも一方の構成員が悪性腫瘍細胞に存在する、こ
とを特徴とする。悪性腫瘍細胞の由来には肺癌、乳癌、
直腸結腸癌及び尿性器癌、例えば膀胱癌及び前立腺癌が
含まれる。適当な薬剤には前記のものが含まれる。

離れた部位での二次腫瘍コロニーの形成は多段階の過程
であり、腫瘍の侵入がその第一段階である。腫瘍細胞は
宿主の組織の障壁、例えば上皮基礎膜に局所的に侵入し
て間質に達し、そこでそれらは血管（又はリンパ管）に
達し、これにより更なる播種を行・う。血管壁の内皮層
に侵入した後、循環腫瘍細胞が循環中に放され、モして
内皮細胞管腔表面に又は露出した基礎膜に付着すること
により標的器官の前毛細静脈に捕捉される。最後に、造
出した腫瘍細胞はそれが発生した組織とは異る組織中で
増殖しなければならない。

炭水化物−炭水化物相互作用は転移の形成において少な
くとも２つの段階で重要である。第一に、これらの相互
作用は、内皮細胞管腔表面への又は露出した基礎膜への
付着による標的器官の前毛細静脈に循環腫瘍細胞が捕捉
される時に重要であろう。第二に、これらの相互作用は
、標的器官中で増殖する複数の腫瘍細胞間の細胞付着の
過程のために重要であろう。これらの炭水化物−炭水化
物相互作用を阻止することにより、転移が効果的に抑制
される。

炭水化物−炭水化物相互作用を阻止することによる腫瘍
細胞−腫瘍細胞付着の阻雪の代表例はＦ９奇形癌（ｔｅ
ｒａｔｏ＊ｃａｒｃｉｎｏｍａ）細胞が関与する。

本発明において、Ｆ９細胞の自己集合がＬｅＸオリゴサ
ッカラードＬＦＰ　Ｈにより阻害されることが示される
。さらに具体的には、マウス奇形癌Ｆ９細ｌ包（Ｂｅｒ
ｎｓｔｉｎｅら、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、へｃａｄ、Ｓｃ
ｉ、ＩＩｓへ、　　Ｔｏ：３８９９−３９０３．１９７
３）を、４．５ｇ／Ｉ！グルコースを含有しそして１０
％（Ｖ／Ｖ）ウシ胎児血清が補充されたダルベコの改変
イーグル培地（Ｄｌ、４Ｂ）中ゼラチンコートされたプ
レート上で増殖せしめた。このプレートは水中０．旧％
ゼラチンを３０分間インキニベートすることにより調製
した。

ゼラチンコートプレート上にコンフルエントに増殖した
Ｆ９細胞を、標準的トリプシン／［ＥＤＴＡ溶液を用い
て収得し、そして１０％ＦＣ３を含有するＤＭＥ中で洗
浄した。次に、細胞をＰＢＳ溶液（０，９ｍｆ、４　Ｃ
ａ”　、　Ｑ、　５ｍＭ　Ｍｇ”及び０．１ｍＭ　Ｍｎ
２＋を含有する）中に注意深く再懸濁し、そして・０．
１％ＦＣ３を補充した。細胞サンプルを注意深く混合し
た後にピペットで取り、そして手動計数、及びコールタ
−・カウンター（モデルＺＢＩ、　Ｃｏｑｌｔｅｒ　Ｅ
ｌｅｃｔｒｏ−ｎｉｃｓ　Ｉｎｃ、、　Ｈｉａｌｅａｈ
、　ＦＬａ）による計数の両方を行った。集合した細胞
を排除して単一細胞の手動計数と関連付けるため、コー
ルタ−・カウンター上での開口の調整を行った。集合測
定のため、細胞を約２．６　ＸＩＯ’　／ｍ１の濃度に
調整した。３７℃にて１時間の後、５０Ｉのアリコート
を５０．／のエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、Ｌ
ＦＰ　ＩＩ又はしＦＰＩ溶液と混合し、そして細胞を３
７℃にてさらに１５分間インキコベートした。ＥＤＴＡ
％　ＬＦＰ　ＩＩ及びしＦＰＩ［の最終濃度はそれぞれ
５０ｍＭ　、２０ｍＭ及び２．ＯｍＭであった。

コールタ−・カウンターでの測定の前に、１０（１ｔｄ
容量のサンプルを１０ｒｎＩ！に稀釈し、そして注意深
く混合した。細胞の顕微鏡写真を撮った実験において、
約０．８　Ｘｌ０６細胞を小ペトリ皿中の異るＰＢＣ溶
液（最終容量１００ＩＪ１）に入れた。次に、この細胞
懸濁液を鉱油で覆い、そして３７℃にて３０〜６０分間
インキニベートし、そして細胞集合の過程を顕微鏡下で
観察した。

第１図に示すように、Ｆ９細胞は（：　ａ　２＋及びＭ
ｇ２−（パネルｂ）の存在下で集合するが、しかしなが
らこの集合はＥＤＴＡ　（パネルａ）及びＬＦＰＩＩＩ
　（パネルｄ）により阻害され、しかしＬＦＰＩＩ（パ
ネルＣ）により阻害されない。Ｆ９細胞集合の程度は、
開口を適当に設定したコールタ−・カウンターにより測
定して、遊離の（すなわち集合していない）細胞の数（
パネルｅ）により半定量的に表現された。遊離細胞はＬ
ＦＰ　Ｉの存在下で非常に増加したが、ＬＦＰ　ＩＩの
存在下では非常に少なかった。

炭水化物−炭水化物相互作用の阻止による腫瘍細胞〜腫
瘍細胞付着の阻害の他の代表例は黒色腫細胞が関与する
。本発明において、黒色腫細胞系へのＴ細胞リンパ腫細
胞系の付着が、特異的炭水化物−炭水化物相互作用をブ
ロックする種々の薬剤により阻害されることを示す。特
に、マウスＢ１６黒色腫細胞系（Ｇ　Ｍ　＊の高発現系
）へのマウスＴ細胞リンパ腫１５１７８＾Ａ１２細胞系
（Ｇｇ３の高発現系）の特異的相互作用がこのような薬
剤により阻害されることを示す。第２図（パネルａ及び
ｂ）に示すように、Ｇｇ３を発現しない遺伝的に変異し
たクローンであるマウスＴ細胞リンパ腫１５１７８ＡＶ
２７細胞系はＡＡ１２細胞と共に観察されたＢ１６細胞
との特異的相互作用を示さない。

マウスＢ１６黒色腫細胞（高レベルの０Ｍ３を発現する
）はアメリカン・タイプ・カルチニア−・コレクション
（ロックビル、　ＭＯ）から購入した。

Ｂ１６細胞による０Ｍ３の発現はＭＡｂ　Ｄｆ（２（Ｄ
ｏｈｉら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　４８　：５６８０
−５６８５．１９８８）　により明らかにされた。マウ
スＴ細胞リンパ腫系Ｌ５１７８　ＡＡ１２（これは高レ
ベルのＧｇ３を発現し、ＭＡｂ２（３４により証明され
る；　　Ｙｏｕｎｇら、Ｊ、Ｅｘｐ９Ｍｅｄ、　　１５
０　：　１００８−１０１９．　１９７９）　　はＩＣ
Ｉ　（Ｙｏｕｎｇら、Ｊ、１ｍｍｕｎｏ１．１２６：１
−６．１９８１）からクローニングされた。Ｇｇ３を発
現しない変異体り０−　ンＬ５１７８　ＡＶ２７もＹｏ
ｕｎｇら、前掲に記載されている。すべての細胞を、１
０％ＦＣ３を含有するＲＰＭＩ　１６４０中で増殖せし
めた。

ＧＭ　３を高度に発現するＢ１６細胞（５ＸＩＯ，’　
／４）を２４−ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ、　０ｘ
ｎａｒｄ、　ＣＡ）上で、２４時間、ＤＭＥ中で増殖せ
しめた。付着細胞の大部分を無血清培地で洗浄した。Ａ
Ａ１２細胞（Ｇｇ３発現系）又ハＡｖ２７細胞（６ｇ３
非発現系）を、２％ＦＣ３，１ｇ／ｌグルコース及び５
０μＣｉ　’Ｈ−ＧＩＣＮＨ２を含有するＤＭＥ中で２
４時間増殖せしめた。

次に、ラベルされたＡＡ１２　（７１，０００ｃｐｍ／
１０５細胞）及びＡＶ２７（３３，０００ｃｐｍ／１０
５細胞）を遠心分離により集め、２％ＦＣ３及びＩｇ／
βグルコースを含有するＤＭＥ中に懸濁し、そして細胞
数を６Ｘ１０５／ｒＩＩｌに調整した。この懸濁液（１
ｍｆ）を、ＢＩ３黒色腫を付着細胞として増殖せしめた
ファルコン（Ｆａｌｃｏｎ）プレートの各ウェルに加え
た。次に、インキュベートされたプレートを無血清新鮮
培地で２回洗浄した。Ｂ１６細胞に付着しないＬ５１７
８１Ｊンパ腫細胞を洗浄除去した。各プレート中の残留
細胞をトリプシン処理し、集め、そして計数した。

第２図（パネルＣ）はＢ１６細胞へのＬ５１７８細胞の
付着に対する１０ｍＭ　ＢＤＴＡ、　５ｍＭシアル酸、
５ｍＭシアリルラクトース、抗−ＧＭ３抗体ＤＨ２及び
抗−Ｇｇ３抗体２Ｄ４の効果を示す。１２−ウェルプレ
ート中で増殖したＢＩ３黒色腫細胞、及びＬ５１７８１
Ｊンパ腫細胞をそれぞれＤＨ２溶液（２ｆｆ　／ｒｎ！
り及び２Ｄ４溶液（５ｆｆ　／−）で処理し、室温にて
３０分間放置し、無血清ＤＭＥで洗浄し、そしてリンパ
腫細胞懸濁液及び黒色腫細胞層と共に５時間インキュベ
ートした。ＢＩ３黒色腫へのＡＡ１２細胞の付着がシア
リルラクトース、ＭＡｂ　ＤＨ２又はＭＡｂ　２Ｄ４の
存在下で顕著に阻害された。ＡＡ１２及びＡＶ２７の両
者の付着は一般にＥＤＴＡにより抑制された。

療法的使用のため本発明の薬剤は、処置されるべき腫瘍
のタイプ及び位置に依存して種々の方法で投与すること
ができる。例えば、投与は静的注射、動脈内注射、腹腔
内注射、胸膜内注射、莢膜内注射、皮下注射、病変部カ
テーテルを通しての注入、又は病変内への直接注射であ
る。静脈内投与、動脈内投与、又は胸膜的投与は一般に
肺癌、乳癌、及び白血病性腫瘍について使用される。腹
腔内投与が脳腫瘍及び白血病のために奨められる。

皮下投与がホジキン（Ｈｏｄｇｋｉｎ）病、リンパ腫及
び乳癌のために奨められる。カテーテル注入が、転移肺
癌、乳癌、又は肝蔵の生殖細胞癌のために有用である。

病変内投与が肺及び乳房の病変のために有用である。

温血動物（例えばヒト）に投与する場合、本発明の薬剤
は水、水溶液、又は任意の生理的に許容されるキャリヤ
ーもしくは稀釈剤と混合することができる。さらに、本
発明の薬剤は免疫療法剤又は化学療法剤と組合わせて投
与することができる。

薬剤の組合わせが好ましい場合、各薬剤は同時に投与す
ることができ、又は混合しそして単一組成物として投与
することができる。この組成物は前記の経路を含めて多
くの経路により療法投与することができる。

本発明の薬剤は、リン酸緩衝液中の無菌水性液として投
与することができる。サッカラード又はグリココンジュ
ゲートの濃度は約１〜ｌｋ　／ｍｌ！であることができ
る。腫瘍部位で約０．５〜１０ｍＭの現場濃度を達成す
る膜剤の単位投与が、通常は毎日数日間にわたって投与
されるであろう。腫瘍体積の減少を確認するため、治療
の前及び治療の後にＣＡＴスキャンのごとき診断法を実
施することができる。抗体である薬剤を使用する場合、
患者の感受性を低下せしめるため、投与量を減少し、そ
して／又は他の種からの抗体及び／もしくはアレルギー
性に至らない抗体、例えばヒトもしくは霊長類の抗体を
使用することが必要であろう。

療法を開始する前に、試験管内で増殖した患者の腫瘍細
胞に対して特定の薬剤を試験するのが有利であろう。例
えば、生検の間に患者から取り出された細胞を培養し、
そして次に薬剤で処理する。

細胞の死滅及び最少投与量を決定することができる。

前記のごとく、本発明の他の観点は、本発明は温血動物
における微生物感染を抑制する方法を提供する。この方
法は、温血動物に炭水化物−炭水化物相互作用を阻止す
る薬剤の有効量を投与し、ここで該炭水化物−炭水化物
相互作用の少なくとも一方の構成員が微生物に存在する
ことを特徴とする。適当な薬剤には前記のものが含まれ
る。

「微生物」なる語は、細菌、ウィルス、真菌及び寄生体
を含む。

細胞−細胞相互作用及び細胞−基質相互作用は微生物感
染において、すなわち宿主の表面への微生物の付着並び
に付着及びコロニー形成における微生物細胞の認識にお
いて、少なくとも２つの役割を演する。細菌のごとき微
生物によるコロニー形成の過程の第一段階は宿主細胞へ
の付着である。

攻撃膜として腸上皮、尿性器上皮及び気管支上皮、並び
に硬質表面、例えば歯質が挙げられる。微生物はまた血
小板及びフィブリンに結合する能力を有し、これによっ
て心臓の弁に付着することができ、これが心内膜炎を生
じさせる。炭水化物−炭水化物相互作用は侵入微生物が
宿主表面に付着する場合に重要である。これらの相互作
用を阻止することにより、可能性ある侵入微生物が哺乳
類宿主に足場を得ることが防止される。

微生物が宿主に付着する他の方法は、宿主の表面にすで
に付着している他の微生物細胞を介してである。この現
象を共集合（ｃｏａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）　と称し、
そして２つの異るタイプの細菌細胞上の表面分子間の認
識による混合細胞集合の形成として定義される。これら
の相互作用は、例えばヒトの口腔内細菌の付着において
主たる役割を演する。歯が専門家により清浄化された後
数分間以内にエナメル表面に細菌が再度棲み付くことが
よく知られている。細菌は付着しなければならず、そし
てそれらは通常の唾液の流れにより洗浄除去されるであ
ろう。従って、歯のすべての部位が満たされれば、入っ
て来る細菌はすでに付着している細菌を認識しそしてそ
れに付着しなければならない。

異る細菌間の相互作用は高度に特異的であって、ある細
胞タイプのみが相手となり得る。共集合は関与する細胞
上の相互的レクチン−炭水化物分子間の特異的認識によ
って介在されると考えられているが、本発明における特
異的炭水化物−炭水化物相互作用の他の例である。

微生物感染を防止するためのこの方法は、細菌、ウィル
ス、真菌及び寄生体を含めての種々の微生物により誘導
される感染性疾患の予防及び治療において有用である。

本発明の薬剤は、単独で又は既知の抗菌剤と組合わせて
、予防的及び治療的抗菌用途に使用することができる。

さらに、これらは化学療法剤と組合わせて使用すること
ができる。

抗菌剤と本発明における使用のために適当な薬剤との組
合せ使用は、該抗菌剤が毒性副作用を有する場合に特に
有利である。例えば、ゲンタマイシン、ストレプトマイ
シン等のごとき抗菌性アミノグリコシドは深刻な毒性、
特に耳に対する毒性（ｏｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ）及び腎
毒性を有することが知られており、このことがこれらの
抗菌剤の有用性を低下させている（Ｇｏｏｄｍａｎ及び
Ｇｉｌｍａｎ、　Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏ−１ｏｇ＋
ｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ　ｏｆ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ
、　　第６刊、Ａ。

Ｇｏｏｄｍａｎ　Ｇｉｌｍａｎら編集；　Ｍａｃｍｉｌ
ｌａｎ　ＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ、　Ｉ　ｎＣ，、−
’−ニーヨーク、　１１６９−７１頁、１９８０年を参
照のこと）。この様な薬剤との組合わせにおける薬剤の
使用が、療法的有効性をなお達成しながら毒性抗菌剤を
低投与量で用いることを可能にする。

本発明の薬剤を標準的試験に付して、一連の細菌を試験
管内で阻害するために必要な最小阻止濃度を決定するこ
とができる。

急性毒性を評価するため、正常動物への種々の濃度での
薬剤の単一静脈内注射を行うことができる。次に、処置
された動物を注射後３０日間観察する。例えば、薬剤を
含有する食塩水の週２回の静脈内注射の後６０日まで慢
性毒性を評価することができる。体重及び器官の重量、
全体的及び顕微鏡的病状、血清電解質、溶質及び血清酵
素、又は腎及び肝機能がモニターされる。前記血清成分
にはグルコース、血尿素振窒素（ＢＩＪＮ）　、尿酸、
コレステローノペ　トリグリセライド、全蛋白質、°ア
ルブミン、グロブリン、クレアチニン、カルシウム、リ
ン、ナトリウム、カリウム、塩化物、炭酸水素塩及び陰
イオンギャップが含まれる。前記酵素にはアルカリホス
ファターゼ、乳酸脱水素酵素、血清グルタミン酸オキサ
ロ酢酸トランスアミナーゼ、血清グルタミン酸ピルビン
酸トランスアミナーゼ、及びクレアチニンホスホキナー
ゼが含まれる。

急性及び慢性発熱性も評価することができる。

例えば、動物に薬剤を１回注射するか、又は３時間にわ
たり増加する量で複数回注射する。ボルス（ｂｏｌｕｓ
）注射の後、体温を１５分間隔で測定する。

本発明の薬剤は、予防又は治療のため、多数の経路によ
り、例えば経口的に、注射（皮内注射、静脈内注射、腹
腔内注射、皮下注射、筋肉内注射を含む）により、局所
的に乾燥粉末として又は適当な生理的キャリヤー中で、
鼻及び上咽腔内膜への局所適用により、並びにエーロゾ
ル化による吸入及び呼吸器内皮への適用、等により投与
することができる。さらに、本発明の薬剤は乾燥粉末と
して又は適当な生理的キャリヤー中で包帯、縫合糸又は
絆創膏に含浸させることができる。サッカラード及びグ
リココンシニゲートは一般に、感染部位において約０．
５〜１．０ｍＭの現場濃度を達成する濃度で投与される
であろう。

温血動物（例えばヒト）に投与される場合、薬剤を水、
水溶液、又は任意の生理的に許容される医療キャリヤー
もしくは稀釈剤と混合することができる。さらに、前記
のように、この薬剤を他の抗菌剤と組合わせて投与する
ことができる。薬剤と抗菌剤との組合わせが望ましい場
合、各薬剤を同時に投与することができ、又は１もしく
は複数の抗菌剤と混合しそして単一組成物として投与す
ることができる。この組合わせは、前記の経路を含めて
多くの経路により予防的又は治療的用途のために投与す
ることができる。１又は複数の薬剤と１又は複数の抗菌
剤との組合わせに関するこの検討は化学療法剤を含む組
合わせに適用される。

この観点において、本発明は温血動物において歯垢を抑
制する方法を提供する。この方法は温室動物に炭水化物
−炭水化物相互作用を阻止する薬剤の有効量を投与し、
ここで炭水化物−炭水化物中間体の少なくとも一方の構
成員が口腔細菌細胞に存在することを特徴とする。適当
な薬剤には前記のものが含まれる。

薬剤による歯垢の抑制は摘出された歯を用いて試験する
ことができる。例えば、新しく摘出されたヒトの歯を水
道水中に集め、そして沈着物を除去するために煮沸する
。次に、これらを試験管中で１２０℃にて１５分間オー
トクレーブする。殺菌後、歯を２分間薬剤を含む試験懸
濁液２−に浸漬する。

これらを取り出し、そして１分間空気乾燥し、そして２
００ｍ１の蒸留水で洗浄する。これらの処理された歯を
１０ｍ１のチオグリコレート媒体に懸垂し、そして４８
時間のスタフィロコッカス・ミュータンスの培養物の１
０−２稀釈物０．１ｍｌを接種する。薬剤処理を伴わな
いで上記のようにして処理した歯を対照として用いる。

ｌ又は複数の薬剤を含有する歯磨を調製することができ
る。本発明の薬剤に加えて、歯磨は典型的にはグリセリ
ン、サッカリン、カルボキシメチルセルロース、水、二
酸化珪素及び香味添加剤を含有する。サッカラード及び
グリココンジ二ゲートは一般に１〜５０＋ｎＭの濃度で
存在する。

前記のように、本発明は他の観点において、温血動物（
例えばヒト）における避妊方法を提供する。この方法は
、精子と卵との間の炭水化物−炭水化物相互作用を阻止
する薬剤及び生理的に許容されるキャリヤー又は稀釈剤
を含んで成る組成物の有効量を動物に投与することを特
徴とする。適当な薬剤には前記のものが含まれる。

未受精卵の漿膜との相互作用に先立ち、成熟した精子が
透明帯に侵入しなければならない。この侵入の前提条件
は精子とこの細胞外被覆との相互作用であり、これが「
結合」と称する付着の状態を導く。透明帯中の少なくと
も１種の糖蛋白質が精子受容体として関連付けられてい
る。しかしながら、精子上の非結合分子の特定は不明の
ままであった。文献（例えば、５ｈｕｒ、　Ｊ、Ｂｉｏ
ｌ、Ｃｈｅｍ、　２５７：６８７１−６８７８．１９８
２）は酵素、例えばグリコジルトランスフェラーゼ及び
プロテイナーゼ、並びにレクチン様蛋白質に焦点を当て
いる。しかしながら、本発明は炭水化物−アミノ酸相互
作用ではなく炭水化物−炭水化物相互作用に基いている
。精子と卵との間の炭水化物−炭水化物相互作用を阻止
することにより、精子は透明帯に付着することができず
、そして妊娠が阻害される。

本発明の避妊組成物は一般に、ゲル、泡、クリーム、又
は膣内使用に適する生薬である。これらの組成物は単独
で使用することができるが、一般にこれらを障壁避妊法
と組合わせて使用することによりそれらの最大の有効性
を実現するのが好ましい。例えば、ゲルの形の避妊組成
物を約１ｍｌ〜２０蔵、好ましくは約１０１ｎｌの量で
ダイアフラムに適用し、そしてこのダイアフラムを性交
の前に挿入する。

前記のように、避組成物は、精子と卵との間の炭水化物
−炭水化物相互作用を阻止する薬剤を生理的に許容され
るキャリヤー又は稀釈剤、一般に水溶性化合物と組合わ
せて含有するであろう。好ましいキャリヤーにはポリエ
チレングリコール、及びポリオキシエチレン−ポリオキ
シプロピレンブロックコポリマー〔「ポロキサマーＪ　
（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）　Ｅが含まれる。膣内避妊組成
物におけるポロキサマーの任用はｖｉｃｋｅｒｙら（米
国特許Ｎｏ、４．３６８．１８６　；引用によりこの明
細書に組み入れる）に記載されている。この組成物はさ
らに、追加の成分、例えば緩衝剤、抗菌剤、又は粘度を
調節するために添加することができるグリセロールを含
有することができる。水を添加することもできる。薬剤
は避妊効果を提供するのに適当な濃度で含まれ、一般に
サッカラード及びグリココンジュゲートは約１〜５０ｍ
Ｍの濃度で添加されるであろう。

さらに薬剤は妊娠の経路における他の因子を阻害する小
分子及び／又は他の蛋白質と組合わせて使用することが
できる。本発明において使用するのに適当な付属分子に
はベンズアミジン、４−アミノベンズアミジン、４′−
二トロフェニル４−グアニジノベンゾエート及びその他
のものが含まれる　（Ｂｅｙｌｅｒ及びＺａｎｅｖｅｌ
ｄ、　　Ｊ、Ｒｅｐｒｏｄ、Ｆｅｒｔｉｌ。

６６　：　４２５−４３１．１９８２）。避妊組成物は
またヒアルロニダーゼ、β−グルクロニダーゼ及びβ−
Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼの阻害剤を含有するこ
とができる（Ｊｏｙｃｅら、Ｂｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｒ
ｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ３５’：　３３６−３４６．１
９８６）。避妊組成物は、毒性及び刺激の害を最小にし
て最大の避妊効果が提供されるように製剤化されるであ
ろう。

前記の組成物に加えて、本明細書に記載する薬剤は従来
技術の装具及び組成物中の他の殺精子剤の代りに使用す
ることができる。例えば、これらの蛋白質は、Ｋａｚｍ
ｉｒｏｓｋｉら（米国特許Ｎｏ、４．３８４．００３）
により開示された生薬中に、又はＤｕｎｎら（米国特許
Ｎｏ、４．５８９．８８０）の使い棄てダイアフラム中
に使用することができる。

妊娠を阻害する薬剤の能力を試験管内で、雑種マウスＢ
６Ｄ２Ｆ１から得られた精子及び卵（後記）を用いて試
験することができる。この動物は試験管内受精率が７５
〜８５％であり、そして雌性マウスが排卵剤によく応答
し動物当り平均３０個の正常卵母細胞を生産するので選
択される。

卵母細胞を３〜４週令の雌性Ｂ６Ｄ２Ｆ１マウスから集
める。動物に５国際単位の妊娠雌鳥血清ゴナドトロピン
を投与して卵胞の生長を阻害する。４８時間後、５国際
単位のヒト絨毛ゴナドトロピンを投与して排卵を行う。

最後注射の１２時間後、卵管を適出し、そしてびん状部
穿刺により卵母細胞を集め、堆積物で包囲された卵母細
胞（堆積塊）をパラフィン油のもとてフラッシャ−（Ｆ
ｒａｓｅｒ）媒体に放出せしめる。卵母細胞の分布を無
作為化するためすべての推債塊を１つの媒体器に集め、
そして次に受精媒体に入れる。精子を添加する平均１５
分間前に卵母細胞を集める。

成熟が証明された９〜１４週令の雄性Ｂ６Ｄ２Ｆ１マウ
スの副塞丸尾から精製を集める。各副輩丸は７０％〜８
０％の運動性を有する約千万個の精子を含有する。１個
の副峯丸からの細胞をパラフィン油のもとて０．２ｍｆ
のフラシャー媒体（薬剤の濃度を異にする）に入れ、そ
して３７℃にて１時間空気雰囲気中加湿した５％Ｃ０２
中でインキュベートする。

１時間の能力付与（ｃａｐａｃｉｔａｔｉｏｎ）期間の
後、精子を堆積細胞包囲卵母細胞を含有する０、２ｍｌ
のフラシャー媒体（薬剤を含有しないか又は含有する）
に加える。この精子／卵母細胞混合物を３７℃にて、空
気雰囲気中５％Ｃ０２中で２時間インキュベートし、こ
の後卵母細胞を取り出し、そして３回洗浄して過剰の精
子を除去する。洗浄された卵母細胞をパラフィン油のも
とて各０．旧ｍｌの媒体滴中に入れ、そして３７℃の環
境にもどす。さらに３時間のインキュベーションの後、
受精の指標（第二極体及び２個の前核の両方の存在）に
ついて観察する。

受精を確認するため、卵母細胞をさらに２４時間インキ
ュベートし、そして２細胞胚の形成について観察する。

上記の実験は薬剤の有効阻止濃度を分析するために設計
される。

薬剤の生体内での有効性を決定するため、薬剤を５ｍＩ
！のリン酸緩衝液に溶解することによりクリームを調製
する。この溶液を１５−のに−Ｙゼリー（Ｊｏｈｎｓｏ
ｎ　＆　Ｊｏｈｎｓｏｎ）　　と共に乳化する。このク
リーム（１００ｐ１）を共生の前に雌性マウスの膣内に
投与する。対照雌性マウスは処理しないか、又は５−の
ＰＢＳ及び１５７のに−Ｙゼリーからなる対照クリーム
を与投する。マウスを共生の１２日後に殺し、そして胎
児の数を記録する。

本発明の他の観点は、植物と病原体、例えば細菌、ウィ
ルス、糸虫及び真菌との相互作用を阻害するための方法
を提供する。この方法は炭水化物−炭水化物相互作用を
阻止する薬剤の有効量を植物に投与し、ここで該炭水化
物−炭水化物相互作用の少なくとも一方が植物病原体に
存在することを特徴とする。

細胞−細胞相互作用及び細胞−基質相互作用は植物感染
の少なくとも２つの観点において、すなわち植物への病
原体の付着、及びコロニー形成の間の病原体の認識にふ
いて重要である。植物病原体、例えばアグロバクテリウ
ム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒ　ｉｕｍ　）との間の相互作
用における最初の段階の１つは植物細胞表面への細菌の
付加である。単一細菌細胞の最初の付加に続き、植物細
胞表面での細菌の多量の集合である。付加に欠陥がある
アグロバクテリウム変異株が非毒性であるか、又は非常
に弱毒化されているという事実により示されるように、
付加は毒性のために重要である。

本発明の薬剤は植物病原体、例えば細菌又は真菌による
植物の感染を阻害するために有用である。

農業において、種子及び幼植物の根の土壌真菌の作用の
ためニーカー当り収量の低下により、綿、大豆、トウモ
ロコシ及び他の作物の栽培において深刻な問題に直面す
る。これらの損失の抑制又は除去は、本発明の土壌の感
染防止剤として本発明に記載する使用により達成される
。これらはまた、木及び貯蔵作物での細菌及び真菌病の
抑制のためにも使用することができる。

本発明の薬剤は所望により他の農薬、例えば殺虫剤、殺
ダニ剤、殺細虫剤、殺菌剤、抗ウィルス剤、除草剤及び
植物生長調節剤、並びに肥料と組み合わせて使用するこ
とができる。当業界において知られている種々のアジュ
バントも用いることができる。

本発明の方法において使用するための典型的な製剤には
、薬剤をキャリヤー又は増殖剤、好ましくは界面活性剤
及び場合によっては他の活性成分と組み合わせたものを
含む。適当な製剤には種々のサイズの顆粒、ダスト、湿
潤粉末、乳化性濃厚物、溶液、分散剤、等が含まれ、そ
の選択は感染部位における環境因子及び選択された適用
方法に依存する。典型的な製剤は、使用される添加剤及
びキャリヤー並びに望ましい適用方法に依存して活性成
分の濃度を広範に異にする。すなわち、活性成物は製剤
に対して０．１〜９９．５重量％で存在することができ
る。農産的に許容されるキャリヤーは製剤に対して約９
９．５重量％〜低く０．５重量％を占めることができる
。適合性の界面活性剤は、製剤中に用いられるとすれば
、製剤に対して１〜３０重量％の範囲が適当である。

製剤はそのまま使用することができ、あるいは活性成分
の分散を促進するのに適当な稀釈剤又はキャリヤーによ
り所望の使用稀釈まで稀釈することができる。活性成分
の濃度は製剤に対して１〜３０重量％の範囲が適当であ
る。

前記の製剤において、稀釈剤、乳化剤、湿潤剤又は溶剤
の広範な選択が可能である。所与の製剤のために最も適
当な特定の稀釈剤、乳化剤、溶剤又は湿潤剤は当業者に
より容易に決定することができる。

薬剤の植物毒性は米国特許Ｎｏ、４．４６０．７０９に
実質的に記載されている出芽後処理により決定すること
ができる。例えば、プラスチックトレイ〔３５×２５Ｘ
ＩＯｃｍ　（深さ）〕に土壌を満たし、そしてこのトレ
イに種子を播きそして温室内で２〜３週間生長せしめる
。試験すべき薬剤の所要量を試験植物の葉に上から小さ
いハンドスプレーにより噴霧する。この葉面散布の後、
植物をさらに３週間温室内で生長させる。次に活性を試
験する。上記の葉面散布において、試験薬剤をニーカー
当り５βの噴霧量で、湿潤剤の添加を伴って適用する。

葉面散布における植物の高さは種により異るが、それは
２〜４枚葉の状態であり、そして２〜１０ｃｍの高さで
ある。この葉面散布において、トウモロコシは２枚葉段
階であり、小麦は２枚枚段階であり、稲は３枚葉段階で
あり、綿は１枚葉段階であり、大豆は第二の三葉段階で
あり、そして甜菜では２枚葉段階である。

抗真菌剤としての本発明の薬剤の適用は、市販の殺真菌
剤、例えば一般名称「トリソリンＪ　（ｔｒｉ−ｓｏｒ
ｉｎｅ）　　として知られているものと比較することが
できる。小麦（農林６１号）を直径９ｃｍの植木鉢中で
１枚葉段階まで生長させる。次に、試験化合物のそれぞ
れを水で稀釈し、そして試験植物に１５ｍ／鉢の量で噴
霧する。試験植物を２０℃に保持されたチャンバーに入
れる。次に、植物にプシニア・レコンジタ（Ｐｕｃｃｉ
ｎｉａ　ｒｅｃｏｎｄｉｔａ）を接種し、２０℃のチャ
ンバー中でインキユベートし、そして蛍光灯のもとてさ
らに１０日間生長させる。感染状態を観察し、そして病
気の重症度を次の標準に基いて計算する。

貼負　　　感染状態 ０　　　試験した葉において感染スポットなし。

１　　　試験した葉において１０個未満の感染スポット
。

２、　　　試験した葉において１１〜２０個の感染スポ
ット。

４、　　　試験した葉において２１〜５０個の感染スポ
ット。

８、　　　試験した葉において５１個以上の感染スポッ
ト。

薬剤により前処理された植物における重症でない症状（
試薬ブランクを噴霧された植物と比較）の観察が薬剤の
保護効果を確認する。

すぐ使用できる調製物（適当な製剤から、例えば水で稀
釈することにより調製することができる）は通常の方法
で、例えば散布により、例えば液体噴霧、ミスト法、ア
トマイズ法、ダスト法、散乱法、潅水、燻化法により、
土壌適用、例えば混合、塗布、バンド法及びドレッシン
グ法（ダストコート法）により、あるいは浸漬により適
用することができる。使用のため、この明細書において
記載する薬剤はそのままで、又は稀釈された形で使用す
ることができる。満足すべき稀釈剤には抗菌活性に対し
て破壊的でない任意の不活性材料、そして特に水性分散
体、溶液及び乳剤を含む液体配合物が含まれる。固体稀
釈剤にはタルク、コーンスターチ、アルミナ及び珪藻土
が含まれる。本発明の抗菌剤はまた、材料、例えば天然
繊維、例えば紙、綿、羊毛及び合成繊維、例えばナイロ
ン、ポリプロピレン、並びに無生物表面、例えば硬表面
、例えば木材、ガラス、金属、タイノペゴム、プラスチ
ック、及び多孔性表面、例えばコンクリート、レザー等
の上に沈着せしめることができる。

本発明のこの観点において、薬剤は、その製剤を植物が
植えられているか又は植えられるであろう土壌に導入す
ることにより適用することができる。これは、製剤を、
植物が植えられているか又は植えられるであろう地域に
散布することにより、あるいは植物が植えられているか
又は植えられるであろう根の領域に適用することにより
達成することができる。後者の方法が適用される場合、
土壌中での薬剤の有効濃度を提供するのに十分な量の製
剤を根の領域に適用しなければならないことは容易に明
らかであろう。

水中分散質として使用するための湿潤性粉末製剤は土壌
中の良好な分散のための実際的な手段を代表する。同じ
結果を達成するための他の方法にはダストの調製が含ま
れる。本発明において有用な薬剤の幾つかは微粉末とし
て、一般に使用される粉末希釈剤、例えばタルク、粘土
精製珪酸塩、木材粉、砂、酸化マグネシウム、炭酸カル
シウム、フラー土、カオリン、珪藻土、雲母、軽石等と
配合することができる。混合物は、例えば平均粒子サイ
ズ１〜１０ミクロンに微粉砕することができ、あるいは
すでに微粉砕された成分を配合することにより製造する
ことができる。湿潤粉末は粉未配合物に０．１５％の湿
潤剤を添加することにより調製することができる。

農業用のため、ダストを、植付けの時に種子包囲土壌に
適用することができる。薬剤の濃度は土壌中で有効な且
つ非植物毒性投与量を与えるように調製される。最も経
済的で効果的な使用のため、ダストを播種の直前のうね
に集中した６〜８インチのバンドとして適用することが
できる。次に、材料を数インチの深さにすきこむことが
できる。

この処理方法は材料を節約し、そして幼植物の根糸を微
生物の攻撃から保護する。所与の作物、例えばキャベツ
の保護のため、抗菌用バンドは黒損病の防止のための８
インチから根部肥大病の防止のための１２〜１５インチ
まで異ることができる。同様に、殺菌剤が分布すべき深
さは２〜６インチと異ることができる。薬剤の最適配置
は特定の生物に依存し、そして当業者は保護されるべき
植物にとって適当な条件を選択するであろう。肥料のバ
ンドへの薬剤の含有が、当業者が理解するように、好ま
しい結果をもたらすであろう。

必要な濃度において植物毒性でない多くの分散化合物が
市販されている。これらは例えば硫酸又はスルホン酸の
アルカリ金属塩又はアミン塩、アルコール及び油、又は
ポリエトキシル化アルキルフェノール、長鎖脂肪アミン
第四級塩、部分フエノーノペ多価アルコールの部分脂肪
酸エステル等である。これらの分散化合物の多くは溶剤
可溶性の形で人手可能である。土壌への適用方法はダス
トの場合に類似している。懸濁液又は乳剤を土壌に散布
するために噴霧装置が使用され、そしてディスクの形成
により薬剤を均一に種々の深さに分布せしめることがで
きる。投与のバンド限定のために噴霧適用が効果的であ
る。

他の農業的使用のため、これらの製剤を植物病原体が関
与する葉面に適用することができる。収量及び品質を低
下せしめるために商業的に重要な病気の幾つかは、リン
ゴ及び梨の腐爛病、核果の細菌斑点、サクシの薬理病、
クルミ胴枯病、豆のコモンブライト（ｃｏｍｍｏｎ　ｂ
ｌｉｇｈｔ）　、ト７ト及びカランの細菌斑点、並びに
ポテトの割れ（ｐｉｅｃｅｄｅｃａｙ）である。本発明
の薬剤はアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ）　、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏ−ｍｏｎａｓ
）　、キサントモナス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ）　、
ｘルウイニア（Ｅｒｗ　ｉｎ　ｉａ）、及びコリネバク
テリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒ　ｉｕｍ）属によ
って惹起される病気に対して有効である。これらは、ダ
スト、水中粉末分散体、水中乳剤、又は水性浸漬浴とし
て適用することができる。これらの製剤に侍よる処理に
よって抑制され得る他の植物病はウドノコ病及び葉腐病
である。

病原体と植物との相互作用に加えて、有用な植物共生体
、例えばりゾビウム（Ｒｈ　ｉ　ｚｏｂ　ｉ　ｕｍ）の
種も植物細胞表面に付着する。リゾビウムの株はよく解
明されており、そして一般に１又は複数の植物の属に係
る狭い宿主域を有するが、常に豆科植物に限定されるわ
けではない。細菌及び植物の両者が共生の特異性に寄与
する。レクチンが２種類の共生パートナ−の結合に寄与
することが示唆されているが、これは本発明における、
炭水化物−炭水化物相互作用が細胞−細胞認識過程の特
異性を提供する他の例である。前記の一殻内タイブの薬
剤は、所望により、植物の共生を阻害するために選択す
ることができる 以上、本発明を具体的に説明したが、本発明の範囲を逸
脱することなく、多くの変更を行うことができよう。

【図面の簡単な説明】

第１図（ａ）〜（ｄ）はＦ９細胞の集合の生物の形態を
表わす顕微鏡写真であり、第１図（ｅ）は各種薬剤によ
る集合の結果を示すグラフである。 第２図（ａ）、　　（ｂ）はＢＩ３黒色腫細胞へのマウ
スリンパ腫Ｌ５１７８　ＡＡ１２細胞系（生物の形態）
の付着を示す顕微鏡写真であり、第２図（Ｃ）は付着に
対する種々の薬剤の効果を示すグラフである。 ｂ 図面の浄書（内容に変更なし） ＦＩＧ、　２

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、温血動物における細胞−細胞相互作用又は細胞−基
   質相互作用を阻害する方法において使用するための炭水
   化物−炭水化物相互作用阻止剤。 ２、炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一方の構
   成員が悪性腫瘍細胞に存在する、温血動物における転移
   を抑制するための方法において使用するための炭水化物
   −炭水化物相互作用阻止剤。 ３、前記悪性腫瘍細胞が黒色腫、肺癌、乳癌、直腸結腸
   癌、又は尿性器癌の細胞である請求項２に記載の剤。 ４、炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一方の構
   成員が微生物に存在する、温血動物における微生物感染
   を抑制する方法において使用するための炭水化物−炭水
   化物相互作用阻止剤。 ５、前記微生物が細菌、ウィルス、真菌及び寄生体から
   成る群から選択されたものである、請求項４に記載の剤
   。 ６、炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一方の構
   成員が口腔細菌細胞に存在する、温血動物における歯垢
   の抑制方法において使用するための炭水化物−炭水化物
   相互作用阻止剤。 ７、前記口腔細菌細胞がストレフトコッカス・ミュータ
   ンス（￥Ｓｔｒｐｔｏｃｏｃｃｕｓ￥　￥ｍｕｔａｎｓ
   ￥）である、請求項６に記載の剤。 ８、温血動物における避妊法において使用するための、
   精子と卵との間の炭水化物−炭水化物相互作用を阻止す
   る薬剤、及び生理的に許容されるキャリヤー又は稀釈剤
   を含んで成る組成物。 ９、前記組成物がゲル、泡、クリーム、又は膣内用に適
   する坐薬の形態である、請求項８に記載の組成物。 １０、前記キャリヤー又は稀釈剤がポリエチレングリコ
   ール又はポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブ
   ロックコポリマーである、請求項８に記載の組成物。 １１、前記薬剤がサッカラード、グリココンジュゲート
   、又は炭水化物決定基に対して向けられた抗体である、
   請求項８に記載の組成物。 １２、炭水化物−炭水化物相互作用の少なくとも一方の
   構成員が植物病原体に存在する、植物−植物病原体相互
   作用の抑制法において使用するための炭水化物−炭水化
   物相互作用阻止剤。 １３、前記植物病原体がアグロバクテリウム（￥Ａｇｒ
   ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ￥）、シュードモナス（￥Ｐｓｅ
   ｕｄｏｍｏｎａｓ￥）、キサントモナス（￥Ｘａｎｔｈ
   ｏｍｏｎａｓ￥）、エルウイニア（￥Ｅｒｗｉｎｉａ￥
   ）及びコリネバクテリウム（￥Ｃｏｒｙｎｅｂａｃ−ｔ
   ｅｒｉｕｍ￥）から成る群から選択されたものである、
   請求項１２に記載の剤。 １４、生物学的調製物中の細胞−細胞相互作用又は細胞
   −基質相互作用を阻害する方法であって、前記生物学的
   調製物を、炭水化物−炭水化物相互作用を阻止する薬剤
   と共にインキュベートし、それによって細胞−細胞相互
   作用又は細胞−基質相互作用を阻害することを特徴とす
   る方法。 １５、前記生物学的調製物が生物学的流体である、請求
   項１４に記載の方法。 １６、前記薬物がサッカラード、グリココンジュゲート
   、又は炭水化物決定基に対して向けられた抗体である、
   請求項１４に記載の方法。 １７、前記薬剤がサッカラード、グリココンジュゲート
   、又は炭水化物決定基に対して向けられた抗体である、
   請求項１、２、４、６又は１２に記載の薬剤。