JPH021464A - 連結剤およびその使用方法 - Google Patents

連結剤およびその使用方法

Info

Publication number
JPH021464A
JPH021464A JP1025625A JP2562589A JPH021464A JP H021464 A JPH021464 A JP H021464A JP 1025625 A JP1025625 A JP 1025625A JP 2562589 A JP2562589 A JP 2562589A JP H021464 A JPH021464 A JP H021464A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
acetyl
amino
compound
trifluoroacetate
alkylene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP1025625A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH0684347B2 (ja
Inventor
Dayton T Reardan
デイトン・トーマス・リアダン
Dane A Goff
デーン・アレン・ゴフ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xoma Corp
Original Assignee
Xoma Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xoma Corp filed Critical Xoma Corp
Publication of JPH021464A publication Critical patent/JPH021464A/ja
Publication of JPH0684347B2 publication Critical patent/JPH0684347B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • C07D213/71—Sulfur atoms to which a second hetero atom is attached
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/10—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/18—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C07C323/20—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton with singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/31—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C07C323/32—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton having at least one of the nitrogen atoms bound to an acyclic carbon atom of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
    • C07C327/30—Esters of monothiocarboxylic acids having sulfur atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は結合体の形成に関し、更に詳細には連結部分と
してチオエーテルまたはジスルフィド結合を利用し℃、
一方の化学棟上の炭水化物またはカルボキシル部分でも
う一方の化学種と接合させることに関する。
炭水化物またはカルボキシル部分へ種々のタイプの化合
物を連結することが種々の理由から望ましい。例えば、
免疫グロブリン？含む結合体の形成では、免疫グロブリ
ン上の特定の範囲での連結が抗原結合部位または補体結
合のにめのＦｃ鎖上の！ｌＳ位の利用能な保持するため
に、しばしば望ましい。更にもう一つの例として、アフ
ィニティクロマトグラフィーで使用されるある種の固木
支持体は結合用に炭水化物またはカルボキシル基を有し
℃おり、二相イムノアッセイに使用さｊる物質とともに
他の固相物質でも、真に同様のことがいえる。
これらの炭水化物またはカルボキシル部分へ連結するこ
とを求められる分子種の多くは直接反応する能力を欠く
分子種である。
本明細岩：では炭水化物またはカルボキシル部分での上
述のタイプの連結を形成するための新規組成物およびそ
の使用方法を供給する。新規組成物は以下の一般式 （式中、Ｒ１ばＮＨ２−およびＮＨ２−ＮＨ−からなる
群から選択される基であり； Ｒ２は−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−　、　　−Ｃ（ＯＪ−ＮＨ−
および−Ｃ（Ｏ）−からなる群から選択される基であり
； Ｒ＋ｔＧ１−Ｃｔｏアルキレン、フェニル置換Ｃ□−Ｃ
２ｏアルキレン、ベンジル置換Ｃ□−Ｃ１ｏアルキレン
、アミン置換Ｃ２−Ｃアルキレｙ、Ｃ３−Ｃ７壌式アル ］０ キレンおよびアリーレンからなる群か ら選択される基であり； Ｒ４はＨ，アセチル。
ｎはＯまたはｌであるノ の範囲内に入る連結剤である。
この式の範囲の内で、ある種の態様が好適であり、特に
それらの式を以下に示す。（これらの各々の式中のＲ１
、Ｒ３，およびＦ（４は上述のものである〕 （Ｒ５はＣ１−０５アルキルである）からなる群から選
択される基であり： ｍは０または１であり； これらの各々の式中の「アルキレン」および「アルキル
」なる用語はそれぞれ飽和の２ｆｉｔｌｉおよび１価炭
化水素基を表わし、直鎖０分枝銀および環状構造を含む
ことを意味する。アルキレン基の例としては−ＧＨ−、
−ＧＨ−ＣＨ−、−ＣＨ２−０Ｈ２−ＣＨ２−およびよ
り長い釦：　−０４（（ＣＨ３）−−Ｃ（ＣＨ３）２−
、−Ｃｄ（（ＣＨ３）−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−
ＣＨ（ＣＨ３Ｊ−、−ＣＨ（ＣＨ３）２−０Ｈ２すなわ
ち左右か逆のものりが挙げられる。好適なアルキレン基
は炭素ｃ）、１から６のもので、最も好適なのは炭素数
１から４の基である。
「環式アルキレン」なる用ｉｆ＆は、環上りいずれか２
ケ所に結合する場、所２点な持つ飽和の２価環式炭化水
素基を衣わす。例とＬ℃はシクロベンチレン、シクロヘ
キシレンおよびシクロヘキシレンが鰺けられる。好適な
孕は１．２−シクロへギシレン（結合する２点は環上の
＠接する炭素原子である）である。
「アリーレン」なる用胎は川（または多環式の基の場合
に（ま複数の環〕上のいずれか２ケ所に結合する場所２
点を°持つ少なくとも−（ｆｉの芳香点を含む２価ラジ
カルを表わて。例としてはフヱニレン、特に］、］２−
フェニレおよびナフテレンカ挙げら４る。
式！　、　Ｕ　、　ＩｎおよびＩＶでは、フェニル環上
での２ケ所の結合位置は互いに関してオルト−、メタ−
またはバラ−かあり得る。結合する位置かメタ−または
バラ−である１ヒ合物か好】Ｎであり、最も好適なσ刀
まバラ−で必ろ。Ｒの足載（／Ｊ　５ち、ピリジンおよ
びピリジン−Ｎ−オキシドへのｔｌｃ黄置換基は２−１
３−またを工４位があり侍る。２−および４−（Ｑか好
適であり、最も好適なのは２−位である。
これらの式に入る１ヒ付物の怪り？以下に示す。
Ｓ−アセチル−４−（４−アミノフェニルツー１−ブタ
ンチオール Ｓ−アセチルチオ琲酸４−アミノアニリド２−ビリジル
ー３′−プロパノイルジスルフィド、４−アミノアニリ
ド Ｓ−アセチルチオ計量ヒドラジド ２−ビリジルー：３′−プロパノイルジスルフィドヒド
ラジド ２−ビリジルー１′−メチルｍ；３′−フロバノイルジ
スルフィドヒドラジド ２−ビリジルー１’、ｌ’−ジメチル−３′−プロパノ
イルジスルフィドヒドラジド ２−ビリジルー１′、２′−ジメチル−３７−プロパノ
イルジスルフィドヒドラジド ２−ビリジルー２７　、２／−ジメチル−３′−プロパ
ノイルジスルフィドヒドラジド ２−ビリジルー１’−（２’−エタノイル）−シクロプ
ロパンジスルフィドヒドラジド ２−ビリジルー１１．１ｔ−ジメチル−２７−アミノ−
３′−プロパノイルジスルフィドヒドラジド２−ビリジ
ルー１′−インプロピル−２′−エタノイルジスルフィ
ドヒドラジド ２−ビリジルー１′−フエニルー２′−エタノイルジス
ルフイドヒドラジド ２−ビリジルー１７−メチル−２７−エタノイルジスル
フィドヒドラジド ２−ビリジルー１７　、１／−ジメチル−２７−エタノ
イルジスルフィドヒドラジド ２−ビリジルー１’−（２’−エタノイル）−シクロヘ
キサンジスルフィドヒドラジド ２−ビリジル−１’　−（２’−エタノイル）−シクロ
へブタンジスルフィドヒドラジド 本発明は史にこれらの化合物の水浴性塩および肪導体を
も含む。塩はカチオン型の化合物のアミン（−１：たは
ヒドラジンノ末端を補足するアニオン証部分によって形
５ｙｊ、され得る。このような塩の例としＣは酢ｇ塩、
トリフルオロＩ￥ｉ−酸塩、ハロゲン化水累酸塩、特に
塩酸塩や臭化水素酸塩。およびトルエンスルホン酸塩か
挙げられろ。訪虚体としては、同じ式ケ持つが分子のい
一’（ｈの末外基の結合能力を妨げない位置に電荷を持
つ基？付加した化合物がＯＪ能である。このよっな訪導
体の例としてはスルホン酸＜−８ｏ３−）基を持つもの
および反応性のないアミノ基（例えばジエチルアミノ基
）な持つものが掌げｌ−１れる。こｔｌらの中で最も好
適なものはトリフルオロ酢酸塩である。
本発明の化合物は、上に・記載されたような望ましいｆ
ｉ￥換基を待った式に従って選択される当事者に良く知
「）ねた従来からの技法によって合成さハ−る。例えば
（Ｒ１＝ＮＨ２−の式［１，ｌおよびＩＶにおけるノア
ミノフェニル末端基を持つ化合物は、相当するニトロフ
ェニル類似体を還元することによっ℃合成できる。Ｒ１
がヒドラジノ基である化合物はＮ−を保廐したヒドラジ
ノ出発物質または過当に置換されたカルバセイトから合
成できる。
式Ｉの化合物は相当するニトロフェニルアルコールから
合成できる。Ｒ１とし℃アミン基を持つ式１の化合物は
適当に置換されたＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステ
ルを適当に置換された４−アミノアニリンと反応させる
ことによつ℃合成できる。この化合物に（ま他の一般的
な結合方法も使用できる。
カルボニルアミノメチレン基を含む化合物はＮを保膿し
たアミン安息香酸を適当なアミノジスルフィドまたはＳ
？保峻したアミノチオールと結合させることによって合
成できる。Ｒとし℃ヒドラジノ基を持つ弐■の化合物は
Ｎを保岐したヒドラジノ安息香酸を適当なチオール含有
アミンと結合させることによつ℃合成できる。Ｒ１とし
℃ヒドラジノ基を持つ式Ｖの化合物はチオール含有カル
ボン酸を適当に置換されたカルバゼイトと結合させるこ
とによって合成できる。
上述の訪導体と同様にこれらの式の１１０囲に入る他の
化合物の合成は、上述の方法を当事者に容易に理解でき
るような適当な変化を加えて行なうこともできる。
塩はカルバメイト型の化合物を適当な酸で変えることに
よって容易に合成さね、遊離塩基は塩基で処理すること
によって形成できる。
これらの化合物は他の化合物の炭水化物基またはカルボ
キシル部分の部位にスルフヒドリルまたはジスルフィド
官能基を入れたり、特定の官能基（丁なわち、一方の化
合物の炭化水素またはカルボキシ部分と他方の化合物の
チオールまたは電子欠損部分］で２つの化合物を連結す
るのに有用である。チオール基の場合、連結剤の相当て
る末端での反応によりジスルフィド基が生成されるか、
ジスルフィド交換によっ℃生成するのが好適である。マ
レイミドやα−ハロカルボニル基のような電子欠損部分
の場合は、求核置換または付加反応による。
これらの連結剤の用途は、少なくとも一方の化字種に関
して位置特異的な方法で、またいくつかの場合には両方
の化学種でも位置特異的にＬ℃、化学種間を連結させる
ことである。従っ℃これらの薬剤は例えは蛋白質や他の
分子を他の蛋白質またはカラム支持体やガラスのような
物質中の炭水化物やカルボキシル基あるいはフェニル７
　ミ７　。
ヒドラジンまたはヒドラジドが反応する特定のタイプの
官能基を含む物質と連結させるのに利用できる。それら
はまた例えば２個の強い電気陰性基にはさまねたエチレ
ン基（すなわちマレイミドノのような他の化学種の箪気
欠伯部分との反応で、位置特異的にスルフヒドリル部分
を導入するのにもネ１１用できる。
こｒらの連結を形成するために使用さｒる連結反応１ま
当事者に良く知られた従来からの技法に従って行なうこ
とができる、炭水化物部分を含む化学種の場合、炭水化
物をまずアルデヒドに変える。
次いで既知の従来からの反応により℃連結剤のアミノ末
端と反応させてイミンまたはヒドラゾン結合を形成し、
必要ならば次に還元することもできる。化字種に１個よ
りも多い炭水化物部分が存在する時は、その炭水化物基
か付いている分子の型によって、ある特定の炭水化物を
選択的に酸化てろ場合もある。例えは免役グロブリンの
繍１合、ガラクトースオキシダーゼまたは温和な条件下
での過ヨウ素ω塩な用いることによって、炭水化物側鎖
な選択的に鹸化することができる。上述のように連結剤
の他の末端での反応はその反応がジスルフィド交換かま
たは求核置換のいずねであるのかによるであろう。いず
れの場合でも、当事者に既知の従来からの方法を使用で
きる。
カルボキシル部分を含む化学種の場合、連結剤のアミン
末端が結合し℃アミド結合を形成する。
本発明の連結剤によって多種類の化字種対を連結するこ
とかでさる。例とし℃は一般に蛋白質および巨大分子２
他の蛋白質や巨大分子または二様６１キレート剤１発光
剤およびＮＭＦ（シフト試薬のようなより分子量の小さ
い化学種との結合があろう特に有効な例はＦｃ領域で免
疫グロブリンを毒素や標識と結合させ、その毒素や標識
に対し℃その免疫グロブリンに特有の位置特異性を生じ
させるものである。このような標識の例としては、酵素
、（二機能キレート剤による）放射性同位元素および（
二機能キレート剤でも可能なノケイ元剤が革げらねる。
以下の実施例は説明するために提供するもので、発明を
少しも制限したり限定しないこと？意味し℃いる。こね
らの実施沙］１では、以下の略語な使用する： Ｎ１ｖｌＲ：ｆｉＯＭ）］３　の核磁気共鳴：全ての化
学シフＮｉテトラメチルシランに相対し たδ値で表わす；“Ｓ″＝＝シ／グ レンドｂｒＳ″二幅広いシングレット、”ｄ“＝ダブレ
ット、１ｔ″＝トリブレンド、＠ｍ”＝マルチプレヴト
、“ａｒ″＝芳査族 ＩＲ：赤外スペクトル；値はｃｌｎ−１で表わす；”　
ｓｈ　”　＝ショルダー（肩）、“ｂｒ　”　＝幅広い ＬＨＭＳ：低分解ａヒ質量分元法（マススベクトロスコ
ビノ、強度は暴竿ピークへの相対 値である。
ＴＬＣ：博１−クロマトグラフィー；値はＲｆで表わ−
ｆ（先端に対する比率〕 ＵＶ／ＶＩＳ：　　紫外／町祝スペクトル；値は相対的
な吸収で表わす ＴＦＡニトリフルオロ酢酸 ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル ＡＣ：　アセチル ｓ、ｍ、　：　　出発″吻宵 実施ψＩＪ　　Ｉ Ｓ−アセチル−４−（４−アミノフェニル）−１−ブタ
ンチオールの合成 本実施例は本発明の範ｕ内の化合物の一つでろ６３−ア
セチル−４−（、４−アミノフェニル）−１−ブタ／チ
オール（上記の式１の構造式のもので、Ｒ１が４−アミ
ノで、Ｒ３が−（ＣＨ２〕、−で、Ｒ４がアセチルの化
合物ノの合成を例示する。
Ｓ−アセチルー４−（４−ニトロフェニル）−１−ブタ
ンチオール（１，Ｃ１，３，９５ｍｍｏ／！、　Ｊをメ
タ）−ル（２５ｍｌ）に溶かし、窒素雰囲気下水浴中で
ＳｎＣ；ｔ２・２Ｈ２０（４，４５？　、　１９．８１
１１ｍ０４，１と６０°Ｃで６時間加熱した。その組成
は〔薄層クロマトグラフィー（以下［ＴＬｃＪと略す）
で調べると］４時間後から変化していなかったが、若干
の出発物知かまだ残っていた。（ヘキサンと酢酸エチル
９０：１０の混合層で、生成物はｆ（ｆ’　ＯＯであり
、出発物質はＲｔ’　０．４５に観察された。〕次いで
５ｎＣ６２・２Ｈ２０を史に添加した。６時Ｉａｉ］後
反応混合物を氷上で冷却し℃、次に冷却した５０％　飽
ＷＪ　”）　Ｎ　ａ　ＨＣＯ３水溶液（１００ｍｌ）に
よッ℃ｐＨ７にした。
かさばった白色沈澱が生じた。この沈澱を酢酸エチルで
４回（１００ｍＡ！ずつ）抽出した。その有機層？水洗
し、ＮａＳＯ４で乾燥して真空下で譲縮した。Ｎ　ｌｖ
ｉ　Ｒにより（目的の生成物の存在の決定的な証明であ
るノチオアセチル基の存在が示さねた。粗収量は０．６
０５’（６８％であった。
粗製生成物をＳｉＣ２にヘキサン／酢酸エチル（９０／
ＩＯＪからヘキサン／酢酸エチル（８０／２０ノで溶離
するフラッシュクロマトグラフィーにかけた。主安生成
物に２０％酢酸エチルで溶離し、ヘキサン／酢酸エチル
（９０／ＩＯＪでＲｆＯ，０８を示し、油状物とし”［
３００％’（収率３４％〕得ろねた。生成物がＳ−アセ
チル−４−（４−アミノフェニル）−１−ブタンチオー
ルであることの固定は以下に示ｆＮＭＲ，ＴＬＣ，ＩＲ
，ＬＦ（ＭＳおよびＵＶ／ＶＩＳＫよって確認された：
ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）：　　６．８８（ｄ　、２Ｈ、ａ
ｒ−）：　６．５０（ｄ、２Ｈ，ａｒ、）；　　３．４
８（Ｓ、２Ｈ，ＮＦ２）；２．８５（ｍ、２Ｈ，ＣＨ２
に　　　２．４７（ｍ、２）（、ＣＨ２）；２．３２（
Ｓ、３Ｈ，ＳＡＣに　　　１．５７（ｍ、４Ｈ，２ｃＨ
２ＪＩＲ（ＮａＣ６，ニー）Ｊ：　　３４４０．３３９
０（ＮＦ２に２９３０．１６８０（Ｓ、ＳＡＣ〕；　　
　１６１８．１５２８（ＮＦ２）；　　１２７８．）１
３５゜９６０．８３０（出発物質における１３５０ｍ−
”の強いＮ０２吸収が消失） ＬＲＭ８：　　　２２３（Ｍ＋、１４．０％）　；　　
　１８１（Ｍ＋−ＧＯＧＨ３，２２，０％）　：　　　
１０６（１００％）ＴＬＣ（９０／１０ヘキサン／Ｅｔ
ＯＡＣ）：　　Ｒｆ”０．０８にンヒドリン陽注ノ ＵＶ／ＶＩＳ：　　　（ＣＨＣｚ２）２９６（０，３３
Ｊ、２５０（１，４１に（ＣＨ３０）１ノ２８８　（０
，０５）　、２３４（０，６９）、２１４実施例　２ ４−（４−アミノフェニル）　−１−ブタ／チオールの
合成 この化合物の構造式は上記の式１のものでＨｌが４−ア
ミノで、Ｒ３が−（ＣＨ２）、−で、Ｒ４がＨのものに
相当てる。
Ｓ−アセチル−４−（４−アミノフェニル）　−１−ブ
タンチオ−ｋ　（１，３ｆ　、　５．ｇ　ｍｍｎｔ）２
エタ）−ル（２ＦＩＪＪに溶かし、望素雰囲気下暗所中
室温で１Ｍアンモニア水と一晩撹拌した。次に２ＭＨＣ
４でｐＨを６．０に調整し、その浴液をｇｔＯＡ０７５
ｍｌずつで３回抽出した。有機層？水洗し、Ｎａ２５ｏ
４　で乾燥し℃真空下で濃縮すると淡黄色液体が０．９
４？（収率９０％〕得られた。生成物が４−（４−アミ
ノフェニル）−１−ブタンチオールであるという同定は
以下に示すＮＭＦ（、ＴＬＣ。
ＩＲおよびＵＶ／ＶＩＳによって確認された。
ＮＭＲ（ＣＤＣ；ｔ３Ｊ：　　６．９２（ｄ、２Ｈ，ａ
ｒ、］；　　６．５３（ａ、２Ｈ，ａｒｉ；　　３．５
３（Ｓ、２Ｈ，Ｎ）１□に２．２８−２．７５（ｍ、４
Ｈに　　１．０８−１．９２（Ｉｌｌ、５Ｅ−ＩＪＩＦ
＋（ＮａＣ６，−一ト）：　　３４４０．３３６０．３
０２０゜２９３０．２８６０．１６２０（Ｓ）、１５１
５（Ｓ）。
１４３５．１２８０（３）、１１８５．１１３０．８３
０ＴＬＧ（５０１５０ヘキサン／ＥｔＯＡＣ）：　　ｆ
（ｆ　　Ｏ，６５ＵＶ／ＶＩＳ：　　　（ＣＨ２Ｃ／、
２Ｊ２９６（０，２６１Ｊ、２４６（１，０５ノ；　　
　（ＣＨ３０８ノ２９０（０，１４７ノ、２３８（１，
Ｇ２Ｊ、２１０（０，７０２ノ 実施例　３ ２−ピリジル−４’−［（１−（４−アミノフヱニルノ
〕ブチルジスルフィドの合成 この化合物の構造式は上記の式ｌでＲ１が４−アミノで
、Ｒ３か−（ＣＨ２）、−で、Ｒ４が２−ピリジルチオ
のものである。４−（４−アミノフェニル）−１−ブタ
ンチオール（０，９４５’、５．２　ｍｍ０６Ｊｆ：Ｅ
ｔＯＡｃ　（２ＣＪｒａｌ］に溶かし、固体の２．２’
−ジピリジルジスル７　イト（１，１５５’　、　５．
２　ｍｍｏｔ）と反応させた。全℃の固体が溶けた陵、
ＢＦ３・（Ｃ２Ｈ５）２０を４簡加え、その浴液を５５
℃の水浴で温めた。ジスルフィド父換はゆるやかであっ
たので、２時間区ベンセン＜１７ｒｎｌ）を加え℃、温
度？６５℃に上げた。史に２０時間後溶媒を真空下で除
き、粗製生成物をヘキサン中５−２０％ＥｔＯＡｃの段
階的グラジェントで溶離するクロマトトロン〔ＳｉＯ２
，ハリソンリサーチ（Ｈａｒｒ　１ｓＯｎＦ（ｅｓｅａ
ｒｃＪ）で情表した。その混合ジスルフィドは淡黄色油
状物とし′Ｃ０，４１？（収率２７％）得られた。生成
物が２−ピリジルー４’−４１−（４−アミノフェニル
ノコブチルジスルフィドであるという同定は以下に示−
ｆＮＭＨ，ＴＬＣおよび’Ｉ［によっ℃確認された： ＮＭＲ（ＧＤＧｔ３）：　　８．４５（ｍ、ＩＨ，ビリ
ジルノ；　７４２−７．８２　（ｍ　、　２Ｈ、ピリジ
ル）；　　ｆｉ、７５−７．１８（ｍ。
Ｉｆ−］、ビリジルノ；　　６．ｑ２（ｄ、２Ｈ，フェ
ニルノ；６．５５（ｄ、２Ｈ，フヱニルノ；　　３．５
８（Ｓ、２Ｈ，Ｃ（Ｏ）２ノ；２．２５−３．００（ｍ
、４Ｆ（，２ＣＨ２に　　１．３Ｂ−２，００（ｍ、４
Ｈ，２ＣＨ２Ｊ ＩＦｆ（ＮａＣ６，＝−）Ｊ３４３０．３３４０．２９
３０（ＳＪ　。
１６２０．１５７５．］５２０．１４５０．Ｊ４２０．
１２８０゜］１２０．８３０．７６５ ＴＬＣ（５０１５０ＥｔＯＡｃ／Ａ、キサツノ：　　）
（ｔ’　　０．７４実施例　４ １、Ｓ−アセチルチオ酢酸、４−（ｔ−ブトキシカルボ
ニルアミツノアニリドの合成 この化合物は（下記のノドリフルオロ酢酸塩への前駆内
として合成した。
Ｓ−アセチル酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステ
ル（、１，２９？　、　５．６　ｍｍｏｌ　オヨび４−
（ｔ−ブトキシカルボニルアミツノアニリド（１，５Ｓ
’　、　５．６　ｒｎｍｏｔ　）を酢ｆｅエチル（３０
ｒｎｇ）に溶かした。その溶液を室温で３．５時間撹拌
し、次に４５℃で一晩撹拌した。反応混合物は終始無色
のままであった。
次に反応混合物を１０％飽和ＮａＨＣＯ３水溶液５０ｒ
ｎｉずつで２回洗浄し、次にＨ２Ｏ（５０ｍｌ）で洗浄
した。有＠Ｉ＠をＮａ２ＳＯ４で乾燥して真空下で内線
すると黄色油状物が得られた。こＦｌを５０１５０酢酸
工チル／石油エーテル中でスラリーにした５ｉ０２カラ
ムに乗ぜ、その浴液で溶離てるフラ・ンシュクロマトグ
ラフィーに２回かけた。最も速く流出して米だ分画をた
めて、内線した。得られた固体を塩化メチレン／石油エ
ーテルから再結晶すると融点１６１−１６２℃の白色固
体が１．２２　！ｉ’−（収率６７％）得らねた。この
固体（オ、以下に示すＩＦｌ、ＮＭＦｌ、ＵＶ／ＶＩＳ
およびＴＬＣによりＳ−アセチルチオｅｉ、４−ｃｔ−
ブトキシカルボニルアミツノアニリドと同定３ｈた： ＮＭＲ（ＧＤＧｔ３）：　　８．００（ｂｒ　　Ｓ、Ｉ
Ｈ，ＮＨに７．３３（Ｓ、５Ｈ，ａｒ、ｌ；　　６．５
５（ｂ工゛　ｓ、ＩＨ。
ＮＨ］；　　３．６５（Ｓ、２）１．ｃ、Ｉ４゜Ｊ：２
．４３（Ｓ、３Ｈ。
５ＡＣＪ：　　１．５２（ｓ、ｑＨ，ｔ−ブチルノＩＲ
（ＫＢｒ］　；　　　３３５０（ＳＪ、１１５（Ｓ、５
ＡＣＪ。
１６６０（Ｓ、アミドＣ＝○］、１．５５０（Ｓ）、１
４１０゜１３１５．１２３５．１．１７０．１０６５．
８２５，７０５゜ＵＶ／ＶＩＳ：　　（ＣＨ３０Ｈ）２
６２（０，５９７）、２１０（０，５１８）；　　（Ｃ
Ｈ２Ｃ６２）２７０（ｓｈ、ｏ、７５ｏ）。
２５８（０゜８７３） ＴＬＣ（５０１５０ＥｔＯＡｃ／ヘキサンノ：　　８１
’　　０．７５２、　　Ｓ−アセチルチオ酢酸、４−ア
ミノアニリド。
トリフルオロ酢酸塩の合成 この化合物は上記の弐■で、Ｈｌが４−アミノてり、Ｈ
３かメチレンで　Ｆ（４かアセチルの構造式を持ち、そ
の構造の左末端の一級アミンがトリフルオロ酢酸塩の型
のものである。
本実施例１　の生成物２００〜をａまたに蒸館したトリ
フルオロ酢酸（以）ドＩ’ＦＡｊというＪ５ｍＡに溶か
し、窒素雰囲気下暗所甲￥温で１．５時間撹拌した。次
に浴１Ｎを真空下３０°Ｃ以下の温間で除去するとほぼ
定址的収率で淡黄色油状物が得ろねた。生成物は以下に
示″ｆＮＭＥによっ″（Ｓ−アセチルチオ酢酸、４−ア
ミノア・ニリド、トリフルオロ酢酸頃であると−」寛さ
また： ＮＭＲ（Ｄ２０Ｊ：　　　７．５７（ｄ、２Ｈ，ａｒＪ
：　　　７．３３（ｄ。
２Ｈ，ａｒ、ノ：　　３．８２（Ｓ、２Ｈ，ＣＨ２５Ａ
Ｃに２．４２（Ｓ。３Ｈ、ＳＡｃノ 実施例　５ １、２−ビリジルー３７−プロパノイルジスルフィド、
４−１　ｔ−ブトキシカルボニルアミノアニリン この化合物は（下記の）トリフルオロ酢酸塩の前駆体と
して合成した。
２．２′−ジピリジルジスルフィド〔アルトリ！ｆ　（
ＡＬｄｒｉｃｈ　）　、　１．５　’；ｔ　、　６．８
　ｍｍ０ｔＪ７無水酢鹸エチル＜１０ｍ１）に溶かし、
無水酢酸エチル（１０ｍｌＪに溶かした３−メルカプト
プロピオン［（０，７３Ｐ、６．８９ｍｍ０６Ｊと反応
サセタ。次にＢＦ３・（Ｃ２Ｈ５］。０４滴を加え℃、
混合物を窒素雰囲気上室温で一晩撹拌した。反応混合物
を真空下で弁部し℃乾固させ１次に冷却したαト酸エチ
ル＜１０ｍ１）でスラリーにし、全℃の固体を濾過する
と淡黄色溶液が侍られた。この浴液に無水酢酸エチル（
１０ｍ／４）に溶かした４−ｔ−ブトキシ力ルポニルア
ミノアニリ／（１，８２？　、　６．８　ｎ１ｍｏ／＝
）および酢酸エチル（１０ｒｎｌ）に溶かしたジシクロ
へキシルカルボジイミド（１，４０ｔ　、　６．８　ｍ
ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を再び至温で一晩撹拌し
、濾過し℃シンクロヘキシル尿素を除いた。ｔｒ’液？
真空下で残部し℃、５ｉＯＺ上で３０／７０酢ｉヤニチ
ル／ヘキサンで溶離てろフラッシュクロマトグラフィー
にかけた。
Ｒｆｏ、８（５０１５０酢（Ｉｊ／工ｆ＃／ヘキサンノ
の第１分画は油であり、それ以上″＃８：を追求しなか
った。Ｒｆｏ、６２の第２分１Ｉ１１は淡黄色固体（０
，４８１］で、ＮＭＲにより４−ｔ−ブトキシカルボニ
ルアミノアニリンと同定さｊた。すぐ直後に溶離ＬりＲ
ｆ　Ｏ，５０ノｍ３　分画４ｔＭ点１３９−１４０℃の
固体（０，６６ｙ、収率２３％）であった。この固体な
エタ）−ルからＦ８結晶すると融点１５４．５−１５５
．５°Ｃの固体が得らねた。その生成物は以下に示すＮ
ＭＲ，工Ｒおよび元素分析により２−ビリジルー３′−
プロパノイルジスルフィド、４−（℃−ブトキシカルボ
ニルアミツノアニリドと同定された： ＮＭＲ（ＣＤＣｔ３／ＣＤ３０ＤＪ：　　８．３０（ｍ
、ｌＨ，ピリジル）：　　７．５０−７．８０（ｍ、２
Ｈ，ビリジに）”、　　７．３７（Ｓ、４Ｈ，フエ＝／
１ｚｆｆｉに　　６．８７　７．２７（ｍ、ＩＨ。
ビ＋）’）ｋ）’、　　３．００（ｍ、２Ｈに　　２．
７５（ｍ、２Ｈ〕；１．５０（ｓ、ｑＨ，ｔ−ブチルノ ＩＦＩ（ＫＢｒＪ：　　　３３４０（ＢｒＪ：　　　１
６９０．１６５５（ｂｏｔｈ　　Ｑ＝○ノ；　　　１５
２０（Ｓノ、１３９０゜１１６５、］０７５．８４２．
７７０ 元素分析、実測値（計算値）：　Ｇ：５６．１１（５６
，２７ハＨ：　５．８３　（５，７２〕、　　Ｎ：１０
．２７（１０，３６）。
Ｓ：１５．７５（１５，８１） ２．２−ピリジル−３′−プロパノイルジスルフィド、
４−アミノアニリド、トリフルオロ酢酸塩の合成 この化合物は上記の弐ｍの構造式で、Ｒか４−アミノで
、Ｒ３が−（ＣＨ２）２−で、Ｈ４が２−ピリジルチオ
のもので、その構造の左末端の一級アミンがトリフルオ
ロ酢酸塩の型のものである。
本実施例ｘｃｖｔｒ成物１５０■を新たに蒸留したＴＦ
Ａに溶かした。その溶液を窒素雰囲気上暗所室温で１．
５時間撹拌すると、遊離した２−ピリジルチオールが示
す黄色が消失した。その溶液を真空下３０℃以下の温度
で留去すると定量的収量で固体が得られた。その固体は
水、メタ）−ルおよび酢酸エチルに可溶であり、以下に
示すプロトンＮＭＲおよびＵＶ／ＶＩＳにより２−ピリ
ジルー３′−プロパノイルジスルフィド、４−アミノア
ニリド、トリフルオロ酢酸塩と同定された：ＩＨＮＭＲ
（Ｄ２０Ｊ：　　８．６２（ｍ、ｌＨ，ピリジルノ；８
．１８（ｍ、　２Ｈ、ピリジル）；　　７．５６−７．
９０（ｍ。
−ｅ不明確、ＩＨ，ビリジルノ；　　７．５０（プソイ
ド−ｄ・４Ｈ・フェニル環〕；　　３．３３（ｔ、２Ｈ
に　　２．９５（ｔ、２Ｈ〕 ＵＶ／ＶＩＳ（Ｈ２０）：　　２４２（あまりはＱきす
しないが約３１０ｕまでの広い吸収帯をともなう）実施
例　６ Ｓ−アセチルチオ酢酸、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルヒ
ドラジドの合成 この化合物は上記の式Ｖの構造式で、Ｒ１がヒドラジノ
で、Ｒ３がメチレンで　Ｒ４がアセチルのもので、ｔ−
ブチルカルバメイトの型のものである。
Ｓ−アセチルチオ酢酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
エステル（１，５５’　、　６．４９ｍｍ０／、）およ
びｔ−プチルカルバゼイト（０，８６？　、　６．４９
ｍｍ０ｔＪの混合物を無水酢酸エチル中で窒素雰囲気上
室温で２４時間撹拌し、次に６０℃で災に６゜５時間撹
拌した。その反応混合物を水冷し、５０ｍ１ずつの飽和
ＮａＨＣＯ３水溶液で２回、次に水で１回洗浄しｒＮａ
２Ｓｏ４で乾燥し、真空下で飽縮した。５０１５０酢酸
エチル／ヘキサンを用いたＴＬＣで主要生成物のスポッ
トはＦｌｆｏ、４２に観察された。
その粗製生成物を５０１５０酢酸エチル／ヘキサンで溶
離ｆるＳｉＯ□のフラッシュクロマトグラフィーにかけ
ると他機黄色油状物１．２２Ｐ（収率７６％〕が得られ
た。未反応の出発物質な結晶化し℃除き、残った混合物
をｍＭし℃乾固させ、酢酸エチル＜２０ｍ１ノに浴かし
”Ｃ２０％飽和ＮａＨＣＯ３水溶液２５ｍ１ずつで４回
洗浄し、次に２５ｍ１の水で洗浄した。次にＮａ２Ｓ○
４で乾燥して真空下で濃縮すると最終生成物が油状物と
し℃得られ、以下に示ｆＮＭＲ、ＩＲおよびＵＶ／ＶＩ
ＳＫＪ：ＱＳ−アセチルチオ酢酸、Ｎ−ｔ−ブトキシカ
ルボニルヒドラジドと同定された： ＮＭＲ（ＣＤＣ６３Ｊ：　　８．５０（ｂｒ　　Ｓ、ｌ
Ｈ，ＮＨに７．００（ｂｒ　　ｓ、ＩＨ，ＮＨに　　３
．６３（Ｓ、２Ｈ。
ＣＨ２５ＡＣノ；　　２．３８（Ｓ、３Ｈ，ＳＡＣに　
　　１，４６（ｓ、９）１．ｔ−ブチルノ ＩＲ（ＮａＣｚ、−一ト）：　　３２９０（ｂｒＪ、２
９９０゜１ｆｉ９０（ｂｒＪ、Ｊ４９０．１３７５．］
２５５．１１６５ＵＶ／ＶＩＳ：　　（ＣＨＧｔ　　）
２４８：　　（ＣＥ（３０Ｈ）２１８この化合物は本明
細書の他の実施例に記述され℃いる操作と同様にし”Ｃ
トリフルオロ酢酸塩に変換することができる。このｆヒ
合物は他の従来からの方法によっ℃本発明の範囲に入る
他の塩に変換することもできる。
実施例　７ １．２−ピリジルー３′−プロパノイルジスルフィド、
Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルヒドラジドの合この化合物
は（下記の）ト’）フルオロ酢酸塩の前駆体として合成
した。
２．２７−ジピリジルジスルフィド（３，１１１゜１７
ｍｒｌｌｏｌを酢酸エチル（２０ｒａｌ）　ＶＣ浴かし
ｌコ溶液を３−メルカプトプロピオン酸（１，８ｙ−。
１７、２　ｍｎ１ｏｔＪの酢酸エチルＣＬＯｍｌ）ｆｒ
Ｊ液およびＢＦ３（Ｃ２Ｈ５Ｊ２０（５ＭＪと反応させ
た。反応混合物を暗所屋索雰囲気下で５時間撹拌し”Ｃ
濾過し、真空下で６縮した。得られた固体残留物な冷却
した酢酸エチル＜２０ｒｎｌ）でスラリーにし、書びｉ
Ｆｉ過しだ。次にも一プチルカルバゼイト（１，９８ｙ
　、　１５　ｍｒ：ｉｏｇを加え、続いて無水酢酸エチ
ル（１０ｍＪＪに溶かしたジシクロへキシルカルボジイ
ミド（３，０９Ｖ　、　Ｘ　５　ｍｍｏｔ）’ａｊ７Ｊ
ｒｌえた。反応混合物を暗所中室温で１８時間撹拌し、
次に濾過して真空下で回線すると黄色油状物が得られた
。
その油状物を５０１５０ＩＴｈ酸工チル／石油エーテル
（３５−６０℃）で溶離するＳ　ｔ　０２のフラッシュ
クロマトグラフィーにかけた。
３分画に分けたところ、第２分画にＲｆ’０．４０（５
０１５０酢（’ｌ＆エチル／ヘキサンノの目的の生成物
が含まれており油状物としＣ１，５６？（収率２８％］
得られた。この生成物は以下に示−ｆ　ＮＭＲ。
ＩＲおよびＵＶ／ＶＩＳにより２−ピリジルー３′−プ
ロパノイルジスルフィド、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル
ヒドラジドと同定された： ＮＭＲ（ＣＤＣ６３Ｊ：　　９．４６（ｂｒ　　Ｓ、Ｉ
Ｈ，Ｎ）Ｉに８．４３（ｍ、ＩＢ、ピリジル）：　　７
．６３（ｍ、２）！、ビＪジル）：　　７．５０（ｂｒ
　　ｓ、ＩＨ，ＮＨ）；　　７４０（ｑ、ＩＨ，ビリジ
ルノ；　　３．０７（ｍ、２）１．ＣＨ２に２．７７（
ｍ　、２Ｈ、ＣＨ２）　：　　１．４７　（Ｓ　、　９
Ｈ、ｔ−フチル〕 ＩＲ（ＮａＣ４，＝−ト）：　　３２８０（ｂｒＪ、２
９９０゜１７３０（Ｓｈ、１．１６８５（ｂｒＪ、１４
２０．１３７２゜１２５０．１１６５．７７０ Ｕ■／■工Ｓ：　　ＣＨ２Ｃｔ２］２８６（１，０５Ｊ
　　、２５０（１，３０〕；（ＣＨ３０Ｈ）２８４（０
，７４）、２３８（］、、４９ハ２１４（ｓｈ、１．１
１） ２．２−ビリジルー３′−プロパノイルジスルフイドヒ
ドラジド、トリフルオロ酢酸塩の合成この化合物は上記
の式Ｖの模造式をもち、Ｒ１がヒドラジノで、Ｒか−（
ＣＨ）　−で、Ｒか２−ピリジルチオのもので、その構
造の左末端の−ｅアミンがトリフルオロ酢酸塩の型のも
のである。
本実施例１の　生成物の一部＜２００ｍ？）？新たに蒸
笛したＴＦＡ（５ｍｌＪに溶かし、暗所中屋素雰囲気下
室温で１時間撹拌した。その撹拌中に極めて淡いピンク
色になった。次に溶媒を真空下３０°Ｃ以下の温度で留
去′ｆると、はぼ定量的収量で淡黄色油状物が得られた
。その油状物は以下に示″ｆＮＭＲにより２−ピリジル
ー３７−プロパノイルジスルフィドヒドラジド、トリフ
ルオロ酢酸塩と同定さねた： ＮＭＲ（Ｄ２０Ｊ：　　８．７３（ｍ、１）１．ピリジ
ルｌ：　　８．３３（ｍ、２Ｈ，ビリジｋ）、７．８８
（ｍ、Ｎ（、ピリジルノ：３．２３（ｍ、２Ｈ，ＯＨ２
に　　２．９３（ｍ、２Ｈ，ＣＨ２，＞実施例　８ 結合体の合成 この実施例は本発明による連結剤？用い−ＣＩＮＤｌ抗
体上の炭水化物部分によるりシンＡ−鎖とＩＮＤ１抗体
との結合体の合成な例示する。使用した連結剤（１実施
例５第２項で合成したものである。
この実施例では以下の略語を便用する：ＲＴＡ：　　リ
シン毒素Ａ−鎖 Ｎａ０Ａｃ：　　酢酸ナトリウム ＤＭＳＯ：　　ジメチルスルホキシド ＤＴＴ　：　　ジチオスレイトール ５ＤＳＰＡＧＥ：　　ドテシルスルフィドナトリウムポ
リアクリルアミドゲル電気泳動 ＰＢＳ　：　　リン＠緩衝塩溶液 ５ＰＤＰ：　　Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ビリ
ジルジチオノグロビオネイト Ｆ、ＩＡ：　　酵素イムノアッセイ １、抗体上の炭水化物部分の過ヨウ素酸酸化および連結
剤との反応 ５　ｍ９／　ｍｌ　Ｉ　Ｎ　Ｄ　１抗体Ｐ）３３溶ｉ（
１ｍＡＪを０１Ｍ　Ｎａ０ＡＣ＋０．１５Ｍ　ＮａＣ６
（ｐＨ５Ｊ　で平衡にしたＧ−５０カラムを通し、０．
ＩＭ　Ｎａ０ＡＣ緩衝液１祠でｌ：ｌに希釈した。その
抗体を暗所中１０ｍＭ過ヨウ素ジナトリウムにより０℃
で２０分間酸化し、次に暗所中で１０ｍＭグリセロール
と０℃で２０分間処理して反応を止めた。その反応混合
物２５０．ｕｌを新鮮なＩ￥１：酸塩緩衝液（ｐＨ５Ｊ
中のＧ−５０に通し、次に酢酸塩緩衝液で希釈すると最
終容量は５００μｔ（３，３μＭ）となった。
２−ビリジルー３′−プロパノイルジスルフィド、４−
アミノアニリドのトリフルオロ酢酸塩５−８〜（黄色ｒ
山状物）をＤＭＳＯ１ｏμｔに溶かして１．５−２Ｍ溶
液を作った。次にこの浴液をエタ）−ルで約５０倍に希
釈し、３　Ｑ　ｍＭというｌＯ倍δい実験用貯蔵液を作
った。この浴液５５μｔｙ上述の反応混合物に加えると
最終的に３００μＭ儂度の連結剤浴Ｍ、（連結剤と抗体
の比率は約１００である）が得られた。その反応混合物
を暗所中４℃で１５時間静かに撹拌した。次にその溶液
な１０ｍＭＮａＣＮＢＨ３水溶液と４℃で４時間静かに
撹拌した。その抗体を５ＰＤＰ緩衝液中のＧ−５０を通
し、ＥＴＡとの結合反応用に１．３η／　ａｔの態度に
した。
２、　ＲＴＡとの反応および免疫毒素の確認ＲＴＡを６
．４　ｍ９７ｍ１Ｉ：）（Ｑ度にして、５０ｍＭＤＴＴ
と室温で］時間反応させ℃スルフヒドリルに還元し、５
ＰＤＰ緩衝液（ｐＨ７，５）中００−５０を通した。還
元されたＦＩＴＡの濃度は４．７５ｍ９／ａｌであった
。１０倍モル過剰のＥＴＡをＩＮＤＩに加えＣ４７５ｍ
ｇ／ｒｎｌＲＴ　Ａ　（２７２、ａｔ）を１．３　ｍ？
　／膨Ｉ　ＮＤ　１　（０，５ｍＡ！Ｊを加えた〕、逆
さにし℃混合し、４℃で一晩撹拌せずに静置した。粗製
反応物中に免疫毒素が存在てることはＳＤＳ　ＰＡ（、
Ｅ（クマジー（ｃｏｏｍａｓｓｉｅ］）によって確認し
、テンシトメータ走査によって定量した。七）−結合体
は粗製反応混合物の３６％であった。ジー結合体は約１
０％の収率で存在した。ＩＮＤＩ抗体の約４０％は未反
応であった。
３、免疫毒素の精製 不純な反応生成物を５ＰＤＰ　（ｐＨ７，５Ｊ中のＡＣ
Ａ−４４に詰めた。２ビークの蛋白質か七〇カラムから
溶離した：抗体および免疫毒素を含む第２のピークを１
００　μｔ　（１，７’ＩＱ７ｍｌ〕に濃縮して０．８
　ｍｉのアフィゲルブに−（Ａｆ’ｔ’ｉｇｅｔＢｌｕ
θツカラムに詰めた。重力で詰めた後、カラムを１０倍
容量のＰＢＳ（ｐＨ７Ｊにより約１５ｍ１．／１１の流
速で洗浄した。次に高置、＾ｐＨ状態（０，ＩＭＩＪン
酸塩、Ｏ，ｓＭＮ乙Ｃｔ、ｐＨ８］　にし℃免疫毒素を
溶離させた。その免疫毒素ｆＩ：５ＤＳ）’ＡＧＥおよ
び活性の検定（ＥＩＡおよび全細胞致死）用に約６０μ
ｔ　（０，９Ｌｎ９／ｍｌ）の濃度にした。
４、活注恢定の結果 クマジー染色した５ＤＳＰＡＧＥのテンシトメーターに
よりアフィゲルブルー″′Ｃ：精製した物質が遊離の抗
体ｆｆｌ０％、モノ−結合体を２０％およびジーＲＴＡ
結合に）を９％含むことが示された。染色の５５％はど
は抗体の過ヨウ素酸酸化を起こす拡販高分子量バンドと
し℃存在した。
ＥＩＡ結合は出発物質と最終生成物との両方で決定した
。免疫毒素のＥＩＡは２３．３％（１し飾し℃いないＩ
ＮＤＩを１００％とし℃の相対（ｌｆＬ）であり、全細
胞致死活性はマフィゲルブルーで精製した物質で＞２０
０　ｎ５’／ｍＪであった。
前述は本来例示のために提供する。分子構造、合成方法
および反応条件に関する変更や修正は本発明の清心およ
び範囲からはずれないで行えることは当事者には難なく
明らかであろう。
−、”：を 代理人　弁理士　湯　浅　恭　三”Ｊ （外４名）

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＾１はＮＨ＿２−およびＮＨ＿２−ＮＨ−から
    なる群から選択される基であり；Ｒ＾２は−ＮＨ−Ｃ（
    Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｃ（Ｏ）−からな
    る群から選択される基であり； Ｒ＾３はＣ＿１−Ｃ＿１＿０アルキレン、フェニル置換
    Ｃ＿１−Ｃ＿１＿０アルキレン、ベンジル置換Ｃ＿１−
    Ｃ＿１＿０アルキレン、アミノ置換Ｃ＿１−Ｃ＿１＿０
    アルキレン、Ｃ＿５−Ｃ＿７環式アルキレンおよびアリ
    ーレンからなる群から選択される基であり；Ｒ＾４はＨ
    、アセチル、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化学
    式、表等があります▼ （Ｒ＾５はＣ＿１−Ｃ＿５アルキルである）からなる群
    から選択される基であり； ｍは０または１であり； ｎは０または１である） の化合物およびその水溶性塩や水溶性誘導体からなる類
    似体。 ２、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿
    ３−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが１で、ｎが０である
    特許請求の範囲第１項記載の化合物またはそのトリフル
    オロ酢酸塩。 ３、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿
    ４−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが１で、ｎが０である
    特許請求の範囲第１項記載の化合物またはそのトリフル
    オロ酢酸塩。 ４、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）
    −で、Ｒ＾３が−ＣＨ＿２−で、Ｒ＾４がアセチルで、
    ｍが１で、ｎが１である特許請求の範囲第１項記載の化
    合物またはそのトリフルオロ酢酸塩。 ５、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）
    −で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４がアセ
    チルで、ｍが１で、ｎが１である特許請求の範囲第１項
    記載の化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩。 ６、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ
    −で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４が２−
    ピリジルチオで、ｍが１で、ｎが１である特許請求の範
    囲第１項記載の化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩。 ７、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ
    −で、Ｒ＾３が−（ＣＨ２）＿２−で、Ｒ＾４がアセチ
    ルで、ｍが１で、ｎが１である特許請求の範囲第１項記
    載の化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩。 ８、Ｒ＾１が４−ヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−
    ＮＨ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ２）＿２−で、Ｒ＾４が２
    −ピリジルチオで、ｍが１で、ｎが１である特許請求の
    範囲第１項記載の化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩
    。 ９、Ｒ＾１がヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−で、
    Ｒ＾３が−ＣＨ＿２−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが０
    で、ｎが１である特許請求の範囲第１項記載の化合物ま
    たはそのトリフルオロ酢酸塩。 １０、Ｒ＾１がヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−で
    、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４が２−ピリ
    ジルチオで、ｍが０で、ｎが１である特許請求の範囲第
    １項記載の化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩。 １１、（ａ）炭水化物部分を含む第１の化合物を酸化し
    て、その炭水化物部分をアルデヒド基に変え；（ｂ）そ
    の第１の化合物を式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１はＮＨ＿２−およびＮＨ＿２−ＮＨ−か
    らなる群から選択される基であり； Ｒ＾２は−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−およ
    び−Ｃ（Ｏ）−からなる群から選択される基であり； Ｒ＾３はＣ＿１−Ｃ＿１＿０アルキレン、フェニル置換
    Ｃ＿１−Ｃ＿１＿０アルキレン、ベンジル置換Ｃ＿１−
    Ｃ＿１＿０アルキレン、アミノ置換Ｃ＿１−Ｃ＿１＿０
    アルキレン、Ｃ＿５−Ｃ＿７環式アルキレンおよびアリ
    ーレンからなる群から選択される基であり；Ｒ＾４はＨ
    、アセチル、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化学
    式、表等があります▼ （Ｒ＾５はＣ＿１−Ｃ＿５アルキルである）からなる群
    から選択される基であり； ｍは０または１であり； ｎは０または１である） の化合物およびその水溶性塩や水溶性誘導体からなる類
    似体であるチオールを含む第２の化合物と連結するため
    の方法。 １２、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）
    ＿３−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが１で、ｎが０であ
    る化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請
    求の範囲第１１項記載の方法。 １３、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾３が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ
    ）−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが１で、ｎが０である
    化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求
    の範囲第１１項記載の方法。 １４、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ
    ）−で、Ｒ＾３が−ＣＨ＿２−で、Ｒ＾４がアセチルで
    、ｍが１で、ｎが１である化合物またはそのトリフルオ
    ロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第１１項記載の方法。 １５、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ
    ）−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４がア
    セチルで、ｍが１で、ｎが１である化合物またはそのト
    リフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第１１項記載
    の方法。 １６、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−Ｎ
    Ｈ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４が２
    −ピリジノチオで、ｍが１で、ｎが１である化合物また
    はそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第１
    １項記載の方法。 １７、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−Ｎ
    Ｈ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４がア
    セチルで、ｍが１で、ｎが１である化合物またはそのト
    リフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第１１項記載
    の方法。 １８、Ｒ＾１が４−ヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）
    −ＮＨ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ２）＿２−で、Ｒ＾４が
    ２−ピリジルチオで、ｍが１で、ｎが１である化合物ま
    たはそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第
    １１項記載の方法。 １９、Ｒ＾１がヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−で
    、Ｒ＾３が−ＣＨ＿２−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが
    ０で、ｎが１である化合物またはそのトリフルオロ酢酸
    塩を用いる特許請求の範囲第１１項記載の方法。 ２０、Ｒ＾１がヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−で
    、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４が２−ピリ
    ジルチオで、ｍが０で、ｎが１である化合物またはその
    トリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第１１項記
    載の方法。 ２１、カルボキシル基を含む第１の化合物を式▲数式、
    化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＾１はＮＨ＿２−およびＮＨ＿２−ＮＨ−から
    なる群から選択される基であり；Ｒ＾２は−ＮＨ−Ｃ（
    Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｃ（Ｏ）−からな
    る群から選択される基であり； Ｒ＾３はＣ＿１−Ｃ＿１＿０アルキレン、フェニル置換
    Ｃ＿１−Ｃ＿１＿０アルキレン、ベンジル置換Ｃ＿１−
    Ｃ＿１＿０アルキレン、アミノ置換Ｃ＿１−Ｃ＿１＿０
    アルキレン、Ｃ＿５−Ｃ＿７環式アルキレンおよびアリ
    ーレンからなる群から選択される 基であり； Ｒ＾４はＨ、アセチル、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化学
    式、表等があります▼ （Ｒ＾５はＣ＿１−Ｃ＿５アルキルである）からなる群
    から選択される基であり； ｍは０または１であり； ｎは０または１である） の化合物およびその水溶性塩や水溶性誘導体からなる類
    似体であるチオール基を含む第２の化合物と連結するた
    めの方法。 ２２、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）
    ３−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが１で、ｎが０である
    化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求
    の範囲第２１項記載の方法。 ２３、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）
    ＿４−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが１で、ｎが０であ
    る化合物またはそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請
    求の範囲第２１項記載の方法。 ２４、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ
    ）−で、Ｒ＾３が−ＣＨ＿２−で、Ｒ＾４がアセチルで
    、ｍが１で、ｎが１である化合物またはそのトリフルオ
    ロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第２１項記載の方法。 ２５、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ
    ）−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４がア
    セチルで、ｍが１で、ｎが１である化合物またはそのト
    リフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第２１項記載
    の方法。 ２６、Ｒ＾１が４−アミノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−Ｎ
    Ｈ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４が２
    −ピリジルチオで、ｍが１で、ｎが１である化合物また
    はそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第２
    １項記載の方法。 ２７、Ｒ＾１が４−ヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）
    −ＮＨ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４
    がアセチルで、ｍが１で、ｎが１である化合物またはそ
    のトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲第２１項
    記載の方法。 ２８、Ｒ＾１が４−ヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）
    −ＮＨ−で、Ｒ＾３が−（ＣＨ＿２）＿２−で、Ｒ＾４
    が２−ピリジルチオで、ｍが１で、ｎが１である化合物
    またはそのトリフルオロ酢酸塩を用いる特許請求の範囲
    第２１項記載の方法。 ２９、Ｒ＾１がヒドラジノで、Ｒ＾２が−Ｃ（Ｏ）−で
    、Ｒ＾３が−ＣＨ＿２−で、Ｒ＾４がアセチルで、ｍが
    ０で、ｎが１である化合物またはそのトリフルオロ酢酸
    塩を用いる特許請求の範囲第２１項記載の方法。
JP1025625A 1988-02-03 1989-02-03 連結剤およびその使用方法 Expired - Lifetime JPH0684347B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/151,700 US4970303A (en) 1988-02-03 1988-02-03 Linking agents and methods
US151700 1988-02-03

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH021464A true JPH021464A (ja) 1990-01-05
JPH0684347B2 JPH0684347B2 (ja) 1994-10-26

Family

ID=22539902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP1025625A Expired - Lifetime JPH0684347B2 (ja) 1988-02-03 1989-02-03 連結剤およびその使用方法

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4970303A (ja)
EP (1) EP0326863A3 (ja)
JP (1) JPH0684347B2 (ja)
AU (1) AU610687B2 (ja)
NZ (1) NZ227644A (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004501869A (ja) * 2000-03-22 2004-01-22 ソルリンク・インコーポレイテッド ヒドラジンベース及びカルボニルベースの二官能性架橋剤

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5218112A (en) * 1988-02-03 1993-06-08 Xoma Corporation Linking agents and methods
WO1991007991A1 (en) * 1989-11-30 1991-06-13 Mallinckrodt Medical, Inc. Method for preparing a metal-radionuclide-labelled protein
US5137877B1 (en) * 1990-05-14 1996-01-30 Bristol Myers Squibb Co Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production
AU2003299509A1 (en) * 2002-06-21 2004-05-13 University Of Utah Research Foundation Crosslinked compounds and methods of making and using thereof
FR2866882B1 (fr) * 2004-02-27 2017-04-14 Oreal Para-phenylenediamines secondaires soufrees, composition tinctoriale comprenant de telles para-phenylenediamines, procede mettant en oeuvre cette composition et utilisation
US7347879B2 (en) 2004-02-27 2008-03-25 L'Oreál, S.A. Sulfur-containing secondary para-phenylenediamines dye compositions comprising such para-phenylenediamines, processes, and uses thereof
US20060206270A1 (en) * 2005-03-04 2006-09-14 Raftery M D Isomarker system for component analysis of mixtures
US8318162B2 (en) 2009-07-16 2012-11-27 Xoma Technology Ltd. Antibodies to high molecular weight melanoma associated antigen
WO2013010045A1 (en) 2011-07-12 2013-01-17 Biotime Inc. Novel methods and formulations for orthopedic cell therapy
CN111943892B (zh) * 2019-05-17 2022-04-05 上海中泽医药科技有限公司 组蛋白去乙酰化酶亚型抑制剂硫乙酰芳胺类化合物及用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4544755A (en) * 1984-05-23 1985-10-01 Basf Aktiengesellschaft Cleavage of phthalimides to amines

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2430943A1 (fr) * 1978-07-13 1980-02-08 Toyo Jozo Kk Nouveaux derives disulfures
SE446184B (sv) * 1979-01-12 1986-08-18 Toyo Jozo Kk Polyfunktionell disulfidforening anvendbar som tverbindande medel
US4671958A (en) * 1982-03-09 1987-06-09 Cytogen Corporation Antibody conjugates for the delivery of compounds to target sites
ATE28864T1 (de) * 1982-07-23 1987-08-15 Ici Plc Amide-derivate.
FR2540495B1 (fr) * 1983-02-07 1986-02-14 Roussel Uclaf Nouveaux derives de o-mercaptopropanamide et de ses homologues, leur procede de preparation, leur application comme medicaments, les compositions les renfermant et les nouveaux intermediaires obtenus
FR2566271B1 (fr) * 1984-06-20 1986-11-07 Sanofi Sa Nouveaux conjugues cytotoxiques utilisables en therapeutique et procede d'obtention
US4797491A (en) * 1986-03-17 1989-01-10 Cetus Corporation Compound 1-(3-(2-pyridyldithio)propionamido)-12-(5-hydrazidoglutaramido)-4,9-dioxadodecane

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4544755A (en) * 1984-05-23 1985-10-01 Basf Aktiengesellschaft Cleavage of phthalimides to amines

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004501869A (ja) * 2000-03-22 2004-01-22 ソルリンク・インコーポレイテッド ヒドラジンベース及びカルボニルベースの二官能性架橋剤

Also Published As

Publication number Publication date
JPH0684347B2 (ja) 1994-10-26
EP0326863A2 (en) 1989-08-09
EP0326863A3 (en) 1991-06-05
AU2890289A (en) 1989-08-03
US4970303A (en) 1990-11-13
AU610687B2 (en) 1991-05-23
NZ227644A (en) 1990-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6008406A (en) Phenylboronic acid complexing reagents derived from aminosalicylic acid
US4149003A (en) Pyridine disulfide compounds
US4569789A (en) Acid-cleavable compound, use in protein conjugates and drug delivery systems
EP0178125B1 (en) Labeled antibody fragments.
US4980457A (en) Cytotoxic conjugates which can be used in therapy and process for their preparation
JPH021464A (ja) 連結剤およびその使用方法
US5093475A (en) Hindered linking agents derived from 2-iminothiolanes and methods
US4797491A (en) Compound 1-(3-(2-pyridyldithio)propionamido)-12-(5-hydrazidoglutaramido)-4,9-dioxadodecane
KR100295545B1 (ko) 2-히드라지노피리딘유도체를사용하는분자표지방법
US5185433A (en) Cross-linking protein compositions having two or more identical binding sites
JPS63203683A (ja) ビオチニル化剤
Senter et al. NOVEL PHOTOCLEAVABLE PROTEIN CROSSLINKING REAGENTS AND THEIR USE IN THE PREPARATION OF ANTIBODY‐TOXIN CONJUGATES
Goff et al. Substituted 2-iminothiolanes: reagents for the preparation of disulfide cross-linked conjugates with increased stability
JPH0358349B2 (ja)
JPH07503258A (ja) 新規プロポキシフェン誘導体、タンパクおよびポリペプチドプロポキシフェン誘導共役体および標識
PT85317B (pt) Processo para a obtencao de imunotoxinas por acoplamento dum anticorpo com uma proteina tricosantina ou tricoquirina
Young et al. Studies on the preparation of conjugates of leukotriene C4 with proteins for development of an immunoassay for SRS-A (1)
KR930003333B1 (ko) 탄수화물 단위가 변형된 리보솜을 비활성화시키는 당단백질 성분을 함유하는 지속-작용성 면역독소의 제조방법
US4954638A (en) Leukotriene by amides and hydrazides
US4767745A (en) Conjugates of leukotrienes with proteins
JPH0625143B2 (ja) イミダゾリド
US5144043A (en) Cleavable bifunctional coupling agents
CA1314245C (en) Process for the preparation of conjugates in which a monovalent carboxylic ionophore is associated by means of a covalent bond with a macromolecule, which are useful as immunotoxin potentiators
Moroder et al. Immunoassays of peptide hormones and their chemical aspects
US5218112A (en) Linking agents and methods