JP7166429B2 - ビリルビンのｉｎ ｖｉｖｏ毒性レベルを評価し、ビリルビン神経毒性の増大したリスクを診断するための、方法およびデバイス - Google Patents

Description

関連出願
本特許協力条約（ＰＣＴ）国際出願は、２０１８年４月３日、米国仮特許出願第（ＵＳＳＮ）６２／６５２，２６６号の、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づく優先権の利益を主張するものである。前述の出願は、その全体が全ての目的で参照により本明細書に明示して組み込まれる。本明細書に引用される全ての刊行物、特許、特許出願は、全ての目的で参照により明らかに本明細書に組み込まれる。

本発明は、一般に、薬、医学診断、および医療デバイスに関する。代替の実施形態では、ビリルビンのｉｎ ｖｉｖｏ毒性レベルを評価し処置するための、および臨床データを処理してビリルビン結合が患者において正常であるか否かを正確に決定することにより、ビリルビン脳症を発症しまたはビリルビン脳症を有する相対的リスクを診断するための、方法、デバイス、およびシステムが提供される。代替の実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏ神経学的にビリルビンの毒性レベルを検出するために、高ビリルビン血症である新生乳幼児においてビリルビン結合が正常であるか否かを決定するのに、および脳症などのビリルビン誘発性神経損傷を予防するのに処置が必要であるか否かを決定するのに、臨床データを使用する方法、デバイス、およびシステムが提供される。臨床検査室データを、従来の血清または血漿総ビリルビン濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）と、２つのＢ_{Ｔｏｔａｌ}での血清もしくは血漿非結合ビリルビンまたは遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）との測定値を含むビリルビン結合パネルに変換して、新規な臨床上関連ある最大Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}および容量定数（Ｂ_Ｔｍａｘ）と、その対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）とを計算することにより、

を使用して任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}＜Ｂ_ＴｍａｘでＢ_Ｆｒｅｅを正確に得るための、コンピュータ実装方法も提供される。代替の実施形態では、ゾーン流体システムなどの自動化マイクロ流体取扱い技術を含む、デバイスおよびシステムであって、２つのＢ_{Ｔｏｔａｌ}で血清または血漿試料中のＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定し、これらのデータおよびビリルビン結合パネルに関する出力Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを分析するために本明細書で提供されるようなコンピュータ実装方法を組み込み、関連ある新生児集団においてＢ_Ｆｒｅｅが標準Ｂ_Ｆｒｅｅ（Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}）に到達したかまたは超えたかどうかを決定し、そうでない場合には、

を使用して生じることになるＢ_{Ｔｏｔａｌ}を計算するようになされたデバイスおよびシステムも提供される。Ｂ_Ｆｒｅｅ≧Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}または

は、高ビリルビン血症を持つ新生児におけるビリルビン誘発性神経学的損傷の相対的リスクが増大することを示す。代替の実施形態では、ビリルビン関連病態を処置し、寛解させ、逆転させ、または予防するための、および本明細書で提供される方法を使用するための方法であって、高ビリルビン血症（黄疸）を持つ新生児など、必要とする個体においてビリルビン誘発性神経学的損傷（例えば、脳症）を寛解させ、逆転させ、または予防するのに処置が必要であるか否かを決定するための、ビリルビン結合パネルの使用を含む方法も提供される。

背景
全新生児の約６０％は、出生後の最初の２週間で、目に見える黄疸になる。黄疸は、ヘモグロビン異化の生成物である、黄色色素非抱合型ビリルビンＩＸ－α（以後、ビリルビンと呼ぶ）の、正常な一時的蓄積に起因する。ビリルビン蓄積は、成人赤血球に対して胎児赤血球がより短い寿命を有することによる、増大したビリルビン生成と、出生後の最初の２日間にわたりビリルビンをなくすための代謝経路が成熟することによる、遅延したビリルビン排泄とに起因する。したがって、目に見える黄疸をしばしば伴う高ビリルビン血症と呼ばれる一時的に上昇した血中ビリルビンレベルは、出生後の最初の数日間の間で新生児において正常な、通常は無害な事象である。しかし、ビリルビンは神経毒性であり、一部の状況において重度の神経学的損傷を引き起こし、死または深刻な後遺症をもたらし、したがって臨床医は、高ビリルビン血症を持つ新生児を密にモニタする。

神経学的に、ビリルビンの毒性レベルは、剖検の際の核黄疸（特定の脳核の黄色染色）と共に死をもたらす急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺、高音域難聴、上方視麻痺、および歯の黄色染色を含む慢性神経学的後遺症（核黄疸とも呼ばれる）など、ある範囲の深刻な神経学的損傷を引き起こす。さらに、最近の懸念として、ビリルビン神経毒性が、オーディトリーニューロパチースペクトラム障害、早産新生児の無呼吸、およびおそらくは自閉症を含むその他の神経学的障害に関与する点がある。この範囲の神経学的損傷を、まとめてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）と呼ぶ。

ＢＩＮＤは、光療法、または交換輸血として公知のよりリスクのある侵襲的処置であって、高ビリルビンレベルの新生児の血液がゆっくり除去されかつ低ビリルビンレベルの適合性あるドナー血液により置き換えられる処置を使用して、身体からのビリルビン排泄を増大させることにより、予防または寛解させることができる。臨床医は現在、３５週未満の新生児に関して以下の表１に示される血清または血漿総ビリルビン濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）を使用する（例えば、Maisels MJ, et al. An approach to the management of hyperbilirubinemia in the preterm infant less than 35 weeks of gestation. J Perinatol 2012;32:660参照）。
表1

表１で使用される処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の範囲（単一処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の使用に対する）は、エビデンスベースではなく臨床経験および専門家の意見に基づくものであり、図１に示されるように、例えば妊娠（＜）２８週未満の新生児においては交換輸血がＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝１１ｍｇ／ｄＬと見なされるがＢ_{Ｔｏｔａｌ}が１４ｍｇ／ｄＬに達するまでは必須ではないなど、処置が必要とされるときに関してかなりの不確実性が導入される。臨床医は、妊娠２８週未満の新生児およびＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝１２ｍｇ／ｄＬが交換輸血を必要とするか否かをどのように判断するのであろうか。不確実性は、妊娠（≧）３５週よりも長いまたはそれに等しい新生児においてさらに大きく、光療法または交換輸血に関する必須のＢ_{Ｔｏｔａｌ}はなく、後者は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}が２５ｍｇ／ｄＬに達したときに「考慮される」だけである（American Academy of Pediatrics, Management of hyperbilirubinemia in the newborn infant 35 or more weeks of gestation. Pediatrics 2004; 114:297-316参照）。これらの不確実性は過剰な処置に繋がり、著しい社会的および財務コストをもたらし、それでもこの手法はＢＩＮＤを排除していない。

処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の範囲は、例えば表１において、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}がＢＩＮＤにそれほど相関しないので使用される（例えば、Watchko JF et al. The enigma of low bilirubin kernicterus in premature infants: why does it still occur, and is it preventable? Semin Perinatol 2014; 38: 397-406、およびIp S et al. An evidence-based review of important issues concerning neonatal hyperbilirubinemia. Pediatrics 2004; 114: e130参照）。光療法も交換輸血もリスク（死を含む）がないわけではないので、新生児は、ＢＩＮＤに罹りまたは不必要な処置による合併症に罹る可能性がある。

図２に示されるように、血漿中ビリルビン結合を測定することは、非アルブミン結合または遊離血漿中ビリルビン（Ｂ_Ｆｒｅｅ）のみが毛細血管および血液脳関門を横断して脳が存在する組織に進入するので、重要である。図３に示されるように、任意のＢ_{ｔｏｔａｌ}でＢ_Ｆｒｅｅが高くなるほど、対応するビリルビンの組織中レベルも高くなり、脳がさらにビリルビンに曝され、したがってＢＩＮＤのリスクが高くなる。ビリルビン結合は、新生児血漿中で非常にばらつき、ビリルビン結合が不十分な新生児は、正常な結合を持つ新生児に比べ、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で比較的高いＢ_Ｆｒｅｅおよび組織中ビリルビンレベルを有することになるが、それは不十分なビリルビンが存在する場合、所与のＢ_{Ｔｏｔａｌ}に達することが必要な蓄積されたビリルビンがより多く、そのＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのより高い組織中ビリルビンレベルが、正常なビリルビン結合を持つ同等の新生児に対してビリルビンに対する脳の曝露およびＢＩＮＤのリスクを増大させるからである（図２および図３参照）。

最近の研究は、類似のＢ_{Ｔｏｔａｌ}を有する高ビリルビン血症を持つ新生児におけるＢ_ＦｒｅｅによってＢＩＮＤが予測されることを文書化しており（図３、および例えばAmin SB, et al. Chronic auditory toxicity in late preterm and term infants with significant hyperbilirubinemia. Pediatrics 2017; 140: e20164009参照）、これらの新生児の通常の評価にビリルビン結合を加えることを検証している。さらに、ビリルビン結合は、日本では定期的に測定され、臨床上非常に役立つことが報告されている（例えば、Morioka I et al. Serum unbound bilirubin as a predictor for clinical kernicterus in extremely low birth weight infants at a late age in the neonatal intensive care unit. Brain Dev 2015; 37:753参照）。

Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅは一般に、しかし誤って、臨床ケアを導くための独立した代替例として見られ、例えば表１のように、Ｂ_Ｆｒｅｅ処置基準が何とか現行のＢ_{Ｔｏｔａｌ}処置基準に取って変わる可能性があるという誤解がある。Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅは独立しておらず、むしろ相互依存した測定値であり、質量作用の法則を通して血漿中ビリルビン結合部位（例えば、アルブミン）に化学的に密接に関連している。ＢＩＮＤのリスクは、ビリルビンがどの程度蓄積されたか、ならびに血液と組織との間でどのように分布されたかに依存し、これはＢ_{Ｔｏｔａｌ}および濃度の数学的関数であるＢ_Ｆｒｅｅ（図２）と、以下に詳述される血漿中ビリルビン結合部位（例えば、アルブミン）の固有の結合能力とにより決定されるものである。ビリルビン結合を臨床ケアに組み込むための実行可能な手法は、平均以下または不十分なビリルビン結合を持つ新生児の識別を可能にし、それに応じて現行のＢ_{Ｔｏｔａｌ}処置指針を調節する手法でビリルビン結合を定量することである。これはケアを個別化することによって、ＢＩＮＤのリスクを決定するのに（例えば、図１）Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}のみを使用する際の固有の不確実性を低減させる。
血漿中ビリルビン結合の定量は、（１）結合することができるビリルビンの最大量（Ｂ_Ｔｍａｘ）と、（２）それがどのように緊密に結合できているかを決定することを必要とし、これは平衡会合または解離定数を使用して典型的には定量されるものである。Ｂ_Ｔｍａｘは、官能化ビリルビン結合部位の濃度に依存し、ビリルビン結合能、または結合部位がビリルビンで「飽和」されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}としばしば呼ばれる（例えば、結合部位の濃度が４５３μｍｏｌ／Ｌである場合、Ｂ_Ｔｍａｘ＝２６．５ｍｇ／ｄＬ＝４５３μｍｏｌ／Ｌである）。ビリルビンが結合部位でどのように緊密に結合されるかは、結合定数によって、例えば平衡会合定数Ｋ_ｎによって定量され、但しｎは、ビリルビンに結合する種々の固有の能力を持つ部位の数であり、各部位を表す定数は、Ｋ_１、Ｋ_２．．．Ｋ_ｎである。化学平衡は、

であり、式中、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}－Ｂ_Ｆｒｅｅは、結合部位に結合されたビリルビンの濃度であり、Ｂ_Ｔｍａｘ－（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}－Ｂ_Ｆｒｅｅ）は、非占有（利用可能）ビリルビン結合部位の濃度である。アルブミンは、少なくとも２つのビリルビン結合部位を有することが公知であり、Ｂ_Ｔｍａｘおよび対応する平衡定数を得るための標準方法を使用してビリルビン結合部位を定量することは、いくつかのＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのＢ_Ｆｒｅｅの測定を必要とする（Jacobsen J. Binding of bilirubin to human serum albumin - Determination of the Dissociation Constants. FEBS Lett 1969; 5: 112-114参照）。著しい試験時間、大きい試料体積、およびデータ解析の複雑さは、標準方法を使用した臨床検査室でのビリルビン結合の通常の定量を妨げる。

Maisels MJ, et al. An approach to the management of hyperbilirubinemia in the preterm infant less than 35 weeks of gestation. J Perinatol 2012;32:660 American Academy of Pediatrics, Management of hyperbilirubinemia in the newborn infant 35 or more weeks of gestation. Pediatrics 2004; 114:297-316 Watchko JF et al. The enigma of low bilirubin kernicterus in premature infants: why does it still occur, and is it preventable? Semin Perinatol 2014; 38: 397-406 Ip S et al. An evidence-based review of important issues concerning neonatal hyperbilirubinemia. Pediatrics 2004; 114: e130 Amin SB, et al. Chronic auditory toxicity in late preterm and term infants with significant hyperbilirubinemia. Pediatrics 2017; 140: e20164009 Morioka I et al. Serum unbound bilirubin as a predictor for clinical kernicterus in extremely low birth weight infants at a late age in the neonatal intensive care unit. Brain Dev 2015; 37:753 Jacobsen J. Binding of bilirubin to human serum albumin - Determination of the Dissociation Constants. FEBS Lett 1969; 5: 112-114

要旨
代替の実施形態では、ビリルビンのｉｎ ｖｉｖｏ毒性レベルを評価し、特に高ビリルビン血症（黄疸）を持つ新生児での、ニューロパチー、例えば脳症またはビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）などであって、脳症、難聴、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含むことができる、ビリルビン関連病態を発症する相対的リスクを診断するための方法、デバイス、およびシステムが提供される。

代替の実施形態において、本明細書で提供される方法、デバイス、およびシステムは、血漿中ビリルビン結合が正常であるか否かを正確に決定するために、および患者のＢＩＮＤの相対的リスクを評価するために、試験のビリルビン結合パネル（ＢＢＰ）を連結することによって、臨床データを処理し分析することを含み：Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅは、試料中のビリルビンの濃縮の前および後で測定され、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、コンピュータアルゴリズムを持つ機器の実装により決定された現行のＢ_{Ｔｏｔａｌ}処置指針による。これらのデータは、現行のＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのＢＩＮＤのリスクの、２つの重要な新しい評価を提供し、関連ある集団（Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}）に関する標準リスクＢ_Ｆｒｅｅと比較するためのＢ_Ｆｒｅｅと、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が生じるＢ_{Ｔｏｔａｌ}である。

Ｂ_Ｆｒｅｅ＝Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}または

である場合、ＢＩＮＤの相対的リスクは、著しい高ピリルビン血症を持つ黄疸のある新生児において増大する（代替の実施形態において、「著しい高ビリルビン血症」という用語は、個体、例えば新生乳幼児などの患者の健康を維持するための処置を必要とする、または高ビリルビン血症を低下させて個体の健康を改善させるおよび／または高ビリルビン血症による個体の健康のさらなる悪影響を予防するまたは高ビリルビン血症の症状を寛解させる処置を必要とする、高ビリルビン血症である）。

代替の実施形態では、最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）およびその関連ある平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を決定することを含む、血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量するための方法（プロセス）、デバイス、およびシステムが提供され、

であり、Ｂ_ＦｒｅｅおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}は、それぞれ非結合または遊離ビリルビンのおよび総ビリルビンの測定された血漿中濃度であり、
必要に応じて、方法は、以下に示されるように：

Ｂ_Ｔｍａｘを解くことができる、２個の未知数（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）を持つ２つの方程式を得るために、血漿試料のビルビリン濃縮の前（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ）および後（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ＿２}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿２}）にＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定することにより患者におけるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを得るための新規な方法を最初に使用することによって、ビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤのリスクが増大するか否かを決定する。

次いで計算されたＢ_Ｔｍａｘ、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、およびＢ_Ｆｒｅｅを

に代入して、

を得、あるいはＫ_Ａは負の切片であり、Ｂ_Ｔｍａｘは、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が一次方程式

であるからであり、次いでＢ_Ｆｒｅｅを、処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}で生じるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}と、および図４に示されるように必要に応じて同等集団に関する中央値Ｂ_Ｔｍａｘおよび中央値Ｋ_Ａと比較し、例えば

であり、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が生じる患者のＢ_{Ｔｏｔａｌ}を決定し、即ち

である。Ｂ_Ｆｒｅｅ＝Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}または

である場合、ＢＩＮＤのリスクは、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}とは無関係に処置を正当化し、（例えば、妊娠（＜）２８週未満の３１名の新生児におけるビリルビン結合を示す表２を参照されたい（Ahlfors CE, et al., Bilirubin binding capacity and bilirubin binding in neonatal plasma E-PAS2017 2017:2718.2715参照）。
表2

中央値Ｂ_Ｔｍａｘは２２．０ｍｇ／ｄＬであり、中央値Ｋ_Ａは１６ｄＬ／μｇであり、必要に応じて、患者は新生児であり、必須の光療法Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} ６ｍｇ／ｄＬ（表１）、必要に応じて、妊娠（＜）２８週未満の新生児（表１）に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_ＡでのＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は、図４に示されるように

になると考えられ、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ（表１）でのＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は、図４に示されるように

と考えられる。第２５四分位数Ｂ_Ｔｍａｘ（１４．３ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．７５ｄＬ／μｇ）を持つこの集団における新生児、即ち不十分なビリルビン結合を持つ新生児は、光療法および交換輸血Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}、それぞれ０．３２μｇ／ｄＬおよび１．５１μｇ／ｄＬに、それぞれ

および

で至ると考えられ、これは表１における現行光療法Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}閾値５ｍｇ／ｄＬおよび交換輸血閾値１１ｍｇ／ｄＬよりも十分低い。一方、第７５四分位数Ｂ_Ｔｍａｘ（２４．８ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（２．２０ｄＬ／μｇ）を持つこの集団における新生児、即ち優れたビリルビン結合を持つ新生児は、光療法および交換輸血Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} ０．３２μｇ／ｄＬおよび１．５１μｇ／ｄＬにそれぞれ、光療法

および交換輸血

で至ると考えられ、表１におけるように現行光療法Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}閾値５ｍｇ／ｄＬおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}交換輸血閾値１１ｍｇ／ｄＬよりも十分高い。）同じＢ_{Ｔｏｔａｌ}を持つがビリルビンに結合するための著しく異なる能力を持つ２名の新生児は、ＢＩＮＤの著しく異なるリスクにあり、その差は、ビリルビン結合を測定することによってのみ検出することができる。第２５四分位数Ｂ_Ｔｍａｘ（１４．３ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．７５ｄＬ／μｇ）を持ち、即ち不十分なビリルビン結合を持ち、かつＢ_{Ｔｏｔａｌ} ７．６ｍｇ／ｄＬを持つ、妊娠（＜）２８週未満の新生児は、交換輸血に関してＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}（１．５１μｇ／ｄＬ）に達したが、ビリルビン結合の測定はなく、現行Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}処置指針（表１）に従う、疑いを持たない臨床医は、光療法を施用するだけで交換輸血を考慮しないと考えられる。

代替の実施形態では、本明細書で提供される方法はさらに、患者におけるＢ_Ｆｒｅｅと同等の集団におけるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}（例えば、必要に応じて、同等の集団は、表１に示されるのと同じ妊娠期間の集団である）とを比較することによって、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で（現行の臨床診療が、処置を考慮すべきと見なすか否かに関わらず）、患者における高ビリルビン血症処置の必要性を評価することを含み、図４に示される

に等しいまたはそれよりも大きい患者におけるＢ_Ｆｒｅｅ、または、

に等しいまたはそれよりも大きいＢ_{Ｔｏｔａｌ}（例えば、妊娠（＜）２８週未満の新生児の場合、必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ（表１）、および必要に応じて中央値Ｂ_Ｔｍａｘ（２２．０ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（１．１６ｄＬ／μｇ）（表２）でのＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は、

である）は、必須処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}で、ＢＩＮＤのより大きいリスクを示し（例えば、妊娠（＜）２８週未満の新生児では、表２による第２５四分位数Ｂ_Ｔｍａｘ（１４．３ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．７５ｄＬ／μｇ）ならびに表１による必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬでのＢ_Ｆｒｅｅは、

で、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}＝１．５１μｇ／ｄＬの４０倍以上である）、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、Ｂ_ＦｒｅｅおよびＢＩＮＤのリスクは、図３および図４に示されるようにＢ_{Ｔｏｔａｌ}とは無関係にＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが低下するにつれて増大し、即ち、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、ビリルビンに対するより多くの脳の曝露、および高ビリルビン血症およびビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤの増大したリスクまたは存在が、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが低下するにつれて現れることを示す。

代替の実施形態では、個体において血漿、血清、または血液をどのようにうまく（またはどのように臨床上効率的に）ビリルビンに結合するかを定量するための方法であって、必要に応じて同等の集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａとの比較のために、最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）およびその対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を決定することを含む方法が提供される。Ｒが、必須の処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、ならびに必要に応じて集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａで得られたＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}である場合、Ｒが生じる患者のＢ_{Ｔｏｔａｌ}は

であり、式中、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは個体のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａであり）、

およびＢ_{Ｔｏｔａｌ}は、それぞれ非アルブミン結合または遊離ビリルビンおよび総ビリルビンの濃度であり、
試料中のビリルビン濃度を高める前および後にＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定することにより、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ＿１}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿１}、およびＢ_{Ｔｏｔａｌ＿２}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿２}が提供されて、２つの未知数（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）を持つ２つの方程式が得られ、これは以下に示されるようにＢ_Ｔｍａｘに関して解くことができる：

次いで計算されたＢ_Ｔｍａｘ、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、およびＢ_Ｆｒｅｅを、

に代入して、

を得、あるいはＫ_Ａは、負の切片であり、Ｂ_Ｔｍａｘは、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が一次方程式

であるからであり、
必要に応じて、濃縮は、試料中のビリルビンの量を、妊娠（＜）３５週未満の新生児において（表１）およそ必須の処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}まで、例えば約２０ｍｇ／ｄＬまで、および妊娠３５週またはそれよりも長い新生児においては約３０ｍｇ／ｄＬまで増大させることを含み、例えば、Wickremasinghe AC, et al. Risk of sensorineural hearing loss and bilirubin exchange transfusion thresholds. Pediatrics 2015; 136: 505-512を参照されたく、
必要に応じて、方法は、
（ａ） 個体から血漿、血液、または血清試料を得る、または採取すること；
（ｂ） 試料中のＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定すること、および
（ｃ） 血漿、血液、または血清試料をビリルビンとともに濃縮すること（または外因性ビリルビンを試料に添加すること）であって、
必要に応じて、濃縮は、試料中のビリルビンの量を、妊娠（＜）３５週未満の新生児において（表１）およそ交換輸血が必須である濃度まで、例えば約２０ｍｇ／ｄＬまで、および妊娠３５週よりも長くまたはそれに等しい新生児においては約３０ｍｇ／ｄＬまで増加させることを含むものであること、
（ｄ） ビリルビン濃縮後の試料中のＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定すること、および
（ｅ） 最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）および対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を決定すること
を含み、
個体のＢ_Ｆｒｅｅが、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}で決定されたＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}（必要に応じて、表１に示される必須処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、および必要に応じて、交換輸血に関する必須処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}は、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関して１４ｍｇ／ｄＬである）および必要に応じて、個体のＢ_{Ｔｏｔａｌ}とは無関係に、同等の集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａよりも上である場合（および必要に応じて、中央値Ｂ_Ｔｍａｘは、２２．０ｍｇ／ｄＬであり、中央値Ｋ_Ａは、１．１６μｇ／ｄＬであり、必要に応じて、

である、図４参照）、このことは、血漿または血清が、ビリルビンの結合においても保持においても臨床的に効率的ではなく、高ビリルビン血症（黄疸）に対する処置の適応があることを示し、
必要に応じて、方法はさらに、ビリルビン結合を定量し、個体のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを、必要に応じて適切な同等の新生児集団における中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較することによって（必要に応じて、表２に示されるように、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関して中央値Ｂ_Ｔｍａｘ＝２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ_Ａ＝１．１６ｄＬ／μｇ）、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で個体における高ビリルビン血症の処置に対する必要性を評価することを含み、中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａよりも低い患者のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}でビリルビンへのより多くの脳の曝露と、ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のより多くのリスクとを示し、例えば表１の、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}よりも下のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、黄疸を含む高ビリルビン血症の処置が保証されてもよく、
必要に応じて、方法はさらに、患者のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａにあるその個体に固有の

での患者における、黄疸を含む高ビリルビン血症の処置に関する必要性を評価することを含み、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}は、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、例えば表１とは異なっていてもよく、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}（

）で、必要に応じて患者の同等者、必要に応じて同等集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_ＡでＢ_Ｆｒｅｅであり（必要に応じて、患者が妊娠（＜）２８週未満である場合、必須の交換輸血は、表１に示されるようにＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝１４ｍｇ／ｄＬであり、必要に応じて、中央値Ｂ_Ｔｍａｘが２２．０ｍｇ／ｄＬおよび中央値Ｋ_Ａが１．１６ｄＬ／μｇ、

である）；個体の

でのＢＩＮＤの相対的リスクは、処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}（表１）で、必要に応じて集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａで生じる場合と同じになると考えられ、ビリルビンに対する十分な脳の曝露およびビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクがあり、その結果、高ビリルビン血症または黄疸に関する処置が保証される。

代替の実施形態では、血漿、血清、または血液がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量するための方法であって、最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）および平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を決定することを含む方法が提供され、

であり、Ｂ_ＦｒｅｅおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}は、それぞれ非アルブミン結合または遊離ビリルビンおよび総ビリルビン濃度であり、
必要に応じて、方法は、ビリルビン結合、即ちＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが正常であること（例えば、同等の個体に関して中央値または平均にあるまたはそれよりも上のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）または正常を下回ることを、患者のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと、必要に応じて同等の個体における平均または中央値とを比較することによって決定し、必要に応じて、患者は新生乳幼児であり、患者における正常値よりも低いＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}（例えば、表１）よりも下のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、ビリルビンに対するより多くの脳の曝露と、高ビリルビン血症およびビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のより多くのリスクまたはその存在とがあることを示し、
必要に応じて、方法はさらに、Ｂ_Ｆｒｅｅを、同等の個体に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}、必要に応じて処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}ならびに同等の抗体に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａで決定されたＢ_{ＦｒｅｅＳｔｎｄａｒｄ}と比較することによって、高ビリルビン血症（または黄疸）処置に関する必要性を評価することを含み、患者は新生乳幼児であり、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}よりも大きいまたはそれに等しいＢ_Ｆｒｅｅは、ビリルビンに対する十分な脳の曝露と、ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクとを示し、その結果、高ビリルビン血症（例えば、黄疸）に関する処置が保証され、
必要に応じて、方法はさらに、患者のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａならびに患者の同等者、必要に応じて集団のＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}を使用して決定される、患者の

である、固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}を決定することによって、処置が考慮されるべきであると現行の臨床診療が見なすものより低い固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}にある患者での高ビリルビン血症（黄疸を含む）処置に関する必要性を評価することを含み（例えば、患者が妊娠（＜）２８週未満である場合、必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ（表１）および必要に応じて中央値Ｂ_Ｔｍａｘ ２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ_Ａ １．１６ｄＬ／μｇ（表２）でのＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は

であり、例えば第２５四分位数Ｂ_Ｔｍａｘ １４．３ｍｇ／ｄＬおよびＫ_Ａ ０．７５ｄＬ／μｇをもつ妊娠２８週未満の新生児は、表１による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する現行の必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬの約半分の

で、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} １．５１μｇ／ｄＬに達すると考えられる）；患者の固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、ビリルビンへの脳の曝露、ならびにビリルビン毒性、必要に応じて神経毒性、および必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクは、現行の必須の処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}で生じる場合と同じであり、処置は、必須の処置のＢ_{Ｔｏｔａｌ}よりも低い患者のＢ_{Ｔｏｔａｌ}にも関わらず保証される。

代替の実施形態では、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを決定するために、本明細書で提供される方法（例えば、本明細書で提供される方法）を含む、または本明細書で提供される方法を実行するための、および必要に応じて：データ要素を受信すること；およびデータ要素を記憶することをさらに含む、コンピュータ実装方法が提供される。

代替の実施形態では、データを処理し、血漿試料のビリルビン濃縮の前および後に測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを使用して新規な方法により得られたＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを決定するための、コンピュータプログラム製品であって、本明細書で提供されるようなコンピュータ実装方法を含むコンピュータプログラム製品が提供される。

代替の実施形態では、血漿試料のビリルビン濃縮の前および後に測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを使用する新規な方法によって得られるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを決定するための、グラフィカルユーザインターフェースが（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品であって、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を含む、ＧＵＩコンピュータプログラム製品が提供される。

代替の実施形態では、プロセッサおよびデータ記憶デバイスを含むコンピュータシステムであって、前記データ記憶デバイスには、：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合せが記憶されたコンピュータシステムが提供される。

代替の実施形態では、（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するためのプログラム命令を含む、非一時的記憶媒体が提供される。

代替の実施形態では、データを入力し、血漿試料のビリルビン濃縮の前および後で測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを使用する新規な方法により得られたＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを決定するための計算を行うための、コンピュータプログラム製品を格納する非一時的コンピュータ可読媒体であって、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を含む非一時的コンピュータ可読媒体が提供される。

代替の実施形態では、コンピューティングデバイスのプロセッサにより実行されたときにコンピューティングデバイスで：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム；または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するコンピュータ可読命令を含む、非一時的コンピュータ可読記憶媒体が提供される。

代替の実施形態では、非一時的コンピュータ可読記憶媒体と；前記記憶媒体に常駐するプログラム命令とを含み、プログラム命令は、コンピュータにより実行されたときに：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合せを処理し／または実装する、コンピュータプログラム製品が提供される。

代替の実施形態では、有形のコンピュータ可読媒体に具体化された、コンピュータプログラム記憶デバイスであって：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合を含む、コンピュータプログラム記憶デバイスが提供される。

代替の実施形態では、メモリと；メモリに動作可能に結合されたプロセッサとを含み、プロセッサはメモリに記憶されたプログラムコードを実行し：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するように適合された、コンピュータまたは等価な電子システムが提供される。

代替の実施形態では、複数のデータポイントおよび／または複数のデータ要素に関連付けられた値を記憶するように構成されるメモリと、メモリに記憶されたプログラムコードを実行して：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するように適合されたプロセッサとを含む、システムが提供される。

代替の実施形態では、外部データソースまたは外部サーバプロセスへの、接続サーバを介したアプリケーションのアクセスをもたらすための、ならびに複数のデータポイントおよび／または複数のデータ要素に関連付けられた値を記憶する能力と、：（ａ）本明細書で提供されるコンピュータ実装方法；（ｂ）本明細書で提供されるコンピュータプログラム製品；（ｃ）本明細書で提供されるグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品；または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するためのアプリケーションとを提供するための、コンピュータ実装システムが提供される。

代替の実施形態では、血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量することが可能なデバイス、例えば医療または分析デバイスであって、Ｂ_Ｆｒｅｅ（非アルブミン結合または遊離ビリルビン濃度）およびＢ_{Ｔｏｔａｌ}（総ビリルビン濃度）を測定し、このデータを、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を実行することができる、本明細書で提供されるコンピュータ実装システム、本明細書で提供されるシステム、または本明細書で提供されるコンピュータもしくは等価な電子システムに伝達して、血漿試料のビリルビン濃縮の前および後に測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを使用する新規な方法によって得られたＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを決定しまたは計算しおよび例えばユーザに出力することが可能である、デバイスであって、
必要に応じて、本明細書で提供されるコンピュータ実装システム、本明細書で提供されるシステム、または本明細書で提供されるコンピュータもしくは等価な電子システムは、デバイスの部分でありもしくはデバイス内にあり、またはデバイスから離れており（例えば、単に直接接続されておるまたは無線で接続されている）、
デバイスは、試料、必要に応じて血漿または血液試料から：総血清ビリルビン濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）；Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを得るためのビリルビン濃縮の前および後に非結合または遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）を測定することが可能な構成要素、必要に応じてロボット化学構成要素を含み、
必要に応じて、コンピュータ実装システム、システム、またはコンピュータもしくは等価な電子システムは、デバイスの一体的部分であり、またはデバイスに操作可能に離れて連結されており、
必要に応じて、デバイスは、自動化マイクロ流体取扱い技術、必要に応じてゾーン流体システムまたはロボットゾーン流体分析システムを含む、デバイスが提供される。

代替の実施形態では、
－ ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤのリスク、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸、または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
の、必要とする個体における診断または予後（または獲得の可能性を予測する）のための、方法もしくはプロセス、またはシステムもしくはデバイスであって：
（ａ） 本明細書で提供される方法を使用すること；または
（ｂ） 最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）および対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を決定すること
を含む、その個体の血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量することを含み、

であり、Ｂ_ＦｒｅｅおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}は、それぞれ非アルブミン結合または遊離ビリルビンおよび総ビリルビンの濃度であり、
方法は、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないか、およびＢＩＮＤの相対的リスクを、Ｂ_Ｆｒｅｅと、同等者の同等の集団に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}とを比較し（例えば、表１による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関し、必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬで、必要に応じて、表２による中央値Ｂ_Ｔｍａｘ ２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ_Ａ １．１６ｄＬ／μｇで、

である）、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が生じる固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}（

）と、同等者の同等の集団に関する現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}とを比較する（例えば、表１による１４ｍｇ／ｄＬのＢ_{Ｔｏｔａｌ}で必須の交換輸血を伴う妊娠（＜）２８週未満の新生児に関し、第２５四分位数Ｂ_Ｔｍａｘ（１４．３ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．７５ｄＬ／μｇ）を持つ患者は、

で１．５１μｇ／ｄＬのＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に達することになる）ことによって決定し、必要に応じて、患者は新生児であり、Ｂ_ＦｒｅｅがＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれよりも大きい場合またはＢ_{Ｔｏｔａｌ}が処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}未満である場合、このことは、ビリルビンへのより多くの脳の曝露と、
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
の増大したリスクまたは存在とを示す、
方法もしくはプロセス、またはシステムもしくはデバイスが提供される。

代替の実施形態では、
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、必要とする個体（必要に応じて、黄疸のある新生児）において処置し、寛解させ、逆転させ、または予防するための方法であって、
（ａ） 本明細書で提供される方法または本明細書で提供されるデバイスを使用して、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを、患者におけるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ対必要に応じて同等の新生児集団における平均または中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを比較し、患者におけるＢ_Ｆｒｅｅを、同等の集団におけるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}およびＢ_Ｆｒｅｅ＝Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}での患者におけるＢ_{Ｔｏｔａｌ}と比較することによって決定することであり、必要とする個体が、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒａｄ}に等しいまたはそれよりも大きいＢ_Ｆｒｅｅまたは現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}よりも低いＢ_{Ｔｏｔａｌ}を有する場合、このことは、より多くの脳のビリルビン曝露と、
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
のより多くのリスクまたは存在を示すものであること；および
（ｂ） 必要とする個体が、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒａｄ}に等しいまたはそれよりも大きいＢ_Ｆｒｅｅをまたは現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}よりも低いＢ_{Ｔｏｔａｌ}を有する場合、
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、必要とする個体で処置し（またはそのための処置を開始し）、寛解させ、逆転させ、または予防すること
を含む方法が提供される。

代替の実施形態では、
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、
－ 必要とする個体で処置し、寛解させ、逆転させ、または予防する
のに使用されるデバイスであって、
本明細書で提供されるデバイス、本明細書で提供されるコンピュータ実装システム、本明細書で提供されるシステム、または本明細書で提供されるコンピュータもしくは等価な電子デバイスを含み、
デバイスは、患者におけるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを得、次いで同等の新生児集団におけるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａに対して比較し、必要とする個体におけるＢ_Ｆｒｅｅを同等の新生児集団におけるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に対して比較するために、試料のビリルビン濃縮の前および後にＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定するための新規な方法を使用することによって、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを決定することができ、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}よりも低いＢ_{Ｔｏｔａｌ}で必要とする個体で生じる正常よりも高いＢ_ＦｒｅｅまたはＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は、より多くの脳のビリルビン曝露と：
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
のより多くのリスクまたは存在を示す、デバイスが提供される。

代替の実施形態では、
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、
－ 必要とする個体で処置し、寛解させ、逆転させ、または予防する
ためのデバイスの使用であって、
デバイスは、本明細書で提供されるデバイス、本明細書で提供されるコンピュータ実装システム、本明細書で提供されるシステム、または本明細書で提供されるコンピュータもしくは等価は電子システムを含み、
デバイスは、患者におけるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを得、次いで必要に応じて同等の新生児集団における平均または中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａに対して比較し、必要とする個体におけるＢ_Ｆｒｅｅを同等の新生児集団におけるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に対して比較するために、試料のビリルビン濃縮の前および後にＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定するための新規な方法を使用することによって、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを決定することができ、正常よりも低いＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと、必要とする個体のＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれよりも大きいＢ_Ｆｒｅｅは、より多くの脳のビリルビン曝露と：
－ 著しい高ビリルビン血症（黄疸を含む）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてＢＩＮＤ、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
のより多くのリスクまたは存在を示す、使用が提供される。

本明細書に記述されるビリルビン結合パネル（ＢＢＰ）は、血漿臨床検査（総ビリルビン濃度、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、および非結合または遊離ビリルビン濃度、ビリルビンによる血漿試料の濃縮の前および後に測定されたＢ_Ｆｒｅｅ）の新規なパネルを使用して、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを計算することにより、患者のビリルビン結合を定量するＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと、そのＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのビリルビン誘発性神経学的機能不全つまりＢＩＮＤの相対的リスクを定量するＢ_Ｆｒｅｅとを臨床医に提供する。これらのデータは、ビリルビンを含む試料の濃縮の前および後にＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅが測定されるように、ビリルビン結合を測定するための現行の方法を修正することによって得られる。これには標準方法を使用する著しく多くの試料（典型的には血漿２５μＬ）（例えば、Ahlfors CE, et al. Measurement of unbound bilirubin by the peroxidase test using Zone Fluidics. Clin Chim Acta 2006; 365: 78-85参照）が必要と考えられるが、ゾーン流体／ＳＩＡ分析は、非常に少量の試料しか必要とせず、試料体積の最小限の増加を使用して（血漿２５μＬ未満）、追加の測定を行うのに適合させることができる。現在、臨床医は、ＢＩＮＤのリスクを評価するのにＢ_{Ｔｏｔａｌ}しか有しておらず、結合評価の定量にＢ_Ｆｒｅｅ、Ｂ_Ｔｍａｘ、およびＫ_Ａを加えることで、ＢＩＮＤのリスクは患者のケアを個別化し、高ビリルビン血症を持つ新生児をいつどのように処置するかの決定を改善する。

本発明の１つまたは複数の実施形態の詳細を、添付図面および以下の説明で述べる。本発明のその他の特徴、目的、および利点は、説明および図面から、ならびに特許請求の範囲から明らかにされよう。

本明細書で引用される全ての刊行物、特許、特許出願、ＧｅｎＢａｎｋ配列、およびＡＴＣＣ寄託は、全ての目的で参照により本明細書に明らかに組み込まれる。

以下の図面は、本発明の態様の例示であり、特許請求の範囲により包含される実施形態の範囲を限定するものではない。

図１は、表１による、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する現行のＢ_{Ｔｏｔａｌ}処置指針を示す。任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクは未知であるが、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}が増大するにつれて増大する。光療法は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}＝５ｍｇ／ｄＬで考慮されるが、６ｍｇ／ｄＬに達するまで必須ではなく、交換輸血はＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝１１ｍｇ／ｄＬで考慮されるが、１４ｍｇ／ｄＬに達するまで必須ではない。灰色ゾーンはかなりの不確実性を示し、ＢＩＮＤのリスクが灰色ゾーンにおけるＢ_{Ｔｏｔａｌ}での処置に値するほど十分であるか否かを、臨床医がどのように決定するのか明らかではない。例えば、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}＝１２ｍｇ／ｄＬの新生児が交換輸血を必要とするか否かを、臨床医はどのように判断するのであろうか。

図２は、非アルブミン結合または遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）が、組織（脳）と血液との間のビリルビンの移動を支配することを、概略的に示す。血漿中ビリルビン結合が不十分な乳児（任意の総ビリルビン濃度で、より高いＢ_Ｆｒｅｅ）は、所与のＢ_{Ｔｏｔａｌ}に達するのに、より多く蓄積されたビリルビンを必要とし、したがって、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}に達する正常なビリルビン結合を持つ患者に対して、そのＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、ビリルビンのより高い組織レベルおよびビリルビンへの脳の曝露を有することになる。したがって、任意のＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのＢＩＮＤのリスクは、不十分なビリルビン結合を持つ新生児でより大きい。

図３は、ＢＩＮＤのリスクが、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅの両方が増大するにつれて増大することを示し、共に、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}しかリスク評価に使用されない図１と比較して、リスクの評価を改善することが分かる。

図４は、集団に関して中央値、第２５および第７５パーセンタイルで生じ得る、図１の灰色ゾーンの端から端までの（青色のドットから橙色のドットまで）Ｂ_Ｆｒｅｅの増大を示し、表１による、必須の光療法（０．３２μｇ／ｄＬ）および交換輸血（１．５１μｇ／ｄＬ）Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}がそれぞれ６ｍｇ／ｄＬおよび１４ｍｇ／ｄＬで、および

を使用して計算された表２による中央値Ｂ_Ｔｍａｘ（２２．０ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（１．１６μｇ／ｄＬ）で生じるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}を示す。

図５は、表３からの測定されたＢ_Ｆｒｅｅ（黒丸）対Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}のプロットである。Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}＝８．３および３１．３１ｍｇ／ｄＬでペアリングデータからＢ_Ｔｍａｘ＝３６．９およびＫ_Ａ＝０．５７ｄＬ／μｇを使用して（但し、

である）、またはＢ_Ｔｍａｘ＝Ａ_{Ｔｏｔａｌ}＝２６．４ｍｇ／ｄＬでありかつ

であることを仮定して、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}において１ｍｇ／ｄＬの増分で計算されたＢ_Ｆｒｅｅも示される。単一部位アルブミンモデルを使用して計算されたＢ_Ｆｒｅｅは、ペアリングデータＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを使用して計算されたＢ_Ｆｒｅｅと比較すると、測定されたＢ_Ｆｒｅｅから著しくずれている。

図６は、ビリルビン結合を使用して修正された、特に必須のＢ_{Ｔｏｔａｌ}光療法（６ｍｇ／ｄＬ）および交換輸血（１４ｍｇ／ｄＬ）ならびに表２における妊娠＜２８週の３１名の新生児の集団に関する中央値Ｂ_Ｔｍａｘ（２２．０ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（１．１６ｄＬ／μｇ）を使用して得られたＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}を使用して修正された、図１に示される妊娠＜２８週の新生児に関する現行の処置指針を示す（

）。これは、処置が図１において自由裁量（不確実）であると見なされるＢ_{Ｔｏｔａｌ}灰色ゾーンをなくす。

図７は、表２からの測定されたＢ_Ｆｒｅｅ（黒丸）対Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}を示し；方程式

（式中、ＭＲは、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}／Ａｔｏｔａｌモル比（表３）であり、Ｋ_１（０．９３ｄＬ／μｇ）およびＫ_２（０．０４ｄＬ／μｇ）は、化学量論的質量作用方程式

に対する最良適合非線形回帰平衡定数である）を使用する化学量論モデル、またはＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝８．３および３１．３ｍｇ／ｄＬ（表３）で結合データをペアリングさせることによって決定されたＢ_Ｔｍａｘ＝３６．９およびＫ_Ａ＝０．５７ｄＬ／μｇを使用する

を使用して、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}において１ｍｇ／ｄＬの増分で計算されたＢ_Ｆｒｅｅも示す。本明細書で記述されるビリルビン結合を定量するための新規な方法は、標準の化学量論的方法にきわめて十分に同等である。

図８は、過酸化物によるビリルビンのホースラディッシュペルオキシダーゼ触媒酸化に関するＫｐが、アルブミンを含有しないビリルビン溶液（即ち、総ビリルビン濃度は、非結合または遊離ビリルビン濃度に等しい）中で決定されることを示す。総ビリルビン濃度は、４４０ｎｍでの吸光度を吸光係数で割ったものであるので、Ｋｐは、速度方程式

を積分することによって決定される。

図９は、ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）およびペルオキシダーゼを添加する前および後の、時間の関数として、ビリルビン／アルブミン溶液の４６０ｎｍでの光の吸光度を示す。４６０ｎｍでの初期吸光度は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}を得るのに使用され、ＨＲＰおよび過酸化物を添加した後の吸光度の変化は、Ｂ_Ｆｒｅｅを得るのに使用される。

様々な図面における同様の参照記号は、同様の要素を示す。

代替の実施形態では、ビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）を持つおよびそのリスクがある患者、例えば新生乳幼児における、ビリルビン結合が正常であるか否か、および患者が、処置を必要とするビリルビンの血漿中レベルを有するか否かを評価するための、ならびに急性ビリルビン脳症およびＢＩＮＤを含む、ビリルビン神経毒性のリスクが増大した著しい高ビリルビン血症を診断するための、方法、デバイス、および多重化システムが提供される。代替の実施形態では、本明細書で提供される方法によって特定された個体において、ｉｎ ｖｉｖｏ毒性レベルのビリルビンの作用を処置しもしくは寛解させまたは予防するための、あるいはビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）を処置もしくは寛解させまたは予防するための、方法が提供される。

代替の実施形態では、ビリルビン濃縮の前および後に測定された総血清ビリルビン濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）および非結合ビリルビンまたは遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）を含む、血漿中ビリルビン結合パネルに含まれる臨床検査室データを変換して、臨床上関係のある最大総ビリルビン濃度Ｂ_Ｔｍａｘおよびその対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を計算し、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを出力して、ビリルビンと、集団に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が生じるＢ_ＦｒｅｅおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}とを患者がどのようにうまく結合するかを定量して、ＢＩＮＤのリスクが、処置に値するほど十分高いか否かを決定するための、コンピュータ実装方法とすることができる方法が提供される。

代替の実施形態では、ビリルビン濃縮の前および後の血漿、血清、または血液試料からの、総血清ビリルビン濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）および非結合ビリルビンまたは遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）を測定するための、ゾーン流体システムなどの自動化マイクロ流体取扱い技術を含み、このデータを分析し、ビリルビン濃縮の前および後に測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅと、ビリルビン結合が患者において正常か否かを正確に決定するために、同等の個体におけるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較される、臨床上関係のある最大総ビリルビン（Ｂ_Ｔｍａｘ）およびその対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）と、同等の個体におけるＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}および現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}とそれぞれ比較したときにビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクを正確に決定する、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が生じる臨床上関係のある診断Ｂ_ＦｒｅｅおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}とを含む、ビリルビン結合パネルを出力するための、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法も組み込む、分析デバイスも提供される。代替の実施形態では、測定された臨床データを分析するための、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を実行するコンピュータまたはプロセッサの容量は、デバイス内で構築される。他の実施形態では、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を実行するコンピュータまたはプロセッサの容量が、デバイス、例えばゾーン流体分析デバイスから離れている、システムが提供される。

代替の実施形態では、その患者における後天性ビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）の存在またはリスクを正確に評価する目的で、ビリルビン結合が患者において、例えば新生乳幼児において正常であるか否かを評価するための、方法、デバイス、および多重化システムが提供される。ビリルビン結合の臨床使用は、ビリルビン結合を測定し、新生児の同等集団（例えば、正期産児、表１に示されるものと同じ妊娠期間の新生児など）のビリルビン結合パラメータを知ることに依存する。これらのデータは：（１）「ビリルビン結合は、高ビリルビン血症の新生児で正常か？」、および（２）「ビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクは何か？」という疑問に答える。例えば、集団に関する正常なＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが必要に応じて中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａである場合、第２５パーセンタイルのＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを持つ新生児は、集団に比べて不十分なビリルビン結合を有する（集団の７５％は、患者よりも高いＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを有する）。必須の処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}で、例えば表１によれば、交換輸血は、妊娠期間（＜）２８週未満の新生児に関してＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝１４ｍｇ／ｄＬで必須であり、表２の中央値Ｂ_Ｔｍａｘ（２２．０ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（１．１６ｄＬ／μｇ）でＢ_Ｆｒｅｅは、

であり、第２５パーセンタイルのＢ_Ｔｍａｘ（１４．３ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．７５ｄＬ／μｇ）では

であり、ＢＩＮＤのリスクが非常に高い。したがって、必要とする個体、必要に応じて新生児での、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ、Ｂ_Ｔｍａｘ、およびＫ_Ａの決定は、新生児がビリルビンをどのようにうまく結合するかを定量し、これらの計量値を同等者の集団の場合と比較することにより、必要とする個体でのＢＩＮＤのリスクが増大するか否かを決定することが可能になる。同等集団のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａノルム（例えば、平均、ＳＤ、範囲、中央値、四分位数など）を得ることは、適切な数の同等の新生児、典型的には約４００名の患者でのそれらの測定を必要とし（例えば、Lott JA, et al. Estimation of reference ranges: how many subjects are needed? Clin Chem 1992; 38:648-650参照）、必要とする個体からの試料のＢ_Ｆｒｅｅ、Ｂ_Ｔｍａｘ、およびＫ_Ａは、必要とする個体のＢ_{Ｔｏｔａｌ}でビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクを定量し、処置が集団に関して現在推奨されている値よりも低いＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、必要とする個体で処置が必要か否かを決定する。

代替の実施形態では、試料のビリルビン濃縮の前および後に測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅと、計算された臨床上関係のあるＢ_Ｔｍａｘおよびその対応する平衡会合定数（Ｋ_Ａ）とを含むビリルビン結合パネル（ＢＢＰ）の構成要素を使用して、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを、必要に応じて同等集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較することにより、ビリルビン結合が正常であるか否かを決定し、かつＢ_Ｆｒｅｅを、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}での集団に関して決定されたＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}ならびに必要に応じて集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較することにより、ＢＩＮＤのリスクが増大するか否かを決定する。さらに、処置が必要とされる実際のＢ_{Ｔｏｔａｌ}は、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}ならびにＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを使用して決定することができる。本明細書で提供されるＢＢＰは、ビリルビン結合をしっかりと定量し、黄疸を含む高ビリルビン血症の処置の必要性を評価するときにビリルビン結合が正常であるか否かを決定するのに使用することができる。ＢＢＰは、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}でのおよび処置が保証され得る実際のＢ_{Ｔｏｔａｌ}を決定するためのスクリーニング検査として使用することもできる（例えば、表１および２による（＜）２８週の新生児に関して交換輸血に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が１．５１μｇ／ｄＬである場合、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}が３．０ｍｇ／ｄＬでありＢ_Ｆｒｅｅが０．１８でありＢ_Ｔｍａｘが２０ｍｇ／ｄＬでありＫ_Ａが１．００ｄＬ／μｇであるこの群の新生児は、

でＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に到達すると考えられ、これは必須Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}交換輸血１４ｍｇ／ｄＬよりも低いものである）。本明細書で提供される方法により決定されたビリルビン結合パネルは、処置の必要性を決定する際にＢ_{Ｔｏｔａｌ}と競合するのではなく、これを含み支援する。

代替の実施形態では、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の臨床上関係のある範囲にわたり、例えば妊娠（＜）３５週未満の新生児に関して２０ｍｇ／ｄＬ未満のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で（表１参照）、ビリルビン結合をしっかりと定量する単純な技法を使用して、ビリルビン結合を定量する際の難題を克服する方法およびシステムが提供される。この手法では、Ｂ_Ｔｍａｘは、全ての血漿結合部位がビリルビンに占有されるＢ_{Ｔｏｔａｌ}ではなく、代わりに、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の臨床上関係のある範囲内の機能性ビリルビン結合部位の上限Ｂ_{ｔｏｔａｌ}であり、Ｋ_Ａは、Ｋ_１．．．Ｋ_ｎ平衡会合定数の、対応する合成数である。化学平衡は：

であり、Ｂ_Ｆｒｅｅは、臨床上関係のあるＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのＢ_{Ｔｏｔａｌ}よりも桁数が小さいので、

であり、得られた質量作用方程式を以下に示す。

は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ、およびＢ_{Ｔｏｔａｌ＿２}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿２}を得るために、ビリルビンを含む試料の濃縮の前および後に、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定することにより、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａに関して容易に解くことができる。これらは、以下に示されるように、Ｂ_Ｔｍａｘに関して解くことができる、２つの未知数（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）を持つ２つの方程式を提供する：

次いで計算されたＢ_Ｔｍａｘ、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、およびＢ_Ｆｒｅｅを

に代入してＫ_Ａ（

）を得、あるいはＫ_Ａは、負の切片であり、Ｂ_Ｔｍａｘは、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が一次方程式

であるからである。

表３は、ビリルビンを含有し、ヒト脱脂アルブミン濃度（Ａ_{Ｔｏｔａｌ}）３．０ｇ／ｄＬを持つ、人工血清で得られたビリルビン結合等温線を示す。図５は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}が増大するときのＢ_Ｆｒｅｅ（黒色ドット）の変化を示す。１／Ｂ_Ｆｒｅｅ対１／Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の負の切片、即ちＫ_Ａは、０．５３μｇ／ｄＬであり、負の勾配／切片、即ちＢ_Ｔｍａｘは、３７．５ｍｇ／ｄＬである。表３のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅのその他の５個の測定値のそれぞれとペアリングさせた最も低いＢ_{Ｔｏｔａｌ}（８．３ｍｇ／ｄＬ）およびＢ_Ｆｒｅｅ（０．５１μｇ／ｄＬ）を使用して上述のように計算される。表４における、１５の可能性あるペアリング全ての平均Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、それぞれ３９．１ｍｇ／ｄＬおよび０．５６ ｄＬ／μｇである。Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}＝８．３ｍｇ／ｄＬおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}＝３１．３ｍｇ／ｄＬのペアリングから得られたＢ_Ｔｍａｘ（３６．９ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．５７ｄＬ／μｇ）を使用して、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}の１ｍｇ／ｄＬの増加で計算されたＢ_Ｆｒｅｅは、図５の白抜き橙色の円により示される、測定された結合点と重なるが、Ｂ_Ｔｍａｘ＝がＡ_{Ｔｏｔａｌ}＝２６．４ｍｇ／ｄＬであり、

と仮定される場合、計算されたＢ_Ｆｒｅｅは、図５の白抜き青色の円により示されるように、測定された結合点から著しくずれる。このことは、Ｂ_Ｔｍａｘおよびアルブミン濃度が密接に関係しておらず、血漿中ビリルビン結合部位は、ビリルビンが血漿中アルブミンに主に結合することが公知である場合であっても密接に関係し、妊娠２８週未満の３１名の新生児におけるＢ_ＴｍａｘおよびＡ_{Ｔｏｔａｌ}は、有意に相関しなかった（ｒ^２＝０．０２）ことを示唆する。
表3

新生児の集団のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを決定することによるビリルビン結合の定量は、処置に関する現行Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}指針の不確実性（例えば、表１、図１）を低減させるのに使用することができる。表２は、妊娠（＜）２８週未満の３１名の新生児からの結合データをまとめており、例えば中央値、必要に応じて集団の平均またはアベレージＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを知ることにより、標準Ｂ_Ｆｒｅｅ、即ちＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}を、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}（例えば、表１）で指定することができ、例えば集団の中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_ＡでのＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は：

であり、他の全ては同等であり、集団の半分は、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}でのＢＩＮＤの（通常は未知の）リスクに対して低いＢＩＮＤのリスクを有し、半分は高いＢＩＮＤのリスクを有する。ＢＩＮＤのリスクが大きい半分の集団について、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}は、処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}未満のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で、即ち

である、個体のＢ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａで生じる。個体におけるＢＩＮＤのリスクは、個体の測定されたＢ_ＦｒｅｅがＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいもしくはそれよりも大きいとき、または個体のＢ_{Ｔｏｔａｌ}が、患者のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを使用して計算された

に等しいとき、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}での集団に関する場合と同じであるが、それはビリルビンの組織中レベル、脳のビリルビン曝露、およびＢＩＮＤのリスクが、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}とは無関係に類似することになるからである。

Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを得るための測定された血清または血漿Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを使用するための新規な方法は、ビリルビン結合を定量するためのそれらの使用のように、本明細書で提供され、新生児高ビリルビン血症を処置するための現行Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}指針の文脈の範囲内でＢＩＮＤのリスクを評価し、図１と比較して図６に示されるように、新生児高ビリルビン血症を処置するための現行Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}指針の不確実性を低減させる。これらのデータ（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ、Ｂ_Ｔｍａｘ、およびＫ_Ａ）は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}のみ使用する現行処置指針に固有の不確実性を著しく低減させることになる、ビリルビン結合パネル（ＢＢＰ）（Ahlfors CE. The Bilirubin Binding Panel: A Henderson-Hasselbalch approach to neonatal hyperbilirubinemia. Pediatrics 2016;138: e20154378参照）を含む。
血漿中ビリルビン結合の定量：

正常なビリルビン結合の画定には、（１）どの程度ビリルビンを結合させることができるか、および（２）どの程度「緊密に」ビリルビンが結合されるかを決定する必要がある。ビリルビンはほとんどが血漿中アルブミンに結合するので、アルブミンの濃度（Ａ_{Ｔｏｔａｌ}）は長い間、どの程度ビリルビンを結合させることができるかを評価するのに使用されてきており、通常は、１個のアルブミン分子が１個のビリルビン分子に結合すると仮定する。しかしアルブミン分子は、１個よりも多くのビリルビン分子に結合する可能性があり、Ａ_{Ｔｏｔａｌ}自体は、どの程度ビリルビンを結合させることができるか（即ち、Ｂ_Ｔｍａｘ）に関する臨床上有用な評価ではない。

各アルブミン分子は、高ビリルビン血症の新生児が遭遇する臨床上関係のあるＢ_{Ｔｏｔａｌ}の範囲にわたって少なくとも２個のビリルビン分子と結合するので（図５参照）、ビリルビン結合を定量するのに図式解析（例えば、Jacobsen J. Binding of bilirubin to human serum albumin - Determination of the Dissociation Constants. FEBS Lett 1969; 5: 112-114）がしばしば使用されてきており、あるいは多数部位結合に関連付けられた多項式質量作用方程式の非線形回帰分析が使用される（例えば、Honore B, Brodersen R. Albumin binding of anti-inflammatory drugs. Utility of a site-oriented versus a stoichiometric analysis. Mol Pharmacol 1984; 25: 137-150 and Klotz IM, Hunston DL. Protein affinities for small molecules: Conceptions and misconceptions. Arch Biochem Biophys 1979; 193: 314-328参照）。化学量論的２部位結合モデルは、複数のＢ_{Ｔｏｔａｌ}で測定された、血漿中アルブミン（Ａ_{Ｔｏｔａｌ}）、総ビリルビン（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）、および非アルブミン結合または遊離ビリルビン（Ｂ_Ｆｒｅｅ）の濃度を測定し、それらを使用して、１個のビリルビン分子に結合するアルブミン分子に関する（Ｋ_１）および２個のビリルビン分子に結合するアルブミン分子に関する（Ｋ_２）２つの平衡会合定数を決定する。このモデルにおいて、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}は、１個に結合するアルブミン（Ａ：Ｂ_１）と、２個のビリルビン分子に結合するものの２倍（２×Ａ：Ｂ_２）、それに加えてＢ_Ｆｒｅｅの濃度の合計であり、Ａ_{Ｔｏｔａｌ}は、Ａ：Ｂ_１＋Ａ：Ｂ_２＋ビリルビンに結合していない非占有または遊離アルブミン結合部位（Ａ_Ｆｒｅｅ）の、合計である。化学平衡は：
Ａ_Ｆｒｅｅ＋Ｂ_Ｆｒｅｅ Ａ：Ｂ_１＋２Ａ：Ｂ_２
であり、質量作用方程式は：

であり、下記の方程式（式中、ＭＲはモル比である）を使用して、Ｂ_Ｆｒｅｅに関して解くことができる：

表３からのＢ_Ｆｒｅｅに対するモル比の非線形回帰分析を使用して、最良適合Ｋ_１（０．９３ｄＬ／μｇ）およびＫ_２（０．０４ｄＬ／μｇ）を、化学量論方程式

を使用して決定した。図７は、

に対して、表３におけるＢ_{Ｔｏｔａｌ} ８．３ｍｇ／ｄＬとＢ_{Ｔｏｔａｌ} ３１．３ｍｇ／ｄＬとのペアリングから得られたＢ_Ｔｍａｘ（３６．９ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（０．５７）を使用する

を使用して、１ｍｇ／ｄＬのＢ_{Ｔｏｔａｌ}増分で計算されたＢ_Ｆｒｅｅを比較し、ビリルビン結合を定量するための新規な方法が、結合を定量するための標準の化学量論的方法と非常に好ましく同等であることを示す。新規な方法の明らかな利点は、しっかりとした結合分析を提供するがそれでも２つのデータポイントしか必要とせず、Ａ_{Ｔｏｔａｌ}を測定することなく、したがってビリルビン結合を定量するのに必要な測定のための時間および材料が非常に少ないことである。

ビリルビン結合を定量するためのより臨床的に適用可能な手法は、どの程度（Ｂ_Ｔｍａｘ）かつどのように「緊密に」（Ｋ_Ａ）、ビリルビンを未知数として結合させることができるかを検討して、これらの未知数をＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅ測定値から誘導することである。このことは、ビリルビンを含む試料の濃縮の前および後に血漿試料中のＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定するための、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅの日常的な測定に対する新規な手法を必要とする。

任意の所与の血漿Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}および（未知の）Ｂ_Ｔｍａｘでの血漿平衡濃度は：

であり、式中、Ｂ_Ｔｍａｘは、どの程度ビリルビンを結合させることができるかであり、Ｂ_Ｔｍａｘ－Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}は、利用可能な（非占有）ビリルビン結合部位の濃度であり、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}－Ｂ_Ｆｒｅｅは、血漿結合部位に結合したビリルビンの濃度である（Ｂ_ＦｒｅｅはＢ_{Ｔｏｔａｌ}よりも桁数が小さいので、結合されたビリルビン＝

である）。

質量作用方程式は、

であり、式中、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅは測定され、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは未知である。Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅが、測定された値Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ、およびＢ_{Ｔｏｔａｌ＿２}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿２}を得るためにビリルビンを含む試料濃縮の前および後に測定される場合、２つの未知数（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）を持つ２つの方程式が提供され、これは以下に示すように、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａに関して解くことができる。

次いで計算されたＢ_Ｔｍａｘ、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、およびＢ_Ｆｒｅｅを

に代入して、

を得、あるいは、Ｋ_Ａが負の切片であり、Ｂ_Ｔｍａｘは、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が線形方程式

であるからである。

ビリルビン結合の臨床上関係のある定量は、ビリルビン結合パネル（ＢＢＰ）を構成する上記質量作用変数（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ＿２}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿２}、Ｂ_Ｔｍａｘ、およびＫ_Ａ）である。必要に応じて、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを使用して、新生児がビリルビンに正常に結合するか否かを決定することができる。以下の表４は、Ｂ_Ｆｒｅｅのほぼ２倍でありかつＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを著しく変化させる、３．０ｇ／ｄＬアルブミンを含有するビリルビン／ヒトアルブミン試料に、スルフィソキサゾール（スルファ）を添加する前および後に決定された、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを示す。表１および２による、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}が８．３、Ｂ_Ｆｒｅｅが０．５１μｇ／ｄＬ、Ｂ_Ｔｍａｘが２４．３ｍｇ／ｄＬ、およびＫ_Ａが１．０１である、妊娠（＜）２８週未満の新生児は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}が

に到達したときに交換輸血Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} １．５１μｇ／ｄＬ（図６）に達する可能性があるが、Ｂ_Ｔｍａｘが４２．１ｍｇ／ｄＬでありＫ_Ａが０．２０ｄＬ／ｕｇである場合、

となり、同一のＢ_{Ｔｏｔａｌ} ８．３ｍｇ／ｄＬにも関わらず、かなりのＢＩＮＤのリスクを示す。
表4

総ビリルビンおよび非結合ビリルビン（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅ）の測定：

ペルオキシダーゼ試験（例えば、Jacobsen J, Wennberg RP. Determination of unbound bilirubin in the serum of newborns. Clin Chem 1974; 20:783-789参照）は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅの両方を測定する。この試験は、日本で臨床的に使用される。代替の実施形態において、本明細書で提供される方法の新規な修正は、２つのホースラディッシュペルオキシダーゼレベルでＢ_Ｆｒｅｅを測定して、Ｂ_Ｆｒｅｅを正確に決定し、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを、血漿またはその他の血液試料のビリルビン濃縮の前および後に測定することによりＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを提供して本明細書に記述されるビリルビン結合パネル（ＢＢＰ）を完成させる。ＢＢＰは、ビリルビン結合（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）およびＢＩＮＤのリスクを、同等の集団に関して決定されたＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}を使用して定量する。ペルオキシダーゼ試験は、過酸化物によるビリルビンのホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）触媒酸化をベースにする。ビリルビンは、アルブミンが存在しないときには４４０ｎｍで、アルブミンに結合するときは４６０ｎｍで、最大限、光を吸収する。アルブミンに結合したビリルビンは、酸化から保護され、Ｂ_Ｆｒｅｅのみが酸化される。４４０ｎｍ（アルブミンなし）または４６０ｎｍ（アルブミンが存在する）での光の吸光度は、ビリルビンが酸化するにつれて減少し、反応速度定数Ｋｐは、以下の等価速度方程式：

に示されるようにアルブミンが存在しない溶液中の公知のビリルビンおよびＨＲＰ濃度を使用して決定することができる（即ち、全てのビリルビンは非結合または「遊離」している）。

Ｋ_ｐの決定： 図８は、ＨＰ８４５２コンピュータ指示型分光光度計を使用して記録されたように、アルブミンが存在しない、過酸化物によるビリルビンのＨＲＰ触媒酸化中の、４４０ｎｍおよび４６０ｎｍでの秒（複数可）当たりのビリルビン吸光度の変化を図式的に示す（反応：０．１Ｍリン酸緩衝液３．０ｍＬ、ｐＨ７．４、１２８μｍｏｌ／ＬのＨ_２Ｏ_２を含有し、２５μＬ ＨＲＰは反応［ＨＲＰ］＝０．０６１μｇ／ｍＬ、５μＬの１ｍｇ／ｍＬビリルビン溶液であり反応［Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}］＝１６３μｇ／ｄＬ、１ｃｍ経路長キュベット、３０℃）。

反応に関するＫ_Ｐ・ＨＲＰは、上記速度方程式を時間ｔ＝０からｔ＝ｔの間で積分することによって容易に計算される：

Ｋ_ｐ・ＨＲＰは、時間に対する

の負の勾配であり、これを反応ＨＲＰ濃度により割ってＫ_ｐが提供される。

Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅの決定： 図９は、秒を単位とする時間の関数として、４６０ｎｍでの光の吸光度を図式的に示し、ＨＰ８４５２（商標）コンピュータ指示型分光光度計を使用して記録されるように、ＨＲＰおよび過酸化物を添加する前および後のビリルビン－アルブミン溶液中、４６０ｎｍでのビリルビン吸光度の変化を示す。４６０ｎｍでの初期吸光度を使用してＢ_{Ｔｏｔａｌ}を得、ＨＲＰ／過酸化物を添加した後の４６０ｎｍでの吸光度の変化を使用して、以下に記述されるようなＢ_Ｆｒｅｅを得る。

標準反応は、そこに試料（例えば、血漿または血清）２５μＬが加えられ、その後にＨＲＰ ２５μＬ（典型的には１．５ｍｇ／ｍＬ）および２６ｍｍｏｌ／ＬのＨ_２Ｏ_２ ５μＬが加えられた、０．１Ｍのリン酸緩衝液、ｐＨ７．４が１．０ｍＬが入っている１ｃｍ経路長キュベットで実行され、その結果、反応Ｈ_２Ｏ_２である１２０μｍｏｌ／Ｌ Ｈ_２Ｏ_２が提供される。以下にさらに記述されるように、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}は、ＨＲＰおよびＨ_２Ｏ_２を添加する前の吸光度から計算され、Ｂ_Ｆｒｅｅは、ＨＲＰ／Ｈ_２Ｏ_２の添加後の吸光度の変化から計算される。方法に対する新規な変更は、別のＨＲＰ濃度（典型的には、０．７５ｍｇ／ｍＬを使用する）での試験の繰返し、次いでビリルビンを含む試料の濃縮（典型的には、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}を、５から２０ｍｇ／ｄＬ増大させる）および２つのＨＲＰ濃度での試験の再度の繰返しを含む。

Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}は、初期吸光度を公知の吸光係数（０．８２７／ｃｍ光路長、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}に関して（単位 ｍｇ／ｍＬ））で割ることによって計算され，Ｂ_Ｆｒｅｅは、ＨＲＰ／Ｈ_２Ｏ_２を添加した後の、４６０ｎｍでの吸光度の変化から計算される。Ｂ_Ｆｒｅｅのみが酸化されるので（結合したビリルビンは、酸化から保護される）、速度方程式は

である。しかし平衡Ｂ_Ｆｒｅｅは、Ｂ_Ｆｒｅｅの酸化が平衡を

から

に崩壊させるので、未知のより低い定常状態にある遊離ビリルビン（Ｂ_Ｆｓｓ）まで降下し、
したがって

であり、
式中、

であり、積分速度は：

または

および

であり、但し

は、ｔに対する

から得られるものである。

Ｂ_Ｆｒｅｅは、追加のＨＲＰ濃度でＢ_Ｆｓｓを測定し、その逆数がＢ_Ｆｒｅｅ（

）であるＨＲＰ（

）に対して１／Ｂ_Ｆｓｓの切片を得るための上記Ｂ_Ｆｓｓ方程式の逆数である

を使用することにより得られる。

試料はビリルビンとともに濃縮され、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ_２}およびＢ_{Ｆｒｅｅ_２}は、測定され、事前濃縮Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅと共に使用されて、表２および３に見られるようなＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが得られる。次いで

は、２つの未知数（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）を持つ２つの方程式を使用して、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａに関して容易に解くことができ、Ｂ_Ｔｍａｘに関しては以下に示されるように解くことができる：

次いで計算されたＢ_Ｔｍａｘ、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、およびＢ_Ｆｒｅｅを

に代入して、

を得、あるいはＫ_Ａは負の切片であり、Ｂ_Ｔｍａｘは、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が一次方程式

であるからである。
ビリルビン結合パネル：

ビリルビン結合の構成要素は、質量作用方程式

によって数学的に連結され、これは実際の血漿中ビリルビン結合部位の化学量論的または化学的性質に関する推測がなされないものであり、それでも定数Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、図５および７に示されるようにＢ_Ｔｍａｘよりも低いＢ_{Ｔｏｔａｌ}でのＢ_Ｆｒｅｅの正確な推定を提供する。一実施形態では、ペルオキシダーゼ試験は、例えばJacobsen J, Wennberg RP. Determination of unbound bilirubin in the serum of newborns. Clin Chem 1974; 20:783-789により記述されるように、血清または血漿Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定する。代替の実施形態では、Ｂ_Ｆｒｅｅは、Ｂ_Ｆｒｅｅの正確な測定を確実にするために第２のペルオキシダーゼ濃度で測定され、次いで試料をビリルビンとともに濃縮し、試験をより高いＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅで繰り返して、２つの方程式および２つの未知数を使用してまたは

の線形分析を使用してＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを得るが、式中、負の切片＝－切片＝Ｋ_Ａであり、負の勾配／切片＝

である。

個体のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、必要に応じて、同等の集団に関する中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較されて、個体が正常なビリルビン結合を有するか否かを決定する。ＢＩＮＤのリスクは、個体が正常なビリルビン結合を有するか否かが決定された集団に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}よりも、個体のＢ_Ｆｒｅｅが大きいまたはそれに等しい場合に増大する。ＢＩＮＤのリスクは、個体のＢ_Ｆｒｅｅが、現行Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}処置指針を使用して決定された集団に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}、ならびに必要に応じて、必須の交換輸血Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬで、例えば例えば表１による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する集団の中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ、ならびに表２における３１名の新生児に関する中央値Ｂ_Ｔｍａｘ（２２．０ｍｇ／ｄＬ）およびＫ_Ａ（１．１６ｄＬ／μｇ）、

よりも大きいまたはそれに等しい場合に増大し、さらに、個体のＢ_Ｆｒｅｅが（≧）Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれよりも大きい場合、処置は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}とは無関係に保証され、Ｂ_ＦｒｅｅがＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}未満である場合、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}が生じかつ処置が必要とされる個体固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}は、個体のＢ_Ｔｍａｘ、Ｋ_Ａ、およびＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}を

として使用して得ることができる。

Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａは、どの程度（Ｂ_Ｔｍａｘ）およびどの程度緊密に（Ｋ_Ａ）血漿がビリルビンに結合するかを定量するので、血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかをしっかり定量する。新生児のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを、同等者の集団のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較する（例えば、それらを中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較する）ことは、ちょうど患者の任意の血液検査が、基本的な状態を検出するのに集団の正常値と比較されるように、その同等者と比較することによりその新生児がどのようにうまくビリルビンに結合するかを決定する。新生児のＢ_Ｆｒｅｅが上述の集団のＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれを超える場合、処置は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}とは無関係に保証される。新生児のＢ_ＦｒｅｅがＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}未満の場合、その新生児が処置されるべきである固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}が、Ｂ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}および上記で示されたその新生児のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａから得られる。この手法は、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}のみを使用する現行処置指針の不確実性を低減させ（図１参照）、ケアを個別化する。

Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ集団パラメータ（平均、標準偏差、中央値など）は、現在Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}にのみ基づく処置判断を増強するのに必要な集団特異的ビリルビン結合データを得るために、様々な新生児集団（期間、表２に示される＜２８週の早産、病気など）で容易に得ることができる。
デバイス：ゾーン流体分析機器

Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定するための当初記述した手動ペルオキシダーゼ試験は、２５μＬの試料を必要とし、本明細書に記述される４つの試験では（ビリルビン濃縮の前および後で２つのペルオキシダーゼ濃度で測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅ）、１００μＬの試料を必要とすると考えられる。本明細書では、試験を自動化しかつ試料体積を低減させる技術が新規である。

代替の実施形態では、ゾーン流体システムなどの自動化マイクロ流体取扱い技術と、試料、例えば患者からの血清、血漿、または全血試料を取り扱い処理するための適切な化学、例えばロボット化学とを含むデバイスおよびシステムであって、血漿または血液試料からの総血清中ビリルビン濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）および非結合ビリルビンまたは遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）を測定するための（Jacobsen J, Wennberg RP. Determination of unbound bilirubin in the serum of newborns. Clin Chem 1974; 20:783, Ahlfors CE, et. al. Measurement of unbound bilirubin by the peroxidase test using Zone Fluidics. Clin Chim Acta 2006;365:78）、および－デバイスに直接またはデバイスに動作可能に接続された多重化システムとして間接的に－本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を組み込んでこのデータを分析しかつ最大ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）およびビリルビン結合定数（Ｋ_Ａ）を出力するためのものであり、これらは同等者の集団における生成物と比較したときに、患者がどのようにうまくビリルビンに結合するか、ならびにＢ_Ｆｒｅｅにより測定されたビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクが同等者の集団に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}でのリスクよりも大きいか否かを正確に決定する、デバイスおよびシステムが提供される。

代替の実施形態では、シーケンシャルインジェクション分析（ＳＩＡ）および／またはゾーン流体技術、ならびに等価な自動化マイクロ流体取扱い技術を含むデバイスであって、患者の血液、血清、または血漿を取り扱い分析し、かつこれらの技術を、Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａの計算を可能にするためにビリルビンによる滴定を含むように拡張するためのデバイスが提供される。

代替の実施形態では、構成要素、例えばロボット化学構成要素を含むデバイスであって、試料、例えば血漿、血清、または血液試料からの、総血清中濃度（Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}）；非結合ビリルビンまたは遊離ビリルビン濃度（Ｂ_Ｆｒｅｅ）を測定するためのデバイスが提供される。当技術分野で公知の任意の化学、デバイス、またはロボット化学構成要素は、例えば、米国特許第７，９３９，３３３号（金属強化型蛍光ベースの感知方法について記述する）；第７，７６７，４６７号（例えば、流体懸濁液から小粒子または細胞を分離するための方法およびデバイスについて記述する）；第７，４１６，８９６号（例えば、総および結合血漿中ビリルビンを決定するための方法およびデバイスについて記述する）；第７，６２５，７６２号（例えば、流体懸濁液から小粒子または細胞を分離するための方法およびデバイスについて記述する）；第６，８８７，４２９号（例えば、既存の医学診断試験を自動化するための方法および装置について記述する）；第６，６９２，７０２号（例えば、自動化装置で細胞を含有する試料から干渉物を除去するための濾過デバイスを利用するための方法および装置について記述する）；および第６，６１３，５７９号に記載されるような；あるいは、米国特許公開：例えば米国特許出願第２０１８／００４５７２３（Ａ１）号（例えば、側方流デバイス、および流体試料を分析するための方法について記述する）；米国特許出願第２０１８／００５２０９３（Ａ１）号（例えば、試料中の粒子を分析するためのデバイスおよび方法について記述する）；米国特許出願第２０１６／０２４５７９９号に記載されるような；あるいは、Amin, S.B., Clinical Perinatology 43 (2016) 241-257（例えば、血漿中ビリルビン結合を測定するためのペルオキシダーゼ法について記述する）； Ahlfors, et al., Clinical Biochemistry 40 (2007) 261- 267（例えば、試料希釈、ペルオキシダーゼ濃度、および塩化物イオンの、早産新生児での非結合ビリルビンの測定に対する効果について記述する；Ahlfors, C. E., Analytical Biochemistry 279, 130-135 (2000)（例えば、プラズマ非結合非共役ビリルビンの測定について記述する）； Ahlfors, et al., Clinica Chimica Acta 365 (2006) 78 - 85（例えば、ゾーン流体を使用するペルオキシダーゼ試験による、非結合ビリルビンの測定について記述する）；Wennberg et al., Pediatrics 117 (2006) 474-485; またはＷＯ ２０１３０３２９５３（Ａ２）、Huber et al, Clinical Chemistry 58 (2012) 869-876（例えば、非結合ビリルビンを定量するためにビリルビンを結合するときに、蛍光消光を受ける蛍光プローブについて記述する）に記載されるような、本明細書で使用されかつ／または提供されるデバイスで使用しまたは組み込むことができる。

代替の実施形態では、本明細書で提供されるコンピュータ実装方法を実行するために、関係のあるデータを、デバイスに組み込まれたまたは個別のデバイスもしくはシステムに出力しまたは送信し、次いで：上述のビリルビン結合パネルの測定された構成要素から得られた、ビリルビン結合定数、最大総ビリルビン濃度、および臨床上関係のある診断積Ｂ_Ｔｍａｘ・Ｋ_Ａを計算し出力する能力を有するデバイスが提供される。

代替の実施形態では、例えばマイクロボアチュービングにより接続されたポンプ、選択弁、および検出器を含む単純で堅牢な流動マニホールドを有するゾーン流体システムが提供される。同じマニホールドを、配管アーキテクチャおよびハードウェアではなく流動プログラムを変化させるだけで、広く異なる化学に使用することができる。代替の実施形態では、流体分析ロボットシステムとして作用するゾーン流体が提供される。代替の実施形態において、下記の特徴または利点の１つ、いくつか、または全てを含むことができる、マイクロ流体技術のこの例示的な実施形態の特定の強さは、
⇒より低いマイクロリットル範囲で試料体積を処理することができ；
⇒ビリルビンを試料に添加して、試料ビリルビン濃縮の前および後にＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅの測定を可能にすることができ；
⇒ハイエンドの臨床化学システムまたはロボットにより実現可能なシステムの性能を、著しく低いプライスポイントで実現することができ；
⇒ポイントオブケア機器に対するスケーラビリティ－販売される物品の低コストを実現することができ；
⇒コンピュータで制御し自動化することができ；
⇒修正された方法－ワークフローの柔軟性－で容易に発展させることができ；および
－動態により方法を最適化させて、ハードウェアの設計からの制約なしに、最高品質データを生成可能にし；
⇒複雑な方法を完全に自動化することができ；
⇒改善された信頼性および容易な維持をもたらすことができ；
⇒試薬の使用を劇的に低減させることができる（多くのその他の方法は、測定あたり、典型的には１から１００ｍＬの試薬を使用する）－ＳＩＡは典型的には、測定当たり１から１００μＬを使用する。

代替の実施形態では、米国特許第７，４１６，８９６号に記載されているゾーン流体システム、または米国特許出願第２０１６／０２４５７９９号に記載されている装置もしくは構成要素を使用して、本明細書で提供される代替のデバイスの実施形態を実施する。
コンピュータ実装方法を実行するためのコンピュータシステム：

代替の実施形態では、実験室データを分析し、血漿または血液試料のビリルビン濃縮の前および後のＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅ、最大Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}（Ｂ_Ｔｍａｘ）およびビリルビン結合定数（Ｋ_Ａ）であって、同等者の集団からのＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａと比較してビリルビン結合が正常か否か、ＢＩＮＤのリスクが患者において増大するか否か（Ｂ_ＦｒｅｅはＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれよりも大きい）を決定するために臨床上関係のあるＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａを提供するもの、およびそうでない場合には、処置に値するほどのその患者に固有のＢ_{Ｔｏｔａｌ}を含む、ビリルビン結合パネルを出力するための、コンピュータ実装方法が提供される。コンピュータ実装方法は、例えば、本明細書で提供されるデバイスに組み込まれるか、または個別にであるが動作可能に、例えばシステムとして、デバイスに接続されてもよいコンピュータまたはプロセッサの使用を含む、例えば非一時的コンピュータ可読媒体を使用して実行される。

コンピュータ実装方法を含む代替の実施形態は、コンピュータメモリ内におけるデータビット上での操作のアルゴリズムおよび記号表示で提示される。これらのアルゴリズム記述および表示は、それらの仕事内容を他の当業者に最も有効に伝達するために、データ処理の分野の当業者によって使用される手段である。アルゴリズムは、本明細書において一般に、結果に繋がる自己矛盾のない一連のステップであると考えられる。ステップは、物理量の物理的処理を必要とするものである。通常、必ずしも必要ではないが、これらの量は、記憶し、伝送し、組み合わせ、比較し、およびその他の手法で処理することが可能な電気または磁気信号の形をとる。これらの信号をビット、値、要素、記号、文字、用語、数値、または同様のもので言及することが、主に一般的使用の理由で、時には都合の良いことが証明されている。

しかし、これらおよび類似の用語の全ては、適切な物理量に関付けられ、これらの量に適用される単なる都合の良い標識であることを、心に留めておくべきである。以下の考察から明らかであるとして他に特に言及しない限り、記述全体を通して、「処理する（processing）」、「算出する（computing）」、「計算する（calculating）」、「決定する（determining）」、「表示する（displaying）」、または同様のものなどの用語を利用する考察は、コンピュータシステムのレジスタおよびメモリ内で物理（例えば電子）量として表されたデータを処理し、コンピュータシステムのメモリもしくはレジスタまたはその他のそのような情報ストレージ、伝送、もしくは表示デバイス内の物理量として同様に表されるその他のデータに変換する、コンピュータシステムまたは類似の電子計算デバイスの動作およびプロセスを指すと理解される。

代替の実施形態では、本明細書で提供される操作またはコンピュータ実装方法を行うための装置が提供される。この装置は、必要とされる目的で特別に構成されてもよく、またはコンピュータに記憶されたコンピュータプログラムによって選択的に能動化されたもしくは再構成された汎用コンピュータを含んでいてもよい。そのようなコンピュータプログラムは、コンピュータ可読記憶媒体、例えば、限定するものではないがフロッピー（登録商標）ディスク、光ディスク、ＣＤ－ＲＯＭ、および磁気光ディスク、読取り専用メモリ（ＲＯＭ）、ランダムアクセスメモリ（ＲＡＭ）、ＥＰＲＯＭ、ＥＥＰＲＯＭ、磁気もしくは光カード、または電子命令を記憶するのに適切な任意のタイプの媒体を含む、任意のタイプのディスクに記憶されてもよい。

本明細書で提示されるアルゴリズムおよびディスプレイは、任意の特定のコンピュータまたはその他の装置に、本質的に関係しない。様々な汎用システムが、本明細書の教示によるプログラムと共に使用されてもよく、または方法ステップを行うためにより特殊化された装置を構成するのに好都合であり得る。様々なこれらのシステムに関する構成は、以下の記述から明らかにされよう。さらに、本明細書で提供される実施形態は、任意の特定のプログラミング言語に関して記述するものではない。本明細書に記述される実施形態の教示を実現するのに、様々なプログラミング言語を使用してもよいことが理解されよう。

代替の実施形態では、機械可読媒体は、機械（例えば、コンピュータ）によって読取り可能な形で情報を記憶し伝送するための任意のメカニズムを含む。例えば、機械可読媒体は、機械可読記憶媒体（例えば、読取り専用メモリ（「ＲＯＭ」）、ランダムアクセスメモリ（「ＲＡＭ」）、磁気ディスク記憶媒体、光記憶媒体、フラッシュメモリデバイスなど）、機械可読伝送媒体（電気、光、音響、またはその他の形の伝搬信号（例えば、搬送波、赤外線信号、デジタル信号など））などを含む。

代替の実施形態では、本明細書で提供される方法は、本明細書で提供されるプロトコールまたは方法のいずれか１つまたは複数を機械に行わせるための１つのセットの命令が内部で実行され得る、コンピュータシステムで実装される。代替の実施形態では、機械は、ＬＡＮ、イントラネット、エクストラネット、もしくはインターネット、またはそれらの任意の均等物におけるその他の機械に接続され（例えば、ネットワーク化され）てもよい。機械は、クライアントサーバネットワーク環境におけるサーバもしくはクライアントマシンの容量で、またはピアツーピア（または分散）ネットワーク環境における同等の機械として、動作してもよい。機械は、パーソナルコンピュータ（ＰＣ）、タブレットＰＣ、セットトップボックス（ＳＴＢ）、パーソナルデジタルアシスタント（ＰＤＡ）、携帯電話、ウェブアプライアンス、サーバ、ネットワークルータ、スイッチもしくはブリッジ、またはその機械がとる動作を指定する１つのセットの命令を（逐次またはその他の手法で）実行することが可能な任意の機械であってもよい。「機械」という用語は、本明細書で論じる方法のいずれか１つまたは複数を行うために、個々にまたは接合して１つのセットの（または複数のセットの）命令を実行する、機械の任意の集合体も含むと解釈するものとする。

代替の実施形態では、本明細書で提供される例示的なコンピュータシステムは、処理デバイス（プロセッサ）、主メモリ（例えば、読取り専用メモリ（ＲＯＭ）、フラッシュメモリ、動的ランダムアクセスメモリ（ＤＲＡＭ）、例えばシンクロナスＤＲＡＭ（ＳＤＲＡＭ）、またはラムバスＤＲＡＭ（ＲＤＲＡＭ）など）、静的メモリ（例えば、フラッシュメモリ、静的ランダムアクセスメモリ（ＳＲＡＭ）など）、およびデータストレージデバイスであって、バスを介して互いに通信するものを含む。

代替の実施形態では、プロセッサは、マイクロプロセッサ、中央処理ユニット、または同様のものなどの１つまたは複数の汎用処理デバイスである。より詳細には、プロセッサは、複合命令セットコンピューティング（ＣＩＳＣ）マイクロプロセッサ、縮小命令セットコンピューティング（ＲＩＳＣ）マイクロプロセッサ、超長命令語（ＶＬＩＷ）マイクロプロセッサ、またはその他の命令セットを実装するプロセッサ、もしくは命令セットの組合せを実装するプロセッサであってもよい。プロセッサは、特定用途向け集積回路（ＡＳＩＣ）、フィールドプログラマブルゲートアレイ（ＦＰＧＡ）、デジタル信号プロセッサ（ＤＳＰ）、ネットワークプロセッサ、または同様のものなど、１つまたは複数の専用処理デバイスであってもよい。代替の実施形態では、プロセッサは、本明細書で論じられる操作およびステップを行うための命令（例えば、処理論理回路）を実行するように構成される。

代替の実施形態では、コンピュータシステムはさらに、ネットワークインターフェースデバイスを含む。コンピュータシステムは、ビデオディスプレイユニット（例えば、液晶ディスプレイ（ＬＣＤ）または陰極線管（ＣＲＴ））、文字数字入力デバイス（例えば、キーボード）、カーソル制御デバイス（例えば、マウス）、および信号発生デバイス（例えば、スピーカー）を含んでいてもよい。

代替の実施形態では、データ記憶デバイス（例えば、駆動装置）は、本明細書で提供されるプロトコール、方法、または機能のいずれか１つまたは複数を具体化する１つまたは複数のセットの命令（例えば、ソフトウェア）が記憶される、コンピュータ可読記憶媒体を含む。命令は、完全にまたは少なくとも部分的に、その実行中にコンピュータシステムによって主メモリ内および／またはプロセッサ内に常駐させてもよく、主メモリおよびプロセッサは、機械でアクセス可能な記憶媒体も構成する。命令はさらに、ネットワークインターフェースデバイスを介してネットワーク上で送信されまたは受信されてもよい。

代替の実施形態では、コンピュータ可読記憶媒体を使用して、ユーザ特定状態を定めるデータ構造セットおよびユーザプロファイルを定めるユーザ選好を記憶させる。データ構造セットおよびユーザプロファイルは、静的メモリなどのコンピュータシステムのその他のセクションに記憶されてもよい。

代替の実施形態では、例示的な実施形態におけるコンピュータ可読記憶媒体が単一媒体であるが、「機械でアクセス可能な記憶媒体」という用語は、１つまたは複数のセットの命令を記憶する単一の媒体または複数の媒体（例えば、集中もしくは分散データベース、および／または関連あるキャッシュおよびサーバ）を含むと解釈することができる。代替の実施形態では、「機械でアクセス可能な記憶媒体」という用語は、機会によって実行するための１つのセットの命令を記憶し、コード化し、または伝搬させることが可能であり、かつ本明細書で提供される方法のいずれか１つまたは複数を機械に行わせる、任意の媒体も含むと解釈することができる。代替の実施形態では、「機械でアクセス可能な記憶媒体」という用語は、限定するものではないがソリッドステートメモリならびに光および磁気媒体を含むと相応に解釈するものとする。
ＢＩＮＤおよび高ビリルビン血症の処置

代替の実施形態では、必要とする個体（必要に応じて、黄疸のある新生児または乳児）において、
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、またはビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児での、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を処置し、寛解させ、逆転させ、または予防するための方法が提供される。

本明細書で提供される方法は、療法が必要とする個体に対していつ開始される（始める）べきであるかを示し、必要とする個体に関する適切な処置の必要性に関して医師に方向性を与え、例えば、同時臨床状況がＢＩＮＤの高いリスクを示さないときは光療法および／または交換輸血を示す。

さらに、本明細書で提供される方法は、ＢＩＮＤのリスクが著しく低減するようにビリルビンレベルが十分減少したことを決定するために、したがって処置を修正し、中断し、または停止させることができるというシグナルを医師に送るために、処置をモニタするのに使用することができる。明らかな症状なしにＢＩＮＤが生じた場合、本明細書で提供される方法は臨床医に警告を出すことができ、したがって、損傷を逆転または少なくすることができる早期処置が可能になり（Johnson L, et al, Clinical report from the pilot USA kernicterus registry (1992-2004). J Perinatol 2009; 29: S25-45参照)、患者は、新生乳幼児、児童、または成人であってもよい（例えば、Blaschke TF, et al, Crigler-Najjar syndrome: an unusual course with development of neurologic damage at age eighteen. Pediatr. Res. 1974; 8:573-890参照）。

このように、本明細書で提供される診断および処置方法は、ＢＩＮＤの症状がその他の状態により、例えば感染によりしばしば混乱し（Ahlfors et al, Unbound bilirubin in a term newborn with kernicterus. Pediatrics 2003; 111: 1110-1112参照）、ＢＩＮＤの症状が早産新生児においてしばしば存在しない（Watchko JF et al. The enigma of low bilirubin kernicterus in premature infants: why does it still occur, and is it preventable? Semin Perinatol 2014; 38: 397-406参照）という問題を解決するのを助ける。

当技術分野で公知の任意の方法を使用して、必要に応じて新生児における、黄疸などの著しい高ビリルビン血症、ビリルビン神経毒性を含むビリルビン毒性、ビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害を、必要に応じて新生児における、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺；原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害を必要に応じて含み、脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺；ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害；ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症；ビリルビン誘発性高音域聴覚障害；ビリルビン誘発性上方視麻痺；および／または歯のビリルビン誘発性黄色染色を必要に応じて含んで、処置しまたは寛解させまたは予防することができる。

例えば、黄疸、例えば新生児黄疸などの著しい高ビリルビン血症は、光療法または着色光で処置されてもよく、この療法は、ｔｒａｎｓ－ビリルビンを水溶性ｃｉｓ－ビリルビン異性体に変化させることによって、または少量の血液を繰り返し引き出しかつそれをドナー血液と交換し、それによってビリルビンおよび移行抗体を希釈することを含み得る交換輸血によって、作用する。代替の実施形態では、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）は、黄疸などの著しい高ビリルビン血症が母親と乳児との間の血液型の違いに関係し得る状況で使用する。この状況によって、乳児の赤血球の急速な破壊に関与する、母親からの抗体を乳児が保持することになる。抗移行Ｉｇ免疫グロブリンの静脈内輸血は、高ビリルビン血症または黄疸を減少させ、交換輸血の必要性または程度を減らすことができる。

当業者ならば、情報および信号が、様々な異なる技術および技法のいずれかを使用して表されてもよいことが理解されよう。例えば、上述の全体を通して言及され得るデータ、命令、コマンド、情報、信号、ビット、記号、およびチップは、電圧、電流、電磁波、磁場または磁性粒子、光学場または光粒子、またはこれらの任意の組合せによって表されてもよい。

当業者ならばさらに、本明細書に開示される実施形態に関連して記述される様々な例示的な論理ブロック、モジュール、回路、およびアルゴリズムステップは、電子ハードウェア、コンピュータソフトウェア、または両方の組合せとして実装され得ることが理解されよう。ハードウェアおよびソフトウェアのこの互換性を明らかに例示するために、様々な例示的な構成要素、ブロック、モジュール、回路、およびステップが、一般にそれらの機能性に関してこれまで記述されてきた。そのような機能性がハードウェアとしてまたはソフトウェアとして実現されるか否かは、特定の適用例およびシステム全体に課された設計制約に依存する。当業者ならば、特定の適用例のそれぞれに関して様々な手法で、記述される機能性を実現することができるが、そのような実現例の判断は、本発明の範囲からの逸脱を引き起こすと解釈されるべきではない。

本発明の修正は、これらの教示に鑑み、当業者が容易に思いつくであろう。上記の説明は例示的であり、制約的なものではない。本発明は、上記明細書および添付図面と併せて見たときのそのような全ての実施形態および修正例を含む、下記の特許請求の範囲によってのみ制限される。したがって本発明の範囲は、上記説明を参照して決定されるべきではなく、代わりに、それらの均等物の全範囲と一緒に添付される特許請求の範囲を参照して決定されるべきである。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
－ 結合を定量するビリルビン結合定数または最大総ビリルビン濃度（Ｂ _Ｔｍａｘ ）および平衡会合定数（Ｋ _Ａ ）を決定することを含んで、どのようにうまく（またはどのように臨床上効率的に）、血漿、血清、または血液が個体のビリルビンに結合するのか、および
－ ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）の前記個体のリスク、および前記個体のＢ _Ｆｒｅｅ を決定することを含むまたは必要とする、処置の必要性
を定量するための方法であって、

であり、Ｂ _Ｆｒｅｅ およびＢ _{Ｔｏｔａｌ} はそれぞれ、非アルブミン結合または遊離ビリルビンの測定された濃度、および総ビリルビン濃度であり、
Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} およびＢ _Ｆｒｅｅ は、Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 、Ｂ _Ｆｒｅｅ 、およびＢ _{Ｔｏｔａｌ＿２} 、Ｂ _{Ｆｒｅｅ＿２} が得られるようビリルビンを含む試料の濃縮の前および後に測定されて、必要に応じて、Ｂ _Ｔｍａｘ に関して解かれる２個の未知数（Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ ）を持つ２つの方程式が提供され、

ならびに前記測定されたＢ _{Ｔｏｔａｌ} およびＢ _Ｆｒｅｅ は、計算されたＢ _Ｔｍａｘ と共に使用されて、

を得、あるいは、Ｋ _Ａ は負の切片であり、Ｂ _Ｔｍａｘ は、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が一次方程式

であるからであり、
必要に応じて、濃縮は、約５から２５ｍｇ／ｄＬの間で前記試料中のビリルビンの量を増加させること、またはＢ _{Ｔｏｔａｌ} を、関係のある集団に関する関係のある現行臨床処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 程度まで増大させることを含み、必要に応じて、前記関係のある集団は、妊娠（＜）２８週未満の新生児（表１）において交換輸血閾値Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬを、またはAmerican Academy of Pediatricsによる、Pediatrics 2004;114:297-316に記載されている、Management of hyperbilirubinemia in the newborn infant 35 or more weeks of gestationに従い、閾値交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} ２５ｍｇ
／ｄＬを含み、
必要に応じて、前記方法は、
（ａ） 前記個体から血漿、血液、または血清試料を得る、または採取する、または得ていること、
（ｂ） Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} およびＢ _Ｆｒｅｅ を測定すること、
（ｃ） 血漿、血液、または血清試料をビリルビンとともに濃縮することであり、
必要に応じて濃縮は、約５から２５ｍｇ／ｄＬの間で前記試料中のビリルビンの量を増加させること、またはＢ _{Ｔｏｔａｌ} を、関係のある集団に関する関係のある現行臨床閾値Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 近傍まで濃縮することを含み、必要に応じて、前記関係のある集団は、妊娠（＜）２８週未満の新生児（表１）において交換輸血閾値Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬを、またはAmerican Academy of Pediatricsによる、またはPediatrics 2004;114:297-316に記載されている、Management of hyperbilirubinemia in the newborn infant 35 or more weeks of gestationに従い、正期産の新生児においては交換輸血
閾値２５ｍｇ／ｄＬを含み、
（ｄ） 前記ビリルビン濃縮血漿中のＢ _{Ｔｏｔａｌ} およびＢ _Ｆｒｅｅ を測定すること、
（ｅ） 最大総ビリルビン濃度（Ｂ _Ｔｍａｘ ）および平衡会合定数（Ｋ _Ａ ）を決定すること
を含み、
前記個体のＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ が、必要に応じて、同等の集団に関する平均、アベレージ、または中央値Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ よりも低い場合（例えば、表２による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する中央値Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ はそれぞれ２２．０ｍｇ／ｄＬおよび１．１６ｄＬ／μｇである）、前記個体は不十分な（臨床上効果のない）ビリルビン結合を有し、
前記個体のＢ _Ｆｒｅｅ が、現行処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} で生ずる同等集団のＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} （必要に応じて、表１に記述される処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 、および必要に応じて、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ）、および必要に応じて、前記集団に関する平均、アベレージ、または中央値Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ （必要に応じて、表２による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する中央値Ｂ _Ｔｍａｘ
２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ _Ａ １．１６ｄＬ／μｇは、

である、現行交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬでのＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を提供する）に等しいまたはそれよりも大きい場合、これは処置に値するほど十分なＢＩＮＤのリスクの存在を示し、
必要に応じて、前記方法はさらに、任意のＢ _{Ｔｏｔａｌ} での個体のＢ _Ｆｒｅｅ が、現行処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} で生ずる適切な同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} （必要に応じて、表１に記述される閾値、および必要に応じて、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ）、および必要に応じて、前記集団に関する平均、アベレージ、または中央値Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ （必要に応じて、表２による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する中央値Ｂ _Ｔｍａｘ ２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ _Ａ １．１６ｄＬ／μｇは、

である前記現行交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬでのＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を提供する）に等しいまたはそれを超える場合に、任意のＢ _{Ｔｏｔａｌ} で患者の高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）の処置の必要性を評価することを含み、
Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に等しいまたはそれよりも大きいＢ _Ｆｒｅｅ は、ビリルビンに対する十分な脳曝露、およびビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクを示し、その結果、高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）に関する処置が必要であることを示し、
必要に応じて、前記方法はさらに、現行処置閾値よりも低いＢ _{Ｔｏｔａｌ} で、患者における高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）処置の必要性を評価することを含み、
必要に応じて、必須の交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} は、表１による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関して１４ｍｇ／ｄＬであり、前記個体のＢ _Ｆｒｅｅ は、必要に応じて前記集団に関する平均、アベレージ、または中央値Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ で決定されるように（必要に応じて、表２による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する前記中央値Ｂ _Ｔｍａｘ ２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ _Ａ １．１６ｄＬ／μｇは、

である現行交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬでのＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を提供する）、現行処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} （必要に応じて、表１に示される前記処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 、および必要に応じて、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する前記交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ）で生ずる適切な同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に等しいまたはそれを超え、Ｂ _Ｆｒｅｅ がＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} 未満である場合、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} が生じかつ処置が保証される患者に関する固有のＢ _{Ｔｏｔａｌ} は、前記患者のＢ _Ｔｍａｘ および前記処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 未満の

を使用して決定され、
必要に応じて、表１による妊娠（＜）２８週未満の新生児における１４ｍｇ／ｄＬ未満のＢ _{Ｔｏｔａｌ} は、ビリルビンに対する十分な脳曝露、およびビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクを示して、高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）に関する処置が必要であることが示される、方法。
(項目２)
最大総ビリルビン濃度（Ｂ _Ｔｍａｘ ）および平衡会合定数（Ｋ _Ａ ）を決定することを含む、血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量するための方法であって、

であり、Ｂ _Ｆｒｅｅ およびＢ _{Ｔｏｔａｌ} は、それぞれ、非アルブミン結合または遊離ビリルビン総ビリルビン濃度の、測定された濃度であり、ビリルビンを含む試料の濃縮の前および後にＢ _{Ｔｏｔａｌ} およびＢ _Ｆｒｅｅ を測定してＢ _{Ｔｏｔａｌ} 、Ｂ _Ｆｒｅｅ 、およびＢ _{Ｔｏｔａｌ＿２} 、Ｂ _{Ｆｒｅｅ＿２} を得ることは、Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ に関して解かれる２個の未知数（Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ ）を持つ２つの方程式：

を提供し、
前記測定されたＢ _{Ｔｏｔａｌ} およびＢ _Ｆｒｅｅ は、計算されたＢ _Ｔｍａｘ と共に使用されて

を得、あるいは、Ｋ _Ａ は、負の切片であり、Ｂ _Ｔｍａｘ は、

対

の負の勾配／切片であるが、それは

の逆数が一次方程式

であるからであり、
必要に応じて、前記方法は、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを、患者におけるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ と、同等の個体におけるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ とを比較することによって決定し、必要に応じて、前記患者は新生乳幼児であり、前記患者における正常よりも低いＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ は、前記患者のＢ _{Ｔｏｔａｌ} で、ビリルビンに対するより多くの脳曝露と、黄疸およびビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のより多くのリスクまたは存在とを示し、
必要に応じて、前記方法はさらに、懸案の任意の現行閾値Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} にあるまたはそれよりも低い値で、患者における高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）処置に関する必要性を、前記患者のＢ _Ｆｒｅｅ 対適切な同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を比較することによって評価することを含み、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に等しいまたはそれよりも大幅に高いＢ _Ｆｒｅｅ は、ビリルビンに対する十分な脳曝露と、ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のより多くのリスクとを示し、したがって、高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）に関する処置が必要であることを示し、
必要に応じて、前記方法はさらに、現行処置閾値Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} よりも低いＢ _{Ｔｏｔａｌ} にある患者における高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）処置に関する必要性を評価することを含み、
必要に応じて、交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} は、表１による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関して１４ｍｇ／ｄＬであり、個体のＢ _Ｆｒｅｅ は、現行処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} （必要に応じて、表１に示される処置Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} 、および必要に応じて、妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する交換輸血Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬ）、および必要に応じて前記集団に関する平均、アベレージ、または中央値Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ （必要に応じて、表２による妊娠（＜）２８週未満の新生児に関する前記中央値Ｂ _Ｔｍａｘ ２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ _Ａ １．１６ｄＬ／μｇは、

を提供する）で生ずる適切な同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}
に等しいまたはそれを超え、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に等しいまたはそれよりも大きいＢ _Ｆｒｅｅ でのＢＩＮＤのリスクは、ビリルビンに対する十分な脳曝露と、ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクとを示し、したがって、高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）に関する処置が必要であることが示され、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} 未満のＢ _Ｆｒｅｅ では、ビリルビンに対する十分な脳曝露と、ビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、必要に応じてビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクとを示し、したがって高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）に関する処置が、固有の

で必要であることが示され、式中Ｂ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ が前記個体のＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ である、方法。
(項目３)
項目１もしくは項目２に記載の方法を含む、または項目１に記載の方法を実行して、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} が生ずるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ 、ならびにＢ _{Ｔｏｔａｌ} を決定するための、コンピュータ実装方法であって、必要に応じてさらに、データ要素を受信することおよび前記データ要素を記憶することを含む、方法。
(項目４)
データを処理し、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} が生ずるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ 、Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} を決定するための、コンピュータプログラム製品であって、項目３に記載のコンピュータ実装方法を含む、コンピュータプログラム製品。
(項目５)
ＢＢＣ／ＫＤ比を決定するための、グラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品であって、項目３に記載のコンピュータ実装方法を含む、ＧＵＩコンピュータプログラム製品。
(項目６)
プロセッサおよびデータ記憶デバイスを含む、コンピュータシステムであって、前記データ記憶デバイスには、（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せが記憶されている、コンピュータシステム。
(項目７)
（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するためのプログラム命令を含む非一時的記憶媒体。
(項目８)
データを入力し、計算を行ってＢ _Ｔｍａｘ ・Ｋ _Ａ の積を決定するために、コンピュータプログラム製品を記憶する非一時的コンピュータ可読媒体であって、項目３に記載のコンピュータ実装方法を含む、非一時的コンピュータ可読媒体。
(項目９)
コンピュータデバイスのプロセッサによって実行されたときに、前記コンピュータデバイスで、（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するコンピュータ可読命令を含む、非一時的コンピュータ可読記憶媒体。
(項目１０)
非一時的コンピュータ可読記憶媒体と、前記記憶媒体に常駐するプログラム命令とを含み、前記プログラム命令は、コンピュータにより実行されたときに（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装する、コンピュータプログラム製品。
(項目１１)
有形のコンピュータ可読媒体上に具体化された、コンピュータプログラム記憶デバイスであって、（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを含む、コンピュータプログラム記憶デバイス。
(項目１２)
メモリと、前記メモリに動作可能に結合されたプロセッサとを含み、前記プロセッサは、前記メモリに記憶されたプログラムコードを実行して、（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するように適合された、コンピュータまたは等価な電子システム。
(項目１３)
複数のデータポイントおよび／または複数のデータ要素に関連付けられた値を記憶するように構成されたメモリと、前記メモリに記憶されたプログラムコードを実行して、（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するように適合されたプロセッサとを含む、システム。
(項目１４)
外部データソースまたは外部サーバプロセスへの、接続サーバを介したアプリケーションのアクセスをもたらすための、ならびに複数のデータポイントおよび／または複数のデータ要素に関連付けられた値を記憶する能力と、（ａ）項目３に記載のコンピュータ実装方法、（ｂ）項目４に記載のコンピュータプログラム製品、（ｃ）項目５に記載のグラフィカルユーザインターフェース（ＧＵＩ）コンピュータプログラム製品、または（ｄ）これらの組合せを実行し、処理し、かつ／または実装するためのアプリケーションとを提供するための、コンピュータ実装システム。
(項目１５)
血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量することが可能なデバイスであって、前記デバイスは、血漿または血液試料のビリルビン濃縮の前および後にＢ _Ｆｒｅｅ （非アルブミン結合または遊離ビリルビン濃度）およびＢ _{Ｔｏｔａｌ} （総ビリルビン濃度）を測定し、このデータを、項目３に記載のコンピュータ実装方法を実行することができる、項目１４に記載のコンピュータ実装システム、項目１３に記載のシステム、または項目１２に記載のコンピュータもしくは等価な電子システムに伝達して、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} が生ずるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ およびＢ _{Ｔｏｔａｌ} を決定しまたは計算しおよび例えばユーザに出力することが可能であり、
必要に応じて、項目１４に記載のコンピュータ実装システム、項目１３に記載のシステム、または項目１２に記載のコンピュータもしくは等価な電子システムが、前記デバイスの部分でありもしくはその内部にあり、または前記デバイスから離れており（例えば、単に直接接続されている、または無線で接続されている）、
前記デバイスは、試料、必要に応じて血漿または血液試料から、総血清ビリルビン濃度（Ｂ _{Ｔｏｔａｌ} ）および非結合ビリルビンまたは遊離ビリルビン濃度（Ｂ _Ｆｒｅｅ ）を測定することが可能な構成要素、必要に応じてロボット化学構成要素を含み、
必要に応じて、前記コンピュータ実装システム、前記システム、または前記コンピュータもしくは等価な電子システムは、前記デバイスの一体的部分であり、または前記デバイスに操作可能に離れて連結されており、
必要に応じて、前記デバイスは、自動化マイクロ流体取扱い技術、必要に応じて、ゾーン流体システムまたはロボットゾーン流体分析システムを含む、デバイス。
(項目１６)
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸、または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
の、必要とする個体における診断または予後（または獲得する可能性を予測する）のための方法であって、
（ａ）項目１もしくは項目２に記載の方法を使用すること、または
（ｂ）最大総ビリルビン濃度（Ｂ _Ｔｍａｘ ）および平衡会合定数（Ｋ _Ａ ）を決定すること
を含む、その個体の血漿がどのようにうまくビリルビンに結合するかを定量することを含み、

であり、
前記方法は、ビリルビン結合が正常かまたは正常に至らないかを、患者の計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ 対同等の新生児集団のＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ を比較することによって決定し、ＢＩＮＤのリスクが増大する否かを、患者のＢ _Ｆｒｅｅ 対Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} および同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} での患者のＢ _{Ｔｏｔａｌ} を比較することによって決定し、
必要に応じて、前記患者は新生乳幼児であり、
正常なＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ よりも低いＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ 、ならびにＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} が生ずる固有の患者のＢ _{Ｔｏｔａｌ} は、より多くの脳のビリルビン曝露と、
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
の、より多くのリスクまたは存在とを示す、方法。
(項目１７)
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、必要とする個体（必要に応じて、黄疸のある新生児または乳幼児）において処置し、寛解させ、逆転させ、または予防するための方法であって、
（ａ）項目１、項目２、もしくは項目１６に記載の方法、または項目１５に記載のデバイスを使用して、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを、患者の計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ 対同等の新生児集団におけるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ を比較することによって決定し、ＢＩＮＤのリスクが増大するか否かを、必要とする前記個体における患者の計算されたＢ _Ｆｒｅｅ 対同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を比較することによって決定することであり、正常より低い計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ の積、ならびに必要とする前記個体における、集団Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に対する、より高いＢ _Ｆｒｅｅ は、より多くの脳のビリルビン曝露と、
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
のより多くのリスクまたは存在とを示すものであること、および
（ｂ）必要とする前記個体が、正常よりも低い計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ またはステップ（ａ）で決定されたＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に等しいまたはそれよりも大きいＢ _Ｆｒｅｅ を有する場合、
－ 黄疸（高ビリルビン血症）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ ビリルビン誘発性神経発達機能障害または神経発達、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、必要とする前記個体で処置し、寛解させ、逆転させ、または予防することを開始することを含む、方法。
(項目１８)
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、
－ 必要とする個体で処置し、寛解させ、逆転させ、または予防する
のに使用されるデバイスであって、
前記デバイスは、項目１５に記載のデバイス、項目１４に記載のコンピュータ実装システム、項目１３に記載のシステム、または項目１２に記載のコンピュータもしくは等価な電子システムを含み、
前記デバイスは、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを、患者の計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ 対同等の新生児集団におけるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ を比較することによって決定することができ、ＢＩＮＤのリスクが増大するか否かを、必要とする前記個体における患者のＢ _Ｆｒｅｅ 対同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を比較することによって決定することができ、正常よりも低い計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ ならびに、必要とする前記個体における、Ｂ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} に対する正常よりも高いＢ _Ｆｒｅｅ は、
より多くの脳のビリルビン曝露と、
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
のより多くのリスクまたは存在とを示す、デバイス。
(項目１８)
－ 著しい高ビリルビン血症（必要に応じて、黄疸）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
を、
－ 必要とする個体で処置し、寛解させ、逆転させ、または予防するためのデバイスの使用であって、
前記デバイスは、項目１５に記載のデバイス、項目１４に記載のコンピュータ実装システム、項目１３に記載のシステム、または項目１２に記載のコンピュータもしくは等価な電子システムを含み、
前記デバイスは、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを、患者の計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ の積と対同等の新生児集団におけるＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ を比較することによって決定することができ、ＢＩＮＤのリスクが増大するか否かを、必要とする前記個体におけるＢ _Ｆｒｅｅ 対同等の新生児集団におけるＢ _{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ} を比較することによって決定することができ、正常よりも低い計算されたＢ _Ｔｍａｘ およびＫ _Ａ の積と、必要とする前記個体における正常よりも高いＢ _Ｆｒｅｅ は、より多くの脳のビリルビン曝露と、
－ 黄疸（高ビリルビン血症）またはビリルビン毒性、必要に応じてビリルビン神経毒性、
－ 必要に応じて、脳症もしくは核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症）または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、ビリルビン誘発性神経発達機能障害、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
－ 必要に応じて脳症または核黄疸または突然の神経毒性（急性ビリルビン脳症、または舞踏病アテトーゼ脳性麻痺を含む、必要に応じて新生児における、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
－ ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
－ ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
－ ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
－ ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
－ 歯のビリルビン誘発性黄色染色
のより多くのリスクまたは存在とを示す、使用。

Claims (19)

1. 最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）および平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を、
   － 高ビリルビン血症もしくはビリルビン毒性、
   － ビリルビン神経毒性、
   － ビリルビン誘発性神経発達機能障害、
   － 原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害、
   － 突然のビリルビン誘発性神経毒性、
   － 急性ビリルビン脳症、
   － 舞踏病アテトーゼ脳性麻痺、
   － ビリルビン誘発性難聴、もしくは原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
   － ビリルビン誘発性自閉症、もしくは原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
   － ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
   － ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
   － 歯のビリルビン誘発性黄色染色
   の、必要とする個体で処置し、寛解させ、または予防する必要性の指標として決定する方法であって、
   （ｉ）前記個体から採取された、または得られた血漿、血液または血清試料においてＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定すること、
   （ｉｉ）ビリルビンを含む前記血漿、血液または血清試料を濃縮すること、
   （ｉｉｉ）前記ビリルビン濃縮血漿においてＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅを測定すること、および
   （ｉｖ）前記必要とする個体において、ビリルビン結合が正常であるかまたは正常に至らないかを決定するために、最大総ビリルビン濃度（Ｂ_Ｔｍａｘ）および平衡会合定数（Ｋ_Ａ）を決定すること
   を含み、
   前記個体のＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが、同等の集団に関する平均または中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａより低い場合、前記個体は不十分な、または臨床上効果のないビリルビン結合を有し、
   前記個体のＢ_Ｆｒｅｅが、現行処置Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}で生ずる前記同等の集団に関するＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれよりも大きい場合、これは処置に値するほど十分なビリルビン誘発性神経学的機能不全（ＢＩＮＤ）のリスクの存在を示し、
   

   

   
   であり、Ｂ_ＦｒｅｅおよびＢ_{Ｔｏｔａｌ}はそれぞれ、非アルブミン結合または遊離ビリルビンの測定された濃度、および総ビリルビン濃度であり、
   Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅは、Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}、Ｂ_Ｆｒｅｅ、およびＢ_{Ｔｏｔａｌ＿２}、Ｂ_{Ｆｒｅｅ＿２}が得られるようビリルビンを含む前記血漿、血液または血清試料の濃縮の前および後に測定されて、Ｂ_Ｔｍａｘに関して解かれる２個の未知数（Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａ）を持つ２つの方程式が提供され、
   

   

   
   ならびに前記測定されたＢ_{Ｔｏｔａｌ}およびＢ_Ｆｒｅｅは、計算されたＢ_Ｔｍａｘと共に使用されて、
   

   

   
   を得、あるいは、Ｋ_Ａは負の切片であり、Ｂ_Ｔｍａｘは、
   

   

   
   対
   

   

   
   の負の勾配／切片であるが、それは
   

   

   
   の逆数が一次方程式
   

   

   
   であるからであり、
   前記必要とする個体が、正常よりも低い計算されたＢ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａまたはステップ（ｉ）～（ｉｖ）で決定されたＢ_{ＦｒｅｅＳｔａｎｄａｒｄ}に等しいまたはそれよりも大きいＢ_Ｆｒｅｅを有する場合、
   － 黄疸もしくはビリルビン毒性
   － ビリルビン神経毒性、
   － ビリルビン誘発性神経発達機能障害、
   － 原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害、
   － 急性ビリルビン脳症、
   － 舞踏病アテトーゼ脳性麻痺、
   － ビリルビン誘発性難聴、もしくは原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害、
   － ビリルビン誘発性自閉症、もしくは原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症、
   － ビリルビン誘発性高音域聴覚障害、
   － ビリルビン誘発性上方視麻痺、または
   － 歯のビリルビン誘発性黄色染色
   の、必要とする個体で処置し、寛解させ、または予防することが必要とされると決定される、
   方法。
2. ステップ（ｉｉ）において、ビリルビンを含む前記血漿、血液または血清試料を濃縮することは、約５から２５ｍｇ／ｄＬの間で前記血漿、血液または血清試料中のビリルビンの量を増加させること、またはＢ_{Ｔｏｔａｌ}を、関係のある集団に関する関係のある現行臨床閾値Ｂ_{Ｔｏｔａｌ}程度まで濃縮させることを含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記必要とする個体が黄疸のある新生児または乳幼児である、請求項１に記載の方法。
4. 前記高ビリルビン血症が黄疸を含む、請求項１に記載の方法。
5. 前記原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する神経発達機能障害が、脳症または核黄疸を含む、請求項１に記載の方法。
6. 前記同等の集団が妊娠２８週未満の新生児である場合、前記同等の集団に関する前記平均または中央値Ｂ_ＴｍａｘおよびＫ_Ａが、中央値Ｂ_Ｔｍａｘ ２２．０ｍｇ／ｄＬおよびＫ_Ａ １．１６ｄＬ／μｇである、請求項１に記載の方法。
7. 前記関係のある集団が、妊娠２８週未満の新生児における交換輸血閾値Ｂ_{Ｔｏｔａｌ} １４ｍｇ／ｄＬまたは正期産児における交換輸血閾値 ２５ｍｇ／ｄＬを含む、請求項２に記載の方法。
8. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、黄疸またはビリルビン毒性に対するものである、請求項１に記載の方法。
9. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、ビリルビン神経毒性に対するものである、請求項１に記載の方法。
10. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、ビリルビン誘発性神経発達機能障害に対するものである、請求項１に記載の方法。
11. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する機能障害に対するものである、請求項１に記載の方法。
12. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、急性ビリルビン脳症に対するものである、請求項１に記載の方法。
13. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、舞踏病アテトーゼ脳性麻痺に対するものである、請求項１に記載の方法。
14. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、ビリルビン誘発性難聴、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する聴覚機能障害に対するものである、請求項１に記載の方法。
15. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、ビリルビン誘発性自閉症、または原因物質として毒性レベルのビリルビンを有する自閉症に対するものである、請求項１に記載の方法。
16. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、ビリルビン誘発性高音域聴覚障害に対するものである、請求項１に記載の方法。
17. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、ビリルビン誘発性上方視麻痺に対するものである、請求項１に記載の方法。
18. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、歯のビリルビン誘発性黄色染色に対するものである、請求項１に記載の方法。
19. 前記処置し、寛解させ、または予防することが、光療法を含む、請求項１に記載の方法。

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