JP7846938B2 - 農業用組成物および方法 - Google Patents

Description

発明の分野
本発明は、ファージおよび／または免疫原性物質と飛翔昆虫誘引因子とを含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のための組成物およびキットに関する。本発明はまた、ファージおよび／または免疫原性物質に飛翔昆虫を誘引するための方法に関する。本発明はまた、ファージおよび／または免疫原性物質を動物または植物に転移させる方法における、飛翔昆虫の使用、ならびに飛翔昆虫を使用する、動物および植物における疾患の治療または予防方法に関する。本発明はまた、動物または植物における疾患の治療および／または予防における使用のための、ファージおよび／または免疫原性物質の製剤に関する。

背景
ハエのような飛翔昆虫は、細菌、寄生生物およびウイルスによる疾患を動物種および植物種に伝染させることが公知である。ハエは、それが接触した表面（とりわけ、ヒトおよび動物の排泄物および腐敗有機物を含む）から微生物を拾い上げ、運搬する。次いでハエが動物または植物と物理的に接触すると、ハエは、運搬している微生物を動物宿主および植物宿主に伝染させて、微生物の機械的媒介体として働く。

細菌性疾患の一般的な媒介体であるハエの一例として、ムスカ・オータムナリス（Ｍｕｓｃａ ａｕｔｕｍｎａｌｉｓ）が挙げられ、これは一般にフェイス・フライ（ｆａｃｅ ｆｌｙ）と称され、ウシおよびウマの害虫種であり、ヨーロッパおよび中央アジアの原産であり、カナダ全土および米国のほとんどの地域で見られる。オーストラリアン・ブッシュ・フライ（Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ｂｕｓｈ ｆｌｙ）［ムスカ・ベツスチッシマ（Ｍｕｓｃａ ｖｅｔｕｓｔｉｓｓｉｍａ）］およびバッファロー・フライ（ｂｕｆｆａｌｏ ｆｌｙ）［ヘマトビア・エキシグス（Ｈａｅｍａｔｏｂｉａ ｅｘｉｇｕｓ）］を含む他のイエバエ（Ｍｕｓｃｉｄａｅ）科のメンバーは、オーストラリアのような南半球地域において細菌性疾患の媒介体として働きうるハエである。フェイス・フライの場合、それは春に越冬場所から現れ、雌が新鮮な牛糞に産卵する。気温に応じて、成体ハエは２０～５０日間生き、初秋からは、生き残ったハエは越冬に備えるため、ウシおよびウマに対する該昆虫の負荷（ｂｕｒｄｅｎ）は低減する。フェイス・フライは宿主を探して数キロメートル移動しうるが、適切な生息地が見つかると、フェイス・フライはウシの周囲、特に水飲み場の近くに集合する傾向がある。

フェイス・フライ、特に雌は、ウシ宿主およびウマ宿主の血液、汗、唾液、鼻粘液、糞および涙を摂餌する。摂餌は日中にのみ行われ、このことは、フェイス・フライが、毎晩、ウシから離れ、毎朝、再び戻っていくことを意味する。夏季の日中には、典型的には、ウシ１頭の顔当たり５～３０匹程度の数のハエが認められる。

一般にフェイス・フライが媒介体として働く疾患はウシ伝染性角結膜炎（ＩＢＫ）であり、これはウシにおける最も一般的な眼疾患であり、ニュー・フォレスト・アイおよびピンクアイなる別称としても公知である。その主な病原体はグラム陰性桿菌モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）であるが、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ボボクリ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｏｃｕｌｉ）およびマイコプラズマ・ボボクリ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｏｃｕｌｉ）感染を含む他の微生物もＩＢＫの病原性における潜在的な素因的役割に関連づけられている。

フェイス・フライはモラクセラ・ボビス細菌の一般的なキャリア（運搬体、保菌体）であり、したがって、ＩＢＫの一般的な媒介体である。特に、口器、体および手足を含むフェイス・フライの表面は、数時間生存可能なモラクセラ・ボビス細菌で汚染されうるが、フェイス・フライによって摂取されたモラクセラ・ボビス細菌はハエの消化管内で最長３日間生存可能であり、このことは、モラクセラ・ボビス細菌を運搬するフェイス・フライは、前腸および中腸からの小滴の吐出によって、数日間にわたってウシの眼感染症を引き起こしうることを意味する。

この疾患の経済的影響は相当なものであり、ＩＢＫは肉用および乳用の若雌ウシを冒す最も多く見られる病態であり、３週齢を超える乳児ウシの、２番目に多く見られる疾患である。

現在、ＩＢＫに対する最も一般的に用いられる治療は、全身注射、結膜下注射、眼瞼内注射または局所適用によって送達される抗生物質薬である。あるいは、殺虫剤を含有する耳タグの使用のような予防的手段に頼る必要がある。しかし、これらの治療選択肢の全ては、眼表面への薬物送達の薬物動態と、治療的または予防的手段を実施するために動物の取り扱いおよび拘束が必要であることとによって妥協される。したがって、動物における細菌感染の発生率を減少させる有効な方法、特に、動物の取り扱いおよび拘束を必要としない、ウシにおけるフェイス・フライ誘発性ＩＢＫの発生率を減少させるための有効な方法が、依然として必要とされている。

ウシは、柵の支柱、木または灌木に体を擦りつけて１日の一定時間を過ごす傾向があり、その間に、喜びおよび満足感を得ているようである。この行動の観察は、この行動を促進させるために圃場および囲い地内に配置されうる商業的に製造されるブラシおよびボディバッファーの開発につながった。特に、頭部の擦りつけはフェイス・フライをウシの顔から一時的に退散させて、ハエは別の休息場所を見つけるか、または顔に戻るまで空中に留まる。ウシのこの自然な傾向を、ウシにおけるハエ誘発性ＩＢＫまたは他の細菌感染を低減するための戦略に利用することができれば有利であろう。ノサシバエ［ヘマトビア・イルリタンス（Ｈａｅｍａｔｏｂｉａ ｉｒｒｉｔａｎｓ）］およびサシバエ［ストモキス・カルシトランス（Ｓｔｏｍｏｘｙｓ ｃａｌｃｉｔｒａｎｓ）］を含む他のハエ種はウシの主要害虫である。一般的なイエバエ［ムスカ・ドメスチカ（Ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）］およびクロバエ［カリフォラ・ボミトリア（Ｃａｌｌｉｐｈｏｒａ ｖｏｍｉｔｏｒｉａ）］と同様に、これらのハエ種は細菌の拡散の媒介体であり、特にノサシバエは、ウシにおいて乳腺炎を引き起こしうるブドウ球菌種を含む細菌の伝染に関与している。したがって、これらの有害なハエをウシから追い払い、それらの細菌負荷を排除することは、ウシの健康および福祉の観点から有益である。

飛翔昆虫によって運搬される細菌性疾患に罹り易いもう１つの宿主種はバナナの木［ムサ（Ｍｕｓａ）科の一部］である。バナナの木は、細菌ザントモナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）によって引き起こされる「バナナ細菌性萎凋病」および細菌ラルストニア・ソランセアラム（Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｃｅａｒｕｍ）によって引き起こされる「モコ病（Ｍｏｋｏ ｄｉｓｅａｓｅ）」を含む幾つかの細菌性疾患に罹り易い。バナナ農園においては、寄生バエ、例えば東洋ミバエ［バクトロセラ・ドルサリス（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ ｄｏｒｓａｌｉｓ）］およびスズメバチが活発に活動しており、したがって、バナナの木に細菌性疾患を運搬する媒介体として働きうる。同様に、オリーブの木［オレア・ユーロペア（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ）］は、細菌キシレラ・ファスティディオサ（Ｘｙｌｅｌｌａ ｆａｓｔｉｄｉｏｓａ）およびシュードモナス・サバスタノイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓａｖａｓｔａｎｏｉ）を含む、オリーブミバエ［バクトロセラ・オレアエ（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ ｏｌｅａｅ）］によって運搬される細菌による細菌性疾患に罹り易い。

マルハナバチ［ボンブス・テレストリス・アウダックス（Ｂｏｍｂｕｓ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ ａｕｄａｘ）］のようなハチも花のような植物種に細菌感染を運搬しうる。特に、多数の植物は、非常に広範囲の宿主種を有するシュードモナス・シリンゲ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）の幾つかの株の１つによって引き起こされる細菌性胴枯れ病に罹り易い。これらの病原体はハチおよび他の飛翔昆虫によって運搬され、拡散されうる。例えば、果実収量を増加させる手段として、キウイフルーツ［アクチニジア・デリシオサ（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｄｅｌｉｃｉｏｓａ）］のような結果（ｆｒｕｉｔ－ｂｅａｒｉｎｇ）植物の受粉を促進させるために、商業用の養蜂箱（ハチの巣）が一般に使用される。しかし、キウイフルーツ植物は、ハチによって運搬されうるキウイフルーツかいよう病菌［シュードモナス・シリンゲ・ピーブイ・アクチニジエ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ ｐｖ．Ａｃｔｉｎｉｄｉａｅ）］によって引き起こされる感染症に非常に罹り易い。したがって、商業用養蜂箱におけるハチの細菌負荷を減少させることができれば、そして疾患予防の手段として、この病原体に対する活性を有するファージをハチが植物にばらまくことを可能にすることができれば、非常に好都合であろう。現在、植物における細菌感染を低減するための農業戦略は、土壌に導入される又は植物種に適用される人工化学物質に大きく依存しており、これは周囲の生態系を攪乱する。したがって、植物における細菌感染の発生率を減少させる有効な方法も、依然として必要とされている。

図１は、グルコースシロップと水との５０：５０混合物からなる誘引因子を摂餌しているイエバエ科のハエの俯瞰図を示す。 図２ａは、アイシングシュガー（粉砂糖）と別の水源とからなる誘引因子を摂餌しているイエバエ科のハエの俯瞰図を示す。 図２ｂは、アイシングシュガーと別の水源とからなる誘引因子を摂餌しているイエバエ科のハエの側面図を示す。 図３は、ハエ、スクロース溶液中のモラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する溶菌活性を有するバクテリオファージまたはその両方を含有する密閉容器内で１日放置された後の寒天プレート上のモラクセラ・ボビスの増殖を示す。 図４は、ハエ、スクロース溶液中のサルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）に対する溶菌活性を有するバクテリオファージまたはその両方を含有する密閉容器内で１日放置された後の寒天プレート上のサルモネラ・エンテリカの増殖を示す。 図５は、フェイス・フライ、スクロース溶液中のサルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）に対する溶菌活性を有するバクテリオファージまたはその両方を含有する密閉容器内で１日放置されたエクスビボのウシの眼を洗浄するために使用した溶液を移した後の寒天プレート上のサルモネラ・エンテリカ病原体の増殖を示す。 図６は、ハチ、スクロース溶液中のサルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）に対する溶菌活性を有するバクテリオファージまたはその両方を含有する密閉容器内に１日放置された新たに切られた花を洗浄するために使用した溶液を移した後の寒天プレート上のサルモネラ・エンテリカ病原体の増殖を示す。 図７は、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有するバクテリオファージの透過型電子顕微鏡イメージを示す。 図８は、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有するバクテリオファージの透過型電子顕微鏡イメージを示す。 図９は、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有するバクテリオファージの透過型電子顕微鏡イメージを示す。 図１０は、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有するバクテリオファージの透過型電子顕微鏡イメージを示す。 図１１ａおよび１１ｂは、図１０のファージを生成した分離体の連続継代後に生成されたクラスターを示す。

発明の概括
本発明の第１の態様においては、（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せる（一緒にする）こと、あるいは（ｉｉ）ファージまたは免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置することを含む、飛翔昆虫をファージおよび／または免疫原性物質に誘引する方法を提供する。

本発明の第２の態様は、ファージおよび／または免疫原性物質を陸生動物または植物に転移させる方法における、飛翔昆虫の使用に関するものであり、ここで、飛翔昆虫はファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして働く。

本発明の第３の態様は、飛翔昆虫を使用してファージおよび／または免疫原性物質を動物または植物に転移させることを含む、陸生動物または植物における疾患の治療または予防方法に関するものであり、ここで、飛翔昆虫はファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして働く。

本発明の第４の態様においては、（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質、ならびに（ｉｉ）糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射または放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射または放射する物質、飛翔昆虫の栄養源およびそれらの組合せのうちの１以上から選択される飛翔昆虫誘引因子を含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のための組成物を提供する。また、本発明の組成物を含む物品をも提供する。

本発明の第５の態様においては、（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質、ならびに（ｉｉ）糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射もしくは放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射もしくは放射する物質、飛翔昆虫の栄養源、または飛翔昆虫が生得的に誘引される休息場所（例えば、ミツバチの場合の養蜂箱）およびそれらの組合せのうちの１以上から選択される飛翔昆虫誘引因子を含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のためのキットを提供する。

幾つかの実施形態においては、本発明はファージの使用を含む。ファージの使用は前記問題を解決する。なぜなら、ファージは、飛翔昆虫によって天然で運搬される細菌に作用して、陸生動物および植物への感染を飛翔昆虫がもたらす可能性を低減しうるからである。更に、ファージは、標的の動物および植物に既に感染している細菌を治療または制御することが可能であり、また、ファージは、飛翔昆虫によって、未感染生物に転移されうる。換言すれば、陸生動物または植物において疾患を引き起こす原因となる細菌の媒介体として通常働く飛翔昆虫は、疾患を引き起こす原因となる細菌に対して作用しうるファージの媒介体となる。これは、取り扱い、手動操作または拘束を含む直接的な人間の介入を要することなく、陸生動物および植物における細菌感染の発生率を減少させるための標的化手段を提供する。

幾つかの実施形態においては、本発明は免疫原性物質の使用を含む。本発明はまた、直接的な人間の介入を要することなく、免疫原性応答を誘発するための免疫原性物質を送達する手段を提供する。これは、免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せること、または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置することによって達成され、その結果、飛翔昆虫への免疫原性物質の転移が達成される。標的の動物または植物への免疫原性物質の後続転移は、取り扱い、手動操作または拘束を含む直接的な人間の介入を要することなく、陸生動物および植物における防御反応を誘発するための標的化手段を提供する。体液性または細胞性メカニズムによる免疫応答は、植物においては、動物において生じるようには生じないと理解されるであろう。それでも、植物は免疫系を有し、病原体分子に応答して防御反応を誘発しうる、と広く認識されている。

好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質を、飛翔昆虫が摂餌する傾向がある栄養源を含む飛翔昆虫誘引因子と組合せ、それによって、ファージまたは免疫原性物質の摂取を促進させる。次いでファージまたは免疫原性物質は、飛翔昆虫の摂餌行動の正常な特徴として生じる、飛翔昆虫の消化管内容物の小滴の吐出中に、標的生物に転移される。

定義
本明細書中で用いる「飛翔昆虫」なる語は、飛翔する能力を有する任意の昆虫を意味する。したがって、「飛翔昆虫」なる語は、１対以上の羽を有する全ての昆虫を含む。

本明細書中で用いる「ハエ」なる名詞は、１対のみの羽を飛行に使用することによって特徴づけられる任意の飛翔昆虫を意味する。これは双翅類種を含むが、これに限定されるものではない。

本明細書中で用いる「双翅目」なる語は双翅目の昆虫を意味し、「双翅類」なる語は双翅目の単一の昆虫を意味する。

本明細書中で用いる「フェイス・フライ」なる語はムスカ・オータムナリス（Ｍｕｓｃａ ａｕｔｕｍｎａｌｉｓ）種を意味する。

本明細書中で用いる「オーストラリアン・ブッシュ・フライ」なる語はムスカ・ベツスチッシマ（Ｍｕｓｃａ ｖｅｔｕｓｔｉｓｓｉｍａ）種を意味する。

本明細書中で用いる「バッファロー・フライ」なる語はヘマトビア・エキシグス（Ｈａｅｍａｔｏｂｉａ ｅｘｉｇｕｓ）種を意味する。

本明細書中で用いる「東洋ミバエ」なる語はバクトロセラ・ドルサリス（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ ｄｏｒｓａｌｉｓ）種を意味する。

本明細書中で用いる「オリーブミバエ」なる語はバクトロセラ・オレアエ（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ ｏｌｅａｅ）種を意味する。

本明細書中で用いる「クロバエ」なる語はカリフォラ・ボミトリア（Ｃａｌｌｉｐｈｏｒａ ｖｏｍｉｔｏｒｉａ）またはルシリア・セリカタ（Ｌｕｃｉｌｉａ ｓｅｒｉｃａｔａ）種の任意の昆虫を意味する。

本明細書中で用いる「マルハナバチ」なる語はボンブス・テレストリス（Ｂｏｍｂｕｓ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）またはボンブス・テレストリス・アウダックス（Ｂｏｍｂｕｓ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ ａｕｄａｘ）種の任意の昆虫を意味する。

本明細書中で用いる「ハナアブ」なる語はハナアブ科（Ｓｙｒｐｈｉｄａｅ）の任意の昆虫を意味する。

本明細書中で用いる「ノサシバエ」なる語はヘマトビア・イルリタンス（Ｈａｅｍａｔｏｂｉａ ｉｒｒｉｔａｎｓ）種を意味する。

本明細書中で用いる「サシバエ」なる語はストモキス・カルシトランス（Ｓｔｏｍｏｘｙｓ ｃａｌｃｉｔｒａｎｓ）種を意味する。

本明細書中で用いる「免疫原性物質」なる語は、標的の陸生生物において免疫応答をもたらしうる任意の物質を意味する。

本明細書中で用いる「誘引因子」なる語は、標的動物を誘引する任意の物質を意味する。したがって、例えば、「飛翔昆虫誘引因子」は、飛翔昆虫を誘引する任意の物質を意味する。誘引因子は栄養源以外の物質であることが可能であり、それは、栄養源を構成または含有する物質であることが可能であり、あるいはそれは、昆虫が生得的に誘引される場所、例えば巣であることが可能である、と理解されるであろう。

本明細書中で言及する「陸生動物」は、主にまたは完全に陸上で生息する動物である。本明細書中で言及する「陸生植物」は、陸上で、陸内で、または陸から成長する植物である。

本明細書中で用いる「含む」なる語は、列挙されている要素の少なくとも全てが存在しなければならないが、挙げられていない他の要素も存在してもよいことを意味する。

本発明の文脈において、「誘引半径」は、標的動物が誘引因子へと誘引される範囲を意味する。例えば、昆虫を誘引するためにニオイ（におい）の利用を伴う昆虫誘引因子の場合、誘引半径は、昆虫が誘引因子のニオイを感じうる範囲である。特定の誘引因子と標的動物とに関する誘引半径は通常の実験によって決定されうると理解されるであろう。例えば、誘引半径は、通常の大気条件下の試験チャンバー内に誘引因子を配置すること、および標的動物が誘引因子に誘引される最大距離を決定するために誘引因子からの距離を漸増させて標的動物を配置することによって決定されうる。

ＸとＹとの組合せに言及するために本明細書中で用いる「組合せる」（「一緒にする」）なる語は、ＸとＹとの混合、およびＸをＹと接触させることを含む。幾つかの実施形態においては、「組合せる」なる語は混合を意味する。幾つかの実施形態においては、「組合せる」なる語は、第１の成分を第２の成分と接触させることを意味する。

本明細書中で用いる「ＩＢＫ」、「ニュー・フォレスト・アイ」および「ピンクアイ」なる語は全て、ウシ伝染性角結膜炎なる疾患を意味する。

本発明における「ウイルス」なる語は、細菌、植物および／または動物の細胞に感染する二本鎖または一本鎖のＲＮＡまたはＤＮＡウイルスを含む。

「ファージ」および「バクテリオファージ」なる語は、特定の細菌に感染するウイルスであるバクテリオファージを意味するものとして、本明細書において互換的に用いられる。

本発明における「基体」（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）なる語は、バクテリオファージのようなウイルスが固定化されうる任意の固相材を意味すると理解される。

関心のある１以上の値に適用される、本明細書中で用いる「約」なる語は、示されている基準値に類似した値を指す。幾つかの実施形態においては、「約」なる語は、いずれかの方向（基準値より大きいまたは小さい）で基準値の２５％以内に含まれる値の範囲を意味する。幾つかの実施形態においては、「約」なる語は、示されている基準値の２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれ未満に含まれる値を意味する（ただし、そのような数値が、可能な値の１００％を超える場合は除かれる）。

詳細な説明
本発明は、ファージおよび／または免疫原性物質を陸生動物または植物に転移させる方法における、飛翔昆虫の使用に関するものであり、ここで、飛翔昆虫はファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして働く。

また、本発明は、飛翔昆虫を使用してファージおよび／または免疫原性物質を動物または植物に転移させることを含む、陸生動物または植物における疾患の治療または予防方法に関するものであり、ここで、飛翔昆虫はファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして働く。好ましい実施形態においては、陸生動物または植物における疾患の治療または予防方法は、ファージおよび／または免疫原性物質を陸生動物または植物上の細菌感染のような感染の部位に直接的に転移させることを含む。

本発明はまた、（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せること、あるいは（ｉｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置することを含む、ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫に転移させる方法に関する。

本発明の方法および使用の実施形態においては、飛翔昆虫誘引因子は、好ましくは、糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射または放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射または放射する物質、飛翔昆虫が生得的に誘引される休息場所、栄養源またはそれらの組合せから選択される飛翔昆虫誘引因子である。

本発明は更に、（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質、ならびに（ｉｉ）糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射または放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射または放射する物質、飛翔昆虫の栄養源およびそれらの組合せから選択される飛翔昆虫誘引因子を含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のための組成物に関する。

また、本発明は、（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質、ならびに（ｉｉ）糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射もしくは放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射もしくは放射する物質、飛翔昆虫が生得的に誘引される休息場所、飛翔昆虫の栄養源またはそれらの組合せから選択される飛翔昆虫誘引因子を含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のためのキットに関する。

本発明の文脈においては、細菌性疾患の「予防」または細菌性疾患を「予防する」は、細菌が昆虫自体によって運搬される場合にも陸生動物または植物上に存在する場合にも、飛翔昆虫に転移されるファージまたは免疫原性物質が細菌に対して作用しうる任意の方法を含む。例えば、細菌性疾患の予防は、飛翔昆虫上に存在する細菌に対してファージまたは免疫原性物質が作用することによって生じて、飛翔昆虫の細菌負荷を低減し、細菌性疾患が昆虫によって拡散されるのを予防しうる。あるいは、飛翔昆虫が陸生動物または植物に接触して、陸生動物または植物上にファージまたは免疫原性物質を付着させ、動物または植物上で生じる細菌感染を予防する場合に、細菌性疾患の予防が生じうる。

好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は抗微生物物質である。他の好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質はバクテリオファージを含む。より好ましくは、バクテリオファージは、操作されたバクテリオファージ、すなわち、本発明の方法、組成物、キットおよび使用のために調製されたバクテリオファージである。

バクテリオファージは特定の細菌を標的化するウイルスであり、その宿主細菌に感染すると、溶菌経路または溶原経路のいずれかによって増殖しうる。溶菌バクテリオファージは、細菌に感染すること、およびそれを利用することによって働いて、該ウイルスの複製および増殖がもたらされうる。最終的に、十分なウイルス複製の後、細菌細胞溶解は大量の新たなバクテリオファージを放出し、それら自体が近傍細菌に感染しうる。溶原バクテリオファージは、そのＤＮＡを細菌染色体内に組み込むこと、および宿主染色体と共に複製することによって働いて、新たな組み込みウイルスＤＮＡコピーが生成される。有利なことに、バクテリオファージは、それが標的化する細菌に特異的であり、このことは、それが、低い特異性の抗生物質とは異なり、宿主内のその他の細菌に損傷を与えることなく、宿主における抗細菌物質として使用されうることを意味する。

特定の細菌に対する活性を有するバクテリオファージは当業者によって単離されうると理解されるであろう。例えば、バクテリオファージは、まず、関連細菌を培養すること、およびそれを寒天上でプレーティングして、増殖する細菌叢を得ることによって単離されうる。次いで、動物組織および分泌物、糞便、植物物質、土壌または水サンプル（これらに限定されるものではない）を含む適切なバクテリオファージ源から液体が採取されうる。例えば、ウシ動物において見られる細菌であるモラクセラ・ボビスに対する活性を有するバクテリオファージを単離するためにウシのルーメン液、鼻および涙の分泌物が採取可能であり、ブタ動物において見られる細菌であるサルモネラ・エンテリカに対する活性を有するバクテリオファージを単離するためにブタの糞便から液体が採取可能である。次いで寒天上の細菌叢を、採取した液体のアリコートにさらし、細菌溶菌が観察されたサンプルに関しては、それからバクテリオファージライセートが濃縮されうる。

好ましい実施形態においては、バクテリオファージを安定化する。例えば、ＥＰ １４９６９１９ Ｂ１に記載されているとおり、基体への固定化によって、それを安定化する。これは、ファージがその抗細菌活性を保持する一方で、遊離ファージと比較して安定性が改善されることが保証されるため、有利である。

幾つかの実施形態においては、ＥＰ １４９６９１９ Ｂ１に記載されているとおり、バクテリオファージを、基体とファージとの間に形成される共有結合によって、基体に固定化する。好ましい実施形態においては、バクテリオファージを、尾部を遊離状態にしたまま、その頭部を介して固定化する。これは、バクテリオファージがその活性を保持することを保証する。なぜなら、バクテリオファージの尾部は、特定の細菌を認識しそれに感染するファージの能力に関与しているからである。

好ましい実施形態においては、飛翔昆虫は双翅類である。特に好ましい実施形態においては、双翅類は、フェイス・フライ、オーストラリアン・ブッシュ・フライ、バッファロー・フライ、ノサシバエまたはサシバエである。これが有利なのは、これらのハエがウシおよびウマの害虫種だからである。したがって、ファージおよび／または免疫原性物質を運搬するための、これらのハエの使用は、これらの物質をウシおよびウマ種に標的化するための有効な方法を提供する。なぜなら、該ハエはファージまたは免疫原性物質をウシおよびウマ種に転移させるからである。特に好ましい実施形態においては、双翅類はフェイス・フライである。

幾つかの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、陸生動物または植物における疾患に関連する細菌に対する活性を有する。好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、陸生動物における疾患に関連する細菌に対する活性を有する。好ましい実施形態においては、陸生動物または植物は陸生動物である。特に好ましい実施形態においては、それはウシまたはウマ種であり、好ましくはウシ、例えば雌ウシまたは子ウシである。特に好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、ウシ伝染性角結膜炎の病因に関連する病原体に対する活性を有する。これらの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ボボクリ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｏｃｕｌｉ）およびマイコプラズマ属種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｐ）の１以上、好ましくはモラクセラ・ボビスに対する活性を有しうる。ファージは細菌に対して直接的な活性をもたらしうるのに対し、免疫原性物質は、細菌に対する免疫応答を誘発することによって、間接的にその効果を発揮する、と理解されるであろう。それでも、どちらも細菌種に対する活性を有すると言うことが可能であり、これはこの分野の当業者に理解されるであろう。したがって、本発明の方法、キットおよび使用は、直接的な人間の介入を要することなく、自然プロセスによって、疾患を引き起こす病原体に対抗するために、ファージまたは免疫原性物質を動物に送達するための効率的な方法を提供する。

幾つかの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、陸生植物における疾患に関連する細菌に対する活性を有する。特に好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、バナナ細菌性萎凋病の病因に関連する病原体に対する活性を有する。これらの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質はザントモナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）に対する活性を有しうる。他の好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質は、モコ病の病因に関連する病原体に対する活性を有する。これらの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質はラルストニア・ソランセアラム（Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｃｅａｒｕｍ）に対する活性を有しうる。幾つかの実施形態においては、飛翔昆虫はスズメバチである。幾つかの実施形態においては、飛翔昆虫は東洋ミバエである。他の好ましい実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質はキシレラ・ファスティディオサ（Ｘｙｌｅｌｌａ ｆａｓｔｉｄｉｏｓａ）、シュードモナス・シリンゲ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）またはシュードモナス・サバスタノイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓａｖａｓｔａｎｏｉ）に対する活性を有する。幾つかの実施形態においては、飛翔昆虫はオリーブミバエである。もう１つの実施形態においては、昆虫はハチ、好ましくはマルハナバチである。したがって、本発明の方法、キットおよび使用は、直接的な人間の介入を要することなく、植物に対する昆虫種の自然行動を利用することによって、自然プロセスにより、疾患を引き起こす病原体に対抗するために、ファージおよび／または免疫原性物質を植物に送達するための効率的な方法を提供する。

また、本発明は、免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せること、あるいはファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置することを含む、ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫に転移させる方法に関する。

幾つかの実施形態においては、誘引因子は、糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射もしくは放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射もしくは放射する物質、または飛翔昆虫が生得的に誘引される休息場所の１以上を含む。飛翔昆虫が生得的に誘引される休息場所には、擦りブラシ、巣、ならびに陸生植物および動物の表面が含まれるが、これらに限定されるものではない。例えば、ハエはウシの顔に生得的に誘引され、ハチは花に生得的に誘引される。適切な状況下の栄養源も誘引因子として働きうると理解されるであろう。したがって、誘引因子は、好ましくは、２つの物質（すなわち、栄養源であるもの、および栄養源ではないもの）の組合せを含みうる。

好ましい実施形態においては、該組成物またはキットは、飛翔昆虫の栄養源を含む飛翔昆虫誘引因子を含み、あるいは該方法は、ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫の栄養源と組合せる（組合せる）ことを含む。栄養源は糖、好ましくはグルコースまたはドライアイシングシュガーでありうる。幾つかの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質と栄養源との組合せは液体形態で提供される。幾つかの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質と栄養源との組合せは固体形態で提供される。

栄養源を含む飛翔昆虫誘引因子の使用が有利である。なぜなら、それは、昆虫が栄養源を摂食する際に、昆虫によるファージおよび／または免疫原性物質の摂取の可能性を高めるからである。これが有利であるのは、それが、ファージおよび／または免疫原性物質が飛翔昆虫の消化管に転移されることを保証するからである。これは、飛翔昆虫がハエである場合に特に有利である。なぜなら、消化管内容物の小滴の吐出はハエの摂食活動の通常の特徴であるからである。その結果、ハエが栄養源の摂食から動物または植物宿主上の摂餌へと移行すると、ファージおよび／または免疫原性物質の、動物または植物宿主への特に高い伝達が生じる。

好ましくは、ファージおよび／または免疫原性物質を、飛翔昆虫が摂餌する傾向がある栄養源を含む飛翔昆虫誘引因子と組合せ、それによって、飛翔昆虫による該物質の摂取を促進させる。

図１は、グルコースシロップと水との５０：５０混合物からなる、ハエ用の例示的な液体栄養源を示す。図２ａおよび２ｂは、ドライアイシングシュガーからなる、ハエ用の例示的な固体栄養源を示す。これらの図は、栄養源のそれぞれを摂餌しているハエを示しており、陸生生物において疾患を引き起こす細菌の治療または制御に有用なファージおよび／または免疫原性物質が栄養源と組合され、または栄養源の誘引半径内に存在する場合、それは、ハエによって、摂取、吸入または四肢の汚染によっても拾い上げられることを示している。

好ましい誘引因子は糞便を含む。誘引因子としての糞便の使用は、昆虫がそのライフサイクルを通じて糞便と頻繁に接触するため、有利である。特に、フェイス・フライを含む、糞便に産卵する昆虫種の場合、各産卵サイクル中に糞便との接触が生じる。したがって、糞便が誘引因子として使用される場合、これは、免疫原性物質が双翅類によって拾い上げられ、次いで、双翅類が移動すると植物または動物宿主に転移されることを保証するための効率的な方法を提供する。好ましい実施形態においては、糞便はウマの糞便を含む。

特に好ましい実施形態においては、糞便はウシの糞便を含む。これは、ウシ属動物（例えば、ウシ）において感染を引き起こす細菌に対する活性を有するファージおよび／または免疫原性物質との併用に有利である。また、これは、ウシの糞便に産卵する昆虫にとって、特に有利である。フェイス・フライを例にとると、雌のフェイス・フライはウシの糞便に産卵することから、ファージおよび／または免疫原性物質がウシの糞便の内部または表面上に位置していれば、フェイス・フライがファージおよび／または免疫原性物質と接触する可能性は非常に高い。また、雌のフェイス・フライは、ウシおよびウマ宿主の血液、汗、唾液、鼻粘液、糞便および涙を摂餌する割合が特に高い。したがって、ウシの糞便を含む方法は、フェイス・フライによるウシ宿主への免疫原性物質の効率的な転移を引き起こす可能性が特に高い。

幾つかの実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せる。これは、例えば、飛翔昆虫栄養源を含む誘引因子の場合に有利である。なぜなら、それは、飛翔昆虫が栄養源に接触し、または栄養源の一部を摂取すると、飛翔昆虫がファージおよび／または免疫原性物質の一部をも摂取することを保証するからである。

他の実施形態においては、ファージおよび／または免疫原性物質を誘引因子の誘引半径内に配置する。これは、ファージおよび／または免疫原性物質を誘引因子と組合せることができない状況において有利である。なぜなら、誘引因子の誘引半径内のその配置は、飛翔昆虫が誘引因子へと移動すると、ファージおよび／または免疫原性物質が飛翔昆虫に転移されることを保証するからである。

誘引半径は、誘引因子のタイプ、濃度および効力ならびに標的動物または植物が何であるかによって異なると理解されるであろう。誘引因子と標的動物または植物との特定の組合せに関する誘引半径は通常の実験によって決定される。例えば、誘引半径は、通常の大気条件下の試験チャンバー内に誘引因子を配置すること、および標的動物が誘引因子に誘引される最大距離を決定するために誘引因子からの距離を漸増させて標的動物を配置することによって決定されうる。養鶏場を誘引因子として用いてイエバエの誘引半径を決定する研究の一例はＮａｚｎｉ ＷＡら，Ｔｒｏｐ Ｂｉｏｍｅｄ．２００５ Ｊｕｎ；２２（１）：５３－６１において見出される。

幾つかの実施形態においては、誘引半径は誘引因子から約１キロメートル以内でありうる。幾つかの実施形態においては、誘引半径は誘引因子から約５００メートル以内でありうる。幾つかの実施形態においては、誘引半径は誘引因子から約１００メートル以内でありうる。幾つかの実施形態においては、誘引半径は誘引因子から約１０メートル以内でありうる。幾つかの実施形態においては、誘引半径は誘引因子から約５メートル以内でありうる。幾つかの実施形態においては、誘引半径は誘引因子から約１メートル以内でありうる。

誘引因子と組合されるファージまたは免疫原性物質の最適濃度は、種々の濃度を調べるチャレンジ研究を用いて決定されうる、と理解されるであろう。幾つかの実施形態においては、ファージの濃度は１０^２ ｐｆｕ／ｍｌ超（すなわち、１０^２ ｐｆｕ／ｍｌを超える）、好ましくは１０^３ ｐｆｕ／ｍｌ超、１０^４ ｐｆｕ／ｍｌ超、または最も好ましくは１０^６ ｐｆｕ／ｍｌ超でありうる。特に好ましい実施形態においては、ファージの濃度は約１０^６ ｐｆｕ／ｍｌである。

幾つかの実施形態においては、組成物またはキットは２以上のファージおよび／または免疫原性物質を含み、あるいは使用または方法は２以上のファージおよび／または免疫原性物質の使用を含む。特に好ましい実施形態においては、組成物は２以上のファージの組合せを含む。ファージおよび／または免疫原性物質の組合せの使用が有利である。なぜなら、細菌はウイルスに対する多数の防御メカニズムを進化させており、耐性を発達させることが公知だからである。したがって、そのような耐性の影響を最小限に抑えるために、製剤は２以上の活性物質のカクテルを含むことが望ましい。

幾つかの実施形態においては、本発明の組成物はプラスチック基体に適用されることが可能であり、そしてこれはウシまたはウマのような動物のための擦り柱に付着され、あるいは該擦り柱の誘引半径内に配置されうる。あるいは、プラスチック基体は液体または液体ガラスの形態でありうる。それが液体製剤である場合、それは糞便のような他の物質においてコーティング、吸収または分散されうる。幾つかの実施形態においては、本発明の組成物は、気象条件のような外部条件から組成物を保護するハウジング内に配置されうる。

例えば、プラスチック基体は、ウシもしくはウマのような動物が接触しうる、例えば擦りうる、またはその環境中に存在しうる柱、木または他の天然もしくは人工構造物に付着され、またはその誘引半径内に配置される。該構造物は、好ましくは、ブラシまたはボディバッファーである。

これは、フェイス・フライが疾患の媒介体として働くウシの場合に特に有利である。特に、柱、木またはブラシもしくはボディーバッファーのような他の構造物にウシが頭を擦りつけるとフェイス・フライはウシの顔から追い払われるため、ハエは空中に留まり、またはウシの顔に戻ることができるまで別の休息場所を探す。したがって、モラクセラ・ボビスに対する活性を有するファージまたは免疫原性物質が、ハエ誘引因子と組合されて、擦りつけ場所と共にまたはその近くに配置されると、ハエによるそれらの取り込みが促進される。例えば、ハエ誘引因子の存在下または非存在下の、ファージ／免疫原性物質のリザーバーを含む、ハエの休息場所が組み込まれた顔擦りブラシは、ハエがウシの顔から追い払われた際にハエがファージ／免疫原性物質のリザーバー上に止まるように促す。次いでハエはファージ／免疫原性物質を拾い上げ、ハエがウシの顔に戻ってくると、それらをウシの顔に転移させて、ＩＢＫのような細菌感染の治療または予防をもたらす。この戦略は有益である。なぜなら、それはウシおよびフェイス・フライの自然行動を利用し、人間の直接的な介入を全く必要としないからである。

あるいは、飛翔昆虫誘引因子の存在下または非存在下、ファージまたは免疫原性物質を顔擦りブラシに直接適用することは、直接的な人間の介入を伴うことなく、ウシの顔へのファージ／免疫原性物質の転移を可能にする。直接的な人間の介入を伴うことなくファージ／免疫原性物質をウシの顔に転移させる別の方法は、飛翔昆虫誘引因子の存在下または非存在下、ウシ用餌源を含有する適切な寸法の容器の縁にファージ／免疫原性物質を添加することを含む。そのような容器から餌をあさって食べると、ウシの鼻口部が容器の縁に接触して、ファージ／免疫原性物質がウシの顔に転移させることになる。これらのどちらの場合においても、飛翔昆虫は次いで、動物の顔から、治療される動物の領域（例えば、眼）にファージ／免疫原性物質を転移させうる。これは、飛翔昆虫誘引因子が存在する場合に特に有利である。なぜなら、これは、飛翔昆虫がウシの顔からファージを拾い上げ、それを感染部位に転移させることを促すからである。

幾つかの実施形態においては、本発明の組成物は、陸生動物用の装着可能な物品、例えばウシまたはウマ用の耳タグ内に組み込まれうる。あるいは、本発明の組成物は動物の外皮に直接的または間接的に付着されうる。これらの実施形態においては、陸生動物が遊牧動物である場合、組成物は、１つの場所に留め置かれるのではなく、陸生動物によって運搬される。これは、組成物が動物と共に移動し、動物が移動しても飛翔昆虫を動物に誘引し続けるため、有利である。耳タグは特に有利である。なぜなら、組成物は動物の顔の近傍に配置されて、動物の顔に誘引される飛翔昆虫（例えば、フェイス・フライ）への容易な接近が可能となるからである。

前記実施形態の全てにおいて、組成物の最終形態は、飛翔昆虫がファージおよび／または免疫原性物質を摂餌し摂取することを可能にするものである。

実施例
あるバクテリオファージ源から、離れて位置する感染部位へとバクテリオファージを飛翔昆虫が運搬する能力を調べるために、実験を行った。これらの原理実証実験において、３つの異なる飛翔昆虫媒介体および２つの異なるファージ／病原体系を使用して、概念の再現性および有用性を実証した。より詳細には、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する特異性を有するバクテリオファージまたはサルモネラ・エンテリカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）に対する特異性を有するバクテリオファージと組合されたフェイス・フライ［ムスカ・オータムナリス（Ｍｕｓｃａ ａｕｔｕｍｎａｌｉｓ）］、クロバエ［カリフォラ・ボミトリア（Ｃａｌｌｉｐｈｏｒａ ｖｏｍｉｔｏｒｉａ）］およびマルハナバチ［ボンブス・テレストリス・アウダックス（Ｂｏｍｂｕｓ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ ａｕｄａｘ）］を使用して、実験を行った。サルモネラ・エンテリカを含む試験の場合には、サルモネラ・エンテリカ血清型チフィムリウム（Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）ＳＬ１３４４に対して以前に分離されていたバクテリオファージを使用した。これらのサルモネラ・エンテリカのファージを以下のとおりに分離した：滅菌水性バッファーに懸濁されたブタ糞便から採取された液体のアリコートに、寒天上で成長しているサルモネラ・エンテリカの菌叢をさらし、次いで、３７℃で一定期間のインキュベーションの後、細菌叢におけるプラークを観察した。

モラクセラ・ボビスの場合には、以下のとおりにバクテリオファージを分離した。モラクセラ・ボビスをＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ（ＮＣＴＣ ９４２６）から購入し、５％ ウマ血液で補足された脳心臓浸出物（Ｂｒａｉｎ Ｈｅａｒｔ Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）（ＢＨＩ）において培養した。細菌を、５％ ウマ血液で補足されたＢＨＩ寒天内でプレーティングし、プレートを３７℃で４８時間インキュベートした。モラクセラ・ボビスに対する溶菌活性を有するバクテリオファージを、バクテリオファージライセートが濃縮されていたウシのルーメン液ならびにウシの鼻および涙分泌物の屠殺場標本から分離した。これは、血液－寒天におけるモラクセラ・ボビスのプレートに該ライセートを導入し、更にインキュベートした後、細菌溶菌を観察することによって達成された。血液－寒天プレートにトリフェニルテトラゾリウムクロリドを加えると、バクテリオファージによる細菌溶菌の可視化が容易になった。５％ ウマ血液で補足されたモラクセラ・ボビス／ＢＨＩブロスにおける富化のために、プラークを採取した。４つの別々の培養物に関して連続継代を行ってバクテリオファージのクローン集団を得、これを透過型電子顕微鏡検査（ＴＥＭ）に付した。分離されたモラクセラ・ボビスに対する活性を有する４つのファージに関するＴＥＭイメージを図７、８、９および１０に示す。図１１ａおよび１１ｂは、図１０のファージを生成した分離体の連続継代後に生成されたクラスターを示す。連続継代後のクローン集団に合致して、分離体におけるファージの全ては同一形態を有していたことが認められうる。更に、分離されたファージのそれぞれは種々の形態を有していたことが認められうる。図７におけるファージは典型的なファージ形態を有していたが、図１０におけるファージは有意に異なる形態を有していた。図８および図９におけるファージは互いに非常に類似した形態を有していた。

実施例１
あるバクテリオファージ源から、離れて位置する感染部位へとバクテリオファージをハエが運搬する能力を実験的に調べるためのモデル系を確立した。このモデルにおいては、感染部位は血液－寒天上のモラクセラ・ボビスまたは寒天上のサルモネラ・エンテリカの増殖によって表され、使用した飛翔昆虫はフェイス・フライ［ムスカ・オータムナリス（Ｍｕｓｃａ ａｕｔｕｍｎａｌｉｓ）］またはクロバエ［カリフォラ・ボミトリア（Ｃａｌｌｉｐｈｏｒａ ｖｏｍｉｔｏｒｉａ）］であった。実験において使用したフェイス・フライは、ウシの近くで採取された広く捕獲された標本であった。クロバエの場合、これらは、１２：１２の明：暗サイクル下で照明され２３℃でインキュベートされた蛹から最近孵化した３日齢の成体のハエであった。モラクセラ・ボビスまたはサルモネラ・エンテリカに対する溶菌活性を有するバクテリオファージを、飛翔昆虫誘引因子として働く２０％ スクロース溶液に加えた。モラクセラ・ボビス実験の場合には、図７～１０に示されている４つのバクテリオファージのカクテルを使用した。モラクセラ・ボビスに対する溶菌活性を有するバクテリオファージの濃度は約１０^６ ｐｆｕ／ｍｌであり、サルモネラ・エンテリカに対する溶菌活性を有するバクテリオファージの濃度は約１０^１１ ｐｆｕ／ｍｌであった。

スクロース溶液中のバクテリオファージと、５匹の成体ハエと、該スクロース溶液から離れて配置された病原体の増殖を伴う寒天プレートとを含有する密閉容器を準備した。このようにして、密閉容器内で、ハエはスクロース溶液を摂餌し、それを行う際にバクテリオファージを摂取し、離れて位置する寒天プレート上の感染部位へ移動し、ここにおいて、ハエは更に摂餌することが可能であった。

また、以下のものを含有する他の密閉容器を対照として準備した。

１．対照１：バクテリオファージを含まない２０％ スクロース溶液を含有し、ハエと、モラクセラ・ボビスまたはサルモネラ・エンテリカの増殖を伴う離れて位置する寒天プレートとを含有する。

２．対照２：２０％ スクロース溶液中のバクテリオファージと、離れて位置するモラクセラ・ボビスまたはサルモネラ・エンテリカの増殖を伴う寒天プレートとを含有するが、ハエを含有しない。

表１は、モラクセラ・ボビスおよびサルモネラ・エンテリカ病原体実験のそれぞれに関する、この実験設定を要約したものである。

各密閉容器を室温で１日中放置した。次いで各密閉容器から寒天プレートを取り出し、病原体の増殖に対する影響があったかどうかを判定するために分析した。

図３はモラクセラ・ボビスの実験終了時の寒天プレートのそれぞれを示す。対照１（図３Ａ）および対照２（図３Ｂ）の実験反復においては、モラクセラ・ボビスの菌叢が、妨げられることなく成長し続けたことが認められうる。対照的に、スクロース溶液中のバクテリオファージとハエとの両方が存在する実験反復（図３Ｃ）においては、バクテリオファージ媒介性細胞溶解によってモラクセラ・ボビスの増殖が消失した領域が見られた。この溶菌活性の可視化はトリフェニルテトラゾリウムクロライドの添加によって増強された。

図４はサルモネラ・エンテリカの実験終了時の寒天プレートのそれぞれを示す。対照１（図４Ａ）および対照２（図４Ｂ）の実験反復においては、サルモネラ・エンテリカの菌叢が、妨げられることなく成長し続けたことが認められうる。対照的に、スクロース溶液中のバクテリオファージとハエとの両方が存在する実験反復（図４Ｃ）においては、バクテリオファージ媒介性細胞溶解によってサルモネラ・エンテリカの増殖が消失した領域が見られた。この溶菌活性の可視化はトリフェニルテトラゾリウムクロライドの添加によって増強された。

実施例１の結果は、飛翔昆虫が、ある位置から別の位置へとバクテリオファージを転移させる媒介体として働きうること、したがって、細菌感染が存在する場合に、飛翔昆虫が、その第２の位置における感染を改善する手段となりうることを証明している。

実施例２
あるバクテリオファージ源から、離れて位置するウシの眼へとバクテリオファージを飛翔昆虫が運搬する能力を実験的に調べるためのモデル系を確立した。このモデルにおいては、使用した飛翔昆虫はフェイス・フライ［ムスカ・オータムナリス（Ｍｕｓｃａ ａｕｔｕｍｎａｌｉｓ）］であった。実験において使用したフェイス・フライは、広く捕獲されたものであり、これらを、１２：１２の明：暗サイクル下で照明パターンでの外界条件下、実験を行う前に、２０％ スクロース溶液上で維持した。ウシの眼は、屠殺場に由来するエクスビボのウシの眼であった。サルモネラ・エンテリカに対する溶菌活性を有するバクテリオファージを、飛翔昆虫誘引因子として働く２０％ スクロース溶液に加えた。サルモネラ・エンテリカに対する溶菌活性を有するバクテリオファージの濃度は約１０^１１ ｐｆｕ／ｍｌであった。

スクロース溶液中のバクテリオファージと、５匹の成体ハエと、該スクロース溶液から離れて配置されたウシの眼とを含有する密閉容器を準備した。このようにして、密閉容器内で、ハエはスクロース溶液を摂餌し、それを行う際にバクテリオファージを摂取し、ウシの眼へ移動することが可能であった。

また、以下のものを含有する他の密閉容器を対照として準備した。

１．対照１：バクテリオファージを含まない２０％ スクロース溶液を含有し、ハエと、離れて位置するエクスビボのウシの眼とを含有する。

２．対照２：２０％ スクロース溶液中のバクテリオファージと、離れて位置するエクスビボのウシの眼とを含有するが、ハエを含有しない。

表２は、この実験設定を要約したものである。

各密閉容器を室温で１日中放置した。次いで各密閉容器からウシの眼を取り出し、眼の表面を１ｍｌの滅菌ＰＢＳ溶液で洗浄し、そのうちの１００μｌを、寒天上のサルモネラ・エンテリカの成長中の菌叢に移して、３７℃で一晩インキュベートした。次いで、病原体の増殖に対する影響があったかどうかを判定するために、各眼からの寒天プレートを分析した。

図５はモラクセラ・ボビスの実験終了時の寒天プレートのそれぞれを示す。対照１（図５Ａ）および対照２（図５Ｂ）の寒天プレートにおいては、エクスビボのウシの眼からのＰＢＳ流出液の添加は病原体の菌叢の攪乱を引き起こしたが、細菌の溶菌領域は検出されなかった。全ての変数が存在する実験反復（図５Ｃ）においては、エクスビボのウシの眼からのＰＢＳ流出液の添加は病原体の菌叢の攪乱を引き起こしたが、更に、液体が溜まった部位において溶菌活性が見られた。

この実験の結果は、ハエがバクテリオファージを或る位置からウシの眼へと転移させることが可能であり、この場合、それらが、感受性細菌種の病原体を抑制または根絶する可能性を有することを示している。

実施例３
あるバクテリオファージ源から、離れて位置する植物種へとバクテリオファージを飛翔昆虫が運搬する能力を実験的に調べるためのモデル系を確立した。このモデルにおいては、使用した飛翔昆虫はマルハナバチ［ボンブス・テレストリス・アウダックス（Ｂｏｍｂｕｓ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ ａｕｄａｘ）］であった。植物種は、新たに切られた花であった。サルモネラ・エンテリカに対する溶菌活性を有するバクテリオファージを、飛翔昆虫誘引因子として働く２０％ スクロース溶液に加えた。サルモネラ・エンテリカに対する溶菌活性を有するバクテリオファージの濃度は約１０^１１ ｐｆｕ／ｍｌであった。

スクロース溶液中のバクテリオファージと、５匹のマルハナバチと、該スクロース溶液から離れて配置された新たに切られた花とを含有する密閉容器を準備した。このようにして、密閉容器内で、ハチはスクロース溶液を摂餌し、それを行う際にバクテリオファージを摂取し、花へ移動することが可能であった。

また、以下のものを含有する他の密閉容器を対照として準備した。

１．対照１：ハチと、離れて位置する花とを含有し、バクテリオファージを含まない２０％ スクロース溶液を含有する。

２．対照２：２０％ スクロース溶液中のバクテリオファージと、離れて位置する花とを含有するが、ハチを含有しない。

表３は、この実験設定を要約したものである。

各密閉容器を室温で１日中放置した。次いで各密閉容器から花を取り出し、１ｍｌの滅菌ＰＢＳ溶液で洗浄し、そのうちの１００μｌを、寒天上のサルモネラ・エンテリカの成長中の菌叢に移して、３７℃で一晩インキュベートした。次いで、病原体の増殖に対する影響があったかどうかを判定するために、各花からの寒天プレートを分析した。

図６は実験終了時の寒天プレートのそれぞれを示す。実施例３の対照１（図６Ａ）および対照２（図６Ｂ）の実験反復においては、花からのＰＢＳ溶液流出液の添加は細菌の溶菌の視認可能領域を生成しなかった。対照的に、全ての変数が存在する実験反復（図６Ｃ）においては、サルモネラ・エンテリカの成長中の菌叢へのＰＢＳ花流出液の添加は明白な溶菌活性をもたらした。

この実験の結果は、媒介体昆虫がバクテリオファージを或る位置から植物種へと転移させることが可能であり、この場合、それらが、感受性細菌種の病原体を抑制または根絶する可能性を有することを示している。更に、この実験の結果は、ハチが、顕花植物にバクテリオファージを拡散するための良好な媒介体であることを示しており、これは植物受粉時における作物保護の有利な結果をもたらす。実際、特定の病原体に対する活性を有するバクテリオファージの、商業用の養蜂箱（ハチの巣）への添加は、ハチが寄り付く植物上および巣のハチ集団内のその病原体の存在を低減すると結論付けるのが合理的であろう。

実施例４
ある細菌源から、離れた位置へと細菌を飛翔昆虫が運搬する能力を実験的に調べるためのモデル系を確立した。

細菌は、５％のウマ血液で補足されたＢＨＩ培地内で培養されたモラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）であった。このブロスの一部をスクロースに加えて、細菌を含有する２０％溶液を調製した。使用した飛翔昆虫はクロバエ［カリフォラ・ボミトリア（Ｃａｌｌｉｐｈｏｒａ ｖｏｍｉｔｏｒｉａ）］であった。

スクロース溶液中の細菌と、５匹のクロバエと、該スクロース溶液から離れて位置する滅菌血液－寒天プレートとを含有する密閉容器を準備した。このようにして、密閉容器内で、ハエはスクロース溶液を摂餌し、それを行う際に細菌を摂取し、滅菌寒天プレートへ移動することが可能であった。

また、対照として、もう１つの密閉容器を準備した。これは、スクロース溶液中の細菌と、スクロース溶液から離れて位置する滅菌血液－寒天プレートとを含有するが、クロバエを含有していなかった。

各密閉容器を室温で１日中放置した。次いで血液－寒天プレートを取り出し、３７℃で一晩インキュベートした。ハエを含有しない密閉容器から取り出された血液－寒天プレートは細菌増殖を示さなかった。しかし、ハエを含有していた密閉容器から取り出された血液－寒天プレートは、視認可能な細菌コロニーを生成した。

この実験は、ハエが、ある場所から、離れた位置へと、細菌を転移させうることを証明している。細菌は免疫原性であると一般に理解されており、実際、不活化もしくは殺滅細菌から、または細胞膜タンパク質のような細菌成分から、ワクチンが開発されうる。したがって、飛翔昆虫は免疫原性物質を或る位置から別の位置へと運搬しうると示唆され、そのような物質をハエ誘引因子および媒介体飛翔昆虫と組合せて供給することが、それらの免疫原性物質を動物および植物などに拡散させるために利用されうる、と一般に理解される。

本開示の番号付き実施形態
１．（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質、ならびに
（ｉｉ）飛翔昆虫誘引因子
を含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のための組成物。

２．（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せる（一緒にする）こと、あるいは
（ｉｉ）ファージまたは免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置すること
を含む、飛翔昆虫をファージおよび／または免疫原性物質に誘引する方法。

３．飛翔昆虫が誘引因子へと移動する、または誘引因子と接触する際に、ファージおよび／または免疫原性物質が飛翔昆虫に転移される、実施形態２記載の方法。

４．（ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質、ならびに
（ｉｉ）飛翔昆虫誘引因子
を含む、陸生植物または動物における細菌性疾患の治療または予防のためのキット。

５．ファージおよび／または免疫原性物質を陸生動物または植物に転移させる方法における、飛翔昆虫の使用であって、ここで、飛翔昆虫がファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして働く、前記使用。

６．実施形態２または３記載の方法によってファージおよび／または免疫原性物質が飛翔昆虫に転移されている、実施形態５記載の使用。

７．飛翔昆虫を使用してファージおよび／または免疫原性物質を陸生動物または植物に転移させることを含む、陸生動物または植物における疾患の治療または予防方法であって、ここで、飛翔昆虫がファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして働く、前記方法。

８．実施形態２または３記載の方法によってファージおよび／または免疫原性物質が飛翔昆虫に転移されている、実施形態７記載の方法。

９．飛翔昆虫誘引因子が飛翔昆虫栄養源を含む、実施形態１記載の組成物、実施形態２、３もしくは８記載の方法、実施形態４記載のキットまたは実施形態６記載の使用。

１０．飛翔昆虫誘引因子が、第２の物質と組合された飛翔昆虫栄養源を含む、実施形態９記載の組成物、方法、キットまたは使用。

１１．ファージおよび／または免疫原性物質が、陸生動物または植物における疾患に関連する細菌に対する活性を有する、実施形態１、９もしくは１０記載の組成物、実施形態２、３、７、８、９もしくは１０記載の方法、実施形態４、９もしくは１０記載のキット、または実施形態５、６、９もしくは１０記載の使用。

１２．組成物が２以上の免疫原性物質および／またはバクテリオファージを含む、好ましくは、２以上のバクテリオファージを含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物またはキット。

１３．２以上の免疫原性物質および／またはバクテリオファージを使用する、前記実施形態のいずれか１項記載の方法または使用。

１４．バクテリオファージを含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物もしくはキット、または、バクテリオファージを使用する、前記実施形態のいずれか１項記載の方法もしくは使用。

１５．バクテリオファージが基体への固定化によって安定化されている、好ましくは、バクテリオファージがその頭部を介して固定化されている、実施形態１４記載の組成物、方法、キットまたは使用。

１６．免疫原性物質が変性細菌抗原を含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

１７．飛翔昆虫がハエ、好ましくは双翅類であり、好ましくは、飛翔昆虫がフェイス・フライ、オーストラリアン・ブッシュ・フライまたはバッファロー・フライ、最も好ましくはフェイス・フライである、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

１８．飛翔昆虫がスズメバチ、東洋ミバエまたはオリーブミバエである、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

１９．ファージおよび／または免疫原性物質が、陸生動物における疾患に関連する細菌に対する活性を有し、好ましくは、ここで、動物がウシ科またはウマ科動物であり、より好ましくはウシ科動物である、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２０．ファージおよび／または免疫原性物質が、陸生植物における疾患に関連する細菌に対する活性を有し、好ましくは、ここで、植物がバナナの木またはオリーブの木である、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２１．ファージおよび／または免疫原性物質が、ウシ伝染性角結膜炎の病因に関与する病原体に対する活性を有する、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用
２２．ファージおよび／または免疫原性物質がモラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有する、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２３．ファージおよび／または免疫原性物質が、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ボボクリ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｏｃｕｌｉ）、マイコプラズマ属種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｐ）、ザントモナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）、ラルストニア・ソランセアラム（Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｃｅａｒｕｍ）、キシレラ・ファスティディオサ（Ｘｙｌｅｌｌａ ｆａｓｔｉｄｉｏｓａ）および／またはシュードモナス・サバスタノイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓａｖａｓｔａｎｏｉ）に対する活性を有する、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２４．飛翔昆虫誘引因子が存在し、好ましくは、誘引因子が、糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射もしくは放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射もしくは放射する物質、または飛翔昆虫が生得的に誘引される休息場所のうちの１以上を含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２５．誘引因子が１以上の天然および／または合成物質、好ましくは、フェロモン、揮発性物質および臭気物質から選択される１以上の物質、好ましくは揮発性物質を含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２６．誘引因子が、可視電磁スペクトル内の光を反射もしくは放射する物質、または可視スペクトル外の電磁放射を反射もしくは放射する物質を含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２７．飛翔昆虫誘引因子が飛翔昆虫栄養源を含み、ここで、該栄養源が糖である、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２８．誘引因子ならびにファージおよび／または免疫原性物質が固体形態または液体形態で存在する、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

２９．誘引因子が糞便、好ましくは、ウシの糞便を含む、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

３０．ファージおよび／または免疫原性物質が誘引因子と混合される、前記実施形態のいずれか１項記載の組成物、方法、キットまたは使用。

３１．前記実施形態のいずれか１項記載の組成物を含む物品。

３２．物品が陸生動物に装着可能である、実施形態３１記載の物品。

３３．物品がウシまたはウマの耳タグである、実施形態３２記載の物品。

３４．前記実施形態のいずれか１項記載の組成物を陸生動物の外皮に適用する方法。

本開示は本発明の例示的な実施形態を提供するものであり、限定的であるとは意図されない。本発明の種々の他の修飾および変更も可能であると理解されるであろう。

Claims (18)

1. ウシ動物における疾病に関連する細菌に対して活性を有するファージおよび／または免疫原性物質を前記ウシ動物に転移する方法における飛翔昆虫の使用であって、
   ここで、前記飛翔昆虫は、以下のいずれによってファージおよび／または免疫原性物質に誘引され；
   （ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せること、あるいは
   （ｉｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置すること；
   ここで、ファージおよび／または免疫原性物質は、飛翔昆虫が誘引因子へと移動するまたは誘引因子と接触する際に飛翔昆虫に転移され、
   そしてここで、前記飛翔昆虫は、前記ウシ動物へのファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして作用し、
   ここで、ファージおよび／または免疫原性物質が、
   ウシ伝染性角結膜炎の病因に関与する病原体に対する活性を有する、使用。
2. ウシ動物における疾病を治療または予防する方法に使用するための、ウシ動物における疾病に関連する細菌に対して活性を有するファージおよび／または免疫原性物質であって、ここで、前記方法が、飛翔昆虫を用いて有効量のファージおよび／または免疫原性物質を前記ウシ動物に転移することを含み、ここで、前記飛翔昆虫は、前記ファージおよび／または免疫原性物質のキャリアとして作用する、ファージおよび／または免疫原性物質であって、
   ここで、ファージおよび／または免疫原性物質が、
   ウシ伝染性角結膜炎の病因に関与する病原体に対する活性を有する、
   ファージおよび／または免疫原性物質。
3. 前記ファージおよび／または免疫原性物質が、以下のいずれかによって前記飛翔昆虫に転移され；
   （ｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子と組合せること、あるいは
   （ｉｉ）ファージおよび／または免疫原性物質を飛翔昆虫誘引因子の誘引半径内に配置すること；
   ここで、前記ファージおよび／または免疫原性物質は、前記飛翔昆虫が前記誘引因子へと移動する、または前記誘引因子と接触する際に、前記飛翔昆虫に転移される、
   請求項２に記載のファージおよび／または免疫原性物質。
4. 前記飛翔昆虫誘引因子が飛翔昆虫栄養源を含み、ここで、前記栄養源は糖であってよい、請求項１に記載の使用。
5. ２以上の免疫原性物質および／またはバクテリオファージを含む、請求項１に記載の使用。
6. ２以上の免疫原性物質および／または１以上のバクテリオファージが使用される、請求項１に記載の使用。
7. ２以上の免疫原性物質および／または１以上のバクテリオファージが使用される、請求項２に記載のファージおよび／もしくは免疫原性物質。
8. バクテリオファージが使用される、請求項１に記載の使用。
9. バクテリオファージが使用される、請求項２に記載のファージおよび／もしくは免疫原性物質。
10. 前記飛翔昆虫が、１対のみの羽を飛行に使用することによって特徴づけられる請求項１に記載の使用。
11. 前記飛翔昆虫が、１対のみの羽を飛行に使用することによって特徴づけられる請求項２に記載のファージおよび／もしくは免疫原性物質。
12. 前記飛翔昆虫が、フェイス・フライである、請求項１に記載の使用。
13. 請求項１に記載の使用であって、ファージおよび／または免疫原性物質が、
    ウシ伝染性角結膜炎の病因に関与する病原体に対する活性を有し、そしてモラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有し、
    および／または、ファージおよび／または免疫原性物質が、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ボボクリ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｏｃｕｌｉ）および／またはマイコプラズマ属種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｐ）に対する活性を有する、ことを特徴とする、使用。
14. 請求項２に記載のファージおよび／もしくは免疫原性物質であって、ファージおよび／または免疫原性物質が、
    ウシ伝染性角結膜炎の病因に関与する病原体に対する活性を有し、そしてモラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｉｓ）に対する活性を有し、
    および／または、ファージおよび／または免疫原性物質が、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ボボクリ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｂｏｖｏｃｕｌｉ）および／またはマイコプラズマ属種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｐ）に対する活性を有する、ことを特徴とする、
    ファージおよび／もしくは免疫原性物質。
15. 前記飛翔昆虫誘引因子が、糞便、フェロモン、揮発性物質、臭気物質、可視電磁スペクトル内の光を反射または放射しうる物質、可視スペクトル外の電磁放射を反射または放射する物質、擦りブラシまたは飛翔昆虫の栄養源のうちの１以上を含む、請求項１に記載の使用。
16. 前記誘引因子ならびにファージおよび／または免疫原性物質が固体形態もしくは液体形態で存在し；ならびに／または、ファージおよび／もしくは免疫原性物質が誘引因子と混合される、請求項１に記載の使用。
17. 前記誘引因子ならびにファージおよび／または免疫原性物質が固体形態もしくは液体形態で存在し；ならびに／または、ファージおよび／もしくは免疫原性物質が誘引因子と混合される、請求項２に記載のファージおよび／もしくは免疫原性物質。
18. ウシ動物における細菌性疾患の治療又は予防用の組成物を含む物品であって、
    前記組成物は、請求項２で規定するファージおよび／または免疫原性物質を含み、
    ここで、前記物品がウシ動物に装着可能である、物品。