JP7193469B2 - 筋肉増量用組成物 - Google Patents
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Description
さらに、健康志向が強まるなか、クオリティ・オブ・ライフ(quality of life:略称:QOL)の向上、フレイル(健常な状態と、要介護状態(日常生活で介護サポートが必要な状態)との中間の状態)の改善や「ロコモティブシンドローム(locomotive syndrome、運動器症候群:略称:ロコモ)」対策において、いかにして筋肉を増量させるかが課題となっている。
しかしながら、筋肉増量の作用機構は、栄養素及びタンパク質合成系等も複雑に関連し合っているので、依然不明な点が多い。このため、筋肉増量のアプローチは種々存在するので、さらなる筋肉増量可能な物質の探索が鋭意行われている。
本技術は、副作用が少なく安全性が高く、効果的に筋肉を増量させることができる筋肉増量用組成物を提供することを主な目的とする。
本発明は、以下の構成を有する。
[2]前記組成物が、医薬品組成物又は飲食品組成物であってもよい。
[3]前記ビフィドバクテリウム属細菌が、生菌及び/又は死菌であってもよい。
[4]ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として投与し、前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)FERM BP-11175、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)ATCC15700、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ATCC15707、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)ATCC29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)ATCC15703、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)DSM20436、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)DSM10140、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)JCM5820、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)ATCC25526、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)ATCC25525からなる群から選択される一種又は複数種である、筋肉増量方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)。
[5]前記筋肉増量方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)において、投与対象者が、アスリートの方、筋肉を増やしたい方、運動不足に伴う筋力の衰えが気になる方、加齢によって衰える筋肉が気になる方、年齢とともに衰える筋力が気になる方、及びフレイルを改善したい方からなる群から選択される一又は複数の者であってもよい。
[6]前記筋肉増量方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)において、投与期間が、少なくとも4週間以上であってもよい。
[7]ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として投与し、前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)FERM BP-11175、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)ATCC15700、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ATCC15707、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)ATCC29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)ATCC15703、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)DSM20436、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)DSM10140、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)JCM5820、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)ATCC25526、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)ATCC25525からなる群から選択される一種又は複数種である、筋疾患又はその症状の改善又は治療方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)。
なお、ここに記載された効果は、必ずしも限定されるものではなく、本技術中に記載されたいずれかの効果であってもよい。
なお、本明細書において「筋肥大」とは、筋管又は筋繊維が太くなることによって、筋肉の容量(大きさ)が増加することをいう。本明細書において「筋肉増量」とは、筋肉の容量が増加すること及び/又は筋肉の重量が増加することをいう。
本技術に用いるビフィドバクテリウム属細菌は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されず、公知のビフィドバクテリウム属細菌を用いることができる。本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、筋肥大作用を発現させる物質又は筋肉増量作用を発現させる物質(菌体成分も含む)の生産能を有するものが好適である。
また、本技術に用いるビフィドバクテリウム属細菌は、上述の群から1種又は2種以上を選択することができ、1種のみを用いてもよいし、任意の2種以上を用いてもよい。
また、DSM番号が付された細菌は、DSMZ(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)(Inhoffenstr.7B, D38124 Braunschweig, GERMANY)から入手することができる公知細菌である。例えば、DSM20436(DSM No:20436)、DSM10140(DSM No:10140)等を入手することができる(https://www.dsmz.de/catalogues/catalogue-microorganisms.html,[online]:2017年10月17日検索)。
また、JCM番号が付された細菌は、JCM(住所:3050074 茨城県つくば市高野台3-1-1 国立研究開発法人 理化学研究所 バイオリソースセンター 微生物材料開発室)から入手することができる公知細菌である。例えば、JCM5820(JCM 5820T ,http://www.jcm.riken.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=5820,[online]:2017年10月17日検索)等を入手することができる。
FERM BP‐11175の受託番号が付与された細菌は、2009年8月25日付で、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター(現 独立行政法人製品評価技術基盤機構(NITE)特許生物寄託センター(IPOD)(NITE-IPOD)、郵便番号:292-0818、住所:千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室)にブダペスト条約に基づく国際寄託がなされている。
このような変異株は、上記ビフィドバクテリウム属細菌に非人為的に変異が導入されることで構築されてもよい。また、UV等の変異原を用いた処理により上記細菌に変異を導入して構築してもよく、種々の遺伝子操作法により上記株に変異を導入して構築してもよい。
なお、ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物には、当該細菌が生産した生産物(例えば、菌体成分や代謝産物等)も含まれる意味であり、当該生産物として、前記細菌の培養物からの分離精製物(例えば、上清、抽出物等)及び/又は菌体処理物(例えば、ペプチドグリカンや細胞壁等の菌体成分等)等が挙げられる。
前記細菌の培養方法は、ビフィドバクテリウム属細菌が増殖できる限り特に限定されず、細菌の性質に応じた適当な条件下で培養を行うことができる。例えば、培養温度は25~50℃でよく、35~42℃であることが好ましい。また培養は嫌気条件下で行うことが好ましく、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。また、液体静置培養等の微好気条件下で培養してもよい。
すなわち、ビフィドバクテリウム属細菌そのものでもよく、ビフィドバクテリウム属細菌を培養して得られた培養物をそのまま用いてもよく、培養物から培養上清のみを分離して用いても良く、培養物や培養上清を希釈又は濃縮して用いてもよく、培養物から回収した菌体を用いてもよい。また、培養物から分離精製により前記細菌の生産物を回収してもよい。また、培養物又は培養上清を乾燥させたものであってもよい。また、本発明に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、生菌であっても死菌であってもよく、生菌と死菌との両方を含むものでもよい。
また、前記細菌の菌体処理物としては、例えば、菌体の細胞壁及び細胞膜が超音波処理やホモジナイザー処理等の常法により一部又は完全に破砕された細胞破砕物等が挙げられる。さらに、前記細胞破砕物は前記破砕後の全画分でもよく一部の画分でもよく、前記破砕後の遠心分離上清、その上清を硫安処理等で部分精製した画分、又は前記上清を濃縮したものであってもよい。
一般的に、筋タンパク質の合成を促進させることで、筋管又は筋繊維が太くなると云われている。また、筋管又は筋繊維が太くなることによって、筋肉の容量(大きさ)又は筋肉の重量が増加すると云われている。
このため、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物は、筋肉増量によって予防、改善又は治療できる症状又は疾患(例えば、筋肉消耗又は筋肉退化等による筋疾患又はその症状)に使用することも可能である。本明細書における筋疾患として、例えば、緊張減退症(atony)、筋萎縮症(muscular atrophy)、筋異栄養症(musular dystrophy)、筋肉退化、筋無力症及び筋肉減少症(sarcopenia)等が挙げられる。本明細書において、筋疾患は、遺伝的要因、後天的要因、老化等を原因として発生し、また、筋肉消耗は筋肉量の斬新的損失、筋肉の弱化及び退行を特徴とする。
また、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物は、通常の生活でも筋肉増量が可能であり、運動によっても筋肉増量が可能である。
また、本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物は、当該細菌は副作用が少なく安全性が高いので、継続して長期間摂取することも可能である。
本技術は、筋タンパク質の合成を促進して筋管を太くすることで、副作用が少なく筋肉を肥大させる目的に使用することもできる。本技術は、トレーニングによる筋肉増強効果の増大;サルコペニア、フレイル、ロコモティブシンドロームの予防又は改善;筋萎縮関連疾患若しくは症状の予防、改善又は治療;に有効に使用することもできる。
本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物は、これ自体をそのまま用いることが可能であり、又は生理的、医薬品的若しくは飲食品的に許容される通常の担体若しくは希釈剤等と共に混合して用いることもできる。
また、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物は、これら各種製剤又は各種組成物等の製造のために使用することができる。また、本技術は、筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物として使用することも可能である。
本技術のビフィドバクテリウム属細菌の使用量は、安全性が高いので特に制限されないが、例えば、1×106~1×1012CFU/kg体重/日が好ましく、1×107~1×1011CFU/kg体重/日がより好ましく、1×108~1×1010CFU/kg体重/日がさらに好ましい。または、1個体(Body weight)あたりの使用量(投与量)としては、107~1014CFU/日が好ましく、108~1013CFU/日がより好ましく、109~1012CFU/日がさらに好ましい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物又はそれ由来の分離精製物(例えば培養上清)の使用量は、0.01~100mL/体重kg/日であることが好ましく、0.1~10mL/体重kg/日であることがより好ましい。
なお、本技術において、CFUとは、Colony forming unitの意味であり、コロニー形成単位を表す。前記細菌が死菌の場合、CFUは、個細胞(cells)と置き換えることができる。
適用対象者は、筋肉増量を望む者であれば特に限定されず、例えば、乳幼児、小児、大人、健常者、アスリート、中高年、高齢者、及び筋疾患の症状を有する者等が挙げられる。
「非治療目的」とは、医療行為、すなわち、治療による人体への処置行為を含まない概念である。例えば、健康増進、美容行為等が挙げられる。
「改善」とは、疾患、症状又は状態の好転;疾患、症状又は状態の悪化防止、遅延;疾患又は症状の進行の逆転、防止又は遅延をいう。
「予防」とは、適用対象における疾患若しくは症状の発症の防止や遅延、又は適用対象の疾患若しくは症状の危険性の低下をいう。
本技術の筋肉増量用組成物は、医薬組成物として用いることができる。本技術の医薬組成物は、筋疾患又はその症状、筋萎縮関連疾患又はその症状に対する予防、改善及び/又は治療に使用することができる。本技術は、特に筋肉を増量させる目的で使用することが好適である。筋萎縮関連疾患又はその症状として、サルコペニア、寝たきり、無運動、無重力飛行、怪我の治療等で行われる四肢の固定に伴う廃用性の筋萎縮;筋萎縮性側索硬化症(ALS)、脊髄性進行性筋萎縮症、急性脊髄前角炎(ポリオ)、ギランバレー症候群等の神経原性筋萎縮;筋ジストロフィー等の筋原性筋萎縮を例示することができる。
加えて、製剤化は剤形に応じて適宜公知の方法により実施できる。製剤化に際しては、適宜、製剤担体を配合して製剤化してもよい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物(例えば培養上清)や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその摂取量又は投与量は、ビフィドバクテリウム属細菌の摂取量又は投与量に換算された場合に上記摂取量又は投与量となることが好ましい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物(例えば培養上清)を用いる場合、その投与量は、体重1kgあたりの1日の量として、0.01~100mLであることが好ましく、0.1~10mLであることがより好ましい。この際、前記細菌の分離精製物(例えば培養上清)は、公知の培地を用いて、ビフィドバクテリウム属細菌の菌数が1×107~1×1011CFU/mLとなるように培養した培養物から得られた分離精製物(例えば上清)であることが好ましく、1×108~1×1010CFU/mLとなるように培養した培養物から得られた分離精製物(例えば培養上清)であることがより好ましい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物(例えば培養上清)や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその含有量は、ビフィドバクテリウム属細菌の含有量に換算された場合に上記含有量となることが好ましい。さらに、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物(例えば培養上清)を用いる場合、0.01~100mL含有されることが好ましく、0.1~10mL含有されることが好ましい。
なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
さらに、本技術の筋肉増量用組成物は、飲食品組成物として用いることができる。本技術の飲食品組成物は、ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物(例えば、前記細菌の培養物の培養上清及び/又は前記細菌の菌体処理物等)を公知の飲食品に添加することによって製造してもよいし、ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物(例えば、前記細菌の培養物の培養上清及び/又は前記細菌の菌体処理物等)を飲食品の原料中に混合して新たな飲食品組成物として製造することもできる。
「表示」行為には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、前記用途を想起・類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本発明の「表示」行為に該当する。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその摂取量は、ビフィドバクテリウム属細菌の摂取量に換算された場合に上記摂取量となることが好ましい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物又はその培養物由来の分離精製物(例えば培養上清)を用いる場合、その摂取量又は投与量は、体重1kgあたりの1日の量として、0.01~100mLであることが好ましく、0.1~10mLであることがより好ましい。この際、前記細菌の培養物由来の分離精製物(例えば培養上清)は、公知の培地を用いて、ビフィドバクテリウム属細菌の菌数が1×107~1×1011CFU/mLとなるように培養した培養物から得られた分離精製物(例えば培養上清)であることが好ましく、1×108~1×1010CFU/mLとなるように培養した培養物から得られた分離精製物(例えば培養上清)であることがより好ましい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその含有量は、ビフィドバクテリウム属細菌の含有量に換算された場合に上記含有量となることが好ましい。さらに、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物由来の分離生成物(例えば培養上清)を用いる場合、0.01~100mL含有されることが好ましく、0.1~10mL含有されることがより好ましい。
[1]
ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物。当該組成物は、経口摂取用が好適である。当該組成物は、医薬組成物又は飲食品組成物が好適である。
[2]
ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋肉増量方法。当該投与は、経口摂取が好適である。
[3]
ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋疾患又はその症状の改善又は治療方法。当該投与は、経口摂取が好適である。前記筋疾患又はその症状は、筋萎縮関連疾患又はその症状が好適である。
[4]
筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物、又はその使用。
[5]
筋疾患又はその症状の改善又は治療用の、ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物、又はその使用。
[6]
ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物の製造のための、ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物の使用。当該組成物は、経口摂取用が好適である。当該組成物は、医薬組成物又は飲食品組成物が好適である。
[7]
筋肉増量用飲食品組成物の製造方法であり、前記飲食品組成物が、ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として含有するものである、製造方法。前記飲食品組成物は、栄養補強食品、発酵飲食品(例えば発酵乳)が好適である。
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)からなる群から選択される一種又は複数種である、前記[1]~[7]の何れか1つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
[9]
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)FERM BP-11175、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)ATCC15700、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ATCC15707、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)ATCC29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)ATCC15703、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)DSM20436、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)DSM10140、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)JCM5820、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)ATCC25526、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)ATCC25525からなる群から選択される一種又は複数種である、前記[1]~[7]の何れか1つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
[10]
投与又は摂取期間が、少なくとも4週間以上である、前記[1]~[9]の何れか1つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
[11]
前記ビフィドバクテリウム属細菌の使用量が、1×106~1×1012CFU/kg体重/日、又は前記培養物の使用量が、0.01~100mL/kg体重/日である、前記[1]~[10]の何れか1つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
[12]
前記培養物が、分離精製物(好適には培養上清)である、前記[1]~[11]の何れか1つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
(1)ビフィドバクテリウム属細菌培養物の調製
脱脂粉乳10%を含む水溶液にて凍結保存された、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175(受託番号 FERM BP-11175:NITE-IPODより入手可能)の菌液90μLをMRS液体培地3mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養した。MRS液体培地は、Difco Lactobacilli MRS Broth(BD社製)5.5g、及びL-Cysteine Monohydrochloride, Monohydrate(和光純薬工業社製)50mgを、100mLとなるように純水に溶解させ、HCl水溶液でpH6.5に調整し、121℃で15分間滅菌することによって調製した。次いで、各培養液を4℃、8000×gの条件下にて10分間遠心処理した後、培養上清を回収した。得られた培養上清は、pHが7.0±0.05の範囲内になるように、水酸化ナトリウムによりpH調整を行った。
C2C12細胞を1.5×104 cells/cm2になるように6ウェルプレートに播種し、10%Fetal Bovine Serum及び1%Penicillin Streptomycin含有DMEM培地で24時間培養した。その後、前記(1)で調整した、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の培養上清を2%Horse Serum及び1%Penicillin Sterptomycin含有DMEM培地に添加した。前記培養上清を添加せずに培養した試料をコントロールとして、2日毎に新鮮な培地に交換し、7日間培養した。その後、ヘマトキシリン・エオジン染色(HE染色)を行い、顕微鏡観察下で筋管の太さを100本無作為に測定し、Dunnett検定にて統計学的有意差を解析した。
その結果、それぞれの試料の筋管細胞の直径(平均値)は、表1の通りとなり、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の培養上清を添加した系では、コントロールに比して筋管細胞の直径が3μm以上太くなり、有意に筋量が増加することが確認された。
試験例1と同様の手順にて、以下の表2に示す9種のビフィドバクテリウム属細菌について培養上清を調製した上で細胞培養試験を実施した。培養上清を添加せずに培養した試料をコントロールとして、顕微鏡観察下で筋管の太さを250本無作為に測定し、Dunnett検定にて統計学的有意差を解析した。
・Bifidobacterium longum subsp. longum ATCC15707
・Bifidobacterium breve ATCC15700
・Bifidobacterium bifidum ATCC29521
・Bifidobacterium adolescentis ATCC15703
・Bifidobacterium dentium DSM20436
・Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM10140
・Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum JCM5820
・Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum ATCC25526
・Bifidobacterium thermophilum ATCC25525
C57BL/6マウス(日本チャールズ・リバー社:健常マウス)を実験動物として用い、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の培養上清の4週間継続摂取による筋肉増量への影響を評価した。
実験動物は、9週齢で入荷後、F-2飼料(フナバシファーム社製)および水道水を自由摂取させた。1週間の馴化後、実験動物をコントロール群(水道水を10mL/kg体重投与)、ビフィドバクテリウム投与群(試験例1の(1)で調整したビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の培養上清10mL/kg体重投与)、ロイシン投与群(ロイシンを1.5g/kg体重投与)の3群(n=7/群)に分け、各マウスに1日1回経口ゾンデを用いた経口投与を4週間継続した。最終投与終了後に実験動物を3時間絶食させ、その後セボフルラン麻酔下で処置して、足底筋、腓腹筋を摘出し、各組織の湿重量(体重比)を測定した。腓腹筋については薄切した組織をHE染色した後に顕微鏡下で組織を観察した。
さらに、腓腹筋の組織を顕微鏡観察した結果では、図1(ビフィドバクテリウム投与群)及び図2(コントロール群)のとおり、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175投与群では、コントロール群に比較して、筋管の直径が大きくなっていることが確認され、筋肉が増量していることが分かった。
肥満1度(BMI25以上30未満)の健常成人80名を対象としたランダム化二重盲検プラセボ対照並行群間比較試験を行い、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175の継続摂取による筋肉増量への影響を評価した。
80名の被験者は、ランダムに2群に分け、それぞれビフィドバクテリウム属細菌(ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175)含有カプセル(1日摂取量当たり200億CFU相当のビフィドバクテリウム属細菌を含有)、又はプラセボカプセル(1日摂取量当たり0.373gのコーンスターチ(松谷化学社製)を含有)を毎日摂取し、摂取4週、及び8週に筋肉量及び骨格筋量を測定した。測定は体組成計InBody770(インボディジャパン社製)を用いて測定し、t検定により統計学的有意差を解析した。なお、群間比較は摂取後の各評価時点において摂取前値を共変量とした共分散分析で評価を行った。
ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175をMRS液体培地3mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末(菌末)を得る。該菌末と、ホエイタンパク質濃縮物(Whey protein concentrate;WPC)とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物20gを200gの水に溶かし、筋肉増量用組成物を得る。これは、筋肉増量用飲食品としても摂取可能であり、また筋肉増量効果が期待できる。
ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175をMRS液体培地3mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末(菌末)を得る。該菌末と、乳タンパク質濃縮物の乾燥粉末(MPC480、フォンテラ社製、タンパク質含量80質量%、カゼインタンパク質:ホエイタンパク質=約8:2)とを均一に混合して、組成物を得る。当該組成物20gを200gの水に溶かし、筋肉増量用組成物を得る。これは、筋肉増量用飲食品としても摂取可能であり、また筋肉増量効果が期待できる。
Claims (8)
- ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として含有し、
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)FERM BP-11175、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)ATCC15700、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ATCC15707、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)ATCC29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)ATCC15703、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)DSM20436、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)DSM10140、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)JCM5820、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)ATCC25526、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)ATCC25525からなる群から選択される一種又は複数種である、筋肉増量用組成物。 - 前記組成物が、医薬品組成物である、請求項1記載の組成物。
- 前記組成物が、飲食品組成物である、請求項1記載の組成物。
- 前記ビフィドバクテリウム属細菌が、生菌及び/又は死菌である、請求項1から3のいずれか一項に記載の組成物。
- ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として投与し、
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)FERM BP-11175、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)ATCC15700、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ATCC15707、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)ATCC29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)ATCC15703、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)DSM20436、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)DSM10140、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)JCM5820、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)ATCC25526、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)ATCC25525からなる群から選択される一種又は複数種である、筋肉増量方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)。 - 投与対象者が、アスリートの方、筋肉を増やしたい方、運動不足に伴う筋力の衰えが気になる方、加齢によって衰える筋肉が気になる方、年齢とともに衰える筋力が気になる方、及びフレイルを改善したい方からなる群から選択される一又は複数の者である、請求項5に記載の筋肉増量方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)。
- 投与期間が、少なくとも4週間以上である、請求項5又は6に記載の筋肉増量方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)。
- ビフィドバクテリウム属細菌及び/又は前記細菌の培養物を有効成分として投与し、
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)FERM BP-11175、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)ATCC15700、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム(Bifidobacterium longum subsp. longum)ATCC15707、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)ATCC29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)ATCC15703、ビフィドバクテリウム・デンティウム(Bifidobacterium dentium)DSM20436、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)DSM10140、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum)JCM5820、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum)ATCC25526、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)ATCC25525からなる群から選択される一種又は複数種である、筋疾患又はその症状の改善又は治療方法(ただし、ヒトを対象とした医療行為を除く)。
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