JP7214866B2 - 優れた殺虫効果および胞子生成能を有する新規ビューベリアバシアナknu-101菌株およびその用途 - Google Patents

優れた殺虫効果および胞子生成能を有する新規ビューベリアバシアナknu-101菌株およびその用途 Download PDF

Info

Publication number
JP7214866B2
JP7214866B2 JP2021527814A JP2021527814A JP7214866B2 JP 7214866 B2 JP7214866 B2 JP 7214866B2 JP 2021527814 A JP2021527814 A JP 2021527814A JP 2021527814 A JP2021527814 A JP 2021527814A JP 7214866 B2 JP7214866 B2 JP 7214866B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
strain
knu
beauveria bassiana
culture
insecticidal
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2021527814A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2022513086A (ja
Inventor
ジェ・ホ・シン
チャン・オン・パク
ヨン・ギュン・ジュン
スン・デ・チェ
ヨン・ジュン・パク
ヒュン・ウ・ジョ
ミン・ジ・キム
ミン・キュ・パク
ミン・チュル・キム
Original Assignee
キュン プク ナショナル ユニバーシティ インダストリ-アカデミック コーポレーション ファンデーション
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020190145696A external-priority patent/KR102251508B1/ko
Application filed by キュン プク ナショナル ユニバーシティ インダストリ-アカデミック コーポレーション ファンデーション filed Critical キュン プク ナショナル ユニバーシティ インダストリ-アカデミック コーポレーション ファンデーション
Publication of JP2022513086A publication Critical patent/JP2022513086A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7214866B2 publication Critical patent/JP7214866B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145Fungi isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01PBIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P7/00Arthropodicides
    • A01P7/04Insecticides
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645Fungi ; Processes using fungi
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

KCTC KCTC 13660BP
本発明は、優れた殺虫効果および胞子生成能を有する新規ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の大量生産方法、前記菌株を用いた殺虫用微生物製剤、および前記微生物製剤を用いた殺虫方法などに関する。
本発明は、韓国農村進興庁の課題番号1395058780、「高麗人参耕作地の微生物群集の分析と能動的再耕技術の開発による連作被害の低減」による韓国政府の支援を受けて行われた。
また、本発明は、韓国農村進興庁の課題番号1545018506、「濃食品有用細菌の参照遺伝体の解読および比較遺伝体の分析による細菌遺伝体情報の高度化および資源化」による韓国政府の支援を受けて行われた。
昆虫は現在地球上の知られた生物の中で最も多い種を占めており、環境への適応力に優れていることが知られている。このような昆虫の一部は商業的に重要な多様な農耕作物に多くの損失をきたしているため、このような害虫を防除するために、以前から化学殺虫剤が多く使用されてきている。しかし、化学殺虫剤は、殺虫能力の非特異的なスペクトルによって、役に立つ益虫および害虫に寄生する寄生虫のような非目的微生物も撲滅し、化学殺虫剤の頻繁な使用により化学殺虫剤に繰り返し露出した目的害虫の耐性獲得を促進し、同時に化学殺虫剤成分は人体に有害であるという欠点があった。
化学殺虫剤の使用を低減すべく、環境にやさしい害虫防除剤として昆虫病原性真菌(entomopathogenic fungi)を用いる方法が使用されている。このような昆虫病原性真菌は、植物を含む人畜には全く無害でありながらも寄主昆虫にのみ特異的な殺虫力を有しているため、対象害虫を効果的に防除できるという利点がある。
一方、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)は、代表的な昆虫病原性真菌として知られており、胞子が昆虫のワックス層を分解しながら昆虫を脱水させて死滅に至らせ、それらの死体を滋養分にして次の世代を引き継いでいくことが知られている。このような理由から、昆虫に対する経口および接触毒性がすべて有効であり、多様な昆虫の宿主に感染可能であることが知られている。このような害虫防除用真菌の胞子の大量培養には、主に分生胞子を生産する固体培養が使用されている。
ただし、細菌とは異なり、カビは最小7日以上の長期的培養期間にもかかわらず胞子の生産量が十分でなくて害虫防除用真菌の製品化が遅れているのが現状であり、現在まで報告されたビューベリアバシアナ菌株も胞子生能が商業的に利用するには低い水準であると知られている。したがって、産業化のためには優れた殺虫力を示すと同時に、大量の胞子を生産できる2つの要件を兼ね備える真菌を選び出すことが優先的な課題となる。
一方、アザミウマ(Thrips)は代表的な土壌害虫であって、幼い葉や茎、花弁などの柔らかい組織に卵を産み、気温の上昇とともに出現し始めて、茎と葉の表面に害を与え、開花期にはつぼみを加害して作物の品質を深刻に低下させる。被害作物は葉がまっすぐに広がらず奇形に変形したり、葉脈が収縮する病変を示す。アザミウマは、キュウリ、レタス、トマト、ナス、チコリなど、寄主範囲が広く、温度条件によって世代期間が最短12日から最長26日程度と非常に短く、繁殖力が強いため、防除に困難を覚えている。
上記のような、害虫駆除のために多様な物質に関する研究が進められているが、今のところ、化学殺虫剤に比べてバイオ殺虫剤に関する研究は不十分であるのが現状である。
上記の本発明の目的を達成するために、本発明の一態様は、殺虫効果を有するビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記菌株は、配列番号1で表されるITS(Internal Transcribed Spacer Region)塩基配列を含むことができる。
本発明の他の態様は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を培養する段階を含む菌株の大量生産方法を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記培養は、28℃~30℃で行われる。
本発明のさらに他の態様は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の培養物、前記培養物の濃縮物、および前記培養物の乾燥物からなる群より選択される1つ以上を有効成分として含む殺虫用微生物製剤を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記微生物製剤は、アザミウマに対して殺虫活性を有するものであってもよい。
本発明のさらに他の態様は、前記微生物製剤を土壌または植物に処理する段階を含む殺虫方法を提供する。
本発明の一態様は、殺虫効果を有するビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記菌株は、配列番号1で表されるITS(Internal Transcribed Spacer Region)塩基配列を含むことができる。
本発明の他の態様は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を培養する段階を含む菌株の大量生産方法を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記培養は、28℃~30℃で行われる。
本発明のさらに他の態様は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の培養物、前記培養物の濃縮物、および前記培養物の乾燥物からなる群より選択される1つ以上を有効成分として含む殺虫用微生物製剤を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記微生物製剤は、アザミウマに対して殺虫活性を有するものであってもよい。
本発明のさらに他の態様は、前記微生物製剤を土壌または植物に処理する段階を含む殺虫方法を提供する。
本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株は、昆虫病原性を有し、農作物に害を及ぼす土壌害虫であるアザミウマの防除に卓越した殺虫効果を示し、胞子生産力にも優れているので、環境にやさしい害虫防除手段として有用に活用できる。
本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株を純粋分離後に形態学的な特徴(A)および顕微鏡で観察した写真(B)を示す図である。 本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株に対するInternal transcribed spacer(ITS)領域を暗号化している遺伝子を用いて系統分類学的模式図を示す図である。 本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株によって死滅したアザミウマを示す図であり、矢印はビューベリアバシアナKNU-101菌株によって死滅したアザミウマを示す。 本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株のアザミウマに対する昆虫病原性を他の菌株と比較したグラフである。 本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101真菌の培養7日後の胞子生産量を示すグラフである。 本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101真菌のトウガラシを用いた圃場実験におけるアザミウマに対する防除価を示すグラフである。
本発明者らは、商業的に重要で多様な農耕作物に害を及ぼす害虫防除のための昆虫病原性微生物を探索している間、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株のアザミウマの致死効果および優れた胞子生成能を確認して、前記菌株を含む害虫防除用微生物製剤を製造することにより、本発明を完成した。
本発明の一実施例では、ビューベリアバシアナKNU-101菌株を土壌害虫のアザミウマに処理した結果、100%の致死率を示し、アザミウマに対する昆虫病原性に優れていることを確認した(実施例2参照)。
本発明の他の実施例では、ビューベリアバシアナKNU-101が他の害虫病原性真菌に比べて最小100倍から最大10,000倍まで胞子生産能力に優れていることを確認した(実施例3参照)。
本発明の一実施例では、ビューベリアバシアナKNU-101が他の害虫病原性真菌に比べて防除価が約30%程度さらに優れていることを確認した(実施例4参照)。
以下、本発明を詳しく説明する。
本発明の一態様は、殺虫効果を有するビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を提供する。
本発明の一具体例によれば、前記菌株は、配列番号1で表されるITS(Internal Transcribed Spacer Region)塩基配列を含むことができる。
本発明では、昆虫病原性真菌(Entomopathogenic fungi)に感染して死滅したアザミウマ、アザミウマが生息する作物および土壌からアザミウマに対する殺虫効果を有する菌株を選び出し、昆虫病原性真菌に感染して死んだ昆虫、および周辺の土壌を採集してアザミウマに対する殺虫効果を有する菌株を分離して、アザミウマにおいて優れた殺虫効果を示す菌株を選別し(図1参照)、前記菌株を「ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101」と同定し(図2参照)、これを2018年10月16日付で韓国生命工学研究院微生物資源センター(KCTC)に寄託した(受託番号:KCTC 13660BP)。
本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株は、30℃およびpH7.0で最適な生育条件を有することができ、好気性菌として、凍結乾燥して保存することができ、0.02%ポリソルベート80を含有した40%グリセロール水溶液と前記真菌培養液とを1対1で混合した後、-80℃で冷凍するなどの通常の方法で保管することができる。
本発明の他の態様は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を培養する段階を含む菌株の大量生産方法を提供する。
本発明のビューベリアバシアナKNU-101菌株を経済的な方法で大量生産するための水と麦粕などを混合した基本的な培地は、グリセリン、ブドウ糖、酵母抽出物、リン酸塩などから構成された群より選択される1つまたは2つ以上を追加的に添加することができるが、これに限定されるものではない。固体培地で培養する場合、真菌の生育に最も大きな影響を与えるものは、通気性と温度、水分含有量で、温度が30℃の時、酸素との接触が円滑であるほど、生産された生菌数の量が改善され、菌体の生産量も向上する。前記培地に添加された酵母抽出物は、微量元素、窒素源の提供および活性化された菌株の殺虫力を維持するために使用し、グリセリンは培地の物性および水分含有度を改善するための補助剤として使用され、リン酸塩はpH緩衝剤として使用される。
本発明の一具体例によれば、前記培養は、28℃~30℃で行われる。
本発明のさらに他の態様は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の培養物、前記培養物の濃縮物、および前記培養物の乾燥物からなる群より選択される1つ以上を有効成分として含む殺虫用微生物製剤を提供する。
前記微生物製剤は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の培養物、前記培養物の濃縮物、または前記培養物の乾燥物に、界面活性剤、増量剤、営養剤などの付加剤を添加して製造することができる。この時、界面活性剤としては、ポリカルボキシレート、ソジウムリグノスルホネート、カルシウムリグノスルホネート、ソジウムジアルキルスルホスクシネート、ソジウムアルキルアリールスルホネート、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ソジウムトリポリホスフェート、ポリオキシエチレンアルキルアリールホスホリックエステル、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリールポリマー、ポリオキシアルキルオンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル、ソジウムスルホネートナフタレンホルムアルデヒド、トリトン100、およびトゥイーン80からなる群より選択される1つ以上を使用し、増量剤および営養剤としては、豆粉、米、小麦、黄土、珪藻土、デキストリン、ブドウ糖、およびデンプンからなる群より選択される1つ以上を使用し、崩壊剤としては、ベントナイト(bentonite)、タルク(talc)、ダイアライト(dialite)、カオリン(kaolin)、およびカルシウムカーボネート(calcium carbonate)からなる群より選択される1つ以上を使用することができる。
前記殺虫用微生物製剤は、前記菌株の安定的な製剤化を目的として、粒剤、水和剤、またはカプセル化剤形の形態に製造できるが、これに限定されるものではなく、前記粒剤の場合、表面活性剤、不活性担体、保存剤、湿潤剤、供給促進剤、誘引剤、カプセル化剤、結合剤、乳化剤、染料、UV保護剤、緩衝剤、およびフロー剤、低飛散粉剤、微粉剤、水面展開剤からなる剤形の群より選択される1つ以上のものを追加的に選択して製造されてもよい。
本発明の一具体例によれば、前記微生物製剤は、アザミウマに対して殺虫活性を有するものであってもよい。
本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)は、同族種属のビューベリアバシアナ菌株対比約30%以上優れたアザミウマ防除率を示すので、アザミウマの防除のために有用に活用できる。
本発明のさらに他の態様は、前記微生物製剤を土壌または植物に処理する段階を含む殺虫方法を提供する。
本発明の殺虫方法は、ビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の培養物、前記培養物の濃縮物、および前記培養物の乾燥物からなる群より選択される1つ以上を有効成分として含む殺虫用微生物製剤を、当業界における土壌または植物に微生物製剤を処理する通常の方法によって行われてもよい。
以下、本発明の理解のために好ましい実施例を提示する。しかし、下記の実施例は本発明をより容易に理解するために提供されるものに過ぎず、下記の実施例によって本発明の内容が限定されるものではない。
[実施例]
実施例1.ビューベリアバシアナKNU-101菌株の分離および同定
本発明において、土壌害虫に対して殺虫力を有する真菌を分離するために、野外で病原性真菌によって感染して死んだ昆虫を採集する方法と、土壌害虫が生息する作物および土壌試料から分離する方法とを並行した。
具体的には、感染して死んだアザミウマはその重量を秤量した後、0.85%塩類溶液(saline solution)に10倍順次希釈して懸濁液中の0.1mlを取り、下記表1のようなサブローデキストロース寒天培地(SDA培地;Sabouraud Dextrose Agar media)に塗抹した。下記の例に表記された培地の成分は本発明のビューベリアバシアナを分離するためのものであり、下記に提示された成分の加減には限定がない。
Figure 0007214866000001
また、土壌、作物、糞便、および飼料の試料から真菌を分離するために採取された試料1.0gを9ml 0.85%塩類溶液に順次希釈して各希釈倍数ごとに0.1mlを取り、表1の組成を有する培地に塗抹し、30℃で5日間培養させた後、一般的に知られたビューベリアバシアナと形態学的に類似する真菌のみを選別分離して新しいSDA培地に接種して、同一の条件で培養した。
その結果、アザミウマに対して殺虫力を有する昆虫病原性13種の真菌を選別し、前記真菌をビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)で同定した。本発明者らは、前記分離した昆虫病原性分離菌のうち、殺虫力に最も優れていることが分かった真菌を「ビューベリアバシアナKNU-101」と名付け、これを2018年10月16日付で韓国生命工学研究院微生物資源センターに寄託した(受託番号;KCTC 13660BP)。
前記ビューベリアバシアナKNU-101を純粋分離後に形態学的な特徴を図1のAに、顕微鏡下で観察した写真を図1のBに示し、図2にInternal transcribed spacer(ITS)領域の配列分析の結果から作成した系統分類学的模式図を示した。前記菌株の系統分類学的模式図は、Molecular Evolutionary Genetics Analysis 7.0 versionを用いてmaximum likelihood方法で確認された。
実施例2.ビューベリアバシアナKNU-101菌株の土壌害虫に対する病原性の検証
キュウリ、トマトおよびレタスなどの栽培地で問題になっている害虫であるアザミウマ類のうち、キュウリのアザミウマ(Palm thrips、Parthenothrips dracaenae)を供試虫(test insect)として用い、成虫の寄主作物としてはインゲンマメを用い、累代飼育をしながら2-4世代内に実験を実施した。
本発明において、分離した真菌であるビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)のアザミウマに対する殺虫力を検証すべく、前記真菌をサブローデキストロース液体培地に約10個の胞子を接種して点培養し、約10個の胞子数を麦粕からなる固体培地で5日間培養した。培養後、血球計数器(hemocytometer)で観測した結果、1gあたり約3.1×10個の胞子を確保した。確保した胞子を農家で獲得したアザミウマに約10個の胞子数で処理し、7日間観察した。無処理群と各処理群のアザミウマは約30匹に設定し、陰性対照群としてアスペルギルスフラバス(Aspergillus flavus)ATCC9643、陽性対照群としてビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)ATCC74040を用いた。
その結果、図3および図4に示されるように、ビューベリアバシアナKNU-101菌株がアザミウマに対して100%の致死率を示し、他の分離真菌および陽性対照群に比べてアザミウマに対する昆虫病原性に優れていることが確認された。
実施例3.ビューベリアバシアナKNU-101の胞子生産量の比較検証
本発明のビューベリアバシアナKNU-101真菌を経済的な方法で大量生産するために、水と麦粕とを混合した基本的な培地を作製した。
前記培地は、グリセリン、ビャッキョウサン、酵母抽出物、リン酸塩などから構成された群より選択される1つまたは2つ以上を追加的に添加することができる。前記培地の添加剤のうち、酵母抽出物は微量元素および窒素源を提供し、グリセリンは培地の物性および水分含有度を改善するための補助剤として用いられ、ビャッキョウサンは活性化された菌株の殺虫力を維持するために用いられ、リン酸塩はpH緩衝剤として用いられる。
供試菌株としてアスペルギルスフラバス(Aspergillus falvus)ATCC9643およびビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)ATCC74040を用いた。本発明において、分離したビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101および前記菌株を固相培地に1gあたり約10spore/mlの胞子濃度で接種し、7日間培養した後、胞子の個数を確認した。各菌株の実験群は3個に設定した。
その結果、図5に示されるように、血球計数器で7日間28~30℃で培養して観測した結果、本発明のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101を培養した培地1gあたり約1.8×1011spore/g個の胞子が観測され、供試菌株のビューベリアバシアナATCC74040と比較した時、最小100倍から最大10,000倍以上胞子生産能に優れていることが確認された。
実施例4.ビューベリアバシアナKNU-101の防除効果の実証
本発明において、分離したビューベリアバシアナKNU-101の実際の作物における土壌害虫に対する防除価を検証すべく、実証実験を実施した。
試験作物はトウガラシを、供試虫としてはミカンキイロアザミウマ(Frankliniella occidentalis)を用いて計27日間実施し、計45mの面積で完全ランダム配置法による3繰り返し試験を行った。
本発明のビューベリアバシアナKNU-101は下記の表2のように処理し、陽性対照群としてビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)ATCC74040を用いた。圃場実験は、外部と遮断された試験区内にトウガラシの畝を定式した植木鉢を入れて、室内で飼育したミカンキイロアザミウマを区あたり300匹ずつ投与して接種した。防除価は試験開始27日後に圃場内のミカンキイロアザミウマの密度率を調べて確認した。
Figure 0007214866000002
その結果、図6に示されるように、本発明のKNU-101製剤が約80%の防除価を示し、実際の圃場においても供試菌株に比べてより高い殺虫能力を有することが確認された。
上述した本発明の説明は例示のためのものであり、本発明の属する技術分野における通常の知識を有する者は、本発明の技術的思想や必須の特徴を変更することなく他の具体的な形態に容易に変形可能であることを理解するであろう。そのため、以上に述べた実施例はあらゆる面で例示的なものであり、限定的ではないと理解しなければならない。

Claims (7)

  1. 殺虫効果を有するビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP) であって、
    前記菌株は、7日間28~30℃で培養すると、10 11 spore/g個数の胞子を形成する、菌株
  2. 前記菌株は、配列番号1で表されるITS(Internal Transcribed Spacer Region)塩基配列を含むものである、請求項1に記載の菌株。
  3. 請求項1に記載のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)を培養する段階を含む菌株の大量生産方法。
  4. 前記培養は、28℃~30℃で行われるものである、請求項3に記載の菌株の大量生産方法。
  5. 請求項1に記載のビューベリアバシアナ(Beauveria bassiana)KNU-101菌株(受託番号KCTC 13660BP)、前記菌株の培養物、前記培養物の濃縮物、および前記培養物の乾燥物からなる群より選択される1つ以上を有効成分として含む殺虫用微生物製剤。
  6. 前記微生物製剤は、アザミウマに対して殺虫活性を有するものである、請求項5に記載の殺虫用微生物製剤。
  7. 請求項5に記載の微生物製剤を土壌または植物に処理する段階を含む殺虫方法。
JP2021527814A 2018-11-16 2019-11-15 優れた殺虫効果および胞子生成能を有する新規ビューベリアバシアナknu-101菌株およびその用途 Active JP7214866B2 (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2018-0142137 2018-11-16
KR20180142137 2018-11-16
KR1020190145696A KR102251508B1 (ko) 2018-11-16 2019-11-14 우수한 살충 효과 및 포자생성능을 갖는 신규 보베리아 바시아나 knu-101 균주 및 이의 용도
KR10-2019-0145696 2019-11-14
PCT/KR2019/015616 WO2020101415A1 (ko) 2018-11-16 2019-11-15 우수한 살충 효과 및 포자생성능을 갖는 신규 보베리아 바시아나 knu-101 균주 및 이의 용도

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022513086A JP2022513086A (ja) 2022-02-07
JP7214866B2 true JP7214866B2 (ja) 2023-01-30

Family

ID=70731256

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021527814A Active JP7214866B2 (ja) 2018-11-16 2019-11-15 優れた殺虫効果および胞子生成能を有する新規ビューベリアバシアナknu-101菌株およびその用途

Country Status (3)

Country Link
US (2) US20230076846A1 (ja)
JP (1) JP7214866B2 (ja)
WO (1) WO2020101415A1 (ja)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4225029A4 (en) * 2020-10-06 2025-07-30 John Thomas Sigurdson BIOLOGICAL PESTICIDE FUNGUS EFFECTIVE AGAINST SEVERAL DIFFERENT SPECIES OF INSECTS
CN115806880B (zh) * 2022-12-08 2024-08-06 江西省林业科学院 一种白僵菌及其分离和筛选方法和在防治枳壳虫害上的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2016135101A (ja) 2013-05-14 2016-07-28 クミアイ化学工業株式会社 ボーベリア・バッシアナ12b菌株及び該菌株を用いた微生物農薬

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2350261A4 (en) * 2008-10-14 2012-06-20 Greentide Ltd ENTOMOPATHOGENIC FUNGI AND USES THEREOF
KR101626801B1 (ko) * 2014-03-27 2016-06-03 전북대학교 산학협력단 곤충병원성 보베리아 바시아나 및 이를 이용한 수도해충 방제용 제제
KR101666968B1 (ko) * 2015-01-06 2016-10-18 전북대학교 산학협력단 곤충병원성 보베리아 바시아나 및 이를 이용한 농업해충 방제용 액상제제
KR101974265B1 (ko) * 2017-04-21 2019-04-30 주식회사 팜한농 총채벌레 방제용 미생물 살충제

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2016135101A (ja) 2013-05-14 2016-07-28 クミアイ化学工業株式会社 ボーベリア・バッシアナ12b菌株及び該菌株を用いた微生物農薬

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Definition: Beauveria bassiana isolate Qin21 internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene andinternal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomalRNA gene, partial sequence,Database GenBank[online],2018年10月31日,〈https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/MG345086.1/〉,Accession No.MG345086
Definition: Beauveria bassiana strain KACC40218 18S ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1,5.8S ribosomal RNA gene, and internal transcribed spacer 2, complete sequence;and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence,Database GenBank[online],2007年10月04日,〈https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF291871〉,Accession No.AF291871

Also Published As

Publication number Publication date
US20250179420A1 (en) 2025-06-05
US20230076846A1 (en) 2023-03-09
JP2022513086A (ja) 2022-02-07
WO2020101415A1 (ko) 2020-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20250179420A1 (en) Beauveria Bassiana KNU-101 Strain Having Excellent Insecticidal Effect and Sporulation Potential and Use Thereof
KR102251508B1 (ko) 우수한 살충 효과 및 포자생성능을 갖는 신규 보베리아 바시아나 knu-101 균주 및 이의 용도
KR101680638B1 (ko) 신규미생물 보베리아 바시아나 fg274와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물제제
CN114424776B (zh) 一种防治南方根结线虫的复合微生物菌剂及制备方法
CN115605580A (zh) 在多种植物中诱导抗性的枯草芽孢杆菌jck-1398菌株、利用其的用于防治松材线虫病的组合物及防治方法
KR102706795B1 (ko) 포자 형성속도가 빠르며 나방목 해충에 살충 효과를 가지는 바실러스 투린지엔시스 아종 쿠르스타키(Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki) KNU-25 균주 및 이의 용도
JP3665295B2 (ja) 新規のトリコデルマ属微生物菌株を利用した生物学的防除用微生物製剤およびその製造方法
CN109673672B (zh) 一种杂色曲霉hy12菌株的应用
KR102162105B1 (ko) 담배가루이에 방제효과를 갖는 Beauveria bassiana JEF-462 또는 Beauveria bassiana JEF-507, 이를 포함하는 담배가루이 방제용 조성물 및 이를 이용한 담배가루이 방제방법
KR101626801B1 (ko) 곤충병원성 보베리아 바시아나 및 이를 이용한 수도해충 방제용 제제
CN121427774A (zh) 苏云金芽孢杆菌cms-bt17及其应用
CN112553086B (zh) 一种淡紫紫孢菌菌株及其在防治黄曲条跳甲方面的应用
KR101773339B1 (ko) 이사리아 푸모소로세아 Pf212 균주 또는 이를 이용한 진딧물, 잘록병균 및 고추 탄저병균의 동시방제용 조성물
CN102242066B (zh) 一种顶孢霉菌株及顶孢霉菌可湿性粉剂
KR102162104B1 (ko) 총채벌레 방제효과를 갖는 Beauveria bassiana JEF-350, 이를 포함하는 총채벌레 방제용 조성물 및 이를 이용한 총채벌레 방제방법
KR102126582B1 (ko) 이사리아 자바니카 ft333 균주 또는 이를 함유하는 총채벌레 및 식물탄저병균의 동시방제용 미생물제제
CN110235662A (zh) 一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法
KR100791983B1 (ko) 아쓰로보트리스속 미생물 및 이를 포함하는 식물 기생성선충 방제용 미생물 제제
CN110720470A (zh) 一种苏云金芽孢杆菌在防治根螨属昆虫中的应用
KR102207732B1 (ko) 메타리지움 아니소플리애 ft319 균주 또는 이를 함유하는 배추좀나방 유충 방제용 미생물제제
KR100458765B1 (ko) 파리목 해충에 대해 방제효과를 가지는 바실러스슈린지에스 균주 및 이를 이용한 미생물 살충제의 제조방법
KR102757825B1 (ko) 포자 형성속도가 빠르며 파리목 해충에 살충 효과를 가지는 바실러스 투린지엔시스 아종 이스라엘렌시스(Bacillus thuringiensis subsp. israelensis) KNU-26 균주 및 이의 용도
TWI872303B (zh) 蟲生真菌新菌株篩選及劑型應用
Soni et al. MASS PRODUCTION AND FIELD EVALUATION OF BEAUVERIA BRONGNIARTII (SACCARDO) AGAINST BRAHMINA CORIACEA (HOPE) WHITEGRUBS IN POTATO.
KR102145620B1 (ko) 이사리아 푸모소로세아 ft337 균주 또는 이를 함유하는 배추좀나방 유충 방제용 미생물제제

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20210719

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20220620

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220920

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20221223

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20230118

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7214866

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250