JP7264667B2 - 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法 - Google Patents

液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法 Download PDF

Info

Publication number
JP7264667B2
JP7264667B2 JP2019036380A JP2019036380A JP7264667B2 JP 7264667 B2 JP7264667 B2 JP 7264667B2 JP 2019036380 A JP2019036380 A JP 2019036380A JP 2019036380 A JP2019036380 A JP 2019036380A JP 7264667 B2 JP7264667 B2 JP 7264667B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
liquid
fluid
flow
channel
pipe
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2019036380A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2020137475A (ja
Inventor
祐史 木村
博康 伊藤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hamamatsu Photonics KK
Original Assignee
Hamamatsu Photonics KK
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hamamatsu Photonics KK filed Critical Hamamatsu Photonics KK
Priority to JP2019036380A priority Critical patent/JP7264667B2/ja
Priority to US17/310,814 priority patent/US20220120271A1/en
Priority to PCT/JP2020/006615 priority patent/WO2020175289A1/ja
Priority to DE112020000979.3T priority patent/DE112020000979T5/de
Priority to CN202080017006.3A priority patent/CN113518924A/zh
Priority to TW109106197A priority patent/TWI837312B/zh
Publication of JP2020137475A publication Critical patent/JP2020137475A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7264667B2 publication Critical patent/JP7264667B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • FMECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F04POSITIVE - DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS FOR LIQUIDS OR ELASTIC FLUIDS
    • F04BPOSITIVE-DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS
    • F04B53/00Component parts, details or accessories not provided for in, or of interest apart from, groups F04B1/00 - F04B23/00 or F04B39/00 - F04B47/00
    • F04B53/16Casings; Cylinders; Cylinder liners or heads; Fluid connections
    • FMECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F04POSITIVE - DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS FOR LIQUIDS OR ELASTIC FLUIDS
    • F04BPOSITIVE-DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS
    • F04B19/00Machines or pumps having pertinent characteristics not provided for in, or of interest apart from, groups F04B1/00 - F04B17/00
    • F04B19/006Micropumps
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • C12M23/16Microfluidic devices; Capillary tubes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/08Chemical, biochemical or biological means, e.g. plasma jet, co-culture
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M47/00Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
    • C12M47/04Cell isolation or sorting
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • FMECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F04POSITIVE - DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS FOR LIQUIDS OR ELASTIC FLUIDS
    • F04BPOSITIVE-DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS
    • F04B23/00Pumping installations or systems
    • F04B23/04Combinations of two or more pumps
    • FMECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F04POSITIVE - DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS FOR LIQUIDS OR ELASTIC FLUIDS
    • F04BPOSITIVE-DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS
    • F04B43/00Machines, pumps, or pumping installations having flexible working members
    • F04B43/02Machines, pumps, or pumping installations having flexible working members having plate-like flexible members, e.g. diaphragms
    • F04B43/04Pumps having electric drive
    • F04B43/043Micropumps
    • FMECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F04POSITIVE - DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS FOR LIQUIDS OR ELASTIC FLUIDS
    • F04BPOSITIVE-DISPLACEMENT MACHINES FOR LIQUIDS; PUMPS
    • F04B53/00Component parts, details or accessories not provided for in, or of interest apart from, groups F04B1/00 - F04B23/00 or F04B39/00 - F04B47/00
    • F04B53/10Valves; Arrangement of valves
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N35/08Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor using a stream of discrete samples flowing along a tube system, e.g. flow injection analysis
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N37/00Details not covered by any other group of this subclass

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Physical Or Chemical Processes And Apparatus (AREA)

Description

本発明は、液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法に関する。
微小流体デバイスと、当該微小流体デバイスに液体を供給する液体供給装置とを含む微小デバイスシステムが知られている(たとえば、特許文献1)。特許文献1に開示されている微小流体デバイスでは、2つの流路が互いに沿って延在している。2つの流路は、連通孔によって連通されている。2つの流路のそれぞれには、所望の液体が供給される。微小流体デバイスは、たとえば、MEMS技術により作製される。
特開2015-002684号公報
上記微小流体デバイスは、たとえば、連通孔に脂質二重膜を形成するデバイス、又は、2つの流路の圧力差によって連通孔の一方の流路側に細胞を捕捉するデバイスを含む。微小流体デバイスでは、1つの流路に複数種類の液体を任意のタイミングで導入することが考えられる。たとえば、第1流路に2種の液体を同時に導入し、その後、第2流路に液体が導入されている状態で、第1流路に導入されている2種の液体のうち1種の導入を停止することが考えられる。
この場合、第1流路への液体の導入の停止に伴って第1流路を流れる液体の流量が変化する場合、第1流路の圧力も変化する。第1流路の圧力が急激に変化する場合には、第1流路と第2流路との間の圧力差が急激に変化するという問題が生じる。2つの流路間での圧力差の変化は、連通孔に位置している対象物に影響を及ぼす。連通孔に脂質膜が形成されていた場合、たとえば、上記圧力差の変化によって、形成された脂質膜が破砕するおそれがある。連通孔に細胞が配置されていた場合には、たとえば、上記圧力差の変化によって、細胞が連通孔から意図せずに離脱するおそれ、又は細胞が連通孔に押しつけられて破砕するおそれがある。
上記問題を解決するために、微小流体デバイスに液体を供給する液体供給装置が、状況に応じて、各流路に導入する液体の導入量をそれぞれ電子制御することも考えられる。しかし、この場合、液体供給装置の大型化、複雑化、及び高コスト化が懸念される。
本発明の一つの態様は、簡易な構成で流路間の圧力差の変化を抑制できる液体供給装置を提供することを目的とする。本発明の別の態様は、簡易な構成で流路間の圧力差の変化を抑制できる微小デバイスシステムを提供することを目的とする。本発明の更に別の態様は、簡易な構成で流路間の圧力差の変化を抑制できる液体供給方法を提供することを目的とする。
本発明の一つの態様に係る液体供給装置は、第1流路と、第2流路と、連通孔とを有する微小流体デバイスに液体を供給する。第2流路は、第1流路に沿って延在する。連通孔は、第1流路と第2流路とを連通する。この液体供給装置は、ポンプ部と、分岐管と、第1導入部と、第2導入部と、停止部とを備える。ポンプ部は、流体を放出する放出口を有する。分岐管は、接続部と、第1及び第2管部とを有する。接続部は、放出口に接続されている。第1及び第2管部は、接続部から分岐している。第1導入部は、第1管部に接続されており、第1管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第1液体を導入する。第2導入部は、第2管部に接続されており、第2管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第2液体を導入する。停止部は、第2管部における流体の流れを停止する。
上記一つの態様では、第2導入部は、第2管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第2液体を導入する。このため、第2管部内の流体の流れを停止することで、第1流路への第2液体の導入を停止できる。第2管部内の流体の流れが停止された状態では、ポンプ部の放出口から放出された流体は、分岐管の第2管部以外の部分に流れ込む。分岐管では接続部から第1及び第2管部が分岐しているため、第2管部内の流体の流れが停止された状態における第1管部内の流体の流量は、第2管部内の流体の流れが停止されていない状態に比べて増加する。第1導入部は、第1管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第1液体を導入する。このため、第2管部内の流体の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、第1流路を流れる液体の流量の変化は抑制される。したがって、上記液体供給装置では、第2管部内の流体の流れが停止された場合と停止されていない場合との間で遷移する場合でも、第1流路における圧力の変化は抑制される。この結果、第1及び第2液体の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制され得る。
上記一つの態様では、第1導入部は、第1管部に接続されていると共に第1液体を内部に収容する第1収容管を含んでもよい。第2導入部は、第2管部に接続されていると共に第2液体を内部に収容する第2収容管を含んでもよい。この場合、第1管部を流れる流体の流量に応じて、第1収容管に収容された第1液体が押し出される。第2管部を流れる流体の流量に応じて、第2収容管に収容された第2液体が押し出される。この結果、より簡易な構成で、第1流路と第2流路との間における圧力差の変化の抑制が実現され得る。
上記一つの態様では、停止部は、第2管部と第2導入部とを接続する流路を開閉するバルブを含んでもよい。この場合、第2管部内の流体の流れは、バルブによって容易に停止され得る。バルブが第2導入部と第2管部との間に設けられていれば、当該バルブによって第2管部の流体の流れが停止される場合に、第2液体の圧縮性及び第2導入部内の流路の膨張などによる影響を受けることなく、ポンプ部からの流体が分岐管の第2管部以外の部分に流れ込む。したがって、第1流路における圧力の変化がさらに抑制される。
本発明の別の態様に係る微小デバイスシステムは、微小流体デバイスと、第1供給部と、第2供給部と、を備える。微小流体デバイスは、第1流路と、第2流路と、連通孔とを有する。第2流路は、第1流路に沿って延在する。連通孔は、第1流路と第2流路とを連通する。第1供給部は、第1流路に液体を供給する。第2供給部は、第2流路に液体を供給する。第1供給部は、ポンプ部と、分岐管と、第1導入部と、第2導入部と、停止部とを備える。ポンプ部は、流体を放出する放出口を有する。分岐管は、接続部と、第1及び第2管部とを有する。接続部は、第1供給部のポンプ部の放出口に接続されている。第1及び第2管部は、接続部から分岐している。第1導入部は、第1管部に接続されており、第1管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第1液体を導入する。第2導入部は、第2管部に接続されており、第2管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第2液体を導入する。停止部は、第2管部における流体の流れを停止する。
上記別の態様では、第2導入部は、第2管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第2液体を導入する。このため、第2管部内の流体の流れの停止によって、第1流路への第2液体の導入を停止できる。第2管部内の流体の流れが停止された状態では、ポンプ部の放出口から放出された流体は分岐管の第2管部以外の部分に流れ込む。分岐管では接続部から第1及び第2管部が分岐しているため、第2管部内の流体の流れが停止された状態における第1管部内の流体の流量は、第2管部内の流体の流れが停止されていない状態に比べて増加する。第1導入部は、第1管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第1液体を導入する。このため、第2管部内の流体の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、第1流路を流れる液体の流量の変化は抑制される。したがって、上記微小デバイスシステムでは、第2管部内の流体の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、第1流路における圧力の変化が抑制される。この結果、第1及び第2液体の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制され得る。
上記別の態様では、微小流体デバイスは、第1流路に接続された第1及び第2流入路を有してもよい。第1及び第2流入路は、第1流路及び第2流路を通る平面上で第2流路の延在方向と直交する方向において、連通孔よりも第2流路から離れた位置に配置されていてもよい。第2流入路は、上記平面に直交する方向から見て、第1流入路よりも第2流路側で延在していてもよい。第1導入部は、第1流入路に第1液体を導入するように配置されていてもよい。第2導入部は、第2流入路に第2液体を導入するように配置されていてもよい。この場合、第1及び第2流入路のそれぞれに第1及び第2液体を導入することで、第1液体が流れる層と第2液体が流れる層とを第1流路内に形成できる。この構成であれば、第2流入路に第2液体を導入するか否かによって、連通孔に供給する液体を制御できる。
上記別の態様では、第2供給部は、ポンプ部と、分岐管と、第3導入部と、第4導入部と、停止部とを備えてもよい。上記ポンプ部は、流体を放出する放出口を有してもよい。分岐管は、接続部と、第3及び第4管部とを有してもよい。上記接続部は、第2供給部のポンプ部の放出口に接続されていてもよい。第3及び第4管部は、上記接続部から分岐していてもよい。第3導入部は、第3管部に接続されており、第3管部を流れる流体の流量に応じた流量で第2流路に第3液体を導入してもよい。第4導入部は、第4管部に接続されており、第4管部を流れる流体の流量に応じた流量で第2流路に第4液体を導入してもよい。上記停止部は、第3管部における流体の流れを停止してもよい。この場合、第2供給部と第1供給部とが同様の構成を有する。したがって、第3管部内の流体の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、第2流路における圧力の変化が抑制される。この結果、第1、第2、第3、及び第4液体の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制され得る。
上記別の態様では、微小流体デバイスは、第2流路に接続された第3及び第4流入路を有してもよい。第3及び第4流入路は、第1流路及び第2流路を通る平面上で第2流路の延在方向と直交する方向において、連通孔よりも第1流路から離れた位置に配置されていてもよい。第3流入路は、上記平面に直交する方向から見て、第4流入路よりも第1流路側で延在していてもよい。第3導入部は、第3流入路に第3液体を導入するように配置されてもよい。第4導入部は、第4流入路に第4液体を導入するように配置されてもよい。この場合、第3及び第4流入路のそれぞれに第3及び第4液体を導入することで、第3液体が流れる層と第4液体が流れる層とを第2流路内に形成できる。この構成であれば、第3液体を導入するか否かによって、連通孔に供給する液体を制御できる。
上記別の態様では、連通孔の径は、1~15 μmであってもよい。この場合、第1流路と第2流路との間に圧力差を設けることで、連通孔で細胞を捕捉できる。
本発明の更に別の態様に係る液体供給方法は、第1流路と、第2流路と、連通孔とを有する微小流体デバイスに液体を供給する。第2流路は、第1流路に沿って延在する。連通孔は、第1流路と第2流路とを連通する。この液体供給方法は、微小流体デバイスに液体を供給する液体供給装置を準備するステップと、液体供給装置によって第1流路及び第2流路に液体を導入するステップと、を備える。液体供給装置は、第1流路に液体を供給する第1供給部と、第2流路に液体を供給する第2供給部とを有する。第1供給部は、ポンプ部と、分岐管と、第1導入部と、第2導入部とを備える。ポンプ部は、流体を放出する放出口を有する。分岐管は、接続部と、第1及び第2管部とを有する。接続部は、放出口に接続されている。第1及び第2管部は、接続部から分岐している。第1導入部は、第1管部に接続されており第1管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第1液体を導入する。第2導入部は、第2管部に接続されており第2管部を流れる流体の流量に応じた流量で第1流路に第2液体を導入する。液体を供給するステップは、第1供給部のポンプ部の放出口から流体を放出し、第1及び第2管部内に流体を流すステップと、第1及び第2管部内に流体を流すステップの後に第1管部内に流体を流しながら第2管部内の流体の流れを停止するステップと、を有する。
上記の更に別の態様では、第1及び第2管部内に流体を流すステップにおいて第1流路に第1及び第2液体が導入され、第2管部内の流体の流れを停止するステップでは第1流路に第1液体は導入されるが第2液体は導入されない。第2管部内の流体の流れが停止された状態では、ポンプ部の放出口から放出された流体は分岐管の第2管部以外の部分に流れ込む。このため、第2管部内の流体の流れが停止された状態における第1管部内の流体の流量は、第2管部内の流体の流れが停止されていない状態に比べて増加する。このため、第2管部内の流体の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、第1流路を流れる液体の流量の変化は抑制される。したがって、上記液体供給方法では、第1及び第2管部内に流体を流すステップと第2管部内の流体の流れを停止するステップとの間で、第1流路における圧力の変化が抑制される。この結果、第1及び第2液体の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制され得る。
上記の更に別の態様では、第1及び第2管部内に流体を流すステップでは、第1流路において、第2液体が第1液体よりも第2流路の近くを流れるように、第1液体と第2液体とを並列させて流してもよい。この場合、第1及び第2管部内に流体を流すステップと第2管部内の流体の流れを停止するステップとの間で、連通孔に供給する液体を制御できる。
上記の更に別の態様では、第2供給部は、ポンプ部と、分岐管と、第3導入部と、第4導入部とを備えてもよい。ポンプ部は、流体を放出する放出口を有してもよい。分岐管は、接続部と、第3及び第4管部とを有してもよい。接続部は、放出口に接続されていてもよい。第3及び第4管部は、接続部から分岐していてもよい。第3導入部は、第3管部に接続されており第3管部を流れる流体の流量に応じた流量で第2流路に第3液体を導入してもよい。第4導入部は、第4管部に接続されており第4管部を流れる流体の流量に応じた流量で第2流路に第4液体を導入してもよい。液体を供給するステップは、第2供給部のポンプ部の放出口から流体を放出し、第3及び第4管部内に流体を流すステップと、第3及び第4管部内に流体を流すステップの後に第4管部内に流体を流しながら第3管部内の流体の流れを停止するステップと、を有してもよい。この場合、第3及び第4管部内に流体を流すステップにおいて第2流路に第3及び第4液体が導入され、第3管部内の流体の流れを停止するステップでは第2流路に第4液体は導入されるが第3液体は導入されない。第3管部内の流体の流れが停止された状態では、ポンプ部の放出口から放出された流体は分岐管の第3管部以外の部分に流れ込む。このため、第3管部内の流体の流れが停止された状態における第4管部内の流体の流量は、第3管部内の流体の流れが停止されていない状態に比べて増加する。したがって、上記液体供給方法では、第3及び第4管部内に流体を流すステップと第3管部内の流体の流れを停止するステップとの間で、第2流路における圧力の変化が抑制される。この結果、第1、第2、第3、及び第4液体の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制される。
上記の更に別の態様では、第3及び第4管部内に流体を流すステップでは、第2流路において、第3液体が第4液体よりも第1流路の近くを流れるように、第3液体と第4液体とを並列させて流してもよい。この場合、第3及び第4管部内に流体を流すステップと第3管部内の流体の流れを停止するステップとの間で、連通孔に供給する液体を制御できる。
上記の更に別の態様では、第2液体は、複数の細胞を含む懸濁液であってもよい。第4液体は、細胞に接触させる標的物質を含む試料であってもよい。第1及び第2管部内に流体を流すステップ及び第3及び第4管部内に流体を流すステップでは、第1流路内の圧力が第2流路内の圧力よりも高くなるように、第1供給部のポンプ部及び第2供給部のポンプ部から流体を放出してもよい。第2管部内の流体の流れを停止するステップでは、第1及び第2管部内に流体を流すステップ及び第3及び第4管部内に流体を流すステップにおける、第1供給部のポンプ部が放出する流体の流量、及び、第2供給部のポンプ部が放出する流体の流量を維持してもよい。この場合、連通孔の第1流路側に細胞を捕捉できる。第3管部内の流体の流れを停止するステップにおいて、捕捉された細胞に標的物質を接触させることができる。第2管部内の流体の流れを停止するステップでは、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制される。このため、捕捉された細胞が連通孔から意図せずに離脱すること、及び、捕捉された細胞が連通孔に押しつけられて破砕することが防止される。
上記の更に別の態様では、第3管部内の流体の流れを停止するステップでは、第1及び第2管部内に流体を流すステップ及び第3及び第4管部内に流体を流すステップにおける、第1供給部のポンプ部が放出する流体の流量、及び、第2供給部のポンプ部が放出する流体の流量を維持してもよい。この場合、第3管部内の流体の流れを停止するステップにおいて、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制される。このため、捕捉された細胞が連通孔から意図せずに離脱すること、及び、捕捉された細胞が連通孔に押しつけられて破砕することが防止される。
上記の更に別の態様では、第1液体は、水溶液であってもよい。第2液体は、脂質を溶解した油性溶液であってもよい。液体を供給するステップは、第2管部内の流体の流れを停止するステップの前に、第2流路に水溶液を供給するステップを有してもよい。第1及び第2管部内に流体を流すステップ及び第2流路に水溶液を供給するステップでは、第1流路内の圧力と第2流路内の圧力とが同じになるように、第1供給部のポンプ部及び第2供給部のポンプ部から流体を放出してもよい。第2管部内の流体の流れを停止するステップでは、第1及び第2管部内に流体を流すステップ及び第2流路に水溶液を供給するステップにおける、第1供給部のポンプ部が放出する流体の流量、及び、第2供給部のポンプ部が放出する流体の流量を維持してもよい。この場合、第2管部内の流体の流れを停止する前に、連通孔に単分子の脂質膜を形成することができ、第2管部内の流体の流れを停止するステップにおいて連通孔に脂質二重膜を形成できる。第2管部内の流体の流れを停止するステップでは、第1流路と第2流路との間の圧力差の変化が抑制される。このため、形成された脂質膜が破砕することが防止される。
本発明の一つの態様は、簡易な構成で流路間の圧力差の変化が抑制される液体供給装置を提供できる。本発明の別の態様は、簡易な構成で流路間の圧力差の変化が抑制される微小デバイスシステムを提供できる。本発明の更に別の態様は、簡易な構成で流路間の圧力差の変化が抑制される液体供給方法を提供できる。
本実施形態に係る微小デバイスシステムの概略図である。 微小流体デバイスの部分拡大図である。 微小デバイスシステムの動作を説明するための図である。 微小デバイスシステムの動作を説明するための図である。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を示すフローチャートである。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。 本実施形態の変形例に係る微小デバイスシステムにおける微小流体デバイスへの液体の供給方法を示すフローチャートである。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。 微小流体デバイスへの液体の供給方法を説明するための図である。
以下、添付図面を参照して、本発明の実施形態について詳細に説明する。なお、説明において、同一要素又は同一機能を有する要素には、同一符号を用いることとし、重複する説明は省略する。
まず、図1及び図2を参照して、本実施形態に係る微小デバイスシステムを説明する。図1は、微小デバイスシステムの概略図である。図2は、微小流体デバイスの部分拡大図である。微小デバイスシステム1は、捕捉した細胞の標的物質に対する反応の観察、又は、脂質二重膜の形成などに用いられる。微小デバイスシステム1は、たとえば、マイクロ流体デバイス又はナノ流体デバイスである。
微小デバイスシステム1は、微小流体デバイス2と液体供給装置3とを備える。液体供給装置3は、微小流体デバイス2に所望の液体を供給する。本実施形態では、液体供給装置3は、4種の液体L1,L2,L3,L4を微小流体デバイス2に供給する。たとえば、液体L1は第1液体であり、液体L2は第2液体であり、液体L3は第3液体であり、液体L4は第4液体である。
微小流体デバイス2は、カバーガラス4と、基板5とを有する。基板5は、カバーガラス4上に積層されている。基板5は、一対の主面を有する。図1に示されているように、基板5には、液体供給装置3から供給された液体が流れる溝が設けられている。図1は、基板5の一対の主面に平行な断面を示している。基板5は、一方の主面でカバーガラス4と接している。基板5は、たとえば、シリコンゴムなどの樹脂で形成されている。シリコンゴムの材料としては、たとえば、ジメチルポリシロキサンが挙げられる。基板5の上記溝は、たとえば、フォトリソグラフィなどによって形成される。
基板5に設けられた溝は、一対の流路10,20、流入路11,12,21,22、流出路13,23、及び連通部30を含んでいる。流路10,20は、一端と他端とを有している。流路10,20の一端は、流路の入口を構成する。流路10,20の他端は、流路の出口を構成する。流入路11,12は、流路10の一端に接続されている。流出路13は、流路10の他端に接続されている。流入路21,22は、流路20の一端に接続されている。流出路23は、流路20の他端に接続されている。連通部30は、流路10,20の一端と他端との間の領域で、流路10と流路20とを連通している。
一対の流路10,20は、基板5の主面と平行に、方向D1に互いに沿って延在している。換言すれば、一対の流路10,20は、基板5の主面と平行な平面を通っており、当該平面上で方向D1と直交する方向D2において並んでいる。流路10と流路20とは、流路10と流路20との間に位置している壁で区画されている。本実施形態では、流路10,20は、直線状である。流路10,20は、弧状であってもよい。
本実施形態では、基板5の主面に直交する方向D3から見て、流路10と流路20との壁の幅は、流路10,20の幅よりも小さい。本実施形態では、流路10,20の断面は矩形であり、流路10の断面積と流路20の断面積とは同一である。流路10と流路20との断面形状も同一ある。たとえば、流路10が第1流路である場合、流路20は第2流路である。たとえば、本実施形態では、流入路11は第1流入路であり、流入路12は第2流入路であり、流入路21は第3流入路であり、流入路22は第4流入路である。
方向D2における流路10,20の幅は、たとえば100 μmである。方向D2における流路10,20の幅は、50 μm~2000μmであってもよい。流路10,20の長さは、たとえば7 mmである。方向D3における流路10,20の深さは、たとえば、25 μmである。方向D3における流路10,20の深さは、15μm~30 μmであってもよい。
連通部30は、図2に示されているように、流路10に設けられた窪み31と、流路20に設けられた窪み32と、窪み31と窪み32を連通する連通孔33とを含む。窪み31は、方向D3から見て流路20側に向けて窪んだU字形状を有する。窪み32は、方向D3から見て流路10側に向けて窪んだU字形状を有する。連通孔33は、U字形状の窪み31,32のそれぞれの底面を貫通し、流路10と流路20とを連通する。連通孔33は、方向D2に設けられている。
流入路11,12及び流出路13は、一端と他端とを有している。流入路11の一端は、注入口11aを含んでいる。流入路11の他端は、流路10に接続されている。流入路12の一端は、注入口12aを含んでいる。流入路12の他端は、流路10に接続されている。流出路13の一端は、流出口13aを含んでいる。流出路13の他端は、流路10に接続されている。
流入路11,12及び流出路13は、方向D2において、連通孔33よりも流路20から離れた位置に設けられている。流入路11,12及び流出路13は、直線状である。流入路12は、方向D3から見て、流入路11よりも流路20側で延在している。本実施形態では、流入路11,12及び流出路13は、基板5の主面と平行、かつ、流路10,20の延在方向D1と交差する方向に延在している。流入路11は、流入路12よりも大きい角度で流路10,20の延在方向D1に対して傾斜している。
流入路21,22及び流出路23は、一端と他端とを有している。流入路21の一端は、注入口21aを含んでいる。流入路21の他端は、流路20に接続されている。流入路22の一端は、注入口22aを含んでいる。流入路22の他端は、流路20に接続されている。流出路23の一端は、流出口23aを含んでいる。流出路23の他端は、流路20に接続されている。
流入路21,22及び流出路23は、方向D2において、連通孔33よりも流路10から離れた位置に設けられている。本実施形態では、流入路21,22及び流出路23は、直線状である。流入路21は、方向D3から見て、流入路22よりも流路10側で延在している。本実施形態では、流入路21,22及び流出路23は、基板5の主面と平行、かつ、流路10,20の延在方向D1と交差する方向に延在している。流入路22は、流入路21よりも大きい角度で流路10,20の延在方向D1に対して傾斜している。流入路21は、流路10,20の延在方向D1に延在していてもよい。
液体供給装置3は、流路10に液体を供給する供給部40、及び流路20に液体を供給する供給部70を備える。供給部40は、ポンプ部41、分岐管45、導入部50,55、及び停止部60,65を備える。供給部70は、ポンプ部71、分岐管75、導入部80,85、及び停止部90,95を備える。たとえば、本実施形態では、導入部50は第1導入部であり、導入部55は第2導入部であり、導入部80は第3導入部であり、導入部85は第4導入部である。たとえば、供給部40は第1供給部であり、供給部70は第2供給部である。
ポンプ部41は、流体F1を放出する放出口41aを有する。ポンプ部41は、たとえば、放出口41aから放出する流体F1が収容されているシリンジポンプである。ポンプ部41は、人力で放出口41aから流体F1を放出してもよい。ポンプ部41は、一定流量で放出口41aから流体F1を放出する。流体F1は、たとえば第1流体である。
ポンプ部41が放出口41aから放出する流体F1は、たとえば、非圧縮性流体である。非圧縮性流体としては、たとえば、液体が挙げられる。液体としては、たとえば、緩衝液が挙げられる。この緩衝液は、たとえば、リン酸緩衝生理食塩水(以下、「PBS」という)であってもよい。図1において、供給部40に対して示されている矢印は、流体F1の流量を示している。図1において、供給部70に対して示されている矢印は、流体F2の流量を示している。矢印の幅が広いほど、流量は大きい。なお、「流量」とは、体積流量であり、流体が移動する単位時間あたりの体積を意味する。
分岐管45は、接続部46と複数の管部47,48とを有する。本実施形態では、分岐管45は、2つの管部47,48を有する。接続部46は、放出口41aに接続されている。放出口41aから放出された流体F1は、接続部46から分岐管45の内部に流入する。本実施形態では、シリンジポンプと分岐管45の接続部46とがシリコーンチューブで接続されている。
管部47,48は、接続部46から分岐している。したがって、接続部46から流入した流体F1は、複数の管部47,48の少なくとも一つに流入する。分岐管45が流体F1で満たされた後に、接続部46へ流入する流体F1の流量は、管部47,48から流出する流体F1の流量の合計である。本実施形態では、分岐管45は、接続部46から2つの管部47,48に分岐しているが、3つ以上の管部47,48に分岐してもよい。
導入部50は、液体L1を流路10に導入する。導入部50は、液体L1を流入路11の注入口11aに導入するように配置される。導入部50は、液体L1を収容する構成を有する。本実施形態では、導入部50は、液体L1を内部に収容する収容管51を含む。収容管51の一端は、管部47に接続されている。収容管51の他端は、微小流体デバイス2の注入口11aに配置される。収容管51は、収容する液体L1の体積にしたがって十分な長さを有する。収容管51は、省スペース化のためにループ状に構成されている。本実施形態では、導入部50は、延在方向D1において、流入路11と流路10との接続位置から流路10と連通孔33との接続位置までの流路10の容積を超える体積の液体L1を収容管51に収容している。たとえば、収容管51は第1収容管である。
管部47から流出した流体F1は、収容管51に流入する。この結果、収容管51に収容されている液体L1は、収容管51に流入した流体F1に押し出される。具体的には、収容管51に収容されている液体L1は、収容管51に流体F1が流入した体積に応じて管部47とは反対側に移動する。このため、収容管51から微小流体デバイス2の流路10に供給される液体L1の流量は、管部47から流出する流体F1の流量である。換言すれば、導入部50は、管部47を流れる流体F1の流量に応じた流量で流路10に液体L1を導入する。供給部40の構成は上述した構成に限定されず、収容管51から微小流体デバイス2の流路10に供給される液体L1の流量は、管部47から流出する流体F1の流量と異なってもよい。
導入部55は、液体L2を流路10に導入する。導入部55は、液体L2を流入路12の注入口12aに導入するように配置される。導入部55は、液体L2を収容する構成を有する。本実施形態では、導入部55は、液体L2を内部に収容する収容管56を含む。本実施形態では、収容管56の一端は、管部48に接続されている。収容管56の他端は、微小流体デバイス2の注入口12aに配置される。収容管56は、収容する液体L2の体積にしたがって十分な長さを有する。収容管56は、省スペース化のためにループ状に構成されている。たとえば、収容管56は第2収容管である。
管部48から流出した流体F1は、収容管56に流入する。この結果、収容管56に収容されている液体L2は、収容管56に流入した流体F1に押し出される。具体的には、収容管56に収容されている液体L2は、収容管56に流体F1が流入した体積に応じて管部48とは反対側に移動する。このため、収容管56から微小流体デバイス2の流路10に供給される液体L2の流量は、管部48から流出する流体F1の流量である。換言すれば、導入部55は、管部48を流れる流体F1の流量に応じた流量で流路10に液体L2を導入する。供給部40の構成は上述した構成に限定されず、収容管56から微小流体デバイス2の流路10に供給される液体L2の流量は、管部48から流出する流体F1の流量と異なってもよい。
停止部60は、管部47における流体F1の流れを停止する。停止部65は、管部48における流体F1の流れを停止する。本実施形態では、停止部60,65は、それぞれ流路を開閉するバルブ61,66を含む。バルブ61は、管部47と導入部50とを接続する流路を開閉する。バルブ61は、収容管51の一端と管部47との接続部分に設けられている。バルブ66は、管部48と導入部55とを接続する流路を開閉する。バルブ66は、収容管56の一端と管部48との接続部分に設けられている。バルブ61は、導入部50と微小流体デバイス2とを接続する流路を開閉してもよい。バルブ66は、導入部55と微小流体デバイス2とを接続する流路を開閉してもよい。
バルブ61,66は、たとえば、流体F1、液体L1、又は液体L2が流れる流路に隣接して設けられた、MEMS技術による空気圧バルブであってもよい。この場合、当該空気圧バルブ内の空気圧の増加によって、流体F1、液体L1、又は液体L2が流れる流路が押圧され、当該流路が閉鎖される。
ポンプ部71は、流体F2を放出する放出口71aを有する。ポンプ部71は、たとえば、放出口71aから放出する流体F2が収容されているシリンジポンプである。ポンプ部71は、人力で放出口71aから流体F2を放出してもよい。ポンプ部71は、一定圧で放出口71aから流体F2を放出する。流体F2は、たとえば第2流体である。
ポンプ部71が放出口71aから放出する流体F2は、たとえば、非圧縮性流体である。非圧縮性流体としては、たとえば、液体が挙げられる。液体としては、たとえば、緩衝液が挙げられる。この緩衝液は、たとえば、PBSであってもよい。
分岐管75は、接続部76及び複数の管部77,78とを有する。本実施形態では、分岐管75は、2つの管部77,78を有する。接続部76は、放出口71aに接続されている。放出口71aから放出された流体F2は、接続部76から分岐管75の内部に流入する。本実施形態では、シリンジポンプと分岐管75の接続部76とがシリコーンチューブで接続されている。たとえば、本実施形態では、管部47は第1管部であり、管部48は第2管部であり、管部77は第3管部であり、管部78は第4管部である。
管部77,78は、接続部76から分岐している。したがって、接続部76から流入した流体F2は、管部77,78の少なくとも一つに流入する。分岐管75が流体F2で満たされた後に、接続部76へ流入する流体F2の流量は、管部77,78から流出する流体F2の流量の合計である。本実施形態では、分岐管75は、接続部76から2つの管部77,78に分岐しているが、3つ以上の管部77,78に分岐してもよい。
導入部80は、液体L3を流路20に導入する。導入部80は、液体L3を流入路21の注入口21aに導入するように配置される。導入部80は、液体L3を収容する構成を有する。本実施形態では、導入部80は、液体L3を内部に収容する収容管81を含む。本実施形態では、収容管81の一端は、管部77に接続されている。収容管81の他端は、微小流体デバイス2の注入口21aに配置される。収容管81は、収容する液体L3の体積にしたがって十分な長さを有する。収容管81は、省スペース化のためにループ状に構成されている。たとえば、収容管81は第3収容管である。
管部77から流出した流体F2は、収容管81に流入する。この結果、収容管81に収容されている液体L3は、収容管81に流入した流体F2に押し出される。具体的には、収容管81に収容されている液体L3は、収容管81に流体F2が流入した体積に応じて管部77とは反対側に移動する。このため、収容管81から微小流体デバイス2の流路20に供給される液体L3の流量は、管部77から流出する流体F2の流量である。換言すれば、導入部80は、管部77を流れる流体F2の流量に応じた流量で流路20に液体L3を導入する。供給部70の構成は上述した構成に限定されず、収容管81から微小流体デバイス2の流路20に供給される液体L3の流量は、管部77から流出する流体F2の流量と異なってもよい。
導入部85は、液体L4を流路20に導入する。導入部85は、液体L4を流入路22の注入口22aに導入するように配置される。導入部85は、液体L4を収容する構成を有する。本実施形態では、導入部85は、液体L4を内部に収容する収容管86を含む。本実施形態では、収容管86の一端は、管部78に接続されている。収容管86の他端は、微小流体デバイス2の注入口22aに配置される。収容管86は、収容する液体L4の体積にしたがって十分な長さを有する。収容管86は、省スペース化のためにループ状に構成されている。本実施形態では、導入部85は、収容管86に、延在方向D1において、流入路21と流路20との接続位置から流路20と連通孔33との接続位置までの流路20の容積を超える体積の液体L4を収容している。たとえば、収容管86は第4収容管である。
管部78から流出した流体F2は、収容管86に流入する。この結果、収容管86に収容されている液体L4は、収容管86に流入した流体F2に押し出される。具体的には、収容管86に収容されている液体L4は、収容管86に流体F2が流入した体積に応じて管部78とは反対側に移動する。このため、収容管86から微小流体デバイス2の流路20に供給される液体L4の流量は、管部78から流出する流体F2の流量である。換言すれば、導入部85は、管部78を流れる流体F2の流量に応じた流量で流路20に液体L4を導入する。供給部70の構成は上述した構成に限定されず、収容管86から微小流体デバイス2の流路20に供給される液体L4の流量は、管部78から流出する流体F2の流量と異なってもよい。
停止部90は、管部77における流体F2の流れを停止する。停止部95は、管部78における流体F2の流れを停止する。本実施形態では、停止部90,95は、それぞれ流路を開閉するバルブ91,96を含む。バルブ91は、管部77と導入部80とを接続する流路を開閉する。バルブ91は、収容管81の一端と管部77との接続部分に設けられている。バルブ96は、管部78と導入部85とを接続する流路を開閉する。バルブ96は、収容管86の一端と管部78との接続部分に設けられている。バルブ91は、導入部80と微小流体デバイス2とを接続する流路を開閉してもよい。バルブ96は、導入部85と微小流体デバイス2とを接続する流路を開閉してもよい。
バルブ91,96は、たとえば、流体F2、液体L3、又は液体L4が流れる流路に隣接して設けられた、MEMS技術による空気圧バルブであってもよい。この場合、当該空気圧バルブ内の空気圧の増加によって、流体F2、液体L3、又は液体L4が流れる流路が押圧され、当該流路が閉鎖される。
次に、図1、図3及び図4を参照して、微小デバイスシステム1における液体供給の動作を詳細に説明する。図3及び図4には、微小流体デバイス2の一部と供給部40のみが示されているが、供給部40によって流路10に液体を供給する場合と共に、供給部70によって流路20に液体を供給する場合についても説明する。図3は、供給部40のバルブ61,66の双方が開いている状態を示している。図4は、供給部40のバルブ66が閉じている状態を示している。図3及び図4において、矢印は、流体F1及び液体L1,L2の流量を示している。矢印の幅が広いほど、流量は大きい。図3及び図4において、二点鎖線は、液体L1と液体L2との境目を示している。この境目では、液体L1と液体L2とが混ざり合っている。
図3に示されているように、供給部40のバルブ61,66の双方が開いている状態では、ポンプ部41から分岐管45に導入された流体F1が管部47及び管部48の双方から流出する。この場合、導入部50から流入路11に液体L1が導入され、導入部55から流入路12に液体L2が導入される。流入路11を流れた液体L1と流入路12を流れた液体L2とは、流路10で合流する。合流した液体L1と液体L2は、互いに並列して流路10を延在方向D1に流れる。すなわち、液体L1が流れる層と液体L2が流れる層とが流路10内に形成される。方向D3から見た場合に、流路20側を液体L2が流れる。換言すれば、液体L2の流れは、方向D2において、液体L1の流れより流路20に近い。したがって、連通孔33の流路10側には、液体L2のみが供給される。
供給部70のバルブ91,96の双方が開いている状態では、ポンプ部71から分岐管75に導入された流体F2が管部77及び管部78の双方から流出する。この場合、導入部80から流入路21に液体L3が導入され、導入部85から流入路22に液体L4が導入される。流入路21を流れた液体L3と流入路22を流れた液体L4とは、流路20で合流する。合流した液体L3と液体L4は、液体L1,L2と同様に、互いに並列して流路20を延在方向D1に流れる。すなわち、液体L3が流れる層と液体L4が流れる層とが流路20内に形成される。方向D3から見た場合に、流路10側を液体L3が流れる。換言すれば、液体L3の流れは、方向D2において、液体L4の流れより流路10に近い。したがって、連通孔33の流路20側には、液体L3のみが供給される。
図4に示されているように、バルブ61が開いた状態かつバルブ66が閉じた状態では、ポンプ部41から分岐管45に導入された流体F1が、管部47から流出し、管部48からは流出しない。このため、液体L1は導入部50から流入路11に導入されるが、液体L2は導入部55から流入路12に導入されない。したがって、流入路12における液体L2の流れは停止し、液体L1のみが流路10を延在方向D1に流れる。この際、液体L1は、流路10内に残っていた液体L2を押し流す。この結果、連通孔33の流路10側には、液体L1のみが供給される。
バルブ61が開いた状態かつバルブ66が閉じた状態では、管部48を流れる流体F1の流量の減少に応じて、管部47を流れる流体F1の流量が増加する。本実施形態では、ポンプ部41から新たに分岐管45に導入された流体F1の全てが管部47から流出する。この結果、管部47における流体F1の流量が、バルブ61,66の双方が開いている状態から増加する。このため、導入部50から流入路11に導入される液体L1の流量もバルブ61,66の双方が開いている状態から増加する。したがって、バルブ61,66の双方が開いている状態からバルブ66が閉じた状態に切り替わったとしても、流路10内を流れる液体の流量の変化は抑制され、流路10内の圧力変化が抑制される。
バルブ96が開いた状態かつバルブ91が閉じた状態では、ポンプ部71から分岐管75に導入された流体F2が、管部78から流出し、管部77からは流出しない。このため、液体L4は導入部85から流入路22に導入されるが、液体L3は導入部80から流入路21に導入されない。したがって、流入路21における液体L3の流れは停止し、液体L4のみが流路20を延在方向D1に流れる。この際、液体L4は、流路20内に残っていた液体L3を押し流す。この結果、連通孔33の流路20側には、液体L4のみが供給される。
バルブ96が開いた状態かつバルブ91が閉じた状態では、管部77を流れる流体F2の流量の減少に応じて、管部78を流れる流体F2の流量が増加する。本実施形態では、ポンプ部71から新たに分岐管75に導入された流体F2の全てが管部78から流出するため、管部78における流体F2の流量がバルブ91,96の双方が開いている状態から増加する。このため、導入部85から流入路22に導入される液体L4の流量もバルブ91,96の双方が開いている状態から増加する。したがって、バルブ91,96の双方が開いている状態からバルブ91が閉じた状態に切り替わったとしても、流路20内の圧力変化が抑制される。
次に、本実施形態における微小デバイスシステムの使用方法について説明する。本実施形態では、微小デバイスシステム1を細胞の標的物質に対する反応の観察に用いる場合について説明する。本実施形態では、液体L1,L3は、たとえば、緩衝液である。この緩衝液は、たとえば、HBSバッファー(140mM NaCI,5 mM KCI,2 mM CaCI,1 mM MgCl,10 mM glucose,0.2% BSA(bovine serum albumin)、及び10 mM HEPES (pH7.4))であってもよい。液体L2は、複数の細胞を含む懸濁液(以下、「細胞懸濁液」という)である。液体L4は、細胞に接触させる標的物質を含む試料(以下、単に「試料」という)である。液体L1は、細胞を含んでいない。液体L3は、標的物質を含んでいない。液体L1,L2,L3,L4には、それぞれの流れを確認するために蛍光色素が添加されていてもよい。
本実施形態における微小流体デバイス2の連通孔33の径は、細胞の径よりも小さい。たとえば、連通孔33の径は、細胞の直径の75%よりも小さい。たとえば、連通孔33の径は、1~15μmである。本実施形態では、連通孔33の径は、3 μmである。
本実施形態において使用される細胞は、蛍光指示薬を有する細胞である。
標的物質は、特に限定されず、ATP、ヒスタミン等の刺激物質であってよい。
蛍光指示薬は、標的物質による刺激の結果蛍光を発する物質であれば特に限定されない。蛍光指示薬は、たとえば、蛍光タンパク質又は蛍光色素であってよい。蛍光指示薬は、好ましくは遺伝的にコードされた蛍光タンパク質である。たとえば、標的物質による刺激が細胞内のイオン濃度の変化をもたらす場合、蛍光指示薬は、そのイオンに感受性の蛍光タンパク質又は蛍光色素であってよい。蛍光タンパク質の例は、カルシウム感受性蛍光タンパク質である、GCaMP3タンパク質、GCaMP6sタンパク質、及びGCaMP7タンパク質である。蛍光色素の例は、Fluo 3-AM、Rhod 2-AM、Calbryte(商標) 520、Fluo 4-AM、Fura 2-AM、Indo 1-AM、Calbryte 590、Calbryte 630等のカルシウム感受性蛍光色素である。
細胞は、たとえば、ヒト子宮頸部上皮がん細胞HeLaである。
次に、図5から図9を参照して、本実施形態における微小流体デバイス2への液体供給方法について説明する。図5は、本実施形態における微小流体デバイス2への液体供給方法を示すフローチャートである。図6から図9は、微小流体デバイス2への液体供給方法の各ステップを説明するための図である。図6から図9において、矢印は、液体の流れ方向を示している。図6から図8において、二点鎖線は、異なる液体の境目を示している。この境目では、異なる液体が混ざり合っている。
まず、図5に示されているように、微小流体デバイス2に液体を供給する液体供給装置3を準備する(ステップS11)。具体的には、導入部50は、流入路11の注入口11aに液体L1として緩衝液を導入するように配置される。導入部55は、流入路12の注入口12aに液体L2として細胞懸濁液を導入するように配置される。導入部80は、流入路21の注入口21aに液体L3として緩衝液を導入するように配置される。導入部85は、流入路22の注入口22aに液体L4として試料を導入するように配置される。
続いて、図5に示されているように、ポンプ部41,71によって、各管部47,48,77,78に流体F1,F2を導入する(ステップS12)。具体的には、供給部40のポンプ部41の放出口41aから流体F1が一定の流量で放出され、管部47,48内に流体F1が流される。供給部70のポンプ部71の放出口71aから流体F2が一定の流量で放出され、管部77,78内に流体F2が流される。この際、バルブ61,66,91,96の全てが開いた状態である。この結果、図6に示されているように、液体供給装置3によって、流路10に液体L1,L2が導入され、流路20に液体L3,L4が導入される。流路10には、細胞懸濁液が緩衝液よりも流路20の近くを流れるように、緩衝液と細胞懸濁液が並列して流れる。流路20には、緩衝液が試料よりも流路10の近くを流れるように、緩衝液と試料とが並列して流れる。すなわち、流路10内には緩衝液が流れる層と細胞懸濁液が流れる層とが形成される。流路20内には緩衝液が流れる層と試料が流れる層とが形成される。
本実施形態では、流路10内の圧力が流路20内の圧力よりも高くなるように、供給部40のポンプ部41及び供給部70のポンプ部71から流体F1,F2が放出される。このため、連通孔33において、圧力差が生じる。この圧力差によって、液体L2中の細胞αが、図7に示されているように、流路10側において連通孔33で捕捉される。なお、流路内の「圧力」とは、静圧を意味する。したがって、「圧力差」とは、流路間の静圧の差である。
本実施形態では、流路10を流れる液体L1,L2の流量の合計と流路20を流れる液体L3,L4の流量の合計との違いによって、流路10内の圧力を流路20内の圧力よりも高くする。しかしながら、流路10を流れる流量と流路20の流量との違いでなく、流路10と流路20との形状の違いによって、流路10内の圧力を流路20内の圧力よりも高くしてもよい。ステップS12では、流路10を流れる液体L1,L2の流量の合計は、60μL/hである。流路20を流れる液体L3,L4の流量の合計は、40 μL/hである。
続いて、図5に示されているように、流路10への細胞懸濁液の導入を停止する(ステップS13)。具体的には、バルブ66を閉じ、管部47内に流体F1を流しながら、管部48内の流体F1の流れを停止する。管部77,78内には、流体F2が流れている。この結果、図8に示されているように、流路10には液体L1として緩衝液のみが流れ、連通孔33で捕捉されなかった細胞αが洗い流される。流路20には、ステップS12と同様に、液体L3,L4として緩衝液と試料とが並列して流れる。
ステップS13では、ステップS12における、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量が維持される。バルブ66が閉じ、管部48内の流体F1の流れが停止しているため、ステップS12で管部48内を流れていた流体F1の流量だけ管部47内の流体F1の流量が増加する。この結果、ステップS12で流路10を流れていた細胞懸濁液の流量だけ、流路10を流れる緩衝液の流量が増加する。したがって、ステップS12からステップS13に切り替わったとしても、流路10内の圧力変化が抑制される。
続いて、図5に示されているように、流路20への緩衝液の導入を停止する(ステップS14)。具体的には、バルブ91を閉じ、管部78内に流体F2を流しながら、管部77内の流体F2の流れを停止する。管部47内には、流体F1が流れている。管部48内の流体F1の流れは停止している。この結果、図9に示されているように、流路20には液体L4として試料のみが流れ、流路20の連通孔33側にも標的物質を含む試料が流れ込む。したがって、連通孔33を通して、連通孔33によって捕捉された細胞αに標的物質が接触する。これによって、標的物質に対する細胞αの反応が開始される。
ステップS14では、ステップS12及びステップS13における、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量が維持される。バルブ91が閉じ、管部77内の流体F2の流れが停止しているため、ステップS12及びステップS13で管部77内を流れていた流体F2の流量だけ管部78内の流体F2の流量が増加する。この結果、ステップS12及びステップS13で流路20を流れていた緩衝液の流量だけ、流路20を流れる試料の流量が増加する。したがって、ステップS13からステップS14に切り替わったとしても、流路20内の圧力変化が抑制される。
次に、本実施形態の変形例に係る微小デバイスシステムの使用方法について説明する。本変形例は、微小デバイスシステム1を脂質二重膜の形成に用いる場合について説明する。本変形例における微小デバイスシステムは、概ね、上述した実施形態と類似又は同じである。本変形例の微小デバイスシステムは、微小流体デバイス2の連通孔33の径、及び、液体L1,L2,L3,L4の種別が上述した実施形態と相違する。以下、上述した実施形態と変形例との相違点を主として説明する。
本変形例における微小流体デバイス2の連通孔33の径は、上記実施形態における連通孔33の径よりも大きい。たとえば、本変形例における連通孔33の径の上限は、流路10,20の深さ以下である。すなわち、流路10,20の深さが100μmであれば、連通孔33の径も100 μmであってもよい。本変形例の微小流体デバイス2では、連通孔33の径は、たとえば、1~30 μmで形成できる。本変形例では、連通孔33の径は、10μmである。液体L2,L3は、脂質を溶解した油性溶液(以下、単に「油性溶液」という)である。液体L1,L4は、水溶液である。液体L1,L2,L3,L4には、それぞれの流れを確認するために蛍光色素が添加されていてもよい。
脂質は、脂質二重膜形成成分であり、親水基(親水性原子団)と疎水基(疎水性原子団)とを有する。脂質は、形成する脂質二重膜に応じて適宜選択される。脂質は、たとえば、リン脂質、糖脂質、コレステロール、又はその他の化合物である。リン脂質としては、たとえば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリンなどが挙げられる。糖脂質としては、たとえば、セレブロシド、ガングリオシドなどが挙げられる。
脂質を溶解する油性溶媒は、各種の有機溶媒が適宜選択される。油性有機溶媒としては、たとえば、ヘキサデカン、スクアレンなどが挙げられる。
液体L1,L4の水溶液は、たとえば、緩衝液である。この緩衝液は、たとえばPBSであってもよい。液体L1,L4の水溶液は、脂質二重膜の形成に影響がない各種成分を含む。
次に、図10から図13を参照して、本変形例における微小流体デバイス2への液体供給方法について説明する。図10は、本変形例における微小流体デバイス2への液体供給方法を示すフローチャートである。図11から図13は、微小流体デバイス2への液体供給方法の各ステップを説明するための図である。図11から図13において、矢印は、液体の流れ方向を示している。図11及び図12において、二点鎖線は、異なる液体の境目を示している。この境目では、異なる液体が混ざり合っている。
まず、図10に示されているように、微小流体デバイス2に液体を供給する液体供給装置3を準備する(ステップS21)。具体的には、導入部50は、流入路11の注入口11aに液体L1として水溶液を導入するように配置される。導入部55は、流入路12の注入口12aに液体L2として油性溶液を導入するように配置される。導入部80は、流入路21の注入口21aに液体L3として油性溶液を導入するように配置される。導入部85は、流入路22の注入口22aに液体L4として水溶液を導入するように配置される。
続いて、図10に示されているように、ポンプ部41,71によって、各管部47,48,77,78に流体F1,F2を導入する(ステップS22)。具体的には、供給部40のポンプ部41の放出口41aから流体F1が一定の流量で放出され、管部47,48内に流体F1が流される。供給部70のポンプ部71の放出口71aから流体F2が一定の流量で放出され、管部77,78内に流体F2が流される。この際、バルブ61,66,91,96の全ては開いた状態である。この結果、図11に示されているように、液体供給装置3によって、流路10に液体L1,L2が導入され、流路20に液体L3,L4が導入される。流路10には、油性溶液が水溶液よりも流路20の近くを流れるように、水溶液と油性溶液とが並列して流れる。流路20には、油性溶液が水溶液よりも流路10の近くを流れるように、油性溶液と水溶液とが並列して流れる。すなわち、流路10及び流路20のそれぞれには、水溶液が流れる層と油性溶液が流れる層とが形成される。
本変形例では、流路10内の圧力と流路20内の圧力とが同じになるように、供給部40のポンプ部41及び供給部70のポンプ部71から流体F1,F2が放出される。この「同じ」には、連通孔33に形成される脂質膜が破砕しない程度の圧力差が生じる場合が含まれる。なお、流路内の「圧力」とは、静圧を意味する。したがって、「圧力差」とは、流路間の静圧の差である。
本変形例では、流路10を流れる液体L1,L2の流量の合計と流路20を流れる液体L3,L4の流量の合計とを同一とすることによって、流路10内の圧力と流路20内の圧力とを同じにする。しかし、流路10を流れる流量と流路20の流量とが異なっても、流路10と流路20との形状の違いによって、流路10内の圧力と流路20内の圧力とを同じにしてもよい。ステップS22では、流路10を流れる液体L1,L2の流量の合計は、10μL/hである。流路20を流れる液体L3,L4の流量の合計は、10 μL/hである。
続いて、図10に示されているように、流路10への油脂溶液の導入を停止する(ステップS23)。具体的には、バルブ66を閉じ、管部47内に流体F1を流しながら、管部48内の流体F1の流れを停止する。管部77,78内には、流体F2が流れている。この結果、図12に示されているように、流路10には液体L1として水溶液のみが流れ、流路10内の油性溶液が洗い流される。したがって、連通孔33の流路10側に水溶液が供給され、液体L1の水溶液と液体L3の油性溶液との界面が連通孔33に形成される。当該界面では、親水基を水溶液側に向けて配列した単分子の脂質膜が連通孔33に形成される。流路20には、ステップS22と同様に、液体L3,L4として水溶液と油性溶液が並列して流れる。
ステップS23では、ステップS22における、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量が維持される。バルブ66が閉じ、管部48内の流体F1の流れが停止しているため、ステップS22で管部48内を流れていた流体F1の流量だけ管部47内の流体F1の流量が増加する。この結果、ステップS22で流路10を流れていた油性溶液の流量だけ、流路10を流れる水溶液の流量が増加する。したがって、ステップS22からステップS23に切り替わったとしても、流路10内の圧力変化が抑制される。
続いて、図10に示されているように、流路20への油性溶液の導入を停止する(ステップS24)。具体的には、バルブ91を閉じ、管部78内に流体F2を流しながら、管部77内の流体F2の流れを停止する。管部47内には、流体F1が流れている。管部48内の流体F1の流れは停止している。この結果、図13に示されているように、流路20には液体L4として水溶液のみが流れ、流路20内の油性溶液が洗い流される。この際、連通孔33に形成されていた単分子の脂質膜の疎水基に油性溶液中の脂質βの疎水基が配置され、連通孔33に脂質二重膜が形成される。形成された脂質二重膜は、テール・ツー・テール式に脂質2分子の疎水基同士が向き合うように配向した構造を有する。
ステップS24では、ステップS22における、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量が維持される。バルブ91が閉じ、管部77内の流体F2の流れが停止しているため、ステップS23で管部77内を流れていた流体F2の流量だけ管部78内の流体F2の流量が増加する。この結果、ステップS23で流路20を流れていた油性溶液の流量だけ、流路20を流れる水溶液の流量が増加する。したがって、ステップS23からステップS24に切り替わったとしても、流路20内の圧力変化が抑制される。
以上のように、供給部40において、導入部55は、管部48を流れる流体F1の流量に応じた流量で流路10に液体L2を導入する。このため、管部48内の流体F1の流れを停止することで、流路10への液体L2の導入を停止できる。管部48内の流体F1の流れが停止された状態では、ポンプ部41の放出口41aから放出された流体F1は分岐管45の管部48以外の部分に流れ込む。分岐管45では接続部46から管部47,48が分岐しているため、管部48内の流体F1の流れが停止された状態における管部47内の流体F1の流量は、管部48内の流体F1の流れが停止されていない状態に比べて増加する。上記実施形態及び変形例では、管部48に流れ込まなくなった流量だけ、管部47に流体F1が流れ込む。導入部50は、管部47を流れる流体F1の流量に応じた流量で流路10に液体L1を導入する。このため、管部48内の流体F1の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、流路10を流れる液体L1,L2の合計流量の変化は抑制される。したがって、上記液体供給装置3では、管部48内の流体F1の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、流路10における圧力の変化は抑制される。この結果、液体L1,L2の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制され得る。
供給部70も供給部40と同様の構成を有する。このため、管部77内の流体F2の流れが停止された状態と停止されていない状態との間で遷移する場合でも、流路20における圧力の変化は抑制される。この結果、液体L1,L2,L3,L4の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制される。
導入部50は、管部47に接続されていると共に液体L1を内部に収容する収容管51を含んでいる。導入部55は、管部48に接続されていると共に液体L2を内部に収容する収容管56を含んでいる。このため、管部47を流れる流体F1の流量に応じて、収容管51に収容された液体L1が押し出される。管部48を流れる流体F1の流量に応じて、収容管56に収容された液体L2が押し出される。この結果、より簡易な構成で、流路10と流路20との間における圧力差の変化の抑制が実現され得る。
停止部65は、管部48と導入部55とを接続する流路を開閉するバルブ66を含んでいる。このため、管部48内の流体F1の流れは、バルブ66によって容易に停止され得る。バルブ66が導入部55と管部48との間に設けられていれば、当該バルブ66によって管部48の流体F1の流れが停止される場合に、液体L2の圧縮性及び導入部55内の流路の膨張などによる影響を受けることなく、ポンプ部41からの流体F1が管部47に流れ込む。したがって、流路10における圧力の変化がさらに抑制される。
微小流体デバイス2は、流路10に接続された流入路11,12を有する。流入路11,12は、方向D2において、連通孔33よりも流路20から離れた位置に配置されている。流入路12は、方向D3から見て、流入路11よりも流路20側で延在している。導入部50は、流入路11に液体L1を導入するように配置されている。導入部55は、流入路12に液体L2を導入するように配置されている。この場合、流入路11,12のそれぞれに液体L1,L2を導入することで、液体L1が流れる層と液体L2が流れる層とを流路10内に形成できる。この構成であれば、流入路12に液体L2を導入するか否かによって、連通孔33に供給する液体を制御できる。
微小流体デバイス2は、流路20に接続された流入路21,22を有する。流入路21,22は、方向D2において、連通孔33よりも流路10から離れた位置に配置されている。流入路21は、方向D3から見て、流入路22よりも流路10側で延在している。導入部80は、流入路21に液体L3を導入するように配置されている。導入部85は、流入路22に液体L4を導入するように配置されている。この場合、流入路21,22のそれぞれに液体L3,L4を導入することで、液体L3が流れる層と液体L4が流れる層とを流路20内に形成できる。この構成であれば、液体L3を導入するか否かによって、連通孔33に供給する液体を制御できる。
連通孔33の径は、1~15 μmである。この場合、流路10と流路20との間に圧力差を設けることで、連通孔33で細胞αを捕捉できる。
上述した液体供給方法では、管部47,48内に流体を流すステップにおいて流路10に液体L1,L2が導入される。管部48内の流体F1の流れを停止するステップでは、流路10に液体L1は導入されるが液体L2は導入されない。管部48内の流体F1の流れが停止された状態では、ポンプ部41の放出口41aから放出された流体F1は分岐管45の管部48以外の部分に流れ込む。このため、管部48内の流体F1の流れが停止された状態における管部47内の流体F1の流量は、管部48内の流体F1の流れが停止されていない状態に比べて増加する。したがって、上記液体供給方法では、管部47,48内に流体F1を流すステップと管部48内の流体F1の流れを停止するステップとの間で、流路10における圧力の変化が抑制される。この結果、液体L1,L2の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制され得る。
管部47,48内に流体を流すステップでは、流路10において、液体L2が液体L1よりも流路20の近くを流れるように、液体L1と液体L2とを並列させて流す。この場合、管部47,48内に流体F1を流すステップと管部48内の流体F1の流れを停止するステップとの間で、連通孔33に供給する液体を制御できる。
管部77,78内に流体F2を流すステップにおいて、流路20に液体L3,L4が導入される。管部77内の流体F2の流れを停止するステップでは、流路20に液体L4は導入されるが液体L3は導入されない。管部77内の流体の流れが停止された状態でも、ポンプ部71の放出口71aから放出された流体は分岐管75の管部77以外の部分に流れ込む。このため、管部77内の流体F2の流れが停止された状態における管部78内の流体F2の流量は、管部77内の流体F2の流れが停止されていない状態に比べて増加する。したがって、上記液体供給方法では、管部77,78内に流体F2を流すステップと管部77内の流体F2の流れを停止するステップとの間で、流路20における圧力の変化が抑制される。この結果、液体L1,L2,L3,L4の導入量を電子制御することなく簡易な構成で、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制される。
管部77,78内に流体F2を流すステップでは、流路20において、液体L3が液体L4よりも流路10の近くを流れるように、液体L3と液体L4とを並列させて流す。この場合、管部77,78内に流体F2を流すステップと管部77内の流体F2の流れを停止するステップとの間で、連通孔33に供給する液体を制御できる。
上記実施形態では、液体L2は、複数の細胞αを含む懸濁液である。液体L4は、細胞αに接触させる標的物質を含む試料であってもよい。管部47,48内に流体F1を流すステップ及び管部77,78内に流体F2を流すステップでは、流路10内の圧力が流路20内の圧力よりも高くなるように、供給部40のポンプ部41及び供給部70のポンプ部71から流体F1,F2を放出する。管部48内の流体F1の流れを停止するステップでは、管部47,48内に流体F1を流すステップ及び管部77,78内に流体F2を流すステップにおける、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量を維持する。
この場合、連通孔33の流路10側に細胞αを捕捉できる。管部77内の流体F2の流れを停止するステップにおいて、捕捉された細胞αに標的物質を接触させることができる。管部48内の流体F1の流れを停止するステップでは、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制される。このため、捕捉された細胞αが連通孔33から意図せずに離脱すること、及び、捕捉された細胞αが連通孔33に押しつけられて破砕することが防止される。
管部77内の流体F2の流れを停止するステップでは、管部47,48内に流体F1を流すステップ及び管部77,78内に流体F2を流すステップにおける、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量を維持する。この場合、管部77内の流体F2の流れを停止するステップにおいて、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制される。このため、捕捉された細胞αが連通孔33から意図せずに離脱すること、及び、捕捉された細胞αが連通孔33に押しつけられて破砕することが防止される。
上記変形例では、液体L4は、水溶液である。液体L3は、脂質βを溶解した油性溶液である。液体を供給するステップは、管部77内の流体F2の流れを停止するステップの前に、流路10に水溶液を供給するステップを有する。管部77,78内に流体F2を流すステップ及び流路10に水溶液を供給するステップでは、流路10内の圧力と流路20内の圧力とが同じになるように、供給部40のポンプ部41及び供給部70のポンプ部71から流体F1及び流体F2を放出する。管部77内の流体F2の流れを停止するステップでは、管部77,78内に流体F2を流すステップ及び流路10に水溶液を供給するステップにおける、供給部40のポンプ部41が放出する流体F1の流量、及び、供給部70のポンプ部71が放出する流体F2の流量を維持する。この場合、管部77内の流体F2の流れを停止する前に連通孔33に単分子の脂質膜を形成することができ、管部77内の流体F2の流れを停止するステップにおいて連通孔33に脂質二重膜を形成できる。管部77内の流体F2の流れを停止するステップでは、流路10と流路20との間の圧力差の変化が抑制される。このため、形成された脂質膜が破砕することが防止される。
以上、本発明の実施形態及び変形例について説明してきたが、本発明は必ずしも上述した実施形態及び変形例に限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲で様々な変更が可能である。
たとえば、連通部30の形状は、上述した実施形態及び変形例に記載した形状に限定されない。連通部30は、連通孔33の代わりに、流路10と流路20とを連通するスリットを含んでいてもよい。この場合、実施形態及び変形例で記載した「連通孔33の径」は、「連通部30のスリット幅」と読み替える。
分岐管45,75のそれぞれにおいて、接続部46,76から分岐される管部は2つに限定されない。液体供給装置3は、分岐管45,75が有する管部の数だけ、各管部に接続された導入部を備えてもよいし、各管部に停止部を備えていてもよい。
流路10,20のそれぞれにおいて、流入路11,12,21,22は2つに限定されない。流路10,20のそれぞれに3つ以上の流入路が接続されてもよい。
微小流体デバイス2は、流路10と流路20とを連通する複数個の連通部30を有していてもよい。
液体供給装置3は、流路10,20のいずれか一方のみに液体を供給してもよい。この場合、供給部40,70のいずれか一方のみが用いられてもよい。
放出口41a,71aから放出される流体F1,F2は、気体であってもよい。気体の圧縮性は、液体の圧縮性よりも大きい。このため、放出口41a,71aから放出される流体F1,F2が液体である場合の方が、ポンプ部41,71の操作によって微小流体デバイス2に供給する液体L1,L2,L3,L4の量を、流体F1,F2が気体である場合よりも高い精度で調整できる。上記実施形態及び変形例では、ポンプ部41,71から流路10,20まで気体が入らないように構成されている。
微小流体デバイス2には、ポンプ部41及びポンプ部71から流体F1,F2を放出する前から、各種の液体が配置されていてもよい。たとえば、ポンプ部41及びポンプ部71の動作前から、流入路11及び流路10の一部に液体L1が配置され、流入路12及び流路10の一部に液体L2が配置され、流入路21及び流路20の一部に液体L3が配置され、流入路22及び流路20の一部に液体L4が配置されていてもよい。この場合、流路10内に、液体L1の層と液体L2の層とが予め形成されていてもよい。流路20内に、液体L3の層と液体L4の層とが予め形成されていてもよい。
導入部50,55,80,85が液体L1,L2,L3,L4を収容するのは、収容管51,56,81,86のように分岐管45,75に直接接続された管状の部材に限定されない。たとえば、各管部47,48,77,78から放出された流体F1,F2から加わる圧力によって、各液体L1,L2,L3,L4を放出するシリンジであってもよい。
供給部40は、停止部60を備えていなくてもよい。供給部70は、停止部95を備えていなくてもよい。
停止部60,65,90,95は、それぞれ、収容管51,56,81,86の一端又は両端に設けられていてもよいし、収容管51,56,81,86の流路の途中に設けられていてもよい。
停止部60,65,90,95は、バルブによって流体の流れを停止する構成に限定されない。たとえば、停止部60,65,90,95は、バルブでなく、管部47,48,77,78から微小流体デバイス2までの流路の一部を構成する弾性チューブを含んでいてもよい。停止部60,65,90,95は、弾性チューブがたとえば人の手によって折り曲げられることで、管部47,48,77,78から微小流体デバイス2までの流路の一部を閉鎖する構成でもよい。
1…微小デバイスシステム、2…微小流体デバイス、3…液体供給装置、10,20…流路、11,12,21,22…流入路、33…連通孔、40,70…供給部、41,71…ポンプ部、41a,71a…放出口、45,75…分岐管、46,76…接続部、47,48,77,78…管部、50,55,80,85…導入部、51,56,81,86…収容管、60,65,90,95…停止部、61,66,91,96…バルブ、F1,F2…流体、L1,L2,L3,L4…液体、D1,D2,D3…方向、α…細胞、β…脂質。

Claims (12)

  1. 第1流路と、前記第1流路に沿って延在する第2流路と、前記第1流路と前記第2流路とを連通する連通孔とを有する微小流体デバイスと、
    前記第1流路に液体を供給する第1供給部と、
    前記第2流路に液体を供給する第2供給部と、を備え、
    前記第1供給部は、
    流体を放出する放出口を有するポンプ部と、
    前記第1供給部の前記ポンプ部の前記放出口に接続されている接続部と、前記接続部から分岐した第1及び第2管部とを有する分岐管と、
    前記第1管部に接続されていると共に第1液体を内部に収容する第1収容管を含んでおり、前記第1管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第1流路に前記第1液体を導入する第1導入部と、
    前記第2管部に接続されていると共に第2液体を内部に収容する第2収容管を含んでおり、前記第2管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第1流路に前記第2液体を導入する第2導入部と、
    前記第2管部における前記流体の流れを停止する停止部と、を有する、微小デバイスシステム。
  2. 前記微小流体デバイスは、前記第1流路に接続された第1及び第2流入路を有し、
    前記第1及び第2流入路は、前記第1流路及び前記第2流路を通る平面上で前記第2流路の延在方向と直交する方向において、前記連通孔よりも前記第2流路から離れた位置に配置されており、
    前記第2流入路は、前記平面に直交する方向から見て、前記第1流入路よりも前記第2流路側で延在しており、
    前記第1導入部は、前記第1流入路に前記第1液体を導入するように配置され、
    前記第2導入部は、前記第2流入路に前記第2液体を導入するように配置されている、請求項に記載の微小デバイスシステム。
  3. 前記第2供給部は、
    流体を放出する放出口を有するポンプ部と、
    前記第2供給部の前記ポンプ部の前記放出口に接続されている接続部と、前記接続部から分岐した第3管部及び第4管部とを有する分岐管と、
    前記第3管部に接続されていると共に第3液体を内部に収容する第3収容管を含んでおり、前記第3管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第2流路に前記第3液体を導入する第3導入部と、
    前記第4管部に接続されていると共に第4液体を内部に収容する第4収容管を含んでおり、前記第4管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第2流路に前記第4液体を導入する第4導入部と、
    前記第3管部における前記流体の流れを停止する停止部と、を有する、請求項又はに記載の微小デバイスシステム。
  4. 前記微小流体デバイスは、前記第2流路に接続された第3及び第4流入路を有し、
    前記第3及び前記第4流入路は、前記第1流路及び前記第2流路を通る平面上で前記第2流路の延在方向と直交する方向において、前記連通孔よりも前記第1流路から離れた位置に配置されており、
    前記第3流入路は、前記平面に直交する方向から見て、前記第4流入路よりも前記第1流路側で延在しており、
    前記第3導入部は、前記第3流入路に前記第3液体を導入するように配置され、
    前記第4導入部は、前記第4流入路に前記第4液体を導入するように配置されている、請求項に記載の微小デバイスシステム。
  5. 前記連通孔の径は、1~15 μmである、請求項又はに記載の微小デバイスシステム。
  6. 第1流路と、前記第1流路に沿って延在する第2流路と、前記第1流路と前記第2流路とを連通する連通孔とを有する微小流体デバイスに液体を供給する液体供給方法であって、
    前記微小流体デバイスに液体を供給する液体供給装置を準備するステップと、
    前記液体供給装置によって前記第1流路及び前記第2流路に液体を導入するステップと、を有し、
    前記液体供給装置は、前記第1流路に液体を供給する第1供給部と、前記第2流路に液体を供給する第2供給部と、を有し、
    前記第1供給部は、流体を放出する放出口を有するポンプ部と、前記放出口に接続されている接続部と前記接続部から分岐した第1管部及び第2管部とを有する分岐管と、前記第1管部に接続されており前記第1管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第1流路に第1液体を導入する第1導入部と、前記第2管部に接続されており前記第2管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第1流路に第2液体を導入する第2導入部と、を有し、
    前記第1導入部は、前記第1管部に接続されていると共に前記第1液体を内部に収容する第1収容管を含み、
    前記第2導入部は、前記第2管部に接続されていると共に前記第2液体を内部に収容する第2収容管を含み、
    前記液体を供給するステップは、
    前記第供給部の前記ポンプ部の前記放出口から前記流体を放出し、前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップと、
    前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップの後に、前記第1管部内に前記流体を流しながら前記第2管部内の前記流体の流れを停止するステップと、を有する、液体供給方法。
  7. 前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップでは、前記第1流路において、前記第2液体が前記第液体よりも前記第2流路の近くを流れるように、前記第1液体と前記第2液体とを並列させて流す、請求項に記載の液体供給方法。
  8. 前記第2供給部は、流体を放出する放出口を有するポンプ部と、前記放出口に接続されている接続部と前記接続部から分岐した第3管部及び第4管部とを有する分岐管と、前記第3管部に接続されており前記第3管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第2流路に第3液体を導入する第3導入部と、前記第4管部に接続されており前記第4管部を流れる前記流体の流量に応じた流量で前記第2流路に第4液体を導入する第4導入部と、を有し、
    前記第3導入部は、前記第3管部に接続されていると共に前記第3液体を内部に収容する第3収容管を含み、
    前記第4導入部は、前記第4管部に接続されていると共に前記第4液体を内部に収容する第4収容管を含み、
    前記液体を供給するステップは、
    前記第2管部内の前記流体の流れを停止するステップの前に、前記第2供給部の前記ポンプ部の前記放出口から前記流体を放出し、前記第3及び第4管部内に前記流体を流すステップと、
    前記第2管部内の前記流体の流れを停止するステップの後に、前記第4管部内に前記流体を流しながら前記第3管部内の前記流体の流れを停止するステップと、を有する、請求項又はに記載の液体供給方法。
  9. 前記第3及び第4管部内に前記流体を流すステップでは、前記第2流路において、前記第4液体が前記第3液体よりも前記第1流路の近くを流れるように、前記第3液体と前記第4液体とを並列させて流す、請求項に記載の液体供給方法。
  10. 前記第2液体は、複数の細胞を含む懸濁液であり、
    前記第4液体は、細胞に接触させる標的物質を含む試料であり、
    前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップ及び前記第3及び第4管部内に前記流体を流すステップでは、前記第1流路内の圧力が前記第2流路内の圧力よりも高くなるように、前記第1供給部の前記ポンプ部及び前記第2供給部の前記ポンプ部から前記流体を放出し、
    前記第2管部内の前記流体の流れを停止するステップでは、前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップ及び前記第3及び第4管部内に前記流体を流すステップにおける、前記第1供給部の前記ポンプ部が放出する前記流体の流量、及び、前記第2供給部の前記ポンプ部が放出する前記流体の流量を維持する、請求項又はに記載の液体供給方法。
  11. 前記第3管部内の前記流体の流れを停止するステップでは、前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップ及び前記第3及び第4管部内に前記流体を流すステップにおける、前記第1供給部の前記ポンプ部が放出する前記流体の流量、及び、前記第2供給部の前記ポンプ部が放出する前記流体の流量を維持する、請求項1に記載の液体供給方法。
  12. 前記第1液体は、水溶液であり、
    前記第2液体は、脂質を溶解した油性溶液であり、
    前記液体を供給するステップは、前記第2管部内の前記流体の流れを停止するステップの前に、前記第2流路に水溶液を供給するステップを有し、
    前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップ及び前記第2流路に水溶液を供給するステップでは、前記第1流路内の圧力と前記第2流路内の圧力とが同じになるように、前記第1供給部の前記ポンプ部及び前記第2供給部の前記ポンプ部から前記流体を放出し、
    前記第2管部内の前記流体の流れを停止するステップでは、前記第1及び第2管部内に前記流体を流すステップ及び前記第2流路に水溶液を供給するステップにおける、前記第1供給部の前記ポンプ部が放出する前記流体の流量、及び、前記第2供給部の前記ポンプ部が放出する前記流体の流量を維持する、請求項又はに記載の液体供給方法。
JP2019036380A 2019-02-28 2019-02-28 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法 Active JP7264667B2 (ja)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019036380A JP7264667B2 (ja) 2019-02-28 2019-02-28 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法
US17/310,814 US20220120271A1 (en) 2019-02-28 2020-02-19 Liquid supply device, microdevice system, and liquid supply method
PCT/JP2020/006615 WO2020175289A1 (ja) 2019-02-28 2020-02-19 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法
DE112020000979.3T DE112020000979T5 (de) 2019-02-28 2020-02-19 Flüssigkeitszuführvorrichtung, Mikrovorrichtungssystem und Flüssigkeitszufuhrverfahren
CN202080017006.3A CN113518924A (zh) 2019-02-28 2020-02-19 液体供给装置、微小装置系统、及液体供给方法
TW109106197A TWI837312B (zh) 2019-02-28 2020-02-26 液體供給裝置、微小裝置系統、及液體供給方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019036380A JP7264667B2 (ja) 2019-02-28 2019-02-28 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2020137475A JP2020137475A (ja) 2020-09-03
JP7264667B2 true JP7264667B2 (ja) 2023-04-25

Family

ID=72238837

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2019036380A Active JP7264667B2 (ja) 2019-02-28 2019-02-28 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20220120271A1 (ja)
JP (1) JP7264667B2 (ja)
CN (1) CN113518924A (ja)
DE (1) DE112020000979T5 (ja)
WO (1) WO2020175289A1 (ja)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4293100A1 (en) * 2021-02-12 2023-12-20 Enplas Corporation Organ-on-chip and biological function reproduction method

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003279569A (ja) 2002-03-26 2003-10-02 Mitsubishi Heavy Ind Ltd 液体サンプル調製装置
JP2008136475A (ja) 2006-11-10 2008-06-19 Univ Waseda 細胞捕捉装置及びそれを利用した細胞操作方法
JP2010104918A (ja) 2008-10-30 2010-05-13 Olympus Corp 分離装置
JP2012185073A (ja) 2011-03-07 2012-09-27 Hamamatsu Photonics Kk 試料観測装置及び試料観測方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3769622B2 (ja) * 2003-09-22 2006-04-26 国立大学法人 東京大学 人工脂質膜の形成方法とそのための脂質平面膜形成装置
JP4973305B2 (ja) * 2006-05-11 2012-07-11 東ソー株式会社 細胞融合装置及びそれを用いた細胞融合方法
JP2014030382A (ja) * 2012-08-03 2014-02-20 Univ Of Tokyo マイクロ流体デバイス及び脂質二重膜の形成方法
JP2014038066A (ja) * 2012-08-20 2014-02-27 Univ Of Tokyo マイクロ液体デバイスシステム及び脂質二重膜の形成方法
JP2015002684A (ja) * 2013-06-19 2015-01-08 国立大学法人 東京大学 マイクロ液体デバイスシステム、脂質二重膜形成デバイス、及びマイクロ液体デバイスシステムの制御方法
WO2015046263A1 (ja) * 2013-09-25 2015-04-02 国立大学法人東京大学 溶液混合器、流体デバイス及び溶液の混合方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003279569A (ja) 2002-03-26 2003-10-02 Mitsubishi Heavy Ind Ltd 液体サンプル調製装置
JP2008136475A (ja) 2006-11-10 2008-06-19 Univ Waseda 細胞捕捉装置及びそれを利用した細胞操作方法
JP2010104918A (ja) 2008-10-30 2010-05-13 Olympus Corp 分離装置
JP2012185073A (ja) 2011-03-07 2012-09-27 Hamamatsu Photonics Kk 試料観測装置及び試料観測方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113518924A (zh) 2021-10-19
JP2020137475A (ja) 2020-09-03
WO2020175289A1 (ja) 2020-09-03
TW202039092A (zh) 2020-11-01
US20220120271A1 (en) 2022-04-21
DE112020000979T5 (de) 2021-12-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8133456B2 (en) Microreactor and method of liquid feeding making use of the same
US7384605B2 (en) Fluidics system
KR20120063162A (ko) 유전자 분석 장치 및 이를 이용한 유전자 분석 방법
Lu et al. Membrane mechanical properties of synthetic asymmetric phospholipid vesicles
Lu et al. Continuous microfluidic fabrication of synthetic asymmetric vesicles
US20020079008A1 (en) Microfluidic methods, devices and systems for in situ material concentration
WO2007030501A2 (en) Microfluidic manipulation of fluids and reactions
WO2006112498A1 (ja) 検体を分析するための検査チップおよびマイクロ分析システム
JP7264667B2 (ja) 液体供給装置、微小デバイスシステム、及び液体供給方法
US20110084014A1 (en) Droplet-based digital microdialysis
JP6817968B2 (ja) 表面機能化および検出デバイス
TWI837312B (zh) 液體供給裝置、微小裝置系統、及液體供給方法
AU2018322819A1 (en) An arrangement for mixing fluids in a capillary driven fluidic system
JP2014030382A (ja) マイクロ流体デバイス及び脂質二重膜の形成方法
US20120186977A1 (en) Devices and methods for electroosmotic transport of non-polar solvents
JP4054798B2 (ja) 流体搬送方法
US20220257844A1 (en) Red blood cells for drug delivery
KR101906969B1 (ko) 유전자 분석장치 및 이를 이용한 유전자 분석방법
JP2023094639A (ja) マイクロ流体デバイス及び脂質二重膜を形成するための方法
CA2547771A1 (en) Microfluidic methods, devices and systems for in situ material concentration
JP2015002684A (ja) マイクロ液体デバイスシステム、脂質二重膜形成デバイス、及びマイクロ液体デバイスシステムの制御方法
US11717830B2 (en) Open microfluidic system and various functional arrangements therefore
WO2023021951A1 (ja) アッセイ装置
JP2012205536A (ja) マイクロ流体デバイス、および脂質二重膜の形成方法
JP7111110B2 (ja) 流体デバイス

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20211021

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20221018

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20221214

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20230404

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20230413

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7264667

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150