JPH02111790A - Hiv抗体と免疫化学的に反応する合成ペプチド - Google Patents
Hiv抗体と免疫化学的に反応する合成ペプチドInfo
- Publication number
- JPH02111790A JPH02111790A JP1220141A JP22014189A JPH02111790A JP H02111790 A JPH02111790 A JP H02111790A JP 1220141 A JP1220141 A JP 1220141A JP 22014189 A JP22014189 A JP 22014189A JP H02111790 A JPH02111790 A JP H02111790A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- synthetic
- hiv
- test fluid
- immunochemically
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 78
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 29
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 20
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 26
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 claims description 5
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 14
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 abstract description 8
- 239000011347 resin Substances 0.000 abstract description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 abstract description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 6
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 abstract description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 abstract description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 5
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- -1 p-nitrophenyl ester Chemical class 0.000 description 9
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 9
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 8
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 8
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 4
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 4
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 4
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 1
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000026030 halogenation Effects 0.000 description 1
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000007928 imidazolide derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003170 phenylsulfonyl group Chemical group C1(=CC=CC=C1)S(=O)(=O)* 0.000 description 1
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N urea hydrogen peroxide Chemical compound OO.NC(N)=O AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
- G01N33/56988—HIV or HTLV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、抗旧V抗体と免疫化学的に反応する合成ペプ
チドに係る。
チドに係る。
本発明はまた、被検流体中のHIVまたは抗旧Vの検出
方法、並びに、該検出方法に使用される免疫化学的試薬
及び試験キットに係る。
方法、並びに、該検出方法に使用される免疫化学的試薬
及び試験キットに係る。
ヒト免疫不全ウィルス1型(HIV−1)は一般に、[
後天性免疫不全症候群(AIDS)Jの病原体と考えら
れている。
後天性免疫不全症候群(AIDS)Jの病原体と考えら
れている。
近年HIVは非常な勢いで蔓延しており、その蔓延は今
後も更に拡大すると予想される。感染個体の治療は勿論
重要であるが、非感染個体への伝染を予防することはい
っそう重要である。ウィルス及びAIDS疾患の発生及
び蔓延(origin and 5pread)に関す
る調査が多数行なわれはしたが、多くの問題が未解決の
ままである。これらの問題の1つは、感染を早期診断で
きる特異性及び感度にすぐれた方法が存在しないことで
ある。
後も更に拡大すると予想される。感染個体の治療は勿論
重要であるが、非感染個体への伝染を予防することはい
っそう重要である。ウィルス及びAIDS疾患の発生及
び蔓延(origin and 5pread)に関す
る調査が多数行なわれはしたが、多くの問題が未解決の
ままである。これらの問題の1つは、感染を早期診断で
きる特異性及び感度にすぐれた方法が存在しないことで
ある。
HIVの一般構造は、脂質含有被膜即ちエンベロープで
包囲されたリボ核タンパク質コアから成る。
包囲されたリボ核タンパク質コアから成る。
この被膜即ちエンベロープは、感染宿主細胞の膜からウ
ィルスが出芽するときに発生する。このエンベロープ内
にウィルスをコードする糖タンパク質が存在する。HI
Vのこれらの糖タンパク質は感染細胞中で160キロダ
ルトンの前駆体タンパク質(gp160)から合成され
る。該タンパク質は120キロダルトンのタンパクM
(gp120)と41キロダル1ヘンのタンパク質(g
p41)とに開裂される。
ィルスが出芽するときに発生する。このエンベロープ内
にウィルスをコードする糖タンパク質が存在する。HI
Vのこれらの糖タンパク質は感染細胞中で160キロダ
ルトンの前駆体タンパク質(gp160)から合成され
る。該タンパク質は120キロダルトンのタンパクM
(gp120)と41キロダル1ヘンのタンパク質(g
p41)とに開裂される。
HIV−1のgp120及び8p41は多くの研究の対
象となったが、gp120及びgp41上の免疫優性エ
ビトー1の所在はまだ完全には解明されていない。
象となったが、gp120及びgp41上の免疫優性エ
ビトー1の所在はまだ完全には解明されていない。
しかしながら、HIV感染を種々の感染期で確実に診断
できる特異性及び感度にすぐれた方法を開発するために
は、この型のウィルスの免疫優性エピトープを同定する
ことが極めて重要である。
できる特異性及び感度にすぐれた方法を開発するために
は、この型のウィルスの免疫優性エピトープを同定する
ことが極めて重要である。
夫々31個、27@及び14個のアミノ酸から成り、第
3図、第2図及び第1図に示すアミノ酸配列を有し、1
1!v抗体と顕著な免疫化学的反応性を示す3つの合成
ポリペプチドがここに見出された。
3図、第2図及び第1図に示すアミノ酸配列を有し、1
1!v抗体と顕著な免疫化学的反応性を示す3つの合成
ポリペプチドがここに見出された。
本発明はまた、HIV抗体との免疫化学的反応性を維持
している前記ヘントリアコンタペプチド、ヘプタコサペ
プチド及びテトラデカペプチドラグメントに係り、また
、HIV抗体と免疫化学的に反応する前記ヘントリアコ
ンタペプチド、ヘプタコサペプチドもしくはテトラデカ
ペプチドまたはそれらのフラグメントを必須構成成分と
して含む合成ポリペプチドに係る。
している前記ヘントリアコンタペプチド、ヘプタコサペ
プチド及びテトラデカペプチドラグメントに係り、また
、HIV抗体と免疫化学的に反応する前記ヘントリアコ
ンタペプチド、ヘプタコサペプチドもしくはテトラデカ
ペプチドまたはそれらのフラグメントを必須構成成分と
して含む合成ポリペプチドに係る。
本発明はまた、本発明の合成ペプチドを少なくとも1つ
含有する免疫化学的試薬に係る。
含有する免疫化学的試薬に係る。
本発明はまた、本発明の合成ペプチドの少なくとも1つ
を使用した、被検流体中の抗111V抗体の検出方法に
係る。
を使用した、被検流体中の抗111V抗体の検出方法に
係る。
本発明はまた、本発明の合成ペプチドの少なくとも1つ
を使用した被検流体中のHIVの検出方法に係る。
を使用した被検流体中のHIVの検出方法に係る。
本発明はまた、本発明の免疫化学的試薬を少なくとも1
つ含有するイムノアッセイ用試験キットに係る。
つ含有するイムノアッセイ用試験キットに係る。
前記合成ペプチドは、被検流体中のHIVまたはHIV
抗体の存在を判定する診断方法において特に適切に使用
できることが知見された。
抗体の存在を判定する診断方法において特に適切に使用
できることが知見された。
天然111Vと対照的な本発明ペプチドの重要な利点は
、安全な非感染性超速に由来していることである。
、安全な非感染性超速に由来していることである。
本発明の合成ペプチドは、公知の有機化学的ペプチド合
成方法の1つを用いるかまたは組換えDNA技術を用い
て製造され得る。後者の方法は、1種以上の該当ポリペ
プチドをコードするポリヌクレオチド配列を有する組換
えポリヌクレオチドを適当な微生物宿主中で発現させる
手段によって所望のポリペプチドを製造する方法である
。
成方法の1つを用いるかまたは組換えDNA技術を用い
て製造され得る。後者の方法は、1種以上の該当ポリペ
プチドをコードするポリヌクレオチド配列を有する組換
えポリヌクレオチドを適当な微生物宿主中で発現させる
手段によって所望のポリペプチドを製造する方法である
。
有機化学的ペプチド合成方法は、均一相中でまたは所謂
固相を用いて、縮合反応によって所望アミノ酸を結合さ
せる方法である。
固相を用いて、縮合反応によって所望アミノ酸を結合さ
せる方法である。
均一相中の縮合反応は以下のごとき処理によって行なわ
れる。
れる。
(a)1つの遊離カルボキシル基を含みその他の反応性
基が保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)と、1つ
の遊離アミノ基を含みその他の反応性基が保護された化
合物(アミノ酸、ペプチド)とを縮合剤の存在下に縮合
させる。
基が保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)と、1つ
の遊離アミノ基を含みその他の反応性基が保護された化
合物(アミノ酸、ペプチド)とを縮合剤の存在下に縮合
させる。
(b)1つの活性カルボキシル基を含みその他の反応性
基が遊離のまたは保護された化合物(アミノ酸、ペプチ
ド)と、1つの遊離アミノ基を含みその他の反応性基が
遊離のまたは保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)
とを縮合させる。
基が遊離のまたは保護された化合物(アミノ酸、ペプチ
ド)と、1つの遊離アミノ基を含みその他の反応性基が
遊離のまたは保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)
とを縮合させる。
(c)1つの遊離カルボキシル基を含みその他の反応性
基が保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)と、1つ
の遊離アミノ基を含みその池の反応性基が遊離のまたは
保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)とを縮合させ
た後、必要に応じて保護基を除去する。
基が保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)と、1つ
の遊離アミノ基を含みその池の反応性基が遊離のまたは
保護された化合物(アミノ酸、ペプチド)とを縮合させ
た後、必要に応じて保護基を除去する。
カルボキシル基を活性化させる方法としては特に、カル
ボキシル基を酸ハロゲン化↑勿、アジド。
ボキシル基を酸ハロゲン化↑勿、アジド。
無水物、イミダゾリドまたは活性化エーテル例えばN−
ヒドロキシ−コハク酸イミド、N−しドロキシ−ベンズ
トリアゾールまたはp−ニトロフェニルエステルに変換
させる方法がある。
ヒドロキシ−コハク酸イミド、N−しドロキシ−ベンズ
トリアゾールまたはp−ニトロフェニルエステルに変換
させる方法がある。
アミノ基の活性化は、アミン基を亜リン酸アミドに変換
するかまたは「ホスホラゾJ法を用いて行なうことがで
きる。
するかまたは「ホスホラゾJ法を用いて行なうことがで
きる。
上記縮合反応の餞も一般的な方法は、カルボジイミド法
、アジド法、混合酸無水物法、及び、「ThePept
1des J、volume [,1965(^ca
de+nic Press)、E、 5chri;de
r and K、 L;bkeに記載のごとき活性エス
テルを使用する方法である。
、アジド法、混合酸無水物法、及び、「ThePept
1des J、volume [,1965(^ca
de+nic Press)、E、 5chri;de
r and K、 L;bkeに記載のごとき活性エス
テルを使用する方法である。
しかしながら、J、^mer、 Che+*、 Soc
、 85.2149(1963)に記載のMerrif
1eldの「固相」法を用いて本発明の前記ペプチド
を製造することも可能である。
、 85.2149(1963)に記載のMerrif
1eldの「固相」法を用いて本発明の前記ペプチド
を製造することも可能である。
製造すべきペプチドのアミノ酸の結合はカルボキシル末
端側から開始されるのが好ましい。この方法では、反応
性基が存在するかまたは反応性基を導入させ得る固相が
必要である。固相は、例えば反応性クロロメチル基を有
する、ベンゼンとジビニルベンゼンとのコポリマーであ
ってもよく、またはヒドロキシメチルもしくはベンジル
アミンによって反応性にされた重合体固相であってもよ
い。
端側から開始されるのが好ましい。この方法では、反応
性基が存在するかまたは反応性基を導入させ得る固相が
必要である。固相は、例えば反応性クロロメチル基を有
する、ベンゼンとジビニルベンゼンとのコポリマーであ
ってもよく、またはヒドロキシメチルもしくはベンジル
アミンによって反応性にされた重合体固相であってもよ
い。
特に適当な固相は、例えば、Hang(1974)、J
。
。
3m、 Chew、 Soc、 95.1328に記載
のp−アルコキシベンジルアルコール樹脂(4−ヒドロ
キシメチル、フェノキシ−メチル−コポリスチレン−1
%ジビニルベンゼン樹脂)である、穏やかな条件下に合
成した後にペプチドを固相から分離し得る。
のp−アルコキシベンジルアルコール樹脂(4−ヒドロ
キシメチル、フェノキシ−メチル−コポリスチレン−1
%ジビニルベンゼン樹脂)である、穏やかな条件下に合
成した後にペプチドを固相から分離し得る。
クロロメチル基を含有する樹脂も極めて適当な固相とし
て使用できる。この種の固相を使用するときは、最初の
α−アミノ−保護アミノ酸と樹脂との結合をエステル結
合によって行なう。
て使用できる。この種の固相を使用するときは、最初の
α−アミノ−保護アミノ酸と樹脂との結合をエステル結
合によって行なう。
所望アミノ酸配列の合成後に、例えば液体フッ化水素、
トリフルオロメタンスルホン酸、またはトリフルオロ酢
酸に溶解したメタンスルホン酸を用いて樹脂からペプチ
ドを脱離する。また、低級アルコール好ましくはメタノ
ールまたはエタノールとのトランスエステル化によって
担体からペプチドを除去してもよい。この場合、ペプチ
ドの低級アルキルエステルが直接形成される。アンモニ
アを用いて同様に分離すると、本発明ペプチドのアミド
が得られる。
トリフルオロメタンスルホン酸、またはトリフルオロ酢
酸に溶解したメタンスルホン酸を用いて樹脂からペプチ
ドを脱離する。また、低級アルコール好ましくはメタノ
ールまたはエタノールとのトランスエステル化によって
担体からペプチドを除去してもよい。この場合、ペプチ
ドの低級アルキルエステルが直接形成される。アンモニ
アを用いて同様に分離すると、本発明ペプチドのアミド
が得られる。
縮合反応に参加しない反応性基は、前記のごとく酸加水
分解または還元によって容易に除去できる基によって有
効に保護される。従って、カルボキシル基は、例えばメ
タノール、エタノール、第三級ブタノール、ベンジルア
ルコールまたはp−二トロベンジルアルコールでエステ
ル化されることによって有効に保護され得る。
分解または還元によって容易に除去できる基によって有
効に保護される。従って、カルボキシル基は、例えばメ
タノール、エタノール、第三級ブタノール、ベンジルア
ルコールまたはp−二トロベンジルアルコールでエステ
ル化されることによって有効に保護され得る。
アミン基を有効に保護し得る基は通常は酸基、例えば酢
酸、安息香酸もしくはピリジンカルボン酸のごとき脂肪
族、芳香族、アリール脂肪族もしくは複素環カルボン酸
から誘導された酸基、または、エトキシカルボニル、ベ
ンジルオキシカルボニル、し−ブトキシカルボニルもし
くはp−メトキシベンジルオキシカルボニル基のごとき
炭酸から誘導された酸基、または、ベンゼンスルホニル
もしくはp−t−ルエンスルホニル基のごときスルホン
酸から誘導された酸基であるが、ベンジル及びトリフェ
ニルメチルのごとき置換もしくは未置換のアリールまた
はアリールアルキル基、またはオルト−ニトロフェニル
−スルフェニル及び2−ベンゾイル−1−メチルビニル
のごとき基も使用し得る。特に適当なα−アミノ−保護
基は例えば、塩基感受性の9−フルオレニル−メトキシ
カルボニル(Fmoc)基(Carpino & Ha
n(1970)J、^mer、 Chem、 Soc、
92.5748)である。
酸、安息香酸もしくはピリジンカルボン酸のごとき脂肪
族、芳香族、アリール脂肪族もしくは複素環カルボン酸
から誘導された酸基、または、エトキシカルボニル、ベ
ンジルオキシカルボニル、し−ブトキシカルボニルもし
くはp−メトキシベンジルオキシカルボニル基のごとき
炭酸から誘導された酸基、または、ベンゼンスルホニル
もしくはp−t−ルエンスルホニル基のごときスルホン
酸から誘導された酸基であるが、ベンジル及びトリフェ
ニルメチルのごとき置換もしくは未置換のアリールまた
はアリールアルキル基、またはオルト−ニトロフェニル
−スルフェニル及び2−ベンゾイル−1−メチルビニル
のごとき基も使用し得る。特に適当なα−アミノ−保護
基は例えば、塩基感受性の9−フルオレニル−メトキシ
カルボニル(Fmoc)基(Carpino & Ha
n(1970)J、^mer、 Chem、 Soc、
92.5748)である。
また、リジンのε−アミノ基及びアルギニンのグアニジ
ン基も保護するのが好ましい、このような保護に使用さ
れる保護基は通常、リジンの場合はtBu−またはトシ
ル基であり、アルギニンの場合はニトロ−1Pms−ま
たはMbs−基である。
ン基も保護するのが好ましい、このような保護に使用さ
れる保護基は通常、リジンの場合はtBu−またはトシ
ル基であり、アルギニンの場合はニトロ−1Pms−ま
たはMbs−基である。
個々の保護基の性質に応じて従来の種々の方法で保護基
を分茫し得る。例えば、l・リフルオロ酢酸を用いても
よく、または水素とパラジウムのごとき触媒とを用いる
穏やかな3H元によってもよく、または氷酢酸中のll
Brを用いてもよい。
を分茫し得る。例えば、l・リフルオロ酢酸を用いても
よく、または水素とパラジウムのごとき触媒とを用いる
穏やかな3H元によってもよく、または氷酢酸中のll
Brを用いてもよい。
前記のごとく、本発明ペプチドはまた、組換えDNA技
術によって製造され得る。ペプチドが繰り返し配列(「
縦列をなして」)で組み込まれているとき、また、はペ
プチドを(より大きい)タンパク質またはポリペプチド
の構成成分として製造するときはこの技術の可能性が特
に重要である。従ってこの技術によるペプチド製造方法
も本発明の範囲に包含される。この場合、組換えDNA
の構成成分としては、本発明のペプチドをコードするポ
リヌクレオチドであって、更に天然HIVゲノム中の前
記ポリヌクレオチド配列に接続した(flank)ポリ
ヌクレオチドセグメントを実質的に含まないポリヌクレ
オチドを使用する。
術によって製造され得る。ペプチドが繰り返し配列(「
縦列をなして」)で組み込まれているとき、また、はペ
プチドを(より大きい)タンパク質またはポリペプチド
の構成成分として製造するときはこの技術の可能性が特
に重要である。従ってこの技術によるペプチド製造方法
も本発明の範囲に包含される。この場合、組換えDNA
の構成成分としては、本発明のペプチドをコードするポ
リヌクレオチドであって、更に天然HIVゲノム中の前
記ポリヌクレオチド配列に接続した(flank)ポリ
ヌクレオチドセグメントを実質的に含まないポリヌクレ
オチドを使用する。
本発明のペプチドをコードする前記のごときポリヌクレ
オチド及びこのポリヌクレオチドを取り込んだ組換えD
NAも本発明の範囲に包含される。
オチド及びこのポリヌクレオチドを取り込んだ組換えD
NAも本発明の範囲に包含される。
特許請求の範囲に特に記載はしていないが、本発明のペ
プチド中の1つ以上のアミノ酸がLos^1amos
Data Bank(AIDSウィルス配列データベー
ス)に示されたような別のアミノ酸で置換されてもよい
ことは自明である。
プチド中の1つ以上のアミノ酸がLos^1amos
Data Bank(AIDSウィルス配列データベー
ス)に示されたような別のアミノ酸で置換されてもよい
ことは自明である。
更に、主として、
(a)ペプチドの酸付加塩、
(b)ペプチドのアミド及び特にC末端アミド、(e)
エステル及び特にC末端エステル、及び、(d)ドアシ
ル誘導体、特定的にはN末端アシル誘導体及び特にN−
アセチル誘導体 を意味するこれらのペプチドの官能性誘導体も本発明の
ペプチドと考えてよい。
エステル及び特にC末端エステル、及び、(d)ドアシ
ル誘導体、特定的にはN末端アシル誘導体及び特にN−
アセチル誘導体 を意味するこれらのペプチドの官能性誘導体も本発明の
ペプチドと考えてよい。
「免疫化学的試薬」なる用語は、本発明の合成ペプチド
が適当な担体に結合しているかまたは標識物質で標識さ
れていることを意味する。
が適当な担体に結合しているかまたは標識物質で標識さ
れていることを意味する。
使用可能な担体の例は、マイクロテストウェルの内壁、
試験管の内壁もしくは毛細管の内壁、膜、フィルター、
試験片母異母、または、ラテックス粒子、赤血球、色素
ゾル、金属ゾルもしくはゾル粒子の形態の金属化合物の
ごとき粒子の表面である。
試験管の内壁もしくは毛細管の内壁、膜、フィルター、
試験片母異母、または、ラテックス粒子、赤血球、色素
ゾル、金属ゾルもしくはゾル粒子の形態の金属化合物の
ごとき粒子の表面である。
使用可能な標識物質の例は特に、放射性同位体、蛍光化
合物、酵素、色素ゾル、金属ゾルまたはゾル粒子の形態
の金属化合物である。
合物、酵素、色素ゾル、金属ゾルまたはゾル粒子の形態
の金属化合物である。
本発明の免疫化学的試薬を使用して行なう被検流体中の
抗旧V抗体の検出方法においては、本発明の該試薬を被
検流体と接触させ、ペプチドと該ペプチドに反応性の被
検流体中の抗体との間に形成された免疫複合体の存在を
検出し、この検出に基づいて被検流体中のHIV抗体の
存在を判定する。
抗旧V抗体の検出方法においては、本発明の該試薬を被
検流体と接触させ、ペプチドと該ペプチドに反応性の被
検流体中の抗体との間に形成された免疫複合体の存在を
検出し、この検出に基づいて被検流体中のHIV抗体の
存在を判定する。
これらの検出方法を使用して生じさせる免疫化学的に反
応は好ましくは、サンドイッチ反応、凝集反応、競合反
応または阻害反応である。
応は好ましくは、サンドイッチ反応、凝集反応、競合反
応または阻害反応である。
抗旧V抗体を使用して被検流体中のHIVを検出するた
めに本発明の免疫化学的試薬を使用するときは、本発明
の該試薬を被検流体と接触させ、ペプチドと抗旧Vとの
間に形成された免疫複合体の存在を検出し、この検出に
基づいて被検流体中のHIVの存在を判定する。
めに本発明の免疫化学的試薬を使用するときは、本発明
の該試薬を被検流体と接触させ、ペプチドと抗旧Vとの
間に形成された免疫複合体の存在を検出し、この検出に
基づいて被検流体中のHIVの存在を判定する。
被検流体中の旧Vの検出に特に適した方法は、固体担体
に結合した抗HIV抗体上の結合部位に対して、標識物
質で標識された本発明の合成ペプチドと(被検流体中に
存在する)HIV抗原とを競合させる競合反応を利用す
る方法である。
に結合した抗HIV抗体上の結合部位に対して、標識物
質で標識された本発明の合成ペプチドと(被検流体中に
存在する)HIV抗原とを競合させる競合反応を利用す
る方法である。
本発明の試験キットは、前記の免疫化学的試薬を必須成
分として含有する必要がある。サンドイッチ反応を行な
うためには、試験キットは例えば、マイクロテストウェ
ルの内壁のごとき固体担体に結合した本発明の合成ペプ
チドから構成され得るが、標識された本発明の合成ペプ
チドまたは標識抗体を使用することも可能である。
分として含有する必要がある。サンドイッチ反応を行な
うためには、試験キットは例えば、マイクロテストウェ
ルの内壁のごとき固体担体に結合した本発明の合成ペプ
チドから構成され得るが、標識された本発明の合成ペプ
チドまたは標識抗体を使用することも可能である。
競合反応を行なうためには、本発明の合成ペプチドが固
体担体に結合された試験キットを使用し、標識された抗
+11V抗体を被検流体中の抗111Vと競合させる。
体担体に結合された試験キットを使用し、標識された抗
+11V抗体を被検流体中の抗111Vと競合させる。
凝集反応においては、粒子またはゾルに結合した本発明
の合成ペプチドから成る免疫1ヒ学的試薬を、検出すべ
き抗HIV抗体が存在している被検流体と直接接触させ
る必要がある。
の合成ペプチドから成る免疫1ヒ学的試薬を、検出すべ
き抗HIV抗体が存在している被検流体と直接接触させ
る必要がある。
試験キットの別の具体例では例えば、本発明の標識合成
ペプチドを免疫化学的試薬として使用し。
ペプチドを免疫化学的試薬として使用し。
固体担体に結合した抗HIV抗体の結合部位に対して検
出すべきIITV抗原との競合反応を行なわせる。
出すべきIITV抗原との競合反応を行なわせる。
1m
第1図の合成ペプチドをこの種のペプチドの常用の有機
化学的合成法によって製造した。ここではMerrif
ieldの固相法を使用した。
化学的合成法によって製造した。ここではMerrif
ieldの固相法を使用した。
支111
第2図の合成ペプチドをこの種のペプチドの常用の有機
化学的合成法によって製造した。ここではMerrif
ieldの固相法を使用した。
化学的合成法によって製造した。ここではMerrif
ieldの固相法を使用した。
支1昨1
第1図のアミノ酸配列を有する合成テトラデカペプチド
(env−ペプチドHIV−1、BRU、601−61
4:Los^1amos Data Bank(AID
Sウィルス配列データベース)のアミノ酸番号、Los
^lamas National Lab。
(env−ペプチドHIV−1、BRU、601−61
4:Los^1amos Data Bank(AID
Sウィルス配列データベース)のアミノ酸番号、Los
^lamas National Lab。
ratory+ Theoretical Divi
sion、Los 八lamos)を、p119.6
の0.058のNaHCO3に1μfI/11で溶解し
た。マイクロタイタープレートにペプチドを結合させる
ために、この溶液を8×12のマイクロタイタープレー
1・に135μm/ウェルの量で導入し、4℃で1晩イ
ンキュベー1〜した6次にウェルを吸引して空にし、5
%粉末スキムミルクと4%正常ヤギ血清とを加えた25
0pl/ウエルのリン酸緩衝化生理食塩水溶液(PBS
)を用い、室温に1時間維持して残存する結合部位をブ
ロックした。次にプレー1−を空にし、シリカゲルにの
せて室温で1晩乾燥しな。
sion、Los 八lamos)を、p119.6
の0.058のNaHCO3に1μfI/11で溶解し
た。マイクロタイタープレートにペプチドを結合させる
ために、この溶液を8×12のマイクロタイタープレー
1・に135μm/ウェルの量で導入し、4℃で1晩イ
ンキュベー1〜した6次にウェルを吸引して空にし、5
%粉末スキムミルクと4%正常ヤギ血清とを加えた25
0pl/ウエルのリン酸緩衝化生理食塩水溶液(PBS
)を用い、室温に1時間維持して残存する結合部位をブ
ロックした。次にプレー1−を空にし、シリカゲルにの
せて室温で1晩乾燥しな。
抗旧■抗体を定旦するために、試験ずべき血清サンプル
をPBSで希釈し、ピペットで注入しく100μp/ウ
エル)、37℃で30分間インキュベーt−t、た0次
にプレートをPBS、0.05%Tween−20(登
録商標)で4回洗浄した6ベルオキシダーゼで標識した
ヤギ抗ヒト免疫グロブリン溶液をピペットで注入しく1
00μm/ウェル)、37℃で30分間インキュベート
シた。
をPBSで希釈し、ピペットで注入しく100μp/ウ
エル)、37℃で30分間インキュベーt−t、た0次
にプレートをPBS、0.05%Tween−20(登
録商標)で4回洗浄した6ベルオキシダーゼで標識した
ヤギ抗ヒト免疫グロブリン溶液をピペットで注入しく1
00μm/ウェル)、37℃で30分間インキュベート
シた。
次にプレートをPBS、0.05%Tveen−20で
4回洗浄した。過酸化尿素(0,5B/z1)とオルト
フェニレンジアミン(Or’D;1.6屑IF/l11
)との溶液(100μl/ウエル)をペルオキシダーゼ
の基質としてウェルに導入し、光を遮断して室温でイン
キュベ−1−した。30分後に100μQ/ウエルのl
Nll2SO,を添加して反応を停止させた。Orga
non Teknika Hicroelisa re
aderを用い492nmに黄色を読み取った。抗+1
1V陽性血清では0.2〜1.2の吸光度が測定された
が、対照正常ヒト血清を使用した場合の吸光度は0.1
であった。
4回洗浄した。過酸化尿素(0,5B/z1)とオルト
フェニレンジアミン(Or’D;1.6屑IF/l11
)との溶液(100μl/ウエル)をペルオキシダーゼ
の基質としてウェルに導入し、光を遮断して室温でイン
キュベ−1−した。30分後に100μQ/ウエルのl
Nll2SO,を添加して反応を停止させた。Orga
non Teknika Hicroelisa re
aderを用い492nmに黄色を読み取った。抗+1
1V陽性血清では0.2〜1.2の吸光度が測定された
が、対照正常ヒト血清を使用した場合の吸光度は0.1
であった。
第1図はII I V抗体と免疫化学的に反応する合成
テ1〜ラデカペプチドのアミノ酸配列を示す。 第2図はHIV抗体と免疫化学的に反応する合成へブタ
コサペプチドのアミノ酸配列を示す。 第3図はHIV抗体と免疫化学的に反応する合成ヘン1
〜リアコンタペプヂドのアミノ酸配列を示す。 ナ斤V アク/’ニーj、2・φ′シン−1〜J!入弁
理士 刃口 山 武
テ1〜ラデカペプチドのアミノ酸配列を示す。 第2図はHIV抗体と免疫化学的に反応する合成へブタ
コサペプチドのアミノ酸配列を示す。 第3図はHIV抗体と免疫化学的に反応する合成ヘン1
〜リアコンタペプヂドのアミノ酸配列を示す。 ナ斤V アク/’ニーj、2・φ′シン−1〜J!入弁
理士 刃口 山 武
Claims (9)
- (1)HIV抗体と免疫化学的に反応する、式:【遺伝
子配列があります】 で示されるアミノ酸配列を有する合成テトラデカペプチ
ド及びそのフラグメント、並びに、必須構成成分として
前記テトラデカペプチドを含む合成ポリペプチドまたは
、HIV抗体と免疫化学的に反応する前記合成ポリペプ
チドのフラグメント。 - (2)請求項1の合成ペプチドを含有する免疫化学的試
薬。 - (3)HIV抗体と免疫化学的に反応する、式:【遺伝
子配列があります】 で示されるアミノ酸配列を有する合成ヘプタコサペプチ
ド及びそのフラグメント、並びに、必須構成成分として
前記ヘプタコサペプチドを含む合成ポリペプチドまたは
、HIV抗体と免疫化学的に反応する前記合成ポリペプ
チドのフラグメント。 - (4)請求項3の合成ペプチドを含有する免疫化学的試
薬。 - (5)HIV抗体と免疫化学的に反応する、式:【遺伝
子配列があります】 で示されるアミノ酸配列を有する合成ヘントリアコンタ
ペプチド及びそのフラグメント、並びに必須構成成分と
して前記ヘントリアコンタペプチドを含む合成ポリペプ
チドまたは、HIV抗体と免疫化学的に反応する前記合
成ポリペプチドのフラグメント。 - (6)請求項5の合成ペプチドを含有する免疫化学的試
薬。 - (7)請求項2、4または6のいずれか一項の免疫化学
的試薬を用い、前記試薬を被検流体と接触させ、前記ペ
プチドと反応する被検流体中の抗体と前記ペプチドとの
間に形成された免疫複合体の存在を検出し、その結果に
基づいて被検流体中のHIV抗体の存在を判定すること
を特徴とする被検流体中の抗HIV抗体の検出方法。 - (8)請求項2、4または6のいずれか一項の免疫化学
的試薬を用い、前記試薬を被検流体と接触させ、前記ペ
プチドと抗HIVとの間に形成された免疫複合体の存在
を検出し、その結果に基づいて被検流体中のHIVの存
在を判定することを特徴とする被検流体中のHIVの検
出方法。 - (9)請求項2、4または6のいずれか一項の免疫化学
的試薬を少なくとも1種含有することを特徴とするイム
ノアッセイ用試験キット。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
NL8802111 | 1988-08-27 | ||
NL8802111 | 1988-08-27 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH02111790A true JPH02111790A (ja) | 1990-04-24 |
Family
ID=19852807
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP1220141A Pending JPH02111790A (ja) | 1988-08-27 | 1989-08-25 | Hiv抗体と免疫化学的に反応する合成ペプチド |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0362910A3 (ja) |
JP (1) | JPH02111790A (ja) |
KR (1) | KR900003204A (ja) |
AU (1) | AU635217B2 (ja) |
DK (1) | DK420589A (ja) |
ZA (1) | ZA896410B (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE570357T1 (de) * | 1992-05-14 | 1994-07-28 | Polimun Scientific Immunbiologische Forschungsgesellschaft Mbh, Wien | Peptide, die Antikörper induzieren, die genetisch divergierende HIV-1 Isolationen neutralisieren. |
US6479055B1 (en) | 1993-06-07 | 2002-11-12 | Trimeris, Inc. | Methods for inhibition of membrane fusion-associated events, including respiratory syncytial virus transmission |
CN1111540C (zh) * | 1993-06-09 | 2003-06-18 | 康诺特实验室有限公司 | 串联的合成hiv-1肽类 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0261224B2 (en) * | 1986-03-24 | 2003-03-26 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Synthetic htlv-iii peptides, compositions and uses thereof |
JPH01500432A (ja) * | 1986-07-21 | 1989-02-16 | サウスウェスト・ファウンデーション・フォー・バイオメディカル・リサーチ | Aidsおよびarcのウィルス原因物質に対して免疫化するための組成物および方法 |
AU608413B2 (en) * | 1988-03-30 | 1991-03-28 | Abbott Laboratories | Mouse monoclonal antibody (5-21-3) to human immunodeficiency virus gp41 protein |
-
1989
- 1989-08-22 ZA ZA896410A patent/ZA896410B/xx unknown
- 1989-08-22 EP EP19890202122 patent/EP0362910A3/en not_active Withdrawn
- 1989-08-25 DK DK420589A patent/DK420589A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-08-25 JP JP1220141A patent/JPH02111790A/ja active Pending
- 1989-08-25 AU AU40800/89A patent/AU635217B2/en not_active Ceased
- 1989-08-26 KR KR1019890012178A patent/KR900003204A/ko not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DK420589D0 (da) | 1989-08-25 |
AU635217B2 (en) | 1993-03-18 |
KR900003204A (ko) | 1990-03-26 |
DK420589A (da) | 1990-02-28 |
EP0362910A3 (en) | 1991-01-09 |
ZA896410B (en) | 1990-05-30 |
AU4080089A (en) | 1990-03-01 |
EP0362910A2 (en) | 1990-04-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0462627A1 (en) | Antigens and peptides of lav. | |
CA2005955C (en) | Synthetic hiv-like peptides, their compositions and uses | |
US5439792A (en) | Cysteine thiol-protected peptides for use in immunoassays | |
US5260189A (en) | Synthetic HIV-like peptides their compositions and uses | |
JPH04210999A (ja) | Hivウイルス類のエンベロープ糖タンパク質由来のペプチド、これらのウイルスによって起こる感染の検出とエイズ症に対する予防接種へのこれらペプチドの用途 | |
JP4130505B2 (ja) | D−アミノ酸からなるペプチドによる診断方法の干渉の排除 | |
JP2650217B2 (ja) | Htlv―1感染の診断、治療及び予防接種のためのペプチド | |
JPH08510063A (ja) | リコンビナントタンパクおよび合成ペプチド試薬を用いるhivイムノアッセイ | |
JPH02111790A (ja) | Hiv抗体と免疫化学的に反応する合成ペプチド | |
JP2813768B2 (ja) | 口蹄疫診断用ペプチドおよび当該ペプチドを含有する口蹄疫診断用抗原 | |
JPH02111791A (ja) | Hiv抗体と免疫化学的に反応する合成ポリペプチド | |
EP1878805B1 (en) | Synthetic antigen for the detection of antibodies immunoreactive with HIV virus | |
EP0474789B1 (en) | Cysteine thiol-protected peptides for use in immunoassays | |
JPH05301889A (ja) | 非a非b型ペプチド | |
AU640352B2 (en) | Synthetic polypeptides immunochemically reactive with hiv antibodies | |
EP0453563A1 (en) | Diagnostic proteins to test for more than one antibody | |
AU635219B2 (en) | Synthetic polypeptides immunochemically reactive with hiv-antibodies | |
EP0371817A2 (en) | Peptides | |
JP2002511853A (ja) | Hiv抗体の検出方法及びそれに使用する抗原 | |
JPH05271277A (ja) | 非−a、非−b肝炎ウイルスに対する抗体と免疫化学的に反応するペプチド | |
JPH05331193A (ja) | 非a非b型肝炎ウイルスに対する抗体と免疫化学的に反応するペプチド | |
EP0371818A2 (en) | Peptides | |
Lombardi et al. | Detection of antibodies to human immunodeficiency virus type I by using synthetic peptides and time-resolved fluoroimmunoassay (TR-FIA) | |
JPH04221398A (ja) | 非a非b型肝炎ウイルスに対する抗体と免疫化学反応するペプチド | |
JPH01163198A (ja) | Hiv−2感染検出用合成ペプチド抗原、その組成物およびその使用方法 |