JP6753610B2 - N−脱硫酸化グリコサミノグリカンの誘導体、及び薬物としての使用 - Google Patents
N−脱硫酸化グリコサミノグリカンの誘導体、及び薬物としての使用 Download PDFInfo
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Description
a)グリコサミノグリカンのN−硫酸化グルコサミン残基の25%から100%、好ましくは30%から90%、より好ましくは45%から80%をN−脱硫酸化する工程;任意ではあるが、この方法はグリコサミノグリカンの2−O硫酸化残基の50%以下、好ましくは25%以下を2−O−脱硫酸化することを更に含む;得られた生成物は、好ましくは0%から50%のN−アセチル化グルコサミン残基、50%から100%のN−非硫酸化グルコサミン残基を含む;
b)好ましくは過ヨウ素酸酸化により、2N−、3−O−非硫酸化グルコサミン残基の隣接OH/NH2及び2−O−非硫酸化ウロン酸残基(元の鎖に沿って自然に存在する非硫酸化残基だけでなく化学的に脱硫酸化された残基も含む)の隣接ジオールを対応するアルデヒドに変換する工程;2N−、3−O−非硫酸化グルコサミン残基は、25%から100%として存在できる;
c)好ましくは水素化ホウ素ナトリウムにより、前記アルデヒドを、対応するアルコールに還元する工程;
を含む方法によって得ることができる。
以下の実施例に開示する非分画ヘパリン(以下、UFHという)のN−脱硫酸化は、公知の方法(Inoue Y及びNagasawa K、1976、「水又はメタノールを含有するジメチルスルホキシドによるヘパリンの選択的N−脱硫酸化(Selective N-desulfation of heparin with dimethyl sulfoxide containing water or methanol)」、Carbohydr Res 46(1)、87〜95)を修正することによって実行された。N−脱硫酸化度は、13C−NMR(Naggi A.他、2001、「過硫酸化ヘパリンの制御された脱硫酸化による抗因子Xa活性3−O−硫酸化グルコサミンに富む配列の生成(Generation of anti-factor Xa active, 3-O-sulfated glucosamine-rich sequences by controlled desulfation of oversulfated heparins)」、Carbohydr.Res.336、4、283〜290)によって判定した。
Bisio他の以前の研究(Bisio A.他、2007「ヘパラナーゼによる開裂に対するヘパリン種の感受性に関する高性能液体クロマトグラフィー/質量分光研究(High-performance liquid chromatographic/mass spectrometric studies on the susceptibility of heparin specie to cleavage by heparanase)」Sem Thromb hemost 33 488〜495)に基づき、イスラエルハイファ大学のVlodavsky教授のグループによってヘパラナーゼ阻害活性が、Hammond他が記載する方法(Hammond他、2010「動態解析及び阻害剤スクリーニングに適するヘパラナーゼ活性に関する比色分析の開発(Development of a colorimetric assay for heparanase activity suitable for kinetic analysis and inhibitor screening)」Anal Biochem、396、112〜6)に従いin vitroで判定された。端的に言えば、ヘパラナーゼは、ヘパリンの抗トロンビン結合部位に構造的に対応する抗血栓剤である合成五糖類フォンダパリヌクスを開裂することができる。ヘパラナーゼによる加水分解の結果、三糖類と還元性二糖類が得られる。後者は、ヘパラナーゼ活性を評価するために容易に定量化できる。本実施例においては、分析溶液(100μl)は、40mM酢酸ナトリウム緩衝液pH5.0と、100mMフォンダパリヌクス(GlaxoSmithKline)とを含み、阻害剤試料は含む場合と含まない場合がある。分析の最初にヘパラナーゼを最終濃度140pMまで添加した。容器を粘着テープで封止し、37℃で2から24時間培養した。1.69mMの4−[3−(4−ヨードフェニル)−1H−5テトラゾリオ]−l,3−ベンゼンジスルホナート(WST−1,Aspep、オーストラリア メルボルン)の0.1M NaOH溶液100μlの添加によって分析を停止した。容器を粘着テープで再度封止し、60℃で60分間生育させた。吸光度を584nm(Fluostar、BMG、Labtech)で測定した。各容器において、D−ガラクトースを還元糖標準として、同じ緩衝液と体積で2〜100μMの濃度範囲で構築した標準曲線を用意した。IC50値を判定した。上記の比色分析を用いて得られた結果を、放射性硫酸塩で標識した細胞外基質(ECM)を基質として採用する別のテストを用いて検証した。端的に言えば、ECM基質は、培養した角膜内皮細胞によって堆積されるため、組成、生物学的機能、及びバリア性が内皮化基底膜に酷似している。硫酸塩標識ECMの調製とヘパラナーゼ分析のためのその使用についての詳細な情報は、Vlodavsky,I.、細胞生物学における現在のプロトコル(Current Protocols in Cell Biology)、Chapter10:Unit10.4、2001に記載されている。
in vivoでの抗骨髄腫活性を、Yang Y他(Yang Y.他、2007、「シンデカン−1ヘパラン硫酸プロテオグリカンは、骨髄腫治療のため実現可能な目標である(The syndecan-1 heparan sulfate proteoglycan is a viable target for myeloma therapy)」、Blood110:2041〜2048)に記載の手順に実質的に従いテストした。端的に言えば、5から6週齢のCB17scid/scidマウスをArlan(インディアナ州インディアナポリス)又はCharles River Laboratories(米国)から得た。マウスをバーミンガムのアラバマ大学の動物施設に収容して監視した。実験手順及びプロトコルは全て、動物実験委員会の承認を得た。1×106ヘパラナーゼ発現CAG骨髄腫細胞(高発現及び低発現)を各マウスの左脇腹に皮下注射した。腫瘍細胞の注射10日後、Alzet浸透圧ポンプ(Durect Corporation、カリフォルニア州クパチーノ)をマウスの右脇腹に埋め込んだ。ポンプには、テスト化合物(新しいヘパリン誘導体)の溶液又は対照としてのリン酸緩衝液(PBS)が入れてあった。溶液は、14日間連続して供給した。14日後、動物を殺し、皮下腫瘍の湿重量と平均血清Κレベルを分析してログランク検定によって実験群内で比較した(p<0.05が統計的に有意であると考えられる)。
スペクトルを25℃にて、5−mmTCI凍結探針又は10mmBBOプローブを備えるBruker Avance500分光計(ドイツ カールスルーエ)で記録した。スペクトルにおけるピーク面積又は体積の積分は、標準的なBruker TopSpin2.0ソフトウエアを用いて行った。
UFH(4.01g、lot番号G3378)を水(32ml)に溶解し、撹拌下にAmberlite IR120(H+、144ml)で処理した。ろ過した酸溶液をピリジンでpH7とし、次いで減圧下で乾燥するまで濃縮した。得られたピリジニウム塩を、DMSO:H2O(体積で95:5)混合物40mlに溶解し、次いで25℃で48時間撹拌した。40mlの水で希釈した後、溶液を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行った。減圧下での濃縮と凍結乾燥により、G8220(2.7g)、収率=67%w/w、MW=19,100Da、13C−NMRによって判定したN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の74.7%、13C−NMRによって判定した2−O硫酸化ウロン酸=全単糖類の18%、が得られた。
実施例1に記載の手順に従い、UFHの試料(0.25g、ロット番号G3378)を対応するピリジニウム塩に変換し、それをDMSO:MeOH(体積で95:5)の混合物中でN−脱硫酸化した。25℃にて2時間撹拌下に置いた後、反応混合物を実施例1に記載の最終手順に従って処理すると、G8343(0.172g)、収率=69%w/w、MW=18,000Da、13C−NMRによって判定したN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の63.3%、13C−NMRによって判定した2−O硫酸化ウロン酸=全単糖類の19%、が得られた。
UFHの試料(0.25g、ロット番号G3378)から出発して実施例2に記載の手順を踏んだが、N−脱硫酸化反応時間を40分に短縮すると、G8516(0.17g)、収率=68%、13C−NMRによるN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の49.7%、13C−NMRによって判定した2−O硫酸化ウロン酸=全単糖類の17%、が得られた。
UFH(2.5g、ロット番号G3378)を水(20ml)に溶解し、撹拌下にAmberlite IR120(H+,90ml)で処理した。ろ過した酸溶液をピリジンでpH7とし、次いで減圧下で乾燥するまで濃縮した。得られたピリジニウム塩を、DMSO:MeOH(体積で90:10)の混合物25mlに溶解し、次いで25℃で18時間撹拌した。25mlの水で希釈した後、溶液を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行った。減圧下での濃縮と凍結乾燥により、G8147(1.9g)、収率=76%w/w、MW=18,200Da、13C−NMRによるN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の60%、が得られた。
UFH(5g、ロット番号G3378)を水(40ml)に溶解し、撹拌下にAmberlite IR120(H+,90ml)で処理した。ろ過した酸溶液をピリジンでpH7とし、次いで減圧下で乾燥するまで濃縮した。得られたピリジニウム塩を、DMSO:MeOH(体積で95:5)の混合物100mlに溶解し、次いで、25℃で18時間撹拌した。100mlの水で希釈した後、溶液を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行った。減圧下での濃縮と凍結乾燥により、G9416(3.65g)、収率=73%w/w、MW=18,800Da、13C−NMRによるN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の77%、が得られた。
UFH(1g、ロット番号G3378)を水(8ml)に溶解し、撹拌下にAmberlite IR120(H+、90ml)で30分間処理した。ろ過した酸溶液をピリジンでpH7とし、次いで減圧下で乾燥するまで濃縮した。得られたピリジニウム塩を、DMSO:MeOH(体積で95:5)の混合物10mlに溶解し、次いで25℃で16時間撹拌した。10mlの水で希釈した後、溶液を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で3日間、蒸留水に対して透析を行った。減圧下での濃縮と凍結乾燥により、“G8079”(1g)、収率=100%w/w、13C−NMRによるN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の60%、が得られた。
水(7.3ml)に溶解し4℃に冷却した実施例1のG8220の試料(0.25g、74.7%のN−脱硫酸化ヘパリン残基)を、同じ体積の0.2M NaIO4に添加した。pH値を2M NaHCO3(約2.1ml)で6.8に調節し、暗闇で4℃にて撹拌下に0.08Mニトリロ三酢酸(NTA、10ml)を溶液に添加した。2M NaHCO3を添加してpH値を4.0から6.6にし、反応混合物を4℃で8時間、撹拌下に置いた。エチレングリコール(0.73ml)を添加して過剰な過ヨウ素酸塩をクエンチし、1時間後、反応混合物を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対する透析を行って脱塩した。脱塩した溶液をNaBH4(0.164g、3.4mmol)で処理し、25℃で3時間撹拌してから、NaBH4の過剰分をクエンチするためにそのpH値を1N HClで4にし、10分間の撹拌の後、0.1N NaOHで中和した。薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行い、減圧下での濃縮及び凍結乾燥を行った結果、0.202gのG8340、収率=90%w/w、MW=8,400Da、が得られた。全単糖類残基に対するRO(53%)、IdoA2S(35%)、GlcNAc(9%)及びGlcNH2(12%)の割合を13C−NMRによって判定した。
in vitroのヘパラナーゼ阻害:IC50=20ng/ml。
in vivoの抗骨髄腫活性:60mg/Kg/日、14日間:75%腫瘍阻害及び60%血清K阻害。
実施例2のG8343(63.3%がN−脱硫酸化ヘパリン残基を0.171g)から出発して実施例7に記載の手順と同じ手順を踏むと、G8438(91.4mg)、収率=82%、MW=6,800Da、が得られた。RO(38%)、IdoA2S(32%)、GlcNAc(8%)、GlcNH2(4%)の割合を13C−NMRによって判定した。
in vitroのヘパラナーゼ阻害IC50:60ng/ml。
実施例3のG8516(44%がN−脱硫酸化ヘパリン残基を0.171g)から出発して実施例7に記載の手順に従うと、G8588(0.136g)、収率=80%、MW=11,000Daが得られた。GlcNAc(30%)、GlcNH2(13%)、IdoA2S(34%)、RO(37%)の割合を13C−NMRによって判定した。
実施例5のG9416から出発して実施例7に記載の手順に従うと、G9578、収率=89%、MW=6,300Da、13C−NMRによるN−脱硫酸化度=全グルコサミン残基の48%、が得られた。グリコサミノグリカンの全残基に対するRO(45%)及びIdoA2S(35%)の割合を、13C−NMRによって判定した。本発明の生成物に対するin vitro及びin vivo試験では、以下の結果が得られた:
in vitroのヘパラナーゼ阻害:IC50=75ng/ml;
in vivoの抗骨髄腫活性(60mg/kg/日、14日間):63%腫瘍阻害。
水(7.3ml)に溶解し4℃に冷却した実施例4のN−脱硫酸化ヘパリンG8147の試料(0.25g、60%のN−脱硫酸化ヘパリン残基)を、同じ体積の0.2M NaIO4に添加した。暗闇で4℃にて16時間、撹拌下にpH値を2M NaHCO3(約2.1ml)で6.8に調節した。エチレングリコール(0.73ml)を添加して過剰な過ヨウ素酸塩をクエンチし、1時間後、反応混合物を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対する透析を行って脱塩した。脱塩した溶液をNaBH4(0.164g、3.4mmol)で処理し、3時間25℃で撹拌し、次いで、NaBH4の過剰分をクエンチするためにそのpH値を1N HClで4にし、10分間の撹拌の後、0.1N NaOHで中和した。薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行い、減圧下での濃縮及び凍結乾燥を行った結果、0.168gのG8188、収率=67%w/w,MW=3,460Da、が得られた。RO(43%)、IdoA2S(40%)、GlcNAc(6%)及びGlcNH2(4%)の割合を13C−NMRによって判定した。
水(7.3ml)に溶解し4℃に冷却したG8147の試料(0.25g、60%のN−脱硫酸化ヘパリン残基)を、同じ体積の0.2M NaIO4に添加した。暗闇で4℃にて16時間、撹拌下にpH値をピリジン(5%v/v、約730μl)で6.8に調節した。エチレングリコール(0.73ml)を添加して過剰の過ヨウ素酸塩をクエンチし、1時間後、反応混合物を4℃で16時間、薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで蒸留水に対する透析を行って脱塩した。脱塩した溶液をNaBH4(0.164g、3.4mmol)で処理し、3時間25℃で撹拌し、次いで、NaBH4の過剰分をクエンチするためにそのpH値を1N HClで4にし、10分間の撹拌の後、0.1N NaOHで中和した。薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行い、減圧下での濃縮及び凍結乾燥を行った結果、0.181gのG8189、収率=72%w/w、MW=5,150Daが得られた。RO(49%)、IdoA2S(39%)、GlcNAc(7%)及びGlcNH2(7%)の割合を13C−NMRによって判定した。
水(7.3ml)に溶解し4℃に冷却したG8147の試料(0.25g、60%のN−脱硫酸化ヘパリン残基)を、同じ体積の0.2M NaIO4に添加した。2M NaHCO3(約2.1ml)でpH値を6.8に調節し、30mlのMnCl20.05M(溶液の最終濃度は0.00001M)を暗闇で4℃にて16時間、撹拌下に添加した。エチレングリコール(0.73ml)を添加して過剰の過ヨウ素酸塩をクエンチした。夜間にpHが8になったため、試料は沈殿し、次いで、そのpH値を1N HClで6にした。1時間後、反応混合物を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対する透析を行って脱塩した。脱塩した溶液をNaBH4(0.164g、3.4mmol)で処理し、3時間25℃で撹拌し、次いで、NaBH4の過剰分をクエンチするためにそのpH値を1N HClで4にし、10分間の撹拌後、0.1N NaOHで中和した。薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行い、減圧下での濃縮及び凍結乾燥を行った結果、0.230のG8217、収率=92%w/w、MW=7,455Da、が得られた。全グリコサミノグリカン残基に対するRO(31%)、IdoA2S(29%)、GlcNAc(8%)及びGlcNH2(6%)の割合を13C−NMRによって判定した。
水(7.3ml)に溶解し4℃に冷却したG8147の試料(0.25g、60%のN−脱硫酸化ヘパリン残基)を同じ体積の0.2M NaIO4に添加した。2M NaHCO3(約1.2ml)でpH値を6.8に調節し、撹拌下に暗闇で、4℃にて0.08Mニトリロ三酢酸(NTA,10ml)とMnCl20.05M31mlとを溶液に添加した。2M NaHCO3を添加してpH値を4.0から6.3にし、反応混合物を4℃で8時間、撹拌下に置いた。エチレングリコール(0.73ml)を添加して過剰な過ヨウ素酸塩をクエンチし、1時間後、反応混合物を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対する透析を行って脱塩した。透析した溶液をNaBH4(0.164g、3.4mmol)で処理し、3時間25℃で撹拌し、次いで、NaBH4の過剰分をクエンチするためにそのpH値を1N HClで4にし、10分間の撹拌後、0.1N NaOHで中和した。薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対して透析を行い、減圧下での濃縮及び凍結乾燥を行った結果、0.202gのG8219、収率=90%w/w、MW=7,330Da、が得られた。RO(54%)、IdoA2S(36%)、GlcNAc(9%)及びGlcNH2(8%)の割合を13C−NMRによって判定した。
水(29.2ml)に溶解し4℃に冷却したG8079の試料(1g、N−脱硫酸化ヘパリン)に、同じ体積のNaIO4(pH5)を添加し、反応混合物を4℃で8時間撹拌下に置いた。エチレングリコール(2.9ml)を添加して過剰の過ヨウ素酸塩をクエンチし、1時間後、反応混合物を薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で16時間、蒸留水に対する透析を行って脱塩した。透析した溶液をNaBH4(0.657g、3.4mmol)で処理し、3時間25℃で撹拌し、次いで、NaBH4の過剰分をクエンチするためにそのpH値を1N HClで4にし、10分間の撹拌後、0.1N NaOHで中和した。薄膜(カットオフ:3,500Da)に包んで4℃で72時間、蒸留水に対して透析を行い、減圧下での濃縮及び凍結乾燥を行った結果、0.643gのG8092、収率=64%w/w、MW=6,064Da、が得られた。13C−NMR分析では、N−脱硫酸化グルコサミンの95ppmにピークを示す。酸性のpHでの酸化反応は起こらない。
[第1の局面]
ヘパラナーゼを阻害するグリコサミノグリカン誘導体を調製する方法であって:
a)グリコサミノグリカンのN−硫酸化残基の25%から100%をN−脱硫酸化する工程;
b)5.5から10.0のpHで好ましくは過ヨウ素酸塩により、隣接ジオール及び隣接OH/NH 2 をアルデヒドに変換するのに効果的な条件下で、前記グリコサミノグリカンの2−N−、3−O−非硫酸化グルコサミン残基及び2−O−非硫酸化ウロン酸残基の25%から100%を酸化する工程;及び
c)好ましくは水素化ホウ素ナトリウムにより、前記アルデヒドをアルコールに変換するのに効果的な条件下で、前記酸化されたグリコサミノグリカンを還元する工程;を含む、
グリコサミノグリカン誘導体を調製する方法。
[第2の局面]
d)N−脱硫酸化の前又は後に、前記グリコサミノグリカンの2−O−硫酸化残基の50%以下、好ましくは25%以下を2−O−脱硫酸化する工程;を更に含む、
第1の局面に記載の方法。
[第3の局面]
e)N−脱硫酸化の前又は後に、前記グリコサミノグリカンのN−アセチル化された残基を部分的又は完全に脱アセチル化する工程;を更に含む、
第1の局面または第2の局面に記載の方法。
[第4の局面]
前記グリコサミノグリカンが、天然又は合成のグリコサミノグリカンであって、
好ましくは、前記天然又は合成のグリコサミノグリカンが、ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヘパラン硫酸又はそれらの画分であり、
より好ましくは、前記天然又は合成のグリコサミノグリカンが、分子量3,500から8,000Daの非分画ヘパリン又はヘパリンである、
第1の局面〜第3の局面のいずれかに記載の方法。
[第5の局面]
グリコサミノグリカンの非硫酸化グルコサミン残基のC 2 −C 3 結合を開裂する方法であって、
前記グリコサミノグリカンを、好ましくは過ヨウ素酸塩により5.5から10.0のpHで、より好ましくは6.0から9.0のpHで、酸化する工程;を含む、
C 2 −C 3 結合を開裂する方法。
[第6の局面]
第1の局面〜第4の局面のいずれかに記載の方法によって得ることができる、
グリコサミノグリカンの誘導体化合物。
[第7の局面]
分子量が、3,000から20,000Da、好ましくは3,500から12,000Daである、
第6の局面に記載の誘導体化合物。
[第8の局面]
第6の局面または第7の局面のグリコサミノグリカンの誘導体化合物の酵素的又は化学的部分解重合により得ることができる、
オリゴ糖化合物。
[第9の局面]
薬剤として用いる、
第6の局面〜第8の局面のいずれかに記載の化合物。
[第10の局面]
抗転移、抗腫瘍薬、好ましくは抗骨髄腫薬として用いる、
第9の局面に記載の化合物。
Claims (23)
- グリコサミノグリカン誘導体を製造する方法であって:
a)グリコサミノグリカンのN−硫酸化残基の25%から100%をN−脱硫酸化する工程;
b)5.5から10.0のpHで過ヨウ素酸塩により、隣接ジオール及び隣接OH/NH2をアルデヒドに変換するのに効果的な条件下で、前記グリコサミノグリカンの2−N−、3−O−非硫酸化グルコサミン残基の25%から100%及び2−O−非硫酸化ウロン酸残基を酸化する工程;及び
c)水素化ホウ素ナトリウムにより、前記アルデヒドをアルコールに変換するのに効果的な条件下で、前記酸化されたグリコサミノグリカンを還元する工程;を含み、
前記グリコサミノグリカンが、天然又は合成のグリコサミノグリカンであり、
前記天然又は合成のグリコサミノグリカンが、ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヘパラン硫酸、又は、それらの画分であり、
前記グリコサミノグリカン誘導体は、ヘパラナーゼを阻害する、
グリコサミノグリカン誘導体を製造する方法。 - d)N−脱硫酸化の前又は後に、前記グリコサミノグリカンの2−O−硫酸化残基の50%以下を2−O−脱硫酸化する工程;を更に含む、
請求項1に記載の方法。 - 前記d)は、前記グリコサミノグリカンの2−O−硫酸化残基の25%以下を2−O−脱硫酸化する、
請求項2に記載の方法。 - e)N−脱硫酸化の前又は後に、前記グリコサミノグリカンのN−アセチル化された残基を部分的又は完全に脱アセチル化する工程;を更に含む、
請求項1〜請求項3のいずれか1項に記載の方法。 - 前記天然又は合成のグリコサミノグリカンが、非分画ヘパリン又は分子量3,500から8,000Daのヘパリンである、
請求項1〜請求項4のいずれか1項に記載の方法。
に記載の方法。 - 前記グリコサミノグリカン誘導体は、3,000から20,000Daの分子量を有する、
請求項1〜請求項5のいずれか1項に記載の方法。 - 前記グリコサミノグリカン誘導体は、3,500から12,000Daの分子量を有する、
請求項1〜請求項6のいずれか1項に記載の方法。 - 請求項1〜請求項7のいずれか1項の前記グリコサミノグリカン誘導体の酵素的又は化学的部分解重合を行う、
オリゴ糖化合物を製造する方法。 - 前記グリコサミノグリカン誘導体、及び、前記オリゴ糖化合物は、薬剤として用いる、
請求項1〜請求項8のいずれか1項に記載の方法。 - 前記薬剤は、抗転移薬又は抗腫瘍薬である、
請求項9に記載の方法。 - 前記抗腫瘍薬は、抗骨髄腫薬である、
請求項10に記載の方法。 - 前記誘導体は、(a)3,000〜20,000Daから選択される分子量、又は、(b)3,500〜12,000Daから選択される分子量を有する、
請求項12または請求項13に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体。 - 前記天然又は合成のグリコサミノグリカンは、非分画ヘパリン又は3500〜8000Daの分子量を有するヘパリンである、
請求項12〜請求項14のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体。 - 隣接ジオール及びOH/NH2が対応するアルデヒドに変換され、次いで対応するアルコールに変換されたグリコール分割残基(RO)の全グリコサミノグリカン残基に対する%(百分率)は、31%〜54%である、
請求項12〜請求項15のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体。 - 2−O−硫酸化L−イズロン酸(IdoA2S)の全グリコサミノグリカン残基に対する%(百分率)は、29%〜40%である、
請求項12〜請求項16のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体。 - N−アセチル−D−グルコサミン(GlcNAc)の全グリコサミノグリカン残基に対する%(百分率)は、6%〜30%である、
請求項12〜請求項17のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体。 - 2−NH2グルコサミン(GlcNH2)の全グリコサミノグリカン残基に対する%(百分率)は、4%〜13%である、
請求項12〜請求項18のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体。 - ヘパラナーゼの阻害から恩恵を得る適応症の治療において使用する、
請求項12〜請求項19のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体に記載のオリゴ糖化合物。 - 抗転移薬又は抗腫瘍薬として使用する、
請求項12〜請求項19のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体に記載のオリゴ糖化合物。 - 抗骨髄腫薬として使用する、
請求項12〜請求項19のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体に記載のオリゴ糖化合物。 - 請求項12〜請求項19のいずれか1項に記載のN−脱硫酸化グリコサミノグリカン誘導体に記載のオリゴ糖化合物を含む、
医薬組成物。
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