JP6949009B2 - ヒトプログラム死リガンド2(pd−l2)に結合する抗体およびその用途 - Google Patents
ヒトプログラム死リガンド2(pd−l2)に結合する抗体およびその用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6949009B2 JP6949009B2 JP2018514829A JP2018514829A JP6949009B2 JP 6949009 B2 JP6949009 B2 JP 6949009B2 JP 2018514829 A JP2018514829 A JP 2018514829A JP 2018514829 A JP2018514829 A JP 2018514829A JP 6949009 B2 JP6949009 B2 JP 6949009B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- binding
- antigen
- expression
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 title claims description 186
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 title claims description 179
- 101001117312 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 2 Proteins 0.000 title claims description 41
- 102000048119 human PDCD1LG2 Human genes 0.000 title claims description 35
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 137
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 93
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 92
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 91
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 78
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 78
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 78
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 76
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 claims description 72
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 59
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 55
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 55
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 38
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 14
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 11
- 229940124060 PD-1 antagonist Drugs 0.000 claims description 11
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 10
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 claims description 9
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 claims description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 4
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 claims 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 83
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 81
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 81
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 70
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 66
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 52
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 48
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 44
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 41
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 37
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 36
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 36
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 31
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 26
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 24
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 22
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 19
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 18
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 18
- 230000004044 response Effects 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 17
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 17
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 15
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 15
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 14
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 13
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 13
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 13
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 12
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 12
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 11
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 11
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 11
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 10
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 10
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 10
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 9
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 8
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 8
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000001280 germinal center Anatomy 0.000 description 7
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 7
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 6
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 6
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 6
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 6
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 5
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 5
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 5
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 5
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 4
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 4
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 102000048776 human CD274 Human genes 0.000 description 4
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 3
- -1 oligonucleotides Chemical class 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000473391 Archosargus rhomboidalis Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000998953 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 1-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 2
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 2
- 102100036887 Immunoglobulin heavy variable 1-2 Human genes 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 2
- 108010053210 Phycocyanin Proteins 0.000 description 2
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 235000001537 Ribes X gardonianum Nutrition 0.000 description 2
- 235000001535 Ribes X utile Nutrition 0.000 description 2
- 235000016919 Ribes petraeum Nutrition 0.000 description 2
- 244000281247 Ribes rubrum Species 0.000 description 2
- 235000002355 Ribes spicatum Nutrition 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000000205 computational method Methods 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 2
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 2
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 239000012893 effector ligand Substances 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000006338 isoaspartate formation Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 2
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102200072304 rs1057519530 Human genes 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydrophthalazine-1,4-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NNC(=O)C2=C1 KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 2-(N-morpholiniumyl)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CC[NH+]1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZTOJFFHGPLIVKC-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-2-[(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound S1C2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N(CC)C1=NN=C1SC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N1CC ZTOJFFHGPLIVKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N Asn-Gly Chemical group NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GADKFYNESXNRLC-WDSKDSINSA-N Asn-Pro Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O GADKFYNESXNRLC-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N Asp-Gly Chemical group OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 241000212384 Bifora Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101100463133 Caenorhabditis elegans pdl-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061968 Gastric neoplasm Diseases 0.000 description 1
- NJMYZEJORPYOTO-BQBZGAKWSA-N Gln-Pro Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O NJMYZEJORPYOTO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101001047628 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 2-29 Proteins 0.000 description 1
- 101100407307 Homo sapiens PDCD1LG2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000611202 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 1
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 102100022949 Immunoglobulin kappa variable 2-29 Human genes 0.000 description 1
- 102000012214 Immunoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010036650 Immunoproteins Proteins 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 101100519207 Mus musculus Pdcd1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000023178 Musculoskeletal disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102100040283 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 230000010799 Receptor Interactions Effects 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000006943 Uracil-DNA Glycosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010072685 Uracil-DNA Glycosidase Proteins 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005006 adaptive immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002787 antisense oligonuctleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 238000013357 binding ELISA Methods 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 239000008004 cell lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 235000021310 complex sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000012537 formulation buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 102000005396 glutamine synthetase Human genes 0.000 description 1
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 125000001810 isothiocyanato group Chemical group *N=C=S 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000007477 logistic regression Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 239000002991 molded plastic Substances 0.000 description 1
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000012633 nuclear imaging Methods 0.000 description 1
- 238000012758 nuclear staining Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000011330 nucleic acid test Methods 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N phenyl 10-methylacridin-10-ium-9-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2[N+](C)=C2C=CC=CC2=C1C(=O)OC1=CC=CC=C1 RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000092 prognostic biomarker Substances 0.000 description 1
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002910 rare earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940066453 tecentriq Drugs 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical class [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Chemical class 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57492—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds localized on the membrane of tumor or cancer cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4703—Regulators; Modulating activity
- G01N2333/4704—Inhibitors; Supressors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は、ヒトプログラム死リガンド2(PD−L2)に結合し、免疫組織化学的(IHC)分析によるヒト組織サンプルにおけるPD−L2発現の検出に有用である抗体およびその抗原結合性フラグメントに関する。本発明はまた、この抗ヒトPD−L2抗体を使用する免疫組織化学的(IHC)アッセイに関する。
本出願は2015年9月21日付け出願の米国仮特許出願第62/221,472号(その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする)の利益を主張するものである。
本出願の配列表は、ファイル名「24188WOPCT−SEQLIST−14SEPT2016.TXT」、2016年9月14日の作成日および13.7KBのサイズを有するASCII形式の配列表としてEFS−Webを介して電子的に提出されている。EFS−Webを介して提出されたこの配列表は本明細書の一部であり、その全体を参照により本明細書に組み入れることとする。
本発明は、非常に特異的で高感度で再現性のある様態で凍結組織切片およびFFPEヒト組織切片の両方におけるPD−L2タンパク質に結合しうる新規抗ヒトPD−L2モノクローナル抗体(mAb)に関する。本発明者らは、この新規抗ヒトPD−L2 mAbが、以下の基準、すなわち、特異性、感度および再現性の1以上に基づいて、IHCアッセイで使用される幾つかの商業的に入手可能な抗ヒトPD−L2抗体より優れていると考えている。これらの3つの基準の3つ全てを満たしているわけではない市販抗ヒトPD−L2抗体としては、R&D Systems(Minneapolis,MN,USA)からカタログ番号MAB1224として入手可能なマウスIgG2b mAbであるクローン#176611、ポリクローナルヤギIgGであるR&D Systemsカタログ番号AF1224として入手可能なもの、およびBioLegend(登録商標)(サンディエゴ,CA USA)からカタログ番号345501として入手可能なマウスIgG1 mAbであるクローンMIH18が挙げられる。したがって、本発明はまた、FFPE組織切片におけるPD−L2を検出するためのIHCアッセイを含む、ヒト細胞の表面上のPD−L2発現の検出における本発明の抗PD−L2 mAbの使用に関する。
腫瘍関連PD−L1発現は抗PD−1療法に対する臨床的応答に関連している。しかし、PD−L1陰性患者も抗PD−1療法に応答しうる。このことは、他のPD−1相互作用が応答性に関連している可能性があることを示唆している。PD−1のもう一方の公知リガンドであるPD−L2の保有率および分布は十分には研究されていない。商業的に入手可能な抗ヒトPD−L2抗体は、FFPE組織切片のIHCアッセイにおいてヒトPD−L2を検出するのに満足しうるものではない。この目的を達成するために、本発明は、単離された抗PD−L2抗原結合性タンパク質、およびヒト組織サンプルにおけるPD−L2発現の検出方法における該抗原結合性タンパク質の使用方法を提供する。本発明は更に、抗PD−1治療を要する患者における抗PD−1治療に対する臨床応答性を予測するための、本発明のPD−L2抗体またはその抗原結合性フラグメントの使用方法を提供する。幾つかの実施形態においては、患者は頭頸部扁平上皮癌(HNSCC)を有する。
本発明の詳細な説明および実施例の全体にわたって、以下の略語を用いる。
CHO:チャイニーズハムスター卵巣
EC50:50%の効力または結合をもたらす濃度
ELISA:酵素結合イムノソルベントアッセイ
FFPE:ホルマリン固定パラフィン包埋
FR:フレームワーク領域
HRP:ホースラディッシュペルオキシダーゼ
HNSCC:頭頸部扁平上皮細胞癌
IC50:50%の抑制をもたらす濃度
IgG:免疫グロブリンG
IHC:免疫組織化学または免疫組織化学的
mAbまたはMab:モノクローナル抗体
MES:2−(N−モルホリノ)エタンスルホン酸
NCBI:National Center for Biotechnology Information
NSCLC:非小細胞肺癌
PCR:ポリメラーゼ連鎖反応
PD−1:プログラム死1
PD−L1:プログラム細胞死1リガンド1
PD−L2:プログラム細胞死1リガンド2
TNBC:三種陰性乳癌
VH:免疫グロブリン重鎖可変領域
VK:免疫グロブリンカッパ軽鎖可変領域
VL:免疫グロブリン重鎖可変領域
本発明がより容易に理解されうるように、ある科学技術用語を特に以下に定義する。本明細書の他の箇所で特に定義されていない限り、本明細書で用いられている全ての他の科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されている意味を有する。
本明細書中で用いる「細胞」、「細胞系」および「細胞培養」なる表現は互換的に用いられ、全てのそのような語は後代を含む。したがって、「形質転換体」および「形質転換細胞」なる語は、導入の数には無関係に、初代対象細胞、およびそれに由来する培養を含む。また、意図的な又は故意でない突然変異のため、全ての後代が厳密に同じDNA含量を有するわけではないと理解される。元の形質転換細胞において選別されたものと同じ機能または生物活性を有する突然変異体後代も含まれる。異なる名称が意図される場合、それは文脈から明らかであろう。
本明細書および特許請求の範囲の全体において用いられる「から実質的になる」およびその派生語、例えば「から実質的になり」または「から実質的になっており」は、任意の列挙されている要素または要素群の包含、および特定されている投与レジメン、方法または組成物の基本的または新規特性を実質的に変化させない、列挙要素と類似した又は異なる性質の他の要素の随意的(すなわち、所望により含んでいてもよい)包含を示す。非限定的な一例としては、列挙されているアミノ酸配列から実質的になる抗PD−L2抗体は、結合特異性または活性に実質的な影響を及ぼさない、1以上のアミノ酸残基の置換を含む1以上のアミノ酸をも含んでいてもよい。
本発明は、ヒトPD−L2に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。該単離抗体またはその抗原結合性フラグメントは3個の軽鎖CDR(CDRL1、CDRL2およびCDRL3)および3個の重鎖CDR(CDRH1、CDRH2およびCDRH3)を含む。該単離抗PD−L2抗体またはその結合性フラグメントは細胞表面上のヒトPD−L2発現の検出に有用である。本発明の抗PD−L2抗体の例には、抗体3G2の軽鎖および重鎖アミノ酸配列を含む抗体(表1を参照されたい;VLは配列番号8を含み、またはそれからなり、またはそれから実質的になり、VHは配列番号16を含み、またはそれからなり、またはそれから実質的になる)が含まれるが、これに限定されるものではない。
の免疫グロブリン軽鎖の四量体であり、ここで、免疫グロブリン重鎖および軽鎖は例えばジスルフィド結合により互いに連結されている。重鎖定常領域は3個のドメイン、すなわち、CH1、CH2およびCH3を含む。軽鎖定常領域は1個のドメインCLを含む。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、典型的には、免疫系の種々の細胞(例えば、エフェクター細胞)および古典的補体系の第1成分(C1q)を含む宿主組織または因子への抗体の結合をもたらす。「抗体」なる語はタイプIgA、IgG、IgE、IgD、IgM(およびそれらのサブタイプ)の無傷免疫グロブリンを含み、ここで、免疫グロブリンの軽鎖はカッパまたはラムダのタイプのものでありうる。
本発明はまた、本明細書に開示される抗PD−L1抗体および抗原結合性フラグメントの免疫グロブリン鎖をコードする組換え核酸を提供する。例えば、本発明は、表1に記載されているアミノ酸配列をコードする核酸、およびそれにハイブリダイズする核酸を含む。
本発明は更に、抗体3G2(「参照抗体」)の軽鎖および重鎖アミノ酸配列を含む四量体抗体の、ヒトPD−L2への結合を、参照抗体と同じエピトープへの結合により遮断する抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。そのような抗体および結合性フラグメントは、当技術分野で公知の任意の交差遮断または競合分析を用いて特定されうる。第1抗体が第2抗体の結合を交差遮断するとみなされるのは、飽和状態までの第1抗体への標的の予備結合が、標的の最大半量結合を達成するのに必要な第2抗体の濃度を2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、20倍、50倍、100倍、200倍以上増加させる場合である。交差遮断抗体の結合性エピトープは、当技術分野でよく知られた技術を用いて特定されうる。
本発明の抗体は、所望の抗体を発現するハイブリドーマクローンを培養することにより製造されうる。例えば、約1グラムの3G2抗体は、以下の方法を用いて、マウスハイブリドーマ細胞株MEB123.3G2.038から製造され、精製されうる。凍結MEB123.3G2.038細胞を、0.18% Pluronic F−68の存在下または非存在下で2mMの追加的L−グルタミンを含有するハイブリドーマ血清非含有培地を含む振とうフラスコ内に解凍する。Pluronic F−68の存在は振とうフラスコ培養の生存性を改善しうる。細胞が振盪フラスコ内に完全に馴化したら、10% CHO CD高効率フィードB(Invitrogen,カタログ番号A10240−01)を加えながら、WAVEバイオリアクター(GE Healthcare Life Sciences)内の無血清培地において20リットルの生産培養を行う。細胞増殖のために、1リットルの培養を小さなWAVEバッグ内で開始させ、ついでその1LのWAVE培養物をWAVEバイオリアクターにおいて20Lの培養へと拡大させる。その20リットルの培養を0.5×106 生存細胞/mLの細胞密度で開始させ、第1日に10% CHO CD高効率フィードBを供給し、1N Na2CO3でpHを毎日調節する。4日後に細胞を集める。NOVA分析のために、少量のサンプルを毎日採取することが可能である。
親抗原結合性タンパク質の可変ドメイン内のフレームワーク残基に対する修飾を含むように、例えば、抗原結合性タンパク質の特性を改善するために、抗PD−L2抗原結合性タンパク質が改変(操作)される実施形態が更に含まれる。典型的には、そのようなフレームワーク修飾は、抗原結合性タンパク質の免疫原性を低下させるために行われる。これは通常、親抗原結合性タンパク質における可変ドメイン内の非CDR残基(すなわち、フレームワーク残基)を、該抗原結合性タンパク質が使用されることになる種の免疫レパトワからの類似残基(例えば、ヒト用治療剤の場合にはヒト残基)で置換することにより達成される。そのような抗体は「ヒト化」抗原結合性タンパク質と称される。幾つかの場合には、改変(例えば、ヒト化)抗原結合性タンパク質の特異性を変化させ、またはアフィニティを増強することが望ましい。1つのアプローチは1以上のフレームワーク残基を対応生殖系列配列へと「復帰突然変異(backmutate)」させることである。より詳しくは、体細胞突然変異を受けた抗原結合性タンパク質は、該抗原結合性タンパク質が由来する生殖系列配列とは異なるフレームワーク残基を含有しうる。そのような残基は、該抗原結合性タンパク質が由来する生殖系列配列と該フレームワーク配列を比較することにより特定されうる。もう1つのアプローチは、該改変(例えば、ヒト化)抗原結合性タンパク質の位置の1以上において元の親残基へと復帰突然変異させること、例えば、フレームワーク残基の置換の過程において喪失した可能がある結合アフィニティを回復させることである(例えば、米国特許第5,693,762号、米国特許第5,585,089号および米国特許第5,530,101号を参照されたい)。
VHおよび/またはVL CDRの変異は、独立して、任意の組合せで選択されうる。また、所望の活性または結合能が維持される限り、本明細書に記載されている任意の変異は、独立して、任意の組合せで選択されうる。
本明細書に開示されている抗原結合性タンパク質はまた、Fc領域内の修飾を含むように、典型的には、抗原結合性タンパク質の機能特性、例えば血清半減期、補体固定、Fc受容体結合および/またはエフェクター機能(例えば、抗原依存性細胞傷害性)の1以上を変化させるために改変されうる。更に、本明細書に開示されている抗原結合性タンパク質は化学的に修飾可能であり(例えば、1以上の化学的部分が該抗原結合性タンパク質に結合可能である)、あるいは、再び抗原結合性タンパク質の機能特性の1以上を改変するために、そのグリコシル化を改変するように修飾されうる。これらの実施形態のそれぞれは後記に更に詳細に記載されている。Fc領域内の残基の番号付けはKabatのEUインデックスのものである。
本明細書に開示されている抗PD−L2抗体および抗体フラグメントはまた、放射性核種または他の検出可能な標識のような化学的部分にコンジュゲート化されうる。放射性核種には、99Tc、90Y、111In、32P、14C、125I、3H、131I、11C、15O、13N、18F、35S、51Cr、57To、226Ra、60Co、59Fe、57Se、152Eu、67CU、217Ci、211At、212Pb、47Sc、109Pd、234Thおよび40K、157Gd、55Mn、52Tr、および56Feが含まれる。蛍光または化学発光標識には、発蛍光団、例えば希土類キレート、フルオレセインおよびその誘導体、ローダミンおよびその誘導体、イソチオシアナート、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o−フタルアルデヒド、フルオレスカミン、152Eu、ダンシル、ウンベリフェロン、ルシフェリン、ルミナール標識、イソルミナール標識、芳香族アクリジニウムエステル標識、イミダゾール標識、アクリジミウム塩標識、シュウ酸エステル標識、エクオリン標識、2,3−ジヒドロフタラジンジオン、ビオチン/アビジン、スピン標識および安定なフリーラジカルが含まれる。
本明細書に開示されている抗PD−L2抗体および抗体フラグメントは、細胞の表面上で発現されたヒトPD−L2を特異的に検出するために使用されうる。該細胞は、ヒト個体から得られた組織または血清サンプル中に存在することが可能であり、PD−L2発現の検出は、当技術分野で公知の種々のインビトロアッセイ方法のいずれかを用いて行われる。
(a)基体(例えば、マイクロタイタープレートウェル、例えばプラスチックプレートの表面)を抗PD−L1抗体またはその抗原結合性フラグメントで被覆(コート)し、
(b)ヒトPD−L1の存在に関して試験されるべきサンプルを該基体に適用し、
(c)該サンプル中の未結合物質が除去されるように、該プレートを洗浄し、
(d)同様にヒトPD−L1に特異的である、検出可能な様態で標識された抗体(例えば、酵素結合抗体)を適用し、
(e)未結合標識抗体が除去されるように、該基体を洗浄し、
(f)該標識抗体が、結合した酵素である場合には、該酵素により蛍光シグナルへと変換される化学物質を適用し、
(g)該標識抗体の存在を検出する。
(1)ヒトPD−L2の存在に関して試験されるべき膜または他の固体基体を本発明の抗体またはその抗原結合性フラグメントと接触させる。そのような膜は、非変性PAGE(ポリアクリルアミドゲル電気泳動)ゲルまたはSDS−PAGE(ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動)ゲルにおいてPD−L2の存在に関して試験されるべきタンパク質が(例えば、該ゲルにおける電気泳動分離の後で)移されたニトロセルロースまたはビニル系(例えば、ポリビニリデンフルオリド(PVDF))膜の形態をとりうる。抗PD−L2抗体またはフラグメントとの膜の接触の前に、膜を、所望により、例えば乾燥脱脂乳などでブロッキングして、該膜上の非特異的タンパク質結合部位に結合するようにする。
アッセイプロトコル
1)FFPE組織を4μmに薄片化し、一晩風乾させる。
1)キシレン 5分×3
2)キシレン 3分×1
3)100% アルコール 3分×2
4)95% アルコール 3分×1
5)95% アルコール 2分×1
6)70% アルコール 2分×1
7)脱イオン水 1分×1。
7)オートステイナープログラムが完了した後、スライドを装置から取り出し、脱イオン水に浸漬し、対比染色/脱水する。これは、以下のとおりに設定されたLeica Stainer XL(プログラム3)を使用して行う。
2)脱イオン水 2分×1
3)リチャード・アレン(Richard Allen’s)ブルーイング試薬 20秒×1
4)脱イオン水 2分×1
5)95% アルコール 1分×1
6)100% アルコール 1分×2
7)キシレン 1分×3
8)キシレン 終了。
本発明はまた、PD−1アンタゴニストに対する臨床応答を予測するための方法を提供する。1つの実施形態においては、該方法は、ヒト患者から摘出された腫瘍組織サンプルにおけるPD−L2の発現レベルを測定し、腫瘍組織サンプルがPD−L2に関して陽性であるか陰性であるかを判定し、サンプルがPD−L2陽性であると判定された場合にはPD−1アンタゴニストを患者に投与することを含む。
便宜上、本明細書に開示されている抗体または特異的結合性物質は、キット、すなわち、診断または検出アッセイを行うための説明を伴う所定量の試薬のパッケージされた組合せとして提供されうる。該抗体が酵素で標識される場合、該キットは基質と、酵素により要求される補因子(例えば、検出可能な発色団または発蛍光団を与える基質前駆体)とを含むであろう。また、安定剤、バッファー(例えば、ブロックバッファーまたは細胞溶解バッファー)などのような他の添加剤が含まれうる。種々の試薬の相対量は、アッセイの感度を実質的に最適化する該試薬の溶液中の濃度がもたらされるように広範に変動しうる。特に、該試薬は、適当な濃度を有する試薬溶液を溶解に際して与える賦形剤を含む乾燥粉末、通常は凍結乾燥粉末として提供されうる。
分子生物学における標準的な方法はSambrook,FritschおよびManiatis(1982 & 1989 2nd Edition,2001 3rd Edition)Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY;SambrookおよびRussell(2001)Molecular Cloning,3rd ed.,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY;Wu(1993)Recombinant DNA,Vol.217,Academic Press,San Diego,CAに記載されている。標準的な方法はAusbelら(2001)Current Protocols in Molecular Biology,Vols.1−4,John Wiley and Sons,Inc.New York,NYにも見られ、これは細菌細胞におけるクローニングおよびDNA突然変異誘発(Vol.1)、哺乳類細胞および酵母におけるクローニング(Vol.2)、複合糖質およびタンパク質発現(Vol.3)ならびにバイオインフォマティクス(Vol.4)を記載している。
抗PD−L2ハイブリドーマの作製およびスクリーニング
幾つかの市販抗ヒトPD−L2抗体の試験が、FFPE組織切片のIHCアッセイにおいてヒトPD−L2を検出するのにそれらが満足しうるものではないことを示した後、本発明者らは、高品質抗ヒトPD−L2 IHC試薬を作製することを試みるために一連のげっ歯類免疫化実験を本実施例で行った。最初の2つの実験で用いた免疫原はヒトPD−L2−Fc融合タンパク質(R&D Systems:カタログ番号:1224−PL、ロット番号:FCI051302A)およびヒトPD−L2−HisTag融合タンパク質(Sino Biologicals:カタログ番号:10292−H08H、ロット番号:MB05OC0910)であった。該PD−L2 Fc融合タンパク質は、ヒトIgG1フラグメントに融合したヒトPD−L2(Leu20−Pro219,NCBIアクセッション番号Q9BQ51.2)の細胞外ドメインを含有する。該PD−L2−Hisタグ融合体は、ポリヒスチジンタグに融合したヒトPD−L2の細胞外ドメインを含有する。第3の実験においては、同じ2つの融合タンパク質を、それらを5分間煮沸して変性させた後、免疫原として使用した。
ついで、1次スクリーニングおよび2次スクリーニングの両方においてヒトPD−L2への結合に関して陽性の試験結果を示したハイブリドーマ上清をIHCアッセイにおいてホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)ヒト正常扁桃組織の標識に関してスクリーニングした。染色、核染色、上皮細胞もしくは他の非特異的染色を示さない、または低いシグナル対ノイズ比を有するハイブリドーマを、更なる考慮から完全に除外した。最初の2回の免疫化実験からのPD−L2結合上清はいずれも、満足しうるIHC染色結果を示さなかった。このことに促されて、本発明者らは、第3の実験における免疫原として変性PD−L2融合タンパク質を使用した。PD−L2結合上清を与えた実験からの420個のハイブリドーマのうち、本発明者らは、IHCにおけるPD−L2検出試薬として使用される候補とみなされるのに十分な標識強度、低いバックグラウンドレベルおよびシグナル鮮明度を有する5個だけを特定した。ついで、これらのハイブリドーマを更なる評価のためにサブクローニングし、精製し、抗体クローン3G2が評価基準において最良の特性を有していた。
材料および方法
染色
FFPE組織切片を常法により脱パラフィン化し、PD−L2およびPD−L1 IHCのために再水和させた。全てのスライドを熱誘発性エピトープ回収に付し、内因性ペルオキシダーゼブロッキングを行った後、一次抗体(抗PD−L2クローン3G2または抗PD−L1クローン22C3,Merck Research Laboratories,Palo Alto CA)の存在下でインキュベーションを行った。抗原−抗体結合を3,3’ジアミノベンジジン(DAB)色素原(K4368,Dako,Carpinteria CA)で可視化した。
保存FFPE腫瘍検体をMerck Palo Alto組織バンクから入手した。スコア化は病理学者により行われた。スコアは腫瘍細胞および非腫瘍細胞の両方の標識の保有率を含む。半定量的な0〜5のスコア化系(0=陰性、1=稀少、2=低い、3=中等度、4=高い、5=非常に高い)を用いた。内皮細胞発現の存在または非存在を、特に、別個の値として評価した。
RNAScopeプラットフォーム(RNAscope 2.0高精細度キット,Advanced Cell Diagnostics[ACD],Hayward CA)を製造業者の説明に従い使用するISHにより、PD−L2 mRNAの細胞分布を評価した。ヒトPD−L2用のアンチセンスおよびセンスDNAプローブ(それぞれ試験プローブおよび陰性対照)ならびにPPIB用のアンチセンスプローブ(陽性対照)[全て、ACDにより設計されたもの(それぞれカタログ番号316291、519891および313901)]を使用して、ハイブリダイゼーションを行った。
定量的RT−PCR
リアルタイム定量的PCR分析のために、QuantiTect Reverse Transcription(Qiagen,Valencia,CA)を製造者の説明に従い使用して、DNアーゼ処理された全RNAを逆転写した。PDCD1LG2(PD−L2、CD273)に特異的なプライマーをApplied Biosystems(Foster City,CA)から商業的に入手した。ウラシル−DNAグリコシラーゼの存在下でTaqman Universal PCR Master Mixと共に特異的プローブ/プライマー混合物を使用して、Fluidigm Biomark上でリアルタイム定量的PCRを行った。ユビキチンレベルを別の反応において測定し、それを用いてΔCt方法によりデータを正規化した。
製造業者のプロトコール(NanoString,Seattle WA)に従って切片化FFPE組織から組織ライセートを得た。細胞ライセート(サンプル当たり50ng)をバーコード化3’ビオチン化捕捉プローブおよび蛍光タグ化5’レポータープローブ(所望の遺伝子発現コードセットからのもの)と混合した。プローブおよび標的転写産物を、製造業者の推奨に従い、一晩ハイブリダイズさせた。ハイブリダイズしたサンプルをNanoString nCouter(商標)装置において使用し、ついで、nCounter(商標)Digital Analyzerを使用して、最大スキャン解像度でサンプルをスキャンした。
3G2抗PD−L2 mAbの品質評価
ヒトPD−L2タンパク質の検出のためのIHC試薬としての3G2抗体の品質を試験した。該試験は、10μg/mLの濃度で適用された場合のFFPEヒト正常扁桃組織の標識に関する初期スクリーニング、高分解能、低いバックグラウンドノイズをもたらすアッセイの最適化(抗体の力価測定、複数の検出系の評価)を含む一連の工程、およびそれに続く一連の妥当性確認工程により行った。妥当性確認工程においては、以下の処理を行った:1)各組織に関する対応アイソタイプ対照を伴う37個の正常ヒト組織のパネル上(この場合、PD−L2の豊富な発現が胎盤および複数のリンパ組織において検出された)および複数のヒト腫瘍のコホートにおいてアッセイを行った;2)IHCアッセイにおいて陽性シグナルを示していたサンプル上でPD−L2 mRNAに関してin situハイブリダイゼーション(RNAscope,Advanced Cellular Diagnostics,Hayward CA)を行うことにより、IHCによる組織におけるシグナルの分布の妥当性をクロスチェックした;3)ブロッキング研究の実施により(この場合、IHCアッセイにおいて標識を示していた組織を共に常法で使用した)、および抗体の相補性決定領域(CDR)の結合に対する標識の依存性を判定するために、免疫原での該抗体の予備吸着の後でのみ、該組織への該抗体の適用により、IHCにより生成されたシグナルの特異性をクロスチェックした;4)通常のRNA分析方法により検出されたmRNAの量と、IHCにより生成されたシグナルの度合を比較するために、PD−L2 mRNA発現のレベル差を示すことが知られている一連の細胞系(CHO−K1、PD−L2トランスフェクト化CHO−K1、NCIH−226、NCIH−23、HOP−62、HOP−92、SKBR3、MCF7、M14、SR、RPMI 8226)から得られたFFPE細胞ペレット上でアッセイを行った;ならびに5)IHCシグナルの再現性を評価するために、出力の比較可能性の病理学者による評価により、3つの正常扁桃上で3日間にわたってアッセイを行った。PD−L2 IHCシグナルは、ヒト腫瘍サンプルにおいてNanoString法により定量されたPD−L2 mRNAレベルとも有意に相関した(p<0.0001〜p=0.0037;データ非表示)。
腫瘍および免疫細胞におけるPD−L2発現
腫瘍組織におけるPD−L2発現を検出するための3G2 mAbの有用性を評価するために、7つの異なる腫瘍型の保存サンプルを、3G2抗体を使用する本明細書に記載されているIHCアッセイに付した。腎細胞癌(n=71)、膀胱癌(n=34)、メラノーマ(n=83)、非小細胞肺癌(NSCLC)(n=94)、HNSCC(n=40)、三種陰性乳癌(TNBC)(n=22)および胃癌(n=73)を含む幾つかの腫瘍型のコホートにおいて、3G2抗PD−L2抗体でのIHC染色により、PD−L2タンパク質の発現を評価した(図3を参照されたい)。PD−L2発現のレベルは、染色の強度に基づいて0(陰性)、1(稀少)、2(低い)、3(中等度)、4(高い)または5(非常に高い)として、病理学者によりスコア化された。本発明者らはまた、種々の腫瘍型にわたる或る範囲のPD−L2発現を示す結果を分析した。また、本発明者らは、腫瘍組織切片における3つの異なる細胞型、すなわち、間質細胞、腫瘍細胞および内皮細胞において、PD−L2発現のレベルを評価し、その結果を図4に示す。簡潔に説明すると、該結果は、PD−L2タンパク質が間質細胞(免疫細胞浸潤物を含む)、腫瘍細胞および内皮細胞上で種々の度合で発現されたことを示している(後記)。
3G2抗PD−L2 mAbを使用するIHCアッセイの臨床的有用性
KEYNOTE−12治験(Seiwertら,2016年提出;Chowら,2016年提出)からの172名のHNSCC患者からの腫瘍組織サンプルにおいて、PD−L1およびPD−L2発現ならびに抗PD−1療法に対する臨床応答の間の関係を調べた。RECIST1.1に従い測定可能な再発性または転移性疾患を有し、0または1のECOG性能状態を有し、200mgのペンブロリズマブで3週間ごとに又は10mg/kgで2週間ごとに治療された、PD−L1およびPD−L2 IHCスコア化データが入手可能なHNSCC患者からの前治療サンプルを含めた。腫瘍および免疫浸潤細胞の両方の評価を含む1% 陽性カットオフ(陽性>1%;陰性<1%)を用いて、両方のアナライトに関する発現をスコア化した。1用量以上の治験薬の投与を受け、ベースライン疾患測定値および1以上のベースライン後スキャンを有する者、または薬物関連有害事象もしくは臨床進行性疾患ゆえに服薬を中断した者として定義される完全分析セット集団におけるこれらの患者の146名において、全体的な応答率(ORR)を評価した。1用量以上の治験薬の投与を受けた者として定義される172名の処置全患者集団において、無増悪生存(PFS)および全生存(OS)を評価した。片側検定、PD−L1発現に関する補正を伴う又は伴わないロジスティック(ORR)またはCox(PFS,OS)回帰分析により、PD−L2発現との関係を調べた。PD−L2陽性および陰性患者におけるPFSおよびOSに関する生存期間中央値を推定するために、カプラン−マイヤー統計を用いた。
入手可能なPD−L2およびPD−L1 IHCスコア化データを有する、KEYNOTE−12治験における再発性または転移性疾患を有する172名のペンブロリズマブ処置HNSCC患者に由来する腫瘍組織サンプルにおいて、PD−L2発現の臨床的関連性を評価した。サンプリングされた患者の年齢中央値は60歳(範囲は37〜84歳)で、ほとんどが男性であり(83.1%)、大部分はHPV陰性(65.7%)であった(図6)。患者の大半はECOG状態1であり(71.5%)、M1の転移病期を有し(84.9%)、多数(60.4%)は再発性または転移性疾患に対する2以上の過去の療法を受けていた。
Claims (17)
- CDRL1、CDRL2およびCDRL3の、3個の軽鎖CDR、ならびにCDRH1、CDRH2およびCDRH3の、3個の重鎖CDRを含む、ヒトPD−L2に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、ここで、
(a)CDRL1は配列番号2であり、
(b)CDRL2は配列番号4であり、
(c)CDRL3は配列番号6であり、
(d)CDRH1は配列番号10であり、
(e)CDRH2は配列番号12であり、
(f)CDRH3は配列番号14である、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。 - 軽鎖可変領域が配列番号8であり、重鎖可変領域が配列番号16である、軽鎖可変領域および重鎖可変領域を含む、請求項1記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。
- マウスIgG1定常領域を含む、請求項1または2に記載の単離された抗体。
- 各重鎖がマウスIgG1定常領域を含み、各軽鎖がマウスカッパ定常領域を含む、2つの同一重鎖および2つの同一軽鎖を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載の単離された抗体。
- 抗体軽鎖可変領域および抗体重鎖可変領域の両方をコードする単離された核酸であって、抗体軽鎖可変領域が配列番号8を含み、抗体重鎖可変領域が配列番号16を含む、単離された核酸。
- 配列番号17および配列番号18の両方を含む、請求項5記載の単離された核酸。
- 請求項5または6記載の単離された核酸を含む発現ベクター。
- 請求項7記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
- ヒトから摘出された組織サンプルをPD−L2発現に関してアッセイする方法であって、
(a)ヒトPD−L2へのPD−L2結合性試薬の特異的結合を可能にする条件下、該組織サンプルをPD−L2結合性試薬と接触させ、ここで、該結合性試薬は、請求項1〜4のいずれか1項記載の抗体または抗原結合性フラグメントを含み、
(b)未結合のPD−L2結合性試薬を除去し、
(c)結合したPD−L2結合性物質の存在または非存在を検出することを含む、方法。 - 結合した結合性試薬の量を定量することを更に含む、請求項9記載の方法。
- 結合性試薬が2つの同一重鎖および2つの同一軽鎖を含み、各重鎖が配列番号16およびマウスIgG1定常領域を含み、各軽鎖が配列番号8およびマウスカッパ定常領域を含む、請求項9または請求項10記載の方法。
- 組織サンプルが腫瘍由来である、請求項9〜11のいずれか1項記載の方法。
- 組織サンプルが腫瘍由来であり、患者が膀胱癌、胃癌、頭頸部扁平上皮癌、メラノーマ、非小細胞肺癌、腎細胞癌または三種陰性乳癌と診断されている、請求項9〜12のいずれか1項記載の方法。
- 請求項1〜4のいずれか1項記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントと、ヒトPD−L2に結合した該抗体または抗原結合性フラグメントの複合体を検出するための試薬のセットとを含むキット。
- 該抗体が2つの同一重鎖および2つの同一軽鎖を含み、各重鎖が配列番号16およびマウスIgG1定常領域を含み、各軽鎖が配列番号8およびマウスカッパ定常領域を含む、
請求項14記載のキット。 - (1)腫瘍由来のサンプルがPD−L2発現に関して陽性であるか陰性であるかを判定し、
(2)腫瘍がPD−L2に関して陽性である場合には、PD−1アンタゴニストの治療的有効量を対象に投与することを含む、腫瘍を有する患者の治療方法に用いるための、請求項14または15に記載のキット。 - 前記(1)の方法において、腫瘍組織サンプルがPD−L1発現に関して陽性であるかどうかを判定する工程を更に含み、
そして、サンプルがPD−L1およびPD−L2の両方に関して陽性であると判定された場合には、患者にPD−1アンタゴニストを投与することを含む、請求項16記載のキット。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562221472P | 2015-09-21 | 2015-09-21 | |
US62/221,472 | 2015-09-21 | ||
PCT/US2016/052569 WO2017053250A1 (en) | 2015-09-21 | 2016-09-20 | Antibody that binds to human programmed death ligand 2 (pd-l2) and uses thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018533914A JP2018533914A (ja) | 2018-11-22 |
JP6949009B2 true JP6949009B2 (ja) | 2021-10-13 |
Family
ID=58387062
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018514829A Active JP6949009B2 (ja) | 2015-09-21 | 2016-09-20 | ヒトプログラム死リガンド2(pd−l2)に結合する抗体およびその用途 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10647771B2 (ja) |
EP (1) | EP3352858A4 (ja) |
JP (1) | JP6949009B2 (ja) |
CA (1) | CA2995502A1 (ja) |
WO (1) | WO2017053250A1 (ja) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2437327T3 (es) | 2007-06-18 | 2014-01-10 | Merck Sharp & Dohme B.V. | Anticuerpos para el receptor PD-1 humano de muerte programada |
CN107090042B (zh) * | 2017-04-25 | 2019-03-12 | 福州大学 | 一种人源程序性死亡因子配体hPD-L2单克隆抗体 |
EP3421607A1 (en) * | 2017-06-29 | 2019-01-02 | Fundación Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas Carlos III | Identification and elimination of damaged and/or senescent cells |
CN111344568B (zh) * | 2017-09-12 | 2024-05-28 | 免疫特征私人有限公司 | 预测对免疫疗法的反应 |
EP3694545A4 (en) | 2017-10-11 | 2021-12-01 | Board Of Regents, The University Of Texas System | HUMAN PD-L1 ANTIBODIES AND METHOD OF USING THEM |
JP7350756B2 (ja) * | 2018-02-14 | 2023-09-26 | アバ セラピューティクス アーゲー | 抗ヒトpd-l2抗体 |
JP7390301B2 (ja) * | 2018-03-23 | 2023-12-01 | ボード オブ リージェンツ,ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム | ヒトpd-l2抗体およびその使用方法 |
AU2020237225A1 (en) | 2019-03-12 | 2021-10-14 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for treating cancer |
CA3195231A1 (en) | 2020-09-16 | 2022-03-24 | President And Fellows Of Harvard College | Methods of treating an individual that has failed an anti-pd-1/anti-pd-l1 therapy |
AU2022314735A1 (en) | 2021-07-19 | 2024-02-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combination of checkpoint inhibitors and an oncolytic virus for treating cancer |
AU2023221738A1 (en) | 2022-02-17 | 2024-08-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combinations of checkpoint inhibitors and oncolytic virus for treating cancer |
WO2024161375A1 (en) | 2023-02-04 | 2024-08-08 | Mabtree Biologics Ag | Human anti-pd-l2 antibody and its uses thereof |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1297135B1 (en) | 2000-06-28 | 2013-01-09 | Genetics Institute, LLC | Pd-l2 molecules: novel pd-1 ligands and uses therefor |
AU2003281200A1 (en) | 2002-07-03 | 2004-01-23 | Tasuku Honjo | Immunopotentiating compositions |
SI2342226T1 (sl) * | 2008-09-26 | 2016-11-30 | Dana-Farber Cancer Institute Inc. | Humana protitelesa proti PD-1, PD-L1 in PD-L2 in njihove uporabe |
HUE039209T2 (hu) | 2011-03-31 | 2018-12-28 | Merck Sharp & Dohme | Antitestek stabil formulációi emberi programozott halálreceptor PD-1 ellen és ezzel kapcsolatos kezelések |
CN104936982B (zh) * | 2012-08-03 | 2020-04-24 | 丹娜法伯癌症研究院 | 抗-pd-l1和pd-l2双结合抗体单一试剂及其使用方法 |
AR093984A1 (es) | 2012-12-21 | 2015-07-01 | Merck Sharp & Dohme | Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano |
SG10201701380TA (en) | 2013-03-15 | 2017-04-27 | Genentech Inc | Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions |
WO2015088847A1 (en) | 2013-12-11 | 2015-06-18 | Glaxosmithkline Llc | Treating cancer with a combination of a pd-1 antagonist and a vegfr inhibitor |
EP3102604B1 (en) * | 2014-02-04 | 2020-01-15 | Pfizer Inc | Combination of a pd-1 antagonist and a 4-1bb agonist for treating cancer |
EP3265825A4 (en) * | 2015-03-06 | 2018-08-08 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Pd-l2 biomarkers predictive of pd-1 pathway inhibitor responses in esophagogastric cancers |
-
2016
- 2016-09-20 EP EP16849405.2A patent/EP3352858A4/en active Pending
- 2016-09-20 JP JP2018514829A patent/JP6949009B2/ja active Active
- 2016-09-20 US US15/761,262 patent/US10647771B2/en active Active
- 2016-09-20 WO PCT/US2016/052569 patent/WO2017053250A1/en active Application Filing
- 2016-09-20 CA CA2995502A patent/CA2995502A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2018533914A (ja) | 2018-11-22 |
EP3352858A1 (en) | 2018-08-01 |
EP3352858A4 (en) | 2019-04-17 |
CA2995502A1 (en) | 2017-03-30 |
US20180258171A1 (en) | 2018-09-13 |
WO2017053250A1 (en) | 2017-03-30 |
US10647771B2 (en) | 2020-05-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6949009B2 (ja) | ヒトプログラム死リガンド2(pd−l2)に結合する抗体およびその用途 | |
JP6854322B2 (ja) | ヒトプログラム死リガンド1(pd−l1)に結合する抗体 | |
US20190330350A1 (en) | Anti-pd-l1 monoclonal antibodies and fragments thereof | |
US10626176B2 (en) | Methods of treating conditions with antibodies that bind B7-H4 | |
JP2021061838A (ja) | Ox40アゴニスト治療薬の有効性及び評価を予測するための方法及びバイオマーカー | |
US20160200815A1 (en) | Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof | |
JP2018534927A (ja) | Icos発現を決定する遺伝子シグネチャー | |
JP2018504610A (ja) | T細胞免疫サブセットを検出するためのアッセイ及びその使用の方法 | |
JP2016538832A (ja) | 抗rspo2及び/又はrspo3抗体及びそれらの使用 | |
WO2016179194A1 (en) | Lilra3 and method of using the same | |
KR20230024368A (ko) | 항-tigit 항체 및 pd-1 축 결합 길항제를 사용한 치료 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190919 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200901 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201126 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210209 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210428 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210601 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210805 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210824 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210921 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6949009 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |