JP7206241B2 - 抗ウイルス薬および抗ウイルス薬の使用 - Google Patents

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Description

本発明は医療の分野に関する。特に、本発明は新規な抗ウイルス薬およびウイルス感染によって生じる病気または状態の治療におけるそれらの使用に関する。
背景技術として参照されている文献について、そのような文献がオーストラリア又は外国における一般常識を構成していると解釈するべきではない。
ウイルスは、社会にとって大きな損失となる、広範囲の哺乳類の疾患の原因である。ウイルス感染の影響は一般的なインフルエンザ症状から重症な呼吸器疾患まで幅広く、特に若者、高齢者、免疫不全患者の間において死に至ることもある。
一例として、インフルエンザウイルスＡ型、Ｂ型及びＣ型を含むオルトミソウイルス科（Orthomyxoviridae）のウイルス並びにパラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）のウイルスは、毎年、多くのヒトの感染症の原因となる病原体である。
パラミクソウイルス科を一例として挙げると、ヒトパラインフルエンザウイルス１型～３型（ｈＰＩＶ－１型、２型及び３型）は、幼児や小児の上部および下部気道疾患の主な原因であり、また、高齢者や免疫不全患者にも影響を与える。重大なこととしては、米国単独でも、毎年５歳未満の子どものうち最大５００万人に下気道感染が起こると推定されており、これらの症例のうちの約３分の１においてｈＰＩＶが単離されたということである。ｈＰＩＶ感染症を予防または治療するためのワクチンも、特効がある抗ウイルス療法も、継続的な尽力にも関わらず、現在無い状態である。より最近の手法のいくつかは、低分子によって、侵入を遮断することや未熟なウイルス融合を引き起こすことに焦点を当ててきた。
パラインフルエンザウイルスと宿主細胞との初期相互作用は、ウイルス表面の糖タンパクであるヘマグルチニン（赤血球凝集素）-ノイラミニダーゼ（ＨＮ）を介して、Ｎ-アセチルノイラミン酸含有複合糖質（N-acetylneuraminic acid-containing glycoconjugates）を認識することを伴う。パラインフルエンザウイルスＨＮは、単一のタンパク質内のみならず、見かけ上単一の結合位置においても、レセプター結合機能（細胞接着のため）およびレセプター破壊機能（ウイルスの放出の促進）を包含している多機能タンパク質である。さらに、ＨＮは標的宿主細胞への感染を開始するために必要なウイルス表面の融合タンパク質（Ｆタンパク質）を活性化させる。ヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼ酵素の阻害は、抗ウイルス薬の標的を提供することができる。
本発明の第１態様によれば、化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容され得る塩であって、
Figure 0007206241000001
＜化学式Ｉ＞
Ｒ１がＣＯＯＨ又はその塩、Ｃ(Ｏ)ＮＲ９Ｒ１０及びＣ(Ｏ)ＯＲ１１からなる群より選択され、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ、水素原子と置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルとからなる群からそれぞれ独立に選択され、
Ｒ３は環を構成する炭素原子のうちの１つ又は両方において置換されているＮ結合型トリアゾール、置換基を有していてもよいＮ結合型テトラゾール、置換基を有していてもよいＮ結合型インドール、置換基を有していてもよいＮ結合型イソインドール及び置換基を有していてもよいＮ結合型ベンゾトリアゾールからなる群より選択され、
Ｒ４はＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７であって、Ｒ１７は、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群より選択され、
Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＮＲ１８Ｒ１８'、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８、－ＮＨ(Ｃ＝Ｏ)Ｒ１８及びＳ(Ｏ)ｎＲ１８からなる群よりそれぞれ独立に選択され、ｎ＝０～２であり、Ｒ１８及びＲ１８'はそれぞれ独立に、水素と置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキル基とのいずれかである、化合物が提供される。
第１態様における一実施形態によると、化学式Ｉの化合物は下記式によって表される化学式ＩＩの化合物であり、
Figure 0007206241000002
＜化学式ＩＩ＞
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、上述の通りである。
本発明の第２態様は、第１態様の有効量の化合物またはその薬学的に許容され得る塩と、希釈剤および／又は賦形剤である薬学的に許容し得る担体と、を含む、医薬組成物である。
好ましくは、医薬組成物はウイルス感染が原因の疾病、疾患または症状の、治療または発症予防のためのものである。
本発明の第３態様は、第１態様の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または医薬組成物、または、第２態様の医薬組成物を治療対象（patient、罹患者、罹患動物）に対して有効量投与する手順を含む、治療対象のウイルス感染による疾病、疾患または症状の治療方法である。
本発明の第４態様は、第１態様の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩、または第２態様の医薬組成物を、治療対象のウイルス感染が原因の疾病、疾患もしくは症状の治療において使用するものである。
本発明の第５態様は、第１態様の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩を、ウイルス感染が原因の疾病、疾患もしくは症状の治療のための医薬の製造に用いるものである。
第３態様、第４態様および第５態様の一実施形態においては、疾病、疾患もしくは症状はインフルエンザである。
インフルエンザは、Ａ型、Ｂ型およびＣ型インフルエンザのいずれかであってもよいし、パラインフルエンザであってもよい。
一実施形態において、パラインフルエンザはｈＰＩＶ－１型、２型および３型のウイルスである。
好ましくは、治療対象が飼育動物もしくは家畜、またはヒトのいずれかである。
本発明の第６態様は、ウイルスのヘマグルチニンとノイラミニダーゼ酵素との両方またはいずれか一方の活性を調節するための方法であって、酵素と第１態様の化合物とを接触させる手順を含む、方法である。
本発明の種々の特徴および実施形態は、前述の個々のセクションを他のセクションに適宜準用する。その結果として、あるセクションの特徴と他のセクションの特徴とを併せてもよい。
本発明の更なる特徴や利点については、後述の詳細な説明において明らかにする。
本発明を容易に理解し、実用的な効果を得るために、好ましい実施形態について図面を参照し一例として説明する。
（１）Ｎ－アセチルノイラミン酸（N-acetylneuraminic acid）、（２）シアリダーゼ阻害剤（sialidase inhibitor）であるNeu5Ac2en、（３）４－アジド－４－デオキシ－Neu5Ac2en（4-azido-4-deoxy-Neu5Ac2en）、（４）ザナミビル（zanamivir）、（５）Neu5Ac2enのＣ－５位をイソブチルアミドに置換したアナログ、（６）リファレンスとなるｈＰＩＶ阻害剤であるBCX2798、（７）～（１０）新規の阻害剤の構造を示す。
モルモット赤血球（ｇｐ ＲＢＣ、無地(solid)のバー）とヒト赤血球（ｈＲＢＣ、破線(dashed)のバー）とを用いた阻害剤６及び１０のＨＩ ＩＣ５０値の比較
Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎ誘導体２、３、５～１０のＮＩ（無地(solid)）とＨＩ（破線(dashed)）のＩＣ５０値のグラフである。Ｃ５位がアセトアミド基（パネル左、グループ１）の阻害剤２、３、７及び８と、Ｃ５位がイソブチルアミド基（パネル右、グループ２）の阻害剤５、６、９及び１０である。値は３についての独立の実験の測定の平均値であり、エラーバーは算出された標準偏差に相当する。
図４Ａは選択された阻害剤の、ＮＩ（無地(solid)のバー）とＨＩ（破線(dashed)のバー）のＩＣ５０値のグラフの比較である。（Ａ）は、化合物３、６～１０及びこれらのＣ－４ヒドロキシルアナログ（２及び５）のＮＩとＨＩとのＩＣ５０値の比較である。 図４Ｂは選択された阻害剤の、ＮＩ（無地(solid)のバー）とＨＩ（破線(dashed)のバー）のＩＣ５０値のグラフの比較である。（Ｂ）は、化合物７～１０及びこれらのＣ－４アジドアナログ（３及び６）のＮＩとＨＩとのＩＣ５０値の比較である。 図４Ｃは選択された阻害剤の、ＮＩ（無地(solid)のバー）とＨＩ（破線(dashed)のバー）のＩＣ５０値のグラフの比較である。（Ｃ）は、化合物６、９～１０及びこれらのＣ－５アセトアミドアナログ（３、７及び８それぞれ）のＮＩとＨＩとのＩＣ５０値の比較である。
ウイルス増殖阻害アッセイの４８時間後の子孫（progeny）ウイルスのタイトレーション（フォーカスフォーミングアッセイ(focus forming assay)）。子孫ウイルスタイトレーションの代表的な結果である。ウイルスは、２μＭの化合物８、１０又は６の存在下において４８時間増幅させ回収した。回収したウイルス培養液の上清は、残存化合物が病巣（foci）の形成に効果が無いことを確認するために、少なくとも１：１０００に希釈した。 基準阻害剤６及び阻害剤１０のウイルス増殖阻害。ウイルス増殖阻害は２μＭの阻害剤の存在下で、低ＭＯＩで感染させられたコンフルエントなＬＬＣ－ＭＫ２の単層に対する子孫（progeny）ウイルスのタイトレーションによって決定された。この阻害剤濃度において、１０は９４％の阻害を示し、それに比べて６は１４％の阻害であった。これらの結果は、２回繰り返し行われた２つの独立した実験の代表的な結果であり、エラーバーは計算した標準偏差に相当する。
様々な細胞株における基準阻害剤６（白抜きの四角）と阻害剤１０（黒三角）とのウイルス増殖阻害を示す。化合物６（白抜きの四角）及び１０（黒三角）のウイルス増殖ＩＣ５０値は、ヒト細胞株（Ａ５４９及びＮＨＢＥ）及びサル腎臓細胞株（ＬＬＣ－ＭＫ２）の両方に対するin situ ELISA手法により決定された。ＩＣ５０値、54.6 ± 3.8 μＭ 及び 2.1 ± 0.6μＭ (LLC-MK2); 130.6 ± 13.0μＭ 及び 10.3 ± 0.3μＭ (A549); 79.3 ± 1.0μＭ 及び 13.9 ± 0.7μＭ (NHBE)は、６と１０それぞれ決定されたものである。これらの値は少なくとも２つの独立した実験を３回繰り返し行うことによって決定され、エラーバーは計算した標準偏差に相当する。
ｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体中の８の１Ｈ及びＳＴＤ ＮＭＲスペクトル。（ａ）８の１Ｈ ＮＭＲスペクトル及び（ｂ）タンパク質－リガンド比が１：１００（２ｍＭの８）であり、２０μＭのｈＰＩＶ－３ ＨＮ存在下における８のＳＴＤ ＮＭＲスペクトル。（ｃ）Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９及びＨ９'領域における１Ｈ ＮＭＲスペクトル。残存するグリセロールのシグナルは黒い星型で印をつけている。（ｄ）Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９及びＨ９'領域におけるＳＴＤ ＮＭＲスペクトル。（ｅ）提案される８の結合エピトープ。
ｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体中の１０の１Ｈ ＮＭＲスペクトルとＳＴＤ ＮＭＲスペクトルとエピトープマップ。（ａ）１０の１Ｈ ＮＭＲスペクトル。（ｂ）タンパク質－リガンド比が１：１００（２ｍＭの１０）であり、２０μＭのｈＰＩＶ－３ ＨＮ存在下における１０のＳＴＤ ＮＭＲスペクトル。（ｃ）Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９及びＨ９'領域における１Ｈ ＮＭＲスペクトル。（ｄ）Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９及びＨ９'領域におけるＳＴＤ ＮＭＲスペクトル。（ｅ）提案される阻害剤１０の結合エピトープマップ。
元のままの（intact、インタクト）ｈＰＩＶ－３ウイルス又は組換えＨＮとの複合体中の１０のＳＴＤ ＮＭＲスペクトルの比較。（ａ）ｈＰＩＶ－３ ＨＮ存在下における１０の１Ｈ ＮＭＲスペクトル、（ｂ）元のままのｈＰＩＶ－３ウイルス存在下における１０のＳＴＤ ＮＭＲスペクトル、及び（ｃ）ｈＰＩＶ－３ ＨＮ存在下における１０のＳＴＤ ＮＭＲスペクトル。
元のままのウイルスまたは組換えＨＮとの複合体中の１０由来のフェニルプロトンの重ね合わせ。（ａ）１０の１Ｈ ＮＭＲスペクトル（ｂ）ｈＰＩＶ－３ウイルス（黒）または組換えｈＰＩＶ－３ ＨＮ（赤）の存在下における１０のＳＴＤ ＮＭＲスペクトル
Ａ５４９細胞に対する細胞毒性試験の結果のグラフである。
フッ素化化合物と非フッ素化化合物の選択のためのＮｅｕ２阻害アッセイの結果を示している。
本発明の少なくとも一部は、特定のノイラミン酸誘導体（neuraminic acid derivatives）がウイルス感染による疾病の治療に有益な有効性を示すという知見に基づいている。特に、本発明の化合物はパラインフルエンザウイルスのヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼ酵素の阻害に有効である。
＜定義＞
本明細書において、構成する（comprises、comprising）、含む（includes、including）又は類似の単語は、方法や組成を非限定的に含むという意味を意図しており、単にそれらの元素を含むのではなく、リストにはない他の元素も適宜含んでもよい。
別に定義される場合はこの限りではないが、本明細書におけるすべての専門用語および科学用語は、本発明に属する分野の当業者に一般的に理解される用語と同じ意味として使用される。
本明細書において、「有効量（effective amount）」とは、適切かつ有効な薬剤量を投与することであり、治療を要する症状の発症防止、症状の悪化を止めるもの、症状を治療し軽減するもの、または少なくとも重症度を軽減するものである。この有効量は、治療対象の年齢、性別、体重等に応じて行われる当業者の判断によって様々となる。適切な投与量または投与計画は通常行われるような治験を通して確認することができる。
本明細書において、「薬学的に許容され得る塩（pharmaceutically acceptable salt）」とは、全身投与または局所投与をしても毒物学的に安全である塩であって、無機および有機の塩基のいずれかと、無機および有機の酸のいずれかとを含む、例えば薬学的に許容し得る無毒性の塩基または酸由来の塩である。薬学的に許容され得る塩は、次の群から選択されてもよい：アルカリ、アルカリ土類、アンモニウム、アルミニウム、鉄、アミン、グルコサミン、塩化物、硫酸塩、スルホネート、重硫酸塩（bisulphate）、硝酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩（tartrate）、ビタレート（bitarate）、リン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩（bicarbonate）、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ナプシル酸塩（napsylate）、フマル酸塩（fumarate）、コハク酸塩（succinate）、酢酸塩、安息香酸塩、テレフタル酸塩、パルモ酸塩（palmoate）、ピペラジン、ペクチ酸塩（pectinate）、Ｓ－メチルメチオニン塩（S-methyl methionine salts）。
本明細書において、「置換（substituted）」及び「置換基を有していてもよい（optionally substituted）」とは、特定の部分構造（moiety）の明確なリストが無かったとしても、適切な部分構造が置換されていることを言う。例えば、アルキル鎖（alkyl chain）又は環構造（ring structure）であり、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、ＣＮ、ＯＨ、oxo、ＮＨ２、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｉ、アリール（aryl）及びヘテロシクリル（heterocyclyl）のうち１以上の群から選択され、アリール及びヘテロシクリル自身が置換基を有していてもよい。「置換」及び「置換基を有していてもよい」という言葉が官能基の前に記載されている場合、すべての官能基の前に「置換」及び「置換基を有していてもよい」という言葉が書かれていなくとも、そのリストの官能基すべてにかかるものとする。例えば、「置換基を有していてもよいアミノ、複素環（heterocyclic）、アリール」は、すべてのアミノ、複素環およびアリール基が置換基を有していてもよい。
「アルキル（alkyl）」は、直鎖または分枝鎖のアルキル置換基であって、例えば、１～約１２個の炭素原子を含み、好ましくは１～約８個の炭素原子を含み、さらに好ましくは１～約６個の炭素原子を含み、より好ましくは１～約４個の炭素原子を含み、より好ましくは１～２個の炭素原子を含む。置換基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソアミル、２－メチルブチル、３－メチルブチル、へキシル、へプチル、２－メチルペンチル、３－メチルペンチル、４－メチルペンチル、２－エチルブチル、３－エチルブチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル等を含む。炭素の数は炭素骨格及び炭素側鎖についてであり、いずれかの置換基に含まれる炭素原子、例えば、炭素骨格から分枝するアルコキシ置換基の炭素原子は含まない。
「シクロアルキル（cycloalkyl）」は、置換基を有していてもよい単環（monocyclic）、二環（bicyclic）又は三環（tricyclic）の飽和炭素基である。必要に応じて、シクロアルキル基は特定の炭素数であってもよく、例えば、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキルは炭素原子を３、４、５又は６個有する炭素環基である。これらに限定されないが、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロへキシル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル等を含む。
「アリール（aryl）」は、一般的に文献において知られているものであり、芳香族の環状炭素の置換基を有していなくても有していてもよい。ヒュッケル則より、アリールは平面であり、電子が４ｎ＋２πから成る環状置換基であることが知られている。Ｃ－６のアリールが好ましい。
本明細書において、「複素環（heterocyclic）」及び「ヘテロシクリル（heterocyclyl）」は、特にいくつかの「Ｒ」基に関する限り、非芳香環であって、環の中に５～７原子を有しており、その原子のうち１～４がヘテロ原子であり、前述の環が単体でもよいし２個目の環に融合していてもよく、前述のヘテロ原子がそれぞれ独立にＯ、Ｎ及びＳから選択されるものである。複素環は、不飽和及び飽和複素環基を含む。複素環系（heterocyclic system）は、炭素数が任意の炭素原子と、遊離基（radical）の炭素ヘテロ原子とのいずれかを介して他の部分構造と結合していてもよく、飽和であっても不飽和であってもよい。これらに限定されないが、例として、複素環はピラゾール、イミダゾール、インドール、イソインドール、トリアゾール、ベンゾトリアゾール、テトラゾール、ピリミジン、ピリジン、ピラジン、ジアジン、トリアジン、テトラジン、ピロリジニル、ピロリニル、ピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピラゾリニル（pyrazolinyl）、ジチオリル（dithiolyl）、オキサチオリル（oxathiolyl）、ジオキサニル（dioxanyl）、ジオキシニル（dioxinyl）、オキサジニル（oxazinyl）、アゼピニル（azepinyl）、ジアゼピニル（diazepinyl）、トリアゼピニル（triazepinyl）、オキセピニル（oxepinyl）、チアピニル（thiapynyl）、イミダゾリニル（imidazolinyl）、チオモルフォリニル（thiomorpholinyly）等から選択されてもよい。
「保護されたＯＨ（protected OH）」または「保護されたヒドロキシ（protected hydroxy）」は、一般的な保護基（protecting group）によって保護されたヒドロキシ基である。一般的な保護基とは、例えば、Ｃ１－Ｃ３アシル基と、エーテル基を形成するＣ１－Ｃ４アルキル基またはエーテル基を形成するベンジル基のようなアリール基と、またはＣ１－Ｃ４エステル基とを含むアシル基、エーテル基またはエステル基である。
本明細書において、「Ｎ結合型（N-linked）」とは、例えば「Ｎ結合型トリアゾール」又は「Ｎ結合型複素環」等の化学式Ｉ及び化学式ＩＩの化合物を含む第１態様の化合物に関し、ノイラミン酸コアのＣ４位（化学式Ｉ及び化学式ＩＩにおけるＲ３）に結合（attachment）した部位（moiety）であって、その結合が、環状炭素（ring carbon）と窒素原子との間の直接結合に限定されるものを表す。好ましくは、Ｎ結合型は窒素原子を介してノイラミン酸コアと結合しており、その窒素原子は複素環の一部を構成している、例えばトリアゾール環、テトラゾール、インドール等の窒素である、Ｒ３の部位（moiety）のことである。式（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ）の「ジフルオロ（difluoro）」化合物において、「Ｎ結合型」は、コアに対して中間の窒素原子（intermediate nitrogen atom）を介して結合するか、又は、複素環の部位（moiety）の場合であれば、例えばトリアゾール環を構成する窒素等、複素環自身を構成する窒素原子を介して結合する、Ｒ３の部位（moiety）のことである。
構造中の原子の数値範囲が示されている場合（例えば、Ｃ１－Ｃ１２、Ｃ１－Ｃ１０、Ｃ１－Ｃ９、Ｃ１－Ｃ６、Ｃ１－Ｃ４、アルキル等）は常に、示された数値範囲内の数値範囲（sub-range）や個別の数値も使用できるものであることを特に意図している。したがって、例えば、本明細書においてあらゆる化学基（chemical group）（例えばアルキル基等）にそれぞれ使われる炭素原子数１－１２（例えば、Ｃ１－Ｃ１２）、炭素原子数１－９（例えば、Ｃ１－Ｃ９）、炭素原子数１－６（例えば、Ｃ１－Ｃ６）、炭素原子数１－４（例えば、Ｃ１－Ｃ４）、炭素原子数１－３（例えば、Ｃ１－Ｃ３）、又は炭素原子数２－８（例えば、Ｃ２－Ｃ８）は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１及び／又は１２の炭素原子を含み、特異的に示すものである。必要に応じて、数値範囲内のあらゆる数値範囲も同様に含み、特異的に示すものである（例えば、炭素原子数１－２、炭素原子数１－３、炭素原子数１－４、炭素原子数１－５、炭素原子数１－６、炭素原子数１－７、炭素原子数１－８、炭素原子数１－９、炭素原子数１－１０、炭素原子数１－１１、炭素原子数１－１２、炭素原子数２－３、炭素原子数２－４、炭素原子数２－５、炭素原子数２－６、炭素原子数２－７、炭素原子数２－８、炭素原子数２－９、炭素原子数２－１０、炭素原子数２－１１、炭素原子数２－１２、炭素原子数３－４、炭素原子数３－５、炭素原子数３－６、炭素原子数３－７、炭素原子数３－８、炭素原子数３－９、炭素原子数３－１０、炭素原子数３－１１、炭素原子数３－１２、炭素原子数４－５、炭素原子数４－６、炭素原子数４－７、炭素原子数４－８、炭素原子数４－９、炭素原子数４－１０、炭素原子数４－１１、及び／又は炭素原子数４－１２等、必要に応じて）。
本明細書において、「対象（subject）」「個体（individual）」「患者、治療対象（patient）」とは、あらゆる対象（subject）であってもよく、特に脊椎動物の対象（subject）であってもよく、さらに具体的には、治療を切望する哺乳類の対象（subject）であってもよい。以下に限定されないが、対象とする脊椎動物は、霊長類、鳥類、家畜動物（例えば、羊、牛、馬、ロバ、豚）、実験動物（例えば、ウサギ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター）、ペット（例えば、猫、犬）及び捕獲された野生動物（例えば、キツネ、シカ、ディンゴ（dingoes））を含む。好ましい対象（subject）は、ウイルス感染による疾病（disease）または症状（condition）の治療を必要とするヒトである。しかしながら、前述の「対象（subject）」「個体（individual）」「患者、治療対象（patient）」は、症状が必ず発症しているという意味を示すものではないものと理解する。
本発明の第１態様によれば、化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容され得る塩であって、
Figure 0007206241000003
（化学式Ｉ）
Ｒ１がＣＯＯＨ又はその塩、Ｃ(Ｏ)ＮＲ９Ｒ１０及びＣ(Ｏ)ＯＲ１１からなる群より選択され、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ、水素原子と置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルとからなる群からそれぞれ独立に選択され、
Ｒ３は環を構成する炭素原子のうちの１つ又は両方において置換されているＮ結合型トリアゾール、置換基を有していてもよいＮ結合型テトラゾール、置換基を有していてもよいＮ結合型インドール、置換基を有していてもよいＮ結合型イソインドール及び置換基を有していてもよいＮ結合型ベンゾトリアゾールからなる群より選択され、
Ｒ４はＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７であって、Ｒ１７は、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群より選択され、
Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＮＲ１８Ｒ１８'、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８、－ＮＨ(Ｃ＝Ｏ)Ｒ１８及びＳ(Ｏ)ｎＲ１８からなる群よりそれぞれ独立に選択され、ｎ＝０～２であり、Ｒ１８及びＲ１８'はそれぞれ独立に、水素と置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキル基とのいずれかである、化合物が提供される。
第１態様における一実施形態によると、化学式Ｉの化合物は下記式によって表される化学式ＩＩの化合物であり、
Figure 0007206241000004
＜化学式ＩＩ＞
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、上述の通りである。
好ましくは、トリアゾールは、環のＮ１位においてノイラミン酸の炭素環と結合する１，２，３－トリアゾールである。
一実施形態においては、テトラゾールの環を構成する炭素原子のみが置換されている。
一実施形態においては、化学式Ｉ又は化学式ＩＩの化合物のＲ１がＣＯＯＨまたはその塩、またはＣ(Ｏ)ＯＲ１１であって、Ｒ１１はメチル、エチル及びプロピルから選択される。
ある特定の実施形態においては、Ｒ１はＣＯＯＨと、ＣＯＯＮａと、Ｃ(Ｏ)ＯＭｅとからなる群より選択される。
一実施形態においては、化学式Ｉ又は化学式ＩＩのＲ３は下記式によって表される次の群より選択され、
Figure 0007206241000005
Ｒ２０及びＲ２１は、水素、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルキルエーテル、置換基を有していてもよいピリジル及び置換基を有していてもよいフェニルからなる群よりそれぞれ独立に選択され、Ｒ２０及びＲ２１のうち少なくとも１つは水素ではなく、
Ｒ２２は、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル及び置換基を有していてもよいフェニルからなる群より選択され、
Ｒ２３及びＲ２４は、水素、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群よりそれぞれ独立に選択される、化合物である。
ある好ましい実施形態において、Ｒ２０及びＲ２１はＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６アルキルヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、置換基を有していてもよいピリジル及び置換基を有していてもよいフェニルからなる群より選択される。
一実施形態において、Ｒ２０、Ｒ２１又はＲ２２は、必要に応じて、置換基を有していてもよいピリジル又は置換基を有していてもよいフェニルのいずれかであり、該置換基は、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルキルヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、－Ｃ(Ｏ)ＯＭe及び－ＣＨ２ＯＣＨ３からなる群から選択される部分構造（moiety）であってもよい。
ある実施形態においては、Ｒ３は下記式によって表される群より選択されてもよい。
Figure 0007206241000006
Figure 0007206241000007
Figure 0007206241000008
Figure 0007206241000009
本明細書において、上記の特定の基（moiety）の一覧は、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７又はＲ８基の開示のうち、どれを組み合わせてもよい。
前述のすべての実施形態において、Ｒ４は下記式によって表される群より選択されてもよい。
Figure 0007206241000010
Figure 0007206241000011
Figure 0007206241000012
ある実施形態においては、Ｒ４が－ＮＨＡｃ、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２(ＣＨ３)２、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＦ３及び－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３からなる群より選択される。
いずれの実施形態においても、化学式Ｉ又は化学式ＩＩの化合物のＲ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨと、Ｃ１－Ｃ３アルコキシと、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８とからなる群よりそれぞれ独立に選択されてもよく、Ｒ１８は置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ３アルキルである。
前述の実施形態のうちいずれか１つ以上の実施形態においては、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ又はＯＡｃからそれぞれ独立に選択されてもよい。
実施形態においては、化学式Ｉまたは化学式ＩＩは下記式によって表される化合物およびそれらのすべてのＣ２類似体から選択されていてもよく、
Figure 0007206241000013
Figure 0007206241000014
Figure 0007206241000015
Figure 0007206241000016
Figure 0007206241000017
Figure 0007206241000018
Figure 0007206241000019
Ｃ－２位のカルボキシ基がプロトン化形、ナトリウム塩形またはＣ１－Ｃ３エステルプロドラッグ形であって、Ｒ４の位置が任意の－ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ基によって明確に置換されており、ＲがＣ１－Ｃ４アルキル又はハロアルキルである。
例えばメチルエステル基のように、ＣＯＯＨ基は塩形態またはエステル保護基に簡単に置き換わるため、すべてのそのような形態については、合成化学の分野に属する当業者においては本明細書に開示されている上述の化合物のリストを参照の上、考慮することが好ましい。
ある特定の実施形態においては、化学式Ｉ又は化学式ＩＩのＲ４がＮＨＡｃであって、Ｒ３がトリアゾールによって置換されているが、トリアゾールはカルボキシ基によって置換されていない。
さらなる特定の実施形態においては、化学式Ｉ又は化学式ＩＩの、Ｒ４がＮＨＡｃであり、Ｒ３がトリアゾールであって、トリアゾール環の第４位（ノイラミン酸のコアに結合する環内窒素である第１位）のみが置換されているが、トリアゾールは、プロピル、置換基を有していてもよいプロピル、置換基を有していてもよいtert－ブチル又はジエトキシアルキルによって置換されていない。
一実施形態においては、第１態様の化合物はヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼのモジュレーターである。好ましくは、ヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼの阻害剤である。
一実施形態においては、ヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼ阻害剤は、インフルエンザ又はパラインフルエンザのヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼ阻害剤である。
本明細書における別の一態様においては、"ジフルオロ（difluoro）"について、化学式ＩＩＩ又は化学式ＩＩＩａ、又はその薬学的に許容され得る塩の化合物に属する発明であって、
Figure 0007206241000020
＜化学式ＩＩＩ＞ ＜化学式ＩＩＩａ＞
Ｒ１はＣＯＯＨ又はその塩、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２及びＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２からなる群より選択され、
Ｒ１ａ及びＲ２はフッ素であって、
Ｒ３は置換基を有していてもよいＮ結合型複素環、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ１２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１３及び－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１４からなる群より選択され、
Ｒ４はＮＲ１５Ｒ１６及びＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１７からなる群より選択され、
Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＮＲ１８Ｒ１８'、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ１８、－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ１８及びＳ（Ｏ）ｎＲ１８からなる群よりそれぞれ独立に選択され、ｎ＝０－２であり、Ｒ１８及びＲ１８'はそれぞれ独立の水素または置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルである。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ１はＣＯＯＨ又はその塩と、ＣＯＯＲ１１とからなる群より選択されるものであって、Ｒ１１は置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルである。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ１１は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、sec－ブチル、イソブチル、tert－ブチル及びペンチルからなる群より選択される。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ１２、Ｒ１３及びＲ１４は、置換基を有していてもよいベンジル及びフェニルからなる群よりそれぞれ独立に選択される。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ３はピラゾール、イミダゾール、インドール、イソインドール、トリアゾール、ベンゾトリアゾール、テトラゾール、ピリミジン、ピリジン、ピラジン、ジアジン、トリアジン及びテトラジンからなる群より選択され、それらのすべてが置換基を有していてもよく、また、環を構成する窒素を介してコアと結合しているものである。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ３は下記式によって表される次の群より選択される。
Figure 0007206241000021
Figure 0007206241000022
Figure 0007206241000023
Figure 0007206241000024
Figure 0007206241000025
Figure 0007206241000026
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ４はＮＲ１５Ｒ１６及びＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７からなる群より選択され、Ｒ１５、Ｒ１６及びＲ１７は置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルと、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルと、Ｃ１－Ｃ６アルケニル（alkenyl）と、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキルとからなる群よりそれぞれ独立に選択される。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ４はＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７であり、Ｒ１７は置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルと、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルと、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキルとからなる群より選択される。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ４は下記式によって表される次の群より選択される。
Figure 0007206241000027
Figure 0007206241000028
Figure 0007206241000029
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ４は－ＮＨＣ(Ｏ)－メチル、－ＮＨＣ(Ｏ)－エチル、－ＮＨＣ(Ｏ)－プロピル、－ＮＨＣ(Ｏ)－イソプロピル、－ＮＨＣ(Ｏ)－ｎ－ブチル、－ＮＨＣ(Ｏ)－sec－ブチル、－ＮＨＣ(Ｏ)－イソブチル、－ＮＨＣ(Ｏ)－tert－ブチル及び－ＮＨＣ(Ｏ)－ペンチルから選択される。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ５はＣ１－Ｃ６アルキル又はＣ１－Ｃ６アルケニルであって、それぞれ置換基を有していてもよい。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ５は、ヒドロキシ又は保護されたヒドロキシ（protected hydroxy）によって置換されたＣ１－Ｃ６アルキルである。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ及び－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８からそれぞれ独立に選択され、Ｒ１８はＣ１－Ｃ１０アルキルである。
一実施形態においては、化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａのＲ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ及びＯＡｃよりそれぞれ独立に選択される。
ジフルオロ（difluoro）についての一実施形態においては、化学式ＩＩＩ又は化学式ＩＩＩａの化合物又はその薬学的に許容され得る塩は、下記式によって表される次の群より選択され、
Figure 0007206241000030
Figure 0007206241000031
Figure 0007206241000032
Figure 0007206241000033
Figure 0007206241000034
Figure 0007206241000035
Figure 0007206241000036
Figure 0007206241000037
Figure 0007206241000038
Figure 0007206241000039
Figure 0007206241000040
Figure 0007206241000041
Figure 0007206241000042
Figure 0007206241000043
Figure 0007206241000044
Figure 0007206241000045
Figure 0007206241000046
Figure 0007206241000047
Figure 0007206241000048
Figure 0007206241000049
Figure 0007206241000050
Figure 0007206241000051
ＣＯＯＨはそれぞれ、ＣＯＯＮａとして読み替えられ、逆もまた同様である。
上記のいずれかの実施形態において、化学式ＩＩＩ又は化学式ＩＩＩａのＲ３がＮ結合型アリールではなくともよく、すなわち、アリール環が中間に介在する窒素原子を介してコアに結合していてもよい。
Ｃ－２位及びＣ－３位がフッ素により置換（フルオロ置換、fluoro substitution）されているパターンの化学式ＩＩＩ及び化学式ＩＩＩａによって表されるような化合物は特にインフルエンザ株に対して効果的と言える。特定の理論に拘束されることを表すものではないが、これらの化合物はウイルスのノイラミニダーゼに対する効果的な阻害剤であることから活性を有すると考えられる。
本発明の化合物を得るために、複数の合成経路を使用できる。以下のスキーム１は１つの経路を示しており、かかる経路により公知のノイラミニダーゼ阻害剤が合成され標準（リファレンス）化合物として使用された。第１態様の化合物の合成にも使えるであろう適切な合成技術は以下の文献に開示されている。Carbohydr. Res. 244, 181-185 (1993); Carbohydr. Res. 342, 1636-1650 (2007); Bioorg. Med. Chem. Lett. 16,5009-5013 (2006); 及びPCT 出願WO2002076971。
Figure 0007206241000052
 スキーム１: (i) (Boc)2O、DMAP、THF、６０℃、オーバーナイト（o/n）、(18, 71%; 19, 96%) (ii) NaOCH3/CH3OH、室温（rt）、１時間; (iii) Ac2O, ピリジン（pyridine）、室温（rt）、オーバーナイト（o/n）、(20, 81%; 21, 63%超 2ステップ) (iv) TFA、DCM、室温（rt）、オーバーナイト（o/n）、(22, 90%; 23, 85%) (v) 塩化イソブチリル（Isobutyryl chloride）、Et3N、DCM、室温（rt）、4時間、(24, 84%; 12, 91%) (vi) NaOH、MeOH/H2O (1:1)、室温（rt）、オーバーナイト（o/n）、(5, 94%; 6, 82%)。
以下のスキーム２は、第１態様において好ましい化合物である化合物７－１０を得るための合成経路を示している。
Figure 0007206241000053
スキーム２: (i) CuSO4、Na-アスコルビン酸（ascorbate）、tert-ブタノール（butanol）/H2O (1:1)、45 ℃, 6時間(13, 78%; 14, 82%; 15, 71%; 16, 84%); (ii) NaOH, MeOH/H2O (1:1)、室温（rt）、オーバーナイト（o/n）(7, 85%; 8, 96%; 9, 92%; 10, 89%)。
つまり、既知の４－アジド－４－デオキシ－Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎをベースとした中間体１１及び１２を用いてトリアゾール７～１０の合成を実現した。典型的なクリック アジド－アルキン カップリング条件下（水とtert－ブタノールとの１：１の混合液の中において、４－アジド－４－デオキシ－Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎ誘導体、アルキン、ＣｕＳＯ４及びアスコルビン酸ナトリウムの混合物を６時間加熱）において、２つの中間体の両者を、メチルプロパルギルエーテル（methylpropargyl ether）又はエチニルベンゼン（ethynylbenzene）のいずれか一方に曝露させることでトリアゾール誘導体（図１）を生成した。トリアゾール１３及び１４（１１よりスタート）と、トリアゾール誘導体１５及び１６（１２よりスタート）とが、それぞれ収量の７８％、８２％、７１％、８４％で単離された。結果として生じるper－O－アセチル化トリアゾール誘導体１３～１６に対し、ｐＨ１３～１４に調整されたメタノール水溶液（５０％）による処理を室温（ＲＴ）で２４時間行うことによって脱保護させ、ナトリウム塩としての最終産物７～１０をそれぞれ収率８５％、９６％、９２％、８９％で得た。
合成ターゲットの一部は、ｈＰＩＶ－３ ＨＮ結晶構造の分子モデルから収集された情報によって決定された。特に、ｈＰＩＶ－３ ＨＮの２１６ループ（loop）は著しい柔軟性を示すため、Ｃ４位に幾分嵩高い置換基を有するＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎ誘導体を収容でき、活性部位内の開口した２１６の空洞（open the 216 cavity）をロックすることができたと仮定された。この理論をテストするための基礎として、Ｃ４位に官能基を有するトリアゾールを包含するＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎ誘導体の設計（design）及び評価をするために、分子動力学（Molecular Dynamics, MD）シミュレーションが用いられた。２１６ループの柔軟性と、２１６の空洞寸法（cavity dimension）の結果に関する最初の研究から、不飽和のノイラミニン酸ベースのテンプレート上の相対的に嵩高いＣ４位の置換基（図１に示す化合物７～１０）は、開口した２１６の空洞（the open 216 cavity）の中でも十分に許容されるという感触が得られた。さらに、ｈＰＩＶ－３ ＨＮを伴う複合体における、Ｃ４位がトリアゾールによって置換されているこれらの阻害剤のモデル化は、テンプレートにおけるＣ５位のアセトアミド（７、８）部分（moiety）及びイソブチルアミド（９、１０）部分（moiety）もまた、同時にＣ５位の結合ドメインによく収容され得ることを示している。ｈＰＩＶ－３ ＨＮにおける開口された２１６ループを効果的にロックするため、嵩高いトリアゾール化合物（８及び１０）の収容能力（capacity）についてＭＤシミュレーションを用いて評価した。もし、嵩高いＣ４位の置換基と組み合わせることにより、嵩高いＣ５位のアシルアミノ部位（moiety）が阻害剤の親和性を向上させることが予測されるのであれば、ｈＰＩＶ－３ ＨＮを伴う複合体中の８及び１０の相対的な相互作用エネルギーが予測される。
モデル化の方法論および生物学的評価については、実験のセクションにおいて詳しく議論しているが、簡単に、阻害剤の有効性に関するＣ４／Ｃ５位の置換基の影響について、いくつかの結論を述べる。２つのスクリーニンググループのそれぞれ、すなわち、グループ１（Ｃ５位がアセトアミド）及びグループ２（Ｃ５位がイソブチルアミド）のそれぞれにおいて見出された、Ｃ４位の置換基に基づく効力の順は次の通りである：ヒドロキシ＜アジド≦４－メトキシメチルトリアゾール＜４－フェニルトリアゾール。両グループにおいて最も弱い阻害を示したのは４－ヒドロキシ誘導体の２及び５である。この結果は、Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎ（２）上にあるＣ４位のヒドロキシ基を収容するＣ４結合ドメインが著しい疎水性を特徴としており、その結果、ヒドロキシ基を含む極性の親水基との相互作用は働かないという考えをサポートしている。ポケットの疎水性の性質と２１６ループが開くことによって形成される大きな２１６の空洞のサイズ（cavity size）とが組み合わされることは、Ｃ４位のヒドロキシ基が嵩高い疎水性置換基に置換されている阻害剤８及び１０を含む阻害剤にとって好都合である。
両グループのＩＣ５０値の比較により、作製したすべての阻害剤においてＣ５位のアセトアミド基をイソブチルアミド基に置換することが、全体の効力を高める結果となることが明らかとなった。例によって、最も効果のある阻害剤１０を除き、一桁近くの向上が観察された。さらに、ＩＣ５０値の分析は、最も良い阻害剤である８及び１０における効力の増大は主にＣ４位の置換基の導入によるものでありＣ５位の置換基の貢献度合いはより低いものであるという考えをサポートする。この考えは、イソブチルアミド基の相対的な相互作用が低いもの（～５０％）であった一方で、４－フェニルトリアゾール部位（moiety）のプロトンが、ｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体中の１０の結合イベントに最大の貢献を示した阻害剤１０の、エピトープマップを導くＳＴＤ ＮＭＲデータ解析によっても、実証される。
阻害剤１０によるＮＩ及びＨＩの両者のＨＮ機能の強力な阻害作用は、化合物がウイルスにとって極めて重要なＨＮタンパク質に作用し、ｈＰＩＶ－３に対し抗ウイルス効果を発揮することを示している。この知見は、阻害剤のトリアゾールのＣ４位の芳香族部位（moiety）が明らかに同一のＳＴＤ ＮＭＲシグナル強度を示す、元のままのウイルスまたは組換えＨＮタンパク質との複合体中の１０に対するＳＴＤ ＮＭＲの実験により、さらにサポートされる。さらに、ｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体を形成している１０に対して、計算した結合エピトープ（binding epitope）はＭＤシミュレーションと非常に一致しており、Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎ誘導体のＨ３及びＣ４位のトリアゾロ基（triazolo moiety）のフェニルプロトンと、タンパク質表面との密着をはっきりと予想させるものであった。
さらに、in situ ELISAの結果はＮＩ及びＨＩアッセイのデータとよく一致している。ＬＬＣ－ＭＫ２細胞ベースアッセイは、１０は、ＮＩ及びＨＩタンパク質ベースアッセイと比べ、細胞レベルにおいてより一層効果があることを示している。この細胞ベースアッセイにおいて、１０は６の～２６倍以上効果がある一方で、タンパク質阻害アッセイではたった～８倍、ＮＩ及びＨＩアッセイでは１１倍をそれぞれ示した。これにより、１０はタンパク質のノイラミニダーゼ及びヘマグルチニン活性の両方の阻害により、効果的な相乗作用を得るという、二重の効果を有し作用する阻害剤であることを強く示唆している。
これは、ヘマグルチニン活性に対し有意に低い阻害を示す結果、より低い相乗効果となる既知の阻害剤６とは、対照的である。最終的に、ヒト細胞株において阻害剤１０と６とを比較した際のウイルス増殖阻害の程度は、デザインされたリガンド１０が優れていることをはっきりと示している。
第１態様の化合物が、ｈＰＩＶ－３ ＨＮのみのものよりも効力があることは評価されるだろう。実験セクションにおいて示すように、多様な化合物の構造は、異なるｈＰＩＶまたは一般的なインフルエンザノイラミニダーゼの活性に合わせられることがわかった。
例えば、本明細書に開示されているジフルオロ誘導体は、ある一定のインフルエンザノイラミニダーゼに対して選択的な有効性を示す場合がある。
特に、ＬＬＣ－ＭＫ２細胞におけるｈＰＩＶ－３ウイルスの感染と増殖を防ぐ能力（capacity）を比較するために行った阻害アッセイにおいて、化合物１０は９４％の減少（reduction）であるのに対し先行技術文献の化合物ＢＣＸ－２７９８（基準化合物６）は１４％の減少であり、化合物１０は先行技術文献の化合物ＢＣＸ－２７９８（基準化合物６）よりも、はるかに良い阻害剤であることのみならず、第１態様の他の化合物についても、１０又は６を上回る効果が示された。例えば、発明者らは化合物IE1398-33及びIE927-99を設計し、合成し、そして生物学的に評価した。これらの化合物の、ｈＰＩＶ－３ ＨＮに対するＩＣ５０値は、それぞれ１．９７マイクロモルと０．２７マイクロモルであった。これは、先行技術文献の基準化合物ＢＣＸ－２７９８に対し、１～２桁分の向上を示す。これらの結果は、本願の化合物の驚くべきレベルの有効性を明示し、それ故に、本願の構造から導いた阻害剤の設計の価値が証明される。
本発明の第２態様によると、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物、若しくはその薬学的に許容され得る塩と、薬学的に許容され得る担体、希釈剤および／又は賦形剤との、効果的な量を構成する医薬組成物を提供する。
好適には、医薬組成物はウイルス感染による疾病、疾患または症状の治療または予防のためである。
医薬組成物は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物のうち１以上を含んでもよい。組成物が１以上の化合物を含む場合、化合物はどのような割合であってもよい。組成物はさらに、既知の共活性剤（co-actives）、送達担体（delivery vehicles）またはアジュバント（adjuvant）を含んでいてもよい。
治療の対象となる疾病、疾患または症状を抑制または改善するために十分な量の医薬組成物中に式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物が存在している。化合物およびそれらを含む医薬組成物の適切な剤形（dosage forms）や比率は当業者によって容易に決定されるであろう。
剤形は、錠剤、散液（dispersions）、懸濁剤（suspensions）、注射剤（injections）、溶液（solutions）、シロップ、トローチ剤、カプセル剤等を含んでいてもよい。これらの剤形には、結合組織が分解される部位における補充を確保するために特異的な、または改良された設計の注射用装置または移植用装置を含んでいてもよい。ヒドロゲルは好ましい送達形態（delivery form）である。
本願発明の第３態様に属する、治療対象のウイルス感染による疾病、疾患または症状の治療方法は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物、若しくはその薬学的に有効な塩と、第２態様の医薬組成物とのいずれかを治療対象へ投与する工程を含む。
本願発明の第４態様は、治療対象のウイルス感染による疾病、疾患または症状の治療に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物、若しくはその薬学的に有効な塩と、第２態様の医薬組成物とのいずれかの使用を提供する。
本願発明の第５態様は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物、若しくはその薬学的に有効な塩の、ウイルス感染による疾病、疾患または症状の治療のための薬剤の製造における使用を提供する。
第３、第４及び第５態様の一実施形態において、疾病、疾患または症状はインフルエンザウイルス又はパラインフルエンザウイルスの感染によるものである。
感染は、インフルエンザウイルスＡ型、Ｂ型またはＣ型もしくはパラインフルエンザウイルスによるものであってもよい。
一実施形態において、パラインフルエンザはｈＰＩＶ－１型、２型、３型または４型ウイルスである。
好ましくは、治療対象は飼育動物もしくは家畜、またはヒトのいずれかである。
本願発明の第６態様は、酵素と、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩａ）の化合物とを接触させる工程を含み、ウイルスのヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼ酵素の活性を調節する方法を提供するものである。
好ましくは、調節はウイルスのヘマグルチニン及び／又はノイラミニダーゼ酵素の阻害に関与する。
下記の実験セクションでは発明にかかる化合物の幾つかの特徴と抗ウイルス活性についてより詳細に説明する。その目的は、本発明における化合物の、幾つかの特定の実施形態と、その有効性についての説明であり、本発明は何ら制限されない。
［実験］
＜計算化学＞
分子動力学シミュレーションは、力場（force field）のパラメータセット５４Ａ４（参考文献３９）を使用し、ソフトウェアであるＧＲＯＭＯＳによって行われた。初期座標は、４（図１）を伴う複合体におけるｈＰＩＶ－３ＨＮのＸ線構造（ＰＤＢアクセッションコード１Ｖ３Ｅ）から取得された。化合物８は結晶構造より、ザミナビル（４）を構成する環に重ねられた。８のパラメータは、ＧＲＯＭＯＳ力場（force field）内の既存のパラメータと同様に生成された。１Ｖ３Ｅ－４及び１Ｖ３Ｅ－８のための最終的な複合系における原子の数はそれぞれ７８２５３及び７８０８４であった。アミノ酸残基のイオン化状態はｐＨ７．０に設定された。ヒスチジン側鎖はＮε原子がプロトン化された。Ｘ線構造と関連した水分子は除去され、以前に発表されている方法論と一致する、単純点電荷（ＳＰＣ）水モデル及び周期境界条件を用いて明確な溶媒和に置き換えられた。シミュレーションにおいて、タンパク質原子と周期ボックス（periodic box）の角形壁面（square walls）との間の最小距離が１．４ｎｍである切頂八面体内において、タンパク質周辺に水分子が追加された。すべての結合はＳＨＡＫＥアルゴリズムを用いて、１０－４の幾何公差に制約された。
２．５×１０４ｋJ mol-1 nm-2の力の定数（force constant）を伴う調和相互作用（harmonic interaction）を用いる溶質の原子を位置的に制限する一方で、溶質・溶媒間の接触を緩和するために系に対して最急降下法（steepest-descent）のエネルギー最小化法を行った。次に、すべての残留ひずみ（residual strain）を除去するために、制限の無い最急降下法のエネルギー最小化法を系に対して行った。ステップあたりのエネルギー変化が0.1 ｋＪ mol-1より小さくなった時、エネルギー最小化は終了した。非結合の相互作用には、0.8/1.4nmのカットオフ半径のトリプルレンジ法（triple-range method）が用いられた。短距離のファンデルワールスと静電相互作用とは、荷電した基のペアリストに基づいて、各時間ステップにおいて評価された。荷電した基のペアの距離が０．８ｎｍより長く１．４ｎｍより短い、中距離のファンデルワールスと静電相互作用とは、ペアリストが更新されるポイントである５回の時間ステップ毎に評価された。より長いカットオフ半径の反応場の近似値は、７８．５の相対誘電率が用いられた。系全体の集団運動の中心は１０００回時間ステップ毎に除去された。溶媒および溶質は、別々に、０．１ｐｓの緩和時間で、２９５Ｋの恒温槽に入れ、弱く結合させた。
系は、０．５ｐｓの緩和時間、１ａｔｍの圧力層に入れ、また、０．７５１３×１０－３（ｋＪ mol-1 nm-3）-1の等温性の圧縮率（isothermal compressibility）において、また弱く結合させた。溶質の原子を拘束するハーモニックポジション（harmonic position）及び力の定数（force constants）２．５×１０４ｋＪmol-1 nm-2、２．５×１０３ｋＪmol-1 nm-2、２．５×１０２ｋＪmol-1 nm-2、２．５×１０１ｋＪ mol-1 nm-2で、２０ｐｓ周期のＭＤシミュレーションが行われることで、５０Ｋ、１２０Ｋ、１８００Ｋ、２４０Ｋ及び３００Ｋのそれぞれの系をさらに平衡化させた。シミュレーションはそれぞれ３０ｎｓの間、実行された。トラジェクトリー座標（trajectory coordinates）とエネルギーとは分析のために０．５ｐｓ毎に保存された。４を伴う複合体中のｈＰＩＶ－３ ＨＮのためのトラジェクトリーシミュレーションは、上述の方法と同様に行われ、分析に用いられ、８を伴う複合体中のｈＰＩＶ－３ＨＮの結果と比較された。
解析ソフトウェアのＧＲＯＭＯＳ＋＋によって解析が行われた。構造間の原子位置の二乗平均平方根偏差（RMSDs、root-mean-square differences）は、所定の原子セット（Ｎ、Ｃα、Ｃ）を用いて二次（基準、reference）構造の上のある構造の回転運動（rotation）および並進運動（translational）の原子位置の最小二乗フィッティング（least-squares fit）により２１６ループ（２１０～２２１残基）を構成する残基が計算された。原子位置の根平均二乗ゆらぎ（RMSFs, root-mean-square fluctuations）は、基準のトラジェクトリー構造のＣα原子の回転運動および並進運動の原子位置の最小二乗フィッティングの実行によるシミュレーションの３０ｎｓの周期の平均として計算された。２１６ループ（２１０～２２１残基）を含むすべての残基のＲＭＳＦｓが計算された。シミュレーションのための還元型（reduced）の代表的な構造のアンサンブルを得るために、ＲＭＳＤに基づく立体構造のクラスター化が行われた。
シミュレーションの１０ｐｓ毎に抽出された構造は、全体の回転運動および並進運動を取り除くためにＣα骨格原子と重ねられた。結合部位に並ぶ残基（１９０～１９８、２１０～２２１、２５１～２５９、２７４～２８０、３２０～３２６、３３４～３３９、３６９～３７７、４０７～４１３、４７４～４８０、５２９～５３３残基）のすべての原子のクラスター化は、異なるシミュレーションのトラジェクトリーからのｈＰＩＶ－３ ＨＮタンパクの相対的な構造の集団を比較するために行われた。適用された類似基準は０．１３ｎｍにおいてカットオフしたそれらの残基のすべての原子のＲＭＳＤである。ＭＤシミュレーションの３０ｎｓの結果より最終構造を得た。ｈＰＩＶ－３ ＨＮと阻害剤８及び１０との間の相互作用エネルギーはエネルギートラジェクトリー（energy trajectory）といわれるが、ＧＲＯＭＯＳによって個々のトラジェクトリーファイルとして得られたエネルギー、自由エネルギーλ導関数（free-energy λ-derivatives）、及びブロック平均とを用いて計算される。これらのファイルから、非結合の寄与、すなわちファンデルワールス相互作用と及びクーロン相互作用等、のそれぞれの相互作用エネルギー値を得るためにene_anaプログラムが使用された。このようにして、リガンドとタンパクとの間のこれらの寄与は、シミュレーション及び相互エネルギーの計算の結果として得られたエネルギートラジェクトリーから抽出された。無限大のブロックサイズにまで外挿される、拡大するサイズについてのブロック平均により誤差の評価は計算された。ＬＩＧＰＬＯＴを用いて、親水性相互作用が分析され、阻害剤１０とｈＰＩＶ－３ ＨＮとの間の相互作用のマップが作られた。選択された構造に対して空洞開口の範囲を測定するために、ＰＯＶＭＥを用いて、この空洞の体積が分析された。重要なことには、シミュレーションの回数を８０ｎｓまで増やすと、結果は示されたデータと完全に一致する。
＜Ｃ４位に嵩高い置換基を伴うＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎに基づくｈＰＩＶ－３ ＨＮ阻害剤のモデルとしての化合物８＞
８との複合体における可能なｈＰＩＶ－３ ＨＮ結晶構造（ＰＤＢアクセッションコード１Ｖ３Ｅ）のシミュレーションは、ザミナビル（４）の結合構造に関するタンパクの動的挙動の解析を可能にした。ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－４及び－８の複合体のシミュレーションから、２１６ループのｈＰＩＶ－３ ＨＮの骨格原子（Ｃα、Ｎ、Ｃ）の原子位置の平均二乗偏差（root-mean-square deviations、RMSDs）は、ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－８複合体の場合の結晶構造から、２１６ループがより有意な偏差の影響を生じることを示した。ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－８複合体のシミュレーションにおいては、０．５ｎｍより大きいＲＭＳＤ値が観察された一方で、ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－４複合体に対しては、その構造にはさほど偏差が見られなかった（０．４ｎｍ）。この考えは、２１６ループ（２０５～２２５残基）と関連する残基の骨格のＣα原子の観察による根平均二乗ゆらぎ（RMSFs, root-mean-square fluctuations）によってさらに裏付けられる。２１６ループ（２１５～２２０）の後半の残基で、根平均二乗ゆらぎの増加が観察され、その中で値が～０．３ｎｍに達しており、開始時のｈＰＩＶ－３ ＨＮ基準（reference）のＸ線構造（ＰＤＢアクセッションコードＩＶ３Ｅ）と比較し、そのドメインにおける実質的な立体構造の再構成が起こることを示している。表１は２１６ループを構成する残基のＲＭＳＦ値の抜粋を示している。
Figure 0007206241000054
表１：１Ｖ３Ｅ－４及び１Ｖ３Ｅ－８のシミュレートシステムのための２１６ループを構成する抜粋された残基の根平均二乗ゆらぎ（RMSFs, root-mean-square fluctuations）、ナノメーター、基準となるＸ線構造のＩＶ３Ｅとの比較
現在の生理学的シミュレーションの条件下において、このデータは結晶構造中のループの柔軟性が著しく過小評価されていることを示しており、また、ループの柔軟性は抗パラインフルエンザウイルス薬の開発の機会を提供することを示している。ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－４複合体及びｈＰＩＶ－３ ＨＮ－８複合体のシミュレーションの比較は、８上のＣ４位の置換基がｈＰＩＶ－３ ＨＮ ２１６ループにおける顕著な動きを引き起こすことを示している。ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－４複合体及び８の１０ｎｓシミュレーションから取得した最終構造の溶媒接触可能表面プロット（solvent-accessible surface plot）から、引き起こされたループの開口を見ることが出来たことがわかった。
４及び８との複合体中のｈＰＩＶ－３ ＨＮのＭＤシミュレーションから、最も頻度の大きい立体構造のクラスターが同定され、４及び８との複合体中のｈＰＩＶ－３ ＨＮのシミュレーションから、最終立体構造の重ね合わせを作り出した。２１６ループの立体構造の違いが明瞭に見えるようになった。２１６ループの空洞は、より立体的に阻害された阻害剤８との複合体の時、より開いた立体構造を取る。一般的に、ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－８複合体のシミュレーションにおいて、より幅の大きな空洞が観察された。ｈＰＩＶ－３ ＨＮ－４複合体のシミュレーションにおいて最も頻度の高いクラスターは、ｈＰＩＶ－３―８複合体（７１７Å３）に比べわずかに小さい空洞の容積（６５４Å３）であった。
Ｃ４位に官能基を有するトリアゾールの存在下において、より嵩高いＣ５位のアシルアミノ基（moiety）が収容されるかどうかを評価するために、ｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体中の１０に対して同一の分析が行われた。この分析は、Ｃ４位に官能基を有するトリアゾールが存在する場合であっても、Ｃ５位のイソブチルアミノ基（moiety）がＣ５位結合ドメインにうまく収納されることを示している。
＜ｈＰＩＶ－３ ＨＮ複合体中の８及び１０の関連する相互作用エネルギー（relative interaction energies）＞
新規のＣ５位のアセトアミド及びＣ５位のイソブチルアミド阻害剤である８と１０のそれぞれと同様に、既知の阻害剤２に対して理論上の平均相互作用エネルギーを特定し、ｈＰＩＶ－３ ＨＮの阻害剤の結合の程度を定量化するため、ＭＤシミュレーションアプローチが用いられた。ｈＰＩＶ－３ ＨＮ（１Ｖ３Ｅ）２５の複合体中の２、８及び１０それぞれにおける平均相互作用エネルギー（Ｅavl）の値は、－６０９．３８±１０．９２ｋＪmol-1、－７３３．９６±１５．４９ｋＪmol-1及び－８２１．８８±１０．９３ｋＪmol-1であった。これらの計算は、８のアセトアミド基（moiety）と１０のイソブチルアミド基（moiety）とを置換することによって、タンパクの複合体中の阻害剤のＥavlの絶対値が著しく向上するという考えをサポートしている。したがって、１０は８に比べてより強力なｈＰＩＶ－３ ＨＮ阻害剤であると予測される。ＭＤシミュレーションによるさらなる解析と、ｈＰＩＶ－３ ＨＮの複合体中の１０の最低の（１,０７８．１３ｋＪ mol-1）相互作用エネルギー構造の抽出とによって、結合ポケットにおいて１０がいくつかの重要な相互作用を形成していることが明らかとなった（図３ｄ）。注目すべきは、リガンドのカルボン酸とトリアルギニルクラスター（Arg192、Arg424、Arg502）との間の静電的な相互作用並びにＣ７位のヒドロキシ基およびＧｌｕ２７６と、Ｃ５位のイソブチルアミドＮＨ、Ｔｙｒ３３７及びＧｌｕ４０９との間の水素結合の相互作用である。さらに、Ｃ４位およびＣ５位の結合ドメインそれぞれの、特にペプチド骨格におけるＣ４位の芳香族およびＣ５位のイソブチル官能基（functionality）の両方において、付加的な疎水性相互作用が観察された。
［化学］
＜一般的方法＞
試薬と乾燥溶媒（dry solvents）とは商業的供給源から購入し、さらなる精製は行わずに使用した。無水反応はオーブンで乾燥させたガラス器具の中において、アルゴン雰囲気中で行われた。反応は、Silica Gel 60 F254（E. Merck）でコーティングされたアルミニウムプレート上の薄層クロマトグラフィー（thin layer chromatography, TLC）によってモニターされた。展開されたプレートは、２５４ｎｍの紫外光下で観察され、ＥｔＯＨ（５％ｖ／ｖ）にＨ２ＳＯ４を混ぜた溶液に入れ可視化した後、炭化させた。蒸留した溶剤を用い、Silica Gel 60 (0.040-0.063mm)上でフラッシュクロマトグラフィーを行った。BrukerAvance 300MHz分光計により、１Ｈ及び１３ＣのＮＭＲスペクトルはそれぞれ、３００ＭＨｚ及び７５．５ｍＨｚと記録された。ケミカルシフト（δ）はperts per milllion（ｐｐｍ）を単位とし、残留溶媒のピークと関連する内部基準 [CDCl3: 7.26 (s) for 1H, 77.0 (t) for 13C; DMSO: 2.50 (pent) for 1H, 39.51 (hept) for 13C; D2O: 4.79 (s) for 1H] として報告された。２Ｄ ＣＯＳＹ及びＨＳＱＣ実験は課題をサポートするために行われた。低分解能質量スペクトル（Low-resolution mass spectra, LRMS）は、エレクトロスプレーイオン化モードで、BrukerDaltonics Esquire 3000 ESI分光計のポジティブモードを用いて記録された。高分解能質量分析法（High-resolution mass spectrometry, HRMS）では、保護された最終誘導体または脱保護された最終誘導体のどちらについても記録され、Apollo ESIソースを装着したthe University of Queensland FTMS Facility on a BrukerDaltonics Apex III 4.7e Fourier Transform micrOTOF-Q70 MS or by the Griffith University FTMS Facility on a BrukerDaltonics Apex III 4.7e Fourier Transform MSにて実施された。
脱保護された最終のシアル酸誘導体は、２％アセトニトリル水溶液を溶媒としてGracePure（商標） SPE C18-Aq (5000 mg/20 mL)カラムによって精製された。クロマトグラフィーによる精製後のすべての合成中間体の純度は、１Ｈ及び１３ＣのＮＭＲ分光法によって９０％より高いと測定され、また、新規の最終産物である７～１０と同様に、スクリーニングの目的で合成された基準化合物（２、３、５及び６）の純度は９５％以上であると測定された。
＜合成＞
中間体である１１、１２及び１７～２４の合成と基準阻害剤である２、３、５及び６の合成とは文献に記載の方法によって達成された。本明細書に記載のすべての化合物及び合成された化合物を得ることを可能にするスキーム１及びスキーム２は、一般的な方法で試みられた。
１８及び１９の合成のための一般的な方法：無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中に入れた、１７または１１（０．４２ｍｍｏｌ）と、Ｂｏｃ２Ｏ（２７５ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）と、ＤＭＡＰ（５０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）との混合物を、アルゴン雰囲気下、６０℃でオーバーナイト（ｏ／ｎ）撹拌した。室温（ｒｔ）まで冷やした後、溶媒を真空下で蒸発させ、残留物を、酢酸エチル：ヘキサン（１：２）を溶媒としたシリカゲルカラムを用いたクロマトグラフ分離のためにジクロロメタン（ＤＣＭ）中に入れ、精製した１８（１７０ｍｇ、７１％）と１９（２２５ｍｇ、９６％）とを得た。
２０及び２の合成のための一般的な方法：ナトリウム金属（０．３９ｍｍｏｌ、９ｍｇ）を無水ＭｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解することによって新たに準備したＮａＯＭｅのメタノール溶液に、化合物１８又は１９（０．２６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物は室温（ｒｔ）で１時間撹拌され、Amberlite（商標）IR-120（Ｈ＋）樹脂（to pH=5）によってクエンチされた。樹脂は濾別され、ＭｅＯＨ（５ｍＬ×３）によって洗浄され、濾液と洗浄液との混合液は真空下で蒸発させた。残留物はピリジン（２ｍＬ）に再溶解され、無水酢酸（０．５ｍＬ）を加えた。反応混合物は、室温、アルゴン雰囲気下でオーバーナイト（ｏ／ｎ）撹拌され、溶媒と過剰なＡｃ２Ｏは真空下で取り除かれた。最後に、残留物を酢酸エチル：ヘキサン（１：２）を溶媒としたシリカゲルカラムを用いたクロマトグラフ分離のためにＤＣＭ中に入れ、精製した２０（１１２ｍｇ、８１％）と２１（８４ｍｇ、６３％）とを得た。
２２及び２３の合成のための一般的な方法：２０または２１（０．１５ｍｍｏｌ）を含む無水ＤＣＭ（２ｍＬ）の溶液にＴＦＡ（２３０μＬ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温、アルゴン雰囲気下でオーバーナイト（ｏ／ｎ）撹拌した。反応物をＤＣＭ（２０ｍＬ）によって希釈し、炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）飽和水溶液（２０ｍＬ）でクエンチした。ＤＣＭ層は水とブライン（brine）によって洗浄し、無水硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）によって乾燥させた。乾燥した有機溶媒は真空下で濃縮させ、適した溶媒系を用いシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、精製した２２（５８ｍｇ、９０％）と２３（５３ｍｇ、８５％）とを得た。
２４及び１２の合成のための一般的な方法：アルゴン雰囲気下の２２または２３（０．１１６ｍｍｏｌ）を含むＤＣＭ（２ｍＬ）の溶液に、トリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）（８２μＬ、０．５８ｍｍｏｌ）と塩化イソブチリル（isobutyryl chloride）（１８μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）とを加えた。混合物を室温で４時間撹拌させ、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）を溶媒としたクロマトグラフ分離のためにシリカゲルカラムに添加し、精製した２４（５０ｍｇ、８４％）と１２（５１ｍｇ、９１％）とを得た。
５及び６の合成のための一般的な方法：２２または２３（０．０８ｍｍｏｌ）の化合物を含む、０℃の、ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏの１：１の混合液（２ｍＬ）の懸濁液がｐＨ１４になるまでＮａＯＨ溶液（１．０Ｍ）を滴下した。温度を徐々に室温まで上げ、混合物は室温にてオーバーナイトで、撹拌された。溶液はAmberlite（商標）IR-120（Ｈ＋）樹脂（to pH=5）によって酸性化され、濾過され、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１０ｍＬ）によって洗浄された。濾液と洗浄液との混合溶液は真空下において濃縮され、残留物は蒸留水（５ｍＬ）によって希釈され、化合物をそのナトリウム塩に変換するため、０．０５ＭのＮａＯＨを用いてｐＨ＝８．０に調整された。化合物は、２％のアセトニトリル水溶液を溶媒とするC18-GracePure（商標）カートリッジによって精製され、ふわふわした白い粉状の、精製した５（２６ｍｇ、９４％）と６（２４ｍｇ、８２％）とを得た。
１３～１６の合成のための一般的な方法：適切な、４－アジド－４－デオキシ－Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎ誘導体（１１または１２、０．２２ｍｍｏｌ）及び対応するエチニル誘導体（ethynyl derivative）（０．３３ｍｍｏｌ）を、tert－ブタノール：Ｈ２Ｏの１：１の混合液（４ｍＬ）に溶解した。溶液に、硫酸銅（ＩＩ）五水塩（４ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を加え、次にアスコルビン酸ナトリウム（新たに準備した１Ｍの水溶液を０．１ｍＬ）を加えた。混合物を４５℃で６時間撹拌し、室温になるまで放置した。そして、ＤＣＭ（１００ｍＬ）によって混合物を希釈し、１０％のＮＨ４ＯＨ（５０ｍＬ）によって洗浄し、次にブライン（brine）（５０ｍＬ）によって洗浄した。粗組成物１３～１６を得るために、有機層を真空下で無水Ｎａ２ＳＯ４によって乾燥し濃縮させ、適した溶媒系を用いてシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。
７～１０の合成のための一般的な方法：保護されたトリアゾール誘導体１３～１６を含む、０℃の、ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏの１：１の混合液（２ｍＬ）の懸濁液に対し、ｐＨが１４になるまでＮａＯＨ溶液（１．０Ｍ）を滴下した。温度を徐々に室温まで上げ、混合物は室温でオーバーナイト撹拌された。溶液はAmberlite（商標）IR-120（Ｈ＋）樹脂（to pH=5）によって酸性化され、濾過され、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１０ｍＬ）によって洗浄された。濾液と洗浄液との混合溶液は真空下において濃縮され、蒸留水（５ｍＬ）によって希釈され、化合物をそのナトリウム塩に変換するため、０．０５ＭのＮａＯＨを用いてｐＨ＝８．０に調整された。最終的に、化合物は２％アセトニトリル水溶液を溶媒とするC18-GracePure（商標）カートリッジによって精製され、純粋な７～１０の生成物を得た。
［合成された化合物の特徴］
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－メトキシメチル［１，２，３，］トリアゾール－１－ｙｌ）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（１３）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （１３））
Figure 0007206241000055
酢酸エチル：アセトン（６：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋な１３（９０ ｍｇ， ７８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．３６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．２９ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５０ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ４．６８－４，７９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９'， Ｈ－６）， ５．４０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．４， ４．９， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．１， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．００ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．６４ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７１， ２０．７９， ２０．９１ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．８０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．３９ （Ｃ－５）， ５２．７１ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．１６ （ＯＣＨ３）， ５８．３８ （Ｃ－４）， ６２．２１ （Ｃ－９）， ６５．６８ （ＯＣＨ２）， ６７．７３ （Ｃ－７）， ７０．９０ （Ｃ－８）， ７６．７１ （Ｃ－６）， １０７．１８ （Ｃ－３）， １２１．５０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．２４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４５．９２ （Ｃ－２）， １６１．２７ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０６， １７０．２７， １７０．８１， １７０．８８ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５４９．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４ＮａＯ１１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ５４９．１８０３； ｆｏｕｎｄ， ５４９．１８０５．
メチル７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（１５）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （１５）．）
Figure 0007206241000056
酢酸エチル：アセトン（９：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋な１５（６５ ｍｇ， ７１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １．０１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．２４ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．３７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１４－４．２９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．５１ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ４．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ５．５， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．５９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８１， １９．３０ （ｉｓｏｂｕｔ－２ＣＨ３）， ２０．７４， ２０．９０ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ３５．５１ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．７９ （Ｃ－５）， ５２．６９ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．５９ （Ｃ－４）， ５８．３８ （ＯＣＨ３）， ６２．０８ （Ｃ－９）， ６５．７３ （ＯＣＨ２）， ６７．６６ （Ｃ－７）， ７０．７９ （Ｃ－８）， ７６．２４ （Ｃ－６）， １０７．０７ （Ｃ－３）， １２１．５４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．３９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４５．８２ （Ｃ－２）， １６１．３０ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１５， １７０．２３， １７０．６９ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７７．８７ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２４Ｈ３４Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５７７．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（１６）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （１６））
Figure 0007206241000057
酢酸エチル：ヘキサン（４：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋な１６（８２ ｍｇ， ８４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ０．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．２０－２．２７ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１６－４．３９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．２６－７．４３ （ｍ， ３Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－４'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ７．８１ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８３， １９．３１ （ｉｓｏｂｕｔ－２ＣＨ３）， ２０．７６， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ３５．５５ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．７４ （Ｃ－５）， ５２．７２ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．６７ （Ｃ－４）， ６２．１２ （Ｃ－９）， ６７．７２ （Ｃ－７）， ７０．８４ （Ｃ－８）， ７６．３９ （Ｃ－６）， １０７．２５ （Ｃ－３）， １１８．８４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．８３ （Ｐｈ）， １２８．４７ （Ｐｈ）， １２８．８９ （Ｐｈ）， １２９．９７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４５．８１ （Ｃ－２）， １４８．１９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．３５ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１８， １７０．２６， １７０．７１ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７８．００ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２８Ｈ３４Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６０８．９ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（７）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （７）．）
Figure 0007206241000058
収率＝８５％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．３１ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．５２－３．７１ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９ ＆ Ｈ－７）， ３．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ３．９５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．２， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３３ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ４．５６ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ５．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ８．０８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６５ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６８ （Ｃ－５）， ５７．１５ （ＯＣＨ３）， ５９．９４ （Ｃ－４）， ６３．０６ （Ｃ－９）， ６４．２２ （ＯＣＨ２）， ６８．０５ （Ｃ－７）， ６９．７１ （Ｃ－８）， ７５．３４ （Ｃ－６）， １０１．８０ （Ｃ－３）， １２３．５４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４４．０８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．４３ （Ｃ－２）， １６８．７５ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５７ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１５Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４３２．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（８）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （８））
Figure 0007206241000059
収率＝９６％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８７ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．１， ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．８９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．００ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３９ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ４'）， ７．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．２８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．７０ （Ｃ－５）， ５９．９６ （Ｃ－４）， ６３．０５ （Ｃ－９）， ６８．０３ （Ｃ－７）， ６９．６９ （Ｃ－８）， ７５．３１ （Ｃ－６）， １０１．７５ （Ｃ－３）， １２０．４１ （Ｐｈ）， １２５．６１ （Ｐｈ）， １２８．７７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２９．１０ （Ｐｈ）， １２９．２８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４７．７４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．４８ （Ｃ－２）， １６８．７５ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５８ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１９Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４６３．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１９Ｈ２２Ｎ４ＮａＯ７ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ４４１．１３８０７０； ｆｏｕｎｄ， ４４１．１４０１８９．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（９）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （９））
Figure 0007206241000060
収率＝９２％。 １Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．４６ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．３９ （ｓ， ３Ｈ，ＯＣＨ３）， ３．６５－３．７６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４９ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６０－４．６５ （ｍ， ３Ｈ， Ｈ－６， ＯＣＨ２）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ８．１８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．４３ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １８．６４ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ３５．１０ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．１９ （Ｃ－５）， ５７．２４ （ＯＣＨ３）， ５９．８６ （Ｃ－４）， ６３．０７ （Ｃ－９）， ６４．２４ （ＯＣＨ２）， ６８．１３ （Ｃ－７）， ６９．８２ （Ｃ－８）， ７５．４３ （Ｃ－６）， １０２．０２ （Ｃ－３）， １２３．６５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４４．０７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．３０ （Ｃ－２）， １６８．８１ （ＣＯＯＮａ）， １８０．６６ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１７Ｈ２５Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４５９．０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１７Ｈ２５Ｎ４Ｎａ２Ｏ８ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４５９．１４６２； ｆｏｕｎｄ， ４５９．１４５８．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（１０）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （１０））
Figure 0007206241000061
収率＝８９％。 １Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ０．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．４３ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．６０－３．７６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．２， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．５１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６２ （ｄ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ６）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４２－７．５４ （ｍ， ３Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－４'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．３６ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．３８ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １８．６５ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ３５．１０ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．２３ （Ｃ－５）， ５９．９１ （Ｃ－４）， ６３．０７ （Ｃ－９）， ６８．１５ （Ｃ－７）， ６９．７６ （Ｃ－８）， ７５．４１ （Ｃ－６）， １０１．９６ （Ｃ－３）， １２０．６６ （Ｐｈ）， １２５．６７ （Ｐｈ）， １２８．８１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２９．１６ （Ｐｈ）， １２９．３６ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４７．７１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．３２ （Ｃ－２）， １６８．８０ （ＣＯＯＮａ）， １８０．６７ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２１Ｈ２５Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ２５Ｎ４Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４９１．１５１３； ｆｏｕｎｄ， ４９１．１５１５．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－イソブチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－６）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｉｓｏｂｕｔｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－６））
Figure 0007206241000062
酢酸エチルを用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ８３２－６（９３ ｍｇ， ６６％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， １．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， １．９３ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ２．０６ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ６．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３８ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．７７ （ｄ， Ｊ ＝ １０．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０３ （ｓ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．０７ （ｂｒｓ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．４９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ２０．７４， ２０．８１， ２０．９３ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．１２， ２２．８４ （２ ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ３ ＋ ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ２８．６０ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ３４．１７ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ４８．０４ （Ｃ－５）， ５２．７６ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．６２ （Ｃ－４）， ６２．０６ （Ｃ－９）， ６７．５６ （Ｃ－７）， ７０．５５ （Ｃ－８）， ７６．５７ （Ｃ－６）， １０６．８２ （Ｃ－３）， １２０．９４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４６．０３ （Ｃ－２）， １４６．８３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．３０ （ＣＯＯＣＨ３）， １６９．９９， １７０．００ １７０．１３， １７０．７８ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２４Ｈ３４Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５６１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－イソブチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－８）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｉｓｏｂｕｔｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－８））
Figure 0007206241000063
収率＝７９％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， １．８１－１．８６ （ｍ， ４Ｈ， ＮＡｃ ＆ ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ２．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ３．５４－３．６８ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９ ＆ Ｈ－７）， ３．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ９'）， ３．９４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３３ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．８０ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．１５ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， ２１．５４ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ２８．０９ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ３３．４２ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ４８．５３ （Ｃ－５）， ５９．６５ （Ｃ－４）， ６２．９９ （Ｃ－９）， ６７．９８ （Ｃ－７）， ６９．６３ （Ｃ－８）， ７５．２９ （Ｃ－６）， １０２．０６ （Ｃ－３）， １２２．０１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４７．７４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．１２ （Ｃ－２）， １６８．８１ （ＣＯＯＮａ）， １７３．２８ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１７Ｈ２５Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４４３．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１７Ｈ２６Ｎ４ＮａＯ７ ［Ｍ＋１］＋ ４２１．１６９３７０； ｆｏｕｎｄ， ４２１．１７００９１．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（４－ヒドロキシメチルフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９３２－１０）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（４－ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９３２－１０））
Figure 0007206241000064
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ） δ １．８６ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ６．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６０－４．７４ （ｍ， ３Ｈ， Ｈ－９'， ＣＨ２）， ４．８０ （ｄ， Ｊ ＝ １０．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．８， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９３ （ｄ， Ｊ ＝ １０．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．７４ （ｂｒｓ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ７．９６ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ２０．７４， ２０．８５， ２０．９８ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．９０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．３１ （Ｃ－５）， ５２．８３ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．４９ （Ｃ－４）， ６２．１９ （Ｃ－９）， ６４．６６ （ＣＨ２）， ６７．７２ （Ｃ－７）， ７０．９３ （Ｃ－８）， ７６．７８ （Ｃ－６）， １０７．１２ （Ｃ－３）， １１９．００ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．９１ （Ｐｈ）， １２７．４７ （Ｐｈ）， １２８．６１ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４１．５９ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．０１ （Ｃ－２）， １４７．６５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．３７ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１３， １７０．４１， １７０．９２， １７１．２６ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６１１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（４－ヒドロキシメチルフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－１２）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（４－ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－１２））
Figure 0007206241000065
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８５ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．５４－３．７１ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．８６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ３．９６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３７ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５４ （ｄ， Ｊ ＝ １０．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ４．６２ （ｓ， ２Ｈ， ＣＨ２）， ５．５０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．３８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．７８ （Ｃ－５）， ６０．０４ （Ｃ－４）， ６３．１２ （Ｃ－９）， ６３．５５ （ＣＨ２）， ６８．１１ （Ｃ－７）， ６９．７７ （Ｃ－８）， ７５．３９ （Ｃ－６）， １０１．７８ （Ｃ－３）， １２０．５３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．９０ （Ｐｈ）， １２８．０６ （Ｐｈ）， １２８．７７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４０．８０ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４７．６０ （Ｃ－２）， １５０．５７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６８．７７ （ＣＯＯＮａ）， １７３．６６ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２３Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９３．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２４Ｎ４ＮａＯ８ ［Ｍ＋１］＋ ４７１．１４８６３５； ｆｏｕｎｄ， ４７１．１４７９７３．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－１３）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－１３））
Figure 0007206241000066
酢酸エチル：アセトン（６：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ８３２－１３（６７ ｍｇ， ５８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．３６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．２９ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５０ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ４．６８－４．７９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９'， Ｈ－６）， ５．４０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．４， ４．９， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．１， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．００ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．６４ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７１， ２０．７９， ２０．９１ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．８０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．３９ （Ｃ－５）， ５２．７１ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．１６ （ＯＣＨ３）， ５８．３８ （Ｃ－４）， ６２．２１ （Ｃ－９）， ６５．６８ （ＯＣＨ２）， ６７．７３ （Ｃ－７）， ７０．９０ （Ｃ－８）， ７６．７１ （Ｃ－６）， １０７．１８ （Ｃ－３）， １２１．５０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．２４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４５．９２ （Ｃ－２）， １６１．２７ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０６， １７０．２７， １７０．８１， １７０．８８ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５４９．１［Ｍ＋Ｎａ］＋． ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４ＮａＯ１１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ５４９．１８０３； ｆｏｕｎｄ， ５４９．１８０５．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－１７）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－１７））
Figure 0007206241000067
収率＝８５％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．３１ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．５２－３．７１ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９ ＆ Ｈ－７）， ３．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ３．９５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．２， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３３ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ４．５６ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ５．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ８．０８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６５（ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６８ （Ｃ－５）， ５７．１５ （ＯＣＨ３）， ５９．９４ （Ｃ－４）， ６３．０６ （Ｃ－９）， ６４．２２ （ＯＣＨ２）， ６８．０５ （Ｃ－７）， ６９．７１ （Ｃ－８）， ７５．３４ （Ｃ－６）， １０１．８０ （Ｃ－３）， １２３．５４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４４．０８ （Ｃ－２）， １５０．４３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６８．７５ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５７ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１５Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４３２．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（３－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－１８）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（３－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－１８））
Figure 0007206241000068

１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ４．２０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ７．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３２ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ９'）， ４．８３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．９， ５．４， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．７９－６．９２ （ｍ， ２Ｈ， ＮＨ， Ｐｈ－Ｈ－４'）， ７．２３－７．３８ （ｍ， ３Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－５'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ７．８４ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７３， ２０．７９， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．９８ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．７９ （Ｃ－５）， ５２．７４ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．３５ （Ａｒ－ＯＣＨ ３ ）， ５８．０４ （Ｃ－４）， ６２．１８ （Ｃ－９）， ６７．７４ （Ｃ－７）， ７０．７８ （Ｃ－８）， ７６．６３ （Ｃ－６）， １０７．１９ （Ｃ－３）， １１０．９４ （Ｐｈ）， １１４．４３ （Ｐｈ）， １１８．２０ （Ｐｈ）， １１８．９３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２９．９７ （Ｐｈ）， １３１．１７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．０２ （Ｃ２）， １４８．０３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６０．０２ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６１．３１ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１２， １７０．２４， １７０．８１， １７０．９９ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６１１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（３－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－２０）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（３－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－２０））
Figure 0007206241000069
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８６ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．５２－３．７４ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．７７－３．９２ （ｍ， ４Ｈ， ＯＣＨ３， Ｈ－９'）， ３．９７ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３７ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５４ （ｄ， Ｊ ＝ １０．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８４ （ｓ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．９６ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－４'）， ７．２３－７．４８ （ｍ， ３Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－５'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．３５ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７１ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．８０ （Ｃ－５）， ５５．３９ （ＯＣＨ３）， ６０．０３ （Ｃ－４）， ６３．１２ （Ｃ－９）， ６８．１１ （Ｃ－７）， ６９．７７ （Ｃ－８）， ７５．３９ （Ｃ－６）， １０１．７３ （Ｃ－３）， １１０．８９ （Ｐｈ）， １１４．５４ （Ｐｈ）， １１８．４９ （Ｐｈ）， １２０．６６ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １３０．４９ （Ｐｈ）， １３０．８５ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４７．５１ （Ｃ２）， １５０．６２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５９．２９ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６８．７７ （ＣＯＯＮａ）， １７３．６５ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２３Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９３．０ ［Ｍ＋１］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２４Ｎ４ＮａＯ８ ［Ｍ＋１］＋ ４７１．１４８６３５； ｆｏｕｎｄ， ４７１．１４８１７７．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－プロピル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－２４）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｐｒｏｐｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－２４））
Figure 0007206241000070
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， ３Ｈ， ｐｒｏｐｙｌ－ＣＨ３）， １．７３ （ｍ， ２Ｈ， ｐｒｏｐｙｌ－２'－ＣＨ２）， １．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０７ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．７７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ｐｒｏｐｙｌ－１'－ＣＨ２）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３８ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．６， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８５ （ｄ， Ｊ ＝ １０．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４２ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ６．０１ （ｓ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．１１ （ｄ， Ｊ ＝ １０．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ７．３７ （ｂｒｓ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．６８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２３Ｈ３２Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５４７．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－プロピル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－２６）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｐｒｏｐｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－２６））
Figure 0007206241000071
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ３Ｈ， ｐｒｏｐｙｌ－ＣＨ３）， １．５７－１．７６ （ｍ， ２Ｈ， ｐｒｏｐｙｌ－２'－ＣＨ２）， １．９３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．７１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， ２Ｈ， ｐｒｏｐｙｌ－１'－ＣＨ２）， ３．６２－３．７７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．２， ６．３， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．８９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１６Ｈ２３Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４２９．０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１６Ｈ２３Ｎ４Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋１］＋ ４２９．１３５７； ｆｏｕｎｄ， ４２９．１３６１．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（ピリジン－３－イル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－２５）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（ｐｙｒｉｄｉｎ－３－ｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－２５））
Figure 0007206241000072
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．４０ （ｑ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６４－４．８８ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９'）， ５．３８ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．８， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．９， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．３６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．９， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ５'）， ８．０４ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）， ８．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ４'）， ８．５４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ－６'）， ８．９６ （ｓ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ－２'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．６９， ２０．７９， ２０．９４ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．８９ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．３５ （Ｃ－５）， ５２．８１ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．５７ （Ｃ－４）， ６２．１４ （Ｃ－９）， ６７．７７ （Ｃ－７）， ７１．１７ （Ｃ－８）， ７６．８５ （Ｃ－６）， １０６．８８ （Ｃ－３）， １１９．０７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２３．８９ （Ｐｙｒ）， １２６．３３ （Ｐｙｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３３．２０ （Ｐｙｒ）， １４５．１３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４６．１７ （Ｃ２）， １４６．８８ （Ｐｙｒ）， １４９．３１ （Ｐｙｒ）， １６１．２５ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１６， １７０．４９， １７０．８０， １７０．９５ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５８２．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（ピリジン－３－イル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－２７）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（ｐｙｒｉｄｉｎ－３－ｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－２７））
Figure 0007206241000073
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９２ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６２－３．７８ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４４ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．５３ （ｍ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ－５'）， ８．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ－４'）， ８．４９－８．６０ （ｍ， ２Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ， Ｐｈｙｒ－Ｈ－６'）， ８．８７ （ｂｒｓ， １Ｈ， Ｐｙｒ－Ｈ－２'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６７ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．７７ （Ｃ－５）， ６０．１７ （Ｃ－４）， ６３．０８ （Ｃ－９）， ６８．０６ （Ｃ－７）， ６９．７３ （Ｃ－８）， ７５．３６ （Ｃ－６）， １０１．６１ （Ｃ－３）， １２１．１３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １３４．３１ （Ｐｙｒ）， １４４．６８ （Ｃ－２）， １４５．６４ （Ｐｙｒ）， １４８．４２ （Ｐｙｒ）， １５０．６５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６８．７２ （ＣＯＯＮａ）， １７３．６５ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１８Ｈ２０Ｎ５ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４６３．７ ［Ｍ＋１］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１８Ｈ２１Ｎ５ＮａＯ７ ［Ｍ＋１］＋ ４４２．１３３３１９； ｆｏｕｎｄ， ４４２．１３３３５８．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（４－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－２９）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－２９））
Figure 0007206241000074
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８８ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ４．１３－４．３０ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．６６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．６， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．８， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０１－６．１６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－３， ＮＨ）， ６．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．６１－７．８３ （ｍ， ３Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７１， ２０．７８， ２０．９０ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．９０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．４５ （Ｃ－５）， ５２．７０ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．３１ （Ｐｈ－ＯＣＨ ３ ）， ５８．１７ （Ｃ－４）， ６２．２３ （Ｃ－９）， ６７．８０ （Ｃ－７）， ７０．９２ （Ｃ－８）， ７６．８３ （Ｃ－６）， １０７．４０ （Ｃ－３）， １１４．３２ （Ｐｈ）， １１７．８８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２２．５７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２７．１３ （Ｐｈ）， １４５．９３ （Ｃ－２）， １４８．０７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５９．８７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６１．３３ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１０， １７０．２７， １７０．８１， １７０．９９ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６１１．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４（４－（４－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－３１）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－３１））
Figure 0007206241000075
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９２ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６３－３．７７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．８５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４２ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．６８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．２６ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６５ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．７５ （Ｃ－５）， ５５．３９ （ＯＣＨ３）， ６０．０１ （Ｃ－４）， ６３．０８ （Ｃ－９）， ６８．０７ （Ｃ－７）， ６９．７２ （Ｃ－８）， ７５．３５ （Ｃ－６）， １０１．８２ （Ｃ－３）， １１４．６０ （Ｐｈ）， １１９．７８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２２．４９ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２７．２１ （Ｐｈ）， １４７．６５ （Ｃ－２）， １５０．４９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５９．２３ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６８．７８ （ＣＯＯＮａ）， １７３．６２ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２３Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９２．６ ［Ｍ＋１］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２４Ｎ４ＮａＯ８ ［Ｍ＋１］＋ ４７１．１４８６３５； ｆｏｕｎｄ， ４７１．１４７４５２．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－３０）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－３０））
Figure 0007206241000076
酢酸エチル：ヘキサン（７：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ８３２－３０（８１ ｍｇ， ６２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ３．８８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ４．２０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ７．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３７ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４５ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．９， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'）， ７．０３ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．２２－７．３０ （ｍ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－４'， ＮＨ）， ８．０７ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）， ８．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．８， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－６'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７１， ２０．７６， ２０．８８ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．９０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．８４ （Ｃ－５）， ５２．６４ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．３６ （Ｐｈ－ＯＣＨ ３ ）， ５７．８３ （Ｃ－４）， ６２．２４ （Ｃ－９）， ６７．８５ （Ｃ－７）， ７０．７９ （Ｃ－８）， ７６．７５ （Ｃ－６）， １０７．７２ （Ｃ－３）， １１０．８７ （Ｐｈ）， １１８．６６ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２０．８８ （Ｐｈ）， １２２．３２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２７．３７ （Ｐｈ）， １２９．２４ （Ｐｈ）， １４３．４０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ４）， １４５．８２ （Ｃ－２）， １５５．６８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６１．４４ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０６， １７０．１９， １７０．７５， １７１．０４ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６１１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４ＮａＯ１１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ６１１．１９５９７９； ｆｏｕｎｄ， ６１１．１９６０４９．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－３７）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－３７））
Figure 0007206241000077
収率＝９１％。 １Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９１ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６３－３．７７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．８６－３．９７ （ｍ， ４Ｈ， Ｈ－９'， ＯＣＨ３）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４５ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．０８－７．１４ （ｍ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．３４－７．４９ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－４'）， ７．９２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．０， １．７ Ｈｚ， Ｈ－６'）， ８．３２ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６７ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．５９ （Ｃ－５）， ５５．３８ （ＯＣＨ３）， ５９．８１ （Ｃ－４）， ６３．０９ （Ｃ－９）， ６８．１１ （Ｃ－７）， ６９．７４ （Ｃ－８）， ７５．４０ （Ｃ－６）， １０１．９５ （Ｃ－３）， １１１．８４ （Ｐｈ）， １１７．８７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２１．００ （Ｐｈ）， １２３．１２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２７．２７ （Ｐｈ）， １３０．０５ （Ｐｈ）， １４３．２３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．３３ （Ｃ－２）， １５５．７０ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６８．８１ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５９ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２３Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９３．２ ［Ｍ＋１］＋．
メチル ７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－（２－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－２３）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－２３））
Figure 0007206241000078
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．００－１．０４ （ｍ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－２ＣＨ３）， ２．０８ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．２５－２．３４ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ３．８８ （ｓ， ３Ｈ， Ｐｈ－ＯＣＨ３）， ４．２０－４．２８ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．９９ （ｄ， Ｊ ＝ １０．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４３ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， １．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ６．０３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．１， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．１１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．３ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ６．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'）， ７．０５ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．２９ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－４'）， ８．０４ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）， ８．２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－６'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８６， １９．３４， ２０．８０， ２０．９５ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－２ＣＨ３）， ３５．４２ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ４９．３１ （Ｃ－５）， ５２．６８ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．２９ （Ｐｈ－ＯＣＨ ３ ）， ５７．１２ （Ｃ－４）， ６２．１９ （Ｃ－９）， ６７．７４ （Ｃ－７）， ７０．７５ （Ｃ－８）， ７６．３０ （Ｃ－６）， １０７．７３ （Ｃ－３）， １１０．７１ （Ｐｈ）， １１８．６８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２０．８９ （Ｐｈ）， １２２．６２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２７．５１ （Ｐｈ）， １２９．２１ （Ｐｈ）， １４３．３０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．６８ （Ｃ－２）， １５５．６８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６１．５６ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１０， １７０．２０， １７０．６８ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７８．０５（ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２９Ｈ３６Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６３９．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２９Ｈ３６Ｎ４ＮａＯ１１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ６３９．２２７２７９； ｆｏｕｎｄ， ６３９．２２５８９７．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－（２－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－３４）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－３４））
Figure 0007206241000079
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， ２．３１ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ３．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．５， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．４， ３．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ３．８５－３．９１ （ｍ， ４Ｈ， Ｈ－８， Ｐｈ－ＯＣＨ３）， ４．３９－４．５５ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－６）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．８９－７．１０ （ｍ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．２７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ８．７， ７．４， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４'）， ８．０２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．７， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．２３ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．３８， １８．５３ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－２ＣＨ３）， ３５．０９ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ４８．１８ （Ｃ－５）， ５５．３４ （ＯＣＨ３）， ５９．６６ （Ｃ－４）， ６３．０８ （Ｃ－９）， ６８．１８ （Ｃ－７）， ６９．７６ （Ｃ－８）， ７５．４４ （Ｃ－６）， １０２．１５ （Ｃ－３）， １１１．８０ （Ｐｈ）， １１７．８６ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２１．００ （Ｐｈ）， １２３．４７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２７．２１ （Ｐｈ）， １３０．０５ （Ｐｈ） ， １４３．１２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．１６ （Ｃ－２）， １５５．７０ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６８．８４ （ＣＯＯＮａ）， １８０．６４ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２２Ｈ２８Ｎ４Ｏ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９９．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ２８Ｎ４ＮａＯ８ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４９９．１７９９３５； ｆｏｕｎｄ， ４９９．１７９９４３．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－４５）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－４５））
Figure 0007206241000080
酢酸エチル：ヘキサン（５：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ８８９－４５（８８ ｍｇ， ７０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．７９ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．４２ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．６， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４２ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．１， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０４ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．２０－７．４２ （ｍ， ４Ｈ， ＮＨ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－４'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．２， １．３ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ７．８８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７０， ２０．８０， ２０．９０ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．８５ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．２６ （Ｃ－５）， ５２．７１ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．４１ （Ｃ－４）， ６２．２６ （Ｃ－９）， ６７．８０ （Ｃ－７）， ７０．９７ （Ｃ－８）， ７６．９５ （Ｃ－６）， １０７．３７ （Ｃ－３）， １１８．７６ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．７７ （Ｐｈ）， １２８．５１ （Ｐｈ）， １２８．９１ （Ｐｈ）， １２９．８５ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４５．９５ （Ｃ－２）， １４８．１３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．３２ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０４， １７０．３０， １７０．８４， １７０．９９ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２６Ｈ３０Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５８１．０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ３０Ｎ４ＮａＯ１０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ５８１．１８５４１４； ｆｏｕｎｄ， ５８１．１８４７２４．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－５２）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－５２））
Figure 0007206241000081
収率＝９６％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８７ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．１， ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．８９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．００ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３９ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ４'）， ７．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．２８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．７０ （Ｃ－５）， ５９．９６ （Ｃ－４）， ６３．０５ （Ｃ－９）， ６８．０３ （Ｃ－７）， ６９．６９ （Ｃ－８）， ７５．３１ （Ｃ－６）， １０１．７５ （Ｃ－３）， １２０．４１ （Ｐｈ）， １２５．６１ （Ｐｈ）， １２８．７７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２９．１０ （Ｐｈ）， １２９．２８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４７．７４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．４８ （Ｃ－２）， １６８．７５ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５８ （ＮＨＣＯＣＨ３）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１９Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４６３．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１９Ｈ２２Ｎ４ＮａＯ７ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ４４１．１３８０７０； ｆｏｕｎｄ， ４４１．１４０１８９．
メチル７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９２７－５７）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９２７－５７））
Figure 0007206241000082
酢酸エチル：アセトン（９：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ９２７－５７（６０ ｍｇ， ６６％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １．０１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．２４ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．３７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１４－４．２９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．５１ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ４．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ５．５， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．５９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８１， １９．３０， ２０．７４， ２０．９０ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ， ｉｓｏｂｕｔ－２ＣＨ３）， ３５．５１ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．７９ （Ｃ－５）， ５２．６９ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．５９ （Ｃ－４）， ５８．３８ （ＯＣＨ３）， ６２．０８ （Ｃ－９）， ６５．７３ （ＯＣＨ２）， ６７．６６ （Ｃ－７）， ７０．７９ （Ｃ－８）， ７６．２４ （Ｃ－６）， １０７．０７ （Ｃ－３）， １２１．５４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．３９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４５．８２ （Ｃ－２）， １６１．３０ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１５， １７０．２３， １７０．６９ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７７．８７ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２４Ｈ３４Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５７７．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９２７－６０）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９２７－６０））
Figure 0007206241000083
収率＝９２％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．４６ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．３９ （ｓ， ３Ｈ，ＯＣＨ３）， ３．６５－３．７６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４９ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６０－４．６５ （ｍ， ３Ｈ， Ｈ－６， ＯＣＨ２）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ８．１８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．４３ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １８．６４ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ３５．１０ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．１９ （Ｃ－５）， ５７．２４ （ＯＣＨ３）， ５９．８６ （Ｃ－４）， ６３．０７ （Ｃ－９）， ６４．２４ （ＯＣＨ２）， ６８．１３ （Ｃ－７）， ６９．８２ （Ｃ－８）， ７５．４３ （Ｃ－６）， １０２．０２ （Ｃ－３）， １２３．６５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４４．０７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．３０ （Ｃ－２）， １６８．８１ （ＣＯＯＮａ）， １８０．６６ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１７Ｈ２５Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４５９．０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１７Ｈ２５Ｎ４Ｎａ２Ｏ８ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４５９．１４６２； ｆｏｕｎｄ， ４５９．１４５８．
メチル７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－イソブチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－５－イソブチルアミド－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９２７－５８）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｉｓｏｂｕｔｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９２７－５８））
Figure 0007206241000084
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， ０．９６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， １．００ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， １．９０ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．２２ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ２．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１３－４．３６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ５．４， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．１， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．４１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．３２ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８３， １９．２９， ２０．７６， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ＋ ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－２ＣＨ３）， ２２．２３ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， ２８．７０ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ３４．６８ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ３５．５５ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ４８．４８ （Ｃ－５）， ５２．６８ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．４７ （Ｃ－４）， ６２．１１ （Ｃ－９）， ６７．６９ （Ｃ－７）， ７０．８９ （Ｃ－８）， ７６．４４ （Ｃ－６）， １０７．５３ （Ｃ－３）， １２０．３６ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．５６ （Ｃ－２）， １４７．５３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．４０ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１５， １７０．２４， １７０．７０ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７７．７４ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２６Ｈ３８Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５８９．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４（４－イソブチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－５－イソブチルアミド－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－ｉｓｏｂｕｔｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ）
Figure 0007206241000085
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， １．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， １．９２ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ２．４３ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ２．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ３．６２－３．７４ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４７ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５６ （ｄ， Ｊ ＝ １１．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．８８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．４５ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， １８．６１ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， ２１．３１ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－２ＣＨ３）， ２８．１７ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ）， ３３．５４ （ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ＣＨ２）， ３５．１２ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ４８．０９ （Ｃ－５）， ５９．５３ （Ｃ－４）， ６３．０７ （Ｃ－９）， ６８．１４ （Ｃ－７）， ６９．７８ （Ｃ－８）， ７５．４７ （Ｃ－６）， １０２．３０ （Ｃ－３）， １２１．９９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４７．８２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．０５ （Ｃ－２）， １６８．８８ （ＣＯＯＮａ）， １８０．４６ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ１９Ｈ２９Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４７１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋， ４４９．２； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１９Ｈ２９Ｎ４Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４７１．１８２６； ｆｏｕｎｄ， ４７１．１８２３．
メチル ７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９８４－４）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９８４－４））
Figure 0007206241000086
酢酸エチル：ヘキサン（４：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ９８４－４（７２ ｍｇ， ７４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ０．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．２０－２．２７ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１６－４．３９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．２６－７．４３ （ｍ， ３Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－４'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．８１ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８３， １９．３１， ２０．７６， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ， ｉｓｏｂｕｔ－２ＣＨ３）， ３５．５５ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．７４ （Ｃ－５）， ５２．７２ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．６７ （Ｃ－４）， ６２．１２ （Ｃ－９）， ６７．７２ （Ｃ－７）， ７０．８４ （Ｃ－８）， ７６．３９ （Ｃ－６）， １０７．２５ （Ｃ－３）， １１８．８４ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．８３ （Ｐｈ）， １２８．４７ （Ｐｈ）， １２８．８９ （Ｐｈ）， １２９．９７ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４５．８１ （Ｃ－２）， １４８．１９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．３５ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１８， １７０．２６， １７０．７１ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７８．００ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２８Ｈ３４Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６０８．９ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（４－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９８４－５）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９８４－５））
Figure 0007206241000087
収率＝８９％。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ０．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．４３ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．６０－３．７６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．２， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．５１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６２ （ｄ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ６）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４２－７．５４ （ｍ， ３Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－３'， Ｐｈ－Ｈ－４'， Ｐｈ－Ｈ－５'）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ－２'， Ｐｈ－Ｈ－６'）， ８．３６ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．３８ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １８．６５ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ３５．１０ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．２３ （Ｃ－５）， ５９．９１ （Ｃ－４）， ６３．０７ （Ｃ－９）， ６８．１５ （Ｃ－７）， ６９．７６ （Ｃ－８）， ７５．４１ （Ｃ－６）， １０１．９６ （Ｃ－３）， １２０．６６ （Ｐｈ）， １２５．６７ （Ｐｈ）， １２８．８１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２９．１６ （Ｐｈ）， １２９．３６ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４７．７１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．３２ （Ｃ－２）， １６８．８０ （ＣＯＯＮａ）， １８０．６７ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）． ＬＲＭＳ ［Ｃ２１Ｈ２５Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ２５Ｎ４Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４９１．１５１３ ； ｆｏｕｎｄ， ４９１．１５１５．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－４－（４－（２－クロロフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－７０）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（４－（２－ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－７０））
Figure 0007206241000088
アセトン：ヘキサン（３：２）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１１７２－７０（７６％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ６Ｈ， ２ ＯＡｃ）， ２．０７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．２０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ７．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３０ （ｑ， Ｊ ＝ ９．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．８， ５．４， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．３， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０９ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．２６ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．８， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．３４ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．６， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．４１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．０， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．０５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．９， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．１９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７５， ２０．８０， ２０．９３ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．９４ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４９．００ （Ｃ－５）， ５２．７４ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．９２ （Ｃ－４）， ６２．１８ （Ｃ－９）， ６７．８１ （Ｃ－７）， ７０．８６ （Ｃ－８）， ７６．４８ （Ｃ－６）， １０７．１１ （Ｃ－３）， １２２．６３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２７．２２ （Ｐｈ）， １２８．６２ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２９．４４ （Ｐｈ）， １２９．８０ （Ｐｈ）， １３０．２８ （Ｐｈ）， １３１．４２ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４４．３１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４５．９６ （Ｃ－２）， １６１．３４ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．２０， １７０．２８， １７０．７９， １７１．０１ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２６Ｈ２９ＣｌＮ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６１５．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－（４－（２－クロロフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－７８）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（４－（２－ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－７８））
Figure 0007206241000089
収率＝８９％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．７３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４８ （ｔ， Ｊ ＝ １０．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．１， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．３７－７．５１ （ｍ， ２Ｈ， ２Ｐｈ－Ｈ）， ７．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．５， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．８１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．０， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．４９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６７ （Ｃ－５）， ６０．１０ （Ｃ－４）， ６３．０９ （Ｃ－９）， ６８．１０ （Ｃ－７）， ６９．７４ （Ｃ－８）， ７５．３９ （Ｃ－６）， １０１．８７ （Ｃ－３）， １２３．７８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２７．３６ （Ｐｈ）， １２８．０３ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２９．９４ （Ｐｈ）， １３０．１０ （Ｐｈ）， １３０．１９ （Ｐｈ）， １３１．５０ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４４．３７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．４１ （Ｃ－２）， １６８．７８ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５６ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１９Ｈ２０ＣｌＮ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９７．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－メチルフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－７２））
Figure 0007206241000090
アセトン：ヘキサン（４：３）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１１７２－７２（８１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．７６ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．３３ （ｓ， ３Ｈ， Ｐｈ－ＣＨ３）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ７．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３９ （ｑ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．４， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．６， ５．１， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．２， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．８６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．２， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．１６－７．３０ （ｍ， ４Ｈ， ＮＨ， ３ＰＨ－Ｈ）， ７．６０ （ｍ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．７０ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７２， ２０．８１， ２０．９３ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２１．０９ （Ｐｈ－ＣＨ ３ ）， ２２．８２ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６３ （Ｃ－５）， ５２．７３ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．０３ （Ｃ－４）， ６２．２１ （Ｃ－９）， ６７．７６ （Ｃ－７）， ７０．９３ （Ｃ－８）， ７６．７２ （Ｃ－６）， １０７．３８ （Ｃ－３）， １２１．２８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２６．１６ （Ｐｈ）， １２８．５８ （Ｐｈ）， １２８．９４ （Ｐｈ）， １２９．２３ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３０．９０ （Ｐｈ）， １３５．６４ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４５．８５ （Ｃ－２）， １４７．１５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １６１．３７ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０７， １７０．３０， １７０．８０， １７１．０６ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ３２Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５９５．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－メトキシフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－８２）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－８２））
Figure 0007206241000091
収率＝８５％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．３６ （ｓ， ３Ｈ， Ｐｈ－ＣＨ３）， ３．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ６．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４８ （ｔ， Ｊ ＝ １０．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．２９－７．４６ （ｍ， ３Ｈ， ３Ｐｈ－Ｈ）， ７．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．１９ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １９．７７ （Ｐｈ－ＣＨ ３ ）， ２１．６７ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６９ （Ｃ－５）， ６０．０６ （Ｃ－４）， ６３．０９ （Ｃ－９）， ６８．１０ （Ｃ－７）， ６９．７４ （Ｃ－８）， ７５．３９ （Ｃ－６）， １０１．９２ （Ｃ－３）， １２２．６０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２６．１７ （Ｐｈ）， １２８．９４ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２９．０１ （Ｐｈ）， １２９．０３ （Ｐｈ）， １３０．７６ （Ｐｈ）， １３６．４５ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．８７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．４２ （Ｃ－２）， １６８．８０ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５２ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２３Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４７７．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－（トリフルオロメチル）フェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－７４）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－７４））
Figure 0007206241000092
アセトン：ヘキサン（３：２）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１１７２－７４（９０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．７５ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１４－４．３５ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－５）， ４．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．９２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．６， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．８， ５．４， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．５， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．１， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．４８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．６１ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．７， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．１， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．７５－７．８４ （ｍ， ２Ｈ， Ｐｈ－Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７６， ２０．７９， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．７３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４９．３８ （Ｃ－５）， ５２．７４ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．４８ （Ｃ－４）， ６２．１６ （Ｃ－９）， ６７．８０ （Ｃ－７）， ７０．７９ （Ｃ－８）， ７６．２５ （Ｃ－６）， １０７．０９ （Ｃ－３）， １２２．５８ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２２．８２ （ｑ， Ｊ ＝ ５．１， ４．６ Ｈｚ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．２９ （Ｐｈ， ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．２２ （ｑ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， Ｐｈ）， １２７．６１ （ｑ， Ｊ ＝ ３０．４ Ｈｚ， ＣＦ３）， １２８．７１ （Ｐｈ）， １３１．７９ （Ｐｈ）， １３２．０９ （Ｐｈ）， １４４．４０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １４５．８４ （Ｃ－２）， １６１．３５ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．２０， １７０．２６， １７０．７５， １７１．１９ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ２９Ｆ３Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６４９．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－（トリフルオロメチル）フェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－８３）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－８３））
Figure 0007206241000093
収率＝７７％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．８， ６．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．２， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．５１ （ｔ， Ｊ ＝ １０．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．５９ （ｄ， Ｊ ＝ １０．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．６１－７．７０ （ｍ， ２Ｈ， ２Ｐｈ－ Ｈ）， ７．７５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．２３ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６１ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６２ （Ｃ－５）， ５９．９６ （Ｃ－４）， ６３．０９ （Ｃ－９）， ６８．１０ （Ｃ－７）， ６９．７３ （Ｃ－８）， ７５．４８ （Ｃ－６）， １０１．９６ （Ｃ－３）， １２２．４９ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２３．７７ （ｑ， Ｊ ＝ ３．０ Ｈｚ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １２５．２０ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．３２ （ｑ， Ｊ ＝ ５．４ Ｈｚ， Ｐｈ）， １２７．３９－１２８．５１ （ｍ， ＣＦ３）， １２９．３８ （Ｐｈ）， １３１．９９ （Ｐｈ）， １３２．２７ （Ｐｈ）， １４４．８３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．３３ （Ｃ－２）， １６８．７５ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５２ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２０Ｆ３Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５３１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（５－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－７９）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（５－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－７９））
Figure 0007206241000094
酢酸エチル：アセトン（６：１）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１１７２－７９（６８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８７ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０１ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０３ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．３４ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ２ＯＣＨ ３ ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１５－４．２７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－９）， ４．３４－４．５０ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ２Ｏ）， ４．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ５．０９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４２ （ｔｄ， Ｊ ＝ ６．２， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．３， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．０５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．９， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ７．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．４６ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７１， ２０．７６， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２３．０４ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ５０．０３ （Ｃ－５）， ５２．６０ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．２０ （Ｃ－４）， ５８．５９ （ＣＨ２ＯＣＨ ３ ）， ６１．９４ （ＣＨ ２ ＯＣＨ３）， ６２．１０ （Ｃ－９）， ６７．７４ （Ｃ－７）， ７０．２５ （Ｃ－８）， ７５．５４ （Ｃ－６）， １０７．８７ （Ｃ－３）， １３３．４８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １３４．４６ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．５０ （Ｃ－２）， １６１．５５ （ＣＯＯＣＨ３）， １６９．９６， １７０．２１， １７０．６６， １７１．５４ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５４９．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（５－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－８７）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（５－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－８７））
Figure 0007206241000095
収率＝８３％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８９ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．４０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．６５－３．７４ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－９， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．５７ （ｄ， Ｊ ＝ １０．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ４．６１－４．７３ （ｍ， ３Ｈ， Ｈ－５， ＯＣＨ２）， ５．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．８１ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４７．９７ （Ｃ－５）， ５７．８７ （ＯＣＨ３）， ５８．９２ （Ｃ－４）， ６１．３４ （ＯＣＨ２）， ６３．０８ （Ｃ－９）， ６８．０８ （Ｃ－７）， ６９．７０ （Ｃ－８）， ７５．３４ （Ｃ－６）， １０２．３６ （Ｃ－３）， １３４．６６ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １３４．７３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １５０．０２ （Ｃ－２）， １６８．７５ （ＣＯＯＮａ）， １７３．６１ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１５Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４３１．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（５－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－３９）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（５－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－３９））
Figure 0007206241000096
ヘキサン：アセトン（４：３）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１１７２－３９（８２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．７４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０２ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．０４ （ｔｄ， Ｊ ＝ １０．１， ７．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．２１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．５１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ５．０５ （ｄ， Ｊ ＝ １０．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３１－５．４６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－８）， ５．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．０９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．３０－７．３２ （ｍ， ２Ｈ， ２Ｐｈ－Ｈ）， ７．４７－７．５３ （ｍ， ３Ｈ， ３Ｐｈ－Ｈ）， ７．５８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７３， ２０．７９， ２０．８９ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２３．０３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ５０．８５ （Ｃ－５）， ５２．５８ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５４．２４ （Ｃ－４）， ６２．０１ （Ｃ－９）， ６７．６３ （Ｃ－７）， ６９．８７ （Ｃ－８）， ７４．７８ （Ｃ－６）， １０８．０２ （Ｃ－３）， １２６．０１ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２９．０７ （Ｐｈ）， １２９．２３ （Ｐｈ）， １３０．０７ （Ｐｈ）， １３２．７０ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １３９．３５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４５．４９ （Ｃ－２）， １６１．４９ （ＣＯＯＣＨ３）， １６９．７９， １７０．４０， １７０．５８， １７１．０３ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２６Ｈ３０Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５８１．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（５－フェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－４５）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（５－ｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－４５））
Figure 0007206241000097
収率＝８８％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．７２ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ６．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．８７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ３．９５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．２， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３３－４．５１ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－６）， ５．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４６－７．５６ （ｍ， ２Ｈ， ２Ｐｈ－Ｈ）， ７．５７－７．６１ （ｍ， ３Ｈ， ３Ｐｈ－Ｈ）， ７．８５ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．８８ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．８３ （Ｃ－５）， ５７．５２ （Ｃ－４）， ６３．００ （Ｃ－９）， ６７．９５ （Ｃ－７）， ６９．６４ （Ｃ－８）， ７５．０１ （Ｃ－６）， １０３．１４ （Ｃ－３）， １２５．７１ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２９．１３ （Ｐｈ）， １２９．２８ （Ｐｈ）， １３０．１０ （Ｐｈ）， １３３．０２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－４）， １３９．８８ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ－５）， １４９．９０ （Ｃ－２）， １６８．８０ （ＣＯＯＮａ）， １７３．３０ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１９Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４６２．６ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４，５－ジフェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－９０）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－９０））
Figure 0007206241000098
ヘキサン：アセトン（３：２）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１１７２－９０（７９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８２ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０３ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．７８ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１７－４．２７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－９）， ４．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ５．０７ （ｄ， Ｊ ＝ １０．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｔｄ， Ｊ ＝ ６．３， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．８， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．７９－５．９３ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－３， Ｈ－４）， ７．１３－７．２７ （ｍ， ６Ｈ， ＮＨ， ５Ｐｈ－Ｈ）， ７．２８－７．３４ （ｍ， ２Ｈ， ２Ｐｈ－Ｈ）， ７．３８－７．４８ （ｍ， ３Ｈ， ３Ｐｈ－Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７５， ２０．７６， ２０．８９ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２３．３３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ５０．５６ （Ｃ－５）， ５２．５４ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５４．９７ （Ｃ－４）， ６２．０９ （Ｃ－９）， ６７．５４ （Ｃ－７）， ６９．９３ （Ｃ－８）， ７５．１３ （Ｃ－６）， １０８．４１ （Ｃ－３）， １２６．４８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２７．１５ （Ｐｈ）， １２８．０９ （Ｐｈ）， １２８．４４ （Ｐｈ）， １２９．３１ （Ｐｈ）， １３０．１１ （Ｐｈ）， １３０．１４ （Ｐｈ）， １３０．１８ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３５．１１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ）， １４４．３５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ）， １４５．４９ （Ｃ－２）， １６１．５０ （ＣＯＯＣＨ３）， １６９．８０， １７０．２７， １７０．６３， １７１．３７ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ３２Ｈ３４Ｎ４Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６５７．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４，５－ジフェニル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１１７２－１０２）
（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１１７２－１０２））
Figure 0007206241000099
収率＝８４％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．８３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ６．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．８８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ３．９４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．４， ６．２， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．３７ （ｄ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ４．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．２， ９．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ５．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９０ （ｓ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．３６－７．５９ （ｍ， １０Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．９４ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．３３ （Ｃ－５）， ５８．４４ （Ｃ－４）， ６３．０１ （Ｃ－９）， ６７．９８ （Ｃ－７）， ６９．６１ （Ｃ－８）， ７４．９６ （Ｃ－６）， １０３．１５ （Ｃ－３）， １２６．０５ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２７．３１ （Ｐｈ）， １２８．５５ （Ｐｈ）， １２８．８０ （Ｐｈ）， １２９．２１ （Ｐｈ）， １２９．６３ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３０．２５ （Ｐｈ）， １３０．４２ （Ｐｈ）， １３５．７９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ）， １４４．６７ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ）， １４９．７１ （Ｃ－２）， １６８．６７ （ＣＯＯＮａ）， １７３．４１ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２５Ｈ２５Ｎ４ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５３９．２ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－４－（４－（２－ブロモフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１２５７－７５）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（４－（２－ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１２５７－７５））
Figure 0007206241000100
ヘキサン：アセトン（３：２）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１２５７－７５（８８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．８５ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．１６－４．２８ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－９）， ４．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．９１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ６．７， ５．６， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．８， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ６．００ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．９， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．１１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．２０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ８．１， ７．３， １．６ Ｈｚ， １Ｈ， ＰＨ－Ｈ）， ７．４０ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．５， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．０， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．９６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．９， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．２２ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．８０， ２０．９５ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２３．１３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４９．５６ （Ｃ－５）， ５２．７５ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．４９ （Ｃ－４）， ６２．１０ （Ｃ－９）， ６７．８１ （Ｃ－７）， ７０．６２ （Ｃ－８）， ７６．１０ （Ｃ－６）， １０７．０３ （Ｃ－３）， １２１．４２ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２２．６６ （Ｐｈ）， １２７．７６ （Ｐｈ）， １２９．７５ （Ｐｈ）， １３０．６５ （Ｐｈ）， １３３．５９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １４５．６１ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ４）， １４５．９４ （Ｃ－２）， １６１．３３ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１５， １７０．２９， １７０．７１， １７１．０９ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－（４－（２－ブロモフェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１２５７－８４）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（４－（２－ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１２５７－８４））
Figure 0007206241000101
収率＝８９％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９３ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６２－３．７７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９）， ３．９２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．２， ６．２， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， ９．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．３６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．９， ７．３， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．４９ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．６， １．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．８， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．７７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．１， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．４５ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７７ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６８ （Ｃ－５）， ６０．０７ （Ｃ－４）， ６３．１０ （Ｃ－９）， ６８．１１ （Ｃ－７）， ６９．７５ （Ｃ－８）， ７５．４２ （Ｃ－６）， １０１．９１ （Ｃ－３）， １２１．４９ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２３．７２ （Ｐｈ）， １２７．９０ （Ｐｈ）， １２９．１６ （Ｐｈ）， １３０．１６ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３０．４２ （Ｐｈ）， １３０．７１ （Ｐｈ）， １３３．４２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １４５．８９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ４）， １５０．３９ （Ｃ－２）， １６８．７８ （ＣＯＯＮａ）， １７３．５４ （ＮＨＣＯＣＨ３）．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－メトキシカルボニル）フェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１３９８－２５）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１３９８－２５））
Figure 0007206241000102
ヘキサン：アセトン（４：３）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋なＩＥ１３９８－２５（９１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．７６ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０２ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．７５ （ｓ， ３Ｈ， Ｐｈ－ＣＯＯＣＨ３）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ， Ｃ２－ＣＯＯＣＨ３）， ４．１７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ７．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．３１ （ｑ， Ｊ ＝ ９．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ． Ｈ－９'）， ４．７８ （ｄ， Ｊ ＝ １０．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．６， ５．４， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．０， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．２， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．３８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．５０ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．７， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ７．８４ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ２０．７２， ２０．７９， ２０．９１ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．８０ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．６５ （Ｃ－５）， ５２．２９， ５２．６６ （２ ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．９６ （Ｃ－４）， ６２．２３ （Ｃ－９）， ６７．７８ （Ｃ－７）， ７０．９１ （Ｃ－８）， ７６．６６ （Ｃ－６）， １０７．３７ （Ｃ－３）， １２２．０６ （Ｐｈ）， １２８．３５ （Ｐｈ）， １２９．８５ （Ｐｈ）， １２９．９９ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３０．１５ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １３０．３５ （Ｐｈ）， １３１．６２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １４５．７９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ４）， １４５．８９（Ｃ－２）， １６１．３６ （Ｃ２－ＣＯＯＣＨ３）， １６８．３９ （Ｐｈ－ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０７， １７０．２７， １７０．７６， １７１．０２ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２８Ｈ３２Ｎ４Ｏ１２］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６３９．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（４－（２－メトキシカルボニル）フェニル）－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ１３９８－３３）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（４－（２－ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ１３９８－３３））
Figure 0007206241000103
収率＝６８％。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．２， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．８， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．４， ６．４， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４７ （ｔ， Ｊ ＝ １０．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．５， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．４３－７．５５ （ｍ， ３Ｈ， ３ Ｐｈ－Ｈ）， ７．７５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， １．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｐｈ－Ｈ）， ８．１８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７６ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．８０ （Ｃ－５）， ５９．６９ （Ｃ－４）， ６３．１０ （Ｃ－９）， ６８．１３ （Ｃ－７）， ６９．７７ （Ｃ－８）， ７５．４０ （Ｃ－６）， １０２．２２ （Ｃ－３）， １２２．３３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １２５．００ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．４４ （Ｐｈ）， １２８．３０ （Ｐｈ）， １２８．５７ （Ｐｈ）， １２８．７９ （Ｐｈ）， １３８．９５ （Ｐｈ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．１５ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－Ｃ４）， １５０．２２ （Ｃ－２）， １６８．８５ （Ｃ２－ＣＯＯＮａ）， １７３．８０ （ＮＨＣＯＣＨ３）， １７８．１０ （Ｐｈ－ＣＯＯＮａ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２０Ｎ４Ｎａ２Ｏ９］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５２８．８ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
メチル ７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－３，４，５－トリデオキシ－３－フルオロ－５－イソブチルアミド－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－エリスロ－β－Ｌ－グルコ－ノン－２－ウロピラノシロネートフロライド（ＩＥ１２５７－２２）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－３－ｆｌｕｏｒｏ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｅｒｙｔｈｒｏ－β－Ｌ－ｇｌｕｃｏ－ｎｏｎ－２－ｕｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｏｎａｔｅ ｆｌｕｏｒｉｄｅ （ＩＥ１２５７－２２））
Figure 0007206241000104
ヘキサン／アセトン（３：２）を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、純粋な１０（５７ ｍｇ， ８１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９６－１．０１ （ｍ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－２ＣＨ３）， ２．０１ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．１３ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．２３ （ｄｑ， Ｊ ＝ １３．０， ６．８ Ｈｚ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．３６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．９０－３．９６ （ｍ， ４Ｈ， ＣＯＯＣＨ３， Ｈ－５）， ４．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．６， ４．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．２７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．６， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．５４ （ｓ， ２Ｈ， ＯＣＨ２）， ４．９９－５．３０ （ｍ， ３Ｈ， Ｈ－３， Ｈ－６， Ｈ－７）， ５．３７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ８．６， ４．６， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ６．１９－６．２９ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－４， ＮＨ）， ７．６０ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８６ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １９．３２ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２０．５９， ２０．７５， ２０．７９ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ３５．５３ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ５０．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， Ｃ－５）， ５３．６２ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．３４ （ＯＣＨ３）， ５９．００－５９．４０ （ｍ， Ｃ－４）， ６１．８６ （Ｃ－９）， ６５．５０ （ＯＣＨ２）， ６７．０８ （Ｃ－７）， ６８．２９ （Ｃ－８）， ７１．５１ （Ｃ－６）， ９０．６４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １９６．１， ３０．３ Ｈｚ， Ｃ－３）， １０５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３０．３， ２６．８ Ｈｚ， Ｃ－２）， １２４．５２ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）， １４４．８３ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １６４．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ３２．９ Ｈｚ， ＣＯＯＣＨ３）， １６９．５６ ， １７０．４１， １７０．６９ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７８．３５ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）； １９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ －１１８．６７ （ｄ， Ｊ ＝ １４．０ Ｈｚ， Ｆ－２α）， －１９７．４２ （ｄ， Ｊ ＝ １３．２ Ｈｚ， Ｆ－３β）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２４Ｈ３４Ｆ２Ｎ４Ｏ１１］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６１５．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
３，４，５－トリデオキシ－３－フルオロ－５－イソブチルアミド－４－（４－メトキシメチル－［１，２，３，］トリアゾール－１－イル）－Ｄ－エリスロ－β－Ｌ－グルコ－ノン－２－ウロピラノソニックフロライド（ＩＥ１２５７－２４）（３，４，５－Ｔｒｉｄｅｏｘｙ－３－ｆｌｕｏｒｏ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ－［１，２，３，］ｔｒｉａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｅｒｙｔｈｒｏ－β－Ｌ－ｇｌｕｃｏ－ｎｏｎ－２－ｕｌｏｐｙｒａｎｏｓｏｎｉｃ ｆｌｕｏｒｉｄｅ （ＩＥ１２５７－２４））
Figure 0007206241000105
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ０．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ２．３５ （ｐ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ３．３８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＣＨ３）， ３．５４ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ３．６１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－９）， ３．７８－３．９１ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－８， Ｈ－９'）， ４．５２－４．７６ （ｍ， ３Ｈ， ＯＣＨ２， Ｈ－６）， ４．８５ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ５．３２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ４９．５， １３．７， ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ５．７５ （ｑ， Ｊ ＝ １１．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ８．２８ （ｓ， １Ｈ， ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．１１ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， １８．６５ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ３）， ３４．８７ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＨ）， ４８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．１ Ｈｚ， Ｃ－５）， ５７．２６ （ＯＣＨ３）， ６３．１６ （Ｃ－９）， ６３．１８－６３．５８ （ｍ， Ｃ－４）， ６４．１３ （ＯＣＨ２）， ６７．８５ （Ｃ－７）， ６９．８３ （Ｃ－８）， ７３．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ３．３ Ｈｚ， Ｃ－６）， ９０．２２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １９０．９， ３２．６ Ｈｚ， Ｃ－３）， １０６．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２２４．１， ２７．８ Ｈｚ， Ｃ－２）， １２４．８９ （ｔｒｉａｚｏｌｅ－ＣＨ）， １４４．０９ （ｔｒｉｚａｏｌｅ－ｑ Ｃ）， １６９．２１ （ｄ， Ｊ ＝ ３０．７ Ｈｚ， ＣＯＯＨ）， １８０．８８ （ｉｓｏｂｕｔ－ＣＯ）； １９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ －１１２．７５ （ｄ， Ｊ ＝ １３．８ Ｈｚ， Ｆ－２α）， －１９９．４１ （ｄ， Ｊ ＝ １４．３ Ｈｚ， Ｆ－３β）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１７Ｈ２５Ｆ２Ｎ４ＮａＯ８］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４９６．８ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋１］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１７Ｈ２６Ｆ２Ｎ４Ｏ８ ［Ｍ＋１］＋ ４５３．１７９１； ｆｏｕｎｄ， ４５３．１８１０．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－４－（１－シアノ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－７６）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（１－ｃｙａｎｏ－２Ｈ－ｉｓｏｉｎｄｏｌ－２－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－７６））
Figure 0007206241000106
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．６０ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， １．８２ （ｓ， ６Ｈ， ２ ＯＡｃ）， １．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．６０ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ３．９６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．７， ７．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．１９ （ｑ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．４０－４．５０ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－６， Ｈ－９'）， ５．１６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．５， ６．０， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）； ５．２２－５．３３ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－４， Ｈ－７）， ５．８６ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨＡｃ）， ６．８４ （ｍ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ６．９９ （ｍ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．２６ （ｓ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ－３'）， ７．３７ （ｍ， ２Ｈ， Ａｒ－Ｈ－４'， Ａｒ－Ｈ－７'）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ２０．７６， ２０．９２ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２２．９７ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４９．２６ （Ｃ－５）， ５２．７９ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５８．００ （Ｃ－４）， ６２．０８ （Ｃ－９）， ６７．６７ （Ｃ－７）， ７０．８６ （Ｃ－８）， ７７．０６ （Ｃ－６）， ９３．８２ （Ａｒ－Ｃ－ＣＮ）， １０７．６６ （Ｃ－３）， １１４．６９ （ＣＮ）， １１７．５５ （Ａｒ）， １１７．７８ （Ａｒ）， １２１．１４ （Ａｒ）， １２３．２３ （Ａｒ）， １２４．６３ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．０８ （Ａｒ）， １３１．６０ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．６３ （Ｃ－２）， １６１．２９ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１７， １７０．３０， １７０．６３ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ２９Ｎ３Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５７８．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－（１－シアノ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－８０）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（１－ｃｙａｎｏ－２Ｈ－ｉｓｏｉｎｄｏｌ－２－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－８０））
Figure 0007206241000107
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９１ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６１－３．７７ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９）， ３．９４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．２， ６．２， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．５０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６４ （ｄ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．４， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９６ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．２１ （ｍ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．３７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ８．９， ６．７， １．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．６５－７．８７ （ｍ， ３Ｈ， Ａｒ－Ｈ－３'， Ａｒ－Ｈ－４'， Ａｒ－Ｈ－７'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．７７ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４９．８３ （Ｃ－５）， ５９．２０ （Ｃ－４）， ６３．０８ （Ｃ－９）， ６８．０９ （Ｃ－７）， ６９．７７ （Ｃ－８）， ７５．４１ （Ｃ－６）， ９２．０８ （Ａｒ－Ｃ－ＣＮ）， １０３．３０ （Ｃ－３）， １１５．３０ （ＣＮ）， １１７．３５ （Ａｒ）， １１９．６５ （Ａｒ）， １２１．３６ （Ａｒ）， １２２．８２ （Ａｒ）， １２４．０９ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２５．９９ （Ａｒ）， １３２．０３ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １５０．５６ （Ｃ－２）， １６８．７８ （ＣＯＯＮａ）， １７３．３６ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ２０Ｎ３ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４６０．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２０Ｎ３Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４６０．１０９１； ｆｏｕｎｄ， ４６０．１０９７．
メチル７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－４－（１－シアノ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－９２）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（１－ｃｙａｎｏ－２Ｈ－ｉｓｏｉｎｄｏｌ－２－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－９２））
Figure 0007206241000108
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ０．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， １．００ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， ２．０７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．２７ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ３．８６ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．２３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．４， ６．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．５０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．７７ （ｄ， Ｊ ＝ １０．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４０ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．６， １．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ９．４ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．１１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．６， ６．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．２８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ６．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．５０ （ｓ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ－３'）， ７．６０－７．６４ （ｍ， ２Ｈ， Ａｒ－Ｈ－４'， Ａｒ－Ｈ－７'）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．７７， １９．０５ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－２ＣＨ３）， ２０．６９， ２０．７３， ２０．９０ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ３５．５１ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ４９．１１ （Ｃ－５）， ５２．７８ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．８８ （Ｃ－４）， ６２．０５ （Ｃ－９）， ６７．６１ （Ｃ－７）， ７０．８０ （Ｃ－８）， ７７．０１ （Ｃ－６）， ９３．８３ （Ａｒ－Ｃ－ＣＮ）， １０７．５６ （Ｃ－３）， １１４．８０ （ＣＮ）， １１７．５８ （Ａｒ）， １１７．８１ （Ａｒ）， １２１．２０ （Ａｒ）， １２３．２２ （Ａｒ）， １２４．６６ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．１５ （Ａｒ）， １３１．５６ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．５０ （Ｃ－２）， １６１．３１ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１０， １７０．１４， １７０．５７ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７７．０７ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＯ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２９Ｈ３３Ｎ３Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６０６．４ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－４－（１－シアノ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－９９）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（１－ｃｙａｎｏ－２Ｈ－ｉｓｏｉｎｄｏｌ－２－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－９９））
Figure 0007206241000109
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ３）， ２．４４ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ３．６２－３．７５ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．３， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．５６－４．６６ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－６）， ５．４７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．２０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．８， ６．８， １．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．３６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ８．３， ６．８， １．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．６， １．１ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．７４－７．８７ （ｍ， ２Ｈ， ２ Ａｒ－Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １８．１６， １８．５９ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－２ＣＨ３）， ３５．０６ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＨ）， ４９．１３ （Ｃ－５）， ５９．３０ （Ｃ－４）， ６３．０７ （Ｃ－９）， ６８．２０ （Ｃ－７）， ６９．８１ （Ｃ－８）， ７５．４５ （Ｃ－６）， ９２．０８ （Ａｒ－Ｃ－ＣＮ）， １０３．３４ （Ｃ－３）， １１５．４７ （ＣＮ）， １１７．３３ （Ａｒ）， １２０．０４ （Ａｒ）， １２１．３８ （Ａｒ）， １２２．８１ （Ａｒ）， １２４．０４ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．０１ （Ａｒ）， １３２．０４ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １５０．３７ （Ｃ－２）， １６８．８７ （ＣＯＯＮａ）， １８０．３７ （ｉｓｏｂｕｔｙｒｙｌ－ＣＯ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２２Ｈ２４Ｎ３ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４８８．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ２４Ｎ３Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４８８．１４０４； ｆｏｕｎｄ， ４８８．１４００．
メチル ７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－４－（１－シアノ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－３，４，５－トリデオキシ－５－（２，２，２－トリフルオロアセトアミド）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９２７－９３）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（１－ｃｙａｎｏ－２Ｈ－ｉｓｏｉｎｄｏｌ－２－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－（２，２，２－ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｍｉｄｏ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９２７－９３））
Figure 0007206241000110
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ２．０７ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０８ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ），２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８６ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．２２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ６．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．５４ （ｑ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．８２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．６， １．９ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．４３ （ｔｄ， Ｊ ＝ ６．０， ５．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．６， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ５．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．１３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．９， ６．８， １．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．２８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ６．７， １．０ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．５２ （ｓ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ－３'）， ７．５８－７．６９ （ｍ， ２Ｈ， Ａｒ－Ｈ－４'， Ａｒ－Ｈ－７'）， ７．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ２０．５０， ２０．７１， ２０．９１ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ４９．８１ （Ｃ－５）， ５２．９３ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５７．４５ （Ｃ－４）， ６１．９３ （Ｃ－９）， ６７．４６ （Ｃ－７）， ７０．６４ （Ｃ－８）， ７６．４０ （Ｃ－６）， ９３．６１ （Ａｒ－Ｃ－ＣＮ）， １０７．１４ （Ｃ－３）， １１３．２４－１１７．０５ （ＣＦ３）， １１４．３７ （ＣＮ）， １１７．７３ （Ａｒ）， １１７．８０ （Ａｒ）， １２１．０８ （Ａｒ）， １２３．６５ （Ａｒ）， １２４．９３ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．５５ （Ａｒ）， １３１．８５ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １４６．７３ （Ｃ－２）， １５７．５６ （ｑ， ＪＣ，Ｆ ＝ ３８．８ Ｈｚ， ＣＯＣＦ３）， １６１．０３ （ＣＯＯＣＨ３）， １６９．９１， １７０．３８， １７０．７１ （３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２７Ｈ２６Ｆ３Ｎ３Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ６３２．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－４－（１－シアノ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－３，４，５－トリデオキシ－５－（２，２，２－トリフルオロアセトアミド）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ９２７－９９）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－４－（１－ｃｙａｎｏ－２Ｈ－ｉｓｏｉｎｄｏｌ－２－ｙｌ）－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－（２，２，２－ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｍｉｄｏ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ９２７－９９））
Figure 0007206241000111
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ３．６０－３．７５ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．４， ６．４， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．６４－４．７４ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－５， Ｈ－６）， ５．５７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．４， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．００ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．２１ （ｍ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．３６ （ｍ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．６９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．７７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ）， ７．８４ （ｓ， １Ｈ， Ａｒ－Ｈ－３'）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ５０．４８ （Ｃ－５）， ５８．７３ （Ｃ－４）， ６３．００ （Ｃ－９）， ６８．０８ （Ｃ－７）， ６９．６６ （Ｃ－８）， ７５．０５ （Ｃ－６）， ９１．９４ （Ａｒ－Ｃ－ＣＮ）， １０３．２１ （Ｃ－３）， １０９．６０－１１８．８８ （ＣＦ３）， １１５．０１ （ＣＮ）， １１７．３４ （Ａｒ）， １２１．３６ （Ａｒ）， １２３．０２ （Ａｒ）， １２４．１９ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １２６．２３ （Ａｒ）， １３２．１２ （Ａｒ ｑ ｃａｒｂｏｎ）， １５０．６２ （Ｃ－２）， １５８．２０ （ｑ， ＪＣ，Ｆ ＝ ３８．８ Ｈｚ， ＣＯＣＦ３）， １６８．４４ （ＣＯＯＮａ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２０Ｈ１７Ｆ３Ｎ３ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５１４．１ ［Ｍ＋Ｎａ］＋， ４９２．２； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ１７Ｆ３Ｎ３Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ５１４．０８３０； ｆｏｕｎｄ， ５１４．０８３６．
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（１Ｈ－テトラゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－８６）（Ｍｅｔｈｙｌ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（１Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－８６））
Figure 0007206241000112
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．９５ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ２．０６ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．１０ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．０２ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．２２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．６， ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．９５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３８ （ｔｄ， Ｊ ＝ ６．２， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．９， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ６．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．１１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．８， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．６７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ８．７０ （ｓ， １Ｈ， ｔｅｔｒａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ ２０．７２， ２０．７５， ２０．９１ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ２３．１３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４９．７２ （Ｃ－５）， ５２．８７ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．９２ （Ｃ－４）， ６１．９３ （Ｃ－９）， ６７．６２ （Ｃ－７）， ７０．５０ （Ｃ－８）， ７５．７０ （Ｃ－６）， １０５．１９ （Ｃ－３）， １４０．８４ （Ｔｅｔｒａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １４６．６４ （Ｃ－２）， １６１．０７ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．１７， １７０．２７， １７０．６３， １７１．５４ （ＮＨＣＯＣＨ３， ３ ＯＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１９Ｈ２５Ｎ５Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５０６．５ ［Ｍ＋Ｎａ］＋．
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－（１Ｈ－テトラゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８３２－９８）（Ｓｏｄｉｕｍ ５－ａｃｅｔａｍｉｄｏ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－４－（１Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８３２－９８））
Figure 0007206241000113
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ １．９４ （ｓ， ３Ｈ， ＮＡｃ）， ３．６５－３．７４ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９）， ３．９２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．３， ６．２， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．０， １．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．７３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ２１．６３ （ＮＨＣＯＣＨ ３ ）， ４８．４４ （Ｃ－５）， ５８．７７ （Ｃ－４）， ６３．０４ （Ｃ－９）， ６７．９９ （Ｃ－７）， ６９．６７ （Ｃ－８）， ７５．２９ （Ｃ－６）， １００．６１ （Ｃ－３）， １４３．９９ （Ｔｅｔｒａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １５０．８５ （Ｃ－２）， １６８．５３ （ＣＯＯＣＨ３）， １７３．８２ （ＮＨＣＯＣＨ３）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１２Ｈ１６Ｎ５ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ３８８．４ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１２Ｈ１６Ｎ５Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ３８８．０８３９６４； ｆｏｕｎｄ， ３８８．０８４９４５．
メチル ７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（１Ｈ－テトラゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－３６）（Ｍｅｔｈｙｌ ７，８，９－ｔｒｉ－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ－２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（１Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－３６））
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－２ＣＨ３）， ２．０１ （ｓ， ３Ｈ， ＯＡｃ）， ２．０５ （ｓ， ６Ｈ， ２ＯＡｃ）， ２．３４ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－ＣＨ）， ３．８１ （ｓ， ３Ｈ， ＣＯＯＣＨ３）， ４．０１ （ｍ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．１８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．５， ６．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９）， ４．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．６， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ５．０３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．５， １．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．３２ （ｔｄ， Ｊ ＝ ６．１， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ５．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．９， １．８ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－７）， ６．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ６．１４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．８， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ６．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．１ Ｈｚ， １Ｈ， ＮＨ）， ８．６５ （ｓ， １Ｈ， ｔｅｔｒａｚｏｌｅ－ＣＨ）； １３Ｈ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： δ １８．８５， １９．２７ （ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－２ＣＨ３）， ２０．６６， ２０．８４ （３ ＯＣＯＣＨ ３ ）， ３５．５６ （ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－ＣＨ）， ４９．６９ （Ｃ－５）， ５２．７９ （ＣＯＯＣＨ ３ ）， ５５．７７ （Ｃ－４）， ６１．９１ （Ｃ－９）， ６７．４９ （Ｃ－７）， ７０．５１ （Ｃ－８）， ７５．６４ （Ｃ－６）， １０５．１５ （Ｃ－３）， １４０．８１ （Ｔｅｔｒａｚｏｌｅ－Ｃ５）， １４６．７０ （Ｃ－２）， １６１．１８ （ＣＯＯＣＨ３）， １７０．０４， １７０．１５， １７０．５８ （３ ＯＣＯＣＨ３）， １７８．５３ （ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－ＣＯ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ２１Ｈ２９Ｎ５Ｏ１０］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ５３４．３ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ２９Ｎ５ＮａＯ１０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ５３４．１８０６６３； ｆｏｕｎｄ， ５４３．１７８８５３１．
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－イソブチルアミド－４－（１Ｈ－テトラゾール－１－イル）－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノネート（ＩＥ８８９－４２）（Ｓｏｄｉｕｍ ２，６－ａｎｈｙｄｒｏ－３，４，５－ｔｒｉｄｅｏｘｙ－５－ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－４－（１Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－１－ｙｌ）－Ｄ－ｇｌｙｃｅｒｏ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏ－ｎｏｎ－２－ｅｎｏｎａｔｅ （ＩＥ８８９－４２））
Figure 0007206241000114
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： δ ０．９９－１．０４ （ｍ， ６Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－２ＣＨ３）， ２．４６ （ｍ， １Ｈ， ｉｓｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｏ－ＣＨ）， ３．５９－３．７５ （ｍ， ２Ｈ， Ｈ－７， Ｈ－９）， ３．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－９'）， ４．０３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ６．２， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－８）， ４．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， ９．７ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－５）， ４．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－６）， ５．７６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．７， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－４）， ５．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．２ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ９．３８ （ｓ， １Ｈ， ｔｅｔｒａｚｏｌｅ－ＣＨ）； ＬＲＭＳ ［Ｃ１４Ｈ２０Ｎ５ＮａＯ７］ （ｍ／ｚ）： （＋ｖｅ ｉｏｎ ｍｏｄｅ） ４１６．０ ［Ｍ＋Ｎａ］＋； ＨＲＭＳ （ＡＰＩ） （ｍ／ｚ）： ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１４Ｈ２０Ｎ５Ｎａ２Ｏ７ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ ４１６．１１５２６４； ｆｏｕｎｄ， ４１６．１１６８８６．
［生物学］
＜細胞とウイルス＞
Ａ５４９細胞（ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞）はEuropean Colloection of Cell Culturesより提供された（86012804-1VL、シグマ アルドリッチ）。細胞は、１％グルタミン（２００ｍＭ）及び５％ウシ胎児血清が添加されたダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）（ロンザ、バーゼル、スイス）において増殖させた。感染および感染後の手順のために、Ａ５４９細胞は１％グルタミンのみ添加されたＤＭＥＭにおいて維持された。正常ヒト気管／気管支上皮（ＮＨＢＥ）細胞（CC-2540, lot 313831, ロンザ）はB-ALI（商標）増殖培地（ロンザ）中で増殖させ、感染と感染後の研究は同じ培地を使用した。ＬＬＣ－ＭＫ２細胞（アカゲザル腎臓、ＡＴＣＣ ＣＣＬ－７）は、１％グルタミン（２００ｍＭ）及び熱失活させた２％ウシ胎児血清が添加されたイーグル最小必須培地（ＥＭＥＭ）（ロンザ）において培養された。ｈＰＩＶ－３の感染および感染後のインキュベーションの間、ＬＬＣ－ＭＫ２細胞は１％グルタミンが添加されたＥＭＥＭにおいて維持された。すべての細胞株は３７℃、５％ＣＯ２の加湿された空気中でインキュベートされた。
ｈＰＩＶ－３（Ｃ－２４３株）はAmerican Type Culture Collection （ATCC、マナッサス、バージニア州）から入手した。ウイルスは、グルタミンが添加されたＥＭＥＭにおけるＬＬＣ－ＭＫ２細胞の中（ＥＭＥＭinf）において、３５℃、５％ＣＯ２の加湿された空気中で増殖させた。細胞変性効果をモニタリングしつつ、ウイルス感染から３～４日後に、ウイルスを含む培養液の上清を回収し、遠心分離（３０００ＲＣＦ、１５分）によって上清から細胞断片を取り除いた。赤血球凝集抑制試験（Haemagglutination Inhibition (HI) assays）に使用するため、30 kDa Amicon Ultra filter unit (ミリポア, ビレリカ、マサチューセッツ州)を用いて、少なくとも１０回ウイルスを濃縮した。ノイラミニダーゼ阻害試験（Neuraminidase Inhibition (NI) assays）とＳＴＤ－ＮＭＲ実験に、ＰＥＧ沈殿を行い上述のように精製されたウイルスを用いた。
精製されたｈＰＩＶ－３の上清とＰＥＧ６０００（最終濃度８％）及びＮａＣｌ（最終０．４Ｍ）とを混合し、穏やかに撹拌しながら４℃でオーバーナイト、インキュベートした。ＰＥＧ６０００／ｈＰＩＶ－３複合体を、４℃で３０００ＲＣＦ、３０分の遠心分離によってペレット状にした。上清は捨て、ＧＮＴＥバッファー（200 mM グリシン, 200 mM NaCl, 20 mM Tris-HCl, 2 mM EDTA, pH 7.4）が、最初のウイルス懸濁液の量に対し少なくとも１：４０となるような量を用いて、ペレットを４℃でオーバーナイト、再懸濁した。ウイルスの懸濁はピペッティングによって均質化され、続いて「堅い」内筒のダウンス型ホモジナイザーを用いて残存するウイルス凝集体を機械的に破壊した。ｈＰＩＶ－３のホモジネートを、ＧＮＴＥバッファー中に調整された３０％～６０％の非線形ショ糖勾配上に流し入れ、４℃で１００,０００ＲＣＦ、２時間３０分、減速のためのブレーキ無しの遠心分離を行った。ウイルスは３０％～６０％ショ糖の界面に濃縮され、回収され、ＮＩ試験のために－８０℃で、またはＳＴＤ－ＮＭＲ実験のために４℃で保管された。
ｈＰＩＶ－３ ＨＮ 阻害剤：化合物２、３、５～１０は凍結乾燥した粉末として用意し、滅菌水に溶解することによって１０ｍＭの原液を作製した。溶液を完全に溶解するために１５分間超音波処理を行い、濾過滅菌した。原液はガラスのバイアルに入れ－２０℃で保存し、使用前に適切なバッファーによって新たに希釈した。ＳＴＤ ＮＭＲ実験用には、原液はＤ２Ｏを用いて用意し、１００ｍＭとした。溶液は上述のように処理され保存された。
組換えＨＮの発現及び精製：引用文献に記載の方法を改変した方法に基づき、Bac-to-Bac（商標） baculovirus expression system （インビトロジェン、カールスバッド、カリフォルニア州）を用いてＨＮタンパクを発現させた。したがって、ミツバチメリチン分泌シグナルペプチド（honeybee melittin signal peptide (HBM)）の核酸配列が、ＨＮ外部ドメインをコードする配列（アミノ酸１２５～５７２）の下流に付加された。この配列（ＨＢＭ＋ＨＮ）を、Spodoptera frugiperda細胞（Ｓｆ９）での発現のためにコドン最適化し、DNA2.0 gene synthesis service（DNA2.0, メンローパーク、カリフォルニア州）に直接注文し、遺伝子名はHBM-HNhPIV-3optとした。HBM-HNhPIV-3optをＰＣＲによって増幅させ、Ｃ末端に精製と検出目的のための６個のヒスチジンからなるタグ（His-Tag）を付加するベクターである、pFastBac/CT-TOPO（商標）ベクターにライゲーションさせた。
HBM-HNhPIV-3optを含む組換えバキュロウイルスを製品の取扱説明書に従って作製し増幅させた。Insect-XPRESSタンパク質フリー昆虫細胞培地（ロンザ）で培養したＳｆ９細胞（インビトロジェン）に、HBM-HNhPIV-3optバキュロウイルスを高い感染効率で感染させた。最も高いタンパク質発現を得るため、組換えＨＮを含む感染後４日目の上清を回収した。上清は、細胞断片を取り除くために遠心分離（３,０００ＲＣＦ、１５分）によって精製され、さらに、HisTrap excel 5 mL カラム（GE Healthcare life sciences, バッキンガムシャー、イングランド）の製品の取扱説明書に従い、精製した。組換えＨＮは５００ｍＭのイミダゾール溶液で溶出され、回収した画分はノイラミニダーゼ活性（ＮＡ）試験（neuraminidase activity assay）により評価された（下記参照）。最も活性のある画分はプールされ、最終的な量が８００μｌになるように10 kDa アミコンウルトラフィルターユニット（ミリポア）によって濃縮された。さらなる精製ステップは、４℃において、Superdex 75 ゲル濾過カラム (GE Healthcare)を通す、高速タンパク質液体クロマトグラフィー（fast protein liquid chromatography） (Amersham Biosciences)を行い、Frac-920で１ｍＬの画分を回収した。２８０ｎｍにおける画分の回収のモニタリングによって決定されたタンパク質を含む画分は、ＳＤＳ－ＰＡＧＥを行うのと同様に、ＮＡ試験によって評価された。精製され、濃縮された組換えＨＮタンパク質は４℃で保存された。
赤血球凝集抑制試験：ＨＮ阻害剤はＵ字型の９６穴プレートアッセイにて２回評価された。化合物は、それぞれの濃度のテストのために（２５μｌ／ウェル、最終１×）ＰＢＳによって希釈し、４×の溶液にした。それぞれの希釈液をｈＰＩＶ－３（２５μｌ／ウェル、最終的に１ＨＡＵ）の、４ヘマグルチネーションユニット（haemagglutination units、ＨＡＵ）と混合し、室温で２０分、インキュベートした。プレートを氷上に移動させ、各ウェルに対し同等の量（５０μｌ）の氷冷した０．７５％モルモット赤血球（guinea pig red blood cells, Gp-RBC）又は１％ヒト赤血球（human red blood cells, h-RBC）を追加した。そして、ヘマグルチネーション（赤血球凝集）の程度を読み取る前に４℃で１時間３０分インキュベートした。未処理のウイルス懸濁液と比較し、ヘマグルチニン活性（凝集）が５０％まで減少した阻害剤の濃度としてＨＩ ＩＣ５０が考慮された。
ノイラミニダーゼ阻害試験：精製したｈＰＩＶ－３、阻害剤およびＭＵＮを準備し、ＮＡ反応緩衝液（Reaction Buffer, NaOAc 50 mM、CaCl2 5 mM、pH4.6）で希釈した。異なるｈＰＩＶ－３希釈液を利用するＮＡはアッセイにおいて最も低いウイルス濃度となるように、最初に測定され決定された。ＮＡアッセイは、蛍光シグナルの最大値が統計的に有意であることを考慮し実験のバックグラウンドと比較して少なくとも５倍以上となるように、十分に精製したウイルスによって行われた。ノイラミニダーゼ阻害（ＮＩ）試験は、３度行われた。精製されたｈＰＩＶ－３を２μｌ、また、２．５×の阻害剤溶液（最終１×）を４μｌ、各ウェルに加え、各濃度をテストした。プレートは、5 mMの2'-(4-メチルウンベリフェリル)-D-N-アセチルノイラミニド（2'-(4-methylumbelliferyl)-D-N-acetylneuraminide）(MUN)(最終2mM)を各ウェルに４μｌ加える前に室温に２０分置いた。そして、プレートは撹拌（１０００ｒｐｍ）しながら３７℃で３０分間インキュベートされた。各ウェルにグリシンバッファー（グリシン０．２５Ｍ、ｐＨ１０．４）を１９０μｌ加えることによって酵素反応を停止させた。ウイルスにＭＵＮを加えることによってネガティブコントロールとし、酵素反応はｔ＝０において停止させた。相対的な蛍光（Relative fluorescence, RF）はVictor 3マルチラベルリーダー（パーキンエルマー、ウォルサム、マサチューセッツ州）によって測定された。データはバックグラウンド除去（ＲＦのネガティブコントロール）が行われ、ＩＣ５０値（非線形回帰（曲線適合）、容量反応阻害（Dose-response-inhibition）、３パラメーターロジスティック（3parameter logistic））を計算するためにGraphPadPrism 4 (GraphPad Software Inc., ラホヤ、カリフォルニア州)を用いて解析が行われた。未処理のウイルス懸濁液と比較し、ノイラミニダーゼ活性（相対的な蛍光）が５０％まで減少した阻害剤の濃度をＮＩ ＩＣ５０値とした。阻害剤６及び阻害剤１０のＫｉ値を、既に公表された方法に基づきｈＰＩＶ－３ウイルス全体について、酵素反応速度実験によって特定した。したがって、ノイラミニダーゼ活性は２０分間の間５分毎に、５種類の基質濃度[S]: 2, 4, 8, 10 及び16 mM、４種類の阻害剤濃度[I]: １０のために、0, 0.5, 2.5及び5 μＭ、６のために、0, 10, 20 and 60 μＭにおいて測定された。すべてのアッセイは３度行われ、［Ｉ］＝０及び可変の［Ｓ］の実験と、Ｋｉ値のデータとを使いミカエリス・メンテン定数（Ｋｍ）を決定するために、GraphPadPrism 4 (GraphPad Software Inc., ラホヤ、カリフォルニア州)を用いて、最終データは競合阻害のためのミカエリス・メンテン式に当てはめられた（fitted to the Michaelis- Menten equation）。
ウイルス増殖抑制試験：細胞ベースアッセイにおいてベストな阻害剤を評価する前に、化合物の細胞毒性を調べるためにＭＴＴアッセイが行われた。ＬＬＣ－ＭＫ２細胞に、８及び１０を最も高濃度の３０３μＭ加えたものを４８時間インキュベーションした後の観察において、細胞毒性は見受けられなかった。ウイルス増殖抑制は、４８ウェルプレートにおいてコンフルエントなＬＬＣ－ＭＫ２の単層に低ＭＯＩ感染しているＥＭＥＭinf中に６、８及び１０が２μｌ存在するタイトレーションの結果を、focus-forming assayを用いて評価された。ウイルス接種（Virus inoculum）（１００ＦＦＵ／ウェル）前に６、８及び１０を伴って２０分プレインキュベートされた。感染は二重（in duplicate）に行われ、３７℃で１時間、１５分置きに穏やかに撹拌しながら行われた。接種材料（inocula）は取り除かれ、それぞれのウェルにつき２μＭの化合物の希釈液（EMEMinf中）５００μｌ（５００μｌ／ウェル）に置き換えられた。
同じコンディションから化合物を除いたものを感染のポジティブコントロールとした。感染した単層細胞（cell monolayers）におけるウイルス増殖は５％ＣＯ２、３７℃で４８時間維持された。二重（duplicates）に培養上清液は回収され、プールされ、１５，０００ＲＣＦで１０分精製され、－８０℃で保管された。上清は、残存する化合物が後のウイルスのタイトレーションに影響することを防ぐため、１０－３、１０－４及び１０－５のＥＭＥＭinfによって希釈された。ウイルスのタイトレーションは前述のウイルス感染のコンディションを用いて二重に行われた。１時間後、ウイルス増殖を制限するとともに局在化させるためにAvicel (FMC BioPolymer, Philadelphia, PA)を含有するＥＭＥＭinfを接種材料に直接添加した（最終濃度１％）。プレートは５％ＣＯ２、３７℃で３６～４０時間、フォーカスフォーメーション（focus formation、病巣の形成）のためにインキュベートされた。Avicelは穏やかに取り除かれ、３．７％のパラホルムアルデヒド／ＰＢＳに置き換えられ、ウイルスの不活性化と細胞の固定化のため、プレートは１５分室温に置かれた。単層細胞はＰＢＳで３回、それぞれ５分ウォッシュし、内在性のペルオキシダーゼは０．３％Ｈ２Ｏ２／ＰＢＳを３７℃、３０分処理することにより、不活性化した。プレートはＰＢＳによって再度３回、それぞれ５分ウォッシュされた。プレートは、マウスモノクローナルＩｇＧ アンチ－hPIV-3 HN (Fitzgerald, clone# M02122321, 2.0 mg/mL)が5% milk/PBS中に1 μｇ／ｍＬとなるようにして、３７℃で１時間、インキュベートされた。単層細胞は０．０２％Tween20/PBSによって３回、５分間ウォッシュされた。ヤギ抗マウス（Goat anti-Mouse）-IgG(H+L)-HRPコンジュゲート (バイオラッド, ref# 170-6516)は、5% milk/PBS中に１：１０００となるように希釈され、各ウェルに加えられ、３７℃で１時間インキュベートされた。単層細胞は前述の通り、0.02% Tween20/PBSによってウォッシュされ、ＰＢＳによって２回リンスされた。TrueBlue溶液（HRP substrate）を各ウェルに追加し、プレートを３７℃で１時間インキュベートすることによって、病巣（foci）は明らかとなった。TrueBlue溶液を捨て、プレートを水で２回リンスし、スキャン前に乾燥（図２）させ、病巣（foci）をカウントした。未処理の感染したＬＬＣ－ＭＫ２単層と比較し、子孫ウイルス価（progeny virus titre）が５０％まで減少した阻害剤の濃度をＩＣ５０値とした。
In situ ELISA：In situ ELISAはウイルス増殖阻害を評価するために有効な技術である。
感染した単層細胞の細胞表面におけるｈＰＩＶ－３ ＨＮの発現レベルをワンステップで測定することができる。発現レベルは、固定化されていないウイルスが、ターゲット細胞に感染および再感染する能力と直接相関がある。９６穴プレートにコンフルエントな単層細胞が播種され、感染が行われた。ウイルス（４０ＦＦＵ／ウェル）は、最終濃度が１０倍の希釈系列（dilution series）として１０００μＭ～０．００１μＭになるような化合物６及び１０と共に、２０分プレインキュベートされた。感染は三重（triplicate）に行われ、１５分毎に穏やかに撹拌しながら３７℃で１時間続けられた。接種材料（inocula）は取り除かれ、各ウェルにそれぞれ、２００μｌの化合物の希釈液に置き換えられた。感染のポジティブコントロールは同一の実験条件、阻害時間を用いることが組み込まれた。感染した単層細胞はウイルス増殖のために５％ＣＯ２、３７℃で３６～４０時間維持された。１１．１％のパラホルムアルデヒド／ＰＢＳを直接１００μｌ加えることによって、ウイルスは不活性化され、細胞は固定化された。プレートは室温に１５分置き、ＰＢＳによって３回、５分ウォッシュし、内在性のペルオキシダーゼは、０．３％Ｈ２Ｏ２／ＰＢＳを３７℃、３０分処理することにより、不活性化した。単層細胞は、マウスモノクローナルＩｇＧ アンチ－hPIV-3 HN (Fitzgerald, clone# M02122321, 2.0 mg/mL)が5% milk/PBS中に1μｇ／ｍＬとなるようにして、３７℃で１時間、インキュベートされた。ウェルは０．０２％Tween20/PBSによって３回、５分間ウォッシュされた。ヤギ抗マウス（Goat anti-Mouse）-IgG(H+L)-HRPコンジュゲート (バイオラッド, ref# 170-6516)は、5% milk/PBS中に１：２０００となるように希釈され、各ウェルに加えられ、３７℃で１時間インキュベートされた。単層細胞は、0.02% Tween20/PBSによってウォッシュされ、ＰＢＳによって２回リンスされた。各ウェルにBD OptEIATMB substrate (BD Biosciences, San Jose, CA, 100 μＬ)を加え、プレートは３７℃でインキュベートした。３～５分後、各ウェルに０．６ＭのＨ２ＳＯ４を５０μｌ加えることにより酵素反応を停止させた。Victor 3 multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA)を用いて、４５０ｎｍ、０．１秒における各ウェルの吸光度（ＯＤ）を測定することによりローデータを得た。最終的なＯＤは、最初のＯＤ測定からネガティブコントロール（未感染の細胞）のＯＤを除去することによって得られ、ＩＣ５０値（非線形回帰（曲線適合）、容量反応阻害（Dose-response-inhibition）、４パラメーターロジスティック（4 parameter logistic））を計算するために、GraphPadPrism4 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA)を用いてデータを解析した。未処理の感染した単層細胞と比較し、４５０ｎｍにおける吸光度が５０％まで減少した阻害剤の濃度をＩＣ５０値とした。
本願発明の化合物は、公表されているモデルを用い、よく分化したヒト気道上皮（human airway epithelial, HAE）細胞上で、ｈＰＩＶ－３阻害試験によってテストすることができる。簡単に、テスト手順は次の通りである：先行文献（Muller et al., 2013）に記載の通り、ヒト気道上皮（ＨＡＥ）細胞を単離し、培養し、そして分化させる。つまり、ヒト鼻気道上皮細胞は単離され、拡大（expanded）され、コラーゲンでコートされた透過膜支持体（permeable membrane supports）上に播種された。一度細胞がコンフルエントになると、頂端培地が除去され、細胞は上皮分化のために、気液界面に約４～６週間維持される。繊毛細胞（ciliated cells）を含む培地が各ウェルにｈＰＩＶ－３を５０００フォーカス形成単位（focus forming units）伴い、１時間管腔側に播種される。細胞がウイルスに感染したらすぐに、様々な濃度の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ）のテスト化合物が培養液の側底部（basolateral）に追加される。先行文献（Guillon et al., 2014）に記載の通り、ウイルスタイトレーションによる感染から１、３及び６日目に、フォーカス形成アッセイ（focus forming assay）又はin situ ELISAを、Ａ５４９細胞又はＬＬＣ－ＭＫ２細胞中で用いることによって、ウイルス量の減少が評価された。相対的な効力の指標を提供するために、これらの結果と先行文献のＢＣＸ－２８５５を含むＢＣＸ化合物等の基準化合物と比較できるかもしれない（Guillon, P., Dirr, L., El-Deeb, I.M., Winger, M., Bailly, B., Haselhorst, T., Dyason, J.C., and von Itzstein, M. (2014). Structure-guided discovery of potent and dual-acting human parainfluenza virus haemagglutinin-neuraminidase inhibitors. Nat. Commun. 5.; and Muller, L., Brighton, L.E., Carson, J.L., Fischer, W.A., and Jaspers, I. (2013). Culturing of Human Nasal Epithelial Cells at Air Liquid Interface. J. Vis. Exp.）。
［結果］
抗ｈＰＩＶ－３ ＨＮであるＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎのＣ４位を修飾し合成されたものの効力の比較を行い、便宜上、ＩＣ５０値はＣ５位に存在するアシルアミノ基に基づく２つのグループに分けた。 グループ１の阻害剤はＣ５位にアセトアミド官能性（acetamido functionality）を有し、グループ２の阻害剤はＣ５位のイソブチルアミド官能性（isobutyramido functionality）を有する（図３及び図４Ａ～Ｃ）。ベンチマーク（benchmark）であり広域スペクトルを有することが十分に認められているノイラミニダーゼ阻害剤Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎ（２）は、ｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が１５６５μＭであり、また、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が１４３８μＭであり、最も弱い阻害を示した。２と３とを比較すると、２はｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が１３８μＭであり、また、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が２１０μＭであり、依然高いマイクロモルの範囲であるにも関わらず、Ｃ５位がＢＣＸ２７９８（６）のアセトアミドアナログである３は阻害を示し、向上していた。これらのＩＣ５０値は、我々の新たな阻害剤である、Ｃ４位がメトキシメチル官能基を有するトリアゾールＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎの誘導体である阻害剤７において観察されたものと類似しており、阻害剤７の実験により測定されたｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値は１５４μＭであり、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値は３１３μＭであった。効果の顕著な向上が観察されたのは、トリアゾールのＣ４位のメトキシメチル部分（７）を、嵩高いフェニル基（８）に置換した場合であった。８においては、ｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が６．５μＭであり、また、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が４．６μＭであった。値は表２にまとめた。
グループ２の阻害剤はＣ５位がイソブチルアミド官能性（isobutyramido functionality）を有するものを含んでおり、Ｃ５位がアセトアミドアナログであるものより、相対的に、それぞれの阻害剤のアフィニティーが向上したことが明らかであった。予想外のことではないが、効果のある順は、同じグループ内において同一であった。したがって、最も弱い阻害を示すのはＣ５位がＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎのイソブチルアミドアナログである阻害剤５であり、阻害剤５はｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が１８８μＭであり、また、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が３５８μＭであった。そして、基準となるｈＰＩＶ阻害剤のＢＣＸ２７９８（６）については、ｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が２１．５μＭであり、また、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が１６．１μＭであった。トリアゾールを形成する環上に相対的に小さなメトキシメチル置換基を有する阻害剤９は、Ｃ４位がアジドアナログである阻害剤６のＩＣ５０値と近い値であった（阻害剤６において、ｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が１４．２μＭであり、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が１３．８μＭであった）。Ｃ５位にアセトアミドを含むグループ１の阻害剤において観察されたのと同様に、阻害剤９のメトキシメチル基を阻害剤１０において嵩高いフェニル部分（moiety）へと置換基のサイズを増大させることにより、顕著な効果の向上を示し、ｈＰＩＶ－３ ＨＮのノイラミニダーゼ阻害試験（ＮＩ）におけるＩＣ５０値が２．７μＭであり、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値が１．５μＭであった。興味深いことに、赤血球凝集抑制試験（ＨＩ）におけるＩＣ５０値の向上は、モルモット赤血球の代わりにヒト赤血球を用いた場合にも観察された（図２）。この向上はおそらく、ヒトの赤血球とモルモットの赤血球との間の、シアル酸の含有量および／又は結合の状態（presentation）の違いが反映されているものである。例えばヒトの、赤血球を含む組織と細胞はＮ－アセチルノイラミン酸含有複合糖質レセプターのみを発現している一方で、他の動物はＮ－グリコリルノイラミン酸をベースにしたレセプターを発現している。そうは言うものの、特定の赤血球が使われていることに関係なく、我々が設計した阻害剤１０は、ベンチマークとなる化合物６と比較した際に、有意に高い効果を有していた。ＭＵＮのＫｍ値は５．１ｍＭであり、阻害剤１０のＫｉ値は１．３μＭであり、阻害剤６のＫｉ値は１６μＭであった。
Figure 0007206241000115
表２：ＮＩ及びＨＩのＩＣ５０値。それぞれテストされた化合物におけるＩＣ５０値の平均値の標準偏差および標準誤差。
＜細胞ベースアッセイ（Cell-based assays）＞
下記の最初の酵素スクリーニングにおいて、最も効果的な阻害剤１０と基準のｈＰＩＶ阻害剤（ＢＣＸ２７９８、６）について、ＬＬＣ－ＭＫ２細胞におけるｈＰＩＶ－３ウイルス感染と増殖（図５Ａ及びＢ）を阻害する能力を比較するために増殖阻害アッセイ（growth inhibition assay）によって評価した。基準となる阻害剤として化合物６が選択されたのは、化合物６は今までに最も報告されているｈＰＩＶ－３ Ｎｅｕ５Ａｃ２ｅｎベースの阻害剤であり、in vitroにおいて適切なｈＰＩＶ－３抗ウイルス効果を有するためである。最初のアッセイにおいて、阻害剤の濃度は２μＭとし、６と１０との存在下においてウイルスを４８時間増殖させ、ウイルスの力価（titres）を特定した。この阻害剤の濃度において、６においては１４％のウイルス力価の減少が、そして１０においては９４％のウイルス力価の減少がそれぞれ計算された（図５Ｂ）。ウイルス増殖阻害のＩＣ５０値は、３種類の異なる細胞株を用いて、確立したin situ ELISAの技術により、２種類の阻害剤について特定された。天然の組織に関係する細胞においてウイルス増殖を阻害することを研究するために、ｈＰＩＶ－３感受性のヒト呼吸器細胞株であるＡ５４９（肺腺がん上皮細胞）及び正常ヒト気管支上皮細胞（ＮＨＢＥ）の初代細胞と同様にｈＰＩＶ－３細胞ベースの感染研究に大規模に使用されているＬＬＣ－ＭＫ２（サル腎臓上皮細胞）細胞株が選ばれた。ウイルスタイトレーション法において本方法は有用な利点を有する。なぜなら固定化していないウイルスの増殖を低ＭＯＩ（multiplicity of infection）で感染させた単層細胞におけるＨＮ発現レベルと関連づけることから、より速く、ワンステップで行うことができ、また主観性が排される方法だからである。興味深いことに、ヒト細胞株に関して、実験用に確率された細胞株であるＬＬＣ－ＭＫ２においては、１０と６について、わずかに低いウイルス増殖阻害のＩＣ５０値が測定された。全体として、３種類すべての細胞株において、阻害剤６（ＩＣ５０＝2.1-13.9μＭ）と比較した際に阻害剤１０（ＩＣ５０＝2.1-13.9μＭ）の著しく強い抗ウイルス効果が測定されるという、同じ傾向が観察された（図６）。
＜構造生物学（Structural biology）＞
試料の準備と１Ｈ ＮＭＲ実験：すべてのＮＭＲ実験は三重勾配（triple axis gradients）を有する５-ｍｍのＴＸＩプローブが備えられた600 MHz NMRスペクトロメーター（Bruker）によって行われた。元のまま（インタクトな、intact）のウイルスの懸濁液と組換えｈＰＩＶ－３ ＨＮとのバッファーは、アミコンフィルターユニット（ミリポア）を用い、ｐＤ４．６において限外濾過によって５０ｍＭの重水素化酢酸ナトリウムと５ｍＭのＣａＣｌ２を含有するＤ２Ｏに交換され、カットオフ値がそれぞれ３０ｋＤａ、１０ｋＤａであった。各実験には、２０μＭのｈＰＩＶ－３ ＨＮタンパクが用いられ、最終ボリュームが２００μＬ中のタンパク質：リガンドのモル比は１：１００であった。
１Ｈ ＮＭＲスペクトルは分光幅６０００Ｈｚ、２８３Ｋ、２秒の緩和遅延時間（relaxation delay）において３２回スキャンし得られた。ウイルスに比べタンパク質は安全であり取り扱いが簡単であること、そして各実験において正確に同じ濃度のタンパク質を供給するために、最初のＳＴＤ ＮＭＲ実験には、インタクトなｈＰＩＶ－ウイルスに対して化合物１０の複合体が用いられたが、それに続く実験には組換えＨＮタンパクが用いられた。
飽和移動差（Saturation Transfer Difference、ＳＴＤ）ＮＭＲ実験：５０ｍｓの持続時間に続いて起こる６０の選択的なガウス型パルスによってタンパク質は飽和され、－１．０ｐｐｍの時にオンレゾナンス（on-resonance）であり、３００ｐｐｍの時にオフレゾナンス（off-resonance）であり、結果として、合計の飽和時間は３ｓであり、緩和遅延時間（relaxation delay）は４ｓになった。ＳＴＤ ＮＭＲ実験においては、組換えｈＰＩＶ－３ ＨＮは合計１０５６スキャン、インタクトウイルスは合計１５１２スキャン取得し、残留ＨＤＯシグナルを抑えるために、WATERGATEシークエンスが用いられた。タンパク質のバックグラウンドを抑制するために５ｋＨｚの強度のスピンロックフィルター（Spin-lock filter）が持続時間１０ｍｓ適用された。ＳＴＤ ＮＭＲ実験のコントロールは、タンパク質の非存在下において、同一のセットアップ及び同じリガンド濃度で行われた。オンレゾナンススペクトル及びオフレゾナンススペクトルは別々にストアされ進められ、最終的なＳＴＤ ＮＭＲスペクトルはオフレゾナンススペクトルからオンレゾナンススペクトルを減算することにより特定された。すべてのＳＴＤ効果は式ASTD = (I0 - Isat) /I0 = ISTD/I0を用いて定量化された。したがって、ＳＴＤ ＮＭＲスペクトル（ISTD）のシグナル強度は対応するレファレンススペクトル（I0）のシグナル強度と比較された。スペクトル中、最も強いＳＴＤシグナルを１００％として、関連するＳＴＤ効果を計算するためのレファレンスとして用いた。
ｈＰＩＶ－３ＨＮ組換え発現している複合体中の８及び、ｈＰＩＶ－３ ＨＮ（図８）組換え発現またはインタクトｈＰＩＶ－３ウイルス（図９）の複合体中において最も強力な阻害剤１０について、特定の結合と特定の阻害を示す計算的な研究および生物学的な研究のさらなるサポートのために、飽和移動差（Saturation Transfer Difference、ＳＴＤ）ＮＭＲ実験が行われた。
阻害剤がインタクトウイルスまたは組換えｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体中にある場合、８または１０に関連するすべてのプロトンのＳＴＤ ＮＭＲシグナル強度が異なる範囲において明瞭に観察され、両方の場合においてリガンドが結合していることが明瞭に示された。インタクトなウイルス粒子の存在によって１０の１Ｈ ＮＭＲスペクトル３．２５、３．５及び４．０ｐｐｍにおいて目に見えるマイナーなシグナルは、ウイルス精製工程由来の不純物およびウイルス粒子や１０ではないものに由来する不純物の結果である。予想通り、これらのシグナルはＳＴＤ ＮＭＲスペクトルにおいては観察されず、不純物はウイルスには結合していないことが明確に示された（図９）。これらの実験により、インタクトなｈＰＩＶ－３ウイルスとｈＰＩＶ－３ ＨＮとの両方に１０が特異的に結合することを明確に示し、阻害剤の生物学的関連性とポテンシャルのさらなる実証となった。
重要なことには、ＳＴＤ ＮＭＲスペクトルの、インタクトウイルスと組換えＨＮタンパクの両方において、芳香族のフェニル基のプロトンのシグナルの重なりが７．１～７．６ｐｐｍにおいて観察されたことであり、ｈＰＩＶ－３ウイルスまたは組換えｈＰＩＶ－３ ＨＮタンパクに結合する際に、阻害剤１０の結合エピトープが、同一とは言わないまでも類似していることも明らかである（図１０）。
＜阻害剤１０のエピトープマッピング＞
１０を伴う複合体中のｈＰＩＶ－３ ＨＮタンパクのＳＴＤ ＮＭＲスペクトル（図８）の解析によって、完全なリガンドの結合エピトープが決定された。１０のすべてのＳＴＤ ＮＭＲシグナルは、最も強いＳＴＤ ＮＭＲシグナルが観察された阻害剤のＨ４'プロトンが７．１８ｐｐｍであるところへ正規化された。阻害剤のすべてのプロトンに対する相対ＳＴＤ ＮＭＲエフェクト（relative STD NMR effects）を計算した（表２）。ＳＴＤ ＮＭＲのシグナル強度の程度は、タンパク質表面にプロトンが近接していることに強く関連しており、また、どのようにして、設計した阻害剤１０がＨＮタンパクの結合サイトに結合しているかを明らかにした。
Figure 0007206241000116
表３：ｈＰＩＶ－３ ＨＮとの複合体の８及び１０のrelative STD NMR effectａ（relative STD NMR effects）。ａＳＴＤ効果は式ASTD = (I0 - Isat) /I0 = ISTD/I0によって計算された。すべての相対ＳＴＤ ＮＭＲエフェクトは最も強いＳＴＤ ＮＭＲ強度（intensity）であるＣ４位のトリアゾロ（triazolo）ＡｒＨ４' と相対的になるように算出した。
注目すべきことに、７．１ｐｐｍと７．６ｐｐｍとの間における、フェニル基のプロトンであるＨ２'、Ｈ３'、Ｈ４'、Ｈ５'及びＨ６において非常に強いrelative STD NMR effectsが観察されたことは、その領域において分子とタンパク質表面との距離が近いということを示している。さらに、著しいSTD NMR effectが、トリアゾール部分（moiety）のＣＨと同じように検出された。それに対し、阻害剤のＣ５位のイソブチルアミド部分（moiety）のプロトンはless effectであった（相対ＳＴＤ ＮＭＲエフェクト強度は４２～５４％であった）
１０のＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎコア構造に関連するプロトンは様々な相対ＳＴＤ ＮＭＲエフェクトを示した。有意なＨ３のＳＴＤ ＮＭＲシグナル強度（８０％）は、この部分とｈＰＩＶ－３ ＨＮ分子とに強い相互作用があることを示唆している。さらに、Ｈ４、Ｈ５及びＨ６の相対ＳＴＤ ＮＭＲシグナル強度はそれぞれ５９％、５０％、及び４９％であり、それはＮｅｕ５Ａｃ２ｅｎのコア構造の環状プロトン（ring proton）もまた、タンパク質の阻害に関与していることを示している。
最後に、グリセロール側鎖のプロトンであるＨ７、Ｈ８、Ｈ９及びＨ９'において、それぞれ３６％、３５％、２４％及び２１％というより弱い相対ＳＴＤ ＮＭＲエフェクトが観察された。そこから、グリセロール側鎖は、Ｃ４位のトリアゾロ官能性（triazolo functionality）及び阻害剤のコアの環状構造と比較し、グリセロール側鎖は阻害剤の結合イベントへの寄与はより低いものであることを示している（図８）。タンパク質表面に明確に近いコンタクトであるＣ４位にトリアゾロ部位（triazolo moiety）を伴う阻害剤１０と同一のすべての意図と目的と阻害剤８のエピトープマップ（図７）とは同一であった。
＜ジフルオロアナログ（Difluoro Analogues）＞
化合物はジフルオロ化（ジフルオロネイテッド（diflouronated）化合物を含んでいてもよく、テストはこのクラス（I-170, I-179 及び I-104、下記参照）の選択したメンバーで行われた。このような化合物のターゲットはｈＰＩＶ－３及びｈＰＩＶ－１のヘマグルチニン－ノイラミニダーゼである。I-I70複合体中のｈＰＩＶ－３ ＨＮの共結晶構造を得た。以下のすべての化合物は、次のようにテストされた。（ｉ）ｈＰＩＶ－３に対するＮＩ酵素アッセイ（及びｈＰＩＶ－１に対するＩ７０についても）、（ｉｉ）ｈＰＩＶ－３を用い、ヒト細胞株のＡ５４９細胞（ヒト肺胞上皮腺癌細胞）を用いた細胞ベースアッセイの評価を行った、（ｉｉｉ）Ａ５４９細胞に対する化合物の細胞毒性試験、（ｉｖ）ヒトノイラミニダーゼ２に対するＮＩ酵素アッセイは活性を示さなかった。図１１に示すように、Ａ５４９細胞を用い、化合物が１５０μＭの場合、どの化合物も細胞毒性を示さなかった。図１２に示すように、ヒトＮｅｕ２に対する活性は示さなかった。
Figure 0007206241000117
Figure 0007206241000118
表４：ジフルオロネイテッド化合物選択のための酵素アッセイ及びセルベースアッセイ。I-57及びI-40は、対比のための、対応するフッ素化していない'en'化合物。
＜インフルエンザウイルスシアリダーゼ活性アッセイ＞
標準的な９６ウェルプレートの型式において、インフルエンザＡ型及びＢ型由来のシアリダーゼを用い、蛍光発生基質である４－メチルウンベリフェリルＮ－アセチル－α－Ｄ－ノイラミニダーゼ（ＭＵＮ）を用い、Potier et al. (Anal. Bio- chem. 1979 , 94 , 287 - 296)の蛍光法により修飾する(Biochim. Biophys. Acta 1991, 10 ,65 - 71)ことにより、合成された化合物がインフルエンザウイルスのシアリダーゼを阻害する能力についてアッセイすることができる。すべての阻害アッセイは、０．１ｍＭのＭＵＮを用いて、６種類の阻害剤濃度で３回繰り返し行うことができる。具体的には、５０ｍＭの酢酸ナトリウム－６ｍＭのCaCl2バッファー（pH 5.5）を７μＬ、氷上に置いた黒い固形の９６穴プレート（solid black plate）の各ウェルに加え、続いて１μＬの阻害剤、１μＬのシアリダーゼ、そして最後に１μＬのＭＵＮ基質を加える。そして、すべての成分を結合させるために、プレートを１０００ｒｐｍになるまでの短時間、約１０秒遠心する。混合液は３７℃で２０分間、９００ｒｐｍで振盪しながらインキュベートする。反応を停止させるために、各ウェルに対し、ｐＨ１０の０．２５Ｍのグリシンを２５０μＬ追加してもよい。そして、蛍光はVictor 3 multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA)によって３５５ｎｍで励起し、４６０ｎｍで発光させ、各ウェル１秒ずつ読み取る。データはバックグラウンド除去（ＲＦのネガティブコントロール）が行われ、ＩＣ５０値（非線形回帰（曲線適合）、容量反応阻害（Dose-response-inhibition）、３パラメーターロジスティック（3parameter logistic））を計算するためにGraphPadPrism 4 (GraphPad Software Inc., ラホヤ、カリフォルニア州)を用いて解析が行われる。
＜インフルエンザＡ型およびＢ型のためのin situ 細胞ELISA＞
合成した化合物のインフルエンザＡ型及びインフルエンザＢ型に対するウイルス増殖阻害を評価するため、Berkowitz and Levin, 1985 (Antimicrob. Agents Chemother, 28, 207-210)に記述された原理に基づき、IAV by Myc et al, 1999 (J. Virol. Methods 77, 165-177 (1999))に適用され開発されたin situ 細胞ELISAにおいて、ＭＤＣＫ細胞をインフルエンザＡ型もしくはインフルエンザＢ型に感染させる。ＭＤＣＫ細胞は、２ｍＭのグルタミンと１０％のＦＢＳとが添加されたイーグル最小必須培地（ＥＭＥＭ）１００μｌ中の、９６穴マイクロタイタープレートの平らな底に播種し、オーバーナイトインキュベートする。翌日、前述の培養液は除去し、培養液によって細胞をウォッシュする。合計５０μｌのウイルス接種菌液（viral inoculum）（４０ＦＦＵ／ウェル）をウェルに加え、５％ＣＯ２、３７℃で、１５分毎に穏やかに撹拌しながら１時間インキュベートする。そして、ウイルス接種菌液（viral inoculum）を取り除き、１００μｌの感染培養液（２ｍＭのグルタミンとトリプシン処理された３．０μｇ／ｍｌのot TPCK）に置き換える。感染したＭＤＣＫ細胞は、必要に応じてさらに１２～２０時間インキュベートし、培養液は吸引する。細胞は３．７％のパラホルムアルデヒド／ＰＢＳによって固定してもよい。アッセイの日に、固定した細胞をウォッシュし、内在性のペルオキシダーゼは０．３５％のH2O2/PBSに３７℃で３０分置くことにより不活化する。再度ウェルをウォッシュし、１．５ｍｇ／ｍｌのマウスモノクローナル抗インフルエンザＡ型または抗インフルエンザＢ型のヘマグルチニンを５０μｌ加え、３７℃で４５分インキュベートする。ウォッシングバッファー（ＰＢＳと0.02% Tween-20）によって細胞を４回ウォッシュし、ヤギ抗マウス（Goat anti-Mouse）IgG(H+L) HRPコンジュゲート (バイオラッド, ref# 170-6516)が、５０μｌ中、１：２０００となるように希釈し、３７℃で４５分インキュベートする。プレートを前述の通り、ウォッシングバッファーでウォッシュし、BD OptEIATMB基質(BD Biosciences, San Jose, CA)を１００μｌずつ各ウェルに加え、プレートを３７℃でインキュベートしてもよい。
酵素反応は１ＭのＨ２ＳＯ４を５０μＬずつウェルに加えて３～５分後に停止させることができる。ローデータは、Victor 3 multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA)によって各ウェル４５０ｎｍで０．１秒の時の吸光度（ＯＤ）を読むことによって得る。最終的な吸光度は最初のＯＤからネガティブコントロールのＯＤ（非感染の細胞）を減算することにより得て、ＩＣ５０値（非線形回帰（曲線適合）、容量反応阻害（Dose-response-inhibition）、４パラメーターロジスティック（4 parameter logistic））を計算するために、GraphPadPrism4 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA)を用いてデータの解析を行う。未処理の感染した単層細胞と比較し、４５０ｎｍにおける吸光度が５０％まで減少した阻害剤の濃度をＩＣ５０値とする。
in situ細胞ベースELISAは、ｈＰＩＶ－１及び３のテスト間の違いも含むマイナーな変更を伴うｈＰＩＶ－３に関しては、次のように行ってもよい：一次抗体：マウスモノクローナル抗ｈＰＩＶ－３ HN（Fitzgerald, clone M02122321）；マウスモノクローナル抗ｈＰＩＶ－１ ＨＮ（LSbio, ref LS-C74109）；ｈＰＩＶ－３感染培地：ＥＭＥＭ＋２ｍＭグルタミン；ｈＰＩＶ－１感染培地：ＥＭＥＭ＋２ｍＭグルタミン＋TrypLE select 1.2%。
＜本発明の化合物のためのｈＰＩＶ－３ ＮＩ及びｈＰＩＶ－１ ＮＩのＩＣ５０値＞
第一態様の多数の化合物のためのＩＣ５０値は、Guillon, P et al, Nature Communications (2014)に既に記載されている標準的なアッセイ方法によって決定された。以下の表は、作製した化合物をchemistry ID順に並べたＩＣ５０値であり、これらのレファレンスと化合物の構造は実験的特性評価セクションに記載されている。
Figure 0007206241000119
表５－テストされた化合物のｈＰＩＶ－３及びｈＰＩＶ－１のＩＣ５０値。

Claims (14)

  1. 化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容され得る塩であって、
    Figure 0007206241000120
     ＜化学式Ｉ＞
    Ｒ１がＣＯＯＨ又はその塩、Ｃ(Ｏ)ＮＲ９Ｒ１０及びＣ(Ｏ)ＯＲ１１からなる群より選択され、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ、水素原子と置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキルとからなる群からそれぞれ独立に選択され、
    Ｒ３は置換基を有していてもよいＮ結合型テトラゾール、置換基を有していてもよいＮ結合型インドール、置換基を有していてもよいＮ結合型イソインドール、下記式によって表される群より選択される置換基を有していてもよいＮ結合型ベンゾトリアゾール及びＮ結合型トリアゾールからなる群より選択され、
    Figure 0007206241000121
    Figure 0007206241000122
    Figure 0007206241000123
     Ｒ４はＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７であって、Ｒ１７は、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群より選択され、
    Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、ＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＮＲ１８Ｒ１８’、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８、－ＮＨ(Ｃ＝Ｏ)Ｒ１８及びＳ(Ｏ)ｎＲ１８からなる群よりそれぞれ独立に選択され、ｎ＝０～２であり、Ｒ１８及びＲ１８’はそれぞれ独立に、水素と置換基を有していてもよいＣ１－Ｃ６アルキル基との何れかである、
    化合物。
  2. Ｒ１がＣＯＯＨ又はその塩、又はＣ(Ｏ)ＯＲ１１であって、Ｒ１１がメチル基、エチル基およびプロピル基より選択される、請求項１に記載の化合物。
  3. Ｒ３のＮ結合型トリアゾールは、下記式によって表される次の群より選択される、請求項１又は２に記載の化合物。
    Figure 0007206241000124
    Figure 0007206241000125
    Figure 0007206241000126
  4. Ｒ３は下記式によって表される次の群より選択され、
    Figure 0007206241000127
     Ｒ２２は、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル及び置換基を有していてもよいフェニルからなる群より選択され、
    Ｒ２３及びＲ２４は、水素、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群よりそれぞれ独立に選択される、
    請求項１又は２に記載の化合物。
  5. Ｒ２２は、必要に応じて、置換基を有していてもよいフェニルであり、該置換基は、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルキルヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、－Ｃ(Ｏ)ＯＭe及び－ＣＨ２ＯＣＨ３からなる群から選択される基であってもよい、
    請求項４に記載の化合物。
  6. Ｒ３は下記式によって表される群より選択される、請求項１に記載の化合物。
    Figure 0007206241000128
  7. Ｒ４は下記式によって表される群より選択される、請求項１～６の何れか一項に記載の化合物。
    Figure 0007206241000129
    Figure 0007206241000130
    Figure 0007206241000131
  8. Ｒ６、Ｒ７及びＲ８はＯＨ及びＯＡｃからそれぞれ独立に選択される、
    請求項１～６の何れか一項に記載の化合物。
  9. 前記化学式Ｉの化合物は下記式によって表される化学式ＩＩの化合物であり、
    Figure 0007206241000132
     ＜化学式ＩＩ＞
    Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、請求項１～８の何れか一項に記載の通りである、請求項１～８の何れか一項に記載の化合物。
  10. 前記化学式Ｉまたは前記化学式ＩＩは下記式によって表される群から選択される、請求項１に記載の化合物。
    Figure 0007206241000133
    Figure 0007206241000134
    Figure 0007206241000135
    Figure 0007206241000136
    Figure 0007206241000137
    Figure 0007206241000138
  11. 請求項１～１０の何れか一項に記載の有効量の化合物またはその薬学的に許容され得る塩と、希釈剤および／又は賦形剤である薬学的に許容し得る担体と、を含み、
    パラインフルエンザウイルス感染によって引き起こされる疾病、疾患または症状の治療または発症予防のための、
    医薬組成物。
  12. パラインフルエンザウイルス感染によって引き起こされる疾病、疾患または症状の治療または発症予防のための医薬品の製造における、請求項１～１０の何れか一項に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に有効な塩の使用。
  13. 前記パラインフルエンザウイルスがｈＰＩＶ－１型、２型および３型のウイルスからなる群から選択される、請求項１２に記載の使用。
  14. 治療対象が飼育動物もしくは家畜、またはヒトの何れかである、請求項１２又は１３に記載の使用。
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