JP7385273B2 - 細胞培養方法及びマイクロファイバ - Google Patents
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Landscapes
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Description
(a)Qcoreを25〔μL/min〕とし、Qshell を75〔μL/min〕とした点
(b)コア部分の流体に含まれる細胞をヒトiPS細胞とし、その密度を1×106 ~1×108 〔cells/mL〕とした点
(c)コア部分の流体として、コラーゲンゲル(細胞外マトリクス(ECM))、アルギン酸ゲル(細胞外マトリクスを含まない)、マトリゲル(人工基底膜マトリックス)、及び、液体培地(ゲルを含まない)を使用した点
このような製造方法に従って製造された直後の中空マイクロファイバであって、ヒトiPS細胞が内部(コア部分)に含まれる中空マイクロファイバ、すなわち、ヒトiPS細胞ファイバの写真が図1に示されている。
Claims (7)
- 細胞培養方法であって、
(a)プライム型多能性幹細胞を含むコア部分と、該コア部分を被覆する管状のアルギン酸ゲルを有するシェル部分とを備えるマイクロファイバを製造する工程と、
(b)ROCK阻害剤を添加した培地中で、前記プライム型多能性幹細胞を前記マイクロファイバの内部で培養し、分化多能性を維持した状態で前記プライム型多能性幹細胞の断面形状及び外径が前記マイクロファイバによって制御された細胞塊になるまで増殖させ、凝集させる工程と、
を含む、細胞培養方法。 - 前記プライム型多能性幹細胞は、ヒトiPS細胞であり、
培養開始時の前記ヒトiPS細胞の密度は、1×107 〔cells/mL〕以上である請求項1に記載の細胞培養方法。 - 前記マイクロファイバを溶融し、前記プライム型多能性幹細胞を回収する工程を更に含む請求項1又は2に記載の細胞培養方法。
- 回収された前記プライム型多能性幹細胞を内部に含むマイクロファイバを製造することによって、前記プライム型多能性幹細胞を内部に含むマイクロファイバを継代する工程を更に含む請求項3に記載の細胞培養方法。
- 前記プライム型多能性幹細胞を内部に含むマイクロファイバを凍結して、前記プライム型多能性幹細胞をマイクロファイバ内で保存する工程を更に含む請求項1~4のいずれか1項に記載の細胞培養方法。
- 前記プライム型多能性幹細胞を内部に含むマイクロファイバを分化誘導培地内で培養することによって、前記プライム型多能性幹細胞をマイクロファイバ内で分化誘導する工程を更に含む請求項1~5のいずれか1項に記載の細胞培養方法。
- プライム型多能性幹細胞を含むコア部分と、該コア部分を被覆する管状のアルギン酸ゲルを有するシェル部分とを備えるマイクロファイバであって、
前記プライム型多能性幹細胞は、ROCK阻害剤を添加した培地中で前記マイクロファイバの内部で培養され、分化多能性が維持された状態で、前記プライム型多能性幹細胞の断面形状及び外径が前記マイクロファイバによって制御された細胞塊を形成している、マイクロファイバ。
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