JP7369712B2 - 歯周病の診断方法、使用及びキット - Google Patents
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Description
を含む、インビトロ方法に関する。
-ヒト患者の唾液試料において、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、マトリックスメタロプロテイナーゼ-9(MMP-9)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の2又はそれ以上のタンパク質を検出することができ、かつそのように適合された検出手段;
-前記タンパク質の測定濃度から歯周病である患者の指標を決定するように適合されたプロセッサ;
を含む、システムに関する。
(a)ヒト患者から唾液試料を獲得する工程;
(b)前記タンパク質を結合する、1又はそれ以上の検出試薬と前記試料を接触させて、前記2又はそれ以上のタンパク質の、前記試料中における存在の検出工程、及び各タンパク質と1又はそれ以上の検出試薬との間の結合の検出工程;
を含む、方法であって、通常、本明細書の他の箇所に記載されているように、少なくとも第1及び第2、場合によっては第3及び第4の検出試薬が存在する。
〔歯肉指数(GI)〕
以下の場合、ロベン修正歯肉指数(MGI)を0~4の尺度で評価し、それに基づいて全口腔歯肉指数を記録する:
-0 =炎症なし
-1 =軽度の炎症;辺縁又は乳頭状歯肉単位の全部ではなく、ある部分が、色の質感のわずかな変化がわずかに変化している
-2 =軽度の炎症;ただし、辺縁全体又は乳頭部に及ぶ;
-3 =中等度の炎症;開口、発赤、浮腫及び/又は辺縁又は乳頭部の肥大、
-4 =重度の炎症;著しい発赤、辺縁又は乳頭状歯肉単位の浮腫及び/又は肥厚、自然出血、うっ血、潰瘍形成。
UNC-15手動歯周プロービングを用いて、最も近いmmまでプロービング深度を記録する。プロービング深度とは、プロービング先端(ポケットの基部と仮定)から歯肉縁までの距離をいう。
歯肉退縮は、UNC-15手動歯周プロービングを用いて、最も近いmmまで記録する。歯肉後退は、遊離歯肉縁からセメント質-エナメル境界までの距離である。歯肉退縮は正の数で示され、歯肉過成長は負の数で示される。
臨床的付着喪失は、各部位におけるプロービング深度+後退の和として計算する。
プロービング後、プロービング時に各部位の出血を評価し、プロービング後30秒以内に出血が生じた場合は、その部位に1のスコアを割り当て、そうでない場合は0のスコアを割り当てる。
-健常群(H):全部位でPD≦3mm(ただし、最終立位大臼歯の遠位部では4mmポケットまで可能)、近位部付着欠損のない部位、GI≧2.0、≦10%、%BOPスコア≦10%;
-歯肉炎群(G):GIが30%を超える部位で3.0以上、近位部付着欠損している部位がない、PDが4mmを超える部位がない、%BOPスコアが10%を超える;
-軽度~中等度の歯周病群(MP):8本以上の歯で5~7mmの歯間PD(約2~4mmのCALに等しい)、%BOPスコア>30%;
-進行性歯周病群(AP):12本以上の歯で7mm以上の歯間PD(CAL約5mm以上と等しい)、%BOPスコア>30%。
スコアSに基づいて、確実性を直接示すことができる。すなわち、S=0.8は歯周病の80%の確実性を意味する;又は、
R1<S<R2の場合、Iは「不確定」となるように、R1~R2の範囲を定義して表示する。
係数ciの決定は以下の訓練手順:
-歯周病であるN1症例(現行基準で歯科医が判定)と、歯周病でないN2症例を選択する;
-各被験体から唾液試料を採取し、上記のようにバイオマーカーの組み合わせのタンパク質濃度を測定する;
-スコアSを歯周病については1とし、歯周病(健常歯肉又は歯肉炎)でない場合は0とする;
-タンパク質濃度とスコアのロジスティック回帰を行う;
により行うことができる。
-ヒト患者の唾液試料において、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、マトリックスメタロプロテイナーゼ-9(MMP-9)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の2又はそれ以上のタンパク質を検出することができ、かつそのように適合された検出手段であって、当該手段は公知であり、当業者が容易にアクセスできる。通常、被験体の口腔液試料を受け取る容器が提供され、その容器は以下の:
前記タンパク質の測定濃度から歯周病である患者の指標を決定するように適合されたプロセッサ;
を含む。
マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、マトリックスメタロプロテイナーゼ-9(MMP-9)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)から選択される少なくとも2つのタンパク質を検出するための1又はそれ以上の検出試薬を含むキットを提供する。
(a)ヒト患者から唾液試料を獲得する工程;
(b)前記タンパク質を結合する、1又はそれ以上の検出試薬と前記試料を接触させて、前記2又はそれ以上のタンパク質の、前記試料中における存在の検出工程、及び各タンパク質と1又はそれ以上の検出試薬との間の結合の検出工程、を含む。
39例は、健常歯肉(H)であった
35例は、歯肉炎(G)と診断された
41例は、軽度の歯周病(MP)と診断された
38例は、進行性歯周病(AP)と診断された。
-0.90-1 =優良(A)
-0.80-0.90 =良好(B)
-0.70-0.80 =公正(C)
-0.60-0.70 =不良(D)
-0.50-0.60 =失敗(F)
以上のことから、上記臨床試験の結果において、ROC AUC値が0.75を超えると、本発明に関する試験を実施する望ましい精度を表すと考えられる。
- MMP8
- MMP9
- IL-1β
- HGF
- 遊離軽鎖(FLC)κ(kappa)
- 遊離軽鎖(FLC)λ(lambda)
- A1AGP
- Hb-ベータ(beta)
- Hb-デルタ(delta)
- ケラチン4
- プロフィリン
- ピルビン酸キナーゼ
- S100A8
- S100A9
さらに、用いたロジスティック回帰では、追加の予測因子としてκ+λ、κ-λ、κ/λを考慮した。
・4個は1のタンパク質マーカー(MMP8、又はMMP9、ともに必要に応じて年齢を追加)である;
・59個はタンパク質マーカーが2つある;
・368個にはタンパク質マーカーが3つある;
・1541個にはタンパク質マーカーが4つある。
MMP8+MMP9
MMP8+ピルビン酸キナーゼ
MMP8+S100A8
MMP9+ピルビン酸キナーゼ。
Claims (23)
- ヒト患者が歯周病であるかを評価するためのインビトロ方法であって、以下の:
-前記ヒト患者由来の唾液試料において、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)から選択される少なくとも2つのタンパク質の濃度の検出工程;
-前記タンパク質の結合濃度を反映する試験値の決定工程;
-前記試験値を、歯周病に関連する結合濃度を同じ方法で反映する閾値と比較して、前記試験値が前記ヒト患者の歯周病であるかを評価するための工程;
を含む、インビトロ方法。 - 前記ヒト患者が歯周病であることが疑われる、請求項1に記載の方法。
- 前記ヒト患者の年齢が判定され、前記試験値が、前記ヒト患者の年齢と組み合わせて、前記結合濃度を反映する、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記閾値が、歯周病の存在又は歯周病の非存在と関連する各試料中の1又はそれ以上の参照試料中の前記タンパク質について決定された濃度に基づく、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記閾値が、歯周病である被験体由来の試料及び歯周病でない被験体由来の試料を含む、一組の試料中の前記タンパク質の濃度に基づく、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記タンパク質が、MMP-9を含む、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。
- 前記タンパク質が、MMP-8及びPK;又はMMP-8及びS100A8を含む、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記タンパク質が、IL-1β、HGF、FLCκ、FLCλ、A1AGP、Hb-β、Hb-δ、ケラチン4、プロフィリン、及びS100A9の1又はそれ以上をさらに含む、請求項1~7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記タンパク質が、MMP-8及びPK又はS100A8からなる、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記結合濃度は、0から1の間の数字に算術的に処理される、請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。
- ヒト患者が歯周病であるかの評価のためのバイオマーカーとしての、ヒト患者の唾液試料中の、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の2又はそれ以上のタンパク質の使用。
- 前記ヒト患者の年齢もまたバイオマーカーとして用いられる、請求項11に記載の使用。
- ヒト患者が歯周病であるかを評価するためのシステムであって、以下の:
-ヒト患者の唾液試料において、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の2又はそれ以上のタンパク質を検出することができ、かつそのように適合された検出手段;
-前記タンパク質の結合濃度から、ヒト患者が歯周病であるかを決定するように適合されたプロセッサ;
を含む、システム。 - 口腔液試料を受け入れる容器をさらに含み、前記容器が前記検出手段を含む、請求項13に記載のシステム。
- さらに、以下の:
-前記決定を示す表示をユーザに提示するユーザインタフェース;
-前記プロセッサから前記ユーザインタフェースに前記表示のデータを転送する、前記プロセッサと前記ユーザインタフェースとの間のデータ接続;
を含む、請求項13又は14に記載のシステム。 - 前記プロセッサを、インターネット系アプリケーションによって作動させることができる、請求項13~15のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記ユーザインタフェースは、前記ヒト患者の年齢に関する情報を入力することができ、前記プロセッサは、前記タンパク質の結合濃度から、前記ヒト患者が歯周病であるかを決定することができ、かつそのように適合された、請求項13~16のいずれか一項に記載のシステム。
- ヒト患者の唾液試料中の歯周病用の少なくとも2つのバイオマーカーを検出するキットであって、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の2又はそれ以上を検出するための、1又はそれ以上の検出試薬を含むキット。
- 前記1又はそれ以上の検出試薬が、MMP-8を検出するための第1検出試薬、PKを検出する第2検出試薬、及びS100A8を検出する第3検出試薬を含む、請求項18に記載のキット。
- 前記1又はそれ以上の検出試薬が固体支持体上に含まれる、請求項18又は19に記載のキット。
- 前記1又はそれ以上の検出試薬が、MMP-8を検出する第1検出試薬、PKを検出する第2検出試薬、及びS100A8を検出する第3検出試薬からなる、請求項18~20のいずれか一項に記載のキット。
- 歯周病に罹患しているヒト患者における歯周病の状態の変化を、第1時点t1から第2時点t2までの時間にわたり決定するためのインビトロ方法であって、前記ヒト患者からt1で得られた唾液の少なくとも1つの試料及び前記ヒト患者からt2で得られた唾液の少なくとも1つの試料において、2又はそれ以上のタンパク質のマトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の濃度の検出工程と、前記検出されたタンパク質の濃度の結合濃度の少なくとも1つの差の比較工程と、を含む方法。
- ヒト患者が歯周病であるかを診断するためのインビトロ方法であって、前記ヒト患者の唾液試料において、マトリックスメタロプロテイナーゼ-8(MMP-8)、ピルビン酸キナーゼ(PK)及びS100カルシウム結合タンパク質A8(S100A8)の2又はそれ以上のタンパク質濃度を検出する工程を含む方法であって、検出された前記タンパク質の濃度の結合濃度が、ヒト患者における歯周病の存在を示す、方法。
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