JP7842395B2 - エクソンスキッピングを可能にするアンチセンス核酸 - Google Patents

エクソンスキッピングを可能にするアンチセンス核酸

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Description

本発明は、標的遺伝子の複数のエクソンを同時にスキッピングさせることが可能なアンチセンスオリゴマー及び該オリゴマーを含む医薬組成物に関する。
近年、疾患を引き起こす変異を有する遺伝子のエクソンをスキッピングさせることにより部分的に機能を有するタンパク質を生じさせ、これにより疾患を治療するエクソンスキッピング療法が注目されている。このようなエクソンスキッピング療法によって治療可能な疾患の例としてデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）が挙げられる。
ＤＭＤは出生男子約３，５００人に１人が発症する最も頻度の高い遺伝性進行性筋疾患である。ＤＭＤ患者は乳幼児期には健常者とほぼ変わらない運動機能を示すが、４～５歳頃から筋力低下がみられる。その後、ＤＭＤ患者の筋力低下は年齢とともに進行し１２歳頃までに歩行不能になり、２０歳代で心不全又は呼吸不全により死に至る。このため、有効な治療薬の開発が強く求められている。
ＤＭＤの原因はジストロフィン遺伝子の変異であることが知られている。ジストロフィン遺伝子はＸ染色体に存在し、２２０万塩基のＤＮＡから成る巨大な遺伝子である。ＤＮＡからｐｒｅ－ｍＲＮＡに転写され、さらにスプライシングによりイントロンが除かれ７９のエクソンが結合したｍＲＮＡは１３，９９３塩基になる。このｍＲＮＡから３，６８５のアミノ酸に翻訳され、ジストロフィンタンパク質が生成される。ジストロフィンタンパク質は筋細胞の膜安定性の維持に関与しており、筋細胞を壊れにくくするために必要である。ＤＭＤ患者はジストロフィン遺伝子に変異を有するため、患者の筋細胞においては、機能するジストロフィンタンパク質がほぼ発現しない。そのため、ＤＭＤ患者体内では、筋収縮時に筋細胞の構造を維持できなくなり、多量のカルシウムイオンが筋細胞内に流れ込む。その結果、筋細胞壊死と線維化が進み、次第に筋細胞が再生されにくくなる。
ベッカー型筋ジストロフィー（ＢＭＤ）もジストロフィン遺伝子の変異が原因であるが、その症状は筋力低下を呈するものの一般にＤＭＤと比較して軽く、筋力低下の進行も遅く、多くの場合、成人期に発症する。ＤＭＤとＢＭＤとの臨床症状の違いは、変異によりジストロフィンのｍＲＮＡがジストロフィンタンパク質へと翻訳される際のアミノ酸読み取り枠が破壊されるか、あるいは維持されるかによるものと考えられている（非特許文献１）。つまり、ＤＭＤでは、アミノ酸読み取り枠がずれる変異を有することにより、機能的なジストロフィンタンパク質がほぼ発現しないが、ＢＭＤでは変異によりエクソンの一部は欠失しているが、アミノ酸読み取り枠は維持されているために不完全ながらも機能し得るジストロフィンタンパク質が産生される。
ＤＭＤの治療法として、エクソンスキッピング法が期待されている。この方法は、スプライシングを改変することでジストロフィンのｍＲＮＡのアミノ酸読み取り枠を修復し、部分的に機能を回復したジストロフィンタンパク質の発現を誘導する方法である（非特許文献２）。エクソンスキッピングの対象となるエクソンから翻訳されるアミノ酸配列部分は失われることになる。そのためこの治療で発現されるジストロフィンタンパク質は正常のものより短くなるが、アミノ酸読み取り枠が維持されるために筋細胞を安定化する機能が部分的に保持される。したがって、エクソンスキッピングにより、ＤＭＤは、より軽症のＢＭＤと同じような症状を呈するようになると期待されている。エクソンスキッピング法は、マウスやイヌによる動物実験を経て、ヒトＤＭＤ患者に対する臨床試験が行われている。
エクソンスキッピングは、５’又は３’スプライス部位周辺のいずれか若しくは両方、又はエクソンの内部を標的とするアンチセンス核酸の結合により誘導することができる。エクソンは両方のスプライス部位がスプライソソーム複合体によって認識された場合のみｍＲＮＡに包含される。したがって、スプライス部位周辺をアンチセンス核酸でターゲッティングすることにより、エクソンスキッピングを誘導することができる。また、エクソンがスプライシングの機構に認識されるためにはエクソンスプライシングエンハンサー（ＥＳＥ）へのセリンとアルギニンに富むＳＲタンパク質の結合が必要であると考えられており、ＥＳＥをターゲッティングすることでもエクソンのスキッピングを誘導することができる。
ジストロフィン遺伝子の変異はＤＭＤ患者によって異なるため、遺伝子変異の場所や種類に応じたアンチセンス核酸が必要になる。ジストロフィン遺伝子の単一エクソンに対して、一つの連続する塩基配列を標的としてエクソンスキッピングを誘導するアンチセンス核酸について複数の報告がある（特許文献１～６並びに非特許文献１及び２）。また、ジストロフィン遺伝子の同一エクソンを標的とする二種類のアンチセンス核酸を混合して作用させると（二重標的化）、各アンチセンス核酸を単独で用いた場合よりスキッピング活性が増強される場合があることが報告されている（特許文献７）。
また、上記のように１つのエクソンをスキップさせるのではなく、複数のエクソン（エクソン群）をスキップするマルチエクソンスキッピングという方法が注目されている。当該方法によれば、ジストロフィン遺伝子の広範囲の変異をエクソンスキッピングによる治療の対象とすることが可能となる。例えば、ジストロフィン遺伝子において、エクソン４５～５５は遺伝子変異のホットスポットとして知られており、これら１１個のエクソンをスキップすることで、欠失変異を有するＤＭＤ患者の約６０％を治療対象とすることができることが報告されている（非特許文献３）。また、エクソン４５～５５を先天的に欠失しているとＢＭＤを発症するが、そのほとんどの患者は無症状又は軽症であることが知られている（非特許文献４）。これらのことから、エクソン４５～５５スキッピングを誘導しうる薬剤は、ＤＭＤ治療薬として有望であると期待されている。
マルチエクソンスキッピングを誘導する方法としては、例えば、エクソンスキッピングの対象となる領域の全てのエクソンをそれぞれ標的とするアンチセンス核酸を用いる方法（非特許文献５、７、８、及び１０）、エクソンスキッピングさせる対象となる領域の３’側及び５’側の２つの異なるエクソンをそれぞれ標的とするアンチセンス核酸を用いる方法（非特許文献６及び９並びに特許文献８）が報告されている。
しかし、イントロンのドナー付近又はアクセプター付近を含む領域を標的としたアンチセンス核酸がマルチエクソンスキッピングを誘導することは未だ報告がない。
国際公開公報第2004/048570号 国際公開公報第2009/139630号 国際公開公報第2010/048586号 米国特許公開公報第2010/0168212号 国際公開公報第2011/057350号 国際公開公報第2006/000057号 国際公開公報第2007/135105号 国際公開公報第2004/083446号
Annemieke Aartsma-Rus et al., (2002) Neuromuscular Disorders 12: S71-S77 Wilton S. D., e t al., Molecular Therapy 2007: 15: p. 1288-96 Christophe Beroud et al., Human Mutation, 28(2), 2007, 196-202 Yusuke Echigoya et al., Molecular Therapy‐Nucleic Acids, 4(2), 2015, e225 Yoshitsugu Aoki et al., PNAS, 109(34), 2012, 13763-13768 Laura van Vliet et al., BMC Medical Genetics, 9, 105, 2008 Joshua Lee et al., PLoS ONE, 13(5), e0197084, 2018 Joshua Lee et al., Methods in Molecular Biology, 1828, 141-150, 2018 Annemieke Aartsma-Rus et al, Am. J. Hum. Genet. 74(1), 83-92, 2004 Yusuke Echigoya et al., Molecular Therapy, 27(11), 1-13, 2019
上記のような状況において、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡの複数のエクソン（エクソン群）を同時にスキッピングさせることにより種々の変異を有する患者を治療するための医薬が求められていた。
本発明者らは、上記文献に記載の技術内容及びジストロフィン遺伝子の構造などを詳細に研究した結果、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの特定の領域を標的とするアンチセンス核酸が、エクソン４５～５５のうち複数のエクソンを同時にスキッピングさせ得ることを見出した。本発明者らは、この知見に基づき、本発明を完成させた。
即ち、本発明は、以下のとおりである。
［１］
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンを同時にスキッピングさせるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であって、
前記アンチセンスオリゴマーは、
前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第ＮＡ番目のエクソンの３’末端から５’末端方向にＮＸ塩基の塩基配列及び第ＮＢ番目のイントロンの５’末端から３’末端方向にＮＹ塩基の塩基配列からなる領域Ｒｎ（ｎは１～２３の奇数）、及び
前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第ＮＡ番目のイントロンの３’末端から５’末端方向にＮＸ塩基の塩基配列及び第ＮＢ番目のエクソンの５’末端から３’末端方向にＮＹ塩基の塩基配列からなる領域Ｒｎ（ｎは２～２４の偶数）
で示される領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくとも１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含み、
ここで、
ｎ＝１のとき、ＮＡ＝４４、ＮＢ＝４４、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２のとき、ＮＡ＝４４、ＮＢ＝４５、ＮＸ＝６００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝３のとき、ＮＡ＝４５、ＮＢ＝４５、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝４のとき、ＮＡ＝４５、ＮＢ＝４６、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝５のとき、ＮＡ＝４６、ＮＢ＝４６、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝６のとき、ＮＡ＝４６、ＮＢ＝４７、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝７のとき、ＮＡ＝４７、ＮＢ＝４７、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝８のとき、ＮＡ＝４７、ＮＢ＝４８、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝９のとき、ＮＡ＝４８、ＮＢ＝４８、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１０のとき、ＮＡ＝４８、ＮＢ＝４９、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１１のとき、ＮＡ＝４９、ＮＢ＝４９、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１２のとき、ＮＡ＝４９、ＮＢ＝５０、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１３のとき、ＮＡ＝５０、ＮＢ＝５０、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１４のとき、ＮＡ＝５０、ＮＢ＝５１、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１５のとき、ＮＡ＝５１、ＮＢ＝５１、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１６のとき、ＮＡ＝５１、ＮＢ＝５２、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１７のとき、ＮＡ＝５２、ＮＢ＝５２、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１８のとき、ＮＡ＝５２、ＮＢ＝５３、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１９のとき、ＮＡ＝５３、ＮＢ＝５３、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２０のとき、ＮＡ＝５３、ＮＢ＝５４、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝２１のとき、ＮＡ＝５４、ＮＢ＝５４、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２２のとき、ＮＡ＝５４、ＮＢ＝５５、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝２３のとき、ＮＡ＝５５、ＮＢ＝５５、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、又は
ｎ＝２４のとき、ＮＡ＝５５、ＮＢ＝５６、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０である、前記アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。［２］
領域Ｒ１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に６００塩基の塩基配列及び第４５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４６番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４６番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４７番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４７番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４８番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４８番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４９番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４９番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５０番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５０番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５１番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５１番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５２番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５２番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５３番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５３番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５４番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、又は
領域Ｒ２４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５６番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域である、
［１］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［３］
前記アンチセンスオリゴマーが、
（ａ）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、
（ｂ）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列、
（ｃ）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、又は
（ｄ）前記（ａ）、（ｂ）、及び（ｃ）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列の一部の塩基配列
に相補的な塩基配列を含む、［１］又は［２］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［４］
前記アンチセンスオリゴマーが、２つ以上のユニットオリゴマーが連結したアンチセンスオリゴマーであって、
前記各々のユニットオリゴマーは、前記領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択されるいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含み、かつ各々のユニットオリゴマーの塩基配列は連続又は互いに重複するものではない、
［１］～［３］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［５］
前記アンチセンスオリゴマーが、２つ以上のユニットオリゴマーが連結したアンチセンスオリゴマーであって、前記各々のユニットオリゴマーは
（ａ）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、
（ｂ）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列、
（ｃ）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、又は
（ｄ）前記（ａ）、（ｂ）、及び（ｃ）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列の一部の塩基配列
に相補的な塩基配列を含み、かつ各々のユニットオリゴマーの塩基配列は連続又は互いに重複するものではない、［１］～［３］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［６］
前記各々のユニットオリゴマーが、前記領域中の連続する５～２０塩基長の塩基配列に相補的な塩基配列を含む、［４］又は［５］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［７］
（１）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（２）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなる、［１］～［３］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［８］
配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなる、［１］～［３］及び［７］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［９］
配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなる、［１］～［３］及び［７］～［８］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１０］
オリゴヌクレオチドである、［１］～［９］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１１］
前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドの糖部分及び／又はリン酸結合部分が修飾されている、［１０］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１２］
前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドの糖部分が、２’位の－ＯＨ基が、－ＯＲ、－Ｒ、－Ｒ’ＯＲ、－ＳＨ、－ＳＲ、－ＮＨ２、－ＮＨＲ、－ＮＲ２、－Ｎ３、－ＣＮ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、及び－Ｉからなる群より選択されるいずれかの基で置換されたリボースである、［１０］又は［１１］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物
（前記Ｒは、アルキル又はアリールを示し、前記Ｒ’は、アルキレンを示す。）。
［１３］
前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドのリン酸結合部分が、ホスホロチオエート結合、ホスホロジチオエート結合、アルキルホスホネート結合、ホスホロアミデート結合、及びボラノフォスフェート結合からなる群より選択されるいずれか１つのものである、［１０］～［１２］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１４］
モルホリノオリゴマーである、［１］～［９］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１５］
ホスホロジアミデートモルホリノオリゴマーである、［１４］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１６］
５’末端が、下記化学式（１）～（３）のいずれかの基である、［１４］又は［１５］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１７］
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか１つのエクソンが単一でスキッピングすることを抑制するサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であって、
前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが、
（ａ）配列番号３７０～３８４からなる群より選択される塩基配列のいずれか１つの塩基配列、若しくは
（ｂ）配列番号３７０～３８４からなる群より選択される塩基配列のいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、又は
（ｃ）前記（ａ）若しくは（ｂ）の塩基配列の一部の塩基配列
に相補的な塩基配列を含む、
前記サプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１８］
（１）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は（２）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなる、［１７］に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［１９］
配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなる、［１７］又は［１８］に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２０］
オリゴヌクレオチドである、［１７］～［１９］のいずれか一項に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２１］
前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドの糖部分及び／又はリン酸結合部分が修飾されている、［２０］に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２２］
前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドの糖部分が、２’位の－ＯＨ基が、－ＯＲ、－Ｒ、－Ｒ’ＯＲ、－ＳＨ、－ＳＲ、－ＮＨ２、－ＮＨＲ、－ＮＲ２、－Ｎ３、－ＣＮ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、及び－Ｉからなる群より選択されるいずれかの基で置換されたリボースである、［２０］又は［２１］に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物
（先記Ｒは、アルキル又はアリールを示し、前記Ｒ’は、アルキレンを示す。）。
［２３］
前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドのリン酸結合部分が、ホスホロチオエート結合、ホスホロジチオエート結合、アルキルホスホネート結合、ホスホロアミデート結合、及びボラノフォスフェート結合からなる群より選択されるいずれか１つのものである、［２０］～［２２］のいずれか一項に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２４］
モルホリノオリゴマーである、［１７］～［１９］のいずれか一項に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２５］
ホスホロジアミデートモルホリノオリゴマーである、［２４］に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２６］
５’末端が、下記化学式（１）～（３）のいずれかの基である、［２４］又は［２５］に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
［２７］
［１］～［１６］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を含む、医薬組成物。
［２８］
［１７］～［２６］のいずれか一項に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物をさらに含む、［２７］に記載の医薬組成物。
［２９］
［１］～［１６］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物と、［１７］～［２６］のいずれか一項に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物とを含む、医薬組成物。
［３０］
（１）前記アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６０からなるオリゴマーであるか、
（２）前記アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６１からなるオリゴマーであるか、又は（３）前記アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６３からなるオリゴマーである、
［２８］又は［２９］に記載の医薬組成物。
［３１］
さらに医薬的に許容可能な担体を含む、［２７］～［３０］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３２］
筋ジストロフィーの治療のための、［２７］～［３１］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３３］
ヒト患者に投与するための、［２７］～［３２］のいずれか一項に記載の医薬組成物。［３４］
［１］～［１６］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩若しくはそれらの水和物、又は［２７］～［３３］のいずれか一項に記載の医薬組成物を、筋ジストロフィー患者に投与する工程を含む、筋ジストロフィーの治療方法。
［３５］
前記筋ジストロフィー患者が、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５スキップの対象となる変異を有する患者である、［３４］に記載の治療方法。
［３６］
前記患者がヒトである、［３４］又は［３５］に記載の治療方法。
［３７］
筋ジストロフィー治療用医薬の製造における、［１］～［１６］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩若しくはそれらの水和物、又は［２７］～［３３］のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。
［３８］
筋ジストロフィー治療に使用するための［１］～［１６］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩若しくはそれらの水和物、又は［２７］～［３３］のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［３９］
前記治療が、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングを行うことを伴う、［３８］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩若しくはそれらの水和物又は医薬組成物。
［４０］
前記治療において、筋ジストロフィー患者がヒトである、［３８］又は［３９］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩若しくはそれらの水和物又は医薬組成物。
［４１］
目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡから２つ以上の番号順に連続するエクソンをスキッピングする際に、前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのスプライシングサイレンサー配列、スプライス部位配列、又はブランチ部位配列を阻害する工程を含む、
前記２つ以上の番号順に連続するエクソンがスキッピングされる効率を増大させる方法。
［４２］
前記スプライシングサイレンサー配列がｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ ｎｕｃｌｅａｒ
ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ Ａ１ （ｈｎＲＮＰＡ１）の認識配列である、［４１］に記載の方法。
［４３］
前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡがヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡである、［４１］又は［４２］に記載の方法。
［４４］
前記２つ以上の番号順に連続するエクソンが、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択される、［４１］～［４３］のいずれか一項に記載の方法。
［４５］
前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡの２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングが、［１］～［１６］のいずれか一項に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を用いて行われる、［４４］に記載の方法。
［４６］
前記スプライシングサイレンサー配列、スプライス部位配列、又はブランチ部位配列を特異的に阻害する工程が、［１７］～［２６］のいずれか一項に記載のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を用いて行われる、［４４］又は［４５］に記載の方法。
また、本発明は以下の態様を含み得る。
［４７］
目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡから２つ以上の番号順に連続するエクソンを同時にスキッピングさせるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であって、
前記アンチセンスオリゴマーは、
（１）前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのいずれかのエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び該エクソンに対して３’側に隣接するイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列から構成される領域、又は
（２）前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのいずれかのイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基又は６００塩基の範囲の塩基配列及び該イントロンに対して３’側に隣接するエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の範囲の塩基配列から構成される領域、
からなる群より選択されるいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含む、
前記アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。［４８］
前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡがヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡである、［４７］に記載のアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物。
本発明により標的の複数のエクソンを同時にスキッピングさせるアンチセンスオリゴマーが提供される。また、本発明の別の態様により、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡの複数のエクソンを同時にスキッピングさせることにより種々の変異を有する患者を治療するための医薬組成物が提供される。また、本発明の別の態様により、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソンが単一でスキッピングすることを抑制するサプレッサーアンチセンスオリゴマー又は当該オリゴマーを含む医薬組成物が提供される。また、本発明の別の態様により、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５を同時に高効率にスキッピングさせることが可能である。
ＲＤ細胞（ヒト横紋筋肉腫細胞）におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のマルチスキッピング及びエクソン４５のシングルスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５５のマルチスキッピング及びエクソン４５のシングルスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～４９間のマルチスキッピング及びエクソン４５のシングルスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～４９間のマルチスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討し、エクソン４５～４６、エクソン４５～４７、エクソン４５～４８、及びエクソン４５～４９の各スキッピングの合計量（全マルチスキッピング産物）を算出した結果を示す図である。当該各スキッピングはすべて治療効果を有すると考えられる。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５２間のマルチスキッピング及びエクソン４５のシングルスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討した結果を示す図である。 ＲＤ細胞におけるヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのエクソン４５～５２間のマルチスキッピングを、ＲＴ－ＰＣＲにより検討し、エクソン４５～４７、エクソン４５～４８、エクソン４５～４９、エクソン４５～５０、エクソン４５～５１、及びエクソン４５～５２の各スキッピングの合計量（左）又はエクソン４５～４７、エクソン４５～４８、エクソン４５～４９、及びエクソン４５～５１の各スキッピング合計量(右）を算出した結果を示す図である。エクソン４５～４７、エクソン４５～４８、エクソン４５～４９、及びエクソン４５～５１の各スキッピングはすべて治療効果を有する。
以下、本発明を詳細に説明する。以下の実施の形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明をこの実施の形態のみに限定する趣旨ではない。本発明は、その要旨を逸脱しない限り、様々な形態で実施をすることができる。
1．アンチセンスオリゴマー
本発明は、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡから２つ以上の番号順に連続するエクソンを同時にスキッピングさせるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であって、
前記アンチセンスオリゴマーは、
（１）前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのいずれかのエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び該エクソンに対して３’側に隣接するイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列から構成される領域、又は
（２）前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのいずれかのイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基又は６００塩基の範囲の塩基配列及び該イントロンに対して３’側に隣接するエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の範囲の塩基配列から構成される領域、
からなる群より選択されるいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含む、
前記アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を提供する。
本明細書において、２つ以上の番号順に連続するエクソンを「同時にスキッピングさせる」とは、各エクソンのｐｒｅ－ｍＲＮＡからの除去のタイミングが完全に同一である場合のみならず、ｐｒe―ｍＲＮＡから成熟ｍＲＮＡに至る期間内で各エクソンを順次除去する場合も含む。すなわち、２つ以上の番号順に連続するエクソンを「同時にスキッピングさせる」とはｐｒe―ｍＲＮＡに対して、２つ以上の番号順に連続する複数のエクソンを除去することをいう。
本明細書において、「２つ以上の番号順に連続するエクソン」は目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡに含まれるエクソンのうち（全エクソン数をＴｅｘｏｎとする）、エクソン番号が１ずつ増加する複数のエクソンを意味する。エクソン番号とは、ｐｒｅ－ｍＲＮＡの最も５’側に存在するエクソンを第１番目のエクソンと定め、５’側から３’側に順次存在するエクソンを順に第２番目、第３番目と振り分けられる番号を意味する。ある遺伝子の２つ以上の番号順に連続するエクソンをスキッピングする場合、そのエクソン番号ａ１，・・・，ａｊは数列｛ａｊ｝として表すことができる。数列｛ａｊ｝の一般項ａｊは以下の式で表される。
［式１］
aj=m+(j-1)
ここでｍは１≦ｍ≦（Ｔｅｘｏｎ－１）を満たす任意の自然数であり、ｊは２≦（ｍ＋ｊ）≦Ｔｅｘｏｎ＋１を満たす自然数である。
例えば、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡがヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡである場合、Ｔｅｘｏｎは７９である。
ある態様ではｊは１～１１から選択される任意の自然数である。また、別の態様ではｊは１１であり、ｊは１０であり、ｊは９であり、ｊは８であり、ｊは７であり、ｊは６であり、ｊは５であり、ｊは４であり、ｊは３であり、ｊは２であり、ｊは１である。
本明細書において、「遺伝子」には、ゲノム遺伝子以外に、ｃＤＮＡ、ｐｒｅ－ｍＲＮＡ及びｍＲＮＡも含まれ、好ましくは、遺伝子はｐｒｅ－ｍＲＮＡである。本明細書において、「ｐｒｅ－ｍＲＮＡ」とは、ゲノム上の標的遺伝子から転写されたエクソン及びイントロンを含むＲＮＡ分子であり、ｍＲＮＡ前駆体である。
ある態様において、本発明は、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンを同時にスキッピングさせるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物（以下、前記アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を総じて「本発明のアンチセンスオリゴマー」ともいう。本発明のアンチセンスオリゴマーは、前記アンチセンスオリゴマー、若しくはその医薬的に許容可能な塩、又はそれらの水和物のそれぞれを指す場合もある。）を提供する。
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡは、ゲノム上のヒトジストロフィン遺伝子から転写されたエクソン及びイントロンを含むＲＮＡ分子であり、ｍＲＮＡ前駆体である。当業者は、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの塩基配列の情報を、ヒトジストロフィン遺伝子のゲノム配列（GenBank Accession No. NG_012232.1）からの類推により入手可能である。
ヒトゲノムにおいて、ヒトジストロフィン遺伝子は遺伝子座Ｘｐ２１．２に存在する。ヒトジストロフィン遺伝子は、約３．０Ｍｂｐのサイズを有しており、既知のヒト遺伝子としては最大の遺伝子である。但し、ヒトジストロフィン遺伝子のコード領域はわずか約１４ｋｂに過ぎず、該コード領域は７９個のエクソンとしてジストロフィン遺伝子内に分散している（Roberts, RG., et al., Genomics, 16: 536-538 (1993)）。ヒトジストロフィン遺伝子の転写物であるｐｒｅ－ｍＲＮＡは、スプライシングを受けて約１４ｋｂの成熟ｍＲＮＡを生成する。ヒトの野生型ジストロフィン遺伝子成熟ｍＲＮＡの塩基配列は公知である（GenBank Accession No. NM_004006）。
上記態様における本発明のアンチセンスオリゴマーは、
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第ＮＡ番目のエクソンの３’末端から５’末端方向にＮＸ塩基の塩基配列及び第ＮＢ番目のイントロンの５’末端から３’末端方向にＮＹ塩基の塩基配列からなる領域Ｒｎ（ｎは１～２３の奇数）、及び
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第ＮＡ番目のイントロンの３’末端から５’末端方向にＮＸ塩基の塩基配列及び第ＮＢ番目のエクソンの５’末端から３’末端方向にＮＹ塩基の塩基配列からなる領域Ｒｎ（ｎは２～２４の偶数）
で示される領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域を標的とする。以下、領域Ｒ１～Ｒ２４を「本発明のアンチセンスオリゴマーの標的領域」又は相互交換的に「本発明の標的領域」と呼ぶ。
本明細書において、「標的とする」とは、対象となる塩基配列が、標的領域の塩基配列又は標的配列の一部の塩基配列に相補的な塩基配列であることをいう。
また、上記態様における本発明のアンチセンスオリゴマーは、本発明の標的領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含む。
上記態様における本発明の標的領域Ｒｎの例としては、以下のものが挙げられる。
ｎ＝１のとき、ＮＡ＝４４、ＮＢ＝４４、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２のとき、ＮＡ＝４４、ＮＢ＝４５、ＮＸ＝６００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝３のとき、ＮＡ＝４５、ＮＢ＝４５、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝４のとき、ＮＡ＝４５、ＮＢ＝４６、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝５のとき、ＮＡ＝４６、ＮＢ＝４６、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝６のとき、ＮＡ＝４６、ＮＢ＝４７、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝７のとき、ＮＡ＝４７、ＮＢ＝４７、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝８のとき、ＮＡ＝４７、ＮＢ＝４８、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝９のとき、ＮＡ＝４８、ＮＢ＝４８、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１０のとき、ＮＡ＝４８、ＮＢ＝４９、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１１のとき、ＮＡ＝４９、ＮＢ＝４９、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１２のとき、ＮＡ＝４９、ＮＢ＝５０、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１３のとき、ＮＡ＝５０、ＮＢ＝５０、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１４のとき、ＮＡ＝５０、ＮＢ＝５１、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１５のとき、ＮＡ＝５１、ＮＢ＝５１、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１６のとき、ＮＡ＝５１、ＮＢ＝５２、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１７のとき、ＮＡ＝５２、ＮＢ＝５２、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１８のとき、ＮＡ＝５２、ＮＢ＝５３、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝１９のとき、ＮＡ＝５３、ＮＢ＝５３、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２０のとき、ＮＡ＝５３、ＮＢ＝５４、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝２１のとき、ＮＡ＝５４、ＮＢ＝５４、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２２のとき、ＮＡ＝５４、ＮＢ＝５５、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝２３のとき、ＮＡ＝５５、ＮＢ＝５５、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、又は
ｎ＝２４のとき、ＮＡ＝５５、ＮＢ＝５６、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０である。
別の態様において、本発明の標的領域Ｒｎの例としては、以下のものも挙げられるが、これに限定されるものではない。
ｎ＝１のとき、ＮＡ＝４４、ＮＢ＝４４、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２のとき、ＮＡ＝４４、ＮＢ＝４５、ＮＸ＝６００、及びＮＹ＝１９であるか、
ｎ＝３のとき、ＮＡ＝４５、ＮＢ＝４５、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝４のとき、ＮＡ＝４５、ＮＢ＝４６、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０であるか、
ｎ＝５のとき、ＮＡ＝４６、ＮＢ＝４６、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝６のとき、ＮＡ＝４６、ＮＢ＝４７、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝３７であるか、
ｎ＝７のとき、ＮＡ＝４７、ＮＢ＝４７、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝８のとき、ＮＡ＝４７、ＮＢ＝４８、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝１９であるか、
ｎ＝９のとき、ＮＡ＝４８、ＮＢ＝４８、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１０のとき、ＮＡ＝４８、ＮＢ＝４９、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝４２であるか、
ｎ＝１１のとき、ＮＡ＝４９、ＮＢ＝４９、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１２のとき、ＮＡ＝４９、ＮＢ＝５０、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝４４であるか、
ｎ＝１３のとき、ＮＡ＝５０、ＮＢ＝５０、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１４のとき、ＮＡ＝５０、ＮＢ＝５１、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝２５であるか、
ｎ＝１５のとき、ＮＡ＝５１、ＮＢ＝５１、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１６のとき、ＮＡ＝５１、ＮＢ＝５２、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝２４であるか、
ｎ＝１７のとき、ＮＡ＝５２、ＮＢ＝５２、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１８のとき、ＮＡ＝５２、ＮＢ＝５３、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝３４であるか、
ｎ＝１９のとき、ＮＡ＝５３、ＮＢ＝５３、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２０のとき、ＮＡ＝５３、ＮＢ＝５４、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝４３であるか、
ｎ＝２１のとき、ＮＡ＝５４、ＮＢ＝５４、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２２のとき、ＮＡ＝５４、ＮＢ＝５５、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝２５であるか、
ｎ＝２３のとき、ＮＡ＝５５、ＮＢ＝５５、ＮＸ＝２０、及びＮＹ＝４００であるか、又は
ｎ＝２４のとき、ＮＡ＝５５、ＮＢ＝５６、ＮＸ＝４００、及びＮＹ＝５０である。
本発明の標的領域Ｒｎの例であるＲ１～Ｒ２４は、別の態様では以下のように表記されるものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
例えば、ある態様では、領域Ｒ１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に６００塩基の塩基配列及び第４５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４６番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４６番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４７番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４７番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４８番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４８番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４９番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４９番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５０番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５０番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５１番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５１番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５２番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５２番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５３番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５３番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５４番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、又は
領域Ｒ２４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５６番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域である。
別の態様において、本発明の標的領域Ｒｎの例であるＲ１～Ｒ２４は、上記の態様では以下のように表記されるものも挙げられるが、これに限定されるものではない。
例えば、ある態様では、領域Ｒ１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に６００塩基の塩基配列及び第４５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に１９塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４６番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４６番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４７番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に３７塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４７番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４８番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に１９塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４８番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第４９番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に４２塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第４９番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５０番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に４４塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５０番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５１番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に２５塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５１番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５２番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に２４塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５２番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５３番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に３４塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５３番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５４番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に４３塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に２５塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のエクソンの３’末端から５’末端方向に２０塩基の塩基配列及び第５５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、又は
領域Ｒ２４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列及び第５６番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に５０塩基の塩基配列からなる領域である。
また、本発明の標的領域Ｒｎの例であるＲ１～Ｒ２４は、別の態様では以下のように表記されるものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
(Ａ１) 領域Ｒ１
領域Ｒ１は、エクソン４４の３’末端とイントロン４４の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン４４に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４４に属する。
(Ａ２) 領域Ｒ２
領域Ｒ２は、イントロン４４の３’末端とエクソン４５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－６００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－６００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４４に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン４５に属する。
(Ａ３) 領域Ｒ３
領域Ｒ３は、エクソン４５の３’末端とイントロン４５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン４５に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４５に属する。
(Ａ４) 領域Ｒ４
領域Ｒ４は、イントロン４５の３’末端とエクソン４６の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４５に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン４６に属する。
(Ａ５) 領域Ｒ５
領域Ｒ５は、エクソン４６の３’末端とイントロン４６の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン４６に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４６に属する。
(Ａ６) 領域Ｒ６
領域Ｒ６は、イントロン４６の３’末端とエクソン４７の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４６に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン４７に属する。
(Ａ７) 領域Ｒ７
領域Ｒ７は、エクソン４７の３’末端とイントロン４７の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン４７に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４７に属する。
(Ａ８) 領域Ｒ８
領域Ｒ８は、イントロン４７の３’末端とエクソン４８の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４７に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン４８に属する。
(Ａ９) 領域Ｒ９
領域Ｒ９は、エクソン４８の３’末端とイントロン４８の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン４８に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４８に属する。
(Ａ１０) 領域Ｒ１０
領域Ｒ１０は、イントロン４８の３’末端とエクソン４９の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４８に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン４９に属する。
(Ａ１１) 領域Ｒ１１
領域Ｒ１１は、エクソン４９の３’末端とイントロン４９の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン４９に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４９に属する。
(Ａ１２) 領域Ｒ１２
領域Ｒ１２は、イントロン４９の３’末端とエクソン５０の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４９に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５０に属する。
(Ａ１３) 領域Ｒ１３
領域Ｒ１３は、エクソン５０の３’末端とイントロン５０の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン５０に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５０に属する。
(Ａ１４) 領域Ｒ１４
領域Ｒ１４は、イントロン５０の３’末端とエクソン５１の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５０に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５１に属する。
(Ａ１５) 領域Ｒ１５
領域Ｒ１５は、エクソン５１の３’末端とイントロン５１の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン５１に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５１に属する。
(Ａ１６) 領域Ｒ１６
領域Ｒ１６は、イントロン５１の３’末端とエクソン５２の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３‘側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５１に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５２に属する。
(Ａ１７) 領域Ｒ１７
領域Ｒ１７は、エクソン５２の３’末端とイントロン５２の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン５２に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５２に属する。
(Ａ１８) 領域Ｒ１８
領域Ｒ１８は、イントロン５２の３’末端とエクソン５３の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５２に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５３に属する。
(Ａ１９) 領域Ｒ１９
領域Ｒ１９は、エクソン５３の３’末端とイントロン５３の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン５３に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５３に属する。
(Ａ２０) 領域Ｒ２０
領域Ｒ２０は、イントロン５３の３’末端とエクソン５４の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５３に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５４に属する。
(Ａ２１) 領域Ｒ２１
領域Ｒ２１は、エクソン５４の３’末端とイントロン５４の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン５４に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５４に属する。
(Ａ２２) 領域Ｒ２２
領域Ｒ２２は、イントロン５４の３’末端とエクソン５５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５４に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５５に属する。
(Ａ２３) 領域Ｒ２３
領域Ｒ２３は、エクソン５５の３’末端とイントロン５５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－２０塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、－２０塩基～－１塩基の範囲で表される領域はエクソン５５に属し、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５５に属する。
(Ａ２４) 領域Ｒ２４
領域Ｒ２４は、イントロン５５の３’末端とエクソン５６の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５５に属し、＋１塩基～＋５０塩基の範囲で表される領域はエクソン５６に属する。
別の態様において、本発明の標的領域Ｒｎの例であるＲ２、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６、Ｒ１８、Ｒ２０、及びＲ２２は、上記の態様では以下のように表記されるものも挙げられるが、これに限定されるものではない。
(Ａ２) 領域Ｒ２
領域Ｒ２は、イントロン４４の３’末端とエクソン４５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－６００塩基～＋１９塩基の範囲で表される領域である。この際、－６００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４４に属し、＋１塩基～＋１９塩基の範囲で表される領域はエクソン４５に属する。
(Ａ６) 領域Ｒ６
領域Ｒ６は、イントロン４６の３’末端とエクソン４７の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋３７塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４６に属し、＋１塩基～＋３７塩基の範囲で表される領域はエクソン４７に属する。
(Ａ８) 領域Ｒ８
領域Ｒ８は、イントロン４７の３’末端とエクソン４８の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋１９塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４７に属し、＋１塩基～＋１９塩基の範囲で表される領域はエクソン４８に属する。
(Ａ１０) 領域Ｒ１０
領域Ｒ１０は、イントロン４８の３’末端とエクソン４９の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋４２塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４８に属し、＋１塩基～＋４２塩基の範囲で表される領域はエクソン４９に属する。
(Ａ１２) 領域Ｒ１２
領域Ｒ１２は、イントロン４９の３’末端とエクソン５０の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋４４塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４９に属し、＋１塩基～＋４４塩基の範囲で表される領域はエクソン５０に属する。
(Ａ１４) 領域Ｒ１４
領域Ｒ１４は、イントロン５０の３’末端とエクソン５１の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋２５塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５０に属し、＋１塩基～＋２５塩基の範囲で表される領域はエクソン５１に属する。
(Ａ１６) 領域Ｒ１６
領域Ｒ１６は、イントロン５１の３’末端とエクソン５２の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋２４塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５１に属し、＋１塩基～＋２４塩基の範囲で表される領域はエクソン５２に属する。
(Ａ１８) 領域Ｒ１８
領域Ｒ１８は、イントロン５２の３’末端とエクソン５３の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋３４塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５２に属し、＋１塩基～＋３４塩基の範囲で表される領域はエクソン５３に属する。
(Ａ２０) 領域Ｒ２０
領域Ｒ２０は、イントロン５３の３’末端とエクソン５４の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋４３塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５３に属し、＋１塩基～＋４３塩基の範囲で表される領域はエクソン５４に属する。
(Ａ２２) 領域Ｒ２２
領域Ｒ２２は、イントロン５４の３’末端とエクソン５５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）、３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、－４００塩基～＋２５塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５４に属し、＋１塩基～＋２５塩基の範囲で表される領域はエクソン５５に属する。
領域Ｒ１～Ｒ２４の塩基配列の具体例は以下のものが挙げられる。本明細書において、チミン「Ｔ」とウラシル「Ｕ」は相互に交換可能であり、「Ｔ」であっても「Ｕ」であっても本発明のアンチセンスオリゴマーのエクソンスキッピング活性に本質的に影響は生じないので、本明細書で示される塩基配列においては「Ｔ」が「Ｕ」である場合も含み、同一の配列番号で示すこととする。以下の表において、ｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける塩基配列であっても「Ｕ」を「Ｔ」で表記する場合があるが、当業者であれば適宜「Ｔ」を「Ｕ」に置き換えてＲＮＡ配列を理解することができる。
別の態様において、領域Ｒ２、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６、Ｒ１８、Ｒ２０、及びＲ２２の塩基配列の具体例は以下のものも挙げられる。
さらに別の態様において、本発明のアンチセンスオリゴマーは、
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第ＮＢ番目のイントロンの５’末端から３’末端方向にＮＹ塩基の塩基配列からなる領域Ｒｎ（ｎは１～２３の奇数）、及び
ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第ＮＡ番目のイントロンの３’末端から５’末端方向にＮＸ塩基の塩基配列からなる領域Ｒｎ（ｎは２～２４の偶数）
で示される領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域を標的とする。
上記の態様において、本発明の標的領域Ｒｎの例としては、以下のものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
ｎ＝１のとき、ＮＢ＝４４及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２のとき、ＮＡ＝４４及びＮＸ＝６００であるか、
ｎ＝３のとき、ＮＢ＝４５及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝４のとき、ＮＡ＝４５及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝５のとき、ＮＢ＝４６及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝６のとき、ＮＡ＝４６及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝７のとき、ＮＢ＝４７及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝８のとき、ＮＡ＝４７及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝９のとき、ＮＢ＝４８及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１０のとき、ＮＡ＝４８及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝１１のとき、ＮＢ＝４９及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１２のとき、ＮＡ＝４９及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝１３のとき、ＮＢ＝５０及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１４のとき、ＮＡ＝５０及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝１５のとき、ＮＢ＝５１及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１６のとき、ＮＡ＝５１及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝１７のとき、ＮＢ＝５２及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝１８のとき、ＮＡ＝５２及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝１９のとき、ＮＢ＝５３及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２０のとき、ＮＡ＝５３及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝２１のとき、ＮＢ＝５４及びＮＹ＝４００であるか、
ｎ＝２２のとき、ＮＡ＝５４及びＮＸ＝４００であるか、
ｎ＝２３のとき、ＮＢ＝５５及びＮＹ＝４００であるか、又は
ｎ＝２４のとき、ＮＡ＝５５及びＮＸ＝４００である。
上記態様に係る本発明の標的領域Ｒｎの例であるＲ１～Ｒ２４は、さらに別の態様では以下のように表記されるものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
例えば、ある態様では、領域Ｒ１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に６００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４６番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４７番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基からなる領域であり、
領域Ｒ９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４８番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４９番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５０番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１５が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１６が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５１番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１７が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１８が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５２番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ１９が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２０が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５３番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２１が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２２が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、
領域Ｒ２３が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のイントロンの５’末端から３’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域であり、又は
領域Ｒ２４が、前記ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第５５番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に４００塩基の塩基配列からなる領域である。
また、上記態様に係る本発明の標的領域Ｒｎの例であるＲ１～Ｒ２４は、別の態様では以下のように表記されるものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
(Ａ１) 領域Ｒ１
領域Ｒ１は、エクソン４４の３’末端とイントロン４４の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４４に属する。
(Ａ２) 領域Ｒ２
領域Ｒ２は、イントロン４４の３’末端とエクソン４５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－６００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－６００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４４に属する。
(Ａ３) 領域Ｒ３
領域Ｒ３は、エクソン４５の３’末端とイントロン４５の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４５に属する。
(Ａ４) 領域Ｒ４
領域Ｒ４は、イントロン４５の３’末端とエクソン４６の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４５に属する。
(Ａ５) 領域Ｒ５
領域Ｒ５は、エクソン４６の３’末端とイントロン４６の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４６に属する。
(Ａ６) 領域Ｒ６
領域Ｒ６は、イントロン４６の３’末端とエクソン４７の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４６に属する。
(Ａ７) 領域Ｒ７
領域Ｒ７は、エクソン４７の３’末端とイントロン４７の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４７に属する。
(Ａ８) 領域Ｒ８
領域Ｒ８は、イントロン４７の３’末端とエクソン４８の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４７に属する。
(Ａ９) 領域Ｒ９
領域Ｒ９は、エクソン４８の３’末端とイントロン４８の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４８に属する。
(Ａ１０) 領域Ｒ１０
領域Ｒ１０は、イントロン４８の３’末端とエクソン４９の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４８に属する。
(Ａ１１) 領域Ｒ１１
領域Ｒ１１は、エクソン４９の３’末端とイントロン４９の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン４９に属する。
(Ａ１２) 領域Ｒ１２
領域Ｒ１２は、イントロン４９の３’末端とエクソン５０の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン４９に属する。
(Ａ１３) 領域Ｒ１３
領域Ｒ１３は、エクソン５０の３’末端とイントロン５０の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５０に属する。
(Ａ１４) 領域Ｒ１４
領域Ｒ１４は、イントロン５０の３’末端とエクソン５１の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５０に属する。
(Ａ１５) 領域Ｒ１５
領域Ｒ１５は、エクソン５１の３’末端とイントロン５１の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５１に属する。
(Ａ１６) 領域Ｒ１６
領域Ｒ１６は、イントロン５１の３’末端とエクソン５２の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５１に属する。
(Ａ１７) 領域Ｒ１７
領域Ｒ１７は、エクソン５２の３’末端とイントロン５２の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５２に属する。
(Ａ１８) 領域Ｒ１８
領域Ｒ１８は、イントロン５２の３’末端とエクソン５３の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５２に属する。
(Ａ１９) 領域Ｒ１９
領域Ｒ１９は、エクソン５３の３’末端とイントロン５３の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５３に属する。
(Ａ２０) 領域Ｒ２０
領域Ｒ２０は、イントロン５３の３’末端とエクソン５４の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５３に属する。
(Ａ２１) 領域Ｒ２１
領域Ｒ２１は、エクソン５４の３’末端とイントロン５４の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５４に属する。
(Ａ２２) 領域Ｒ２２
領域Ｒ２２は、イントロン５４の３’末端とエクソン５５の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５４に属する。
(Ａ２３) 領域Ｒ２３
領域Ｒ２３は、エクソン５５の３’末端とイントロン５５の５’末端との境界を基点０とし、基点より３’側（下流）の塩基配列領域を「＋」で示した場合に、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域である。この際、＋１塩基～＋４００塩基の範囲で表される領域はイントロン５５に属する。
(Ａ２４) 領域Ｒ２４
領域Ｒ２４は、イントロン５５の３’末端とエクソン５６の５’末端との境界を基点０とし、基点より５’側（上流）の塩基配列領域を「－」（マイナス）で示した場合に、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域である。この際、－４００塩基～－１塩基の範囲で表される領域はイントロン５５に属する。
上記の態様において、領域Ｒ１～Ｒ２４の塩基配列の具体例は以下のものが挙げられる。
また、本発明のアンチセンスオリゴマーの標的領域Ｒ１～Ｒ２４には、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡに関して、野生型（例えば配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９に示される領域）だけではなく、変異型のものも含まれる。かかる変異型は、具体的には、以下の塩基配列（Ｂ０）及び（Ｂ１）～（Ｂ１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を有する。
（Ｂ０）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列；
（Ｂ１）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ２）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ３）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ４）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ５）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ６）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ７）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ８）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ９）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１０）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１１）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１２）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１３）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１４）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１５）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列
（Ｂ１６）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列
本明細書において、「ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列」とは、例えば配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列の全部又は一部をプローブとして、コロニーハイブリダイゼーション法、プラークハイブリダイゼーション法又はサザンハイブリダイゼーション法などを用いることにより得られる塩基配列をいう。ハイブリダイゼーションの方法としては、例えば“Sambrook & Russel, Molecular Cloning: A Laboratory Manual Vol. 3, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001”、“Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, 1987-1997”などに記載されている方法を利用することができる。
本明細書において、「相補的な塩基配列」とは、対象となる塩基配列とワトソン・クリック対を形成する塩基配列に限定されるものではなく、揺らぎ塩基対（Wobble base pair）を形成する塩基配列も含む。ここで、ワトソン・クリック対とは、アデニン－チミン、アデニン－ウラシル、及びグアニン－シトシン間に水素結合が形成される塩基対を意味し、揺らぎ塩基対とは、グアニン－ウラシル、イノシン－ウラシル、イノシン－アデニン、及びイノシン－シトシン間に水素結合が形成される塩基対を意味する。また、「相補的な塩基配列」とは、対象となる塩基配列と１００％の相補性を有していなくてもよく、例えば、対象となる塩基配列に対して、１塩基、２塩基、３塩基、４塩基、又は５塩基の非相補的塩基が含まれていてもよく、また、対象となる塩基配列に対して、１塩基、２塩基、３塩基、４塩基、又は５塩基短い塩基配列であってもよい。
本明細書において、「ストリンジェントな条件」とは、低ストリンジェントな条件、中ストリンジェントな条件、及び高ストリンジェントな条件のいずれでもよい。「低ストリンジェントな条件」は、例えば、５×ＳＳＣ、５×デンハルト溶液、０．５％ＳＤＳ、５０％ホルムアミド、３２℃の条件である。また、「中ストリンジェントな条件」は、例えば、５×ＳＳＣ、５×デンハルト溶液、０．５％ＳＤＳ、５０％ホルムアミド、４２℃又は５×ＳＳＣ、１％ＳＤＳ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５０％ホルムアミド、４２℃の条件である。「高ストリンジェントな条件」は、例えば、５×ＳＳＣ、５×デンハルト溶液、０．５％ＳＤＳ、５０％ホルムアミド、５０℃又は０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃の条件である。これらの条件において、温度を上げるほど高い配列同一性を有する塩基配列が効率的に得られることが期待できる。ただし、ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーに影響する要素としては温度、プローブ濃度、プローブの長さ、イオン強度、時間、塩濃度等の複数の要素が考えられ、当業者であればこれらの要素を適宜選択することで同様のストリンジェンシーを実現することが可能である。
なお、ハイブリダイゼーションに市販のキットを用いる場合は、例えばAlkPhos Direct Labelling and Detection System（ＧＥヘルスケア社）を用いることができる。この場合は、キットに添付のプロトコールにしたがい、標識したプローブとのインキュベーションを一晩行った後、メンブレンを５５℃の条件下で０．１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳを含む１次洗浄バッファーで洗浄後、ハイブリダイゼーションを検出することができる。あるいは、配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と相補的な塩基配列の全部又は一部に基づいてプローブを作製する際に、市販の試薬（例えば、ＰＣＲラベリングミックス（ロシュ・ダイアグノスティックス社）等）を用いて該プローブをジゴキシゲニン（ＤＩＧ）ラベルした場合には、ＤＩＧ核酸検出キット（ロシュ・ダイアグノスティックス社）等を用いてハイブリダイゼーションを検出することができる。
なお、塩基配列の同一性は、カーリン及びアルチュールによるアルゴリズムＢＬＡＳＴ（Basic Local Alignment Search Tool）（Proc. Natl. Acad. Sci. USA 872264-2268, 1990; Proc Natl Acad Sci USA 90: 5873, 1993）を用いて決定できる。ＢＬＡＳＴのアルゴリズムに基づいたＢＬＡＳＴＮやＢＬＡＳＴＸと呼ばれるプログラムが開発されている（Altschul SF, et al: J Mol Biol 215: 403, 1990）。ＢＬＡＳＴＮを用いて塩基配列を解析する場合は、パラメーターは、例えばｓｃｏｒｅ＝１００、ｗｏｒｄｌｅｎｇｔｈ＝１２とする。ＢＬＡＳＴとＧａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴプログラムを用いる場合は、各プログラムのデフォルトパラメーターを用いる。
本発明のアンチセンスオリゴマーは、本発明の標的領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含む。「その一部」とは、標的領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域の全長を除く領域、つまり標的領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域の部分領域を意味する。部分領域の長さは、１０～６０塩基長、１０～５５塩基長、１０～５０塩基長、１０～４５塩基長、１０～４０塩基長、１０～３５塩基長、１０～３０塩基長、１０～２５塩基長、１５～６０塩基長、１５～５５塩基長、１５～５０塩基長、１５～４５塩基長、１５～４０塩基長、１５～３５塩基長、１５～３０塩基長、１５～２５塩基長、１６～６０塩基長、１６～５５塩基長、１６～５０塩基長、１６～４５塩基長、１６～４０塩基長、１６～３５塩基長、１６～３０塩基長、１６～２５塩基長、１７～６０塩基長、１７～５５塩基長、１７～５０塩基長、１７～４５塩基長、１７～４０塩基長、１７～３５塩基長、１７～３０塩基長、１７～２５塩基長、１８～６０塩基長、１８～５５塩基長、１８～５０塩基長、１８～４５塩基長、１８～４０塩基長、１８～３５塩基長、１８～３０塩基長、１８～２５塩基長、１９～６０塩基長、１９～５５塩基長、１９～５０塩基長、１９～４５塩基長、１９～４０塩基長、１９～３５塩基長、１９～３０塩基長、１９～２５塩基長、２０～６０塩基長、２０～５５塩基長、２０～５０塩基長、２０～４５塩基長、２０～４０塩基長、２０～３５塩基長、２０～３０塩基長、２０～２５塩基長、１５～３０塩基長、１５～２９塩基長、１５～２８塩基長、１５～２７塩基長、１５～２６塩基長、１５～２５塩基長、１５～２４塩基長、１５～２３塩基長、１５～２２塩基長、１５～２１塩基長、１５～２０塩基長、１５～１９塩基長、１５～１８塩基長、１６～３０塩基長、１６～２９塩基長、１６～２８塩基長、１６～２７塩基長、１６～２６塩基長、１６～２５塩基長、１６～２４塩基長、１６～２３塩基長、１６～２２塩基長、１６～２１塩基長、１６～２０塩基長、１６～１９塩基長、１６～１８塩基長、１７～３０塩基長、１７～２９塩基長、１７～２８塩基長、１７～２７塩基長、１７～２６塩基長、１７～２５塩基長、１７～２４塩基長、１７～２３塩基長、１７～２２塩基長、１７～２１塩基長、１７～２０塩基長、１７～１９塩基長、１７～１８塩基長、１８～３０塩基長、１８～２９塩基長、１８～２８塩基長、１８～２７塩基長、１８～２６塩基長、１８～２５塩基長、１８～２４塩基長、１８～２３塩基長、１８～２２塩基長、１８～２１塩基長、１８～２０塩基長、１８～１９塩基長、１９～３０塩基長、１９～２９塩基長、１９～２８塩基長、１９～２７塩基長、１９～２６塩基長、１９～２５塩基長、１９～２４塩基長、１９～２３塩基長、１９～２２塩基長、１９～２１塩基長、１９～２０塩基長、２０～３０塩基長、２０～２９塩基長、２０～２８塩基長、２０～２７塩基長、２０～２６塩基長、２０～２５塩基長、２０～２４塩基長、２０～２３塩基長、２０～２２塩基長、２０～２１塩基長、５～２５塩基長、５～２４塩基長、５～２３塩基長、５～２２塩基長、５～２１塩基長、５～２０塩基長、５～１９塩基長、５～１８塩基長、５～１７塩基長、５～１６塩基長、５～１５塩基長、５～１４塩基長、５～１３塩基長、５～１２塩基長、７～２５塩基長、７～２４塩基長、７～２３塩基長、７～２２塩基長、７～２１塩基長、７～２０塩基長、７～１９塩基長、７～１８塩基長、７～１７塩基長、７～１６塩基長、７～１５塩基長、７～１４塩基長、７～１３塩基長、７～１２塩基長、９～２５塩基長、９～２４塩基長、９～２３塩基長、９～２２塩基長、９～２１塩基長、９～２０塩基長、９～１９塩基長、９～１８塩基長、９～１７塩基長、９～１６塩基長、９～１５塩基長、９～１４塩基長、９～１３塩基長、９～１２塩基長、１０～２５塩基長、１０～２４塩基長、１０～２３塩基長、１０～２２塩基長、１０～２１塩基長、１０～２０塩基長、１０～１９塩基長、１０～１８塩基長、１０～１７塩基長、１０～１６塩基長、１０～１５塩基長、１０～１４塩基長、１０～１３塩基長、１０～１２塩基長、６０塩基長、５９塩基長、５８塩基長、５７塩基長、５６塩基長、５５塩基長、５４塩基長、５３塩基長、５２塩基長、５１塩基長、５０塩基長、４９塩基長、４８塩基長、４７塩基長、４６塩基長、４５塩基長、４４塩基長、４３塩基長、４２塩基長、４１塩基長、４０塩基長、３９塩基長、３８塩基長、３７塩基長、３６塩基長、３５塩基長、３４塩基長、３３塩基長、３２塩基長、３１塩基長、３０塩基長、２９塩基長、２８塩基長、２７塩基長、２６塩基長、２５塩基長、２４塩基長、２３塩基長、２２塩基長、２１塩基長、２０塩基長、１９塩基長、１８塩基長、１７塩基長、１６塩基長、１５塩基長、１４塩基長、１３塩基長、１２塩基長、１１塩基長、１０塩基長、９塩基長、８塩基長、７塩基長、６塩基長、又は５塩基長であってもよいが、これらに限定されるものではなく、上記の長さに１、２、又は３塩基長が加えられても減らされてもよい。
本発明のアンチセンスオリゴマーは、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンを同時にスキッピングさせる活性を有する。本明細書では、このような目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡからの２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングを「マルチエクソンスキッピング」又は「マルチスキッピング」と呼び、この活性を「マルチエクソンスキッピング活性」又は「マルチスキッピング活性」と呼ぶ。
ここで、第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンとは、ｐｒｅ－ｍＲＮＡに含まれる第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンの１１個のエクソンのうち、エクソン番号が１ずつ増加する複数のエクソンを意味する。エクソン番号とは、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡに含まれる７９個のエクソンのうち、ｐｒｅ－ｍＲＮＡの最も５’側に存在するエクソンを第１番目のエクソンと定め、５’側から３’側に順次存在するエクソンを順に第２番目、第３番目・・・第７９番目と振り分けられる番号を意味する。なお、イントロンについては、その５’側に存在するエクソンと同じ番号となる。つまり、第４５番目のイントロンは、その５’側に第４５番目のエクソンが存在し、その３’側に第４６番目のエクソンが存在する。また、本明細書において、「第ｎ番目」のエクソン又はイントロンとは、ｐｒｅ－ｍＲＮＡにおいて５’末端から３’末端に向けて数えてｎ番目のエクソン又はイントロンを意味する。
第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンに含まれるエクソンの組み合わせを表４に示す。
表４に記載したエクソンの組み合わせの中、ＤＭＤへのより高い治療効果を発揮することが期待されるスキッピングパターンは、例えば、組み合わせ１、２、３、４、６、８、１０、１８、２０、２１、２３、２５、２７、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４１、４３、４５、４６、５０、５２、又は５５である。これらの組み合わせでマルチエクソンスキッピングさせることにより、より多くのＤＭＤ患者に治療効果を発揮することが期待される。
また、第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンは、連続するエクソン群を複数含んでもよく、限定されるものではないが、例えば（例１）エクソン４５～４６（第１のエクソン群）とエクソン４８～５３（第２のエクソン群）、（例２）エクソン４６～４７（第１のエクソン群）とエクソン４９～５０（第２のエクソン群）とエクソン５２～５４（第３のエクソン群）であってもよい。
本発明において「スキッピングさせる活性」（つまりマルチスキッピング活性）とは、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡを例に挙げると、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンが欠失したヒトジストロフィンｍＲＮＡを生じさせる活性を意味する。
この活性は、言い換えれば、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡ上の標的部位に本発明のアンチセンスオリゴマーが結合することにより、該ｐｒｅ－ｍＲＮＡがスプライシングを受けた際に、欠失するエクソンのすぐ上流のエクソンの３’末端のヌクレオチドに、欠失するエクソンのすぐ下流のエクソンの５’末端のヌクレオチドが連結し、コドンのフレームシフトが起こっていない成熟ｍＲＮＡ（すなわち、フレームシフトを起こさずにエクソンが欠失した成熟ｍＲＮＡ）が形成されることを意味する。
本発明のアンチセンスオリゴマーは生理的条件下でマルチスキッピング活性を示す。上記「生理的条件下」とは、生体内と類似のｐＨ、塩組成、温度に調節された条件を意味する。例えば、２５～４０℃、好ましくは３７℃、ｐＨ５～８、好ましくは、ｐＨ７．４であって、塩化ナトリウム濃度が１５０ｍＭの条件が挙げられる。マルチスキッピングを誘導する際、本発明のアンチセンスオリゴマーは、１種又は複数種、例えば２、３、４、５、６、７、８、９又は１０種のアンチセンスオリゴマーを組み合わせて用いることができる。
マルチスキッピングが生じたか否かは、ジストロフィン発現細胞（例えば、ヒト横紋筋肉腫細胞）に本発明のアンチセンスオリゴマーを導入し、前記ジストロフィン発現細胞の全ＲＮＡから、ヒトジストロフィン遺伝子のｍＲＮＡのエクソン４５～５５の周辺領域をＲＴ－ＰＣＲ増幅し、該ＰＣＲ増幅産物に対してｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ又はシークエンス解析を行うことにより確認することができる。マルチスキッピング効率は、ヒトジストロフィン遺伝子のｍＲＮＡを被検細胞から回収し、該ｍＲＮＡのうち、エクソン４５～５５のうちいずれか２つ以上の番号順に連続したエクソンがスキップしたバンドのポリヌクレオチド量「Ａ」と、エクソン４５～５５のうちいずれか１つのエクソンがスキッピングしたバンドのポリヌクレオチド量「Ｂ」と、スキッピングが生じていないバンドのポリオリゴヌクレオチド量「Ｃ」とを測定し、これら「Ａ」、「Ｂ」、及び「Ｃ」の測定値に基づき、以下の式に従って計算することができる。
スキッピング効率（％）＝Ａ／（Ａ＋Ｂ＋Ｃ）×１００
例えば、エクソン４５～５５のマルチスキッピング効率は、エクソン４４に対するフォワードプライマーとエクソン５６に対するリバースプライマーを用いて、エクソン４５～５５マルチスキップしたバンドのポリヌクレオチド量「Ａ」を測定し、エクソン４４に対するフォワードプライマーとエクソン４６に対するリバースプライマーを用いて、エクソン４５シングルスキップしたバンドのポリヌクレオチド量「Ｂ」を測定し、エクソン４４に対するフォワードプライマーとエクソン４６に対するリバースプライマーを用いてスキッピングが生じていないバンドのポリヌクレオチド量「Ｃ」を測定し、これら「Ａ」、「Ｂ」、及び「Ｃ」の測定値に基づき、上記の式に従って計算することができる。
本発明のアンチセンスオリゴマーによりヒトジストロフィンｍＲＮＡにおいて欠失するエクソンの数は、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、又は１１個である。これを欠失パターンと称するが、１回のスキッピング実験又はスキッピング治療で得られる結果で種々の欠失パターンが混在することもある。たとえば、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡを発現する細胞に本発明のアンチセンスオリゴマーを導入し、そのｍＲＮＡを回収すると、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、又は１１個のエクソンが欠失したｍＲＮＡが混在して得られることになる。
ある実施態様では「スキッピングさせる活性」は、以下の（Ｃ１）～（Ｃ１０）として定義することができる。
（Ｃ１）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記２個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目及び第４６番目のエクソン、第４６番目及び第４７番目のエクソン、第４７番目及び第４８番目のエクソン、第４８番目及び第４９番目のエクソン、第４９番目及び第５０番目のエクソン、第５０番目及び第５１番目のエクソン、第５１番目及び第５２番目のエクソン、第５２番目及び第５３番目のエクソン、第５３番目及び第５４番目のエクソン、又は第５４番目及び第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ２）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか３個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記３個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第４７番目のエクソン、第４６番目～第４８番目のエクソン、第４７番目～第４９番目のエクソン、第４８番目～第５０番目のエクソン、第４９番目～第５１番目のエクソン、第５０番目～第５２番目のエクソン、第５１番目～第５３番目のエクソン、第５２番目～第５４番目のエクソン、又は第５３番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ３）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか４個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記４個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第４８番目のエクソン、第４６番目～第４９番目のエクソン、第４７番目～第５０番目のエクソン、第４８番目～第５１番目のエクソン、第４９番目～第５２番目のエクソン、第５０番目～第５３番目のエクソン、第５１番目～第５４番目のエクソン、又は第５２番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ４）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか５個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記５個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第４９番目のエクソン、第４６番目～第５０番目のエクソン、第４７番目～第５１番目のエクソン、第４８番目～第５２番目のエクソン、第４９番目～第５３番目のエクソン、第５０番目～第５４番目のエクソン、又は第５１番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ５）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか６個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記６個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第５０番目のエクソン、第４６番目～第５１番目のエクソン、第４７番目～第５２番目のエクソン、第４８番目～第５３番目のエクソン、第４９番目～第５４番目のエクソン、又は第５０番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ６）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか７個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記７個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第５１番目のエクソン、第４６番目～第５２番目のエクソン、第４７番目～第５３番目のエクソン、第４８番目～第５４番目のエクソン、又は第４９番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ７）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか８個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記８個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第５２番目のエクソン、第４６番目～第５３番目のエクソン、第４７番目～第５４番目のエクソン、又は第４８番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ８）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか９個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記９個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第５３番目のエクソン、第４６番目～第５４番目のエクソン、又は第４７番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ９）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか１０個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記１０個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第５４番目のエクソン、又は第４６番目～第５５番目のエクソンであってよい。
（Ｃ１０）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択される１１個の番号順に連続するエクソンが、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の効率でスキッピングされる。
ここで前記１１個の番号順に連続するエクソンは、第４５番目～第５５番目のエクソンである。
本発明のアンチセンスオリゴマーは１０～６０塩基長、１０～５５塩基長、１０～５０塩基長、１０～４５塩基長、１０～４０塩基長、１０～３５塩基長、１０～３０塩基長、１０～２５塩基長、１５～６０塩基長、１５～５５塩基長、１５～５０塩基長、１５～４５塩基長、１５～４０塩基長、１５～３５塩基長、１５～３０塩基長、１５～２５塩基長、１６～６０塩基長、１６～５５塩基長、１６～５０塩基長、１６～４５塩基長、１６～４０塩基長、１６～３５塩基長、１６～３０塩基長、１６～２５塩基長、１７～６０塩基長、１７～５５塩基長、１７～５０塩基長、１７～４５塩基長、１７～４０塩基長、１７～３５塩基長、１７～３０塩基長、１７～２５塩基長、１８～６０塩基長、１８～５５塩基長、１８～５０塩基長、１８～４５塩基長、１８～４０塩基長、１８～３５塩基長、１８～３０塩基長、１８～２５塩基長、１９～６０塩基長、１９～５５塩基長、１９～５０塩基長、１９～４５塩基長、１９～４０塩基長、１９～３５塩基長、１９～３０塩基長、１９～２５塩基長、２０～６０塩基長、２０～５５塩基長、２０～５０塩基長、２０～４５塩基長、２０～４０塩基長、２０～３５塩基長、２０～３０塩基長、２０～２５塩基長、１５～３０塩基長、１５～２９塩基長、１５～２８塩基長、１５～２７塩基長、１５～２６塩基長、１５～２５塩基長、１５～２４塩基長、１５～２３塩基長、１５～２２塩基長、１５～２１塩基長、１５～２０塩基長、１５～１９塩基長、１５～１８塩基長、１６～３０塩基長、１６～２９塩基長、１６～２８塩基長、１６～２７塩基長、１６～２６塩基長、１６～２５塩基長、１６～２４塩基長、１６～２３塩基長、１６～２２塩基長、１６～２１塩基長、１６～２０塩基長、１６～１９塩基長、１６～１８塩基長、１７～３０塩基長、１７～２９塩基長、１７～２８塩基長、１７～２７塩基長、１７～２６塩基長、１７～２５塩基長、１７～２４塩基長、１７～２３塩基長、１７～２２塩基長、１７～２１塩基長、１７～２０塩基長、１７～１９塩基長、１７～１８塩基長、１８～３０塩基長、１８～２９塩基長、１８～２８塩基長、１８～２７塩基長、１８～２６塩基長、１８～２５塩基長、１８～２４塩基長、１８～２３塩基長、１８～２２塩基長、１８～２１塩基長、１８～２０塩基長、１８～１９塩基長、１９～３０塩基長、１９～２９塩基長、１９～２８塩基長、１９～２７塩基長、１９～２６塩基長、１９～２５塩基長、１９～２４塩基長、１９～２３塩基長、１９～２２塩基長、１９～２１塩基長、１９～２０塩基長、２０～３０塩基長、２０～２９塩基長、２０～２８塩基長、２０～２７塩基長、２０～２６塩基長、２０～２５塩基長、２０～２４塩基長、２０～２３塩基長、２０～２２塩基長、２０～２１塩基長、６０塩基長、５９塩基長、５８塩基長、５７塩基長、５６塩基長、５５塩基長、５４塩基長、５３塩基長、５２塩基長、５１塩基長、５０塩基長、４９塩基長、４８塩基長、４７塩基長、４６塩基長、４５塩基長、４４塩基長、４３塩基長、４２塩基長、４１塩基長、４０塩基長、３９塩基長、３８塩基長、３７塩基長、３６塩基長、３５塩基長、３４塩基長、３３塩基長、３２塩基長、３１塩基長、３０塩基長、２９塩基長、２８塩基長、２７塩基長、２６塩基長、２５塩基長、２４塩基長、２３塩基長、２２塩基長、２１塩基長、２０塩基長、１９塩基長、１８塩基長、１７塩基長、１６塩基長、１５塩基長、１４塩基長、１３塩基長、１２塩基長、１１塩基長、又は１０塩基長であってもよいが、これらに限定されるものではなく、上記の長さに１、２、又は３塩基長が加えられても減らされてもよい。
本発明のアンチセンスオリゴマーの一態様は、複数のユニットオリゴマーが相互に連結した構成を有する連結型アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である（以下、「本発明の連結型アンチセンスオリゴマー」という）。ユニットオリゴマーとは、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーを構成する各オリゴマーを意味する。つまり、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーがヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡ上の標的塩基配列に結合する際に、連続する塩基配列を有する標的塩基配列とハイブリダイゼーションを生じる塩基配列を含む部分（ユニット）を意味する。
具体的には、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは、
２つ以上のユニットオリゴマーが連結したアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であって、
前記各々のユニットオリゴマーは、前記領域Ｒ１～Ｒ２４（野生型である配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９に示される領域並びにその変異型も含まれ得る）からなる群より選択されるいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含み、かつ各々のユニットオリゴマーの塩基配列は連続又は互いに重複するものではないアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。
ユニットオリゴマーは、ハイブリダイゼーションに寄与しないリンカーを介して連結していてもよく、あるいはリンカーを介さずに直接連結していてもよい。ユニットオリゴマー同士が直接連結する場合、５’末端側に位置するユニットの３’末端と、３’末端側に位置するユニットの５’末端とがリン酸結合又は以下のいずれかの基を形成する。
（式中、Ｘは、－ＯＨ、－ＣＨ２Ｒ１、－Ｏ－ＣＨ２Ｒ１、－Ｓ－ＣＨ２Ｒ１、－ＮＲ２Ｒ３、又はＦを表し；
Ｒ１は、Ｈ、アルキルを表し；
Ｒ２及びＲ３は、同一又は異なって、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、又はアリールを表し；
Ｙ１は、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、又はＮＲ１を表し；
Ｙ２は、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ１を表し；
Ｚは、Ｏ又はＳを表す。）
本発明の連結型アンチセンスオリゴマーでは、各ユニットオリゴマーは、領域Ｒ１～Ｒ２４の中、別々の領域に含まれる塩基配列を標的としてもよいし、同一の領域に含まれる塩基配列を標的としてもよい。また、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは、各々のユニットオリゴマーの塩基配列は連続又は互いに重複するものではない。各々のユニットオリゴマーの塩基配列が連続するものではないというのは、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーを構成する各ユニットオリゴマーの標的塩基配列がヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡ上の塩基配列として連続していないことを意味する。したがって、各ユニットオリゴマーの標的塩基配列をヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの塩基配列と対比すると、前記標的塩基配列の間にはヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの塩基配列として少なくとも１塩基が介在する。一方、各々のユニットオリゴマーの塩基配列が互いに重複するものではないとは、ユニットオリゴマーの標的塩基配列がヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡ上の塩基配列として重複していないことを意味する。各々のユニットオリゴマーの塩基配列中に偶然に１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０塩基程度の一致が存在することは許容される。
本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは、前記各々のユニットオリゴマーが、
（Ｄ１）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、
（Ｄ２）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ３）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列、又は
（Ｄ４）前記（Ｄ１）、（Ｄ２）、及び（Ｄ３）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列の一部の塩基配列
に相補的な塩基配列を含み、かつ各々のユニットオリゴマーの塩基配列は連続又は互いに重複するものではない構成を有していてもよい。
本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは上記のとおり、（Ｄ１）、（Ｄ２）、（Ｄ３）、及び（Ｄ４）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列を含みうる。（Ｄ２）の塩基配列は、前記（Ｄ１）の塩基配列の変異体であり、その例として、
（Ｄ２－１）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－２）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－３）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－４）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－５）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－６）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－７）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－８）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－９）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－１０）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－１１）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－１２）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－１３）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－１４）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｄ２－１５）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び（Ｄ２－１６）配列番号２３３～２５６、３４１～３６９、及び３８５～３８９からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーを構成する前記各々のユニットオリゴマーは、前記（Ｄ１）、（Ｄ２－１）～（Ｄ２－１６）、（Ｄ３）、及び（Ｄ４）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列を含みうる。
また、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは上記のとおり、（Ｄ１）、（Ｄ２）、（Ｄ３）、及び（Ｄ４）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列に相補的な塩基配列を含みうる。塩基配列（Ｄ４）は、前記（Ｄ１）、（Ｄ２）、及び（Ｄ３）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列の一部の塩基配列に関する。（Ｄ４）に関し、「その一部」とは、（Ｄ１）、（Ｄ２）、又は（Ｄ３）の全長を除く、連続する部分領域を意味する。部分領域の長さは、５～２５塩基長であり、５～２４塩基長、５～２３塩基長、５～２２塩基長、５～２１塩基長、５～２０塩基長、５～１９塩基長、５～１８塩基長、５～１７塩基長、５～１６塩基長、５～１５塩基長、５～１４塩基長、５～１３塩基長、５～１２塩基長、７～２５塩基長、７～２４塩基長、７～２３塩基長、７～２２塩基長、７～２１塩基長、７～２０塩基長、７～１９塩基長、７～１８塩基長、７～１７塩基長、７～１６塩基長、７～１５塩基長、７～１４塩基長、７～１３塩基長、７～１２塩基長、９～２５塩基長、９～２４塩基長、９～２３塩基長、９～２２塩基長、９～２１塩基長、９～２０塩基長、９～１９塩基長、９～１８塩基長、９～１７塩基長、９～１６塩基長、９～１５塩基長、９～１４塩基長、９～１３塩基長、９～１２塩基長、１０～２５塩基長、１０～２４塩基長、１０～２３塩基長、１０～２２塩基長、１０～２１塩基長、１０～２０塩基長、１０～１９塩基長、１０～１８塩基長、１０～１７塩基長、１０～１６塩基長、１０～１５塩基長、１０～１４塩基長、１０～１３塩基長、１０～１２塩基長、２５塩基長、２４塩基長、２３塩基長、２２塩基長、２１塩基長、２０塩基長、１９塩基長、１８塩基長、１７塩基長、１６塩基長、１５塩基長、１４塩基長、１３塩基長、１２塩基長、１１塩基長、１０塩基長、９塩基長、８塩基長、７塩基長、６塩基長、５塩基長であってもよいが、これらに限定されるものではなく、上記の長さに１、２、又は３塩基長が加えられても減らされてもよい。
各ユニットオリゴマーのサイズは、５～３０塩基長であり、５～２９塩基長、５～２８塩基長、５～２７塩基長、５～２６塩基長、５～２５塩基長、５～２４塩基長、５～２３塩基長、５～２２塩基長、５～２１塩基長、５～２０塩基長、５～１９塩基長、５～１８塩基長、５～１７塩基長、５～１６塩基長、５～１５塩基長、５～１４塩基長、５～１３塩基長、５～１２塩基長、７～３０塩基長、７～２９塩基長、７～２８塩基長、７～２７塩基長、７～２６塩基長、７～２５塩基長、７～２４塩基長、７～２３塩基長、７～２２塩基長、７～２１塩基長、７～２０塩基長、７～１９塩基長、７～１８塩基長、７～１７塩基長、７～１６塩基長、７～１５塩基長、７～１４塩基長、７～１３塩基長、７～１２塩基長、９～３０塩基長、９～２９塩基長、９～２８塩基長、９～２７塩基長、９～２６塩基長、９～２５塩基長、９～２４塩基長、９～２３塩基長、９～２２塩基長、９～２１塩基長、９～２０塩基長、９～１９塩基長、９～１８塩基長、９～１７塩基長、９～１６塩基長、９～１５塩基長、９～１４塩基長、９～１３塩基長、９～１２塩基長、１０～３０塩基長、１０～２９塩基長、１０～２８塩基長、１０～２７塩基長、１０～２６塩基長、１０～２５塩基長、１０～２４塩基長、１０～２３塩基長、１０～２２塩基長、１０～２１塩基長、１０～２０塩基長、１０～１９塩基長、１０～１８塩基長、１０～１７塩基長、１０～１６塩基長、１０～１５塩基長、１０～１４塩基長、１０～１３塩基長、１０～１２塩基長、３０塩基長、２９塩基長、２８塩基長、２７塩基長、２６塩基長、２５塩基長、２４塩基長、２３塩基長、２２塩基長、２１塩基長、２０塩基長、１９塩基長、１８塩基長、１７塩基長、１６塩基長、１５塩基長、１４塩基長、１３塩基長、１２塩基長、１１塩基長、１０塩基長、９塩基長、８塩基長、７塩基長、６塩基長、５塩基長であってもよいが、これらに限定されるものではなく、上記の長さに１、２、又は３塩基長が加えられても減らされてもよい。各ユニットオリゴマーのサイズは同じであってもよく、異なっていてもよい。
ある態様では、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは、
（Ｅ１）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｅ２）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であってもよい。
ここで、（Ｅ２）の塩基配列は、（Ｅ１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｅ２－１）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－２）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－３）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－４）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－５）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－６）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－７）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－８）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－９）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－１０）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－１１）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－１２）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－１３）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－１４）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ２－１５）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｅ２－１６）配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、も挙げられる。
したがって、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは、前記（Ｅ１）及び（Ｅ２－１）～（Ｅ２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるものであってもよい。
好ましくは、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは、配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を含む。また、ある態様では本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは配列番号１８～２１、８０～１１１、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなる。
さらに、本発明のアンチセンスオリゴマーは、
（Ｅ’１）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｅ’２）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であってもよい。
ここで、（Ｅ’２）の塩基配列は、（Ｅ’１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｅ’２－１）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－２）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－３）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－４）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－５）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－６）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－７）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－８）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－９）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－１０）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－１１）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－１２）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－１３）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－１４）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’２－１５）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び（Ｅ’２－１６）配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、本発明のアンチセンスオリゴマーは、前記（Ｅ’１）及び（Ｅ’２－１）～（Ｅ’２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるものであってもよい。
好ましくは、本発明のアンチセンスオリゴマーは、配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を含む。また、ある態様では本発明のアンチセンスオリゴマーは配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなる。
ある態様では、本発明のアンチセンスオリゴマーは、
（Ｅ’’１）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｅ’’２）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であってもよい。
ここで、（Ｅ’’２）の塩基配列は、（Ｅ’’１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｅ’’２－１）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－２）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－３）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－４）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－５）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－６）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－７）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－８）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－９）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－１０）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－１１）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－１２）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－１３）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－１４）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’２－１５）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｅ’’２－１６）配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、本発明のアンチセンスオリゴマーは、前記（Ｅ’’１）及び（Ｅ’’２－１）～（Ｅ’’２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるものであってもよい。
ある態様では、本発明のアンチセンスオリゴマーは、
（Ｅ’’’１）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｅ’’’２）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であってもよい。
ここで、（Ｅ’’’２）の塩基配列は、（Ｅ’’’１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｅ’’’２－１）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－２）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－３）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－４）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－５）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－６）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－７）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－８）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－９）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－１０）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－１１）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－１２）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－１３）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－１４）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｅ’’’２－１５）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｅ’’’２－１６）配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、本発明のアンチセンスオリゴマーは、前記（Ｅ’’’１）及び（Ｅ’’’２－１）～（Ｅ’’’２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるものであってもよい。
好ましくは、本発明のアンチセンスオリゴマーは、配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を含むアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。また、ある態様では本発明のアンチセンスオリゴマーは配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。
さらに好ましくは、本発明のアンチセンスオリゴマーは、配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を含むアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。また、ある態様では本発明のアンチセンスオリゴマーは配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。
また、ある態様では本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは配列番号８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を含むアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。また、ある態様では、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは配列番号８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなる。さらに好ましくは、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは配列番号１０２、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列を含む。また、ある態様では、本発明の連結型アンチセンスオリゴマーは配列番号１０２、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物である。
本発明のアンチセンスオリゴマーは、領域Ｒ１～Ｒ２４からなる群より選択される少なくともいずれか１つの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含む。領域Ｒ１～Ｒ２４に含まれるそれぞれの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列として、上記（Ｅ１）及び（Ｅ２－１）～（Ｅ２－１６）からなる群、（Ｅ’１）及び（Ｅ’２－１）～（Ｅ’２－１６）からなる群、（Ｅ’’１）及び（Ｅ’’２－１）～（Ｅ’’２－１６）からなる群、又は（Ｅ’’’１）及び（Ｅ’’’２－１）～（Ｅ’’’２－１６）からなる群から選択されるいずれかの塩基配列を選択することもできる。例えば、領域Ｒ１～Ｒ２４の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列として、領域Ｒ４～Ｒ２４についてはそれぞれの領域の塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列とし、領域Ｒ１～Ｒ３については（Ｅ１）及び（Ｅ２－１）～（Ｅ２－１６）からなる群より選択される塩基配列であって、Ｒ１～Ｒ３の領域に含まれる塩基配列とすることもできる。
本発明のアンチセンスオリゴマー（本発明の連結型アンチセンスオリゴマーを含む）は、オリゴヌクレオチド、モルホリノオリゴマー、又はペプチド核酸（Peptide Nucleic Acid：ＰＮＡ）オリゴマーであってもよい（以下、それぞれを、「本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド」、「本発明のアンチセンスモルホリノオリゴマー」、又は「本発明のアンチセンスペプチド核酸オリゴマー」ともいう。）。
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヌクレオチドを構成単位とするアンチセンスオリゴマーであり、かかるヌクレオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、又は修飾ヌクレオチドのいずれであってもよい。
修飾ヌクレオチドとは、リボヌクレオチド又はデオキシリボヌクレオチドを構成する核酸塩基、糖部分、及びリン酸結合部分の全部又は一部が修飾されているものをいう。
核酸塩基としては、例えば、アデニン、グアニン、ヒポキサンチン、シトシン、チミン、ウラシル、又はそれらの修飾塩基を挙げることができる。かかる修飾塩基としては、例えば、シュードウラシル、３－メチルウラシル，ジヒドロウラシル、５－アルキルシトシン（例えば、５－メチルシトシン）、５－アルキルウラシル（例えば、５－エチルウラシル）、５－ハロウラシル（例えば、５－ブロモウラシル）、６－アザピリミジン、６－アルキルピリミジン（例えば、６－メチルウラシル）、２－チオウラシル、４－チオウラシル、４－アセチルシトシン、５－（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル、５－カルボキシメチルアミノメチル－２－チオウラシル、５－カルボキシメチルアミノメチルウラシル、１－メチルアデニン、１－メチルヒポキサンチン、２，２－ジメチルグアニン、３－メチルシトシン、２－メチルアデニン、２－メチルグアニン、Ｎ６－メチルアデニン、７－メチルグアニン、５－メトキシアミノメチル－２－チオウラシル、５－メチルアミノメチルウラシル、５－メチルカルボニルメチルウラシル、５－メチルオキシウラシル、５－メチル－２－チオウラシル、２－メチルチオ－Ｎ６－イソペンテニルアデニン、ウラシル－５－オキシ酢酸、２－チオシトシン、プリン、２，６－ジアミノプリン、２－アミノプリン、イソグアニン、インドール、イミダゾール、キサンチン等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
糖部分の修飾としては、例えば、リボースの２’位の修飾及び糖のその他の部分の修飾を挙げることができる。リボースの２’位の修飾としては、例えば、リボースの２’位の－ＯＨ基を－ＯＲ、－Ｒ、－Ｒ’ＯＲ、－ＳＨ、－ＳＲ、－ＮＨ２、－ＮＨＲ、－ＮＲ２、－Ｎ３、－ＣＮ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉに置換する修飾を挙げることができる。ここで、Ｒはアルキル又はアリールを表す。Ｒ’はアルキレンを表す。
糖のその他の部分の修飾としては、例えば、リボース又はデオキシリボースの４’位のＯをＳに置換したもの、糖の２’位と４’位を架橋したもの、例えば、ＬＮＡ（Locked Nucleic Acid）又はＥＮＡ（2'-O,4'-C-Ethylene-bridged Nucleic Acids）などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
リン酸結合部分の修飾としては、例えば、ホスホジエステル結合をホスホロチオエート結合、ホスホロジチオエート結合、アルキルホスホネート結合、ホスホロアミデート結合、ボラノフォスフェート結合（例えば、Enya et al: Bioorganic & Medicinal Chemistry,2008, 18, 9154-9160を参照）に置換する修飾を挙げることができる（例えば、再公表特許公報第２００６／１２９５９４号及び再公表特許公報第２００６／０３８６０８号を参照）。
本明細書において、アルキルとしては、直鎖状又は分枝鎖状の炭素数１～６のアルキルが好ましい。具体的には、例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、イソヘキシルが挙げられる。当該アルキルは置換されていてもよく、かかる置換基としては、例えば、ハロゲン、アルコキシ、シアノ、ニトロを挙げることができ、これらで１～３個置換されていてもよい。
本明細書において、シクロアルキルとしては、炭素数３～１２のシクロアルキルが好ましい。具体的には、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシル、シクロドデシルが挙げられる。
本明細書において、ハロゲンとしては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素を挙げることができる。
本明細書において、アルコキシとしては、直鎖状又は分枝鎖状の炭素数１～６のアルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、ｎ－ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ｎ－ヘキシルオキシ、イソヘキシルオキシ等を挙げることができる。とりわけ、炭素数１～３のアルコキシが好ましい。
本明細書において、アリールとしては、炭素数６～１０のアリールが好ましい。具体的には、例えば、フェニル、α－ナフチル、β－ナフチルを挙げることができる。とりわけフェニルが好ましい。当該アリールは置換されていてもよく、かかる置換基としては、例えば、アルキル、ハロゲン、アルコキシ、シアノ、ニトロを挙げることができ、これらが１～３個置換されていてもよい。
本明細書において、アルキレンとしては、直鎖状又は分枝鎖状の炭素数１～６のアルキレンが好ましい。具体的には、例えば、メチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、２－（エチル）トリメチレン、１－（メチル）テトラメチレンを挙げることができる。
本明細書において、アシルとしては、直鎖状若しくは分枝鎖状のアルカノイル又はアロイルを挙げることができる。アルカノイルとしては、例えば、ホルミル、アセチル、２－メチルアセチル、２，２－ジメチルアセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、ペンタノイル、２，２－ジメチルプロピオニル、ヘキサノイル等が挙げられる。アロイルとしては、例えば、ベンゾイル、トルオイル、ナフトイルを挙げることができる。かかるアロイルは置換可能な位置において置換されていてもよく、アルキルで置換されていてもよい。
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、好ましくは、リボースの２’位の－ＯＨ基がメトキシで置換され、リン酸結合部分がホスホロチオエート結合である、下記一般式で表される基を構成単位とする本発明のアンチセンスオリゴマーである。
（式中、Baseは、核酸塩基を表す。）
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、各種自動合成装置（例えば、AKTA oligopilot plus 10 / 100（GE Healthcare））を用いて容易に合成することが可能であり、あるいは、第三者機関（例えば、Promega社又はTakara社）等に委託して作製することもできる。
本発明のアンチセンスモルホリノオリゴマーは、下記一般式で表される基を構成単位とするアンチセンスオリゴマーである。
（式中、Baseは、前記と同義であり；
Ｗは、以下のいずれかの式で表わされる基を表す。
（式中、Ｘは、－ＣＨ２Ｒ１、－Ｏ－ＣＨ２Ｒ１、－Ｓ－ＣＨ２Ｒ１、－ＮＲ２Ｒ３、又はＦを表し；
Ｒ１は、Ｈ、アルキルを表し；
Ｒ２及びＲ３は、同一又は異なって、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、又はアリールを表し；
Ｙ１は、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、又はＮＲ１を表し；
Ｙ２は、Ｏ、Ｓ、又はＮＲ１を表し；
Ｚは、Ｏ又はＳを表す。））
本発明のアンチセンスモルホリノオリゴマーを合成するのに用いるモルホリノモノマー化合物の例としては、表５に示すモルホリノモノマー化合物（Ａ）、モルホリノモノマー化合物（Ｃ）、モルホリノモノマー化合物（Ｔ）、及びモルホリノモノマー化合物（Ｇ）が挙げられるがこれらに限定されるものではない。
本発明において、モルホリノオリゴマーは、好ましくは、以下の式で表わされる基を構成単位とするオリゴマー（ホスホロジアミデートモルホリノオリゴマー（以下、「ＰＭＯ」という））である。
（式中、Base、Ｒ２、Ｒ３は、前記と同義である。）
モルホリノオリゴマーは、例えば、国際公開公報第１９９１／００９０３３号、又は国際公開公報第２００９／０６４４７１号に記載の方法に従って製造することができる。特に、ＰＭＯは、国際公開公報第２００９／０６４４７１号、又は国際公開公報第２０１３／１００１９０号に記載の方法に従って製造することができる。
本発明のアンチセンスペプチド核酸オリゴマーは、下記一般式で表される基を構成単位とするアンチセンスオリゴマーである。
（式中、Baseは、前記と同義である。）
ペプチド核酸オリゴマーは、例えば、以下の文献に従って製造することができる。
１）P. E. Nielsen, M. Egholm, R. H. Berg, O. Buchardt，Science, 254, 1497 (1991)２）M. Egholm, O. Buchardt, P. E. Nielsen, R. H. Berg，JACS, 114, 1895 (1992)３）K. L. Dueholm, M. Egholm, C. Behrens, L. Christensen, H. F. Hansen, T. Vulpius, K. H. Petersen, R. H. Berg, P. E. Nielsen, O. Buchardt，J. Org. Chem., 59, 5767 (1994)
４）L. Christensen, R. Fitzpatrick, B. Gildea, K. H. Petersen, H. F. Hansen, T. Koch, M. Egholm，O. Buchardt, P. E. Nielsen, J. Coull, R. H. Berg, J. Pept. Sci., 1, 175 (1995)5）T. Koch, H. F. Hansen, P. Andersen, T. Larsen, H. G. Batz, K. Otteson, H. Orum, J. Pept. Res., 49, 80 (1997)
本発明のアンチセンスオリゴマー（本発明の連結型アンチセンスオリゴマーを含む）は、その医薬的に許容可能な塩の形態、水和物の形態、又は医薬的に許容可能な塩の水和物の形態であってもよい。
本発明のアンチセンスオリゴマーの医薬的に許容可能な塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩などの金属塩；アンモニウム塩；ｔ－オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ－メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ－ベンジル－フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩；弗化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、沃化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩；硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩のようなアリールスルホン酸塩；酢酸塩、りんご酸塩、フマール酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩などの有機酸塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩などが挙げられる。これらの塩は、公知の方法で製造することができる。あるいは、本発明のアンチセンスオリゴマーは、その水和物の形態にあってもよい。
２．サプレッサーアンチセンスオリゴマー
本発明の別の態様において、エクソンが単一でスキッピングすること（以下、「シングルスキッピング」という）を抑制する、サプレッサーアンチセンスオリゴマーを提供する。サプレッサーアンチセンスオリゴマーは、シングルスキッピングを抑制することにより、アンチセンスオリゴマーによるマルチエクソンスキッピングの効果を高めることができる。シングルスキッピングは、複数のエクソンを同時にスキッピングさせるのではなく、１つのエクソンのみがスキッピングされることに関する。
具体的には、本発明は、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか１つのエクソンが単一でスキッピングすることを抑制するサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を提供する。以下、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を総じて「本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマー」ともいう。本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマー、その医薬的に許容可能な塩、若しくはそれらの水和物のそれぞれを指す場合もある。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡ上のスプライシングサイレンサー配列、ブランチ部位配列、又はスプライス部位配列の部位を標的してスプライシングを阻害することで、シングルスキッピングを抑制する。本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーにより、対照と比較して、対象となるエクソンのシングルスキッピングの効率が低下する。
例えば、第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか１つのエクソンが単一でスキッピングすることを抑制するサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、第４４番目から第５６番目のいずれかのエクソンのスプライシングサイレンサー配列、あるいは第４４番目から第５５番目のいずれかのイントロンのスプライシングサイレンサー配列、ブランチ部位配列、又はスプライス部位配列を標的とする。
本明細書において、スプライシングサイレンサー配列は、エクソンの認識を抑制する働きを有するｐｒｅ－ｍＲＮＡ上の塩基配列要素である。スプライシングサイレンサー配列としては、例えば、ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ ｎｕｃｌｅａｒ ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ Ａ１（ｈｎＲＮＰ Ａ１）、ｈｎＲＮＰ Ａ２／Ｂ１、ＤＡＺＡＰ１、ｈｎＲＮＰ Ｉ、Ｆｏｘ－１、Ｆｏｘ－２、ｈｎＲＮＰ Ｈ１、ｈｎＲＮＰ Ｈ２、ｈｎＲＮＰ Ｈ３、ｈｎＲＮＰ Ｌ、Ｓａｍ６８、ＳＲｐ４０等のタンパク質又はタンパク質複合体の認識配列等が挙げられる。
本明細書において、スプライス部位は、エクソンとイントロンの境界である。スプライス部位は、イントロンの５’末端がＧＵ、ＡＵ等で始まり、イントロンの３’末端がＡＧ、ＡＣ等で終わることから、推定することができる。
本明細書において、ブランチ部位は、スプライシング反応中に５’スプライス部位を攻撃し、共有結合するイントロン中の配列である。ブランチ部位配列とは、ブランチ部位を含むイントロン中の塩基配列を指す。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの標的（以下、「サプレッサー配列」という）となるスプライシングサイレンサー配列、ブランチ部位配列、又はスプライス部位配列としては、例えば、以下の塩基配列（配列番号３７０～３８４及び３９０）が挙げられる。また、サプレッサー配列、ブランチ部位配列、及びスプライス部位配列の位置は、ＳｐｌｉｃｅＡｉｄ（Francesco Piva et al., Bioinformatics, 25(9), 1211-1213, 2009）、ＳｐｌｉｃｅＡｉｄ－２（Francesco Piva et al., Human Mutation, 33(1), 81-85, 2012）、ＳｐｌｉｃｅＡｉｄ－Ｆ（Matteo Giulietti et al., Nucleic Acids Res., 41, D125-D131, 2012）、ＡＴｔＲＡＣＴ－ａ（Girolamo Giudice et al., Database (Oxford), baw035, 2016）、ＳＲＯＯＧＬＥ（Schraga Schwartz et al., Nucleic Acids Res., 37, W189-W192, 2009）、Ｒｅｇ ＲＮＡ（Hsi-Yuan Huang et al., Nucleic Acids Res., 34, W429-W434, 2006）、Ｒｅｇ ＲＮＡ ２．０（Tzu-Hao Chang et al., BMC bioinformatics, 14(Suppl 2), S4, 2013）、Ｈｕｍａｎ Ｓｐｌｉｃｉｎｇ Ｆｉｎｄｅｒ（Francois-Olivier Desmet et al., Nucleic Acids Res., 37, 9, e67, 2009）、ＳＶＭ－ＢＰｆｉｎｄｅｒ（Andre Corvelo et al., PLoS Comput Biol., 6, 11, e1001016, 2010）等のソフトウェアを使用して検出することができる。
ここで、スプライシングサイレンサー配列の具体例としては、配列番号３７０～３８２が挙げられる。また、配列番号３７０～３８２の変異体として、
（Ｆ１）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ２）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ３）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ４）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ５）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ６）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ７）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ８）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ９）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ１０）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ１１）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ１２）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ１３）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ１４）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｆ１５）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｆ１６）配列番号３７０～３８２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
本発明のある態様では、前記スプライシングサイレンサー配列がheterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1（ｈｎＲＮＰ Ａ１）の認識配列であってもよい。ヒトｈｎＲＮＰ Ａ１の認識配列の例を配列番号３７０～３７９に示す。
またここで、スプライス部位配列の具体例としては、配列番号３８４又は３９０が挙げられる。また、配列番号３８４又は３９０の変異体として、
（Ｇ１）配列番号３８４又は３９０の塩基配列と８０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２０％以内の長さを有する塩基配列、も挙げられる
またここで、ブランチ部位配列の具体例としては、配列番号３８３が挙げられる。また、配列番号３８３の変異体として、
（Ｈ１）配列番号３８３の塩基配列と８０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２０％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
また、上記サプレッサー配列の変異型として、以下の標的領域も本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの標的塩基配列に含まれる。
（Ｉ１）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ２）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ３）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ４）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ５）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ６）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ７）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ８）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ９）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ１０）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ１１）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ１２）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ１３）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ１４）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｉ１５）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｉ１６）配列番号３７０～３８４及び３９０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの一態様としては、配列番号３７０～３８４及び３９０に示す塩基配列及び上記（Ｉ１）～（Ｉ１６）に示す変異型塩基配列からなる群より選択される塩基配列のいずれか１つの塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列を含むものが挙げられる。また、別の態様では、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは配列番号３７０～３８４及び３９０に示す塩基配列からなる群より選択される塩基配列のいずれか１つの塩基配列又はその一部の塩基配列に相補的な塩基配列からなるものが挙げられる。
ここで「その一部」とは本発明のアンチセンスオリゴマーの項目で述べた定義と同様である。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、
（Ｊ１）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｊ２）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
ここで、（Ｊ２）の塩基配列は、（Ｊ１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｊ２－１）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－２）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－３）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－４）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－５）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－６）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－７）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－８）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－９）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－１０）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－１１）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－１２）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－１３）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－１４）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ２－１５）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｊ２－１６）配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、（Ｊ１）及び（Ｊ２－１）～（Ｊ２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、
（Ｊ’１）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｊ’２）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
ここで、（Ｊ’２）の塩基配列は、（Ｊ’１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｊ’２－１）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－２）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－３）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－４）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－５）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－６）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－７）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－８）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－９）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－１０）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－１１）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－１２）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－１３）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－１４）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｊ’２－１５）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｊ’２－１６）配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、（Ｊ’１）及び（Ｊ’２－１）～（Ｊ’２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは生理的条件下でマルチスキッピング効果を高める。上記「生理的条件下」とは、生体内と類似のｐＨ、塩組成、温度に調節された条件を意味する。例えば、２５～４０℃、好ましくは３７℃、ｐＨ５～８、好ましくは、ｐＨ７．４であって、塩化ナトリウム濃度が１５０ｍＭの条件が挙げられる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーがマルチエクソンスキッピングの効果を高めたかどうかは、（ｉ）本発明のアンチセンスオリゴマーだけを用いたマルチエクソンスキッピングの実験系と、（ｉｉ）本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを用いたマルチエクソンスキッピングの実験系、を他の条件をそろえて準備し、実験系（ｉｉ）で得られるマルチエクソンスキッピング効果と実験系（ｉ）で得られるマルチエクソンスキッピング効果との差を観察することにより、確認することができる。
マルチスキッピングの効果の測定は、本発明のアンチセンスオリゴマーの項目「１．アンチセンスオリゴマー」で述べたとおりである。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは１０～６０塩基長であり、１０～５５塩基長、１０～５０塩基長、１０～４５塩基長、１０～４０塩基長、１０～３５塩基長、１０～３０塩基長、１０～２５塩基長、１５～６０塩基長であり、１５～５５塩基長、１５～５０塩基長、１５～４５塩基長、１５～４０塩基長、１５～３５塩基長、１５～３０塩基長、１５～２５塩基長、１６～６０塩基長であり、１６～５５塩基長、１６～５０塩基長、１６～４５塩基長、１６～４０塩基長、１６～３５塩基長、１６～３０塩基長、１６～２５塩基長、１７～６０塩基長であり、１７～５５塩基長、１７～５０塩基長、１７～４５塩基長、１７～４０塩基長、１７～３５塩基長、１７～３０塩基長、１７～２５塩基長、１８～６０塩基長であり、１８～５５塩基長、１８～５０塩基長、１８～４５塩基長、１８～４０塩基長、１８～３５塩基長、１８～３０塩基長、１８～２５塩基長、１９～６０塩基長であり、１９～５５塩基長、１９～５０塩基長、１９～４５塩基長、１９～４０塩基長、１９～３５塩基長、１９～３０塩基長、１９～２５塩基長、２０～６０塩基長であり、２０～５５塩基長、２０～５０塩基長、２０～４５塩基長、２０～４０塩基長、２０～３５塩基長、２０～３０塩基長、２０～２５塩基長、１５～３０塩基長であり、１５～２９塩基長、１５～２８塩基長、１５～２７塩基長、１５～２６塩基長、１５～２５塩基長、１５～２４塩基長、１５～２３塩基長、１５～２２塩基長、１５～２１塩基長、１５～２０塩基長、１５～１９塩基長、１５～１８塩基長、１６～３０塩基長であり、１６～２９塩基長、１６～２８塩基長、１６～２７塩基長、１６～２６塩基長、１６～２５塩基長、１６～２４塩基長、１６～２３塩基長、１６～２２塩基長、１６～２１塩基長、１６～２０塩基長、１６～１９塩基長、１６～１８塩基長、１７～３０塩基長であり、１７～２９塩基長、１７～２８塩基長、１７～２７塩基長、１７～２６塩基長、１７～２５塩基長、１７～２４塩基長、１７～２３塩基長、１７～２２塩基長、１７～２１塩基長、１７～２０塩基長、１７～１９塩基長、１７～１８塩基長、１８～３０塩基長であり、１８～２９塩基長、１８～２８塩基長、１８～２７塩基長、１８～２６塩基長、１８～２５塩基長、１８～２４塩基長、１８～２３塩基長、１８～２２塩基長、１８～２１塩基長、１８～２０塩基長、１８～１９塩基長、１９～３０塩基長であり、１９～２９塩基長、１９～２８塩基長、１９～２７塩基長、１９～２６塩基長、１９～２５塩基長、１９～２４塩基長、１９～２３塩基長、１９～２２塩基長、１９～２１塩基長、１９～２０塩基長、２０～３０塩基長であり、２０～２９塩基長、２０～２８塩基長、２０～２７塩基長、２０～２６塩基長、２０～２５塩基長、２０～２４塩基長、２０～２３塩基長、２０～２２塩基長、２０～２１塩基長、６０塩基長、５９塩基長、５８塩基長、５７塩基長、５６塩基長、５５塩基長、５４塩基長、５３塩基長、５２塩基長、５１塩基長、５０塩基長、４９塩基長、４８塩基長、４７塩基長、４６塩基長、４５塩基長、４４塩基長、４３塩基長、４２塩基長、４１塩基長、４０塩基長、３９塩基長、３８塩基長、３７塩基長、３６塩基長、３５塩基長、３４塩基長、３３塩基長、３２塩基長、３１塩基長、３０塩基長、２９塩基長、２８塩基長、２７塩基長、２６塩基長、２５塩基長、２４塩基長、２３塩基長、２２塩基長、２１塩基長、２０塩基長、１９塩基長、１８塩基長、１７塩基長、１６塩基長、１５塩基長、１４塩基長、１３塩基長、１２塩基長、１１塩基長、又は１０塩基長であってもよいが、これらに限定されるものではなく、上記の長さに１、２、又は３塩基長が加えられても減らされてもよい。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、複数のユニットオリゴマーが相互に連結した構成を有する連結型アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物であってもよい。ユニットオリゴマーは、前述のとおり、ハイブリダイゼーションに寄与しないリンカーを介して連結していてもよく、あるいはリンカーを介さずに直接連結していてもよい。本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーが連結型の場合、各々のユニットオリゴマーの塩基配列は連続又は互いに重複するものではない。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、オリゴヌクレオチド、モルホリノオリゴマー、又はペプチド核酸（Peptide Nucleic Acid:ＰＮＡ）オリゴマーであってもよい。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーがオリゴヌクレオチドの場合（以下、「本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴヌクレオチド」という）、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヌクレオチドを構成単位とするサプレッサーアンチセンスオリゴマーであり、かかるヌクレオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、又は修飾ヌクレオチドのいずれであってもよい。
修飾ヌクレオチドは、前述のとおりである。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴヌクレオチドは、好ましくは、リボースの２’位の－ＯＨ基がメトキシで置換され、リン酸結合部分がホスホロチオエート結合である、下記一般式で表される基を構成単位とする本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーである。
（式中、Baseは、前記と同義である。）
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴヌクレオチドは、各種自動合成装置（例えば、AKTA oligopilot plus 10 / 100（GE Healthcare））を用いて容易に合成することが可能であり、あるいは、第三者機関（例えば、Promega社又はTakara社）等に委託して作製することもできる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーがモルホリノオリゴマーの場合（以下、「本発明のサプレッサーアンチセンスモルホリノオリゴマー」という）、本発明のサプレッサーアンチセンスモルホリノオリゴマーは、下記一般式で表される基を構成単位とするサプレッサーアンチセンスオリゴマーである。
（式中、Base、Ｗは、前記と同義である。）
本発明のサプレッサーアンチセンスモルホリノオリゴマーを合成するのに用いるモルホリノモノマー化合物の例としては、表７に示すモルホリノモノマー化合物（Ａ）、モルホリノモノマー化合物（Ｃ）、モルホリノモノマー化合物（Ｔ）、及びモルホリノモノマー化合物（Ｇ）が挙げられるがこれらに限定されるものではない。
本発明のサプレッサーアンチセンスモルホリノオリゴマーにおいて、モルホリノオリゴマーは、好ましくは、ＰＭＯである。
モルホリノオリゴマーは、例えば、国際公開公報第１９９１／００９０３３号、又は国際公開公報第２００９／０６４４７１号に記載の方法に従って製造することができる。特に、ＰＭＯは、国際公開公報第２００９／０６４４７１号、又は国際公開公報第２０１３／１００１９０号に記載の方法に従って製造することができる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーがペプチド核酸オリゴマーの場合（以下、「本発明のサプレッサーアンチセンスペプチド核酸オリゴマー」という）、本発明のサプレッサーアンチセンスペプチド核酸オリゴマーは、下記一般式で表される基を構成単位とするサプレッサーアンチセンスオリゴマーである。
（式中、Baseは、前記と同義である。）
ペプチド核酸は、前述のとおり製造することができる。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、その医薬的に許容可能な塩の形態、水和物の形態、又は医薬的に許容可能な塩の水和物の形態であってもよい。
本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの医薬的に許容可能な塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩などの金属塩；アンモニウム塩；ｔ－オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ－メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ－ベンジル－フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩；弗化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、沃化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩；硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩のようなアリールスルホン酸塩；酢酸塩、りんご酸塩、フマール酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩などの有機酸塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩などが挙げられる。これらの塩は、公知の方法で製造することができる。あるいは、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、その水和物の形態にあってもよい。
［ＰＭＯの製法］
本発明のアンチセンスオリゴマー及び本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、ＰＭＯであってもよい。ＰＭＯの１つの態様として、例えば、次の一般式（Ｉ）で表される化合物（以下、ＰＭＯ（Ｉ）という。）を挙げることができる。
（式中、各Base、Ｒ２、Ｒ３は、前記と同義であり；
ｎは、１～９９の範囲内にある任意の整数であり、好ましくは、１８～２８の範囲内にある任意の整数である。）
ＰＭＯ（Ｉ）は、公知の方法（例えば、国際公開公報第２００９／０６４４７１号、又は国際公開公報第２０１３／１００１９０号を参照）に従い製造することができる。
また、本発明のアンチセンスオリゴマー又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、５’末端が、下記化学式（１）～（３）のいずれかの基であってもよい。好ましくは（３）－ＯＨである。
以下、上記（１）、（２）、及び（３）で示される基を、それぞれ「基（１）」、「基（２）」、及び「基（３）」と呼ぶ。
３．医薬用途
本発明は、本発明のアンチセンスオリゴマー（その医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物も含まれる）を含む、医薬組成物（以下、「本発明の医薬組成物」という）を提供する。本発明の医薬組成物は、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマー（その医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物も含まれる）、及び／又は医薬的に許容可能な担体をさらに含んでいてもよい。
また、本発明は、本発明のアンチセンスオリゴマー（その医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物も含まれる）と、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマー（その医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物も含まれる）とを含む、医薬組成物（以下、「本発明の組み合わせ医薬」という）を提供する。
本発明の医薬組成物が、本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを含む場合、それらのオリゴマーのいずれの組み合わせも含まれる。また、本発明の組み合わせ医薬においては、本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーのいずれの組み合わせも含まれる。本発明の医薬組成物又は本発明の組み合わせ医薬に含まれるアンチセンスオリゴマーは、本発明のアンチセンスオリゴマーであればいずれでもよく、特に限定されるわけではないが、好ましくは配列番号１～１１１、１１３～１７７、１７９、１８０、１８２、１８３、１８５～１９３、１９５～１９８、２００～２２３、及び２２５～２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるアンチセンスオリゴマーであり、より好ましくは配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、２８、２９、３５、３８、３９、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５８、５９、６３、６４、６５、６６、６７、６８、７４、７５、７６、７７、７８、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１０２、１１３、１１９、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１２８、１３０、１３１、１３２、１３９、１４２、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、２２５、２２８、２３１、及び２３２からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるアンチセンスオリゴマーであり、さらに好ましくは配列番号１、５、１１、２７、２８、３５、４０、４１、４３、４５、４６、４７、５０、５１、５２、５４、５５、５９、６３、６４、６５、６６、６８、７４、７５、７６、７７、７８、１０２、１１３、１１９、１２８、１３１、１３２、１３９、１４２、１６１、１６２、１６３、２２５、及び２２８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるアンチセンスオリゴマーである。
また、本発明の医薬組成物又は本発明の組み合わせ医薬に含まれるサプレッサーアンチセンスオリゴマーは、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーであればいずれでもよく、特に限定されるわけではないが、好ましくは配列番号２５７～２７５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるサプレッサーアンチセンスオリゴマーであり、より好ましくは配列番号１、５、６、７、８、１０、１１、１４、２６、２７、であり、より好ましくは配列番号２６０、２６１、及び２６３からなる群から選択されるいずれか１つの塩基配列からなるからなるサプレッサーアンチセンスオリゴマーである。
本発明の医薬組成物が本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを含む場合、好ましくは、上記の本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの組み合わせを含む。また、本発明の組み合わせ医薬は、好ましくは、上記の本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの組み合わせを含むものである。
本発明の組み合わせ医薬において、本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーとの組み合わせの例としては以下が挙げられる。
（Ｋ１）アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６０からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ２）アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６１からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ３）アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６３からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ４）アンチセンスオリゴマーが配列番号６５からなるオリゴマーであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６０からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ５）アンチセンスオリゴマーが配列番号６５からなるオリゴマーであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６１からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ６）アンチセンスオリゴマーが配列番号６５からなるオリゴマーであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６３からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ７）アンチセンスオリゴマーが配列番号５５と５９からなるオリゴマーの組み合わせであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６０からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ８）アンチセンスオリゴマーが配列番号５５と５９からなるオリゴマーの組み合わせであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６１からなるオリゴマーである組み合わせ、
（Ｋ９）アンチセンスオリゴマーが配列番号５５と５９からなるオリゴマーの組み合わせであり、サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６３からなるオリゴマーである組み合わせ。
本発明の医薬組成物は、上記組み合わせの本発明のアンチセンスオリゴマー及び本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを含み得る。
本発明の医薬組成物及び本発明の組み合わせ医薬は、それぞれ、例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）、先天性筋ジストロフィー、エメリ・ドレフュス（Emery-Dreifuss）型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、がん咽頭型筋ジストロフィー、皮質下梗塞と白質脳症を伴う常染色体優性脳動脈症（ＣＡＤＡＳＩＬ）、アルポート症候群等の治療のために用いることができる。また、本発明の組み合わせ医薬及び本発明の医薬組成物は、それぞれヒト患者、特に筋ジストロフィーのヒト患者に投与することができる。本発明の組み合わせ医薬又は本発明の医薬組成物の投与の対象となる患者は、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５からなる群より選択される２つ以上のエクソンのスキッピングの対象となる変異を有するヒト患者であってもよい。
本発明の一態様において、本発明のアンチセンスオリゴマー、又は本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの組み合わせを筋ジストロフィー患者に投与する工程を含む、筋ジストロフィーの治療方法を提供する。
本発明の別の態様において、本発明の医薬組成物又は本発明の組み合わせ医薬を筋ジストロフィー患者に投与する工程を含む、筋ジストロフィーの治療方法を提供する。
前記治療方法は、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングを行うことを伴ってもよい。前記治療方法において、前記筋ジストロフィー患者は、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５スキップの対象となる変異を有する患者であってもよい。前記患者はヒトであってもよく、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５スキップの対象となる変異を有するヒト患者であってもよい。
本発明は、さらに筋ジストロフィー治療用医薬の製造における本発明のアンチセンスオリゴマー、若しくは本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの組み合わせ、又は本発明の医薬組成物、若しくは本発明の組み合わせ医薬の使用を提供する。
さらに本発明は、筋ジストロフィー治療に使用するための本発明のアンチセンスオリゴマー、若しくは本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの組み合わせ、又は本発明の医薬組成物、若しくは本発明の組み合わせ医薬を提供する。前記治療は、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングを行うことを伴ってもよい。前記治療において、前記筋ジストロフィー患者は、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５スキップの対象となる変異を有する患者であってもよい。前記患者はヒトであってもよく、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５スキップの対象となる変異を有するヒト患者であってもよい。
本発明のアンチセンスオリゴマー、若しくは本発明のアンチセンスオリゴマーと本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの組み合わせ、又は本発明の医薬組成物、若しくは本発明の組み合わせ医薬の投与形態は、医薬的に許容可能な投与形態であれば特に制限されず、治療方法に応じて選択することができるが、筋組織への送達容易性の観点から、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経口投与、組織内投与、経皮投与等が好ましい。また、本発明の組成物が取り得る剤型としては、特に制限されないが、例えば、各種の注射剤、経口剤、点滴剤、吸入剤、軟膏剤、ローション剤等を挙げることができる。
本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを筋ジストロフィー患者に投与する場合、本発明の組成物は、該オリゴマーの筋組織への送達を促進する担体を含むことが好ましい。このような担体は、医薬的に許容可能なものであれば特に制限されず、その例として、カチオン性リポソーム、カチオン性ポリマー等のカチオン性担体、又はウイルスエンベロープを利用した担体を挙げることができる。カチオン性リポソームとしては、例えば、２－Ｏ－（２－ジエチルアミノエチル）カルバモイル－１，３－Ｏ－ジオレオイルグリセロールとリン脂質とを必須構成成分として形成されるリポソーム（以下、「リポソームＡ」という）、オリゴフェクトアミン（登録商標）（Invitrogen社製）、リポフェクチン（登録商標）（Invitrogen社製）、リポフェクトアミン（登録商標）（Invitrogen社製）、Lipofectamine 2000（登録商標）（Invitrogen社製）、DMRIE-C（登録商標）（Invitrogen社製）、GeneSilencer（登録商標）（Gene Therapy Systems社製）、TransMessenger（登録商標）（QIAGEN社製）、TransIT TKO（登録商標）（Mirus社製）、Nucleofector II（Lonza）を挙げることができる。それらの中で、リポソームＡが好ましい。カチオン性ポリマーとしては、例えば、JetSI（登録商標）（Qbiogene社製）、Jet-PEI（登録商標）（ポリエチレンイミン、Qbiogene社製）を挙げることができる。ウイルスエンベロープを利用した担体としては、例えば、GenomeOne（登録商標）（HVJ-Eリポソーム、石原産業社製）を挙げることができる。あるいは、特許２９２４１７９号に記載の医薬デバイス、再公表特許公報第２００６／１２９５９４号及び再公表特許公報第２００８／０９６６９０号に記載のカチオン性担体を用いることもできる。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬に含まれる本発明のアンチセンスオリゴマーの濃度は、担体の種類等によって異なるが、０．１ｎＭ～１００μＭの範囲内が適当であり、１ｎＭ～１０μＭの範囲内が好ましく、１０ｎＭ～１μＭの範囲内がより好ましい。また、本発明の組成物に含まれる本発明のアンチセンスオリゴマーと担体との重量比（担体／本発明のアンチセンスオリゴマー）は、該オリゴマーの性質及び該担体の種類等によって異なるが、０．１～１００の範囲内が適当であり、１～５０の範囲内が好ましく、１０～２０の範囲内がより好ましい。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬に含まれる本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの濃度は、担体の種類等によって異なるが、０．１ｎＭ～１００μＭの範囲内が適当であり、１ｎＭ～１０μＭの範囲内が好ましく、１０ｎＭ～１μＭの範囲内がより好ましい。また、本発明の組成物に含まれる本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーと担体との重量比（担体／本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマー）は、該オリゴマーの性質及び該担体の種類等によって異なるが、０．１～１００の範囲内が適当であり、１～５０の範囲内が好ましく、１０～２０の範囲内がより好ましい。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、水溶液の形態であってもよい。その場合、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、本発明のアンチセンスオリゴマーを、２．５～５００ｍｇ／ｍＬ、５～４５０ｍｇ／ｍＬ、１０～４００ｍｇ／ｍＬ、１５～３５０ｍｇ／ｍＬ、２０～３００ｍｇ／ｍＬ、２０～２５０ｍｇ／ｍＬ、２０～２００ｍｇ／ｍＬ、２０～１５０ｍｇ／ｍＬ、２０～１００ｍｇ／ｍＬ、２０～５０ｍｇ／ｍＬ、２０～４０ｍｇ／ｍＬ、２０～３０ｍｇ／ｍＬ、２３～２７ｍｇ／ｍＬ、２４～２６ｍｇ／ｍＬ、又は２５ｍｇ／ｍＬの濃度で含んでいてもよい。または、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、本発明のアンチセンスオリゴマーを、１０～１００ｍｇ／ｍＬ、１５～９５ｍｇ／ｍＬ、２０～８０ｍｇ／ｍＬ、２５～７５ｍｇ／ｍＬ、３０～７０ｍｇ／ｍＬ、３５～６５ｍｇ／ｍＬ、４０～６０ｍｇ／ｍＬ、４５～５５ｍｇ／ｍＬ、４７～５３ｍｇ／ｍＬ、４８～５２ｍｇ／ｍＬ、４９～５１ｍｇ／ｍＬ、又は５０ｍｇ／ｍＬの濃度で含んでいてもよい。
また、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬が水溶液の形態である場合、本発明のサプレッサーオリゴマーを、２．５～５００ｍｇ／ｍＬ、５～４５０ｍｇ／ｍＬ、１０～４００ｍｇ／ｍＬ、１５～３５０ｍｇ／ｍＬ、２０～３００ｍｇ／ｍＬ、２０～２５０ｍｇ／ｍＬ、２０～２００ｍｇ／ｍＬ、２０～１５０ｍｇ／ｍＬ、２０～１００ｍｇ／ｍＬ、２０～５０ｍｇ／ｍＬ、２０～４０ｍｇ／ｍＬ、２０～３０ｍｇ／ｍＬ、２３～２７ｍｇ／ｍＬ、２４～２６ｍｇ／ｍＬ、又は２５ｍｇ／ｍＬの濃度で含んでいてもよい。または、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、本発明のサプレッサーオリゴマーを、１０～１００ｍｇ／ｍＬ、１５～９５ｍｇ／ｍＬ、２０～８０ｍｇ／ｍＬ、２５～７５ｍｇ／ｍＬ、３０～７０ｍｇ／ｍＬ、３５～６５ｍｇ／ｍＬ、４０～６０ｍｇ／ｍＬ、４５～５５ｍｇ／ｍＬ、４７～５３ｍｇ／ｍＬ、４８～５２ｍｇ／ｍＬ、４９～５１ｍｇ／ｍＬ、又は５０ｍｇ／ｍＬの濃度で含んでいてもよい。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、乾燥形態であってもよい。その場合、水溶液形態の本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬を調製するために、例えば１２５ｍｇ又は２５０ｍｇの乾燥形態の本発明のアンチセンスオリゴマーを、０．５ｍＬ～１００ｍＬの水と混合して（１．２５ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬ又は２．５ｍｇ／ｍＬ～５００ｍｇ／ｍＬの本発明のアンチセンスオリゴマー濃度に相当する）、好ましくは１ｍＬ～５０ｍＬの水と混合して（２．５ｍｇ／ｍＬ～１２５ｍｇ／ｍＬ又は５ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬの本発明のアンチセンスオリゴマー濃度に相当する）、より好ましくは５ｍＬ～１０ｍＬの水と混合して（１２．５ｍｇ／ｍＬ～２５ｍｇ／ｍＬ又は２５ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬの本発明のアンチセンスオリゴマー濃度に相当する）用いてもよい。
また、本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬が乾燥形態である場合、水溶液形態の本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬を調製するために、例えば、１２５ｍｇ又は２５０ｍｇの乾燥形態の本発明のサプレッサーオリゴマーを０．５ｍＬ～１００ｍＬの水と混合して（１．２５ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬ又は２．５ｍｇ／ｍＬ～５００ｍｇ／ｍＬの本発明のサプレッサーオリゴマー濃度に相当する）、好ましくは１ｍＬ～５０ｍＬの水と混合して（２．５ｍｇ／ｍＬ～１２５ｍｇ／ｍＬ又は５ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬの本発明のサプレッサーオリゴマー濃度に相当する）、より好ましくは５ｍＬ～１０ｍＬの水と混合して（１２．５ｍｇ／ｍＬ～２５ｍｇ／ｍＬ又は２５ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬの本発明のサプレッサーオリゴマー濃度に相当する）用いてもよい。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬に含まれる本発明のアンチセンスオリゴマー及び本発明のサプレッサーオリゴマーの前記濃度は、本発明のアンチセンスオリゴマー及び本発明のサプレッサーオリゴマーそれぞれの濃度であってもよいし、本発明のアンチセンスオリゴマー及び本発明のサプレッサーオリゴマーを合わせた濃度であってもよい。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬には、本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーと上述した担体以外に、任意に医薬的に許容可能な添加剤を配合することができる。かかる添加剤として、例えば、乳化補助剤（例えば、炭素数６～２２の脂肪酸やその医薬的に許容可能な塩、アルブミン、デキストラン）、安定化剤（例えば、コレステロール、ホスファチジン酸、マンニトール、ソルビトール）、等張化剤（例えば、塩化ナトリウム、グルコース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース）、ｐＨ調整剤（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエタノールアミン）を挙げることができる。これらを一種又は二種以上使用することができる。本発明の組成物中の当該添加剤の含有量は、９０重量％以下が適当であり、７０重量％以下が好ましく、５０重量％以下がより好ましい。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、担体の分散液に本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを加え、適当に攪拌することにより調製することができる。また、添加剤は、本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの添加前でも添加後でも適当な工程で添加することができる。本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを添加させる際に用い得る水性溶媒としては、医薬的に許容可能なものであれば特に制限されず、例えば、注射用水、注射用蒸留水、生理食塩水等の電解質液、ブドウ糖液、マルトース液等の糖液を挙げることができる。また、かかる場合のｐＨ及び温度等の条件は、当業者が適宜選択することができる。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬は、例えば、液剤やその凍結乾燥製剤とすることができる。当該凍結乾燥製剤は、常法により、液剤の形態を有している本発明の組成物を凍結乾燥処理することにより調製することができる。例えば、液剤の形態を有している本発明の組成物を適当な滅菌を行った後、所定量をバイアル瓶に分注し、約－４０℃～－２０℃の範囲内の条件で予備凍結を２時間程度行い、約０℃～１０℃の範囲内で減圧下に一次乾燥を行い、次いで、約１５℃～２５℃の範囲内で減圧下に二次乾燥して凍結乾燥することができる。そして、一般的にはバイアル内部を窒素ガスで置換し、打栓して本発明の組成物の凍結乾燥製剤を得ることができる。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬の凍結乾燥製剤は、一般には任意の適当な溶液（再溶解液）の添加によって再溶解し使用することができる。このような再溶解液としては、注射用水、生理食塩水、その他一般輸液を挙げることができる。この再溶解液の液量は、用途等によって異なり特に制限されないが、凍結乾燥前の液量の０．５倍量～２倍量又は５００ｍＬ以下が適当である。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬を投与する際の用量としては、含有される本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの種類、剤形、年齢や体重等の患者の状態、投与経路、疾患の性質と程度を考慮した上で調節することが望ましいが、成人に対して本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの量として、１回の投与に体重１ｋｇあたり０．１ｍｇ～１ｇ、好ましくは体重１ｋｇあたり１ｍｇ～１００ｍｇ、さらに好ましくは体重１ｋｇあたり１ｍｇ～９０ｍｇ、より好ましくは体重１ｋｇあたり１ｍｇ～８０ｍｇで投与することができる。投与頻度は、１～３日に１回、１週間に１回、又は２～３週に１回であってもよい。この数値は標的とする疾患の種類、投与形態、標的分子によっても異なる場合がある。したがって、場合によってはこれ以下の用量又は投与頻度でも十分であるし、また逆にこれ以上の用量又は投与頻度を必要とするときもある。
本発明の医薬組成物及び／又は本発明の組み合わせ医薬の別の態様として、本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを発現し得るベクターと上述した担体とを含む医薬組成物を挙げることができる。かかる発現ベクターは、複数の本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを発現し得るものであってもよい。当該組成物には、本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを含有する本発明の組成物と同様に、医薬的に許容可能な添加剤を添加することができる。当該組成物中に含まれる発現ベクターの濃度は、担体の種類等によって異なるが、０．１ｎＭ～１００μＭの範囲内が適当であり、１ｎＭ～１０μＭの範囲内が好ましく、１０ｎＭ～１μＭの範囲内がより好ましい。当該組成物中に含まれる発現ベクターと担体との重量比（担体／発現ベクター）は、発現ベクターの性質、担体の種類等によって異なるが、０．１～１００の範囲内が適当であり、１～５０の範囲内が好ましく、１０～２０の範囲内がより好ましい。また、当該組成物中に含まれる担体の含有量は、本発明のアンチセンスオリゴマー及び／又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを含有する本発明の組成物の場合と同様であり、その調製方法等に関しても、本発明の組成物の場合と同様である。
４．ヒトジストロフィン以外の目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡ
本明細書は、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡがヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡである場合について具体的に述べるが、それに限定されず、ヒトジストロフィン以外の目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡの場合も、アンチセンスオリゴマー及びサプレッサーアンチセンスオリゴマーの設計、製造、使用方法については、本明細書の開示又は当分野の公知の技術及び方法に従って実施することができる。当業者であれば本明細書の開示又は当分野の公知の技術及び方法に基づき、ヒトジストロフィン以外の目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡについても、そのアンチセンスオリゴマー又はサプレッサーアンチセンスオリゴマーを設計、製造及び使用することができる。同様に、当業者は本明細書の開示及び当分野の公知の技術及び方法に基づき、アンチセンスオリゴマーを用いて目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのマルチエクソンスキッピングをすること、及びサプレッサーアンチセンスオリゴマーを用いてマルチエクソンスキッピングの効率を高めることができる。
本明細書において、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡの例として、ヒトγ－サルコグリカン（ＳＧＣＧ）、ヒトＮｏｔｃｈ３、及びヒトジストロフィンのｐｒｅ－ｍＲＮＡが挙げられる。本発明のある態様において目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡはヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡであってもよい。また、本発明の別の態様において、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡはＳＧＣＧ又はヒトＮｏｔｃｈ３であってもよい。
ヒトＳＧＣＧ及びヒトＮｏｔｃｈ３の目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡにおけるマルチエクソンスキッピングに用いるアンチセンスオリゴマーの標的領域の塩基配列は以下のとおりである。
本発明における、ヒトＳＧＣＧのｐｒｅ－ｍＲＮＡの標的領域を、以下に配列番号２８３及び２８４として示す。
本発明におけるヒトＮｏｔｃｈ３のｐｒｅ－ｍＲＮＡの標的領域を、以下に示す。
ヒトＳＧＣＧのｐｒｅ－ｍＲＮＡに対しマルチエクソンスキッピングを誘導するヒトＳＧＣＧ用アンチセンスオリゴマーとしては、例えば、イントロン３の３’末端を基点とした－４００～＋５０塩基の範囲を標的とするものが挙げられ、具体例として、
（Ｌ１）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｌ２）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるヒトＳＧＣＧ用アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
ここで、（Ｌ２）の塩基配列は、（Ｌ１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｌ２－１）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－２）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－３）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－４）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－５）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－６）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－７）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－８）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－９）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－１０）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－１１）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－１２）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－１３）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－１４）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｌ２－１５）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｌ２－１６）配列番号２８７～３０８からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、ヒトＳＧＣＧ用アンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、
（Ｌ１）及び（Ｌ２－１）～（Ｌ２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるヒトＳＧＣＧ用アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。ヒトＳＧＣＧ用アンチセンスオリゴマーは、本発明に含まれる。
ヒトＳＧＣＧのｐｒｅ－ｍＲＮＡのシングルスキップのサプレッサーアンチセンスオリゴマー（ヒトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマー）としては、例えば、イントロン４のスプライシングサイレンサー配列又はシングルスキッピングのスプライス部位を標的とするものが挙げられ、具体例として、
（Ｍ１）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｍ２）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるヒトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
ここで、（Ｍ２）の塩基配列は、（Ｍ１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｍ２－１）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－２）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－３）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－４）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－５）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－６）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－７）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－８）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－９）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－１０）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－１１）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－１２）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－１３）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－１４）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｍ２－１５）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｍ２－１６）配列番号３３１～３３５からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、ヒトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、
（Ｍ１）及び（Ｍ２－１）～（Ｍ２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるヒトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。ヒトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマーは、本発明に含まれる。ヒトトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマーは、本発明に含まれる。ヒトＳＧＣＧ用サプレッサーアンチセンスオリゴマーは、ＳＧＣＧのｐｒｅ－ｍＲＮＡのマルチスキッピングの効率を増大させ得る。
ヒトＮｏｔｃｈ３のｐｒｅ－ｍＲＮＡに対しマルチエクソンスキッピングを誘導するヒトＮｏｔｃｈ３用アンチセンスオリゴマーとしては、例えば、イントロン３のアクセプター付近の領域、すなわち、イントロン３の３’末端を基点とした－４００～＋５０塩基の範囲を標的とするものが挙げられ、例えば、
（Ｎ１）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｎ２）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるヒトＮｏｔｃｈ３用アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
ここで、（Ｎ２）の塩基配列は、（Ｎ１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｎ２－１）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－２）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－３）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－４）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－５）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－６）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－７）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－８）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－９）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－１０）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－１１）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－１２）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－１３）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－１４）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｎ２－１５）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｎ２－１６）配列番号３０９～３３０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、ヒトＮｏｔｃｈ３用アンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、（Ｎ１）及び（Ｎ２－１）～（Ｎ２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるヒトＮｏｔｃｈ３用アンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。ヒトＮｏｔｃｈ３用アンチセンスオリゴマーは、本発明に含まれる。
ヒトＮｏｔｃｈ３のｐｒｅ－ｍＲＮＡのシングルスキップのサプレッサーアンチセンスオリゴマー（ヒトＮｏｔｃｈ３用サプレッサーアンチセンスオリゴマー）としては、例えば、イントロン４のスプライセンシングサイレンサー配列又はシングルスキッピングのスプライス部位を標的とするものが挙げられ、具体例として、
（Ｏ１）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列、又は
（Ｏ２）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
からなるヒトＮｏｔｃｈ３用サプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。
ここで、（Ｏ２）の塩基配列は、（Ｏ１）の塩基配列の変異型であるが、変異型としては、
（Ｏ２－１）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－２）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－３）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－４）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－５）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と８９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１１％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－６）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９０％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１０％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－７）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９１％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±９％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－８）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９２％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±８％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－９）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９３％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±７％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－１０）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９４％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±６％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－１１）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±５％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－１２）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９６％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±４％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－１３）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９７％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±３％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－１４）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９８％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±２％以内の長さを有する塩基配列、
（Ｏ２－１５）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±１％以内の長さを有する塩基配列、及び
（Ｏ２－１６）配列番号３３６～３４０からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列と９９．５％以上の配列同一性を有し、かつ前記選択されるいずれか１つの塩基配列の長さと比べ±０．５％以内の長さを有する塩基配列、
も挙げられる。
したがって、ヒトＮｏｔｃｈ３用サプレッサーアンチセンスオリゴマーのさらなる態様としては、
（Ｏ１）及び（Ｏ２－１）～（Ｏ２－１６）からなる群より選択されるいずれか１つの塩基配列からなるヒトＮｏｔｃｈ３用サプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物が挙げられる。ヒトＮｏｔｃｈ３用サプレッサーアンチセンスオリゴマーは、本発明に含まれる。ヒトＮｏｔｃｈ３用サプレッサーアンチセンスオリゴマーは、Ｎｏｔｃｈ３のｐｒｅ－ｍＲＮＡのマルチスキッピングの効率を増大させ得る。
以下に、配列番号２８７～３４０の塩基配列を示す。
５．マルチエクソンスキッピングの効率を増大させる方法
本発明は、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡから２つ以上の番号順に連続するエクソンをスキッピングする際に、前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのスプライシングサイレンサー配列、スプライス部位配列、又はブランチ部位配列を阻害する工程を含む、
前記２つ以上の番号順に連続するエクソンがスキッピングされる効率を増大させる方法（以下、「本発明の増大方法」という）を提供する。
本発明の増大方法において、前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡの２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングは、マルチエクソンスキッピングを誘導するアンチセンスオリゴマー、例えば、本発明のアンチセンスオリゴマー、若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を用いて行うことができる。
本発明の増大方法は、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡ上のスプライシングサイレンサー配列、スプライス部位配列、又はブランチ部位配列を阻害することでシングルスキッピングを抑制し、マルチエクソンスキッピングの効率を増大させることができる。本発明の増大方法は、これらの目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡ上のスプライシングサイレンサー配列、スプライス部位配列、又はブランチ部位配列の機能を阻害することを含み、より具体的には、これらの配列を、サプレッサーアンチセンスオリゴマーで標的することで、エクソンのシングルスキッピングを抑制することを含む。
また、本発明の増大方法において、前記スプライシングサイレンサー配列、スプライス部位、又はブランチ部位配列を阻害する工程は、本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマー等のサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物を用いて行うことができる。
本発明の増大方法においては、サプレッサーアンチセンスオリゴマーとして、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡ上のスプライシングサイレンサー配列、ブランチ部位配列、及びスプライス部位配列に相補的な塩基配列を含むオリゴマーを、スプライシングサイレンサー配列、ブランチ部位配列、及びスプライス部位配列を阻害する工程に使用することができる。
スプライシングサイレンサー配列、ブランチ部位配列、及びスプライス部位配列は、前述のとおりである。本発明の増大方法のある態様では、前記スプライシングサイレンサー配列がheterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1（ｈｎＲＮＰ Ａ１）の認識配列であってもよい。ヒトｈｎＲＮＰ Ａ１の認識配列の例を配列番号３７０～３７９に示す。
本発明の増大方法に、前記アンチセンスオリゴマー及び前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーを「用いる」とは、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡを発現する細胞に前記アンチセンスオリゴマー及び前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーを取り込ませ、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡにエクソンスキッピングを生じさせることを意味する。前記細胞に前記アンチセンスオリゴマー及び前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーを取り込ませる方法としては、カチオン性リポソーム、カチオン性ポリマー等のカチオン性担体、又はウイルスエンベロープを利用した担体を用いた導入方法が挙げられる。カチオン性リポソームとしては、例えば、２－Ｏ－（２－ジエチルアミノエチル）カルバモイル－１，３－Ｏ－ジオレオイルグリセロールとリン脂質とを必須構成成分として形成されるリポソーム（以下、「リポソームＡ」という）、オリゴフェクトアミン（登録商標）（Invitrogen社製）、リポフェクチン（登録商標）（Invitrogen社製）、リポフェクトアミン（登録商標）（Invitrogen社製）、Lipofectamine 2000（登録商標）（Invitrogen社製）、DMRIE-C（登録商標）（Invitrogen社製）、GeneSilencer（登録商標）（Gene Therapy Systems社製）、TransMessenger（登録商標）（QIAGEN社製）、TransIT TKO（登録商標）（Miruｓ社製）、Nucleofector II（Lonza）を挙げることができる。それらの中で、リポソームＡが好ましい。カチオン性ポリマーとしては、例えば、JetSI（登録商標）（Qbiogene社製）、Jet-PEI（登録商標）（ポリエチレンイミン、Qbiogene社製）を挙げることができる。ウイルスエンベロープを利用した担体としては、例えば、GenomeOne（登録商標）（HVJ-Eリポソーム、石原産業社製）を挙げることができる。あるいは、特許２９２４１７９号に記載の医薬デバイス、再公表特許公報第２００６／１２９５９４号及び再公表特許公報第２００８／０９６６９０号に記載のカチオン性担体を用いることもできる。
また、患者の体内において目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡを発現する細胞に前記アンチセンスオリゴマー及び前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーを取り込ませる方法としては項目「３．医薬用途」に記載する投与方法を参照することができる。
本発明の増大方法において前記目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡのスプライシングサイレンサー配列、スプライス部位配列、又はブランチ部位配列を阻害することにより、同阻害を行わない場合に得られるマルチエクソンスキッピングの効率を１００とした場合、同効率が２％以上、４％以上、６％以上、８％以上、１０％以上、１２％以上、１４％以上、１６％以上、１８％以上、２０％以上、２２％以上、２４％以上、２６％以上、２８％以上、３０％以上、３２％以上、３４％以上、３６％以上、３８％以上、４０％以上、４２％以上、４４％以上、４６％以上、４８％以上、５０％以上、５２％以上、５４％以上、５６％以上、５８％以上、６０％以上、６２％以上、６４％以上、６６％以上、６８％以上、７０％以上、７２％以上、７４％以上、７６％以上、７８％以上、８０％以上、８２％以上、８４％以上、８６％以上、８８％以上、９０％以上、９２％以上、９４％以上、９６％以上、９８％以上、又は１００％以上増大する。
本発明の増大方法において、目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡは、例えば、ヒトγ－サルコグリカン（ＳＧＣＧ）、ヒトＮｏｔｃｈ３、及びヒトジストロフィンのｐｒｅ－ｍＲＮＡが挙げられる。本発明のある態様において目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡはヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡである。目的ｐｒｅ－ｍＲＮＡはヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡである場合、前記２つ以上の番号順に連続するエクソンは、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるエクソンである。
以下に、実施例及び試験例を挙げて、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明は実施例に示される範囲に限定されるものではない。
［実施例１：アンチセンスオリゴマーの製造］
アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（４－ベンズアミド－２－オキソピリミジン－１－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物１）の製造
工程１：４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（４－ベンズアミド－２－オキソピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸の製造
アルゴン雰囲気下、Ｎ－｛１－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イル｝ベンズアミド３．４４ｇと４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）１．１ｇをジクロロメタン５０ｍＬに懸濁し、無水コハク酸０．９０ｇを加え、室温で３時間撹拌した。反応液にメタノール１０ｍＬを加え、減圧濃縮した。残渣に酢酸エチルと０．５Ｍのリン酸二水素カリウム水溶液を用いて抽出操作を行った。得られた有機層を０．５Ｍのリン酸二水素カリウム水溶液、水、飽和食塩水で順に洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮し、４．０ｇの目的物を得た。
工程２：アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（４－ベンズアミド－２－オキソピリミジン－１－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸の製造
４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（４－ベンズアミド－２－オキソピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸４．０ｇをピリジン（脱水）２００ｍＬに溶解し、４－ＤＭＡＰ０．７３ｇ、１－エチル－３‐（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩１１．５ｇを加えた。次いで、アミノポリスチレン樹脂：Primer support 200 amino（GE Healthcare Japan社製、17-5214-97）２５．０ｇ、トリエチルアミン８．５ｍＬを加え、室温で４日間振とうした。反応後、樹脂をろ取した。得られた樹脂をピリジン、メタノール、ジクロロメタンで順に洗浄し、減圧乾燥した。得られた樹脂にテトラヒドロフラン（脱水）２００ｍＬ、無水酢酸１５ｍＬ、２，６－ルチジン１５ｍＬを加え、室温で２時間振とうした。樹脂をろ取し、ピリジン、メタノール、ジクロロメタンで順に洗浄し、減圧乾燥し、２６．７ｇの目的物を得た。
当該目的物のローディング量は、公知の方法を用いて、樹脂１ｇ当たりのトリチルのモル量を４０９ｎｍにおけるＵＶ吸光度を測定することにより決定した。樹脂のローディング量は、１２９．２μｍｏｌ／ｇであった。
UV測定条件
機器：U-2910（日立製作所）
溶媒：メタンスルホン酸
波長：409 nm
ε値：45000
アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（５－メチル－２，４－ジオキソピリミジン－１－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物２）の製造
化合物１と同様の方法に従って、標記化合物を製造した。但し、化合物１の製造の工程１で用いたＮ－｛１－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イル｝ベンズアミドの代わりに、本工程では、１－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］－５－メチルピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオンを使用した。
当該目的物のローディング量は、公知の方法を用いて、樹脂１ｇ当たりのトリチルのモル量を４０９ｎｍにおけるＵＶ吸光度を測定することにより決定した。樹脂のローディング量は、１６４．０μｍｏｌ／ｇであった。
アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（６－ベンズアミドプリン－９－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物３）の製造
化合物１と同様の方法に従って、標記化合物を製造した。但し、化合物１の製造の工程１で用いたＮ－｛１－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イル｝ベンズアミドの代わりに、本工程では、Ｎ－｛９－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］プリン－６－イル｝ベンズアミドを使用した。
当該目的物のローディング量は、公知の方法を用いて、樹脂１ｇ当たりのトリチルのモル量を４０９ｎｍにおけるＵＶ吸光度を測定することにより決定した。樹脂のローディング量は、１８５．７μｍｏｌ／ｇであった。
アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛｛（２Ｓ，６Ｒ）－６－｛６－（２－シアノエトキシ）－２－［（２－フェノキシアセチル）アミノ］プリン－９－イル｝－４－トリチルモルホリン－２－イル｝メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物４）の製造
化合物１と同様の方法に従って、標記化合物を製造した。但し、化合物１の製造の工程１で用いたＮ－｛１－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリミジン－４－イル｝ベンズアミドの代わりに、本工程では、Ｎ－｛６－（２－シアノエトキシ）－９－［（２Ｒ，６Ｓ）－６－（ヒドロキシメチル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］プリン－２－イル｝－２－フェノキシアセトアミドを使用した。
当該目的物のローディング量は、公知の方法を用いて、樹脂１ｇ当たりのトリチルのモル量を４０９ｎｍにおけるＵＶ吸光度を測定することにより決定した。樹脂のローディング量は、１６４．８μｍｏｌ／ｇであった。
ヒトジストロフィン遺伝子のイントロンのドナー付近又はアクセプター付近の領域を標的とするアンチセンスＰＭＯの製造
以下の記載に従い、表１０に示すヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡのイントロン４４～５５のドナー付近又はアクセプター付近の領域を標的とする、表１１のＰＭＯ Ｎｏ．１～２３２の塩基配列（配列番号１～２３２）を有するＰＭＯを合成した。ＰＭＯの５’末端は下記基（３）である。合成したＰＭＯを注射用水（大塚製薬工場社製）で溶解した。
なお、本発明のアンチセンスオリゴマー又は本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーの標的塩基配列は、「Ha1_b1-c1」、「Ha2_b2-c2_Ha3_b3-c3」、又は「Ha4_b4-c4_Ha5_b5-c5_Ha6_b6-c6」のように記載した。
「Ha1_b1-c1」は、本明細書における第一の態様のアンチセンスオリゴマーの標的塩基配列である。「Ha1」はヒトジストロフィン遺伝子の第ａ番目のエクソンを表し、「b1」は標的塩基配列の５’末端の塩基を表し、「c1」は標的塩基配列の３’末端の塩基を表す。「Ha1_b1-c1」は、その３’末端に付加的な１塩基を有していてもよく、そのような標的塩基配列は、「Ha1_b1-c1_N」で表される（「N」は任意の塩基を表す）。
「b1」、「c1」が正の整数の場合、「b1」、「c1」はそれぞれ、第ａ番目のエクソンの５’末端塩基を１番目の塩基としたときに、３’末端方向の何番目の塩基なのかを表す。一方、「b1」、「c1」が負の整数である場合、「b1」、「c1」はそれぞれ、第（ａ－１）番目のイントロンの３’末端の塩基を－１番目としたときに、５’末端方向の何番目の塩基なのかを表す。
例えば、「H45_(-10)-15」の場合、当該標的塩基配列の５’末端が第４４番目のイントロンの３’末端から５’末端方向に１０番目の塩基であり、当該標的塩基配列の３’末端が第４５番目のエクソンの５’末端から３’末端方向に１５番目の塩基である塩基配列を意味する。
「Ha2_b2-c2_Ha3_b3-c3」は、本明細書における第二の態様のアンチセンスオリゴマーの標的塩基配列である。「Ha2_b2-c2_Ha3_b3-c3」の第１の部分である「Ha2_b2-c2」は、該アンチセンスオリゴマーを構成する３’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列を意味し、第２の部分である「Ha3_b3-c3」は、該アンチセンスオリゴマーを構成する５’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列を意味する。「Ha3_b3-c3」は、その３’末端に付加的な１塩基を有していてもよく、そのような標的塩基配列は、「Ha2_b2-c2_Ha3_b3-c3_N」で表される（「N」は任意の塩基を表す）。各「Ha2_b2-c2」及び「Ha3_b3_-c3」は、上記「Ha1_b1-c1」の表記方法と同様である。
なお、「Ha2」と「Ha3」が同じである場合には、「_Ha3」部分を省略することもできる。
例えば、「H45_(-5)-5_25-35」又は「H45_(-5)-5_H45_25-35」の場合、アンチセンスオリゴマーを構成する３’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列が「H45_(-5)-5」であり、５’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列が「H45_25-35」である塩基配列を意味する。
「Ha4_b4-c4_Ha5_b5-c5_Ha6_b6-c6」は、本明細書における第三の態様のアンチセンスオリゴマーの標的塩基配列である。「Ha4_b4-c4_Ha5_b5-c5_Ha6_b6-c6」の第１の部分である「Ha4_b4-c4」は、該アンチセンスオリゴマーを構成する３’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列を意味し、第２の部分である「Ha5_b5-c5」は、該アンチセンスオリゴマーを構成する中間部ユニットオリゴマーの標的塩基配列を意味し、第３の部分である「Ha6_b6-c6」は、該アンチセンスオリゴマーを構成する５’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列を意味する。「Ha6_b6-c6」は、その３’末端に付加的な１塩基を有していてもよく、そのような標的塩基配列は、「Ha4_b4-c4_Ha5_b5-c5_Ha6_b6-c6_N」で表される（「N」は任意の塩基を表す）。各「Ha4_b4-c4」、「Ha5_b5_-c5」、及び「Ha6_b6_-c6」は、上記「Ha1_b1-c1」の表記方法と同様である。
なお、「Ha4」と「Ha5」及び「Ha6」が同じである場合には、「_Ha5」及び「_Ha6」部分を省略することもできる。
例えば、「H45_(-5)-5_25-35_60-70」又は「H45_(-5)-5_H45_25-35_H45_60-70」の場合、アンチセンスオリゴマーを構成する３’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列が「H45_(-5)-5」であり、中間部分ユニットオリゴマーの標的塩基配列が「H45_25-35」であり、５’末端側ユニットオリゴマーの標的塩基配列が「H45_60-70」である塩基配列を意味する。
表１１のＰＭＯの中、
Ｒ２を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．２２～７１、９１～９３、９８～９９が挙げられ、さらに別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．２２～５９、９１～９３、９８～９９が挙げられ；
Ｒ４を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１５０～１６３が挙げられ、さらに別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１５０～１６０が挙げられ；
Ｒ６を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１７１～１７７が挙げられ、さらに別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１７１～１７６が挙げられ；
Ｒ８を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１８０が挙げられ；Ｒ１０を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１８３が挙げられ；Ｒ１２を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１８６～１９１が挙げられ；
Ｒ１６を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１９７、１９８が挙げられ、さらに別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１９７が挙げられ；
Ｒ１８を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．２０１～２０６が挙げられ；
Ｒ２２を標的領域とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．２１７～２２３が挙げられ、さらに別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．２１７～２２２が挙げられ；
Ｒ２４を標的とするものは、別の態様においてはＰＭＯ Ｎｏ．１２８～１４２が挙げられる。
５’末端塩基に対応する、アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（４－ベンズアミド－２－オキソピリミジン－１－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物１）、アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（５－メチル－２，４－ジオキソピリミジン－１－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物２）、アミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛［（２Ｓ，６Ｒ）－６－（６－ベンズアミドプリン－９－イル）－４－トリチルモルホリン－２－イル］メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物３）、又はアミノポリスチレン樹脂に担持された４－｛｛（２Ｓ，６Ｒ）－６－｛６－（２－シアノエトキシ）－２－［（２－フェノキシアセチル）アミノ］プリン－９－イル｝－４－トリチルモルホリン－２－イル｝メトキシ｝－４－オキソブタン酸（化合物４）０．２ｇをフィルター付きカラムに充填し、核酸合成機（AKTA Oligopilot 10 plus）を使用して、表１２に示す合成サイクルを開始した。表１１に記載の各ＰＭＯの塩基配列になるよう、各カップリングサイクルにおいて所望のモルホリノモノマー化合物を添加した（表１２を参照）。
なお、デブロック溶液としては、３％（ｗ／ｖ）トリフルオロ酢酸を含有するジクロロメタン溶液を用いた。中和・洗浄溶液としては、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを１０％（ｖ／ｖ）になるように、かつテトラヒドロフランを５％（ｖ／ｖ）になるように、３５％（ｖ／ｖ）のアセトニトリルを含有するジクロロメタン溶液で溶解したものを用いた。カップリング溶液Ａとしては、モルホリノモノマー化合物を０．１０Ｍになるように、テトラヒドロフランで溶解したものを用いた。カップリング溶液Ｂとしては、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを２０％（ｖ／ｖ）になるように、かつテトラヒドロフランを１０％（ｖ／ｖ）になるように、アセトニトリルで溶解したものを用いた。キャッピング溶液としては、アセトニトリルに対して２０％（ｖ／ｖ）の無水酢酸と３０％（ｖ／ｖ）の２，６－ルチジンを溶解したものを使用した。
モルホリノモノマー化合物としては、表１３に記載のモルホリノモノマー化合物（Ａ）、モルホリノモノマー化合物（Ｃ）、モルホリノモノマー化合物（Ｔ）、及びモルホリノモノマー化合物（Ｇ）を用いた。
上記で合成したＰＭＯが担持されたアミノポリスチレン樹脂を反応容器から回収し、２時間以上室温で減圧乾燥した。乾燥したアミノポリスチレン樹脂に担持されたＰＭＯを反応容器に入れ、２８％アンモニア水－エタノール（１／４）５ｍＬを加え、５５℃で１５時間撹拌した。アミノポリスチレン樹脂をろ別し、水－エタノール（１／４）１ｍＬで洗浄した。得られたろ液を減圧濃縮した。得られた残渣を２０ｍＭの酢酸－トリエチルアミン緩衝液（ＴＥＡＡ緩衝液）とアセトニトリルの混合溶媒（４／１）１０ｍＬに溶解し、メンブレンフィルターでろ過した。得られたろ液を逆相ＨＰＬＣにて精製した。使用した条件を表１４に示す。
各フラクションを分析して、目的物を回収し、減圧濃縮した。濃縮残渣に２Ｍのリン酸水溶液０．５ｍＬを加え、１５分間攪拌した。さらに、２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液２ｍＬを加えてアルカリ性とし、メンブレンフィルター（０．４５μｍ）でろ過した。
得られた目的物を含有する水溶液を陰イオン交換樹脂カラムで精製した。使用した条件を表１５に示す。
各フラクションを分析（ＨＰＬＣ）し、目的物を水溶液として得た。得られた水溶液に０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ６．０）を添加し中和した。次いで、表１６に示す条件で逆相ＨＰＬＣにて脱塩した。
目的物を回収し、減圧濃縮した。得られた残渣を水に溶かし、凍結乾燥して、白色綿状固体として目的化合物である各ＰＭＯを得た。ＥＳＩ－ＴＯＦ－ＭＳの計算値、測定値を下記表１７に示す。
ヒトジストロフィン遺伝子のイントロン中のスプライシングサイレンサー又はシングルスキッピングに関与するスプライス部位を標的とするアンチセンスＰＭＯの製造
イントロンのドナー付近又はアクセプター付近の領域を標的とするＰＭＯと同様の方法で、ヒトジストロフィン遺伝子の（ｉ）イントロン４４のスプライシングサイレンサー配列又はシングルスキッピングに関与するスプライス部位を標的とするＰＭＯ Ｎｏ．２３３の塩基配列（配列番号２５７）を有するＰＭＯ、（ｉｉ）イントロン４５のスプライシングサイレンサー配列又はシングルスキッピングに関与するスプライス部位を標的とするＰＭＯ Ｎｏ．２３４～２４４の塩基配列（配列番号２５８～２６８）を有するＰＭＯ、（ｉｉｉ）イントロン４４のアクセプター付近の領域（Ｒ２）とイントロン４５のスプライシングサイレンサー配列又はシングルスキッピングに関与するスプライス部位を標的とするＰＭＯ Ｎｏ．２４５～２４９の塩基配列（配列番号２６９～２７３）を有するＰＭＯ（連結型）、及び（ｉｖ）エクソン４５のスプライシングサイレンサー配列を標的とするＰＭＯ Ｎｏ．２５０～２５１の塩基配列（配列番号２７４～２７５）を有するＰＭＯを合成した。各ＰＭＯの５’末端は、イントロンのドナー付近又はアクセプター付近の領域を標的とするＰＭＯと同様に基（３）である。各ＰＭＯを表１８に示し、ＥＳＩ－ＴＯＦ－ＭＳの計算値、測定値を表１９に示す。
下線はイントロン中のスプライシングサイレンサー配列又はシングルスキッピングに関与するスプライス部位に対応すると予想される塩基配列を示す。
［実施例２：アンチセンスオリゴマーのマルチエクソンスキッピング活性試験］
＜試験例１＞
ヒトジストロフィン遺伝子のマルチエクソンスキッピングのＩｎ ｖｉｔｒｏアッセイ（１）：マルチエクソンスキッピングの誘導
手順
ＲＤ細胞（ヒト横紋筋肉腫細胞株、ＣＣＬ－１３６、ＡＴＣＣより購入）３．５×１０５個に対して、表１１のアンチセンスオリゴマー（ＰＭＯ Ｎｏ．５５、５９、７８、６５、７５、７７、１０２、３５、５２、４７、５０、４６、４３、４０、１３９、１１９、１４２、１１３、５１、１１、４５、５４、４１、７４、６６、６４、６３、６８、７６、２８、２７、２２５、２２８、１、５、１３２、１３１、１２８、１６３、１６２、及び１６１（配列番号５５、５９、７８、６５、７５、７７、１０２、３５、５２、４７、５０、４６、４３、４０、１３９、１１９、１４２、１１３、５１、１１、４５、５４、４１、７４、６６、６４、６３、６８、７６、２８、２７、２２５、２２８、１、５、１３２、１３１、１２８、１６３、１６２、及び１６１））をそれぞれ２５～５０μＭの濃度で単独、あるいは２，３本の組合せで導入した。試薬はAmaxa Cell Line Nucleofector Kit Lを用いてNucleofector II（Lonza）により導入した。プログラムはT-030を用いた。
導入後、細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（インビトロジェン社製）を含むEagle's minimal essential medium（ＥＭＥＭ）培地（シグマ社製、以下同じ）２ｍＬ中、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で三晩培養した。
細胞をＰＢＳ（ニッスイ社製、以下同じ）で１回洗浄した後、１％の２－メルカプトエタノール（ナカライテスク社製）を含むBuffer RLT（キアゲン社製）を３５０μＬ細胞に添加し、数分間室温に放置して細胞を溶解させ、QIAshredder ホモジナイザー（キアゲン社製）に回収した。１５，０００ｒｐｍで２分間遠心し、ホモジネートを作製した。RNeasy Mini Kit（キアゲン社製）に添付のプロトコールに従って全ＲＮＡを抽出した。抽出した全ＲＮＡの濃度はNanoDrop ND-1000（エル・エム・エス社製）を用いて測定した。
抽出した全ＲＮＡ８００ｎｇに対し、QIAGEN OneStep RT-PCR Kit（キアゲン社製）を用いてＯｎｅ－Ｓｔｅｐ ＲＴ－ＰＣＲを行った。キットに添付のプロトコールに従って、反応液を調製した。サーマルサイクラーはTaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch（タカラバイオ社製）を用いた。用いたＲＴ－ＰＣＲのプログラムは、以下のとおりである。
50℃、30分間：逆転写反応
95℃、15分間：ポリメラーゼ活性化、逆転写酵素不活性化、cDNA熱変性
[94℃、10秒間：57℃、30秒間；72℃、1分間]×33サイクル：PCR増幅
72℃、10分間：最終伸長反応
ＲＴ－ＰＣＲに使用したフォワードプライマーとリバースプライマーの塩基配列は以下のとおりである。
フォワードプライマー：5'-ATTTGACAGATCTGTTGAGAAATGG-3'（配列番号276）リバースプライマー1：5'-GGCTGTTTTCATCCAGGTTGTG-3'（配列番号277）リバースプライマー2：5'-AGTTGCTGCTCTTTTCCAGGT-3'（配列番号278）
フォワードプライマーとリバースプライマー２の組合せで、エクソン４５～５５のマルチエクソンスキッピングが生じた転写産物を検出することができる。また、フォワードプライマーとリバースプライマー１の組合せで、スキッピングが生じていない転写産物及びエクソン４５の単独エクソンスキッピングが生じた転写産物を検出することができる。
上記ＰＣＲの反応産物をBioanalyzer（アジレント社製）及びMultiNA（島津製作所社製）を用いて解析した。
エクソン４５～５５のうちいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンがスキップしたバンドのポリオリゴヌクレオチド量「Ａ」と、エクソン４５～５５のうちいずれか１つのエクソンがスキッピングしたバンドのポリヌクレオチド量「Ｂ」と、スキッピングが生じていないバンドのポリオリゴヌクレオチド量「Ｃ」を測定した。これら「Ａ」、「Ｂ」、及び「Ｃ」の測定値に基づき、以下の式に従って、マルチエクソンスキッピングのスキッピング効率を求めた。
スキッピング効率（％）＝Ａ／（Ａ＋Ｂ＋Ｃ）×１００
結果
結果を図１～１６に示す。ＰＭＯ Ｎｏ．５５、５９、７８、６５、７５、７７、１０２、３５、５２、４７、５０、４６、４３、４０、１３９、１１９、１４２、１１３、５１、１１、４５、５４、４１、７４、６６、６４、６３、６８、７６、２８、２７、２２５、２２８、１、５、１３２、１３１、１２８、１６３、１６２、及び１６１（配列番号５５、５９、７８、６５、７５、７７、１０２、３５、５２、４７、５０、４６、４３、４０、１３９、１１９、１４２、１１３、５１、１１、４５、５４、４１、７４、６６、６４、６３、６８、７６、２８、２７、２２５、２２８、１、５、１３２、１３１、１２８、１６３、１６２、及び１６１）を単独で、あるいは組合せて導入することにより、エクソン４５～５５のマルチエクソンスキッピングが誘導された。
したがって、表１１に記載の本発明のアンチセンスオリゴマーは、単独で又は組合せて用いることにより、マルチエクソンスキッピングを有効に誘導する、あるいは誘導するであろうことが判明した。
なお、ＰＭＯ Ｎｏ．６、７、８、１０、１４、２６、２９、３８、３９、５３、５８、６７、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１３０、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、２３１、２３２（配列番号６、７、８、１０、１４、２６、２９、３８、３９、５３、５８、６７、８０、８２、８６、９２、９７、９８、１００、１２１、１２２、１２４、１２５、１２６、１３０、１４４、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、２３１、２３２）を導入することによっても、エクソン４５～５５のマルチエクソンスキッピングが誘導されることが確認されている。
＜試験例２＞
ヒトジストロフィン遺伝子のマルチエクソンスキッピングのＩｎ ｖｉｔｒｏアッセイ（２）：マルチエクソンスキッピングの促進
手順
ＲＤ細胞（ヒト横紋筋肉腫細胞株、CCL-136, ATCCより購入）３．５×１０５個に対して、表１１のアンチセンスオリゴマー（ＰＭＯ Ｎｏ．７５）２５～５０μＭに加えて、表１８のアンチセンスオリゴマー（ＰＭＯ Ｎｏ．２３６、２３７、又は２３９）２５～５０μＭを組合せて導入し、試験例１と同様の手順でアッセイを行った。
結果
結果を図１７及び１８に示す。ＰＭＯ Ｎｏ．７５（配列番号７５）単独の場合と比較して、ＰＭＯ Ｎｏ．２３６、２３７、又は２３９（配列番号２６０、２６１、又は２６３）を組合せて導入した場合には、エクソン４５～５５のマルチエクソンスキッピングのスキッピング効率が増大した。一方、エクソン４５の単独エクソンスキッピングのスキッピング効率は減少した。
したがって、表１１に記載の本発明のアンチセンスオリゴマーに表１８に記載の本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを組合せて用いることにより、マルチエクソンスキッピングを促進する、あるいは促進するであろうことが判明した。
＜試験例３＞
ヒトジストロフィン遺伝子のマルチエクソンスキッピングのＩｎ ｖｉｔｒｏアッセイ（３）：全般的なマルチエクソンスキッピングの促進
手順
試験例３はＯｎｅ－Ｓｔｅｐ ＲＴ－ＰＣＲを以下のように行ったことを除き、試験例２と同様の手順で行った。
抽出した全ＲＮＡ８００ｎｇに対し、QIAGEN OneStep RT-PCR Kit（キアゲン社製）を用いてＯｎｅ－Ｓｔｅｐ ＲＴ－ＰＣＲを行った。キットに添付のプロトコールに従って、反応液を調製した。サーマルサイクラーはTaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch（タカラバイオ社製）を用いた。用いたＲＴ－ＰＣＲのプログラムは、以下のとおりである。
50℃、30分間：逆転写反応
95℃、15分間：ポリメラーゼ活性化、逆転写酵素不活性化、cDNA熱変性
[94℃、10秒間；60℃、30秒間；72℃、2分間]×40サイクル：PCR増幅
72℃、10分間：最終伸長反応
ＲＴ－ＰＣＲに使用したフォワードプライマーとリバースプライマーの塩基配列は以下のとおりである。
フォワードプライマー2：5'-ATTTGACAGATCTGTTGAGAAATGG-3'（配列番号279）リバースプライマー3：5'-GGCTCCAATAGTGGTCAGTCC-3'（配列番号280）フォワードプライマー3：5'-CCTGAGAATTGGGAACATGC-3'（配列番号281）リバースプライマー4: 5'-CCTCCTTCCATGACTCAAGC-3'（配列番号282）
ヒトジストロフィン遺伝子の、エクソン４５～４６、エクソン４５～４７、エクソン４５～４８、又はエクソン４５～４９のマルチエクソンスキッピングが生じた転写産物は、フォワードプライマー２とリバースプライマー３の組合せで検出することができる。一方、エクソン４５～４６、エクソン４５～４７、エクソン４５～４８、エクソン４５～４９、エクソン４５～５０、エクソン４５～５１、又はエクソン４５～５２のマルチエクソンスキッピングが生じた転写産物は、フォワードプライマー３とリバースプライマー４の組合せで検出される。
上記ＰＣＲの反応産物をBioanalyzer（アジレント社製）及びMultiNA（島津製作所社製）を用いて分析し、各エクソンスキッピングが生じた転写産物のＰＣＲ産物量を定量した。
結果
結果を図１９～２２に示す。ＰＭＯ Ｎｏ．７５（配列番号７５）単独の場合と比較して、ＰＭＯ Ｎｏ．２３６又は２３９（配列番号２６０又は２６３）を組合せて導入した場合には、エクソン４５～５５のマルチエクソンスキッピングのスキッピング（試験例２）に加えて、エクソン４５～４６、エクソン４５～４７、エクソン４５～４８、又はエクソン４５～４９、エクソン４５～５０、エクソン４５～５１、及びエクソン４５～５２のマルチエクソンスキッピングのスキッピング効率も増大した。
したがって、表１１に記載の本発明のアンチセンスオリゴマーに表１８に記載の本発明のサプレッサーアンチセンスオリゴマーを組合せて用いることにより、全般的にマルチエクソンスキッピングを促進する、あるいは促進するであろうことが判明した。
本発明によりヒトジストロフィンのマルチエクソンスキッピングを可能にするアンチセンスオリゴマー及びサプレッサーアンチセンスオリゴマーが提供される。本発明のアンチセンスオリゴマー及びサプレッサーアンチセンスオリゴマーを用いることにより、新たなＤＭＤ治療薬及び治療方法が提供される。

Claims (13)

  1. （ｉ）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡにおける第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンを同時にスキッピングさせるアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物、及び
    （ｉｉ）ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか１つのエクソンが単一でスキッピングすることを抑制するサプレッサーアンチセンスオリゴマー若しくはその医薬的に許容可能な塩又はそれらの水和物
    を含む医薬組成物であって、
    （１）前記アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６０からなるオリゴマーであるか、
    （２）前記アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６１からなるオリゴマーであるか、又は
    （３）前記アンチセンスオリゴマーが配列番号７５からなるオリゴマーであり、前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーが配列番号２６３からなるオリゴマーである、
    医薬組成物。
  2. 前記アンチセンスオリゴマー及び／又は前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーがオリゴヌクレオチドである、請求項１に記載の医薬組成物。
  3. 前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドの糖部分及び／又はリン酸結合部分が修飾されている、請求項２に記載の医薬組成物。
  4. 前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドの糖部分が、２’位の－ＯＨ基が、－ＯＲ、－Ｒ、－Ｒ’ＯＲ、－ＳＨ、－ＳＲ、－ＮＨ２、－ＮＨＲ、－ＮＲ２、－Ｎ３、－ＣＮ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、及び－Ｉからなる群より選択されるいずれかの基で置換されたリボースである、請求項２又は３に記載の医薬組成物
    （前記Ｒは、アルキル又はアリールを示し、前記Ｒ’は、アルキレンを示す。）。
  5. 前記オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１つのヌクレオチドのリン酸結合部分が、ホスホロチオエート結合、ホスホロジチオエート結合、アルキルホスホネート結合、ホスホロアミデート結合、及びボラノフォスフェート結合からなる群より選択されるいずれか１つのものである、請求項２～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  6. 前記アンチセンスオリゴマー及び／又は前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーがモルホリノオリゴマーである、請求項１に記載の医薬組成物。
  7. 前記アンチセンスオリゴマー及び／又は前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーがホスホロジアミデートモルホリノオリゴマーである、請求項６に記載の医薬組成物。
  8. 前記アンチセンスオリゴマー及び／又は前記サプレッサーアンチセンスオリゴマーの５’末端が、下記化学式（１）～（３）のいずれかの基である、請求項６又は７に記載の医薬組成物。
  9. さらに医薬的に許容可能な担体を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  10. 筋ジストロフィーの治療のための、請求項１～９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  11. ヒト患者に投与するための、請求項１～１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  12. 前記患者が、ジストロフィン遺伝子にエクソン４５～５５スキップの対象となる変異を有する患者である、請求項１１に記載の医薬組成物。
  13. 前記治療が、ヒトジストロフィンｐｒｅ－ｍＲＮＡの第４５番目のエクソンから第５５番目のエクソンからなる群より選択されるいずれか２つ以上の番号順に連続するエクソンのスキッピングを行うことを伴う、請求項１０～１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20240279666A1 (en) * 2021-07-02 2024-08-22 Aarhus Universitet Methods of treating alzheimer's disease
JP2025079347A (ja) * 2022-03-11 2025-05-22 日本新薬株式会社 キャリアペプチドが連結された核酸
WO2024196804A1 (en) * 2023-03-17 2024-09-26 The Regents Of The University Of California Factor viii splice-modulating antisense oligonucleotides and methods of use

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012506697A (ja) 2008-10-27 2012-03-22 プロセンサ テクノロジーズ ベー．フェー． Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーｍＲＮＡ前駆体のエクソン４５の効率的なスキッピングのための方法及び手段
JP2012506703A (ja) 2008-10-24 2012-03-22 エイブイアイ バイオファーマ， インコーポレイテッド Ｄｍｄのための複数のエキソンスキッピング組成物
JP2013510561A (ja) 2009-11-12 2013-03-28 ジ ユニバーシティ オブ ウェスタン オーストラリア 病状を治療するためのアンチセンス分子及び方法
WO2013100190A1 (ja) 2011-12-28 2013-07-04 日本新薬株式会社 アンチセンス核酸
JP2015509922A (ja) 2012-01-27 2015-04-02 プロセンサ テクノロジーズ ビー．ブイ．Ｐｒｏｓｅｎｓａ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｂ．Ｖ． デュシェンヌ型及びベッカー型筋ジストロフィーの治療のための改善された特徴を有するｒｎａ調節オリゴヌクレオチド
WO2018129384A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Avidity Biosciences Llc Nucleic acid-polypeptide compositions and methods of inducing exon skipping
WO2019060775A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Avidity Biosciences Llc NUCLEIC ACID-POLYPEPTIDE COMPOSITIONS AND EXON JUMP INDUCTION METHODS

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3398378B2 (ja) 1989-12-20 2003-04-21 アンチビラルス・インコーポレイテツド リン含有キラルインターサブユニットリンケージを有する非電荷モルホリノ―基体ポリマー
JP2924179B2 (ja) 1993-02-19 1999-07-26 日本新薬株式会社 グリセロール誘導体，デバイス及び医薬組成物
JP4777777B2 (ja) 2002-11-25 2011-09-21 雅文 松尾 ｍＲＮＡ前駆体のスプライシングを修飾するＥＮＡ核酸医薬
CA2524255C (en) * 2003-03-21 2014-02-11 Academisch Ziekenhuis Leiden Modulation of exon recognition in pre-mrna by interfering with the secondary rna structure
ATE498685T1 (de) * 2004-06-28 2011-03-15 Univ Western Australia Antisense-oligonukleotide zur induktion von exon- skipping sowie verfahren zur verwendung davon
EP1857548A1 (en) 2006-05-19 2007-11-21 Academisch Ziekenhuis Leiden Means and method for inducing exon-skipping
AU2008317566B2 (en) * 2007-10-26 2014-05-01 Academisch Ziekenhuis Leiden Means and methods for counteracting muscle disorders
MX2010004955A (es) 2007-11-15 2010-06-30 Avi Biopharma Inc Metodo de sintesis de oligomeros de morfolina.
EP2119783A1 (en) 2008-05-14 2009-11-18 Prosensa Technologies B.V. Method for efficient exon (44) skipping in Duchenne Muscular Dystrophy and associated means
US8084601B2 (en) 2008-09-11 2011-12-27 Royal Holloway And Bedford New College Royal Holloway, University Of London Oligomers
TWI541024B (zh) * 2010-09-01 2016-07-11 日本新藥股份有限公司 反義核酸
NZ731587A (en) * 2013-03-14 2021-07-30 Sarepta Therapeutics Inc Exon skipping compositions for treating muscular dystrophy
SMT201900169T1 (it) * 2014-03-12 2019-05-10 Nippon Shinyaku Co Ltd Acido nucleico antisenso
SI3351633T1 (sl) * 2015-09-15 2020-09-30 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Protismiselna nukleinska kislina
EP3735462A1 (en) * 2018-01-05 2020-11-11 The Board of Regents of The University of Texas System Therapeutic crispr/cas9 compositions and methods of use
IL277889B2 (en) * 2018-04-12 2025-01-01 Wave Life Sciences Ltd Oligonucleotide preparations and methods of using them
EP3829595A4 (en) * 2018-08-02 2022-08-24 Dyne Therapeutics, Inc. MUSCLE-DIRECTED COMPLEXES AND USES THEREOF IN THE TREATMENT OF DYSTROPHINOPATHIES
CN118109468A (zh) * 2019-12-26 2024-05-31 日本新药株式会社 诱导外显子50的跳读的反义核酸
US20230140736A1 (en) * 2020-02-28 2023-05-04 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Antisense nucleic acid inducing skipping of exon 51

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012506703A (ja) 2008-10-24 2012-03-22 エイブイアイ バイオファーマ， インコーポレイテッド Ｄｍｄのための複数のエキソンスキッピング組成物
JP2012506697A (ja) 2008-10-27 2012-03-22 プロセンサ テクノロジーズ ベー．フェー． Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーｍＲＮＡ前駆体のエクソン４５の効率的なスキッピングのための方法及び手段
JP2013510561A (ja) 2009-11-12 2013-03-28 ジ ユニバーシティ オブ ウェスタン オーストラリア 病状を治療するためのアンチセンス分子及び方法
WO2013100190A1 (ja) 2011-12-28 2013-07-04 日本新薬株式会社 アンチセンス核酸
JP2015509922A (ja) 2012-01-27 2015-04-02 プロセンサ テクノロジーズ ビー．ブイ．Ｐｒｏｓｅｎｓａ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｂ．Ｖ． デュシェンヌ型及びベッカー型筋ジストロフィーの治療のための改善された特徴を有するｒｎａ調節オリゴヌクレオチド
WO2018129384A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Avidity Biosciences Llc Nucleic acid-polypeptide compositions and methods of inducing exon skipping
WO2019060775A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Avidity Biosciences Llc NUCLEIC ACID-POLYPEPTIDE COMPOSITIONS AND EXON JUMP INDUCTION METHODS

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