JPH01302158A - 検査体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

に産業上の利用分野】 本発明は、血液、果汁、尿、工業廃液等の有色懸濁液中
に含まれる特定成分を簡便かつ迅速に検出することので
きる検査体に係るものである。

【従来の技術】

血液中の成分を測定するには、ヘモグロビンの強い着色
性がすべての呈色反応を妨げるため、検査に先立って膜
分離、遠心分離等により血液から血清または血漿を分離
することが必要であるが、このような処理は熟練と相当
の設備が必要とされる。このような煩雑な操作と、誤認
定の欠点を防止するために、特公昭４４−１４６７３号
公報には、透明な支持体上に白液内容物検出試薬を含浸
した吸収性相持体を設け、更にその上を白球等を分離す
る層で１Ｉ−）で血漿を分離し、呈色反応を行う検査材
料が、また、特公昭４５−１５６６９号公報には血液内
容物検出用試薬を含む吸収性担持物質を疎水性化して表
面に沈積する赤面球を水で洗い流す診断材が記載されて
いる。これらの検査材は使用における簡便化という点で
は改良が認められるが、血液中に含まれる物質の検査に
おいて、土足ｉ性を持たせるには充分ではない。 更に、特開昭５９−２２８１６６号公報には、上層及び
下層を有するマトリックスとし、上層が部分的に架橋結
合された水透過性であって有色色素を透さないポリマー
を含むように構成し、過剰の試料を拭きとるようにした
ものが提案されているが、この場合も上層への検査試料
成分の＠肴は避けることができず、半定量性検査には不
充分である。また、特開昭６０−２０９１７４号によれ
ば、担体層と検出用試薬を含む微細孔性重合層とを有す
る検査装置が提案され、一定時間後に拭きとりを行うか
、又は担体を透明とするかによって呈色を判定する。 この場合も検査試薬の呈色が不均一であること、また、
拭きとりによっては表面への色素の＠者が生じ、透明担
体を用いても沈着した面色素が若干透けて観察され、試
薬呈色の観察時に障害となることが考えられ、半定量性
検査を行うには充分とは言えない。 Ｋ発明が解決しようとする課題】 上記したような従来技術における血液、尿中の成分の検
査に用いる検査材は、検査液中に含まれる面色素、有色
夾雑物等の＠肴を完全に分離するものではないので、そ
れらによる呈色への影響は避けることができず、定性的
検査には利用できても、半定量的な測定を行うには充分
でなかった。 更に、上記したような検査材においては、何れも試薬部
または試薬部に近接した個所に血液を塗布するので、試
薬が漏出、拡散し、この点からも検査の半定量性を不充
分としている。 本発明は、上記のような従来の白液内容物検査試薬にお
ける欠点を解決すると共に、血液のみではなく、汚濁の
著しい尿や、着色物、微細な浮遊物等を含む汚濁した工
業廃水等の検査を、半定量的に行うことのできる簡易検
査体を提供することを目的とする。 Ｋ課題を解決するための手段】 本発明は、着色物質を含む懸濁液中に含まれる検査目的
物質を検出２分析するための検査体であって、支持体上
に設けた検査目的物質を検出可能な応答を生じうる試薬
−と、該試薬層上に剥離可能に積層した着色物質濾別性
被膜層とを含む検査体に係るものである。 Ｋ作　　　用】 本発明は、支持体上に設けた検出試薬類を含む下１と、
下層上に剥離可能に積層した分離濾過機能を持つ上層と
で検査体を構成したことを特徴とするものであり、本発
明による検査体は検査液中に一定時間浸漬するか、上層
上に検査液を滴下せしめて被検出物質を含む液のみを下
層に透過セしめた後、上層を剥離して下層の検査試薬層
の呈色を調べるものである。 Ｋ実　施　例】 以下、本発明の詳細な説明する。 上記したように、本発明は血液に限定されず、汚濁の著
しい尿の検査、下水、工業廃水等着色したｇｉ細分散物
、粘着性分散物等を含む広い範囲での懸濁液検査に使用
できるものである。まず、検査体を構成する上層である
、着色した微細分散物。 粘着性分散物等に対する分離・濾別機能を有する膜を形
成可能な物質としては、下記のようなものが挙げられる
。 膜の種類と８膜に含まれる素材を列挙する。 イオン交換膜：陽イオン交換膜、陰イオン交換膜。 両性イオン交換膜、バイポーラ− イオン交換膜、モザイクイオン交 換膜 透　析　Ｗ！：再生セルロース、セルロースアセテート
、ポリアクリロニトリル共 重合体、ポリメチルメタクリレ− ト、エチレンビニルアルコール共 重合体、芳香族ポリスルホン、芳 香族ポリアミド、カーボネート。 エチレンオキシド共重合体 逆　浸透　膜：全芳香族ポリアミド、アリル−アルキル
ポリアミド／ポリウシアセ ルロースアセテート、セルロース ］・リアセテート、ポリピペラジン アミド 限外濾過膜：ポリアクリルニトリル、ポリフッ化ビニリ
デン、ポリスルホン、ポ リエーテルスルホン、芳香族ナイ ロン、セルロースアセテート、エ バール（商品名工バール、クラレ 株式会社製） 上層を形成する分ｉ濾過性の膜は、上記の素材中から被
検出液中に含有される分散物により、また、検出成分の
透過の障害とならないものを適宜選択して使用するが、
例えば、血液中のブドウ糖。 尿素窒素や工業廃水中の鉄イオンのような低分子量の物
質の検出には、セルロース膀のような透析腰を使用する
ことができ、血液中のグルタメート−ピルベート−トラ
ンスアミナーゼやアルカリホスフ１ターゼのような高分
子量の物質の検出には、ポリフッ化ビニリデン製メンブ
ランフィルタ−のような精密濾過膜を使用することがで
きる。 上記上層と下層とは、接着剤によって検査材を検査液に
浸漬もしくは接触させた後、上層を剥離することができ
るよう接着剤によって上層と下層を密着してＶＪ層する
か、もしくは間に接着層を設けて接着する。 接＠１Ｇは全面もしくは部分的（スポット状など）に上
層と下Ｎを接着し、検査時に溶解または開孔しているこ
とで検査目的物質と溶剤が下層に達しつるＭ４＠をとる
。 接＠層素材は下記のようなものからなり、これらは単独
もしくは二種以上の混合物で用いられる。 ポリエステル樹脂、アルキッド樹脂、ポリウレタン樹ｌ
、ポリスチレン’０４　脂、アクリル樹脂、エポキシ樹
脂、塩化ビニル樹脂、塩化ビニル共重合体樹脂、ポリビ
ニルブチラール樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリ
ビニルピロリドン樹脂、ポリエチレンオキサイド樹脂、
もしくは無水マレイン酸系共重合体樹脂などの合成樹脂
： メチルセルロース、エチルセルロース、ヒトＯキシエチ
ルセルロ−ス デンプン、多糖類，ゼラチン、カゼイン、もしくはアル
ギン酸ナトリウムなどの天然高分子が挙げられる。 分ｌｉ１濾過性膜の接着剤又は接着Ｎによる検査試薬Ｎ
を有する支持体への接着は、ヒートシール又はドライラ
ミネート法などの方法により適宜性なうことができる。 下層である検査試薬Ｈの形成は、濾紙に試薬組成物を含
浸させてなるもの、例えば体液中のブドウ糖検出用試験
紙として、ブドウ糖酸化酵素，ペルオキシダーゼ、被酸
化性指示薬．緩衝剤からなる試薬組成物をゼラチンを含
む水または水−アルコール系溶媒中に溶解又は分散させ
、得られだ液に濾紙を含浸させた後、乾燥したものを検
査試薬層とし、濾紙を適宜裁断してプラスチックフィル
ムのような基材上に貼付して形成することができる。同
様に蛋白検出用試薬層，ｐＨ検出用試薬層も濾紙に含浸
させて検査試薬層を製造して同様に形成することができ
る。 次に印刷によって基材上に検査試薬層を設けるものとし
ては、水−アルコール混合溶液に酵素類を予め溶解させ
、これに指示Ｉ，ｐＨ．！！衝剤，高分子結合剤，およ
び吸水性担体等を混合して、印刷またはコーティング適
性を有するインキ組成物を？Ａｖｉｎ、このインキ組成
物を基材上に印刷（コーティングを含む）した後乾燥し
て検査試薬層を製造することができる。更に好ましくは
、本出願人の出願に係る特開昭６２−　２６３４６９Ｊ
１３明Ｓ＋＋害に２軟のように （ａ）糖酸化酵素，ペルオキシダーゼ、被酸化性指示薬
．湿潤剤，感度調節剤．安定剤，　ｐＨ緩衝剤．結合剤
，及び吸水性粉末からなる試薬組成物が非水溶剤中に溶
解或いは分散されてなるブドウ糖検出用インキ組成物、 （ｂ）蛋白質誤差を示す指示薬，ｐ１１緩血剤，湿潤剤
。 蛋白質吸看性イオン交換体，形態保持剤，！＠合剤。 及び吸水性粉末からなる試薬組成物が溶剤中に溶解或い
は分散されてなる蛋白質検出゛用インキ組成物、 （ｃ）　ｐＨ指示薬，４級アンモニウム塩又はアミン塩
。 塩基性物質，結合剤，及び吸水性粉末からなる試薬組成
物が、溶剤中に溶解或いは分散されてなるｐＨ９１定川
インキ組成物 が挙げられ、これらインキ組ｌｉｚ物は、基材上に塗布
することによって試薬層を形成することができる。更に
血液、又は尿中のビリルビンの検出にはニトロ、ハロゲ
ン、スルホン基などの置換基を有するベンゼンジアゾニ
ウム塩に、接着剤，酸（特に固体の酸）、溶剤，更に必
要に応じて湿潤剤。 吸水性担体粉末などをｈ口えて調製した組成物を濾紙に
含浸もしくは基材１に印刷又は塗工する。その他面液中
のグルタメート−ピルベート−トランスアミナーゼの検
出用試薬のような公知の体液検出用試薬を用いて試薬層
を形成する。 基材は、試薬組成物と反応せず、しかも試薬の呈色を朋
害しないものであることが好ましく、具体的には、例え
ば紙２合成紙、不織布または合成樹脂フィルム或いは紙
と合成樹脂フィルムとの積層体等が用いられる。 インキ組成物の基材上への塗布技術としては、印刷法、
コーティング法（例えばロールコーティング、スプレー
コーティング、デイツプコーティング、ベタコーティン
グ）等が用いられつる。インキ組成物の塗布中が比較的
多く、かつ塗布中が一定であることが好ましいため、シ
ルクスクリーン印刷法、凹版印刷法、グラビア印刷法等
によって、インキ組成物を基材上に設けることが好まし
い。塗布中は、インキ組成物の種類に応じて変化するが
、一般に２〜１５０ｇ／ｍ（乾燥時）であることが好ま
しい。 下Ｈである検査目的物質を検出可能な応答を生じる試薬
層としては、上記以外にもそれぞれ検査目的物質の検出
に用いられている公知の臨床検査用の試験紙、例えば、
市販の白液、尿等の体液中のブドウ糖検出用試験紙、蛋
白質検出用試験紙。 ビリルビン検出用試験紙、ｐ■検出用試験紙、血液中の
グルタメート−ピルベート−トランスアミナーゼ検出用
試験紙等の試験紙を使用することができる。 又、本発明は、着色分散物、粘着物等を含む下水、廃水
中の溶解性鉄、水素イオン濃度、生物化学的Ｗ１素要求
ｆｆ１（ＢＯＤ）、化学的酸素要求量（ＣＯＤ）、クロ
ム、総水銀、銅等の検出にも適用可能であり、市販のイ
オン試験紙を用いて試薬層とすることもできる。 実施例１ 血糖検出用検査体の製造 １５μセロハン（＃　２５０）上に、１０％非イオンキ
直鎖ポリエチレンオギサイド（Ｄｏｌｙ　ＯＸ　Ｎ−７
５０；ユニオンカーバイド社製９分子ｉ３０万）のジオ
キサン溶液を、ブレードコーターを用いてコーティング
して乾燥し、約１０μの接＠層を形成する。−方、下記
組成のブドウ糖検出用インキ組成物をホモミキサーで微
細分散させた後、スクリーン印刷により、厚さ３００μ
の白色ポリスチレンシートに一辺が５１ｎの四角形であ
ってＩＩｌ厚が１１０μとなるように印刷した。用いた
スクリーン版は８０メツシユ、レジスト及びスクリーン
紗の厚さの合計は１３０μであった。 得られた印刷物を６０℃で４０分間乾燥して試薬層を形
成した。 ブドウ　検出用インキ組成物 ブドウ糖酸化酢木（東洋紡製；　Ｇｒａｄｅ　ＩＩ　）
３．６重量部 ベルオキシターゼ（東洋紡製；　Ｇｒａｄｅ　Ｉ［［）
２．４１量部 グアヤク脂　　　　　　　　　　　　４．８重量部ソル
ビタンモノラウレート （花王石鹸製；スパン２０）７．２１量部クエンＭ　　
　　　　　　　　　　　２．８重量部クエン酸ナトリウ
ム　　　　　　　１１゜０重ｉ部ポリビニルブチラール （積木化学製；　ｘ）、　Ｌ／　７　’ｙ　ＢＸ−１）
　　３．０ＯｉｊｉＮｓセルロース微粉末 （層化成製；アビセルＴＧ−Ｄ）　　　　　１７１重吊
重吊−アミルアルコール　　　　　　２２８◆吊部ブチ
ルセロソルブアセテート　　　３３．５ｆｉ　１部上記
のようにして得られた試薬層を形成した白色ポリスチレ
ンシート上に接着層を有するセロハンを８０℃の温度で
約３０＄　ｇ加熱することによってヒートシールを行い
、これをスティック状に＠罰して血糖検出用検査体を得
た。 図面に検査体の構造の一例を示す。検査体１は基材２上
に設けた試薬層３を接着層４を介して着色性物舅濾別性
被膜層５を剥離可能に設けたものであって、剥離操作を
容易にするためのタブ片６を形成することができる。こ
の検査体重よ、血糖の半定量に有効であると共に、血液
、Ｍ、その他の異物による汚染のひどい尿でも充分な半
定量性を有した。 即ち、図面に示したような検査体１の被膜Ｎ５上に血液
を約０．２ＣＣを滴下、＃布して約１分間放置後、被膜
層５を剥離、除去して約１分後予め作成しておいた各濃
度の呈色を示した比色表と比較測定したところ、被検査
血液中のブドウ糖含有量は５０１１ｇ／旧であることが
判明した。一方、被膜層５を設けず、直接血液を試薬層
上に滴下すると血色系の沈着により、測定は全く不可能
であった。 実施例２ 尿素窒素検出用検査体の製造 血液中の尿素窒素を検出するために、実施例１におＣプ
るブドウ糖検出用インキ組成物に変えて以下の尿素窒素
検出用インキ組成物を用いる以外は、実施例１と同様に
して検査体を製造した。 尿素窒素検出用インキ組成物 ウレアーゼ（東洋紡製：　Ｇｒａｄｅ　ＩＩ　）　　３
．６重量部ペルオキシダーゼ（東洋紡製；　Ｇｒａｄｅ
　Ｉ［）２．４重量部 グアヤク脂　　　　　　　　　　　　４．８重重部ソル
ビタンモノラウレート （花王石鹸製；スパン２０）　　　　　　７．２重量部
クエン酸　　　　　　　　　　　　　２．０重吊部クエ
ン酸ナトリウム　　　　　　　１１．０重量部ポリビニ
ルブチラール （槽水化学′ｌＪ：　ｘ）、　レツ：’７ＢＸ−１）　
　３．００　Ｍ量ｆｌＡセルロース微粉末 （加化成製；アビセルＴＧ−Ｄ）　　　　　１７１重量
部ｎ−アミルアルコール　　　　　　２２８重量部ブチ
ルセロソルブアセテート　　　３３．５重量部得られた
検査体のセロハン被膜上に血液的０．２０Ｃを滴下、塗
布後約１分間放置し、被膜を剥離除去し、約１分間放置
したものを観察すると、試薬層は青色に呈色しており、
標準比０表と比較したところ、約１０１１．９／ｄｉの
尿素窒素を含有することが判明した。 実施例３ 総コレステロール検出用検査体の製造 血液中の総コレステロールを検出するために、実施例１
におけるブドウ糖検出用インキ組成物に変えて以下の総
コレステロール検出用インキ組成物を用いる以外は、実
施例１と同様にして検査体を製造した。 総コレステロール検出用インキ１１Ｕ物コレステロール
エステラーゼ （東洋紡製：　Ｇｒａｄｅ　ｍ　）　　　　　　　１．
６重ｆｆ１部コレステロールオキシダーゼ （東洋紡製：　Ｇｒａｄｅ　ｍ　）　　　　　　　１．
６重量部ペルオキシダーゼ （東洋紡製：　Ｇｒａｄｅ　ｍ　）　　　　　　　２．
４重量部グアヤク脂　　　　　　　　　　　　４，８重
量部ソルビタンモノラウレート （花王製ニスパン２０）７．２重量部 リン酸−ナトリウム　　　　　　　　６．０重量部リン
酸二ナトリ１クム　　　　　　　　９．０重量部ポリビ
ニルブチラール （Ｖ４水化学￥Ｊ：１スレツクＢｘ−１）３．０重吊部
セルロース微粉末 （脂化成製：アビセルＴＧ−Ｄ）　　　　　１７１重量
部ｎ−アミルアルコール　　　　　　２２８重量部ブチ
ルセロソルブアセテート　　　３３．５重吊部得られた
検査体のセロハン被膜上に血液的０．２０Ｃを滴下、塗
布後約３分間放置し、被膜を剥離除去し、約２分間放置
したものを観察すると、試薬層は青色に呈色しており、
標準比０表と比較したところ、約２００１＃ｇ／旧の総
コレステロールを含有することが判明した。 実施例４ 実施例１において使用したセルロースの代りにポリピニ
リデンフＯライド製メンブランフィルタ−（商品名ＨＩ
ＬＬＩＰＯＲＥ　ａｖｗｐ、　ミＩＪ　ホ７会社製）ヲ
用い、１０％とドロキシエチルセルロース水溶液を咋み
１０μｍになるようコーティングして乾燥する。 一方、下記の組成のグルタメート−ピルベート−トラン
スアミナーゼ検出用インキ組成物をホモミキサーでｇ１
細分散さゼた後、スクリーン印刷により厚さ３００μの
白色ポリ１チレンシートｔに一辺が５穎の四角形であっ
て膜厚が１００μｍとなるように印−１した。用いたス
クリーン版は８０メツシユ。 レジスト及びスクリーン紗の厚さの合計は１３０μであ
った。得られた印刷物は６０℃で４０分間乾燥して試薬
層を形成した。 グルタメート−ピルベート−トランスアミナーゼピルベ
ートオキシダーゼ （東洋醸造）４．０重母部 ペルオキシダーゼ （東洋紡製：　Ｇｒａｄｅ　Ｉｆ　）　　　　　　　０
．５重量部グアヤク脂　　　　　　　　　　　４．８重
量部アラニン　　　　　　　　　　　　３．２重量部α
−ケトグルタルＭ　　　　　　　　３．０重母部ピロｆ
ｉ酸四アミン　　　　　　　　０．００２重Ｍ部塩化マ
グネシウム　　　　　　　　０．０４重Ｑ部ソルビタン
モノラウレート （死重石鹸製ニスパン２０）７．２重量部リン酸−ナト
リウム　　　　　　　９．３８重重母リン酸二ナトリウ
ム　　　　　　　４．５４重重量ポリビニルブチラール （積木化学製：エスレックＢＸ−１）　　３．００重量
部セルロース微粉末 （層化成製：アビセルＳＦ）　　　　　　１７１重量部
ｎ−アミルアルコール　　　　　　　２２８重量重量子
ルセロソルブアセテート　　　３３．５１Ｍｆｆ１ｉ上
記のようにして得られた試祷層を有する白色ポリエチレ
ンシート上に接着層を有するメンブランフィルタ−を積
層し、８０℃の温度で約　１分間加熱することによって
ヒートシールを行い、スティック状に裁断して試験用ス
トリップを得た。 検査片のメンブランフィルタ−上に血液的０．２０Ｃを
滴下、塗布して約３分間ＩＪ！１ｍ後、メンブランフィ
ルタ−を剥離、除去して、約２分間放置して試薬層の呈
色を観察したところ青色であり、約２０ＩＵ／　、９の
グルタメート−ピルベート−トランスアミナーゼ活性の
存在が推定された。 実加例５ Ｆｅ　（ＩＩ　）検出用検査体の製造 １５μセロハン（＃２５０）上に、１０％非イオン性直
鎖ポリエチレンオキサイド（ｐｏｌｙ　ｏｘ　Ｎ−７５
０：ユニオンノコ−バイト社製、　ｆｌ子ｉ３０万）の
ジオキサン溶液を、ブレードコーターを用いてコーティ
ングして乾燥し、約１０μの接着層を形成する。−方、
下記組成のＦｅ　（Ｕ　）検出用インキ組成物をホモミ
キサーで微細分散させた後、スクリーン印刷により、厚
さ３００μの白色ポリスチレンシートに一辺が５ＩＮ！
ｎの四角形であって膜厚が１１０μとなるように印刷し
た。用いたスクリーン版は８０メツシユ、レジスト及び
スクリーン紗の厚さの合計は１３０μであった。 得られた印刷物を６０℃で４０分間乾燥して試薬層を形
成した。 ｒｅ　（１１）検出用インキ組成物 ０−フェナントロリン　　　　　　　０．５重母部ソル
ビタンモノラウレート （死重製ニスパン２０）７゜２重母部 酢酸アンモニウム　　　　　　　　　１５．０重母部ポ
リビニルブチラール （積木化学製：エスレックＢＸ−１）　　　３．Ｑ重母
部セルロース微粉末 （旭化成￥ｉ：アビセルＴＧ−Ｄ　）　　　　　１７１
重量部ｎ−アミルアルコール　　　　　　　２２８重Ｑ
部ブチルセロソルブアセテート　　　　３３．５１１部
上記のようにして形成された試薬−を有する白色ポリス
チレンシート上に、接着層を有するセロハンを８０℃の
温度で約３０秒間加熱して接着して検査体を製造した。 濁度計で測定すると、Ｄ、　０．３００の濁度を示すＦ
ｅ２＋を５ｍｙ／旧及（ｆＦｅ”ヲ１００１Ｒｙ／ｄｌ
ソｈソｈ含む工業廃水を用いて、上記によって得られた
Ｆｅ　（Ｕ　）検出用検査体を用いてＦｅ２＋の検査を
行った。検査体を工業廃水に浸漬後被嗅Ｎであるセロハ
ンを剥離除去して、試薬Ｎの呈色を観察したところ、上
記２種の液のＦｅ２″Ｓ度の判別が可能であった。しか
しながら、上記試薬層上にセロハン被膜を設けなかった
検査体を同様に工業廃水に浸泊したものは、検査体表面
の着色が著しく、Ｆｅ”９度の異なる液をそれぞれ判別
することが不可能であった。

【発明の効果】

本発明は、支持体上に設けた検出目的物質を検出可能な
応答を生じうる試薬層上に、着色物質濾別性被膜を剥離
可能に設けた検査体に係るものであるので、血液、工業
廃水などの有色被検査液を対蒙とした簡易検査において
、着色成分の吸着を防葎でき、また、試薬層上の試薬の
被検査液中への拡散を抑制することができる。従って、
本発明による検査体は、着色液中に含まれる成分の半定
量性検出を可能とすることができた。

【図面の簡単な説明】

図面は、本発明による検査体の一例を示す拡大断面図で
ある。 １・・・検査体、　　　　２・・・基材。 ３・・・試薬層、　　　４・・・接着層。 ５・・・青色性物質濾別性被膜層。 ６・・・タブ片 特許出願人　　　大日本印刷株式会社

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、着色物質を含む懸濁液中に含まれる検査目的物質を
   検出、分析するための検査体であって、支持体上に設け
   た、検査目的物質を検出可能な応答を生じうる試薬層と
   、該試薬層上に剥離可能に積層した着色物質濾別性被膜
   層とよりなる検査体。