JP7242651B2 - 構造化された水相とセリシンとを含む組成物 - Google Patents
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Description
・繭を約5x5mmの小片に切る;
・繭を約25℃の脱塩水(脱イオン水)による第1の洗浄処理に供する;
・繭を約70℃の脱イオン水による第2の洗浄処理に供する;
・繭を約25℃でエタノールによる第2の洗浄処理に供する;
・30℃未満の温度で蒸発させることにより、洗浄した繭からエタノールを除去する;
・乾燥洗浄した繭の重量の1重量部を約20重量部の熱湯(約95℃)と組み合わせて、水性懸濁液を形成する;
・水性懸濁液を約120℃の温度で約5分~約20分間維持する;
・加熱した懸濁液を4000Gで20分間遠心分離した後、デカントしてセリシンタンパク質抽出物を回収する。
・二次構造においてベータシートの割合が80%超であるセリシンを含む水性成分を提供すること;および
・100重量部の水性成分を、少なくとも5重量部の1以上の成分と混合すること。
本明細書で使用される場合、「含む(comprising)」の語は、「から本質的になる(consisting essentially of)」および「からなる(consisting of)」の語を包含する。「含む(comprising)」の語が使用されている場合、列挙された工程または選択肢は包括的である必要はない。
・応力τは、製品のLineair粘弾性範囲で選択される(LVERは振幅スイープによって決定される)。応力は1Paで一定に保たれる。
・角周波数ωの増加するランプログは、6.28rad/sから始まり、低周波数から高周波数までサンプルに設定される。終了ωは、628.32rad/sである。
・測定点を集める設定は「時間設定なし」である。この手法では、装置は定常状態の状態を待ってから、測定点をとる。
・10進ごとに(every decade)10個の測定ポイントが取得される。
・二次構造におけるベータシートの割合が80%を超えるセリシンを含む水性成分を提供すること、および
・100重量部の水性成分を、少なくとも5重量部、好ましくは少なくとも10重量部、より好ましくは少なくとも20重量部の1以上の他の成分と混合すること。
実施例1:セリシン抽出
セリシンは、カイコガ(Bombyx mori)の繭から次の手順で抽出した:
i)繭を超純水および脱気した水に周囲温度で15分間浸し、5分ごとに内容物を振とうした。繭は、鉗子を使用して水から分離した。
ii)事前に洗浄した小片を、脱気した超純水に70℃で30分間(5分ごとに振とうしながら)再度浸した。繭は鉗子を使用して水から分離した。
iii)室温で繭をエタノールに15分間浸した(3分ごとに振とう)。繭は、鉗子を使用してエタノールから分離した。
・サンプル2を、30分の抽出時間を使用して、同じ条件下で抽出した。
・サンプル3も、同じ条件で、90分の抽出時間を使用して抽出した。
実施例1のサンプル1~3におけるセリシンタンパク質の二次構造は、円二色性(CD)測定を使用して分析した。タンパク質の二次構造の標準CDスペクトルを195~240nmの波長スキャンを使用して記録し(図1参照)、次にオンライン分析ソフトウェア「K2D3」を使用してデータをフィッティングした(図2a=サンプル1、図2b=サンプル2、および図2c=サンプル3を参照)。折り畳まれたタンパク質は、αヘリックス;βシート;ループ(二次構造ドメインを相互接続するリンカー残基)の二次構造で構成される。ソフトウェア「K2D3」は、スキャン波長として200~240nmを取る。円偏光二色性からの平均残基楕円率値は、二次構造(αヘリックスおよびβシート)に寄与するアミノ酸のパーセントを指し、リンカー領域の残基は含まれない。すべての二次構造の最大合計(46%)は、セリシンタンパク質の計算モデルから取得された。セリシンのベータシート構造は、K2D3ソフトウェアの結果を使用して推定された。
実施例1のセリシン抽出物のレオロジー特性は、これらの抽出物の(25℃における)貯蔵弾性率および損失弾性率を測定することにより決定された。結果を表2に示す。
Zn2+を含有するハイドロゲルは、実施例1のサンプル1を使用し、そして異なる量のZnCl2を添加することによって調製した。
セリシンハイドロゲルの貯蔵弾性率に対するpHの影響を、実施例1のサンプル1を使用して決定した。セリシンの0.9%水溶液のpHは、HCl(モル濃度0.1)またはNaOH(モル濃度0.1)を使用して調整され、異なるpHの溶液が提供された。
Claims (13)
- 構造化された水相5~100重量%を含む組成物であって、
当該組成物が、水の重量に対してセリシン0.1~10重量%を含み、
前記セリシンが、二次構造中のベータシートの割合が90%を超え、
前記構造化された水相のpHが、2.0~4.0、または、5.5~10.5の範囲である、組成物。 - セリシンが2kDa~400kDaの範囲の分子量を有する、請求項1に記載の組成物。
- 水の重量に対しセリシン0.2~4重量%を含む、請求項1または2に記載の組成物。
- 1つ以上の非水性相1~80重量%、および、構造化された水相20~99重量%を含む、請求項1~3のいずれか一項に記載の組成物。
- 少なくとも0.08mmolの多価金属カチオンを含み、
前記多価金属カチオンが、Zn2+、Cu2+、Ca2+およびそれらの組み合わせから選択される、請求項1~4のいずれか一項に記載の組成物。 - 前記構造化された水相がセリシンハイドロゲルを含む、請求項1~5のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記構造化された水相が連続水相である、請求項1~6のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記構造化された水相が水を少なくとも50重量%含む、請求項1~7のいずれか一項に記載の組成物。
- 水の重量に対してセリシンを少なくとも0.4重量%含み、
前記セリシンの分子量が少なくとも10kDaであり、二次構造中のベータシートの割合が90%超である、請求項1~8のいずれか一項に記載の組成物。 - ローション、クリーム、軟膏および膏薬から選択されるがこれらに限定されない化粧製品である、請求項1~9のいずれか1項に記載の組成物。
- ・90%超の割合のベータシートを二次構造中に有するセリシンを含む水性成分を提供する工程と、
・100重量部の水性成分を少なくとも5重量部の1つ以上の他の成分と混合する工程と
を含む、請求項1~10のいずれか一項に記載の組成物の調製方法。 - 前記1つ以上の他の成分が、充填剤、染料、pH調整剤、溶媒、ポリマーおよび増粘剤からなる群から選択される、請求項11に記載の方法。
- Zn2+、Cu2+、Ca2+およびそれらの組み合わせから選択される多価金属カチオンの水溶性塩の添加を含む、請求項11または12に記載の方法。
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