JP7008020B2 - ヒトおよびイヌil-4rアルファに対するイヌ化ヒト抗体 - Google Patents
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Description
本出願は2015年12月18日付け出願の第62/269,486号および2016年9月29日付け出願の第62/401,368号(それらの両方の全内容を参照により本明細書に組み入れることとする)の35 U.S.C.§119(e)に基づく優先権を主張するものである。
本発明は、イヌIL-4Rαに対する高い結合アフィニティおよび特異的配列を有する、ヒトIL-4Rαに対するイヌ化ヒト抗体に関する。本発明はまた、イヌのアトピー性皮膚炎の治療における、本発明の抗体の使用に関する。
本発明は、イヌIL-4Rαに対する高い結合アフィニティを有し、イヌIL-4および/またはIL-13へのイヌIL-4Rαの結合を遮断する能力を有するイヌ化ヒト(すなわち、ヒト化免疫系を有するように操作されたトランスジェニックマウスから作製されたもの)抗ヒトIL-4Rアルファ抗体に関する。本発明はまた、アトピー性皮膚炎のような疾患および/または状態の治療における、そのような抗体の使用に関する。
イヌIL-4受容体アルファタンパク質とヒトIL-4受容体アルファタンパク質との間には66%のアミノ酸同一性しか存在しない。更に、これらの受容体の細胞外ドメインのみを比較しても、アミノ酸同一性は僅か68%である。この事実にもかかわらず、IL-4RαのヒトECDに対する幾つかのヒト化抗体をイヌIL-4Rαとのそれらの反応性に関してスクリーニングした。注目すべきことに、ヒトIL-4Rαタンパク質の細胞外ドメインに特異的であると以前に確認されていたこれらのヒト化抗体の1つは、驚くべきことに、イヌIL-4Rα鎖にも結合することが判明した。更に驚くべきことに、この抗体は、イヌIL-4の、そのイヌIL-4Rα鎖への結合を遮断しうることが判明した。したがって、後記で開示されているとおり、この抗体のイヌ化はイヌにおける治療的有用性を有する。
本発明の詳細な説明および実施例の全体にわたって、以下の略語を用いる。
CDC 補体依存性細胞傷害;
CDR Kabat(カバト)番号付け系を用いて定められた、免疫グロブリン可変領域内の相補性決定領域;
CHO チャイニーズハムスター卵巣;
EC50 50%の効力または結合をもたらす濃度;
ELISA 酵素結合イムノソルベントアッセイ;
FR 抗体フレームワーク領域:CDR領域を除く免疫グロブリン可変領域;
HRP ホースラディッシュペルオキシダーゼ;
IFN インターフェロン;
IC50 50%の抑制をもたらす濃度;
IgG 免疫グロブリンG;
Kabat Elvin A.Kabat[Sequences of Proteins of Immunological Interest,5th Ed.Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991)]により開発された免疫グロブリンアライメントおよび番号付け系;
mAb モノクローナル抗体(また、MabまたはMAb);
MTT (3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド);
MOA 作用メカニズム;
NHS 正常ヒト血清;
PCR ポリメラーゼ連鎖反応;
PK 薬物動態;
SEB スタフィロコッカス(Staphylococcus)エンテロトキシンB;
TT 破傷風トキソイド;
V領域 異なる抗体間で配列が可変性であるIgG鎖のセグメント。それは軽鎖内のKabat残基109および重鎖内の113まで伸長する;
VH 免疫グロブリン重鎖可変領域;
VK 免疫グロブリンカッパ軽鎖可変領域。
本発明がより容易に理解されうるように、幾つかの科学技術用語を以下に具体的に定義する。本明細書中の他の箇所で特に定義されていない限り、本明細書中で用いる他の全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解される意味を有する。
本発明は、イヌIL-4Rαに結合する単離されたイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメント、およびそのような抗体またはそのフラグメントの使用を提供する。
性は絶対的な結合特異性を要しない。イヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体がイヌIL-4Rαに「特異的」である(または特異性を伴って結合する)とみなされるのは、その結合が、イヌのサンプルにおける他のイヌタンパク質の活性を不適切に妨げることなく、例えば、診断場面における偽陽性または治療場面における副作用のような望ましくない結果をもたらすことなく、イヌから得られた生物学的サンプル中のイヌIL-4Rαの存在を決定するものである場合、あるいはそれがイヌIL-4Rαの活性を変化させうる場合である。イヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体に必要な特異性の度合は該抗体の意図される用途に左右されうるが、いずれにせよ、意図される目的の用途に対するその適合性によって定められる。想定される方法の抗体、または抗体の抗原結合性部位に由来する結合性化合物が、その抗原またはその変異体もしくは突然変異タンパク質に、特異性を伴って結合するのは、それが、いずれかの他のイヌ抗原に対するアフィニティより少なくとも2倍大きな、好ましくは少なくとも10倍大きな、より好ましくは少なくとも20倍大きな、最も好ましくは少なくとも100倍大きなアフィニティを有する場合である。
1.抗体依存性細胞傷害(ADCC)および補体依存性細胞傷害(CDC)のようなエフェクター機能を欠いている;ならびに
2.プロテインAクロマトグラフィーに基づく技術のような業界標準技術を用いて大規模で容易に精製される。
本発明は、キメラおよびイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体を提供し、また、疾患の治療、例えばイヌにおけるアトピー性皮膚炎の治療における該抗体またはその抗原結合性フラグメントの使用方法を提供する。イヌにおいては、A、B、CおよびDと称される4つのIgG重鎖が存在する。これらの重鎖は、イヌIgGの、4つの異なるサブクラスに対応し、それらはIgGA、IgGB、IgGCおよびIgGDと称される。2つの重鎖のそれぞれは1つの可変ドメイン(VH)、ならびにCH-1、CH-2およびCH-3と称される3つの定常ドメインからなる。CH-1ドメインは、「ヒンジ」または「ヒンジ領域」と称されるアミノ酸配列を介してCH-2ドメインに連結されている。
IgGB: PKRENGRVPRPPDCPKCPAPEM(配列番号62);または
IgGC: AKECECKCNCNNCPCPGCGL(配列番号63)。
本発明は更に、本明細書に開示されているイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体およびその抗原結合性フラグメントの免疫グロブリン鎖をコードする核酸を含む。例えば、本発明は、後記配列表に列挙されている新規核酸、ならびに本発明で提供されるアミノ酸配列を含むペプチドおよびタンパク質をコードする核酸の全てを含む。
本発明のキメラ(ヒト/イヌ)およびイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメントはイヌIL-4へのイヌIL-4Rαの結合を抑制することが可能であり、配列番号39および/または40および/または41および/または42のアミノ酸配列の1以上を含むエピトープに結合する
イヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体は、後記実施例に記載されているとおりに組換え的に製造されうる。本明細書に開示されている抗体またはフラグメントの発現のための宿主として利用可能な哺乳類細胞系は当技術分野でよく知られており、American Type Culture Collection(ATCC)から入手可能な多数の不死化細胞系を包含する。これらは、とりわけ、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、NSO、SP2細胞、HeLa細胞、ベビーハムスター腎(BHK)細胞、サル腎細胞(COS)、ヒト肝細胞癌細胞(例えば、Hep G2)、A549細胞、3T3細胞、HEK-293細胞および多数の他の細胞系を包含する。哺乳類宿主細胞はヒト、マウス、ラット、イヌ、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマおよびハムスター細胞を包含する。特に好ましい細胞系は、どの細胞系が高い発現レベルを有するのかを決定することにより選択される。使用されうる他の細胞系としては、昆虫細胞系、例えばSf9細胞、両生類細胞、細菌細胞、植物細胞および真菌細胞が挙げられる。重鎖またはその抗原結合性部分もしくはフラグメント、軽鎖および/またはその抗原結合性フラグメントをコードする組換え発現ベクターを哺乳類宿主細胞内に導入する場合には、該宿主細胞における該抗体の発現(またはより好ましくは、該宿主細胞が培養される培地内への該抗体の分泌)を可能にするのに十分な期間にわたって該宿主細胞を培養することにより、該抗体が産生される。
本発明のイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体は、例えば該抗体の特性を改善するために、親(すなわち、イヌ)モノクローナル抗体の可変ドメイン内のフレーム残基に対する修飾を含むように操作されている。
本発明のイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメントは、イヌIL-4Rαタンパク質に関する診断アッセイ、例えば、特定の細胞、組織または血清におけるその発現の検出においても有用でありうる。そのような診断方法は種々の疾患診断において有用でありうる。例えば、そのような方法は以下の工程を含む。
(b)イヌIL-4Rαの存在に関して試験されるべきサンプルを該基体に適用すること;
(c)該プレートを洗浄して、該サンプル中の未結合物質を除去すること;
(d)IL-4Rα抗原に同様に特異的である検出可能な様態で標識された抗体(例えば、酵素結合抗体)を適用すること;
(e)該基体を洗浄して、未結合標識抗体を除去すること;
(f)標識抗体が酵素結合体である場合には、蛍光シグナルへと酵素により変換される化学物質を適用すること;および
(g)標識抗体の存在を検出すること。
(iii)結合したイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメントを検出すること。
イヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメントの医薬組成物または無菌組成物を製造するためには、それを医薬上許容される担体または賦形剤と混合する[例えば、Remington’s Pharmaceutical SciencesおよびU.S.Pharmacopeia:National Formulary,Mack Publishing Company,Easton,PA(1984)を参照されたい]。
既に記載されているとおり、本発明のイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメントは1以上の他の治療用物質(例えば、アトピー性皮膚炎を治療するために使用される医薬組成物)と共投与されうる。該抗体は(免疫複合体として)該物質に連結されることが可能であり、あるいは該物質とは別々に投与されうる。後者(別々の投与)の場合、該抗体は該物質の前、後または同時に投与可能であり、あるいは他の公知療法と共投与されうる。
更に、医薬上許容される担体および/または本明細書に記載されているアトピー性皮膚炎を治療するために使用される医薬(これらに限定されるものではない)を含む1以上の追加的成分と共に、IL-4Rαに特異的に結合する本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメント(例えば、本発明のイヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rα抗体またはその抗原結合性フラグメント)(これらに限定されるものではない)を含む1以上の成分を含むキットを提供する。アトピー性皮膚炎を治療するために使用される医薬および/または結合性組成物は、純粋な組成物として、または医薬組成物において医薬上許容される担体と組合せて製剤化されうる。
実施例1
イヌIL-4受容体アルファ鎖の特定およびクローニング
推定完全長イヌIL-4受容体アルファ鎖をコードするcDNA(配列番号1)をGenbankデータベース(アクセッション番号XM 547077.4)の検索により特定した。この推定cDNAは、25アミノ酸のリーダー配列を含む823アミノ酸(配列番号2)をコードしており、アクセッション番号XP 547077.3として特定される。成熟推定イヌIL-4受容体α鎖タンパク質(配列番号4)はヒトIL-4受容体α鎖(アクセッション番号NP 000409.1)に対して65%の同一性およびブタIL-4受容体α鎖(アクセッション番号NP 999505.1)に対して70%の同一性を共有する。成熟推定イヌIL-4受容体α鎖タンパク質は、配列番号3として特定されているヌクレオチド配列によりコードされる。推定成熟IL-4受容体α鎖とヒトIL-4受容体α鎖の公知配列との比較は成熟イヌIL-4受容体α鎖タンパク質の細胞外ドメイン(ECD)を特定した。これは配列番号6と称される。成熟イヌIL-4受容体α鎖のECDをコードするDNA配列は配列番号5として特定されている。
キメラおよびイヌ化ヒト抗ヒトIL4Rαモノクロナール抗体
イヌにおけるアトピー性皮膚炎の治療を開発するために、ヒトIL-4受容体アルファに対する公知ヒト化抗体[例えば、U.S.8,877,189、U.S.7,186,809およびUS 2015/0017176 A1を参照されたい]のいずれかがイヌIL-4Rαにも結合しうるかどうかを知るための研究を行った。ヒトIL-4受容体アルファに対するこれらのヒト化モノクローナル抗体の幾つかはイヌIL-4Rαにも結合することが判明した。
1.抗体依存性細胞傷害(ADCC)および補体依存性細胞傷害(CDC)のようなエフェクター機能を欠いている;ならびに
2.プロテインAクロマトグラフィーに基づく技術のような業界標準技術を用いて大規模で容易に精製される。
修飾イヌ定常重鎖(CH1~CH3)を選択したら、抗ヒトIL-4受容体アルファ mAb[US 2015/0017176 A1]の重鎖可変領域のアミノ酸配列をコードするDNA配列を修飾イヌ定常重鎖のDNA配列に融合させて、キメラヒト-イヌ重鎖DNA配列(配列番号15)を得た。該コード化キメラヒト-イヌ重鎖は配列番号16のアミノ酸配列を含む。同様に、抗ヒトIL-4受容体アルファ mAbの軽鎖可変領域[US 2015/0017176 A1]のアミノ酸配列をコードするDNA配列を、定常イヌカッパ軽鎖のアミノ酸配列をコードするDNA配列に融合させて、キメラヒト-イヌ軽鎖DNA配列(配列番号17)を得た。該キメラヒト-イヌ軽鎖DNA配列によりコードされるタンパク質は配列番号18のアミノ酸配列を含む。
いずれの特定のアプローチにも束縛されるものではないが、イヌおよびヒト配列の種々の含有物を有するイヌ化抗IL-4Rα mAbの変異体の製造方法は以下の一般的スキームを含むものであった。
配列番号16および配列番号18によりコードされるキメラヒト-イヌ抗体を、イヌIL-4受容体アルファに対する反応性に関して、以下のとおりに試験した。
イヌ化ヒト抗ヒトIL-4Rαモノクローナル抗体
いずれの特定のアプローチにも束縛されるものではないが、イヌ化抗イヌIL-4Rα mAbを製造するために種々の組合せで混合されうるイヌ化重鎖および軽鎖の全体的な製造方法は以下のプロトコールで達成されうる。
イヌIL-4受容体アルファに対するイヌ化抗体の遮断活性
イヌIL-4受容体アルファを発現するCHO-DG44安定細胞系を使用して、イヌIL-4受容体アルファに対するイヌ化抗体の遮断活性に関する試験を行った。
配列番号1のヌクレオチド配列を有する完全長イヌIL-4受容体アルファ鎖をコードする核酸を合成し、哺乳類発現ベクター内にサブクローニングした。得られたプラスミドをCHO DG44細胞内にトランスフェクトした。トランスフェクションの48時間後、該細胞を96ウェルプレート内に希釈して単細胞クローンを得た。4週間のインキュベーションの後に約130個のクローンを得た。該クローンの全てを、クローン化インターロイキン-4受容体アルファ[cIL-4Rα]の発現に関して、抗cIL-4Rαモノクローナル抗体(6B2)を使用するFACSによりスクリーニングした。3つのクローンを安定性評価のために選択し、これをFACSにより20継代にわたってモニターした。
・細胞増殖培地:CD OptiCHO培地 + 8mM L-グルタミン + 0.018% F-68;
・FACSバッファー:BD Pharmingen染色(Stain)バッファー(BDカタログ番号554657);
・R-フィコエリシン(phycoerythin)結合ストレプトアビジン(Life Technologies:SB66);
・イヌIL-4(R&D system,カタログ番号754-CL/CF);
・製造業者の推奨に従いイヌIL-4をビオチン化するために使用されるLightning-Linkビオチン結合キットA型(Novus:704-0010)
・フローサイトメーター:BD FACSCanto II;
・細胞系:イヌIL-4受容体アルファを発現するCHO-DG44安定細胞系。
1.CHO-DH44-canIL-4Rα細胞を96%以上の生存度で2~4×106 細胞/mLまで増殖させた。
イヌIL-4Rαに対するイヌ化DUPI抗体の中和活性の試験
IL-4受容体アルファを発現するBaF3細胞系の構築
BaF3はマウス前駆B細胞系であり、その細胞増殖はマウスIL-3に依存的である。ヒトIL-4受容体アルファ鎖を発現するBaF3細胞はIL-4の刺激で増殖することが示されている。このプロトコールは、イヌIL-4受容体アルファ鎖を発現するBaF3安定細胞系を作製するためのものであり、得られる細胞系はイヌIL-4による刺激に際して増殖する。
細胞系:前記のとおりのイヌIL-4受容体アルファ鎖を発現するBaF3安定細胞系。
イヌIL-4Rαエピトープのマッピング
序論
対応コグネイトタンパク質抗原との抗体の相互作用は該抗体の特異的アミノ酸(パラトープ)とその標的抗原の特定のアミノ酸(エピトープ)との結合によって媒介される。エピトープは、免疫グロブリンによる特異的反応を引き起こす抗原決定基である。それは抗原の表面上のアミノ酸の一群からなる。
不連続的エピトープのマッピングは技術的に困難であり、専門的な技術、例えば、対応標的タンパク質とのモノクローナル抗体のX線共結晶解析、水素-重水素(H/D)交換、および/または酵素消化と組合された質量分析を要する。抗イヌIL-4Rα mAb cDupi H2-L2により認識されるエピトープを特定するために、化学的架橋、高質量MALDI質量分析およびnLC-Orbitrap質量分析に基づく方法を用いた(CovalX(登録商標)Instrument Incorporated)。図5に示されているとおり、イヌIL-4Rαのエピトープマッピングに対するこの技術の適用は、配列番号39(アミノ酸配列:QWKMDHPTNCSAELRLSYQLD;領域1)および配列番号40(アミノ酸配列:RLAASTLKSGA;領域2)(接触アミノ酸残基が太字で示されている)により表されるイヌIL-4Rα鎖の細胞外ドメイン(ECD)内の2つの領域へのエピトープの位置の特定をもたらした。結果はまた、これら2つの領域が、cDupi H2 L2抗体と接触しているIL-4Rα鎖のアミノ酸、特に、配列番号4のアミノ酸配列のアミノ酸27位のスレオニン残基、アミノ酸37位のチロシン残基、アミノ酸164位のセリン残基、アミノ酸165位のスレオニン残基、およびアミノ酸167位のリジン残基を含む。その結果は、エピトープがアミノ酸TNCSAELRLSYの配列(配列番号41;サブ領域1)および/またはSTLK(配列番号42;サブ領域2)のアミノ酸配列を含むことを示している。結果は、該エピトープがTNCSAELRLSY(配列番号41;亜領域1)のアミノ酸配列および/またはSTLK(配列番号42;亜領域2)のアミノ酸配列内に存在することを示している。
Claims (14)
- イヌIgG重鎖とイヌカッパ軽鎖とを含む、インターロイキン4受容体アルファ(IL-4Rα)に特異的に結合する単離されたイヌ化抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、イヌカッパ軽鎖が3つの軽鎖相補性決定領域(CDR)、すなわち、CDR軽1(CDRL1)、CDR軽2(CDRL2)およびCDR軽3(CDRL3)を含み、
イヌIgG重鎖が3つの重鎖CDR、すなわち、CDR重1(CDRH1)、CDR重2(CDRH2)およびCDR重3(CDRH3)を含み、
(a)CDRL1が配列番号43のアミノ酸配列を含み、
(b)CDRL2が配列番号44のアミノ酸配列を含み、
(c)CDRL3が配列番号45のアミノ酸配列を含み、
(d)CDRH1が配列番号46のアミノ酸配列を含み、
(e)CDRH2が配列番号47のアミノ酸配列を含み、および
(f)CDRH3が配列番号48のアミノ酸配列を含む、単離されたイヌ化抗体またはその抗原結合性フラグメント。 - IgG重鎖が、配列番号28、配列番号30、および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1記載の単離されたイヌ化抗体。
- カッパ軽鎖が、配列番号34、配列番号36、および配列番号38からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1または2記載の単離されたイヌ化抗体。
- 該イヌ化抗体またはその抗原結合性フラグメントが、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42およびそれらのいずれかの組合せからなる群から選択されるアミノ酸配列からの1以上のアミノ酸残基においてイヌIL-4Rαに結合する、請求項1乃至3のいずれか1項記載の単離されたイヌ化抗体またはその抗原結合性フラグメント。
- 該抗体が、イヌIL-4Rαに結合する場合、T27、Y37、S164、T165、
K167およびそれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、配列番号4の1以上のアミノ酸残基に結合する、請求項4記載の単離されたイヌ化抗体。 - イヌIL-4Rαに結合し、イヌインターロイキン4(IL-4)へのイヌIL-4Rαの結合を遮断する、請求項1乃至5のいずれか1項記載の単離されたイヌ化抗体またはその抗原結合性フラグメント。
- 一対の単離された核酸であって、一方が請求項1乃至6のいずれか1項記載の単離されたイヌ化抗体の軽鎖をコードし、他方が該抗体の重鎖をコードする、一対の単離された核酸。
- 重鎖が、配列番号27、配列番号29および配列番号31から成る群から選択される核酸配列を含む、請求項7記載の一対の単離された核酸。
- 軽鎖が、配列番号33、配列番号35および配列番号37から成る群から選択される核酸配列を含む、請求項7記載の一対の単離された核酸。
- 請求項7、8または9のいずれか1項記載の一対の単離された核酸を含む発現ベクター。
- 請求項10記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
- 請求項1、2、3、4、5または6記載の抗体、あるいは請求項7、8または9記載の核酸、あるいは請求項10記載の発現ベクター、あるいはそれらのいずれかの組合せと、医薬上許容される担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
- 請求項12記載の医薬組成物の治療的有効量をイヌに投与することを含む、イヌのアトピー性皮膚炎の治療方法。
- a.該核酸が発現され、それにより、軽鎖および重鎖可変領域を含むポリペプチドを産生する条件下、請求項11記載の宿主細胞を培地内で培養し、
b.該ポリペプチドを宿主細胞または培地から回収することを含む、IL-4Rαに結合するイヌ化抗体またはその抗原結合性フラグメントの製造方法。
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Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005032399A2 (en) | 2003-05-30 | 2005-04-14 | The Regents Of The University Of California | Il4 receptor antagonists for horse, dog and cat |
JP2005514063A (ja) | 2001-12-21 | 2005-05-19 | イデックス ラボラトリーズ インコーポレイテッド | イヌ免疫グロブリン可変ドメイン、イヌ化抗体、ならびにそれらを作製および使用する方法 |
WO2014197470A1 (en) | 2013-06-04 | 2014-12-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mehods for treating allergy and enhancing allergen-specific immunotherapy by administering an il-4r inhibitor |
WO2015091914A2 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | Intervet International B.V. | Caninized murine antibodies to human pd-1 |
WO2016156588A1 (en) | 2015-04-02 | 2016-10-06 | Intervet International B.V. | Antibodies to canine interleukin-4 receptor alpha |
-
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WO2005032399A2 (en) | 2003-05-30 | 2005-04-14 | The Regents Of The University Of California | Il4 receptor antagonists for horse, dog and cat |
WO2014197470A1 (en) | 2013-06-04 | 2014-12-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mehods for treating allergy and enhancing allergen-specific immunotherapy by administering an il-4r inhibitor |
WO2015091914A2 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | Intervet International B.V. | Caninized murine antibodies to human pd-1 |
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