JP7266247B2 - ビタミンａ５経路のレチノイド類を提供するための前駆体化合物及びその使用 - Google Patents

Description

本発明は、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）シグナル伝達及びビタミンＡ５経路と呼ばれる新規のビタミンＡ経路の分野に関する。（Ｒ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノイン酸、内因性ＲＸＲリガンドを提供するのに有用な化合物、並びにそれらの使用及びそれらの製造方法が特許請求の範囲に記載される。本発明の化合物は医薬及び栄養用途に有用である。

より具体的には、９ｃＤＨＲＡの前駆体は、とりわけ９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール（９ＣＤＨＲＯＬ、ビタミンＡ５）及び９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータカロテン（９ＣＤＨＢＣ、プロビタミンＡ５）である。これらはそれぞれ新規な種類のレチノイド及びカロテノイドＲＸＲリガンド前駆体である。驚くべきことに、そのような前駆体が直接又は間接的に９ＣＤＨＲＡに代謝され得ることがここに見出された。本発明はまた、これらの化合物の予防的／医薬的使用、特に、うつ病及びＲＸＲ媒介シグナル伝達が影響を受けるか又は治療標的として提案された他の様々な疾患の慢性ストレス動物モデルにおけるうつ様行動の治療における使用に関する。そのような疾患には、神経変性疾患及び代謝疾患、皮膚機能障害及び免疫機能障害（炎症を含む）、並びに心血管疾患及び記憶増強効果のような生活様式の適用が含まれる。

ビタミンＡは、ビタミンＣ及びＤと並行して、欠乏症状に関連した最初の化合物群の１つであった。この活性脂質は後に「ビタミンＡ」と命名された。１９３１年にＫａｒｒｅｒ等はタラ肝油中のこの脂溶性栄養素誘導体を同定した（Ｋａｒｒｅｒら、１９３１ａ；Ｋａｒｒｅｒら、１９３１ｂ）。１９３７年にビタミンＡの基礎研究で、レチノール（すなわち、ビタミンＡ１）の構造を解明したポール・カーラー氏がノーベル化学賞を受賞した。並行してＥｄｉｓｂｕｒｙら（Ｅｄｉｓｂｕｒｙ ｅｔ ａｌ．、１９３７）及びＧｉｌｌｉａｍら（Ｇｉｌｌａｍ ｅｔ ａｌ．、１９３８）は、１９３７‐３８年に、主に海産魚に存在する食品因子を発見した。彼らはビタミンＡ２のこの第２のカテゴリーを命名するためにビタミンＡ２という用語を使用したが、それは環Ｃ３‐Ｃ４の位置に追加の二重結合が存在するためにレチノールとは異なる吸収スペクトルを示すからである。

１９８０年代には、ビタミンＡの分子作用は、主にピエール・シャンボンとロナルド・エバンスのグループによって、一連のビタミンＡ効果の生物活性メディエーターとしての全トランス‐レチノイン酸（ＡＴＲＡ）の同定によってさらに拡大された。彼らは、ＡＴＲＡを栄養素由来の脂質ホルモンとして同定し、それによって転写活性を媒介するためのＡＴＲＡとＲＡＲ（レチノイン酸受容体）との会合（Ｇｉｇｕｅｒｅら、１９８７）及びＲＡＲ自体を核ホルモン受容体スーパーファミリーの新しいメンバーとして同定した（Ｐｅｔｋｏｖｉｃｈら、１９８７年）。ＲＡＲの他に、レチノイド‐Ｘ受容体（ＲＸＲ）（Ｋｌｉｅｗｅｒら、１９９２年；Ｌｅｉｄら、１９９２年；Ｍａｎｇｅｌｓｄｏｒｆら、１９９０年；Ｅｖａｎｓ ２０１４年）も重要な機能の媒介物質として同定され、多種多様な核内ホルモン受容体に対する必須のヘテロ二量体結合パートナーとして確立された。１９９２年に９‐シス‐レチノイン酸、９ＣＲＡは、ＲＸＲに対する推定「内因性」リガンドとして同定された（Ｈｅｙｍａｎら、１９９２；Ｌｅｖｉｎら、１９９２）。並行して、ビタミンＡ２誘導体全トランス‐３，４‐ジデヒドロ‐レチノイン酸（ＡＴＤＤＲＡ；ビタミンＡ２‐酸）がヒトにおいて内因的に同定され（Ｖａｈｌｑｕｉｓｔ ｅｔ ａｌ．、１９８２）、後にＲＡＲ媒介遺伝子転写を活性化する際にＡＴＲＡと同様の活性を示すことが示された（Ｔｏｒｍａら、１９９４）。しかしながら、９ＣＲＡは強力なＲＸＲリガンドであるが、高薬理学的（毒物学的）レチノイド投与後又はビタミンＡを豊富に含む食品を用いた人工栄養介入後のいずれかで厳密に内因的に同定されたにすぎない（Ａｒｎｈｏｌｄ ｅｔ ａｌ．、１９９６；Ｓｃｈｍｉｄｔ ｅｔ ａｌ．、２００２年；Ｕｌｖｅｎら、２００１年）（？）。さらに、「ビタミンＡ」誘導体が無脊椎動物に見出された。すなわち節足動物中で３‐ヒドロキシレチナール（「ビタミンＡ３」）が、一部の甲殻類で４‐ヒドロキシレチナール（「ビタミンＡ４」）が見出された（Ｂａｂｉｎｏ ｅｔ ａｌ．、２０１６）。

レチノール（ビタミンＡ１）は、視覚、特に暗視、正常な骨及び歯の発達、生殖、並びに皮膚及び粘膜の健康（気道などの身体領域を裏打ちする粘液分泌層）において重要な役割を果たす。ビタミンＡは、抗酸化物質、特定の癌のリスクを減らす可能性がある保護化学物質として体内でも働く。

これらの化合物の医学的用途に関して、オールトランス‐レチノイン酸（ＡＴＲＡ、トレチノインとも呼ばれる）はいくつかの医薬製剤における活性剤であり、とりわけ、例えばニキビに対する化粧品及び局所適用及び急性前骨髄球性白血病において使用されている。

異性体９‐シス‐レチノイン酸（９ＣＲＡ）もアリトレチノインの名称で医薬として使用されている。９ＣＲＡ（アリトレチノイン）の経口製剤は、Ｔｏｃｔｉｎｏの商品名で市販されている。

イソトレチノイン（活性剤は１３‐シス‐レチノイン酸である）の主な適応症は、重度の嚢胞性ざ瘡の治療であり、エイズ関連カポジ肉腫における皮膚病変の治療にも適応される。

Ｔｏｃｔｉｎｏの商標名で、この化合物は慢性手湿疹での経口使用のために英国で処方権を与えられている。ガイダンスは、しかし、それを深刻な場合にのみ処方することを示唆している。

したがって、レチノイドの複数の役割に幾分反して、それらのうちのわずかなものだけが、比較的少数の特定の疾患における医薬として使用されている。

医薬中に存在するこれらの全ての変異体は酸の形で存在し、１３，１４二重結合を含む。

Ｐａｌｃｚｅｗｓｋｉグループは、１３，１４‐二重結合が水素化された１３，１４‐ジヒドロレチノイドの内在性の存在を報告し、全トランス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（ＡＴＤＨＲＡ）をＲＡＲに対する弱い親和性のリガンド及び細胞ベースのアッセイにおけるＲＡＲ制御遺伝子のＡＴＲＡよりも弱い活性化因子として同定した（Ｍｏｉｓｅら、２００４年；Ｍｏｉｓｅら、２００５年、Ｍｏｉｓｅら、２００９年）。

ＲＡＲのほかに、さらに別のクラスの受容体、ＲＡＲとヘテロ二量体を形成するレチノイドＸ受容体は、核内受容体シグナル伝達において重要な役割を果たす［Ｄ．Ａ．Ｍａｎｇｅｌｓｄｏｒｆ、Ｒ．Ｍ．Ｅｖａｎｓ、Ｃｅｌｌ １９９５、８３、８４１～８５０］。上記のように、９‐シス‐レチノイン酸（９ＣＲＡ）は、ＲＸＲの強力な活性化剤であり、重要な機能の媒介物質であり、多種多様な核ホルモン受容体に対する必須のヘテロ二量体結合パートナーである。

９ＣＲＡ以外に、ＲＸＲ媒介シグナル伝達を活性化することが見出されている第二のクラスの誘導体は、フィタン酸（ＰＨＹＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）及びオレイン酸のような種々の脂肪酸である（ｄｅ Ｕｒｑｕｉｚａら、２０００年；Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、２００３年；Ｋｉｔａｒｅｅｗａｎら、１９９６年）。しかしながら、いくつかの知見は、これらの誘導体の内因性レベルが低すぎるためにＲＸＲに結合して転写活性化を引き出せないことを示している。

最近、全トランス異性体と一緒の９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（９ＣＤＨＲＡ）の内在性の存在が、ＬＣ‐ＭＳ‐ＭＳ及びＵＶの組み合わせ分析設定及び合成標準試料との比較によりマウス由来のいくつかの器官（肝臓、血清、脳）で確認されている。測定量は、ＲＸＲ依存性活性を維持するのに十分であると考えられた。実際、９ＣＤＨＲＡは合成ＲＸＲアゴニストと類似の生物学的活性を示すことが見出され、おそらく対応する許容ヘテロ二量体を介して、いくつかの核内受容体シグナル伝達経路の転写活性を調整した（Ｒｕｈｌ ｅｔ ａｌ．、２０１５）。

しかしながら、この化合物に至る代謝経路は依然として不明であり、このリガンドを特徴付け、生物系におけるその推定上の複数の役割を決定するためにさらなる研究が必要である（ｄｅ Ｌｅｒａ ｅｔ ａｌ．、２０１６）。要約すると、ビタミンＡの研究はこれまでに食事と、ビタミンＡ及び脂質ホルモン受容体の活性化及びさらに媒介されるシグナル伝達を結びつけるための基本的な原理を確立し、さまざまな（病理）生理学的経路の調節をもたらした。残念なことに、ＲＸＲリガンドの内因性の存在及び栄養的関連性、特にその点における９ＣＲＡの状態は、物議を醸していることが証明されている。

本発明者らは今や、独立した新しいビタミンＡ経路（ビタミンＡ５）、最も顕著には９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール（９ｃＤＨＲＯＬ）のメンバーを含む一連の化合物を同定し、それらは実際の内因性ＲＸＲリガンドの前駆体である。本発明者らはまた、驚くべきことに、これらの前駆体が脳内で予想外に高い９ｃＤＨＲＡの増加を生じること（例えば、肝臓に関して優先的であること）、ＲＸＲの脳シグナル伝達を標的とする有用なベクターであることを発見した。さらに、９ｃＤＨＲＯＬから出発して、極めて高レベルの９ｃＤＨＲＡが組織中で、とりわけ脳内で生成された。

これらの知見は、本発明の化合物を医薬としても栄養補助食品としても優れた候補にする。

発明の詳細な説明
本発明は一般式（Ｉ）の化合物に関する。

式中、Ｒは、ＣＯＯＲ_１及びＣＨ_２ＯＲ_２、並びに一般式（Ａ）の基から選択され、
Ｒ_１は、哺乳動物の組織又は器官において加水分解により除去されて（Ｒ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエート及び生物学的に許容可能な耐容性の化合物を生じる基であり、及び／又は
Ｒ_２はＨ又はアシル基Ｃ（Ｏ）Ｒ_３であり、ここでＲ_３は哺乳動物の組織又は器官において加水分解により除去されて（Ｒ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノール及び生物学的に許容可能な耐容性の化合物を生じる基であり、及び／又は
Ｒは一般式Ａの基であり、

式中、Ｑ_１は、置換若しくは非置換のＣ_６‐１０アルケニル若しくはシクロアルケニル、好ましくは置換若しくは非置換のトリメチル‐シクロアルケニル、又はより好ましくは置換若しくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル、さらにより好ましくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル又は２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐２‐エン‐１‐イルであり、トリメチルシクロヘキセニルの場合、例えば、２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル基は置換されており、それは好ましくはヒドロキシル置換又はオキソ置換、好ましくはオキソ置換である、前記化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官又は細胞において９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールに変換される。

非常に好ましくは、一般式Ａの基は式ａの基である。

ここで、前記化合物は、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテン（９ＣＤＨＢＣ）である。

前記化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官又は細胞中でＲ配置９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸に変換される。本明細書では、哺乳動物の組織又は器官又は細胞は、少なくとも１種類又は少なくとも１種類の組織又は器官又は細胞培養物又は細胞の集団又は複数の組織又は器官又は細胞培養物又は細胞の集団として理解され、これらは異なる組織や器官、細胞の種類で異なる変換工程が起こる場合を含む。

好ましくは該化合物は哺乳動物対象、好ましくはヒト対象における治療に使用するためのものである。好ましくは、該化合物はレチノイドＸ受容体関連疾患が治療される疾患の治療に使用するためのものである。

場合により、特に本発明が化合物それ自体に関する場合、特に上記で定義された場合において、Ｒ_１はエチルとは異なる。

化合物のエナンチオマー配置は式に示されている。好ましくは、本明細書で定義されるように、化合物又はそれを含む任意の組成物は、このエナンチオマー（通常は（Ｒ）として示される）に富むか、又は好ましくはエナンチオ純粋である。

本発明はまた、一般式（Ｉ）の化合物に関する。

式中、Ｒは、ＣＯＯＲ_１及びＣＨ_２ＯＲ_２、並びに式（Ａ）の基から選択され、
Ｒ_１は、Ｃ_１‐２５アルキル又はＣ_２‐２５アルケニルであり、及び／又は
Ｒ_２は、Ｈ又はアシル基Ｃ（Ｏ）Ｒ_３であり、ここで、Ｒ_３は、Ｃ_１‐２５アルキル又はＣ_２‐２５アルケニルであり、及び／又は
Ｒは一般式Ａの基であり、

式中、Ｑ_１は、一般式Ａのテトラテルペノイド誘導体化合物を形成する置換又は非置換のトリメチル‐シクロアルケニルであり、又はより好ましくは、Ｑ_１は置換又は非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル、さらにより好ましくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル又は２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐２‐エン‐１‐イルであり、トリメチルシクロヘキセニルの場合、例えば、２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル基は置換されており、それは好ましくはヒドロキシル置換又はオキソ置換、好ましくはオキソ置換であり、
前記化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官又は細胞において９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールに変換される。

非常に好ましくは、一般式Ａの基は式ａの基である。

ここで、前記化合物は、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテン（９ＣＤＨＢＣ）である。

前記化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官中でＲ配置９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸に変換することができる。

一般式Ｉの本発明の化合物における好ましい実施形態では、Ｒ_１又はＲ_２は上で定義された通りであるか、又は化合物は前駆体化合物としての、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテン誘導体又は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテンである９‐シス‐カロテノイド化合物、好ましくは９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテンであり、ここで一度投与されると、哺乳動物の組織又は器官又は細胞中の前記化合物はＲ配置９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸に変換される。

Ｒ_１又はＲ_２の場合のアルキル又はアルケニル鎖の長さについての好ましい選択肢は本明細書に定義されている通りである。

好ましくは、該化合物は、本明細書中で定義されるように、哺乳動物における、好ましくはヒト対象における治療における使用のためのものである。

任意選択で、特に本発明が化合物自体に関する場合、Ｒ_１はエチルとは異なる。本発明が化合物自体に関するとは、化合物が製品として特許請求されていることを意味し、人体若しくは動物の体に行われる医学的又は診断的用途又は目的によって限定されないことを意味する。さらにそれは、化合物が使用又は方法クレーム内で使用又は方法の一部として特許請求されてはいないことを意味する。

化合物のエナンチオマー配置は式に示されている。好ましくは、本明細書で定義されるように、化合物又はそれを含む任意の組成物は、このエナンチオマー（通常は（Ｒ）として示される）に富むか、又は好ましくはエナンチオ純粋である。

第一の態様において、化合物は一般式（３）の化合物である。

式中、Ｒ_２は、Ｈ又はアシル基Ｃ（Ｏ）Ｒ_３であり、ここで、Ｒ_３は、
Ｃ_１‐２５アルキル又はＣ_１‐２３アルキル、好ましくはＣ_１‐８アルキル又はＣ_１‐６アルキル及びＣ_９－２３アルキル、より好ましくはＣ_１‐４アルキル及びＣ_{１１‐２１}アルキル及び
Ｃ_２‐２５アルケニル、好ましくはＣ_２－８アルケニル又はＣ_２－６アルケニル及びＣ_２－２３アルケニル、より好ましくはＣ_{１３－２３}アルケニルから選択される。

好ましい実施態様において、Ｒ_３は、Ｃ_１‐８アルキル、好ましくはＣ_１‐６アルキル、より好ましくはＣ_１‐４アルキルである。

好ましい実施形態では、Ｒ_３はＣ_９－２３アルキル、好ましくはＣ_{１１－２１}アルキル、より好ましくはＣ_{１３‐１９}アルキルである。好ましい態様において、Ｒ_３はＣ_２－８アルケニル、好ましくはＣ_２－６アルケニル、より好ましくはＣ_２－４アルケニルである。

好ましい実施形態において、Ｒ_３はＣ_９－２５アルケニル、好ましくはＣ_{１１－２３}アルケニル、より好ましくはＣ_{１３－２３}アルケニルである。

一実施形態では、Ｒ_２はＨであり、化合物は（Ｒ）（Ｒ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールである。

さらなる実施態様において、Ｒ_２はアシル基Ｃ（Ｏ）Ｒ_３であり、Ｒ_３は上記で定義した通りの化合物であり、Ｒ_３は哺乳動物の組織又は器官におけるエステルの加水分解により除去されて対応するアルコール（Ｒ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールを生じる基である。したがって、エステルはアルコールと生物学的に耐容性の及び／又は許容可能な化合物に変換される。前記アルコール化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官においてＲ配置９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸に変換される。これは、化合物がこの能力を有することを意味し、すなわち「である」とは、また、化合物が実際に投与されるかどうかに依存して「可能である」ことを意味する。

好ましくは該化合物は哺乳動物対象、好ましくはヒト対象における治療に使用される。

化合物のエナンチオマー配置は式に示されている。好ましくは、本明細書で定義されるように、化合物又はそれを含む任意の組成物は、このエナンチオマー（通常は（Ｒ）として示される）に富むか、又は好ましくはエナンチオ純粋である。

本発明のこの態様の好ましい実施形態では、前記化合物は一般式（４）のものである。

式中、Ｒ_３は、一般式（３）で定義される通りであるか、又はＲ_３は、
‐Ｃ_１‐４アルキル、好ましくはメチル、エチル、プロピル又はイソプロピル、
‐Ｃ_{１１‐２１}アルキル、好ましくはＣ_{１３‐１９}アルキル、及び
‐Ｃ_{１１‐２３}アルケニルから選択される。

好ましくはアルケニルは多価不飽和Ｃ_{１３‐２３}アルケニルである。

好ましい態様において、該化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官においてＲ配置９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールに変換される。

より好ましくは、哺乳動物組織は神経組織であるか、又はその組織若しくは器官は中枢神経系若しくは末梢神経系のものである。哺乳動物細胞は、好ましくは神経細胞（ニューロサイト）、好ましくは又は特に乏突起膠細胞（オリゴデンドロサイト）である。

さらに好ましい態様において、哺乳動物組織は血液である。さらに好ましい態様において、哺乳動物組織は肝臓である。

本発明のさらなる態様において、前記化合物は一般式（２）のものである。

ここで、Ｒ_１は、
Ｃ_１‐２５アルキル又はＣ_１‐２３アルキル、好ましくはＣ_１‐６アルキル及びＣ_９‐２３アルキル、より好ましくはＣ_１‐４アルキル及びＣ_{１１‐２１}アルキル及びＣ_２‐２５アルケニル又はＣ_２‐２４アルケニル、好ましくはＣ_２‐６アルケニル及びＣ_９‐２３アルケニル、より好ましくはＣ_{１３‐２３}アルケニルから選択される。

場合により、特に本発明が化合物それ自体に関する場合、Ｒ_１はエチルとは異なる。

化合物のエナンチオマー配置は式に示されている。好ましくは、本明細書で定義されるように、化合物又はそれを含む任意の組成物は、このエナンチオマー（通常は（Ｒ）として示される）に富むか、又は好ましくはエナンチオ純粋である。

好ましい実施形態において、Ｒ_１は、
Ｃ_１‐８アルキル及びＣ_９‐２３アルキル、より好ましくはＣ_１‐４アルキル及びＣ_{１１‐２１}アルキル及び
Ｃ_２‐２５アルケニル又はＣ_２‐２４アルケニル、好ましくはＣ_２‐６アルケニル及びＣ_９‐２３アルケニル、より好ましくはＣ_{１３‐２３}アルケニルから選択される。

好ましい実施形態において、Ｒ_１はＣ_１‐８アルキル、好ましくはＣ_１‐６アルキル、より好ましくはＣ_１‐４アルキルである。

好ましい実施態様において、Ｒ_１は、Ｃ_２‐８アルケニル、好ましくはＣ_２‐６アルケニル、より好ましくはＣ_２‐４アルケニルである。

好ましい実施形態では、Ｒ_１はメチル、エチル、プロピル又はイソプロピルから選択され、場合によりメチル、プロピル又はイソプロピルである。

さらなる態様において、本発明はまた、一般式（５）の化合物に関する。

上記式中、Ｑ_１は、置換若しくは非置換のＣ_６‐１０アルケニル若しくはシクロアルケニル、好ましくは置換若しくは非置換のトリメチル‐シクロアルケニル、又はより好ましくは置換若しくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル、さらにより好ましくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル又は２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐２‐エン‐１‐イルであり、トリメチルシクロヘキセニルの場合、例えば、２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル基は置換されており、それは好ましくはヒドロキシル置換又はオキソ置換、好ましくはオキソ置換であり、
前記化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官又は細胞において９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールに変換される。

非常に好ましくは、一般式Ａの基は式ａの基である。

好ましい実施形態では、本発明はまた、例えば９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテン誘導体又は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテンである９‐シス‐カロテノイド化合物に関し、例えば、前駆体化合物としての９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテン又は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐アルファ‐カロテン、好ましくは９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテンに関し、ここで前記化合物は、投与されると、哺乳動物の組織又は器官又は細胞内でＲ配置９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸に変換される。特に、９‐シス‐カロテノイド化合物は生物学的に許容可能な耐容性の化合物である。

さらなる態様では、本発明は、一般式（３）の化合物について上で定義した化合物を含む医薬組成物に関し、該組成物はまた、１種以上の薬学的に許容可能な担体、例えば添加剤及び／又は賦形剤を含む。

好ましくは、本発明は、一般式（４）の化合物に関して上で定義された化合物を含む医薬組成物に関し、該組成物はまた、１種以上の薬学的に許容可能な担体、例えば添加剤及び／又は賦形剤も含む。

好ましくは、本発明は、前駆体化合物として、９‐シス‐カロテノイドについて上記で定義した化合物及び／又は一般式（５）の化合物、特に９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテンを含む医薬組成物に関し、該組成物はまた、１種以上の薬学的に許容可能な担体、例えば添加剤及び／又は賦形剤も含む。

本発明はまた、前駆体化合物として、一般式（３）の化合物、又は好ましくは一般式（４）の化合物、又は一般式（５）の化合物、又は９‐シス‐カロテノイド化合物、好ましくは９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテンについて上で定義した化合物を含む栄養補助食品組成物に関し、該組成物は１つ以上の栄養補助的に許容可能な添加剤及び／又は賦形剤も含む。好ましくは、前記組成物は栄養補助食品、機能性食品、医療用食品又は健康強調表示のある食品である。好ましくは、前記栄養補助食品組成物は、天然の食品マトリックス中に存在するよりも多い量又は濃度で前記化合物を含み、及び／又は追加量の化合物、好ましくは追加の単離又は人工的調製化合物を含む。

本発明はまた、アルキル９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエートを介した９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール及びそのエステル形態の新規な化学合成に関する。この方法は以下を含む。
ｉ）アルキル９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエートの９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールへの還元、及び場合により
ｉｉ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールの対応するエステル形態へのアルキル化。エステルを以下に例示する。

好ましい実施形態では、還元は、有機溶媒、好ましくはＴＨＦのような小さな複素環式化合物中での水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ‐Ｈ）還元のような水素化物触媒によって行われる。

アルコールのエステル化は、好ましくはアルキル及びヒドリド試薬によって行われる。好ましくはピリジン及び／又は誘導体のような塩基性窒素含有単環式複素環が適用される。非常に好ましい実施形態では、反応はジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で行われる。

適用される好ましい有機溶媒は、例えばＣＨ_２Ｃｌ_２、クロロホルム、ＣＣｌ_４等である。

９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸及び９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールの他のエステル（パルミテートなど）は、同じ手順を用いて容易に調製することができる。

さらなる実施形態において、本発明はまた、上で定義されたような一般式（５）の化合物、好ましくは９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテン誘導体、好ましくは９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテンである９‐シス‐カロテノイド化合物の新規な化学合成に関する。前記方法は、
‐一般式（３）の化合物

式中、Ｒ_２はＨ又はＯＨ保護基である、
の、中間体としての式（６）の対応するアルデヒドへの変換

‐前記アルデヒド中間体とウィッティヒ試薬化合物（７）との反応。

式中、Ｑ_１は、置換若しくは非置換のＣ_６‐１０アルケニル若しくはシクロアルケニル、好ましくは置換若しくは非置換のトリメチル‐シクロアルケニル、又はより好ましくは置換若しくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル、さらにより好ましくは非置換の２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル又は２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐２‐エン‐１‐イルであり、トリメチルシクロヘキセニルの場合、例えば、２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニル基は置換されており、それは好ましくはヒドロキシル置換又はオキソ置換、好ましくはオキソ置換であり、
Ｒは、式（５）の所望の化合物を得るために、リンイリド、好ましくはホスホニウム基、好ましくはトリフェニル‐ホスホニウム基を形成する基である。

好ましい実施態様において、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテンが製造され、ここで一般式（７）は一般式（８）の化合物である。

Ｒは、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐ベータ‐カロテンを与えるために、リンイリド、好ましくはホスホニウム基、好ましくはトリフェニル‐ホスホニウム基を形成する基である。

さらなる態様において、本発明はまた、一般式（３）の化合物、又は好ましくは一般式（４）の化合物、又は一般式（５）の化合物、又は９‐シス‐カロテノイド、又は食品成分又は栄養補助食品としての特定の選択肢のための上記定義の化合物の使用に関する。好ましくは、食品成分は機能性食品又は医療用食品の成分である。

本発明の一実施形態において、一般式（３）の化合物、又は好ましくは一般式（４）の化合物、又は一般式（５）の化合物、又は９‐シス‐カロテノイド又はその特定の選択肢についての上記定義の化合物は哺乳動物対象における治療に使用するためのものである。

好ましい態様において、化合物は医薬組成物の形態である。

さらに好ましい実施形態では、化合物は、本明細書で提供される適応症のために市販される認可を必要とする栄養補助食品組成物の形態である。

さらなる態様において、本発明は、一般化合物（２）について上で定義された化合物を含む医薬組成物に関し、該組成物はまた、１つ以上の薬学的に許容可能な担体、例えば添加剤及び／又は賦形剤を含む。

本発明はまた、一般化合物（２）について上で定義した化合物を含む栄養補助食品組成物にも関し、該組成物はまた１つ以上の栄養補助的に許容可能な添加剤及び／又は賦形剤を含む。好ましくは、前記組成物は栄養補助食品、機能性食品、医療用食品又は健康強調表示のある食品である。

さらなる態様において、本発明はまた、食品成分としての一般化合物（２）について上で定義されたような化合物の使用に関する。好ましくは、食品成分は機能性食品又は医療用食品の成分である。

本発明の一実施形態において、一般化合物（２）について上で定義された化合物は、哺乳動物対象における治療に使用するためのものである。

好ましい態様において、化合物は医薬組成物の形態である。

さらに好ましい実施形態では、化合物は、本明細書で提供される適応症のために市販される認可を必要とする栄養補助食品組成物の形態である。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、ＲＸＲシグナル伝達媒介機能不全の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、レチノイドＸ受容体シグナル伝達の障害に関連する又はそれに起因する疾患の予防及び／又は治療に使用するためのものである。前記疾患は、好ましくは、選択的レチノイドＸ受容体リガンドによって治療又は予防又は軽減することができる。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、中枢神経系関連疾患及び末梢神経系関連疾患から選択される疾患の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は精神疾患の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、記憶障害の予防及び／又は治療に使用するための、あるいは記憶能力を増強するために使用するためのものであり、好ましくは前記記憶は作業記憶である。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、認知機能障害又は学習障害の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は鬱病の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は神経変性疾患の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

好ましい実施形態では、化合物又は医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、アルツハイマー病、パーキンソン病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＭＣＩを伴うパーキンソン病、ハンチントン病、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、及び加齢、疾患又は外傷によって引き起こされる脳の変化による他の神経変性関連の認知症；又は好ましくはアルツハイマー病及びパーキンソン病に由来する、脊髄損傷及び運動失調、播種性硬化症及び多発性硬化症又は他の神経学的状態から選択される神経変性疾患の予防及び／又は治療に使用するためのものである。

上記の医学的適応症の態様において、化合物は好ましくは一般化合物（２）、（３）又は（４）について上で定義した化合物から選択される。上記の医学的適応症の態様において、化合物は好ましくは一般化合物（３）又は好ましくは（４）について上に定義した化合物から選択される。

本発明はまた、本明細書又は上記で定義された医薬製剤又は医薬の調製における上記化合物のいずれかの使用に関する。

本発明はまた、栄養補助食品、好ましくは医療用食品又は本明細書又は上記に定義された健康強調表示を有する食品の調製における上記化合物のいずれかの使用に関する。

本発明はまた、本発明の化合物又は本発明の医薬組成物又は栄養補助食品組成物を有効量でそれを必要とする哺乳動物被験体、好ましくはヒトに投与する、上で定義した疾患の治療方法に関する。好ましい実施形態では、投与は定期的、例えば毎日の投与である。

本発明はまた、健康を維持するための、好ましくは食品成分、栄養補助食品としての、例えばビタミンやその前駆物質としての、あるいは栄養成分としての、本明細書で定義されるような化合物のいずれかの使用に関する。好ましい実施形態では、本発明は、本明細書で定義されているような状態を予防するために健康を維持するための使用に関する。一実施形態では、前記使用は、正常な視力の維持、正常な皮膚及び粘膜の維持、並びに正常な毛髪の維持のためのものである。

より好ましくは、前記使用は、正常な脳機能の維持又は精神的健康の維持又は精神的能力の維持又は正常な心理的機能又は認知機能の維持、又は神経系の機能の貢献のためである。一実施形態では、これらの用途は健康強調表示で定義されている。

本発明はまた、本発明の化合物又は本発明の栄養補助食品組成物を、それを必要とする哺乳動物被験体、好ましくはヒトに、食事の一部として投与する、上記で定義したような被験体の健康状態を維持する方法に関する。好ましい実施形態では、投与は定期的、例えば毎日の投与である。

本明細書では、ＲＸＲ及びＲＡＲ受容体に関連して本明細書で説明されているように、非選択的前駆体を本発明によるＲＸＲシグナル伝達媒介機能不全の治療及び予防に使用することはできない。

本発明はまた、ビタミンＡ５（９ＣＤＨＲＯＬ）又はその前駆体としての栄養補助食品としての、上で定義された一般式（３）、（４）及び／又は（５）のいずれかによる化合物の使用に関する。特定の実施形態では、前駆体は９ＣＤＨＢＣである。さらなる特定の実施形態では、前駆体は９ＣＤＨＲＯＬ‐エステルから選択される。

本発明はまた、９ＣＤＨＲＡ前駆体としての栄養補助食品としての、上で定義されたような一般式（３）、（４）及び／又は（５）のいずれかによる化合物、及びＲＸＲ‐リガンドの使用に関する。特定の実施形態では、９ＣＤＨＲＡ前駆体は９ＣＤＨＢＣ、９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ‐エステル及び９ＣＤＨＲＡ‐エステルから選択される。

好ましくは、前駆体は静脈内、局所又は経口経路で投与される。前駆体は全身的又は局所的に投与することができる。

これらの前駆体は、９ＣＤＨＲＡ（ＲＸＲ媒介シグナル伝達を可能にするための内因性ＲＸＲリガンド）への選択的代謝変換のために与えられ得る。

特定の実施形態では、本発明は、上で定義されたような状態を予防、治療又は改善するための９ＣＤＨＢＣの使用に関する。好ましい実施形態では、状態は以下からなる群から選択される：（ａ）うつ病、統合失調症などの精神障害を含む（ただしこれらに限定されない）ストレス関連障害における情動異常、（ｂ）認知症に伴う記憶障害、及び特にアルツハイマー病。

特定の実施形態では、９ＣＤＨＢＣが記憶改善のために使用される。

特定の実施形態では、本発明は、上で定義したような状態を予防、治療又は改善するための本明細書で定義の９ＣＤＨＲＯＬ又はその任意のエステルの使用に関する。好ましい実施形態では、状態は以下からなる群から選択される：（ａ）うつ病、統合失調症などの精神障害を含む（ただしこれらに限定されない）ストレス関連障害における情動異常、（ｂ）認知症に伴う記憶障害、及び特にアルツハイマー病。

特定の実施形態では、９ＣＤＨＲＯＬ又はその任意のエステルが記憶改善のために使用される。

特定の実施形態では、本発明は、９ＣＤＨＢＣのカロテノイド前駆体としての９ＣＢＣの使用に関する。

特定の実施形態では、本発明は、非治療的用途において人体中の９ＣＤＨＢＣのレベルを高めるための栄養補助食品としての９ＣＢＣの使用に関する。

９ＣＤＨＲＯＬ処理は、遅延非場所合わせタスク（Ｄｅｌａｙｅｄ Ｎｏｎ－Ｍａｔｃｈ ｔｏ Ｐｌａｃｅ Ｔａｓｋ：ＤＮＭＴＰ）の作業メモリのパフォーマンスを向上させる。（ａ）野生型Ｃ５７ＢＬ６Ｎ雄マウス（ｎ＝５）についての増加する学習曲線は、作業記憶課題の獲得を例示する。試行間間隔（ＩＴＩ）の増加について採点された記憶能力は、灰色の領域で示され、３分のＩＴＩ及びマウスが記憶障害を示し、群全体で１３分の平均値に達した平均ＩＴＩ（ｇｒ１３として示される）に対応する。（ｂ）９ＣＤＨＲＯＬ（ただしビヒクル処置ではない）は、治療の７～９時間後にｇｒ１３の平均ＩＴＩで試験したが、作業記憶性能を改善した。１又は２群のｔ検定で同定された統計的差異は、それぞれ以下のように示された：^＊、チャンスレベルでの５０％パフォーマンスと比較した場合はｐ＜０．０５、獲得フェーズの最終日のパフォーマンスとの比較は＃、ｐ＜０．０５（１０日目）。

９ＣＤＨＲＯＬ標準混合物（上部クロマトグラム）及びビヒクル処置後のマウスの肝臓中の内因性レベル（下部クロマトグラム）。

ビヒクル処置後の９ＣＤＨＲＯＬはマウスにおける内因性レベルを表し（青色）、マウスにおける９ＣＤＨＲＯＬ処置後（赤色）。

ビヒクル処置後の９ＣＤＨＲＡのレベルは、マウスにおける内因性レベルを表し（青色）、及び９ＣＤＨＲＯＬ処置後（赤色）。

ビヒクル処置後の９ＣＤＨＲＡのレベルはマウス肝臓における内因性レベルを表し（青色）、９ＣＤＨＲＯＬ処置後（赤色）。上図：正常範囲（最大に設定）；下図：内因性レチノイドの最大範囲の拡大範囲。

９ＣＤＨＲＡ対照処置（内因性レベル）及び乏突起膠細胞へのレチノイドの補充後。上：内因性（青）、９ＣＤＨＲＯＬ（オレンジ）、９ＣＤＨＲＯＬ‐アセテート（ピンク）、下：９ＣＤＨＲＡ‐アセテート（ピンク）

新しいビタミンＡ５クラスター前駆体の推定栄養前駆体の要約。内因性レチノイドとしてまだ同定されていないレチノイドは、青い文字でマークされている。略語：９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノール（９ＣＤＨＲＯＬ）、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチナール（９ＣＤＨＲＡＬ）及び９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノイン酸（９ＣＤＨＲＡ）。）、全トランス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチナール（ＡＴＤＨＲＡＬ）、全トランス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノール（ＡＴＤＨＲＯＬ）、全トランス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノイン酸（ＡＴＤＨＲＡ） ）

（Ｒ）‐９ＣＤＨＲＡの増加する用量はＲｂｐｌ‐／‐マウスの作業記憶障害を逆転させ、最小のＩＴＩで試験した場合にＤＮＭＴＰ課題においてＷＴマウス（ｎ＝８／群）において記憶促進活性を示した。このＩＴＩでは、マウスはチャンスレベル（５０％）でパフォーマンスをし、Ｒｂｐ１‐／‐では６分、又はＷＴマウスでは１２分であった。濃度１０^‐５Ｍのｔｔｔ：ＡＴＲＡは細胞傷害性であった。同じ群のビヒクル処置と比較して、^＊、ｐ＜０．０５。＃、ｐ＜０．０５。＃＃、ｐ＜０．０１；＄、ｐ＜０．０５；＄＄、ｐ＜０．０１；５０％のチャンスレベルでのパフォーマンスとの比較のための１つのグループのスチューデントｔ検定。全てのエラーバーはＳ．Ｅ．Ｍ．を表す。

Ｒ‐９ＣＤＨＲＡはインビボでＲＸＲアゴニスト様活性を示す。ＵＶＩ２１０８及びＲ‐９ＣＤＨＲＡによる処置後の行動障害の逆転。 Ｒ‐９ＣＤＨＲＡ（０．１、１、２ｍｇ／ｋｇ）の用量を増やすと、強制水泳試験でＲｂｐｌ‐／‐マウスの絶望行動が減少する（ビヒクル群でｎ＝２６、残りの各群でｎ＝６‐８）。ＰＬＳＤフィッシャー検定によって明らかにされた統計学的差異は、それぞれの群におけるビヒクル処置ＷＴ対照との比較のために、^＊＊＊、ｐ＜０．００１として示された。全てのエラーバーはＳ．Ｅ．Ｍ．を表す。

Ｒ‐９ＣＤＨＲＡは慢性的な社会的敗北ストレスモデルにおいて抗うつ効果を示す。 図１０ａ：社会的敗北ストレスは、ストレスを受けていない対照（ｃｔｒ；ｎ＝１７）マウスと比較して、（ビヒクル；ｎ＝１２）を受けたマウスにおける強制水泳試験における不動時間を有意に増加させた。９ｃＤＨＲＡ処置は、用量依存的に（９ｃＤＨＲＡの、１ｍｇ／ｋｇについてｎ＝８及び３ｍｇ／ｋｇについてｎ＝６）、合成ＲＸＲアゴニストＵＶＩ２１０８（ｎ＝１２）と同程度まで、ストレスマウスにおけるそのような不動を減少させた。 図１０ｂ：社会的敗北ストレスによって誘発されたスクロース嗜好性欠如は、ＵＶＩ２１０８によって又は９ｃＤＨＲＡ処置によって防止された。ＰＬＳＤフィッシャー検定によって明らかにされた統計的差異は、以下のように示された：^＊、対照マウスと比較した場合、ｐ＜０．１。＃、ビヒクル処置ストレスマウスと比較してｐ＜０．１。スクロース消費の５０％の値に相当するスクロース嗜好の欠如と比較して、＄＄、ｐ＜０．０１、＄、ｐ＜０．１。全てのエラーバーはＳ．Ｅ．Ｍ．を表す。

レチノール適用後の細胞培養中のレチノールの測定：ＲＯＬ標準（黒線）、ＡＴＲＯＬ適用（青い線）、９ＣＲＯＬ適用（赤い線）

レチノール適用後の細胞培養物中のＤＨ‐ＲＡの測定：ＲＯＬ標準（黒線）、ＡＴＲＯＬ適用（青線）、９ＣＲＯＬ適用（赤線）。

レチノール適用後の細胞培養物中のＲＡ測定：ＲＯＬ標準（黒線）、ＡＴＲＯＬ適用（青線）、９ＣＲＯＬ適用（赤線）。

Ａ．９ＣＤＨＲＯＬ標準混合物（上部クロマトグラム）とマウス脳における内因性レベル（中央クロマトグラム）及び９ＣＤＨＲＯＬ処理後（下部クロマトグラム）、脳試料の両方のｙ軸スケールは同一であったが、標準のｙ軸は類似しておらず、関連するピークの最高値に適合した。Ｂ．ヒト血清中９ＣＤＨＲＯＬ（上のクロマトグラム）と９ＣＤＨＲＯＬ／ＡＴＤＨＲＯＬ標準混合物（下のクロマトグラム）、両方のｙ軸スケールが類似しておらず、関連するピークの最大値に適合した。Ｃ．ヒト食物連鎖／ウシ肝臓中の９ＣＤＨＲＯＬ（上のクロマトグラム）及び９ＣＤＨＲＯＬ／ＡＴＤＨＲＯＬ標準混合物（下のクロマトグラム）、両方のｙ軸スケールは類似せず、関連するピークの最大値に適合した。Ｄ．ＣＴＲＬ、９ＣＢＣ、９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＤＨＲＯＬ投与後のインビトロでのヒト乏突起膠細胞株における９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＢＣの９ＣＤＨＲＯＬへの変換。上部の３つのクロマトグラムのＹ軸スケールは似ており、関連するピークの最大値に適合したが、下部のクロマトグラムははるかに大きいスケールである。

ヒト食物連鎖中の９ＣＤＨＢＣ、２５．０分で溶出する標準９ＣＤＨＢＣ（上図）及び２５．０分で同時溶出するピークを有する缶から抽出されたモモ（下の図）及び同等のＵＶ／ＶＩＳスペクトル（データは示さず）。

カロテノイドの内部変換：Ａ．インビトロでのヒト乏突起膠細胞株における投与された９ＣＢＣの９ＣＤＨＢＣへの変換。２５．１分の保持時間を有するピークは、９ＣＤＨＢＣ処理後に存在し、並びに９ＣＢＣ処理後にはより低レベルで存在する。Ｂ．インビトロで乏突起膠細胞ヒト細胞株においてＡＴＢＣの９ＣＢＣ又は９ＣＤＨＢＣへの変換なし。ＡＴＢＣは２７．２分で溶出し（４５０ｎｍのＵＶｍａｘを有しながら４１１ｎｍで検出可能）、ＡＴＢＣ処理後に非常に高レベルで存在する（右パネルの上から２番目の図）。９ＣＢＣは９ＣＢＣ処置後に主要な肩のピークとして存在するが、ＣＴＲＬ又は代替治療後には検出されない。

Ａ．インビトロでのヒト乏突起膠細胞株における９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ‐エステル及び９ＣＤＨＲＡ‐エステルの９ＣＤＨＲＡへの変換。材料及び方法のセクション、レチノイド勾配で説明したように、使用したＨＰＬＣシステム及び抽出手順が異なるため、誘導体の保持時間がわずかに異なることが観察された。Ｂ．９ＣＤＨＢＣの９ＣＤＨＲＡへの変換：同じｙ軸スケール寸法を用いたマウス肝臓における対照処置／内因性（上部クロマトグラム）及び９ＣＤＨＢＣ補充（下部クロマトグラム）後の９ＣＤＨＲＡ及びＡＴＤＨＲＡ標準レベル。Ｃ．９ＣＤＨＲＯＬから９ＣＤＨＲＡへの変換：関連器官（血清、脳、肝臓）あたり同じｙ軸スケール寸法を使用して、マウスにおいて対照処置／内因性後（上部クロマトグラム）及び９ＣＤＨＲＯＬ補給後（下部クロマトグラム）の血清、脳及び肝臓における９ＣＤＨＲＡ及びＡＴＤＨＲＡ標準レベル。

慢性社会的敗北ストレスモデルにおける９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＢＣの抗うつ活性。（ａ）社会的敗北ストレスは、ストレスを受けていない対照（ＣＴＲ；ｎ＝６）マウスと比較して、（ｖｅｈ；ｎ＝６）を受けたマウスにおける強制水泳試験における不動時間を有意に増加させた。９ＣＤＨＲＯＬ処置（ｎ＝５）は、９ＣＤＨＢＣ（ｎ ＝４）と同様に、ストレスを受けたマウスにおいてそのような不動性を減少させた。（ｂ）社会的敗北ストレスによって誘発されたスクロース嗜好性欠乏は９ＣＤＨＲＯＬ又は９ＣＤＨＢＣ処置によって予防された。スチューデントｔ検定によって明らかにされた統計的差異は、以下のように示された：^＊＊、対照マウスと比較した場合、ｐ＜０．０１；＃、ビヒクル処置ストレスマウスと比較してｐ＜０．０５；スクロース嗜好性の欠如に対応するスクロース消費量の５０％の値と比較して、＄、ｐ＜０．０５。全てのエラーバーはＳ．Ｅ．Ｍ．を表す。

定義
本発明は、本明細書に提供された特定の例及び実施形態に限定されず、当業者の技術の範囲内である代替物が含まれるべきであることが理解されるべきである。本明細書で使用される用語は特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定することを意図するものではないこともまた理解されるべきである。

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかにそうでないことを指示しない限り、複数の言及を含む。

典型的には、本発明による化合物は、エナンチオマー（純粋なエナンチオマー又はそれらが本発明の方法によって得られるという条件で混合物）、それらの水和物及び溶媒和物、それらの固体形態、並びに前記形態の混合物に関する。

「エナンチオマー」は、異なる化合物であり、互いの鏡像である一対の光学異性体化合物のいずれかである。

「エナンチオマー」は、本明細書において、好ましくは、エナンチオ選択的方法により、好ましくはエナンチオ選択的調製方法により、非常に好ましくはエナンチオ純粋又はエナンチオマー的に純粋な化合物として得られるものとして本発明の化合物として理解される。「エナンチオ純粋」又は「エナンチオマー的に純粋な」は、分子が（本発明の方法によって得られる程度まで）同じキラリティーを有する化合物である。好ましくはエナンチオ純粋又はエナンチオマー的に純粋とは、光学的に純粋、より好ましくは少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、さらに好ましくは少なくとも９８％又は９９％の光学純度を有することを意味する。非常に好ましくは、「エナンチオ純粋」又は「エナンチオマー的に純粋」の分子は、検出限界内で同じキラリティーを有する。

「アルキル」とは、本明細書では、飽和で、最大２５個（好ましくは２３個又は２１個又は１９個）の炭素原子を有する、炭素原子及び水素原子のみからなる直鎖又は分岐の炭化水素鎖基を指す。特定の実施形態において、アルキルは、１～２５個の炭素原子を含み得（Ｃ_１‐２５アルキルと称される）、又は好ましくは、それは、Ｃ_{１３‐２５}アルキル、Ｃ_{１３‐２３}アルキル、Ｃ_{１３‐２１}アルキル、Ｃ_{１３‐１９}アルキル又はＣ_{１３‐１７}アルキルであり得る。あるいは、それは短鎖アルキル、例えば、Ｃ_１‐３アルキル、Ｃ_１‐４アルキル、Ｃ_１‐５アルキル、Ｃ_１‐６アルキル、Ｃ_１‐７アルキル又はＣ_１‐８アルキルであり得る。さらにあるいは、いくつかの実施形態では、それは、Ｃ_８‐１７アルキル、Ｃ_８‐１５アルキル又はＣ_８‐１３アルキルであり得る。アルキルは、単一の共有結合によって分子の残りの部分に結合している。アルキルは、好ましくは、非分岐の直鎖炭化水素鎖である。あるいは、それは分岐炭化水素鎖を含んでもよいが、分岐側鎖は典型的にはメチル、エチル又はプロピル基、好ましくはメチル又はエチル基である。アルキル鎖は、以下の置換基：ハロ（‐Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ又はＩを含む）、シアノ、ニトロ、オキソ、Ｃ_１‐３アルコキシル又はヒドロキシルのうちの１つ以上で場合により置換されていてもよい。好ましくはアルキルは非置換である。

「アルケニル」とは、本明細書において、不飽和である、すなわち、少なくとも２個から２５個まで（好ましくは２３個又は２１個又は１９個）の炭素原子を有する、少なくとも１個の二重結合（すなわちＣ＝Ｃ）を含む、炭素原子及び水素原子のみからなる直鎖又は分岐炭化水素鎖基を指す。特定の実施形態では、アルキルは、２～２５個の炭素原子を含み得る（Ｃ_２‐２５アルキルと呼ばれる）。必要な変更を加えれば、鎖長はアルキルと同じであり得るが、最も短い鎖は少なくとも２個の炭素原子を含む。分岐及び置換に関しては、アルキル鎖の場合と同じことが当てはまる。

本発明の（Ｒ）９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールのエステルは脂肪酸エステルであり得る。ここで、用語「脂肪酸」は、飽和（アルキル）又は不飽和（アルケニル）であり得る長い脂肪族（非芳香族）鎖を有するカルボン酸を指す。好ましくは、本発明において使用される脂肪酸中のアルキル鎖は、直鎖又は分岐鎖のいずれかである開鎖化合物である。典型的には、脂肪酸アルキル鎖は少なくとも１１個、最大２５個、好ましくは２３、２２又は２１個の炭素を含む。

本発明の化合物は同様に医薬的（薬用）及び栄養的用途を有する。

「医薬組成物」は、健康を回復又は維持するために人体又は動物の体の治療に使用するための組成物に関し、前記組成物は、（１以上の）活性剤及び担体として有用な１以上の追加の物質を含む。用語「担体」とは、それと共に剤が投与用に製剤化される希釈剤、アジュバント、充填剤、賦形剤、安定剤、又はビヒクルをいう。

「栄養補助食品」（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）とは、その基本的な栄養価に加えて健康上の利益を提供する食品を指す。栄養補助食品は生理学的利益を有するか、又は生理学的障害若しくは不快感に対する保護を提供する。栄養補助食品組成物は、本発明の組成物と少なくとも１つの追加の物質、例えば栄養補助食品キャリア又は食品成分を含む。

用語「栄養補助食品」（ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）は、栄養補助食品（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）、例えば摂取しなければ十分な量で消費されない可能性がある栄養素を提供することを目的とした栄養補助食品組成物（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）を指す。

「機能性食品」は栄養補助食品（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）、例えば栄養補助食品組成物（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）でもあり、それが含む伝統的な栄養素を超えて、生理学的障害又は不快感に抗する利益を提供し得る又は保護を提供し得る任意の改質食品又は食品成分を指す。

「健康強調表示」は栄養補助食品の健康上の利益を定義し、国内法又は同等の法律に従って規制上の承認（医薬品の場合の適応症に類似）の対象となる。「健康強調表示」とは、食品ラベルとして、食品マーケティングにおいてである。

本明細書で使用される「含む」という用語は、含有する、すなわち他の実体又は要素の存在を可能にすることを意味する。この用語は、「列挙された必須成分又は成分及び場合により他の非必須成分又は成分を含むことを意味する「から本質的になる」；又は任意の追加成分を排除することを意味する「からなる」に限定されることができる。

「治療」（ｔｈｅｒａｐｙ）は予防及び／又は処置（治療）（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）を含み得る。

疾患又は状態の発症の「予防すること」又は「予防」とは、少なくとも、疾患又は障害を獲得する危険性又は獲得のしやすさの可能性の減少、又は好ましくは疾患又は障害の臨床症状の少なくとも１つを引き起こし、疾患にさらされているか、又はその素因がある可能性があるが、まだその疾患の症状を経験していないか又は表示していない患者において発症しないことを指す。

いくつかの実施形態では、任意の疾患又は障害の「治療すること」（「処置すること」）又は「治療」（「処置」）は、少なくとも１つの疾患、障害又は状態の改善、又は好ましくは疾患又は障害又はそれらの少なくとも１つの臨床症状の発症の軽減を指す。特定の実施形態では、「治療すること」（「処置すること」）又は「治療」（「処置」）とは、疾患の少なくとも１つの身体的パラメータを改善することを指す。特定の実施形態では、「治療すること」（「処置すること」）又は「治療」（「処置」）は、物理的又は生理学的のいずれかで、疾患又は障害又は状態を阻害することを指す。特定の実施形態では、「治療すること」（「処置すること」）又は「治療」（「処置」）は、疾患又は障害の発症を予防又は遅延させることを指す。

特に中枢又は末梢神経系治療の疾患の場合、特に変性障害の場合又は精神障害の場合、必要に応じて、変性速度又は衰退速度を遅くすること；変性の衰弱を少なくする；対象の身体的又は精神的な健康状態を改善する；記憶及び／又は認知機能を改善又は保存すること：覚醒状態及び集中する能力を回復及び／又は改善すること、又は状況によっては認知症の発症を予防することを含み得る。

したがって、「予防」及び「治療」（「処置」）という用語は、後者が疾患又は障害の発症を予防又は遅延させることを含む場合、そして含む限り、上記の定義から以下のように重複してもよい。

被験体は、任意の動物被験体又はヒト被験体、特に脊椎動物被験体、より具体的には温血動物被験体又は哺乳動物被験体である。

本明細書で使用される「哺乳動物被験体」は、任意の哺乳動物、好ましくは実験動物、ペット、家畜動物又は家畜であり得る。哺乳動物被験体は、例えば、げっ歯類、霊長類、類人猿又はヒトであり得る。好ましくは哺乳動物は、新皮質（脳の領域）、毛髪及び乳腺を有する哺乳類クラス内の任意の脊椎動物である。

本発明による化合物及び医薬組成物は治療方法に使用することができる。

本発明による化合物及び医薬組成物は、レチノイン酸受容体（ＲＡＲ）及びレチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）を含む疾患を治療するための治療方法において使用される。好ましくは、この疾患はレチノイドＸ受容体を含み、本発明のリガンドはそれに対して選択的である。そのような疾患は、ＲＸＲシグナル伝達の障害による疾患であり得る。

本発明による化合物及び医薬組成物は治療方法、特に精神障害／疾患の治療のために使用される。

「中枢神経系関連疾患」という用語は、中枢神経系（ＣＮＳ）、すなわち脳又は脊髄のいずれかに影響を及ぼし、好ましくはＲＡＲ又は他の核内受容体とのＲＸＲ複合体に関連する神経又は精神障害をもたらす疾患又は障害である。ＣＮＳ疾患の原因は、例えば、外傷、感染症、変性、自己免疫疾患、構造上の欠陥、腫瘍、及び脳卒中であり得る。ここでは、神経変性疾患、気分障害、統合失調症、自閉症に焦点を当てている。

用語「末梢神経系関連疾患」は、末梢神経系に影響を及ぼす疾患であり、好ましくはＲＡＲ又は他の核内受容体とのＲＸＲ複合体に関連している。しかしながら、本発明のリガンドは、好ましくはＲＸＲに対して選択的である。

用語「精神障害」は、とりわけ、強迫性障害、心的外傷後ストレス障害、不安、パニック発作、統合失調症、統合失調症性障害、うつ病、躁病、躁うつ病（双極性障害）、無関心、せん妄、恐怖症、健忘症、摂食障害（例、過食症、食欲不振）などを含む。一実施形態では、精神障害には、強迫神経症、心的外傷後ストレス障害、パニック発作、統合失調症、統合失調症性障害、うつ病、躁病、躁うつ病（双極性障害）、無関心、せん妄、恐怖症、健忘症、及び摂食障害（例えば、過食症、食欲不振）が含まれる。別の実施形態では、精神障害は、強迫神経症、統合失調症、統合失調性感情障害、鬱病、躁病、躁鬱病（双極性障害）、無関心、せん妄、及び恐怖症を含む。別の実施形態では、精神障害は、強迫神経症、統合失調症、統合失調症性感情障害、鬱病、躁病、及び躁鬱病（双極性障害）を含む。好ましくは、又は特に本明細書で使用される「精神障害」という用語は、疾病及び関連健康問題のＷＨＯ国際統計分類、１０版のセクションＦ０６‐Ｆ５０に記載されている「精神障害」を意味し、当業者によって理解されるであろう。一実施形態では、神経変性障害は精神障害又は精神障害の範囲から除外される。

「作業記憶又は同義語短期記憶」は、数分から数時間、場合によっては数日に及ぶ短期間の情報の取得、保存、保持及び想起を特徴とし、対象の行動を修正するために使用される。

「記憶喪失」とは、過去の経験、知識及び思考を含む情報を獲得、保存、保持及び／又は想起する能力の低下を指す。

用語「うつ病」又は「うつ病性障害」又は「気分障害」は、当業者によって理解され得る医学分野を指す。「気分障害」とは、長期間にわたって個人が経験している感覚の緊張又は感情的状態の混乱を指す：気分障害には、大鬱病障害（すなわち、単極性障害）、躁病、不快気分、双極性障害、気分変調症、気分循環症及び他の多くのものが含まれる。例えば、精神障害の診断及び統計マニュアル、第４版、（ＤＳＭ ＩＶ）を参照のこと。「大うつ病障害」、「大うつ病性障害」、又は「単極性障害」は、以下の症状のいずれかを含む気分障害を指す。持続的な悲しい、不安、又は「空の」気分；絶望や悲観論の感情；罪悪感、無価値、又は無力感；セックスを含む、以前は楽しまれていた趣味や活動に対する興味や喜びの喪失；エネルギーの低下、疲労、「減速」；集中、覚え、決断をするのが難しい；不眠、早朝の目覚め、又は寝過ごし；食欲及び／又は体重減少、又は過食及び体重増加；死、自殺、又は自殺企図の考え；落ち着きのなさやいらいら；頭痛、消化器疾患、慢性疼痛など、治療に反応しない持続的な身体症状。うつ病の様々なサブタイプが、例えばＤＳＭ ＩＶに記載されている。

本明細書で使用される「神経変性疾患又は障害」という用語は、進行性神経系機能不全によって、又は神経組織、好ましくはニューロンの構造又は機能の進行性喪失（ニューロンの死を含む）によって特徴付けられる疾患又は障害を指す。「神経変性疾患又は障害」は、好ましくは、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、タンパク質ＴＤＰ‐４３に関連する前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ‐ＴＤＰ、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、血管性認知症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＭＣＩを伴うパーキンソン病、及び加齢、疾患又は外傷による脳の変化による神経変性関連認知症、又は脊髄損傷及び運動失調、播種性硬化症及び多発性硬化症又は他の神経学的状態からなる群から選択される。

本発明による化合物及び医薬組成物は、治療方法において、特にアルツハイマー病の治療のために使用される。

「アルツハイマー病」という用語は、臨床的によく認識されている最も一般的な形態の認知症を指す。記憶喪失もまたこの疾患において重要な役割を果たす。

発明の詳細な説明
ビタミンＡは、ビタミンＡ欠乏症候群を完全に回復させることができる物質である（ＩＵＰＡＣ‐ＩＵＢ、１９８２年；Ｍｏｏｒｅ、１９２９年；Ｒｕｈｌ、２００７年）。本明細書では、ビタミンＡ１は、レチノール、レチニルエステル及びレチナール、並びにβ‐カロテン、α‐カロテン及びβ‐クリプトキサンチンのようなプロビタミンＡ誘導体及び同等のビタミンＡ２誘導体（３，４‐ジデヒドロ‐レチノイド及びカロテノイドアンヒドロルテイン）に適用される用語として用いられ、これは主に鳥類や魚種に存在し（Ｃａｍａ ｅｔ ａｌ．、１９５２；Ｍｏｉｓｅ ｅｔ ａｌ．、２００７）、このビタミンＡ１はこの範疇に属する。これまで脊椎動物に関連していなかったビタミンＡ３及びＡ４クラスターからの視覚色素のヒト関連性もまた批判的に考慮されるかもしれない（Ｂａｂｉｎｏ ｅｔ ａｌ．、２０１６）。

成体動物では、ＲＸＲヘテロ二量体、主にＲＸＲ‐ＶＤＲ、ＲＸＲ‐ＰＰＡＲ、ＲＸＲ‐ＦＸＲ及びＲＸＲ‐ＬＸＲヘテロ二量体は、ＲＸＲ‐ＲＡＲと共に、恒常性脂質代謝及び炎症を調節する（Ｃｈａｗｌａ ｅｔ ａｌ．、２００１；Ｄｅｓｖｅｒｇｎｅ、２００７年；Ｅｖａｎｓ及びＭａｎｇｅｌｓｄｏｒｆ、２０１４年；Ｍａｎｇｅｌｓｄｏｒｆ及びＥｖａｎｓ、１９９５年；Ｍａｎｇｅｌｓｄｏｒｆら、１９９５年；Ｓｈｕｌｍａｎ及びＭａｎｇｅｌｄｓｄｏｒｆ、２００５年）に概説されている。この受容体媒介シグナル伝達の変化は、重度の代謝性及び免疫学的疾患をもたらす（（（Ｓｚａｎｔｏ ｅｔ ａｌ．、２００４ａ）及び（Ｄｅｓｖｅｒｇｎｅ、２００７）に概説されている。）これらの生理学的効果のいくつかは、炎症反応や脂質シグナル伝達のようなＲＸＲ媒介プロセスに依存し、それにより、それらは成体ビタミンＡ欠乏動物において同定された種々の病態生理学的作用に関連する（Ｎｕｎｅｚら、２０１０；Ｓｔｅｐｈｅｎｓｅｎら、２００７；Ｗａｎら、２００３）。

内因性ＲＸＲリガンドは、哺乳動物生物においてＲＸＲヘテロ二量体媒介シグナル伝達を可能にするための主要なスイッチとして機能する。ビタミンＡ欠乏動物で観察された様々な効果は、ＲＸＲ‐ＫＯ動物で見られた効果に匹敵した（Ｋａｓｔｎｅｒら、１９９７ａ；Ｋａｓｔｎｅｒら、１９９７ｂ）。本発明者らは、視覚における非核ホルモン受容体媒介効果に加えて、ＲＡＲ媒介経路、特にＲＸＲ媒介経路がビタミンＡ活性の主要経路であり、これらは内因性ＲＡＲ及び／又はＲＸＲリガンドに依存すると考える。

ＡＴＲＡが内因性の関連性のあるＲＡＲリガンドであることは広く認められているが、他のリガンドもまた記載されている（Ｍｏｉｓｅら、２００５年；Ｒｕｈｌら、２０１５年）。９‐シス‐レチノイドは、全トランス‐レチノイドに変換することができ、内因性ＲＡＲリガンドＡＴＲＡの追加の前駆体として機能することができる。

Ｓｈｉｒｌｅｙ ＭＡらは１９９６年に、ラットでは９‐シス‐ＲＡは１３，１４‐ジヒドロ‐９‐シス‐ＲＡに還元され、後者はタウリンと結合して新規の代謝産物を形成することを見出した（Ｓｈｉｒｌｅｙ ＭＡ ｅｔ ａｌ．１９９６）が、それにもかかわらず、これをβ酸化をもたらす初期段階と考えた。

最近、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（９ＣＤＨＲＡ）がマウスの内因性レチノイドとして同定されている。本発明者らは、９ＣＤＨＲＡは、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）、脳内の様々な生理学的関連経路の調節、脂質代謝、炎症、分化、増殖、及び細胞周期に関与する核内ホルモン受容体の内因性関連リガンドであると結論づけた。ＲＸＲシグナル伝達に関連した脂質恒常性の調節異常及び炎症が関与する神経機能障害、心血管疾患及び皮膚／免疫関連疾患に及ぶ様々な疾患において、ＲＸＲ媒介シグナル伝達が調節不全になることが報告されている。本発明者らはさらに、リガンドのレベルの低下によるＲＸＲの機能不全におそらく関連するシグナル伝達脂質分子として、内因性のＲＸＲリガンドである９ＣＤＨＲＡを同定した。それによって、ビタミン５経路と呼ばれる新しいビタミンＡ経路が同定された。

本発明は、９ＣＤＨＲＡの生理学的前駆体並びに栄養前駆体に関する。主な前駆体は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール（９ＣＤＨＲＯＬ）、すなわちビタミンＡ５及びそのエステル、９‐シス‐１３、１４‐ジヒドロレチニルエステル（９ＣＤＨＲＯＬ‐エステル）並びに９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸エステル（９ＣＤＨＲＡ‐エステル）であると主張されている。これらの分子に加えて、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐β‐カロテン（９ＣＤＨＢＣ）のようなプロビタミンＡ（５）前駆体としての新規カロテノイド。９ＣＤＨＢＣのさらなる上流前駆体（９‐シス‐β‐カロテン（９ＣＢＣ）のような）が企図される。

本研究の目的は、有機化学合成によってこれらの追加の誘導体を見つけて合成し、マウスモデルにおけるうつ病について動物モデルにおいてこれらの前駆体の代表例を試験することであった。

実施例に記載されている一連の実験において、本発明者らはエチル９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエートを介した９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール及び９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチニルアセテートの新規化学合成を開発した。他の９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸及び９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールのエステル（パルミチン酸塩など）は、基本的に同じ方法を用いて容易に調製することができる。

９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐β‐カロテン及び合成された９‐シス‐β‐カロテンの新規合成方法もまた開発されている。

あるいは、長鎖レチニルエステルの化学酵素的合成もまた選択肢である。これらの合成法の一部は出発物質としてレチノールを利用している［Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ ｅｔ ａｌ．Ａｕｓｌ．．１．Ｃｈｅｍ．１９９２，４５，６４１；Ｍａｕｇａｒｄ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｌｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２００２，１８，４２４）。特定の著者は、長鎖レチニルエステルの生体触媒調製のための出発物質としてレチニルアセテートのようなレチニルエステルを利用している（例えば、未審査の日本特許出願ＪＰ ６２‐２４８４９５、１９８７参照）。ＵＳ７５６６７９５Ｂ２は、短鎖レチニルエステル及び適当な長鎖酸又はエステルから、酵素及び有機溶媒の存在下で、そして任意にレチニルエステルを形成するための少なくとも１つのモレキュラーシーブ及び／又は少なくとも１つのイオン交換樹脂の存在下での化学酵素処理によるレチノールの長鎖エステルの改良製造方法を記載している。

いくつかの特許出願は、様々なビタミンＡ型前駆体及びそれらの変種に向けられてきた。
酸型のエステルに関しては、ＷＯ９５／０４０１８Ａ１は９‐シス‐レチノイン酸エステルの製造に関する。化合物は、炭素１１と１２の間、及び炭素原子１３と１４の間に二重結合を含み、シス又はトランス配置のいずれかを有することができる。本明細書において方法を利用することができるが、化合物は必ずしも１３，１４ジヒドロ誘導体であることはできない。ＷＯ９５／３２９４６Ａ１はまた、９‐シス‐レチノイン酸エステルの調製に関する。化合物は、シス異性体とトランス異性体の両方であり得る、炭素１１‐１２と１３‐１４の間の二重結合を含まなければならない。

レチノールのエステルに関して、ＷＯ２０１３１３４８６７Ａ１は、９‐シス又は１１‐シス‐レチニルエステル（請求項１７参照）を用いた網膜色素変性症の治療を記載している。その記載は代謝産物として９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸を述べているが、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール誘導体への示唆はない。（「薬物動態学的分析により、主な代謝産物は９‐シス‐レチニルオレエート又は９‐シス‐レチニルパルミテートのいずれか、及び１３，１４‐ジヒドロ‐９‐シス‐レチノイン酸であることが示された。投与後４時間で、これらの化合物の濃度は、９‐シス‐レチニルアセテート及び９‐シス‐レチノールの濃度よりも高かった。」７０ページの最後から２番目の段落を参照。）

ＷＯ２０１１／０３４５５１Ａ２は、脂質ビヒクル中に１つ以上の９‐シス‐レチニルエステル（アセテート、パルミテートなど）を含む医薬製剤及び眼科目的のためのそれらの使用を記載している。その記載は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール誘導体の使用については言及していない。

したがって、明らかに、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール又はそのエステル誘導体の医学的用途、特に栄養学的用途を記載している文書はないようである。さらに、我々は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールのエステル誘導体に関するデータを見いだしていない。

ＲＸＲ‐リガンド結合はビタミンＡ媒介効果に関与する非常に重要なメカニズムである。

ＲＸＲ前駆体経路は、ＡＴＲＡ及び選択的ＲＡＲ媒介シグナル伝達をもたらすＲＡＲ前駆体経路とは異なる。あるいは、ＡＴＢＣについて証明されているようなプロビタミンＡ１カロテノイドは、人間の体内で９‐シス誘導体に変換することができず、それによってＲＸＲ選択的リガンドの前駆体ではない。ビタミンＡ１アルコール全トランス‐レチノールは、弱くかつ非異性体選択的に９ＣＤＨＲＯＬに変換され、それによってＲＸＲ選択的リガンドの弱い前駆体及び非選択的前駆体である。ＡＴＲＯＬは、レチニルエステルとして貯蔵され、一般的な恒常性のために血清及び細胞中のタンパク質を結合することによって厳密に制御され、ＲＡＲ及びＲＸＲリガンド合成並びにＲＸＲ選択性なしでさらにＲＡＲ及びＲＸＲ媒介シグナル伝達を可能にする多機能前駆体として主に役立ち得る。

本明細書では、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイドをＲＸＲリガンドの特異的及び／又は選択的前駆体と見なすことができると考えられる。上記で概説した情報に基づいて、ビタミンＡ１及びＡ２経路から生じる可能性のあるＲＸＲリガンドは、内因性関連性が全くないか又は非常に限られているように思われる。しかしながら、本発明者らは、ＲＸＲ活性化に関連するこの新たなシグナル伝達経路もまた、一般的なビタミンＡ機能に対する重要な基準として含まれるべきであることを示した（図７）。この図では、９ＣＤＨＲＡＬとＡＴＤＨＲＡＬの存在はまだ識別されていない。類似のアルコール型９ＣＲＯＬ及びＡＴＲＯＬは本質的に細胞培養で、例えば、乏突起膠細胞で対応する酸に変換されないため、この経路はビタミンＡ経路に特異的であるように思われる。まとめると、ビタミンＡ１経路に由来する非内因的に関連のない９ＣＲＡは内因性の関連するＲＸＲ活性化因子として除外されるべきであるため、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイド及びそれらの栄養前駆体は新規ビタミンＡシグナル伝達経路を表し、ビタミンＡ５経路と呼ばれる。

本発明者らは、インビトロ細胞系における哺乳動物生物における補給実験におけるこのビタミンＡ５経路の化合物の代謝変換を解明し、マウス及びヒト生物においてそれらを内因性誘導体として同定し、これらの誘導体をヒト食物連鎖内で直接的又は間接的に同定する。さらに、９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＢＣがＲＸＲ媒介プロセスとして社会的ストレス敗北プロトコルにおいて抗うつ活性を示すことが調査され、驚くべきことに発見された。したがって、本発明は、ＲＸＲ‐リガンド又はビタミンＡ５（９ＣＤＨＲＯＬ）並びに９ＣＤＨＢＣのようなＲＸＲ‐リガンドプレ前駆体又はビタミンＡ５前駆体（プロビタミンＡ５誘導体）の投与による鬱病の新規治療方法に関する。

ＲＸＲシグナル伝達調節不全疾患の中で、ＲＸＲシグナル伝達効果を示す例として、うつ病は、病因が明確に同定されていない精神障害の異種群として選択されてきた。それは、無快感症及び絶望感を含む多くの中核的な情動的症状、並びに作業記憶の不足などのそれほど具体的ではない認知症状によって特徴付けられる。細胞性レチノール結合タンパク質１（Ｒｂｐ１）についてヌル突然変異を有するマウスにおける９ＣＤＨＲＡのバイオアベイラビリティの低下は、鬱病様の行動をもたらすのに対して、９ＣＤＨＲＡによる薬理学的治療はこれらのマウスにおける正常な行動を回復させることが示されている。鬱病については、選択的ＲＡＲリガンドの投与はいかなる改善及びこの機能不全ももたらさず、それは選択的ＲＸＲシグナル伝達関連機能不全であるように思われる。本明細書に開示される９ＣＤＨＲＡ前駆体による治療は、合成ＲＸＲリガンドと同様に、９ＣＤＨＲＡ及び９ＣＤＨＲＡ‐前駆体が鬱病行動の慢性ストレス動物モデルにおける鬱病様行動の予防に有効であったので、鬱病の研究に直接関連する。

具体的には、本発明者らは、９ＣＤＨＲＡ前駆体９ＣＤＨＲＯＬがマウスに経口投与された場合に、マウスの記憶能力に対する好ましい効果も誘発することができると判断した。さらに彼らは、マウスに経口投与したときに９ＣＤＨＲＯＬが９ＣＤＨＲＡの前駆体であると決定した。

これは、類似体である９‐シス‐レチノール（９ＣＲＯＬ）及び全トランス‐レチノール（ＡＴＲＯＬ）が、インビトロ実験では（図１３参照）、９‐シス‐レチノイン酸（９ＣＲＡ）及び全トランス‐レチノイン酸（ＡＴＲＡ）に変換されないか又はわずかにしか変換されないため、驚くべき発見である。したがって、それらは対応する酸型の優れた前駆体基質ではない。

同様に、類似体９‐シス‐レチノール（９ＣＲＯＬ）及び全トランス‐レチノール（ＡＴＲＯＬ）は、インビトロ実験では、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（９ＣＤＨＲＡ）及び全トランス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（ＡＴＤＨＲＡ）に変換されていないか、又はわずかにしか変換されていない（図１３参照）。したがって、それらは、活性ＲＡＲリガンド及びＲＸＲリガンドのどちらに対しても良好な前駆体基質ではない。

したがって、本発明者らは、９ＣＤＨＲＡ前駆体９ＣＤＨＲＯＬ並びにそのエステルが活性ＲＡＲ及びＲＸＲリガンドの特別な前駆体であることを示すことによって、予想外の新規ビタミンＡ経路を見出した。

本結果は、９ＣＤＨＲＯＬがマウスにおいて新規の内因性レチノイドであり、一度投与されると動物又は人体において９ＣＤＨＲＯＬをもたらす誘導体が、この新しいタイプのビタミンＡの供給源と見なすことができるという結論を可能にする。

本発明者らはまた、９ＣＤＨＲＯＬエステル及び９ＣＤＨＲＡエステルが９ＣＤＨＲＡの前駆体として９ＣＤＨＲＯＬに代わるものであることを決定した。

したがって、９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＲＯＬエステル及び９ＣＤＨＲＡエステルは９ＣＤＨＲＡの生理学的及び栄養学的前駆体であり、（特定の）組織においてより高い９ＣＤＨＲＡレベルに達するための代替治療として使用することができる。

一連の精神疾患モデルの動物実験では、Ｒ‐９ＣＤＨＲＡがインビボでＲＸＲアゴニスト様活性を示し、マウスの行動障害を回復させるというさらなる証拠が提供されている。

９ＣＤＨＲＡエステル及び９ＣＤＨＲＯＬ並びにそのエステルが、脳及び乏突起膠細胞において驚くべき様式で９ＣＤＨＲＡレベルを増加させるという証拠と一緒に、Ｒｂｐｌ‐／‐マウスにおける行動障害の逆転、野生型マウスにおける認知能力の改善、慢性の社会的敗北ストレスモデルにおける抗うつ効果の逆転を示すということは、中枢及び末梢神経系の広範囲の疾患における本発明の化合物の有用性を支持する。Ｒｂｐ１‐／‐マウスは、それらがＲＸＲｇ‐／‐と同じタイプの欠損を示すために使用されたものであり、これは、ＲＸＲｇシグナル伝達が下方制御されていることを示唆している。それらの記憶を正常化することは、これらのマウスが受容体自体（又は受容体機能性）ではなく、ＲＸＲリガンドを欠いているという証拠である。ＲＸＲｇ‐／‐マウスの使用は、９ｃＤＨＲＡが記憶を改善するためにＲＸＲｇで作用することを示す陰性対照であり、その結果、ＲＸＲｇが存在しない場合、それは記憶を改善することはできない。結果は野生型動物において確認された。

９ＣＤＨＲＡによるＲＸＲリガンド化は、選択的ＲＸＲ活性化経路並びにＲＸＲ‐ＬＸＲ、ＲＸＲ‐ＮＲ４Ａ、ＲＸＲ‐ＶＤＲ、ＲＸＲ‐ＦＸＲ及びＲＸＲ‐ＰＰＡＲ媒介シグナル伝達をもたらす。これらのＲＸＲ媒介シグナル伝達経路は、ＲＡＲリガンドによってではなく、ＲＸＲリガンドによってのみ改変され得る。

本発明者らは、内在性ＲＸＲリガンド９ＣＤＨＲＡ及びその有効な前駆体９ＣＤＨＲＯＬ（ビタミンＡ５）並びに上流の前駆体を見出した。このビタミンＡ５／プロビタミンＡ５経路は、我々の特許請求する選択的ＲＸＲ前駆体の製薬上の又は栄養上の又は皮膚局所的な用途を含む。

ＲＸＲ媒介シグナル伝達が様々な神経変性疾患、並びにアテローム性動脈硬化症、肥満及び糖尿病のようなＲＸＲ媒介改変脂質恒常性及び免疫調節が関与する皮膚及び心臓血管系のさらなる疾患のように増強される疾患に対するこれらのビタミンＡ５／プロビタミンＡ５化合物の予防及び使用。機能不全ＲＸＲ媒介シグナル伝達を有するこれらの疾患は、本発明者らのＲＸＲ選択的前駆体によって予防及び／又は治療することができる。

この研究で使用された例として、うつ病は、積極的な治療／予防戦略として、９ＣＤＨＲＡ並びに９ＣＤＨＲＡ前駆体として９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＢＣで、ＲＸＲ媒介シグナル伝達機能不全として治療された。しかしながら、ＲＸＲ‐ＫＯ表現型が主に肥満、糖尿病、アテローム性動脈硬化症及び食欲調節のような心臓血管系における神経変性疾患及び機能不全に及ぶ範囲で存在する多くの他の疾患が当該分野で報告されていた。

我々は、サプリメント／医薬品として、９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＢＣに与えることもできるａ）選択的生理的リガンド（９ＣＤＨＲＡ）又はｂ）食品中に存在する栄養前駆体によって選択的にスイッチオンすることができる重要な生理学的スイッチメカニズムをヒト生物において見いだしたと主張する。このスイッチは、ＲＸＲ媒介シグナル伝達を可能にし、それによってＲＸＲ依存性の機能不全及び疾患を予防することができる。

驚くべきことに、選択的９ＣＤＨＲＡ前駆体９ＣＤＨＢＣがＲＸＲ媒介シグナル伝達を可能にするためのプロビタミンＡ５カロテノイドであることも見出された。

ここに示すように、９ＣＢＣではなく９ＣＨＢＣだけが９ＣＤＨＲＯＬ（ビタミンＡ５）の優れた前駆体である。インビボの補給試験でマウスに経口投与する場合、カロテノイド９ＣＤＨＢＣはマウス血清、肝臓、脳の９ＣＤＨＲＡの優れた前駆体である。これは９ＣＤＨＢＣであり、９ＣＢＣではなく、特にＡＴＢＣではなく、９ＣＤＨＲＯＬのそしてまた９ＣＤＨＲＡの優れた前駆体であることが示されている。

９ＣＢＣ（すでに知られている）と９ＣＤＨＢＣは、人間の食物連鎖（桃の場合とブロッコリーの場合は追加で示されている）に存在するだけでなく、藻類に存在する食物連鎖の全体的な前駆物質にもなる。プランクトンは、主に藻類を含むが、プランクトン／藻類、魚類、大型の水生生物、そしてその後の陸生動物から始まり、ヒトの視点から選択的に評価される関連性のあるグローバルな食物連鎖の終わりとして最終的にヒトに至るこの地球上のすべての食物の出発物質である。

本発明によれば、９ＣＤＨＢＣ又は他の化合物又は本発明に従って使用するための化合物のような、単離されたビタミンＡ５又はその任意の前駆体を添加した機能性食品が特許請求される。好ましくは、本発明による機能性食品は加工食品であり、好ましくは保存食品である。

本発明の選択的ＲＸＲ前駆体リガンドは、非選択的化合物よりも驚くほど効果的である。例えば、既知の内因性レチノイドビタミンＡ１アルコール、ＡＴＲＯＬは、インビトロでのヒト乏突起膠細胞培養において、９ＣＤＨＲＯＬの単なる弱くて非異性体選択的な前駆体であり、９ＣＤＨＲＡの前駆体ではない。補給マウスでは、それは弱くそして部分的に有意に９ＣＤＨＲＡに変換されない：経口補給後にマウスで試験した血清中のファクター２（有意でない）、肝臓中のファクター２，７（有意）及びマウス脳中のファクター７（有意）、それによって、選択的ＲＸＲ‐リガンド前駆体としての使用のための前駆体基質の可能性が全くないか又は単に不十分であると決定される。比較のために同量のこれらのレチノイドをマウスに補給した場合、我々の新規クレームされたビタミンＡ５アルコールとしての９ＣＤＨＲＯＬは、インビトロでヒト乏突起膠細胞培養において９ＣＤＨＲＡに卓越して、非常に効率的に変換される（血清でファクター９８、肝臓でファクター７６、及びマウス脳でファクター１２９４、すべて有意）。ここに示されているように、９ＣＤＨＲＯＬは、ヒト血清中及び市販の牛肉肝臓中で調べられたヒト食物連鎖中に存在することが確認されている。

それにより９ＣＤＨＲＯＬは９ＣＤＨＲＡの優れた生理学的及び栄養学的前駆体であり、マウスの行動研究で証明されたより高い９ＣＤＨＲＡレベル及び選択的ＲＸＲ媒介シグナル伝達に選択的に到達するための代替治療として使用することができる。９ＣＤＨＲＯＬは、インビトロ及びインビボでのサプリメント試験で示されているように、９ＣＤＨＲＡに非常に効率的に変換される。９ＣＤＨＲＯＬ（９ＣＤＨＲＯＬ‐エステル）及び９ＣＤＨＲＡ（９ＣＤＨＲＡ‐エステル）のエステルもまた優れており、さらにより安定な誘導体であり、代替的に与えて９ＣＤＨＲＡへのさらに高い変換をもたらすことができる。我々は９ＣＤＨＲＯＬが選択的ＲＸＲリガンド前駆体として機能する新規の選択的ビタミンＡファミリーに属し、ビタミンＡ５ファミリーと命名されると主張する。

９ＣＤＨＢＣは、ヒトの食物連鎖において様々なレベルで大量に同定されている新規の内因性誘導体である。それゆえ我々は、９ＣＤＨＢＣが選択的ＲＸＲリガンド９ＣＤＨＲＡの選択的前駆体としてプロビタミンＡ５と命名された新規の選択的プロビタミンであると主張する。

我々はまた９ＣＢＣがＲＸＲ‐リガンド及びプロ‐プロビタミンＡ５の前駆体であると主張する。９ＣＢＣは、食物成分又は栄養補給誘導体として、ここで選択的なＲＸＲリガンド／ＲＸＲ媒介性神経変性疾患としてのうつ病によって代表的に示される、我々の有機体のＲＸＲ依存性機能障害を予防するための、ＶＡ５欠乏症の予防及び一般的なＶＡ５補給のための非常に弱く非選択的な誘導体と共に、代替的に使用できる。

１３，１４‐ジヒドロ‐カロテノイドは、リコペン、フィトエン及びフィトフルエンのような非環式カロテノイドの場合を除いて、今日まで報告されていない。１３，１４‐二重結合の形式的水素化は、不飽和前駆体レチノールに対するレチノール‐サチュラーゼ（ＲＥＴＳＡＴ）の作用又は古典的に知られているレチノイドの別の代謝から生じ得る（Ｍｏｉｓｅら、２００４）。全トランス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノイン酸は、本発明者らの研究グループによって、若い野生型非ビタミンＡ補給マウスの血清、肝臓及び脳中に高濃度（それぞれ９６ｎｇ／ｍｌ；３５２ｎｇ／ｍｇ；３８ｎｇ／ｇ）で同定されている。

要約すると、９‐シス‐ジヒドロ‐カロテノイド、好ましくは９‐シス‐１３、１４‐ジヒドロ‐カロテノイドからの経路は、食事性カロテノイドから始まる内因性９ＣＤＨＲＡ合成に生理学的に関連性がある。したがって、９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＢＣは、内因性ＲＸＲリガンド９ＣＤＨＲＡの栄養的及び内因性の関連性のある前駆体であると考えられる。

したがって、本発明はまた、本明細書に開示されている目的のための９‐シス‐ジヒドロ‐カロテノイド（９ＣＤＨＢＣ）の使用に関する。

実験は、本発明の化合物が９ｃＤＨＲＡを提供することができ、そして健康、特に中枢神経系又は末梢神経系の健康の維持及び／又は本明細書に記載の疾患に対する健康の維持又は実質的に誰でも前記疾患の予防又は治療に働き得ることを示す。特に、この疾患は、本明細書に列挙されているような中枢又は末梢神経系疾患である。

本発明の特定の態様及び実施形態を以下に詳述し、次いで本発明を本発明の一部である実施例によって説明する。しかしながら、当業者は、本明細書に提供された具体的かつ一般的な教示に基づいて、他の変形形態及び実施形態が手元にあり実行可能であることを理解するであろう。

本発明の化合物の調製
出発化合物は市販されているか、又は標準的な方法に従って合成することができる。

９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸とそのエステルの調製
実施例に示される実施形態において、（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸の（Ｒ）‐４エチルエステル［（Ｒ）‐１］の調製は、エナンチオ純粋なトリエニルヨージド３とボロン酸２の鈴木カップリングに基づいた（実施例１のスキーム１参照）。３の合成は（Ｚ）‐スタンニルジエノール５から開始し、これは対応するチオールとの光延反応によりベンゾチアゾリルアリルスルフィド６に変換され、続いてＨ_２Ｏ_２及びペルオキシモリブデート（ＶＩ）試薬を用いてスルホン７に酸化された。Ｊｕｌｉａ‐Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉオレフィン化は、わずかに過剰の塩基及び過剰のエナンチオ純粋なアルデヒド（Ｒ）‐８（エチルエステルである）を用いて行われた。アリルスルホンとアルデヒドとの反応の立体化学的結果に関する以前の知見から予想されるように、トリエニルエステル（Ｒ）‐９の新たに形成されたオレフィンはＺ‐幾何学的配置のものである。前駆体スタンナンをＣＨ_２Ｃｌ_２中のヨウ素溶液で処理すると、Ｓｎ‐１交換及び９Ｚ、１１Ｚジエンの所望の９Ｚ、１１Ｅ幾何異性体へのヨウ素促進異性化を介してヨウ化物（Ｒ）‐３が生成した。幾何異性体は、ＮＯＥ実験によって確認することができる。

新たに調製されたボロン酸２及びヨウ化ジエニル（Ｒ）‐３の鈴木反応、それに続く即時処理により、エチル（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエート（Ｒ）‐４が得られた。（Ｒ）‐４の鹸化は、立体化学的完全性の検出可能な損失なしに所望のカルボン酸（Ｒ）‐１を与えた。（反応スキーム１参照）

一般スキームに従って、エナンチオマー（Ｓ）‐１も同様の効率で調製した。

本発明の化合物の調製は実施例１により詳細に記載されている。

代替の９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸エステルは、（Ｒ）‐８化合物の対応するエステル変異体を用いて調製することができる。

さらに、カルボン酸９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸は、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）及びジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）と両化合物との混合物の処理などの標準的な手順を用いて他のアルキル又はアルケニル含有アルコールでエステル化することができる。

さらに、エチルとは異なるエステルを用いて、対応するアルデヒド（Ｒ）‐８から出発してさらなるエステルを調製することができた。

９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールとその９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチニルエステルの調製
９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールは、エチル１３，１４‐ジヒドロレチノエートのＤＩＢＡＬ‐Ｈ（水素化ジイソブチルアルミニウム）還元により、本明細書に記載されるように調製されている。

エステル還元はまた、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）又はジエチルエーテル中の水素化アルミニウムリチウム（ＬｉＡｌＨ_４）を用いて、又は溶媒としてのＴＨＦ／ジエチルエーテル中の水素化ホウ素リチウム及びアルコール（ＥｔＯＨ、ＭｅＯＨ）を用いて達成することができる。

９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチニルアセテートは、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールから、ＤＭＡＰの存在下で過剰のＡｃ_２Ｏ及びピリジンを添加することによって調製した。得られたエステルを単離し精製した。

合成方法はエナンチオマーの立体配置光学純度を維持した。

この方法により、Ｒはカルボン酸であるカルボン酸無水物試薬Ｒ_２Ｏを用いて、又はカルボン酸から誘導された対応する塩化物を用いて、又は例えばＤＣＣ及びＤＭＡＰを用いて調製される活性化カルボン酸を用いて代替エステルを調製できる。

９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールのエステルは、エステルのエステル交換反応によって調製することができ、それによってアシル基を置き換えることができる。

あるいは、レチニルエステルは、適切なエステル化剤を使用して９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールから調製することができる。

さらなる方法は選択的酵素反応であり得る。

例えば、レシチン：レチノールアシルトランスフェラーゼ（ＬＲＡＴ）は、エステル交換を触媒し、膜二重層ホスファチジルコリンのｓｎ‐１位に存在する長鎖脂肪酸アシル部分（主にパルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸及びリノール酸）をレチノールに転移し、レチニルエステルを形成する（Ｏ’Ｂｙｒｎｅ、Ｓｈｅｉｌａ Ｍ． ｅｔ ａｌ．２０１３）。リパーゼは、脂肪酸エステルのような、エステルの合成に適したさらなる酵素群を形成する（Ｋａｉ Ｚ Ｊ ２０１１、Ｙｉｎ Ｃｈｕｎｈｕａ ２００６）。あるいは、化学‐酵素複合法を使用することができる（Ｌｉｕ ＺＱ ２０１５）。

そのような酵素は、組換え技術によって調製され得、所望のエステルを選択的に調製するために使用され得る。あるいは、酵素を適切な宿主細胞にクローニングし、活性型で過剰発現させ、この組み換え細胞を用いて所望のエステルを調製することができる。

本発明の特定の好ましいエステル
好ましい９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸エステル
好ましい９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸エステルは、典型的には９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸のメチル、エチル又はプロピルエステルのような低級アルキルエステルである。長鎖脂肪族アルコールと９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸とのエステルは、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールの長鎖脂肪酸のエステルよりも好ましさが劣る。

さらに好ましい９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチニルエステル化合物
さらに好ましい９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチニルエステル化合物としては、ギ酸エステル（メタノエート）、エタノエートエステル及びプロピオン酸エステル、さらに好ましさは劣るが酪酸エステル及び吉草酸エステルが挙げられる。

長鎖脂肪酸も９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールとエステルを形成することができる。
長鎖脂肪酸（ＬＣＦＡ）は、１３から２１個の炭素の脂肪族尾部を有する脂肪酸を含む。
長鎖脂肪酸は、飽和及び不飽和脂肪酸から選択することができ、後者は一価不飽和及び多価不飽和脂肪酸を含む。

飽和脂肪酸
飽和脂肪酸との典型的なエステルは、例えば、以下の長鎖脂肪酸を用いて形成され得る。
ミリスチン酸 ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１２ＣＯＯＨ １４：０
パルミチン酸 ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１４ＣＯＯＨ １６：０
ステアリン酸 ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１６ＣＯＯＨ １８：０
アラキジン酸 ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１８ＣＯＯＨ ２０：０。

飽和脂肪酸はしばしば食事には不利であると言われているが、それらは本発明のエステルのヒト組織中の９ＣＤＨＲＯＬの前駆体としての有用な成分であり得る。

一価不飽和脂肪酸（ＭＵＦＡ）
一価不飽和脂肪酸は１つの炭素‐炭素二重結合を有し、それは異なる位置に存在し得る。最も一般的なモノエンは、１６～２２の鎖長及び好ましくはシス配置の二重結合を有する。

本発明に適用可能な好ましいＭＵＦＡはオレイン酸、ＣＨ_３（ＣＨ_２）_７（ＨＣ＝ＣＨ）（ＣＨ_２）_７ＣＯＯＨ及びパルミトレイン酸ＣＨ_３（ＣＨ_２）_５（ＨＣ＝ＣＨ）（ＣＨ_２）_７ＣＯＯＨである。

多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）
多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）では、最初の二重結合は、最初のカルボン酸の炭素から３番目と４番目の炭素原子の間に見出すことができ、これらはω‐３脂肪酸と呼ばれる。最初の二重結合が６番目と７番目の炭素原子の間にある場合、それらはω‐６脂肪酸と呼ばれる。

本発明に適用可能な好ましいＰＵＦＡは、例えばω‐３及びω‐６脂肪酸である。

ＰＵＦＡの中でアラキドン酸（ＡＲＡ）及びドコヘキサン酸（ＤＨＡ）はアルツハイマー病の治療に有用である（例えばＥＰ１４１９７８０Ｂ１参照）。

この場合、ＰＵＦＡは、一旦加水分解されると、問題の器官においてそれらの有利な効果を発揮することもできる。

一実施形態では、必須脂肪酸エステルが好ましい。２つの必須脂肪酸はリノール酸（ＬＡ）及びアルファ‐リノレン酸（ＡＬＡ）である。人体は、ＡＬＡをより長鎖のオメガ‐３脂肪酸‐エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）（これらも好ましい）に変換する能力が限られている。

分岐鎖脂肪酸（ＢＣＦＡ）
分岐鎖脂肪酸（ＢＣＦＡ）は生物活性食品成分である［Ｒａｎ‐Ｒｅｓｓｌｅｒ Ｒ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．”Ｂｒａｎｃｈｅｄ‐ｃｈａｉｎ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｏｏｄｓ ａｎｄ ｅｓｔｉｍａｔｅｄ ｉｎｔａｋｅ ｉｎ ｔｈｅ ＵＳＡ．”（「食物の分枝鎖脂肪酸含有量と米国における推定摂取量」） Ｂｒ Ｊ Ｎｕｔｒ．２０１４ Ａｕｇ ２８；１１２（４）：５６５‐７２。］これは、牛乳や大豆に含まれているほか、反すう動物の脂肪や特定の魚には（フィタン酸のように）存在する場合がある。天然に存在する分枝鎖脂肪酸は潜在的な健康特性を示し、そして本発明のエステルの好ましい成分である。

そのような好ましいＢＣＦＡは、例えば、天然に存在する１３‐メチルテトラデカン酸、１５‐メチルパルミチン酸及びフィタン酸（３，７，１１，１５‐テトラメチルヘキサデカン酸）である。

脂肪酸及びそれらの生物学における役割は、例えば、以下の文献に見出すことができる。
（Ｃｈｉｎｇ Ｋｕａｎｇ Ｃｈｏｗ”Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ ｉｎ Ｆｏｏｄｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ Ｈｅａｌｔｈ Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”（「食品中の脂肪酸とその健康への影響」）２００７；Ａｒｉｌｄ Ｃ ｅｔ ａｌ．Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ＥＮＣＹＣＬＯＰＥＤＩＡ ＯＦ ＬＩＦＥ ＳＣＩＥＮＣＥＳ（脂肪酸：構造と性質ライフサイエンスの百科事典）２００５）

本発明による化合物及び／又は医薬組成物は治療方法に使用することができる。好ましい治療は神経系の疾患に関する。

神経系及び神経組織における本発明の化合物
本発明の化合物は、神経組織又は神経系においてそれらの活性形態に変換することができる。好ましくは、化合物が動物又はヒトの被験体に投与される場合、神経系又は神経組織（この好ましい実施形態では脳内）におけるこの変換は優先的である。

本発明の好ましい態様において、化合物は加水分解により９ＣＤＨＲＯＬに変換される。あるいは、化合物は９ＣＤＨＲＯＬである。神経系において９ＣＤＨＲＯＬはさらにそのＲＸＲアゴニスト作用を発揮する９ＣＤＨＲＡに変換される。

本明細書で使用される神経系は、中枢神経系（ＣＮＳ）及び末梢神経系（ＰＮＳ）からなる。中枢神経系（ＣＮＳ）は脳と脊髄で構成されている。

末梢神経系（ＰＮＳ）は、全ての（分岐している）末梢神経を含み、身体の機能及び活動を調節及び制御する。

本発明によれば、ｉｎ ｓｉｔｕで形成された９ＣＤＨＲＡは神経組織においてそのＲＸＲアゴニスト効果を発揮してＣＮＳ又はＰＮＳの疾患を予防又は治療する（本明細書で詳述するように、そのような疾患が検討される）。

神経系組織（又は神経組織）は、神経系の上記２つの部分、すなわちＣＮＳ及びＰＮＳの主な組織成分である。それは、インパルスを送受信するニューロン、すなわち神経細胞、及び（神経）グリア細胞（グリア）としても知られている神経膠細胞から構成され、神経インパルスの伝播を補助し、ニューロンに栄養分を提供する。

神経膠細胞は、例えば、次の細胞である：
ミクログリア細胞、アストロサイト、乏突起膠細胞、ＮＧ２グリア、シュワン細胞、サテライトグリア細胞、腸グリア。

もう少し詳しく説明すると、乏突起膠細胞は、ニューロンの軸索上にミエリン鞘を形成する中枢神経系構造であり、これは軸索に沿った神経インパルスの効率的な伝導を促進する脂質ベースの絶縁体である。ＮＧ２グリアは、乏突起膠細胞の発生前駆体として働くＣＮＳ細胞である。シュワン細胞は乏突起膠細胞と同等のＰＮＳであり、それらは軸索を維持し、ＰＮＳにミエリン鞘を形成するのを助ける。

再ミエリン化の制御における合成ＲＸＲアゴニストの役割を報告するデータと共に乏突起膠細胞を用いた実験は、ＣＮ及びＰＮＳ並びにＮＧ２グリアにおける乏突起膠細胞形成及びミエリン鞘機能の制御のための特許に記載された化合物の役割及び有用性を支持する。

したがって、ＲＸＲアゴニストによって治療、予防又は軽減することができるＣＮＳ及びＰＮＳの疾患は、９ＣＤＨＲＡのエステル、９ＣＤＨＲＯＬ及び後者のエステルで治療することができる。

脳内のＲＡＲ／ＲＸＲ、ＲＸＲ／ＰＰＡＲ又はＲＸＲ／ＬＸＲシグナル伝達は、例えば以下の刊行物において概説又は誘発されている：（ｖａｎ Ｎｅｅｒｖｅｎ ２００８；Ｓｈｕｄｏ Ｋ ｅｔ ａｌ．２００９；Ｓｋｅｒｒｅｔｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．２０１５）。

３つのレチノインＸ受容体（ＲＸＲ）：それぞれＲＸＲＡ、ＲＸＲＢ、ＲＸＲＧ遺伝子によってコードされる、ＲＸＲ‐アルファ、ＲＸＲ‐ベータ、及びＲＸＲ‐ガンマがある。ＲＸＲ‐リガンド結合はビタミンＡ媒介効果に関与する非常に重要なメカニズムである。ＲＸＲは、それが複数のＮＲの共通のヘテロ二量体化パートナーとして働くので、核内受容体（ＮＲ）シグナル伝達において中心的な位置を占める。これらのヘテロ二量体は、それぞれＲＸＲの役割が活性転写パートナーとしてのものか、サイレント転写パートナーとしてのものかによって、許容型又は非許容型と呼ばれる。許容ＲＸＲ‐ＮＲヘテロ二量体は、ＲＸＲリガンド又はパートナーのリガンドによって活性化され、ヘテロ二量体の両方のパートナーがそれらのリガンドに結合している場合、相乗効果が通常観察される。ヘテロ二量体の一つはＲＸＲ‐ＲＡＲヘテロ二量体である。

本発明者らは、ＲＸＲアゴニストとしての９ＣＤＨＲＡが、おそらく対応する許容ヘテロ二量体を介して、いくつかの核内受容体シグナル伝達経路の転写活性を調整することを実証した（Ｒｕｈｌ ｅｔ ａｌ．、２０１５）。

本発明の化合物は、ＲＸＲアゴニストとして、そして特にＲＸＲ‐ＲＡＲだけでなく、ＲＸＲ‐ＰＰＡＲ又はＲＸＲ‐ＬＸＲによるＲＸＲのアゴニストが健康を維持又は回復するのに有用である状態において特に有用である。

好ましい実施形態では、化合物は、認知機能障害及び／又は学習障害の治療に使用することができる。

本発明による化合物及び／又は医薬組成物は、治療方法において、特に記憶障害（記憶喪失）、特に作業記憶障害、例えば、欠陥や喪失、又は短期間の記憶障害、例えば欠陥や喪失、例えば健忘症等の治療のために使用することができる。記憶障害、学習能力障害、認知機能障害は、軽度認知障害、健忘症症候群、統合失調症における記憶及び認知障害、双極性情動障害及びうつなどの気分障害、部分的及び完全な健忘症、解離性健忘症などのストレス関連及び不安障害に関連している可能性がある。

三環系抗うつ薬、ドーパミン作動薬、抗ヒスタミン薬、ベンゾジアゼピン、スタチン、β遮断薬、バルビツレート、オピオイド、ＴＨＣ、アルコールなど、いくつかの精神活性物質及び薬物療法は記憶喪失、学習能力障害及び認知機能障害を引き起こすことが知られている。

本発明による化合物及び／又は医薬組成物は、上記の疾患又は投薬によってもたらされるそのような記憶障害を元に戻すのに特に有用である。

本発明による化合物及び／又は医薬組成物は、短期記憶障害の予防及び／又は治療に特に有用である。本発明による化合物及び／又は医薬組成物は、作業記憶性能を改善するか又は作業記憶喪失を減少させるのに特に有用である。

本発明による化合物及び／又は医薬組成物は、軽度、中等度及び重度のうつ病エピソード並びに双極性疾患、気分循環症又は気分変調のうつ相、混合不安‐うつ障害、統合失調症、癌、代謝性疾患などの他の疾患に関連したうつ病又はうつ病エピソードなどのうつ病の治療に有用である。

本発明による化合物及び／又は医薬組成物は、神経変性障害の予防及び／又は治療に有用である。好ましくは、神経変性障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＭＣＩを伴うパーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、及び加齢、病気又は外傷によって引き起こされる脳の変化による他の神経変性関連認知症；又は脊髄損傷及び運動失調、播種性硬化症及び多発性硬化症又は他の神経学的状態から選択される。

特定の実施形態によれば、本発明はまた、上記の方法による治療に適したキットに関する。

一実施形態では、これらのキットは、適切な投与量で本発明の化合物を含む組成物と、気分安定剤、抗鬱剤、抗不安剤などを含む第二の組成物とを含む。

さらなる実施形態では、キットは、適切な投与量で本発明の化合物を含む組成物と、本明細書で定義又は列挙されるような神経変性疾患に対する活性剤を含む第二の組成物とを含む。

本発明はまた、上に列挙したようなキットの構成要素を含む組み合わせに関する。

本発明の化合物を試験することは、抑うつ行動の慢性社会的敗北ストレスモデル、アミロイドーシス又はアルツハイマー病及びパーキンソン病の動物モデルのような動物モデル（及び非動物モデル）において可能である。

栄養使用
本発明の化合物は、栄養補給食品又は栄養補助食品として、機能性食品組成物、栄養補助食品組成物（ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）、又は栄養補助食品組成物（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）において使用することができる。そのような栄養補給食品又は栄養補助食品、機能性食品組成物、栄養補助食品組成物（ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）又は栄養補助食品組成物（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）は、本明細書に開示されるような状態を予防、逆転及び／又は軽減するという利点を有する。好ましい実施形態では、状態は、記憶喪失、特に作業中又は短期間の記憶障害、特に医薬の投与を伴わない、すなわち非医学的方法での記憶喪失であり、及び／又は学習障害及び／又は認知機能の低下の予防、逆転及び／又は軽減という利点を有する。非医学的治療とは、本明細書で定義される状態が非病理学的であるか又は病理学的レベルに達していない正常な身体機能が維持されるべきであるという適用の目的のためのものを意味する。好ましくは、非医学的治療において、栄養補給食品又は栄養補助食品、機能性食品組成物、栄養補助食品組成物（ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）又は栄養補助食品組成物（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）を使用して、まだ病気ではない、又は病気と見なすことができない状態において、記憶喪失、学習障害及び／又は認知機能の低下を予防、解消及び／又は軽減する。

栄養補助食品組成物は、「栄養補助的に許容可能な担体」を含んでもよく、担体がヒトの摂取に許容され、活性剤の生物学的特性を保持又は改善することを意味する。

本発明に基づく他の食事性ビタミンＡ組成物と同様に、ビタミンＡ５経路のレチノイドの量は、９ＣＤＲＯＬ当量で測定することができる。

本発明の組成物は、栄養補助食品組成物、例えば、栄養補助食品、機能性食品、医療用食品又は健康強調表示のある食品に使用するのに適している。

本明細書に示されるように、脂溶性形態は肝臓に貯蔵され、体の供給はそれから達成され得る。

製剤
組成物は、活性剤の他に少なくとも１つの担体を含む。
担体は、例えば、薬剤が投与のために処方される希釈剤、アジュバント、賦形剤、安定剤、又はビヒクルであり得る。医薬担体は、ピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物、植物又は合成起源のものを含む、水及び油などの滅菌液体であり得る。医薬組成物を静脈内投与する場合、水は典型的な担体である。生理食塩水溶液並びにデキストロース及びグリセロール水溶液も、特に注射用溶液のための液体担体として使用することができる。

一実施形態では、薬剤は、哺乳動物又はヒトへの静脈内投与に適合した医薬組成物として日常的な手順に従って製剤化される。典型的には、静脈内投与用の組成物は滅菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要に応じて、組成物は可溶化剤も含み得る。

固形製剤では、適切な医薬賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム；乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。組成物は、所望であれば、脂質のような少量の湿潤剤又は乳化剤も含み得る。

医薬組成物又は栄養補助組成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉末、徐放製剤などの形態をとることができる。

特により長いアルキル鎖エステルの場合、脂質ビヒクルが有利である。本発明の化合物は光と酸素に敏感である。したがって、適切なビヒクルの選択は、本発明の化合物を安定化させるその能力に依存し得る。そのような製剤は、例えば、ＷＯ２０１１０３４５５１Ａ２（Ｂｏｃｈら、脂質ビヒクル中に９‐シス‐レチニルエステルを含む医薬製剤）に記載されている。例示的な製剤及び投与量は、ＷＯ２０１１０３４５５１Ａ２及びＷＯ２０１３１３４８６７Ａ１に記載されている。

適切な経口剤形には、例えば、錠剤、丸剤、サシェ剤、又は硬若しくは軟ゼラチン、メチルセルロース、又は消化管に容易に溶解する他の適切な材料のカプセルが含まれる。例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどを含む適切な無毒の固体担体を使用することができる。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ ”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”、第１７版、Ｇｅｎｎａｒｏ（編）、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ペンシルベニア州、１９８５年を参照のこと）。

導入方法としては、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、眼内、硬膜外及び経口経路が挙げられるが、これらに限定されない。薬剤は、例えば注入又はボーラス注射、上皮又は粘膜内層（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸粘膜）を通した吸収などによる任意の都合のよい経路によって投与することができ、他の機能的に活性な薬剤と同時に投与することができる。

投与量
薬剤の投与量は、臨床状態、対象の状態及び年齢、剤形などに応じて慎重に選択することができる。

例えば、ヒトの有効量は、例えば２００５年７月の米国ＦＤＡガイドラインの第５章（ステップ２：ヒト等価用量計算）及び表１に記載されているように動物の用量から計算することができる。これは、ヒトにおいて開始する用量の値を与えるためには、動物の用量は体表面積に基づいて計算された係数、例えば、ラットとヒトの間の体重キログラム用量の６．２倍のファクター、及びマウスとヒトの間の体重キログラム用量の１２．３倍のファクターで割られるべきであることを示している。

したがって、少なくとも上限は、種に依存する動物モデルに基づいて安全に与えられ得る。
副作用は投与量に依存し、本発明の化合物はこの点で好ましいと考えられる。

説明のための例を挙げると、点眼薬の場合、試験の対象となる薬剤は、例えば、単回投与あたり約０．０１ｍｇ、約０．１ｍｇ、又は約１ｍｇから約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約９０ｍｇまで投与することができる。点眼薬は、必要に応じて１日１回以上投与することができる。注射の場合、適切な用量は、例えば、１週間に１～４回、約０．０００１ｍｇ、約０．００１ｍｇ、約０．０１ｍｇ、又は約０．１ｍｇから約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、又は約９０ｍｇの薬剤であり得る。他の実施形態では、より頻繁に必要に応じて、約１．０～約３０ｍｇの薬剤を週に１～３回以上、例えば毎日投与することができる。経口投与量は同程度のオーダーになり得る。例えば、被験体において約１ｍｇ又は５ｍｇから約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、又は約１００ｍｇの薬剤を毎日又は１週間に１から６回投与する。

実施例１：化学合成‐ジヒドロレチノイドの合成
３０３＞２０７ｍ／ｚで検出された相対ＭＳ‐ＭＳシグナルが９ＣＤＨＲＡに対応するかどうかを確認するために、９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸の両方のエナンチオマーの立体選択的合成を、パラジウム触媒Ｃｓｐ２‐Ｃｓｐ２鈴木カップリング（Ｐａｚｏｓ Ｙ ｅｔ ａｌ．２００１）に基づいて先に記載された戦略に従って実施した。９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸の（Ｒ）‐及び（Ｓ）‐エナンチオマーの立体制御合成、精製及び特徴付けの詳細を以下に提供する。

（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（Ｒ）‐４のエチルエステルの調製は、エナンチオ純粋なトリエニルヨージド３とボロン酸２との鈴木カップリングに基づいた（スキーム１）。３の合成は、（Ｚ）‐スタンニルジエノール５で開始し（Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ Ｂ． ｅｔ ａｌ．２０００、Ｐａｚｏｓ Ｙ ｅｔ ａｌ．１９９９）、対応するチオールとの光延反応によりベンゾチアゾリルアリルスルフィド６に変換され、続いて－１０℃でＨ_２Ｏ_２及びペルオキシモリブデート（ＶＩ）試薬（Ｓｃｈｕｌｔｚ ＨＳら、１９６３年）を用いてスルホン７に酸化された。わずかに過剰の塩基（ＮａＨＭＤＳ、１．１５当量）及び１．７当量のエナンチオ純粋アルデヒド（Ｒ）‐８を使用して、ジュリア‐コシエンスキオレフィン化（Ｂｌａｋｅｍｏｒｅ ＰＲ．２００２；Ａｉｓｓａ Ｃ２００９）を行った（Ｍｏｉｓｅ ＡＲら、２００８年、Ｌｅｏｎａｒｄ Ｊ．ら、１９９５年）。アリルスルホンとアルデヒドとの反応の立体化学的結果に関する以前の知見から予想されるように（Ｓｏｒｇ Ａら、２００５年、Ｖａｚ Ｂら、２００５年）、トリエニルエステル（Ｒ）‐９の新たに形成されたオレフィンはＺ‐幾何学的形状である（これはＮＯＥ実験により確認された）。前駆体スタンナンをＣＨ_２Ｃｌ_２中のヨウ素溶液で処理することにより、Ｓｎ‐Ｉ交換及び９Ｚ、１１Ｚジエンの所望の９Ｚ、１１Ｅ幾何異性体へのヨウ素促進異性化を介してヨウ化物（Ｒ）‐３が生成された（ＮＯＥ実験により確認）。

スキーム１。試薬と条件
（ａ）ＰＰｈ_３，ＢＴＳＨ，ＤＩＡＤ，ＣＨ_２Ｃ１_２，２ｈ（９８％）。
（ｂ）（ＮＨ_４）_６Ｍｏ_７Ｏ_２４・４Ｈ_２０，３０％ Ｈ_２Ｏ_２，ＥｔＯＨ，－１０℃，１７時間（６６％）。
（ｃ）ＮａＨＭＤＳ，ＴＨＦ，－７８℃，３０分（９３％）。
（ｄ）Ｉ_２，ＣＨ_２Ｃｌ_２，２５℃，３０分。
（ｅ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４，１０％ａｑ．ＴｌＯＨ，ＴＨＦ，２５℃，３時間（４２％）。
（ｆ）２Ｍ ＫＯＨ，ＭｅＯＨ，８０℃，４５分（８４％）。

触媒としてＰｄ（ＰＰｈ_３）_４とＴＨＦ中の塩基として１０％ＴｌＯＨ水溶液を用いて、周囲温度で、新しく調製したボロン酸２とヨウ化ジエニル（Ｒ）‐３のＳｕｚｕｋｉ反応、それに続く即時処理により７８％の収率でエチル（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエート（Ｒ）‐４を得た。

（（Ｒ）‐４から、対応するカルボン酸（Ｒ）‐１を、立体化学的完全性の検出可能な損失なしに８４％の収率で提供することができる。

一般スキームに従って、エナンチオマー（Ｓ）‐４も同様の効率で調製することができる。

化合物の調製及び特徴付け‐一般手順
溶媒は公表されている方法に従って乾燥し、使用前に蒸留した。他の全ての試薬は入手可能な最高純度の市販化合物であった。特記しない限り、全ての反応はアルゴン雰囲気下で行われ、水性試薬を含まないものはオーブン乾燥ガラス器具中で行われた。分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、Ｍｅｒｃｋ Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０Ｆ２５４を用いてアルミニウムプレート上で行い、ＵＶ照射（２５４ｎｍ）によって、又はホスホモリブデン酸のエタノール溶液で染色することによって可視化した。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、加圧下でＭｅｒｃｋ Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０（２３０～４００メッシュ）を使用して実施した。電子衝撃（ＥＩ）質量スペクトルは、７０ｅＶで作動するＨｅｗｌｅｔｔ‐Ｐａｃｋａｒｄ ＨＰ５９９７０機器で得た。あるいは、７Ｔ能動遮蔽磁石を備えたＡＰＥＸ ＩＩＩ ＦＴ‐ＩＣＲ ＭＳ（Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｏｎｉｃｓ）を使用し、（イオン化効率を最適化するために）１８００～２２００Ｖの電圧を針に印加し、４５０Ｖの対向電圧をキャピラリーに印加して、アポロＡＰＩエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源を使用してイオンを生成した。ＥＳＩスペクトルについては、試料を７０：２９．９：０．１（ｖ／ｖ／ｖ）ＣＨ_３ＯＨ／水／ギ酸のスプレー溶液を１～５％のｖ／ｖ比で試料の溶液に添加することによって調製し、最良の信号対雑音比を得た。高分解能質量スペクトルはＶＧ Ａｕｔｏｓｐｅｃ機器で取った。^１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、内部標準として残留プロトン性溶媒を用いて４００ＭＨｚでＢｒｕｋｅｒ ＡＭＸ‐４００分光計でＣ_６Ｄ_６及びアセトン‐ｄ_６中で周囲温度で記録した。

（２Ｚ，４Ｈ）‐１‐（ベンゾチアゾール‐２‐イル）スルファニル‐５‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）‐３‐メチルペンタ‐２，４‐ジエン（６）
（２Ｚ，４Ｅ‐３‐メチル‐５‐（トリブチルスタンニル）ペンタ‐２，４‐ジエン‐１‐オール（１．０ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）、２‐メルカプトベンゾチアゾール（０．６５ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）及びＰＰｈ_３（１．１０ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１４ｍＬ）中の溶液を０℃で５分間撹拌した。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＤＩＡＤ（０．７７ｍＬ、３．８７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、混合物を２５℃で３０分間撹拌した。溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８‐シリカゲル、ＣＨ_３ＣＮ）により精製して、（２Ｚ，４Ｅ）‐１‐（ベンゾチアゾール‐２‐イル）スルファニル‐５‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）‐３‐メチルペンタ‐２，４‐ジエン６と同定された１．１１ｇ（７８％）の無色の油状物を得た。

（２Ｚ、４Ｅ）‐１‐（ベンゾチアゾール‐２‐イル）スルホニル‐５‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）‐３‐メチルペンタ‐２，４‐ジエン（７）。
ＥｔＯＨ（９ｍＬ）中の（２Ｚ、４Ｅ）‐１‐（ベンゾチアゾール‐２‐イル）スルファニル‐５‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）‐３‐メチルペンタ‐２，４‐ジエン６（０．４８ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の溶液へ，－１０℃で、過酸化水素水溶液（３５％、７．７ｍＬ）中の（ＮＨ_４）_６Ｍｏ_７Ｏ_２４・４Ｈ_２Ｏ（０．４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。－１０℃で１７時間撹拌した後、混合物をＨ_２Ｏでクエンチし、Ｅｔ_２Ｏ（３×）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を除去した。残留物をクロマトグラフィー（Ｃ１８‐シリカゲル、ＭｅＯＨ）により精製して、（２Ｚ、４Ｅ）‐１‐（ベンゾチアゾール‐２‐イル）スルホニル‐５‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）‐３‐メチルペンタ‐２，４‐ジエン７として同定される０．３３ｇ（６６％）の無色の油状物を得た。

（３Ｓ、４Ｚ、６Ｚ、８Ｅ）‐エチル３，７‐ジメチル‐９‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）ノナ‐４，６，８‐トリエノエート（（Ｓ）‐９）。
ＴＨＦ（９ｍＬ）中の（２Ｚ、４Ｅ）‐１‐（ベンゾチアゾール‐２‐イル）スルホニル‐５‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）‐３‐メチルペンタ‐２，４‐ジエン（０．１１５ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の冷却（－７８℃）溶液をＮａＨＭＤＳ（０．２３ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ、０．２３ｍｍｏｌ）で処理した。この温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（４．５ｍＬ）中の（Ｓ）‐エチル３‐メチル‐４‐オキソブタノエート（０．０４４ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、得られた混合物を－７８℃で１時間撹拌し、３時間温度を室温に到達させるために放置した。Ｅｔ_２Ｏ及び水を低温で加え、混合物を室温に温めた。それを次いでＥｔ_２Ｏで希釈し、層を分離した。水層をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出し、合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ‐１８シリカゲル、ＭｅＯＨ）で精製して、（３Ｓ、４Ｚ、６Ｚ、８Ｅ）‐エチル３，７‐ジメチル‐９‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）ノナ‐４，６，８‐トリエノエート（Ｓ）‐９として同定される０．９４ｇ（９３％）の淡黄色油状物を得た。

（３Ｒ，４Ｚ，６Ｚ，８Ｅ）－エチル３，７－ジメチル－９－（トリ－ｎ－ブチルスタンニル）ノナ－４，６，８－トリエノエート（（Ｒ）－９）。［α］^２９ _Ｄ－１０．３°（ｃ１．２５，ＭｅＯＨ）。

（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐エチル９‐ヨード‐３，７‐ジメチルノナ‐４，６，８‐トリエノエート（（Ｒ）‐３）。
ＣＨ_２Ｃｌ_２（５．３ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｚ，６Ｚ，８Ｅ）‐エチル３，７‐ジメチル‐９‐（トリ‐ｎ‐ブチルスタンニル）ノナ‐４，６，８‐トリエノエート（Ｒ）‐９（０．０６０ｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２．８ｍＬ）中のヨウ素（０．０４６ｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）を滴下して加え、得られた混合物を２５℃で３０分間撹拌した。飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３溶液を添加し、反応混合物をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９７：３ヘキサン／Ｅｔ_３Ｎ）で精製して、（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐エチル９‐ヨード‐３，７‐ジメチルノナ‐４，６，８‐トリエノエート（Ｒ）‐３として同定される０．０３７ｇ（９２％）の淡黄色油状物を得た。

（３Ｓ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐エチル９‐ヨード‐３，７‐ジメチルノナ‐４，６，８‐トリエノエート（（Ｓ）‐３）。［α］^２３ _Ｄ－１６．７°（ｃ０．７２、ＭｅＯＨ）。

（９Ｚ，１３Ｒ）‐エチル１３，１４‐ジヒドロレチノエート（（Ｒ）‐４）。ＴＨＦ（２．３ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐エチル‐ヨード‐３，７‐ジメチルノナ‐４，６，８‐トリエノエート（Ｒ）‐３（０．０３６ｇ、０．１０７ｍｍｏｌ）の溶液へ、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４（０．０１３ｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で５分後、２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エニルボロン酸２（０．０２７ｇ、０．１６１ｍｍｏｌ）を一度に加えた後、ＴｌＯＨ（１０％水溶液、０．７５ｍＬ、０．４０７ｍｍｏｌ）を加えた。２５℃で３時間撹拌した後、Ｅｔ_２Ｏを添加し、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）の短いパッドを通して濾過した。ろ液をＮａＨＣＯ_３（飽和）で洗浄し、有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９７：３ヘキサン／Ｅｔ_３Ｎ）により精製して、０．０２８ｇ（７８％）の（９Ζ，１３Ｒ）‐エチル１３，１４‐ジヒドロレチノエート（Ｒ）‐４として同定される淡黄色油状物を得た。

（９Ｚ，１３Ｓ）‐エチル１３，１４‐ジヒドロレチノエート（（Ｓ）‐４）。［ａ］^２２ _Ｄ－１５．５°（ｃ０．５１、ＭｅＯＨ）。

（９Ｚ，１３Ｒ）‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（（Ｒ）‐１）。ＭｅＯＨ（４．７ｍＬ）中の（９Ｚ，１３Ｒ）‐エチル１３，１４‐ジヒドロレチノエート（Ｒ）‐４（０．０２３ｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＫＯＨ（２Ｍ水溶液、１．１ｍＬ、２．２７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃で４５分間撹拌した。反応物を室温に冷却した後、ＣＨ_２Ｃｌ_２及びブラインを加え、層を分離した。水層をＨ_２Ｏ（３×）で洗浄した。合わせた水層を１０％ＨＣｌで酸性化し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３×）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎ_２ＳＯ_４）、溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９５：５～９０：１０のＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨの勾配）で精製して、（９Ｚ、１３Ｒ）‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（Ｒ）‐１として同定される０．０１７ｇ（８４％）の淡黄色油状物を得た。

（９Ｚ，１３Ｓ）‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸（（Ｓ）‐１）。［α］^２４ _Ｄ－６．９°（ｃ０．２６、ＭｅＯＨ）。

実施例２．１：（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール及び（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールアセテート
（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールは、－７８℃でＴＨＦ中の（９Ｚ，１３Ｒ）‐エチル１３，１４‐ジヒドロレチノエート（（Ｒ）‐４）のＤＩＢＡＬ‐Ｈ還元によって収率９５％で合成した（スキーム１）。
ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下、無水酢酸及びピリジンを用いて（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールをアセチル化することにより、（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチニルアセテート］を８６％の収率で調製した。

スキーム２
（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエン‐１‐オール（（Ｒ）‐１０）
エチル（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエノエート［エチル（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノエート、（Ｒ）‐４］（３２．０ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の冷却（－７８℃）溶液へ、ＤＩＢＡＬ‐Ｈ（０．２４２ｍＬ、０．２４２ｍｍｏｌ、ヘキサン中１．０Ｍ）を加え、得られた混合物を－７８℃で３０分間撹拌した。混合物を２．５時間で－２０℃まで温めた。Ｈ_２Ｏを加え、混合物をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を除去した。残渣のフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、最初に９８：２のヘキサン／Ｅｔ_３Ｎで中和し、次いで９５：５のヘキサン／ＥｔＯＡｃからＥｔＯＡｃへの勾配）により、（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ‐３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエン‐１‐オール（２６．５ｍｇ、９５％）を無色の油状物として得た。

（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエン‐１‐イルアセテート（（Ｒ）‐１１）
（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエン‐１‐オール（５．７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（０．５ｍＬ）中の溶液へ、Ａｃ_２Ｏ（０．００９ｍＬ、０．０９９ｍｍｏｌ）、ピリジン（０．００８ｍＬ、０．０９９ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（０．５ｍｇ、０．００４ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られた混合物を２５℃で１時間撹拌した。次いで、Ｅｔ_２Ｏを加え、得られた溶液をＣｕＳＯ_４の飽和水溶液（２×）で洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発させた。残渣のフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサンから８５：１５のヘキサン／ＥｔＯＡｃの勾配）により、無色の油状物として、（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエン‐１‐イルアセテート（５．６ｍｇ、８６％）を得た。

実施例２．２：９‐シス‐β，β‐カロテンの合成（スキーム３、追加の計算を含む）
９‐シス‐エチルレチノエート（ＩＩＩ）。ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中のエチル（Ｅ）‐４‐（ジエトキシホスホリル）‐３‐メチルブタ‐２‐エノエート（ＩＩ）（０．２２７ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）の冷（０℃）溶液に、ｎＢｕＬｉ（０．６３ｍＬ、１．００ｍｍｏｌ、ヘキサン中１．６Ｍ）及びＤＭＰＵ（０．１５ｍＬ、１．２４ｍｍｏｌ）を加えた。１時間撹拌した後、反応物を－７８℃に冷却し、ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中の（２Ｚ，４Ｅ）‐３‐メチル‐５‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ペンタ‐２，４‐ジエナール（Ｉ）（０．１００ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。水を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９５：５ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製して、エチル９‐シス‐レチノエート（ＩＩＩ）として同定される０．１４４ｇ（９６％）の黄色の固体を得た。

９‐シス‐レチノール（ＩＶ）。ＴＨＦ（２．３ｍＬ）中のエチル９‐シス‐レチノエート（ＩＩＩ）（０．１５４ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の冷（－７８℃）溶液に、ＤＩＢＡＬ‐Ｈ（１．０８ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ、トルエン中１．０Ｍ）を加え、反応物を２時間撹拌した。次いで水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９５：５から８０：２０へのヘキサン／ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、９‐シス‐レチノール（ＩＶ）として同定される０．０８０ｇ（６０％）の黄色油状物を得た。

９‐シス‐レチナール（Ｖ）。ＣＨ_２Ｃｌ_２（９．１ｍＬ）中の９‐シス‐レチノール（ＩＶ）（６５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｎＯ_２（１９７ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）及びＮａ_２ ＣＯ_３（２４０ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を２５℃で１．５時間撹拌した。混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄しながらＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドを通して濾過した。溶媒を蒸発させると、９‐シス‐レチナール（Ｖ）として同定される３８ｍｇ（５８％）の黄色油状物が得られた。

（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）‐ブロモ‐（３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐２，４，６，８‐テトラエン‐１‐イル）トリフェニル‐ホスファン（ＶＩＩ）。ＭｅＯＨ（２．７ｍＬ）中のビタミンＡ／全トランス‐レチノール（ＶＩ）（１．３７０ｇ、４．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰＰｈ_３（１．４４３ｇ、５．５ｍｍｏｌ）及びＨＣｌ（１．４ｍＬ、ジオキサン中４Ｍ）の溶液を加え、反応物を２５℃で２時間撹拌した。次いで、混合物を水に注ぎ入れ、Ｅｔ_２Ｏ（２×）で抽出した。水層をＡｃＯＥｔ（３×）で抽出し、合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。明橙色の残渣をＥｔＯＡｃで３回粉砕して、（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）‐ブロモ‐（３，７‐ジメチル‐９‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐２，４，６，８‐テトラエン‐１‐イル）トリフェニル‐ホスファンＶＩＩとして同定された１．３９０ｇ（５２％）の黄色泡状物を得た。

９‐シス‐β，β‐カロテン（ＶＩＩＩ）。－７８℃のＴＨＦ（０．２０ｍＬ）中のホスホニウム塩（ＶＩＩ）（２４．９ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎＢｕＬｉ（０．０２７ｍＬ、０．０４４ｍｍｏｌ、ヘキサン中１．６Ｍ）を加え、混合物を３０分間撹拌した。次いで、ＴＨＦ（０．１３ｍＬ）中の９‐シス‐レチナールＶ（９．０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を－７８℃で１時間、２５℃で３０分間撹拌した。水を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８‐シリカゲル、ＣＨ_３ＣＮ）により精製して、９‐シス‐β，β‐カロテン（ＶＩＩＩ）として同定される１１．３ｍｇ（６７％）の赤色の泡状物を得た。分光学的データは以前に公表されたもの（ＬＩＴ）と同一である。

スキーム３
実施例２．３：（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐β，β‐カロテンの合成（計算を含むスキーム４）
（Ｚ）‐３‐ヨード‐３‐メチルプロパ‐２‐エン‐１‐オール（Ｘ）。ＣｕＩ（０．３４ｇ、１．７８ｍｍｏｌ）をプロパルギルアルコール（ＩＸ）（１．００ｇ、１１．８４ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（１３．２ｍＬ）中溶液に添加した。ＭｅＭｇＢｒ（１７．８ｍＬ、５３．５１ｍｍｏｌ、Ｅｔ_２Ｏ中３Ｍ）の溶液を－２０℃で加えた。この温度で２時間撹拌した後、溶液を２５℃に到達させ、さらに１２時間撹拌した。Ｅｔ_２Ｏ（４０．０ｍＬ）中のＩ_２（９．１０ｇ、３５．６７ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で添加し、冷却浴を取り外した。２５℃で２４時間撹拌した後、得られた混合物を０℃に冷却し、氷水を加えた。有機層をＮａ_２Ｓ_２Ｏ_４の飽和水溶液（３×）で洗浄し、次いでセライト（登録商標）のパッドを通して濾過した。残渣を蒸留（０．２ｍｍＨｇ、６０℃）により精製して、（Ｚ）‐３‐ヨード‐３‐メチルプロパ‐２‐エン‐１‐オール（Ｘ）として同定された黄色油２．１０ｇ（６０％）を得た。

（Ｚ）‐３‐ヨード‐２‐メチルアクリルアルデヒド（ＸＩ）。ＣＨ_２Ｃｌ_２（５３．０ｍＬ）中の（Ｚ）‐３‐ヨード‐３‐メチルプロパ‐２‐エン‐１‐オール（ＩＩＸ）（０．２１ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）の溶液にＭｎＯ_２（０．９３ｇ、１０．６５ｍｍｏｌ）及びＮａ_２ＣＯ_３（１．１３ｇ、１０．６５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を２５℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄しながらセライト（登録商標）のパッドを通して濾過した。溶媒を蒸発させて、０．１５ｇ（７３％）の（Ｚ）‐３‐ヨード‐２‐メチルアクリルアルデヒド（ＸＩ）として同定された黄色油状物を得た。

２‐（１Ｅ，３Ｚ）‐４‐ヨード‐３‐メチルブタ‐１，３‐ジエン‐１‐イル）‐１，３，３‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン（ＸＩＩＩ）。ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中のホスホニウム塩（ＸＩＩ）（１５０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の冷（－３０℃）溶液に、ｎＢｕＬｉ（２．５ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ、ヘキサン中２．３６Ｍ）を加え、混合物を０℃で４５分間撹拌した。－３０℃に冷却した後、ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中の（Ｚ）‐３‐ヨード‐２‐メチルアクリルアルデヒド（ＸＩ）（７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物を１．５時間撹拌した。水（５ｍＬ）を添加し、混合物をヘキサン（３×）で抽出した。有機抽出物を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８‐シリカゲル、ＣＨ_３ＣＮ）により精製して、２‐（１Ｅ，３Ｚ）‐４‐ヨード‐３‐メチルブタ‐１，３‐ジエン‐１‐イル）‐１，３，３‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン（ＸＩＩＩ）として同定される６５ｍｇ（６４％）の黄色油状物を得た。

シリルエーテル（ＸＶ）。ＴＨＦ（０．２ｍＬ）中の２‐（１Ｅ，３Ｚ）‐４‐ヨード‐３‐メチルブタ‐１，３‐ジエン‐１‐イル）‐１，３，３‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エンＸＩＩＩ（１６１ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４（４５ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）を加えた。２５℃で５分間撹拌した後、ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の（Ｒ）‐ボロランＸＩＶ（１５０ｍｇ、０．３９２ｍｍｏｌ）の溶液及びＴｌＯＨ（４．２６ｍＬ）の１０％水溶液を加え、反応混合物を２時間撹拌した。混合物をＥｔ_２ Ｏ（３×）で抽出し、合わせた有機層をブライン（３×）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９５：５ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製して、（３Ｒ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）‐｛［３，７‐ジメチル‐９］‐（２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イル）ノナ‐４，６，８‐トリエン‐１‐イル］オキシ｝トリイソプロピルシラン（ＸＶ）として同定される１２０ｍｇ（７１％）の無色油状物を得た。

（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノールＸＶＩ。ＴＨＦ（３．５ｍＬ）中のシリルエーテル（ＸＶ）（９１．２ｍｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）の冷（０℃）溶液に、Ｂｕ_４ＮＦ（０．３２ｍＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で０．５時間撹拌した。ＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（９５：５から７０：３０へのヘキサン／ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチノール（ＸＶＩ）として同定された４１ｍｇ（６７％）の無色の油を得た。

（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐β，β‐カロテン（ＸＩＸ）。ＣＨ_２Ｃｌ_２（３．７ｍＬ）中のアルコール（ＸＶＩ）（２５ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でデス‐マーチンペルヨージナン（Ｄｅｓｓ-Ｍａｒｔｉｎｅ ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）（７３．５ｍｇ、０．１７３ｍｍｏｌ）及びピリジン（０．０１４ｍＬ、０．１７３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃で３０分間及び２５℃で２時間撹拌した。次いで、Ｅｔ_２Ｏ（５ｍＬ）、ＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（３ｍＬ）及びＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３の飽和水溶液（３ｍＬ）を加えた。層を分離し、水層をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出し、合わせた有機層をＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（２×）及びブライン（２×）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、９５：５から７０：３０へのヘキサン／ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチナール（ＸＶＩＩ）として同定した１４ｍｇ（５７％）の無色油状物を得た。この生成物は非常に不安定で容易に異性化されることが観察された。ＩＲ（ＮａＣｌ）：ｖ ２９２７（ｍ、Ｃ‐Ｈ）、２８６４（ｍ、Ｃ‐Ｈ）、１４６１（ｓ）、１１０５。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）：計算値Ｃ２０Ｈ３１Ｏ（［Ｍ＋Ｈ］^＋）、２８７．２３６２。測定値、２８７．２３６９。－７８℃のＴＨＦ（０．２ｍＬ）中のホスホニウム塩ＶＩＩ（２４．９ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎＢｕＬｉ（０．０２７ｍＬ、０．０４４ｍｍｏｌ、ヘキサン中１．６Ｍ）を加え、反応物を３０分間撹拌した。次いで、ＴＨＦ（０．１３ｍＬ）中の（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐レチナールＸＶＩＩ（９．０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）の溶液を加え、混合物を－７８℃で１時間、２５℃で３０分撹拌した。水を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（３×）で抽出した。合わせた有機層をＮａＣｌの飽和水溶液（２×）で洗浄し、乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。溶媒を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィー（Ｃ１８‐シリカゲル、ＣＨ_３ＣＮ）によって精製して、（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐β，β‐カロテン（ＸＩＸ）として同定される１１．３ｍｇ（６７％）の赤色の泡状物を得た。

実施例３：動物実験
動物：
雄マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、フランス）を、個々に換気されたケージ（Ｔｅｃｈｎｉｐｌａｓｔ、イタリア）内の午前７時～午後７時の明／暗サイクルで、ケージあたり３匹のマウスの群に収容した。食物（標準食餌、フランスのＳＡＦＥからのＤ０４）及び水は自由に入手可能であった。すべての実験は、１９８６年１１月２４日の欧州共同体評議会指令（８６／６０９／ＥＥＣ）に従い、ＣＮＲＳ及びフランスの農林省の指針（法令８７８４８）に従って行われた。

社会的敗北ストレスプロトコルのために、我々は６～７週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｎマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、フランス）を使用した。社会的敗北ストレスに適応したＭＩＣＥケージで実施されるストレスプロトコール（下記参照）まで、個々の換気されたケージ（Ｔｅｃｈｎｉｐｌａｓｔ、イタリア）において、午前７時～午後７時の明／暗サイクルでケージ当たり４～５匹のマウスのグループにすべてのマウスを収容した。Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ（Ｆｒａｎｃｅ）から購入したＣＤ１雄マウスをこの試験の攻撃者として使用した（下記参照）。

食料と水は自由に手に入るようにした。すべての実験は、１９８６年１１月２４日の欧州共同体評議会指令（８６／６０９／ＥＥＣ）に従い、ＣＮＲＳ及びフランス農林省の指針（法令８７８４８）並びにフランス研究省の承認に従って行われた。

行動手順及び組織試料採取：
行動学的にナイーブなマウス群を、薬理試験を容易にするための修正を加えて（Ｗｉｅｔｒｚｙｃｈ‐Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．、２０１１）、以前に記載されたプロトコール（Ｗｉｅｔｒｚｙｃｈ ｅｔ ａｌ．、２００５）に従ってＴ‐迷路のＤＮＭＴＰで試験した。具体的には、本プロトコルでは、動物を最初に約１５秒の最小試行間間隔（ＩＴＩ）で１０連続日にわたって訓練した。これは４連続日（９‐１０日目）の間に正しい選択の９０％以上という基準を達成するために必要であった。この期間の後、５日間連続して（１１～１５日目に示す）６分のブロックずつＩＴＩを半ランダムに増加させて、各動物について「試験ＩＴＩ」を決定し、これはマウスがチャンスレベルで行動する最短ＩＴＩとして定義した。１６日目から、マウスを１６日目のビヒクル注射後（ビヒクル単独の効果について試験するため）及び１７日目の９ＣＤＨＲＯＬ（４０ｍｇ／ｋｇ）注射後に対応する「試験ＩＴＩ」遅延を用いて試験した。保持期間中に腕を選択するための潜伏期間が３日連続で１日２回以上の試行で３分を超えたため（除外基準）、３匹のマウスを試験から除外した。１８日目にマウスに再度９ＣＤＨＲＯＬ（４０ｍｇ／ｋｇ）を注射し、９時間後に化学分析のために殺した。３日連続してビヒクル注射を受けたマウスを９ＣＤＨＲＯＬ代謝の分析のためのビヒクル処置対照として使用した。急性処置後の９ＣＤＨＲＯＬ代謝について試験するために、３匹の未処置マウスのさらなる群にも９ＣＤＨＲＯＬ（４０ｍｇ／ｋｇ）を注射した。

強制水泳試験：強制水泳パラダイムは、２２～２３℃（水深１７ｃｍ）で水を半分満たした３リットルのガラスビーカー中で午後１時～午後４時の間に行われた。全てのマウスはこの課題において一度だけ試験された。この目的のために、各マウスを穏やかに水中に下げ、６分間の試験期間中に不動時間を記録した。マウスは直立姿勢で浮遊しているときに動けないと判断され、頭を水面上に保つためにわずかな動きしかしなかった。６分後、マウスを水から取り出し、赤色灯の下で乾燥させ、そのホームケージに戻した。各動物の不動スコアを絶望行動の指標として用いた。

スクロース選好試験：マウスの快楽行動を測定するために設計されたこの作業は、多くのマウス系統で観察されたスクロースの明白な性質に基づいている。試験の初日に、スクロースナイーブマウスを午前１１時に個々のケージに入れ、そこに水及び食物と共に慣らし期間の間置いた。午後５時に、１本の水のボトルを２本のボトルと交換した。１本は水を含み、もう１本は０．８％スクロース溶液を含む。３時間後（午後８時）、ボトルを計量して液体の消費量を測定し、朝までケージに入れた。その後、ショ糖の嗜好性を評価するために、一晩消費量の測定をさらに１日実施した。自発的なスクロースの嗜好性を測定し、水分欠乏のストレスによって引き起こされる潜在的な感情的交絡を排除するために、マウスはいかなる時点でも水分を奪われていなかった。スクロースの嗜好性は、総液体消費量に対する消費されたスクロース溶液の百分率として表された。

社会的敗北ストレス：社会的敗北ストレス手順は、以前に記載されたプロトコルの修正版であった（Ｂｅｒｔｏｎ、ＭｃＣｌｕｎｇ ｅｔ ａｌ．２００６）。Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスを１０日間連続して慢性的に敗北させた。毎日、彼らは、ホームケージで見慣れないＣＤ１アグレッサーとの物理的な接触を最大５分の相互作用時間で行った。各回の身体的ストレスの後、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ及びＣＤ１マウスを穴のあいた壁で分離し、２４時間感覚的接触を維持した。最後のストレスセッションの後、マウスを新しいケージに移し、行動試験期間を通して別々に収容した。実験動物と同様に、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ対照マウスを、金属製の穴のあいた壁によって隔てられたケージあたり２匹収容した。毎日、彼らは５分間物理的な接触にさらされた。

動物の治療
行動分析のために、９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＢＣをエタノールに溶解し、次いでひまわり油と混合し、最終溶液は３％のエタノールを含んでいた。ビヒクル処置は、ヒマワリ油中の３％エタノール溶液からなった。午前７時から試験開始前の７時間の間に、３ｍｌ／ｋｇの容量／重量比で腹腔内注射により処置を施した。ストレスプロトコールの１日目から始まるストレスセッション直後のストレスプロトコールの２日目毎に５～６ｐｍの間に、各物質について１０ｍｇ／ｋｇ、体重／重量比３ｍｌ／ｋｇで経口投与した。

代謝分析のために、ＡＴＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＢＣ及び対照溶液を上記のように調製した。４０ｍｇ／ｋｇの用量の各物質の単回経口投与を用いて夕方にマウスを処置し、試料を遮光した状態で１１時間後に集め、秤量し、液体窒素中で凍結し、分析まで－８０℃で保存した。血清を調製し、さらなる分析まで直ちに茶色のバイアル中に－８０℃で保存した。

統計分析
学習段階中の行動成績の比較は、従属パラメータとしての時間と独立パラメータとしての正しい選択の割合を用いて、反復測定における一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を用いて行われた。薬理学的データは、反復測定で一元配置分散分析を用いて、ビヒクル処置後及び９ＣＤＨＲＯＬ処置後の動物の能力を比較することによって分析した。事後統計分析を行って、一群スチューデントｔ検定を用いて動物の能力を５０％のチャンスレベルと比較した。重要な違いは対応する図に示されている。

動物補給試験の結果
９ＣＤＨＲＯＬがインビボで９ＣＤＨＲＡを産生するための基質として作用し得る可能性を試験するために、我々は９ＣＤＨＲＡの活性を検出するのに敏感な行動パラダイムとして作業記憶を遅延非場所合わせ（ＤＮＭＴＰ）で試験した（Ｒｕｈｌ ｅｔ ａｌ、２０１５）。この目的のために、我々は４日間連続して最大性能（９０％超）の基準を達成するためにＤＮＭＴＰ課題においてＣ５７ＢＬ６Ｊ雄マウスのコホートを訓練した（図１ａ）。野生型Ｃ５７ＢＬ６Ｎ雄マウスは、１５秒間の試行間隔（ＩＴＩ）で訓練を受けたときに訓練日の有意な効果によって示されるように作業記憶課題を獲得した（Ｆ［９，３９］＝８，２８；ｐ＜０．００１、反復測定で一元配置分散分析）。マウスを３分というより長いＩＴＩで試験したとき、記憶能力は低下した。しかしながら、ＩＴＩが平均１３分（グラフ中にｇｒｌ３として示される全群の平均）に達したとき、それらの能力は５０％のチャンスレベルと変わらなかったので、マウスはＤＮＭＴＰ課題において完全な記憶喪失を示した（ｐ＜０．０５、１群ｔ検定）。各動物が完全な忘却を示したＩＴＩは、各個々の動物について「試験ＩＴＩ」として同定され、９ＣＤＨＲＯＬの記憶促進活性（ｐｒｏ－ｍｎｅｍｏｎｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ）を試験するときに使用された（図１ｂ）。そのような試験の間、９ＣＤＨＲＯＬ処置は記憶性能を有意に向上させたが、正しい選択の割合は５０％のチャンスレベル（ｐ＝０．２、ｎｓ；１群ｔ検定）に匹敵したので、ビヒクル適用は記憶を改善しなかった（Ｆ［１，４］１６；ｐ＜０．０５、治療効果の反復測定に関する一元配置分散分析）。９ＣＤＨＲＯＬ処置マウスは、５０％のチャンスレベルよりも有意に良好に機能した（ｐ＜０．０５；一群のｔ検定）。

実施例４：分析手順並びにＨＰＬＣ及びＬＣ‐ＭＳ分析
組織試料のＬＣ‐ＭＳ分析
Ａ．レチノイド分析のみ：分析手順：高速液体クロマトグラフィー質量分析（Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＬＣシステム；Ｍａｄｒｉｄ、Ｓｐａｉｎ）‐質量分析（ＳＣＩＥＸ Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄ ３５００ Ｓｙｓｔｅｍ；Ｓｃｉｅｘ、Ｍａｄｒｉｄ、Ｓｐａｉｎ）は、以前に検証されたプロトコルを使用して濃い黄色／琥珀色の光で行った（Ｒｕｈｌ、２００６；Ｒｕｈｌ ｅｔ ａｌ．、２０１５）。１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸の検出についてはＭＳ‐ＭＳ設定は３０３→２０７ｍ／ｚであり、１３，１４‐ジヒドロレチノールの検出についてはＭＳ‐ＭＳ設定はＭＳ‐ＭＳ特有のレチノイン酸の設定に匹敵する同じ滞留時間及び衝突エネルギーを用いて２９０→６９ｍ／ｚであった。したがって、試料調製のために、１００ｍｇの材料（試料が１００ｍｇ未満の場合、使用される標準重量：１００ｍｇまで水を添加した）又は１００μｌの血清を３倍容量のイソプロパノールで希釈し、組織をハサミで刻み、１０秒間ボルテックスし、５分間超音波浴に入れ、６分間振盪し、＋４℃でＨｅｒａｅｕｓ ＢＩＯＦＵＧＥ Ｆｒｅｓｃｏ中で１３０００ｒｐｍで遠心分離した。遠心分離後、上清を３０℃のエッペンドルフ濃縮器５３０１（エッペンドルフ、ドイツ）で乾燥した。乾燥抽出物を６０μｌのメタノールで再懸濁し、４０μｌの６０ｍＭ酢酸アンモニウム水溶液で希釈し、オートサンプラーに移して、引き続いて分析した。

Ｂ．レチノイドとカロテノイドの組み合わせ分析：分析手順：高速液体クロマトグラフィー質量分析（Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＬＣシステム；スペイン、マドリッド）‐質量分析（ＳＣＩＥＸ Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄ ３５００システム；スペイン、マドリード、Ｓｃｉｅｘ）プラス追加のオンラインダイオードアレイ検出器（Ｗａｔｅｒｓ ９６６ ＤＡＤ、Ｗａｔｅｒｓ、ＥＳ、Ｓａｎｔｉａｇｏ ｄｅ Ｃｏｍｐｏｓｔｅｌｌａ、ＥＳ）分析を、以前に確認されているプロトコル（ＬＩＴ）に加えて２０分の溶出時間後に第３及び第４の溶出液を添加して暗黄色／琥珀色の光の下で行った。２０分２０％（イソプロパノール：メタノール：メチル‐ｔｅｒｔ‐ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）／３０：３０：４０）～８０％（イソプロパノール：メタノール／５０：５０）、２５分４０％（イソプロパノール：メタノール：メチル‐ｔｅｒｔ‐ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）／３０：３０：４０）～６０％（イソプロパノール：メタノール／５０：５０）、２９分７０％（イソプロパノール：メタノール：メチル‐ｔｅｒｔ‐ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）／３０：３０：４０）～３０％（イソプロパノール：メタノール／５０：５０）、３０分０％（イソプロパノール：メタノール：メチル‐ｔｅｒｔ‐ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）／３０：３０：４０）～１００％（イソプロパノール：メタノール／５０：５０）、３０．１分２０％（イソプロパノール：メタノール：メチル‐ｔｅｒｔ‐ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）／３０：３０：４０）～８０％（イソプロパノール：メタノール／５０：５０）の直線勾配。１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸の検出については、ＭＳ‐ＭＳ設定は３０３‐＞２０７ｍ／ｚであり、１３，１４‐ジヒドロレチノールの検出についてはＭＳ‐ＭＳ設定は２９０‐＞６９ｍ／ｚであり、９ＣＤＨＢＣの検出については４０５‐＞４０５／４０５→９５ｍ／ｚ。したがって、試料調製のために、１００ｍｇの材料（試料が１００ｍｇ未満の場合、使用される標準重量：１００ｍｇまで水を添加した）又は１００μｌの血清を３倍容量のイソプロパノールで希釈し、組織をハサミで刻み、１０秒間ボルテックスし、５分間超音波浴に入れ、６分間振盪し、＋４℃でＨｅｒａｅｕｓ ＢＩＯＦＵＧＥ Ｆｒｅｓｃｏ中１３０００ｒｐｍで遠心分離した。遠心分離後、上清をＩＬＭＡＣ ＭＰＣ３０１‐Ｚ真空ポンプ（ＣＯＮＴＲＯＬＴＥＣＮＩＣＡ、Ｍａｄｒｉｄ、ＥＳ）を備えたＧＹＯＺＥＮ遠心分離真空濃縮機で３０℃で乾燥した。乾燥抽出物を３０μｌのメタノール‐ＭＴＢＥ（５０‐５０）で再懸濁し、オートサンプラーに移し、続いて１０μｌを分析した。

統計分析
行動分析及びレチノイド／カロテノイド分析のための統計分析は、２群比較のそれぞれについてスチューデントｔ検定を用いて行った。重要な差は対応する図に示されている。

ＨＰＬＣ及びＬＣ‐ＭＳ分析の結果
内因性９ＣＤＨＲＯＬの初期同定及び９ＣＤＨＲＯＬのマウスへの処置後の９ＣＤＨＲＯＬの同定
最初に、ＬＣ‐ＭＳ分析を使用して９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール（９ＣＤＨＲＯＬ）と全トランス‐ジヒドロレチノール（ＡＴＤＨＲＯＬ）の混合標準を分析し（図２の上図）、ビヒクル処置マウスからの肝臓試料を分析した（図２の下図）。標準９ＣＤＨＲＯＬとＡＴＤＨＲＯＬの両方のピークは、ＬＣ‐ＭＳシステムの同じＭＳ‐ＭＳ分画チャンネルを使用して、肝臓試料で同定されたピークと共溶出している。共溶出に基づいて同じＬＣ‐ＭＳパラメータと同じ分画パターンチャンネル（２９０‐＞６９ｍ／ｚ）を使用して、９ＣＤＨＲＯＬとＡＴＤＨＲＯＬを哺乳動物の内因性レチノイドと主張して同定する。さらに、これらの共溶出ピークはマウスの血清及び脳でも低レベルで観察することができ、９ＣＤＨＲＯＬは９ＣＤＨＲＯＬ処置後に強く増加する（図３）。

マウス、ヒト及びヒト食品マトリックス中の内因性９ＣＤＨＲＯＬの同定：
マウス脳を上記の手順に従って調製した。簡単に言うと、夕方のマウスに４０ｍｇ／ｋｇの用量の９ＣＤＨＲＯＬ（又は他の引用物質）を単回経口投与した後、１１時間後に屠殺し、脳を含む組織試料を遮光条件下で解剖し、秤量し、液体窒素中で凍結し、分析まで－８０℃で保存した。血清を調製し、さらなる分析まで、直ちに茶色のバイアル中に－８０℃で保存した。

ヒト血清試料を全ての被験者の書面によるインフォームドコンセントを得て、健康な志願者の血液から得た。

食品試料：スペインのビーゴの地元の肉屋で牛レバーを購入した。缶詰の桃の保存品（Ｍｅｔａｄｅｓ、Ｐｅｓｓａｇｏ ｅｍ ｃａｌｄａ、Ａｕｃｈａｎ／Ａｌｃａｍｐｏ‐ｈｏｍｅ‐ｂｒａｎｄ／４２０ｇ缶）は、Ａｌｃａｍｐｏ、Ｖｉｇｏ、スペインで購入した。

最初に我々はＬＣ‐ＭＳ分析を用いて標準の９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール（９ＣＤＨＲＯＬ、図１４Ａの上のクロマトグラム）を分析し、その後我々は対照処置マウスからの対照脳試料を分析した（図１４Ａの中央クロマトグラム）。９ＣＤＨＲＯＬ標準のピークは、ＬＣ‐ＭＳシステムの同じＭＳ‐ＭＳ分画チャネルを使用して、脳試料で同定されたピークと同時に溶出している。

さらに、我々は、ヒト血清中（図１４Ｂ）及び関連のヒト食品／牛肉肝臓中（図１４Ｃ）に９ＣＤＨＲＯＬを同定した。共溶出に基づいて、同じＬＣ‐ＭＳパラメータと同じ分画パターンチャンネル（２９０‐＞６９ｍ／ｚ）を使用して、９ＣＤＨＲＯＬを、哺乳類の生物であるマウスとヒトにおける、並びにこれも哺乳類の生物である牛肉の肝臓に代表されるヒトの食べ物に存在する新規内因性レチノイドとして主張し同定する。

ヒトの食品マトリックス中の９ＣＤＨＢＣの同定（図１５）：
９ＣＤＨＢＣは、缶の中のモモ（砂糖煮）における共溶出及び匹敵するＵＶ／ＶＩＳスペクトルを用いて同定された。

実施例５：マウスにおける処置後の化合物の同定
マウスにおける９ＣＤＨＲＯＬ処置後の９ＣＤＨＲＡの同定
最近我々は９ＣＤＨＲＡがマウス（Ｒｕｈｌ ｅｔ ａｌ．、２０１５）及びヒト（まだ未発表のデータ）において内因性の誘導体であることを確認した。次のステップは、インビボ及びインビトロモデルで９ＣＤＨＲＡの前駆体を同定することである。

動物処置、９ＣＤＨＲＯＬの投与及び試料分析は実施例３及び４に記載のように実施した。

マウス補充実験を用いて、我々はｎ＝６のマウスに１００ｍｇ／ｋｇ体重の９ＣＤＨＲＯＬを経口投与し、処置の９時間後にマウスを殺し、血液、脳及び肝臓を採取した。採血した血液を遠心分離した後、血清を得た。

血清中、脳及び肝臓の９ＣＤＨＲＡ及びＡＴＤＨＲＡは内因的に低レベルで見出された。さらに９ＣＤＨＲＯＬ処置後、血清、脳及び肝臓の分析試料で９ＣＤＨＲＡレベルの大幅な増加が確認された（図４）。比較として、我々は肝臓試料中の９ＣＤＨＲＡの増加レベルを図５に示した。

マウスにおける９ＣＤＨＲＯＬの同定
９ＣＤＨＲＯＬは９ＣＤＨＲＯＬ処置マウス及び９ＣＤＨＢＣインビトロ乏突起膠細胞培養からの代謝産物に蓄積される：経口投与マウスにおける９ＣＤＨＲＯＬによる処置は、対照処理脳（図１４Ａの中央クロマトグラム）と比較してマウス脳における９ＣＤＨＲＯＬを増加させる（図１４Ａの下のクロマトグラム）。本明細書では、９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＤＨＲＯＬの投与はヒト乏突起膠細胞培養物中の９ＣＤＨＲＯＬレベルを増加させるが、ＡＴＢＣは増加を示さなかったことに留意する。９ＣＢＣ（及びＡＴＲＯＬ）は、乏突起膠細胞培養において、９ＣＤＨＲＯＬの増加を全く示さなかったか、又はわずかな非異性体選択的増加を示しただけである（図１４Ｄ）。まとめると、９ＣＤＨＢＣは、インビトロでのヒト乏突起膠細胞培養における９ＣＤＨＲＯＬの優れた前駆体基質である。

実施例６：細胞培養実験
細胞培養実験
正常な不死化乏突起膠細胞系１５８Ｎを以前に報告されたように培養した（Ｆｅｕｔｚら、２００１）。細胞が７０％の集密度に達したとき、それらを以下の化合物のうちの１つの１０‐２Ｍエタノール溶液で処理した：９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ‐アセテート、９ＣＤＨＲＡ‐エチルエステル。対照としての９ＣＤＨＲＡ及びエタノール、ビヒクル処置。処理の１８時間後、細胞をアンバーエッペンドルフチューブに集め、分析まで－８０℃で保存した。レチノイドの光分解を避けるために、光制限条件下で処理及び細胞収集を行った。

高速液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ‐ＭＳ）は実施例４に記載されているように実施した。

ＡＴＲＯＬと９ＣＲＯＬの変換
同様の実験において、我々は以下のレチノール種を必要な変更を加えて同じ細胞培養に適用した：ＡＴＲＯＬ及び９ＣＲＯＬ。標準として通常のＲＯＬ標準が適用された（黒い線）。種は矢印でも示されている（図１１）。

レチノール種の変換もまた追跡された。図１２では、１３，１４‐ジヒドロ‐レチノイン酸（ＤＨ‐ＲＡ）種９ＣＤＨＲＡ及びＡＴＤＨＲＡの測定が、同じレチノール種ＡＴＲＯＬ及び９ＣＲＯＬの投与後に示されている（それぞれ青い線及び赤い線）。細胞中にはせいぜい非常に少量のジヒドロ酸が存在するか又は全く存在しない（９ＣＲＯＬ）ことが明らかに示されている。

同様の実験において、レチノイン酸種１３‐シス‐レチノイン酸（１３ＣＲＡ）並びに９ＣＲＡ及びＡＴＲＡの測定は、同じレチノール種ＡＴＲＯＬ及び９ＣＲＯＬの投与後に示される（それぞれ青線及び赤線）。細胞内に存在するとしても、ごくわずかな量のこれらの酸形態が、ノイズの多い背景に対しては見られないことが明らかに示されている。したがって、アルコールの対応する酸形態への変換は非常に弱く、アルコール形態は前駆体として確かに不適切である。
分析手順は上記の通りに実施した。

乏突起膠細胞への９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＥＴ‐アセテート又は９ＣＤＨＲＡ‐エチル‐エステルの添加後の９ＣＤＨＲＡの同定
我々は、９ＣＤＨＲＡがマウスの血清、脳及び肝臓における９ＣＤＨＲＯＬ補給の代謝産物であることを確認した。さらに、乏突起膠細胞株を１０^‐５Ｍの９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＥＴ‐アセテート又は９ＣＤＨＲＡ‐エチルエステルで１８時間処理した。我々は９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＥＴ‐アセテートの投与後に９ＣＤＨＲＡレベルの強い増加が見られたことを観察した（図６上）。加えて、我々は９ＣＤＨＲＡ‐エチル‐エステル適用後に非常に強い増加が確認されたことを見出した（図６下）。

９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＤＨＲＯＬ投与後の９ＣＤＨＲＯＬの同定
９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＤＨＲＯＬの投与は、ヒト乏突起膠細胞培養物中の９ＣＤＨＲＯＬレベルを増加させるが、ＡＴＢＣは増加を示さなかった。９ＣＢＣ（及びＡＴＲＯＬ）は、乏突起膠細胞培養において９ＣＤＨＲＯＬの増加を全く示さないか、又はほんのわずかな非異性体選択的増加を示す（図１４Ｄ）。要約すれば。９ＣＤＨＢＣは、インビトロでのヒト乏突起膠細胞培養における９ＣＤＨＲＯＬの優れた前駆体基質である。

９ＣＤＨＢＣ、９ＣＢＣ及びＡＴＢＣ投与後の９ＣＤＨＢＣの同定
９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＢＣ投与後、ただしインビトロでの乏突起膠細胞培養へのＡＴＢＣ投与後ではない９ＣＤＨＢＣの同定（図１６Ａ及び１６Ｂ）：９ＣＢＣ投与時の乏突起膠細胞培養では、これらの処理した細胞における４１１ｎｍの検出波長で、保持時間２６．１分で９ＣＢＣを検出でき（図１６Ａ、４１１ｎｍの検出）、一方、ＡＴＢＣ又は９ＣＤＨＢＣ処置後のいずれかと同様に、９ＣＢＣは対照処置では検出できなかった。この存在は、ダイオードアレイ検出器によって取られたＵＶ／Ｖｉｓスペクトルによっても確認された（データはここには示されていない）。

３６６ｎｍでのＵＶ検出を有する９ＣＤＨＢＣに焦点を合わせると（図１６Ｂ）、我々は対照処置又はＡＴＢＣ処置後の９ＣＤＨＢＣの非常に小さいピークを検出することができ、９ＣＢＣ処置後に９ＣＤＨＢＣ処置後にやや高いピーク及びさらに高いピークを検出することができ（２５、１分の保持時間で）、それはダイオードアレイ検出器によって取られた比較のＵＶスペクトルによって確認された（データはここには示されていない）。

乏突起膠細胞培養物への９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ‐エステル、９ＣＤＨＲＡ及び９ＣＤＨＲＡ‐エステル投与後の９ＣＤＨＲＡの同定
１０^‐５Ｍの９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ‐アセテート、９ＣＤＨＲＡ又は９ＣＤＨＲＡ‐エチル‐エステルで１８時間処理した乏突起膠細胞株では、９ＣＤＨＲＯＬの後、９ＣＤＨＲＯＬ‐アセテートは９ＣＤＨＲＡレベルの強い増加を見いだした（図１７Ａ）。さらに、９ＣＤＨＲＡ‐エチル‐エステル（及び９ＣＤＨＲＡ、データは示されていない）の適用後、非常に強い増加が確認された（図１７Ａの下のクロマトグラム）。９ＣＤＨＲＯＬ及び９ＣＤＨＲＯＬ‐エステルは９ＣＤＨＲＡの優れた前駆体であるが、我々はまた、ＡＴＲＯＬ、９ＣＤＨＢＣ、９ＣＢＣ及びＡＴＢＣは、９ＣＤＨＲＡに変換されないことを確認した（データは示されていない）。要約すると、９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬ‐エステル及び９ＣＤＨＲＡ‐エステルは、インビトロヒト乏突起膠細胞培養における優れた選択的かつ異性体特異的なＲＸＲ‐リガンド前駆体である。

実施例７ マウスにおける９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＢＣ補給後の９ＣＤＨＲＡの同定
実験は実施例５に記載したものと類似していた。
インビトロ実験に加えて、本発明者らは、経口補給マウスに９ＣＤＨＢＣ及び９ＣＤＨＲＯＬを用いてインビボ補給実験も行った（図１７Ｂ及び１７Ｃ）。対照と比較して、９ＣＤＨＢＣ補給後に９ＣＤＨＲＡの中程度だが有意な増加が観察された（図１７Ｂ）。低レベルの９ＣＤＨＲＡ及びその異性体ＡＴＤＨＲＡは、マウスの対照マウス（図１７Ｃの上のクロマトグラム）の血清、肝臓及び脳でも観察され、特に９ＣＤＨＲＡは９ＣＤＨＲＯＬ補給後に著しく増加する（図１７Ｃの下のクロマトグラム）。

実施例８：実験手順‐動物試験における試験（Ｒ）‐９ＣＤＨＲＡ
例８．１：方法
動物：
Ｒｂｐｌ‐／‐及びＲｘｒｙ‐／‐変異体並びにそれらの野生型（ＷＴ）対照マウスを、記載のようにヘテロ接合性交配から混合遺伝的背景（６０％Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ及び４０％１２９ＳｖＥｍｓ／ｊ）で飼育し（Ｇｈｙｓｅｌｉｎｃｋ ＮＢ １９９９）；Ｋｒｅｚｅｌら、１９９６）、３～６ヶ月の年齢で試験した。全てのマウスを、個々に換気されたケージ（Ｔｅｃｈｎｉｐｌａｓｔ、イタリア）中で午前７時～午後７時の明／暗サイクルでケージ当たり４～５匹のマウスの群に収容した。食料と水は自由に手に入るようにした。すべての実験は、１９８６年１１月２４日の欧州共同体評議会指令（８６／６０９／ＥＥＣ）に従い、ＣＮＲＳ及びフランスの農林省の指針（法令８７８４８）に従って行われた。

社会的敗北ストレスプロトコルとして、我々は、６週齢でＴａｃｏｎｉｃ（フランス）から移され、１ケージあたり４匹のグループに収容されたＣ５７ＢＬ／６Ｎマウスを使用した。馴化期間の１週間後、彼らは社会的敗北ストレスにさらされた。この試験では、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ（Ｆｒａｎｃｅ）から購入したＣＤ１を攻撃者として使用した。

行動手順：すべての行動試験は、標準的な操作手順に従ってＩｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｌｉｎｉｑｕｅ ｄｅ ｌａ Ｓｏｕｒｉｓ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｃｓ－ｍｃｉ．ｆｒ／）で実施した。

強制水泳テスト：
強制水泳パラダイム（Ｄａｌｖｉ ａｎｄ Ｌｕｃｋｉ、１９９９）は、２２～２３℃の水で半分満たされた２リットルのガラス製ビーカー中で午後１時～午後４時の間に行われた（水深は１７ｃｍ）。全てのマウスはこの課題において一度だけ試験された。このために、各マウスを穏やかに水中に下げ、不動時間を６分間の試験期間中に記録した。マウスは直立姿勢で浮遊し、頭を水面上に保つためにわずかな動きしかしなかった場合に動けないと判断された。６分後、マウスを水から取り出し、赤色灯の下で乾燥させ、そのホームケージに戻した。各動物の不動スコアを絶望行動の指標として用いた。

スクロース嗜好性試験：マウスにおける快楽行動を測定するために設計されたこの作業（Ｍｏｒｅａｕ，１９７７）は、多くのマウス系統で観察されたスクロースの口当たりの良い性質に基づいている。試験の初日に、スクロースナイーブなマウスを午前１１時に個々のケージに入れ、そこに水及び食物と共に慣らし期間の間放置した。午後５時に、１本の水のボトルを２本のボトルと交換した。１本は水を含み、もう１本は０．８％スクロース溶液を含む。３時間後（午後８時）、ボトルを秤量して液体消費量を測定し、朝までケージに入れた。その後、スクロースの嗜好性を評価するために、一晩消費量の測定をさらに１日実施した。自発的なスクロースの嗜好性を測定し、水分欠乏のストレスによって引き起こされる潜在的な感情的交絡を排除するために、マウスはいかなる時点でも水分を奪われていなかった。スクロースの嗜好性は、総液体消費量に対する消費されたスクロース溶液の百分率として表された。

社会的敗北ストレス：社会的敗北ストレス手順は、以前に記載されたプロトコルの修正版であった（Ｂｅｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．２００６）。Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスを１０日間連続して慢性的に敗北させた。毎日、彼らはそのホームケージで見慣れないＣＤ１アグレッサーとの最大で５分間の相互作用時間で物理的な接触に晒された。各回の物理的ストレスの後、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ及びＣＤ１マウスを穴のあいた壁で分離し、２４時間感覚的接触を維持した。最後のストレスセッションの後、マウスを新しいケージに移し、行動試験期間を通して別々に収容した。実験動物と同様に、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ対照マウスを、金属製の穴のあいた壁によって隔てられたケージあたり２匹収容した。毎日、彼らは５分間物理的な接触にさらされた。
次に動物を強制水泳及びスクロース試験で試験した。

実施例７．２：Ｒ‐９ＣＤＨＲＡ補給はＲｂｐ１‐／‐マウスの行動変化を元に戻す
インビボでのＲＸＲ機能の調節における９ＣＤＨＲＡの関連性に取り組むために、本発明者らは、Ｒ‐９ＣＤＨＲＡがＲｂｐ１‐／‐マウスにおける行動障害を逆転させることができるかどうかを試験した。Ｒ‐９ＣＤＨＲＡによる急性処置は、強制水泳試験において用量依存的にノックアウトマウスの不動性を低下させ、すでに１ｍｇ／ｋｇで最大効果を達成し、これは同用量又は５ｍｇ／ｋｇでのＡＴＲＡによる処置で合成ＲＸＲアゴニストＵＶＩ２１０８の抗致死効果に匹敵した（図９）。処置の効果はＷＴマウスでは明白ではなかったが、それはこの系統における低いベースラインの不動性及びその結果としての床効果に関連しているかもしれない。Ｒ‐９ＣＤＨＲＡでの２ｍｇ処置はＲｘｒγ‐／‐マウスの能力を改善しなかったので、そのような活性はＲＸＲγによって媒介され、ビヒクル処置Ｒｘｒγ‐／‐動物における１１９±１９秒間と比較して１２０±２５秒間不動のままであった。

強制水泳試験における抗致死効果と同様に、１又は２ｍｇ／ｋｇのＲ‐９ＣＤＨＲＡも記憶試験におけるＲｂｐｌ‐／‐マウスのパフォーマンスを改善した。そのような治療は、Ｒｂｐｌ‐／‐の成功した選択の割合を増加させ、これはＤＮＭＴＰ試験において６分の試験間間隔で試験した場合、５０％のチャンスレベルより有意に良好に機能した（図８）。２ｍｇ／ｋｇのＲ‐９ＣＤＨＲＡでの処置はまた、ビヒクル処置の場合に同じＷＴマウスがチャンスレベル（５０％の正確な選択）で実行される１２又は１８分の長い試験間間隔で試験した場合、ＷＴマウスの能力も正しい選択の約７０％まで上昇させた。そのような処置は、５７±７％の正しい選択で機能したＲｘｒγ‐／‐マウスの性能を改善せず、これは９ＣＤＨＲＡレベルの低下に関連するＲＸＲγ機能の低下がＲｂｐ１‐／‐動物で観察される欠損の原因であるというさらなる証拠を提供する。

実施例７．３：Ｒ‐９ＣＤＨＲＡは慢性的な社会的敗北ストレスモデルにおいて抗うつ効果を示す。
本発明者らは、Ｒ‐９ＣＤＨＲＡ補給が、鬱病の慢性ストレスモデルにおいて鬱病行動を治療することを見出した。ストレスは、うつ病の病因における重要な環境要因である。ストレスによって誘発される鬱病行動の治療のための９ｃＤＨＲＡの効率を試験するために、我々は社会的敗北ストレス動物モデルを使用した（Ｂｅｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．、２００６、Ｈｏｌｌｉｓ ａｎｄ Ｋａｂｂａｊ、２０１４）。支配的な優性ＣＤ１雄との１０日間の短い毎日の物理的接触とそれに続くその後の感覚的接触は、強制水泳課題における絶望を効率的に誘発した（図１０．ａ）。ストレスプロトコール中の１又は３ｍｇ／ｋｇの９ｃＤＨＲＡによる処置は、コントロールのストレスを受けていないマウスに匹敵する不動時間を効率的に標準化した。より低い用量とは対照的に、３ｍｇ／ｋｇの９ｃＤＨＲＡでの治療は、ストレスを与えられた非処置マウスで観察された無動時間よりも有意に低いので抗絶望効果を示し、したがって９ｃＤＨＲＡはこの行動パラメータの制御において用量効果を示す。９ｃＤＨＲＡの効果は合成ｐａｎＲＸＲアゴニストＵＶＩ２１０８の活性と同等であり、９ｃＤＨＲＡによる抗絶望活性の達成におけるＲＸＲ活性化の重要な役割を示唆している。絶望行動に加えて、慢性的なストレスも無作為選択を反映して５０％と有意に異ならないレベルで消費された甘味飲料の嗜好の欠如によって反映される無快感症を誘発した（図１０．ｂ）。無快感症は、低用量の９ｃＤＨＲＡ（１ｍｇ／ｋｇ）ですでに処置されたストレスマウスでは、チャンスレベルの５０％を有意に超えるスクロースの嗜好性によって示されるようになくなったが、この嗜好性は３ｍｇ／ｋｇの９ｃＤＨＲＡの用量を上げて処置すると、さらに顕著であったのである。ａｎＲＸＲアゴニストＵＶＩ２１０８は９ｃＤＨＲＡと同様の活性を示し、抗うつ活性における９ｃＤＨＲＡによるＲＸＲ活性化の関与を支持した。

以前の特許において、ＲＸＲｇ‐／‐の使用は、９ｃＤＨＲＡが記憶を改善するためにＲＸＲｇで作用することを示す陰性対照であり、結果としてＲＸＲｇが存在しない場合、それは記憶を改善することはできない。Ｒｂｐｌ‐／‐はＲＸＲｇ‐／‐がＲＸＲｇシグナル伝達が停止していることを示唆しているのと同じタイプの欠損を示すために使用された。９ｃＤＨＲＡがそれらの記憶を正常化できることを示すことは、これらのマウスがＲＸＲリガンドを欠いており、受容体それ自体（又は受容体機能性）を欠いているのではないという概念の証明であった。以前の実験でさえ、我々は９ｃＤＨＲＡがＷＴマウスの記憶を改善することができることを示し、それはそれが健康な対象において記憶増強剤として働くことができるがＡＤにおいて記憶増強剤としても使用できることを示唆する。しかしながら、９ｃＤＨＲＡは催奇形性効果を有する可能性があるので、我々は、おそらくそのような催奇形性活性が引き出される前駆体を試験する。

例７．４：９ＣＤＨＲＯＬ又は９ＣＤＨＢＣは慢性ストレスモデルのうつ病における抑うつ行動を予防する（図１８）。
ストレスは、うつ病の病因における重要な環境要因である。ストレスによって誘発される鬱病行動の治療のための９ｃＤＨＲＯＬ及び９ｃＤＨＢＣの効率を試験するために、我々は社会的敗北ストレス動物モデルを使用した（Ｂｅｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．、２００６、Ｈｏｌｌｉｓ ａｎｄ Ｋａｂｂａｊ、２０１４）。支配的な優性ＣＤ１雄との１０日間の短い毎日の物理的接触とそれに続くその後の感覚的接触は、強制的な水泳課題において効率的に絶望を誘発した（図１８．８Ａ）。ストレスプロトコール中の１０ｍｇ／ｋｇの９ＣＤＨＲＯＬ又は１０ｍｇ／ｋｇの９ＣＤＨＢＣによる治療は、対照のストレスを受けていないマウスに匹敵する不動時間を正常に標準化した。絶望行動の慢性的なストレスは無作為選択を反映して５０％と有意に異ならないレベルで消費された甘味飲料の嗜好の欠如によって反映される無快感症を誘発した（図１８．Ｂ）。ストレスプロトコルの間に１０ｍｇ／ｋｇの９ＣＤＨＲＯＬ又は１０ｍｇ／ｋｇの９ＣＤＨＢＣで処置されたストレスマウスにおいては、スクロース嗜好性が５０％のチャンスレベルを有意に超えたことにより示されるように、無快感症はなくなった。

まとめと産業上の利用可能性
ビタミンＡは体内で視覚色素と核ホルモン受容体のリガンドに変換されることができる誘導体の集まりである。ビタミンＡ１（レチノール）はＲＡＲリガンド全トランス‐レチノイン酸（ＡＴＲＡ）の前駆体であることがよく知られているが、最近発見されたレチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）の内因性のリガンドである９‐シス‐１３，１４ジヒドロレチノイン酸（９ＣＤＨＲＡ）の前駆体の同一性は知られていない。本研究では、９ｃＤＨＲＡの栄養前駆物質は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール（９ＣＤＨＲＯＬ）と９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐βカロテン（９ＣＤＨＢＣ）であり、それぞれ新しいタイプのレチノイドとカロテノイドであって、これまで記載されてはいないが、食品マトリックス中及びヒトを含む哺乳動物生物中に内因的に高レベルで存在する。インビトロ及びインビボ実験を用いて、我々はそのような前駆体が直接又は間接的に９ＣＤＨＲＡに代謝され得ることを実証する。対照的に、全トランス‐レチノール、９‐シス‐レチノール及び全トランス‐β‐カロテンのような周知の内因性レチノイド／カロテノイドは、９ＣＤＨＲＡの弱い選択的な又は非選択的な前駆体にすぎない。我々はまた、既知の内因性カロテノイド９‐シス‐β‐カロテン（９ＣＢＣ）が脱水素化によって９ＣＤＨＢＣに弱く変換されるだけであることを実証する。しかしながら、９ＣＤＨＢＣは容易に９ｃＤＨＲＡに変換され、それ自体ＲＸＲリガンド‐９ｃＤＨＲＡの間接的な前駆体として提案することができる。我々の代謝スクリーニングを通して、我々は初めて９ＣＤＨＲＡエステル、９ＣＤＨＲＯＬ、９ＣＤＨＲＯＬエステル、９ＣＤＨＢＣが内因性ＲＸＲリガンド９ＣＤＨＲＡの栄養学的及び生理学的に関連のある選択的前駆体を元の形に戻すのに優れ、ＲＸＲ媒介シグナル伝達を誘導することを証明した。我々はさらに、この新しいクラスの物質を、９ｃＤＨＲＯＬの場合はビタミンＡ５、９ＣＤＨＢＣの場合はプロビタミンＡ５と命名された新しい独立した選択的な新しいタイプのビタミンＡとして説明した。これらの化合物の予防的／医薬的使用のための概念の証明は、うつ病の慢性ストレス動物モデルにおけるうつ病様行動の治療に示されている。これらの化合物の同様の使用は、ＲＸＲ媒介シグナル伝達が影響を受けるか又は治療標的として提案されている様々な疾患に対して想定することができる。そのような疾患には、神経変性疾患及び代謝疾患、皮膚機能障害及び免疫機能障害（炎症を含む）、並びに心血管疾患が含まれ得るが、記憶亢進効果のような生活様式の用途にも関係し得る。

参考文献

特許公報
ＷＯ９５／０４０１８Ａｌ
ＷＯ９５／３２９４６Ａｌ
ＷＯ２０１１／０３４５５１Ａ２
ＷＯ２０１３／１３４８６７Ａｌ

Claims (27)

1. 一般式（Ｉ）の化合物を含む、投与後の哺乳動物の組織又は器官又は細胞における（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノイン酸の前駆体としての医薬組成物又は栄養補助食品組成物であって、
   

   

   
   
   式中、Ｒは、一般式（Ａ）及び‐ＣＨ_２ＯＲ_２の群から選択され、
   Ｒは一般式Ａの基であり、
   

   

   
   
   式中、Ｑ_１は２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イルであり、及び／又は
   Ｒ_２はＨ又は哺乳動物の組織又は器官における加水分解により除去され、（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノール及び生物学的に許容可能な耐容性の化合物を生じるアシル基であり、
   前記組成物は１つ又は複数の薬学的に又は栄養補助食品的に許容可能な添加物及び／又は賦形剤をも含み、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）関連疾患の予防又は治療に使用するための、上記医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
2. 一般式（Ｉ）の化合物を含む請求項１に記載の医薬組成物又は栄養補助食品組成物：
   

   

   
   
   式中、Ｒは、一般式（Ａ）及びＣＨ_２ＯＲ_２の群から選択され、
   Ｒは一般式Ａの基であり、
   

   

   
   
   式中、Ｑ_１は、２，６，６‐トリメチルシクロヘキサ‐１‐エン‐１‐イルであり、
   及び／又は
   Ｒ_２はＨ又はアシル基Ｃ（Ｏ）Ｒ_３であり、ここでＲ_３はＣ_１‐２５アルキル又はＣ_２‐２５アルケニルである。
3. 一般式（３）の化合物
   

   

   
   
   式中、Ｒ_２は、Ｈ又はアシル基Ｃ（Ｏ）Ｒ_３であり、ここで、Ｒ_３は、
   Ｃ_１‐２３アルキル、及びＣ_２‐２５アルケニルから選択される、
   を含む、請求項２に記載の医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
4. 一般式（５）の化合物
   

   

   
   （５）
   式中、Ｑ _１ は、２，６，６‐トリメチルシクロヘキセニルである、
   を含む、請求項１又は２に記載の栄養補助食品組成物。
5. 一般式（４）の化合物を含む、請求項３に記載の医薬組成物又は栄養補助食品組成物：
   

   

   
   
   式中、Ｒ_３は、
   ‐Ｃ_１‐４アルキル、
   ‐Ｃ_{１１‐２１}アルキル、及び
   ‐Ｃ_{１１‐２３}アルケニル
   から選択される。
6. Ｒ_３は、Ｃ_１‐６アルキル、Ｃ_９‐２３アルキル、Ｃ_２‐６アルケニル、及びＣ_{１３‐２３}アルケニルから選択される、請求項２又は３に記載の組成物。
7. 前記化合物は、投与後に哺乳動物の組織又は器官において（Ｒ）‐９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロレチノールに変換される、哺乳動物におけるレチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）関連疾患の予防又は治療に使用するための、請求項３～６のいずれか一項に記載の医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
8. 哺乳動物の組織は中枢神経系若しくは末梢神経系のものである、請求項７に記載の医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
9. ９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ，ベータ‐カロテン又は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ，アルファ‐カロテンである、９‐シス‐カロテノイドを含む、ＲＸＲ関連疾患又はビタミンＡ５欠乏症に罹患した哺乳動物被験体における治療に使用するための、請求項７に記載の組成物。
10. ビタミンＡ５欠乏症の予防及び／又は治療に使用するための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
11. 中枢神経系関連疾患から選択される疾患の予防及び／又は治療に使用するための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、組成物。
12. 末梢神経系関連疾患から選択される疾患の予防及び／又は治療に使用するための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
13. ‐記憶障害、
    ‐作業記憶欠陥又は喪失、
    ‐認知機能障害
    ‐学習障害、及び／又は
    ‐うつ病
    の予防及び／又は治療に使用するための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
14. 神経変性疾患であるレチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）関連疾患の予防及び／又は治療における使用のための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
15. 神経変性疾患が、アルツハイマー病、パーキンソン病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＭＣＩを伴うパーキンソン病、ハンチントン病、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、及び加齢、疾患又は外傷によって引き起こされる脳の変化による他の神経変性関連認知症；又は脊髄損傷及び運動失調、播種性硬化症及び多発性硬化症（ＭＳ）又は他の神経学的状態から選択される、請求項１４に記載の医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
16. 記憶能力を増強するための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
17. 被験体の健康を維持するための、食品成分としての、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
18. 精神的健康又は性能を維持するため、又は請求項１０～１５のいずれかに定義された状態を予防するために健康を維持するための、請求項１～６のいずれかに記載の化合物を含む、医薬組成物又は栄養補助食品組成物。
19. 非治療的応用における化合物９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ‐カロテン（９ＣＤＨＢＣ）のレベルを増加させるための栄養補助食品としての、対応する自然環境又は食品マトリックス中に存在する量よりも多い量で９－シス－ベータ－カロテン（９ＣＢＣ）を含む、栄養補助食品組成物。
20. 請求項１１～１５のいずれかに定義された疾患の治療又は予防に使用するための、請求項１９に記載の栄養補助食品組成物。
21. ＶＡ５欠乏症の予防に使用するための、及び／又は一般的なＶＡ５補給のための、又はＲＸＲ依存性機能障害を予防するための、請求項１９に記載の栄養補助食品組成物。
22. 記憶能力を増強するための、請求項１９に記載の栄養補助食品組成物。
23. 一般式（４）の化合物：
    

    

    
    
    式中、Ｒ_３は、
    ‐Ｃ_１‐２３ アルキル、及び
    ‐Ｃ_‐２３２ アルケニル
    から選択される。
24. 一般式（４）の化合物：
    

    

    
    
    式中、Ｒ_３は、
    ‐Ｃ_１‐４アルキル、
    ‐Ｃ_{１１‐２１}アルキル、及び
    ‐Ｃ_{１１‐２３}アルケニル
    から選択される。
25. Ｒ_３は、Ｃ_１‐６アルキル、Ｃ_９‐２３アルキル、Ｃ_２‐６アルケニル、及びＣ_{１３‐２３}アルケニルから選択される、請求項２３に記載の化合物。
26. ９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ，ベータ‐カロテン又は９‐シス‐１３，１４‐ジヒドロ‐ベータ，アルファ‐カロテンである、９‐シス‐カロテノイド化合物。
27. 哺乳動物の被験体の治療に、ＲＸＲ関連疾患又はビタミンＡ５欠乏症に使用するための請求項２６に記載の９‐シス‐カロテノイド化合物であって、該９‐シス‐カロテノイド化合物は栄養補助食品組成物中に存在し、該栄養補助食品組成物は、天然の食品マトリックス中に存在するよりも多い量又は濃度で該化合物を含有する、及び／又は追加量の化合物を含む、上記９‐シス‐カロテノイド化合物。

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