JP6739061B2 - 画像生成装置、画像生成方法及びプログラム - Google Patents
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Description
実施の形態1に係る画像生成装置を含む画像生成システムは、イメージセンサ上に位置する対象物に複数の照明器が順に照明し、照明する毎に対象物を撮影することで得られた複数の撮影画像を用いて、複数の照明器とイメージセンサとの間に位置する仮想的な焦点面における対象物の画像を生成する。なお、この複数の撮影画像を用いて生成された画像を合焦画像又はリフォーカシング画像とも呼び、撮影画像を用いて仮想的な焦点面における対象物の画像を生成することをリフォーカス処理とも呼ぶ。リフォーカス処理では、撮影画素を用いて仮想的な焦点面における画素が求められてもよい。画像生成システムは、複数の仮想的な焦点面における合焦画像を生成し、生成した複数の合焦画像を用いて、対象物の3次元モデル(3Dモデル)を生成する。さらに、画像生成システムは、3Dモデルに含まれる複数の合焦画像を用いて、3Dモデルにおける任意の断面画像を生成する。
[1−1−1.画像生成システムの全体構成]
図1は、実施の形態1に係る画像生成システム10の機能ブロック図である。図1に示される画像生成システム10は、撮影装置100と、画像生成装置200と、記憶部120と、表示部150とを備える。画像生成システム10は、さらに、予め定められた焦点面及び撮影対象物の形状等の情報を記憶している第1記録部121と、リフォーカス処理済みの画素の情報を記録する第2記録部122と、焦点面を指定する指定情報の入力を受け付ける焦点面入力部130と、表示部150に表示される表示物に与えられる動作指令の入力を受け付けるCG操作入力部140とを備えてもよい。表示部150は、ディスプレイによって実現され、画像操作部260、断面画像生成部270によって生成される画像等を表示する。焦点面入力部130及びCG操作入力部140は、コンピュータ装置などのキーボード、マウス、タッチパッド等の種々の入力装置によって実現されてもよく、表示部150を構成するタッチスクリーン等の画面を介した入力装置によって実現されてもよい。
まず、撮影装置100の構成について説明する。撮影装置100は、複数の照明器101と、イメージセンサ102と、撮影制御部103とを備える。撮影装置100は、対象物の撮影画像(photographic image)を取得する。ここでは、撮影装置100は、フォーカスレンズを有さない。
次に、画像生成装置200の構成について説明する。画像生成装置200は、制御回路によって実現される。図1に示すように、画像生成装置200は、焦点面決定部210と、リフォーカス処理部220と、合焦画像生成部230と、対象物抽出部240と、3D画像生成部250と、画像操作部260と、断面画像生成部270とを備える。
[1−2−1.画像生成システムのリフォーカス処理の概略動作]
次に、以上のように構成された画像生成システム10によるリフォーカス処理の概略動作つまり合焦画像の生成の概略動作について説明する。図7は、実施の形態1に係る画像生成システム10の合焦画像の生成動作の一例を示すフローチャートである。図8は、座標と焦点面との関係の一例を示す模式図である。
まず、撮影装置100の撮影制御部103は、複数の照明器101を順に用いて対象物を照明し、当該対象物の複数の画像を撮影する。具体的には、撮影制御部103は、複数の照明器101のそれぞれが対象物を照明するたびに、イメージセンサ102の受光面の各画素に到達した光の強度を記録することにより、対象物の画像を取得する。取得された画像は、撮影時に対象物を照明していた照明器の位置情報とともに記憶部120で記憶される。ここでは、複数の照明器101の位置は、イメージセンサ102に対して固定されており、複数の照明器101の各々の位置情報は予め定められている。撮影処理の詳細は後述する。
画像生成装置200の焦点面決定部210は、焦点面を決定する。具体的には、焦点面決定部210は、イメージセンサ102に対する焦点面の位置及び傾き(角度)を決定する。例えば、焦点面決定部210は、第1記録部121に記憶される予め定められた焦点面の情報に基づいて焦点面を決定してもよい。または、焦点面決定部210は、焦点面入力部130によりユーザから受け付けられた、焦点面を指定する指定情報に基づいて、焦点面を決定してもよい。焦点面は、合焦画像が生成される仮想的な面に相当する。つまり、焦点面における対象物の合焦画像に含まれる複数の画素は、焦点面上の複数の点に一対一で対応する。例えば、焦点面決定部210は、焦点面の角度及び位置を用いて焦点面を決定する。焦点面の角度及び位置は、例えば図8に示すxyz空間によって定義される。
リフォーカス処理部220は、複数の撮影画像と、複数の照明器101の位置情報と、焦点面の情報とに基づいて、リフォーカス処理を行い、焦点面上の各画素つまり各点の輝度を求める。リフォーカス処理の詳細は後述する。
合焦画像生成部230は、ステップS1300で行われたリフォーカス処理の結果に基づきディスプレイ等に出力可能な画像データとしての焦点面の合焦画像を生成する。
ここでステップS1100の撮影装置100の動作、具体的には撮影制御部103の動作の詳細を説明する。図9は、撮影装置100の動作の一例を示すフローチャートである。
撮影制御部103は、予め定められた複数の照明位置、または図示しない外部入力によって指定された複数の照明位置のリスト(以下、照明位置リストという)を参照して、各照明位置から照明された対象物の撮影が終了したか否かを判定する。複数の照明器101と照明位置リストに含まれる複数の照明位置は1対1に対応する。
撮影制御部103は、照明位置リストに含まれる複数の照明位置の中から、まだ照明が行われていない照明位置を選択し、複数の照明器101へ制御信号を出力する。なお、撮影制御部103は、まだ照明が行われていない照明位置が複数存在する場合は、一つの照明位置を選択する。照明位置リストにおいて、各照明位置は、例えば、照明位置ごとに割り当てられた番号によって示される。あるいは、各照明位置は、例えば、図8に示すxyz空間における座標値によって示される。照明位置の選択は、例えば、リストの昇順に行われる。
複数の照明器101は、ステップS1120で撮影制御部103より出力された制御信号に従って、対象物への照明を開始する。つまり、ステップS1120で選択された照明位置にある照明器が光の照射を開始する。
照明器によって対象物が照明されている間に、イメージセンサ102は、当該照明器から対象物を透過した光によって形成される画像を取得する。
その後、撮影制御部103は、複数の照明器101へ制御信号を出力して、対象物への照明を停止する。なお、照明の停止は、撮影制御部103からの制御信号に従って行われなくてもよい。例えば、複数の照明器101は、照明を開始してからの時間長を計時して、計時した時間長が予め定められた時間長を超えたら照明を能動的に停止してもよい。あるいはステップS1140でイメージセンサ102が画像の取得を終了した後に、イメージセンサ102は、照明を停止するための制御信号を複数の照明器101に出力してもよい。
次いで、撮影制御部103は、ステップS1140で取得された画像と、ステップS1130で用いられた照明器の位置情報とを記憶部120へ出力する。そして、記憶部120は、画像データと照明位置の情報とを対応付けて記憶する。ステップS1160の後、ステップS1110へ戻る。
さらに、ステップS1300のリフォーカス処理部220の動作の詳細を説明する。図10は、実施の形態1に係るリフォーカス処理部220の動作の一例を示すフローチャートである。図11〜図15は、リフォーカス処理の計算方法の具体例を説明する模式図である。
リフォーカス処理部220は、ステップS1200で決定された焦点面の情報を焦点面決定部210から取得する。
リフォーカス処理部220は、合焦画像に含まれる全画素についてリフォーカス処理が終了したか否かを判定する。ここでは、リフォーカス処理とは、ステップS1320からステップS1390までの処理を意味する。
リフォーカス処理部220は、合焦画像に含まれる複数の画素の中から1つの画素を選択する。ここで選択される1つの画素は、合焦画像に含まれる複数の画素のうち、リフォーカス処理がまだ実行されていない画素である。なお、合焦画像の画素値の初期値は0である。
リフォーカス処理部220は、すべての照明位置に対する加算処理が終了しているか否かを判定する。
リフォーカス処理部220は、撮影に用いたすべての照明位置の中からまだ加算処理が終了していない照明位置を選択する。
リフォーカス処理部220は、選択された照明位置と焦点面における選択画素の位置とを通る直線が、イメージセンサ102の受光面と交差する点の位置を計算する。
リフォーカス処理部220は、選択された照明位置に対応する画像を記憶部120から取得する。つまり、リフォーカス処理部220は、選択された照明位置にある照明器を用いて撮影された画像を記憶部120から取得する。具体的には、リフォーカス処理部220は、図6に示した照明位置情報と画像との対応関係に従って、記憶部120に記憶された画像を取得する。例えば、リフォーカス処理部220は、図13に示す照明器101aの位置に対応する画像を取得する。
リフォーカス処理部220は、ステップS1360で計算されたイメージセンサ102上の対象点の撮影画像中の位置を決定する。具体的には、リフォーカス処理部220は、撮影画像の画素の配列を基準に撮影画像における対象点の位置を決定する。
リフォーカス処理部220は、合焦画像上の選択画素の輝度値にステップS1380で計算した対象点の輝度値を加算する。
次に、以上のように構成された画像生成システム10の動作について、図16を参照しつつ、詳細に説明する。図16は、実施の形態1に係る画像生成システム10の動作の一例を示すフローチャートである。なお、以下では、撮影する対象物として、図17に示すような脊椎動物の半透明な受精卵の初期胚である胚Sを適用した場合の例を説明する。図17は、対象物の一例の胚Sの斜視図を示す。図17では、球形状の胚Sは、2つに分割した球形状の細胞S1及びS2を含んでいる。
まず、撮影装置100の撮影制御部103は、複数の照明器101を順に用いて、イメージセンサ102の受光面上に配置された半透明な胚Sを照明し、当該胚Sの複数の画像を撮影する。本実施の形態では、複数の照明器101の位置は、イメージセンサ102に対して固定されており、複数の照明器101の各々の位置情報は予め定められている。撮影制御部103は、複数の照明器101のそれぞれが胚Sを照明するたびに、イメージセンサ102の受光面の各画素に到達した光の強度を記録することにより、胚Sの画像を取得する。取得された画像は、撮影時に胚Sを照明していた照明器の位置情報とともに記憶部120で記憶される。
画像生成装置200の焦点面決定部210は、基準として用いるための焦点面である複数の基準焦点面を決定する。本例では、イメージセンサ102の受光面に略平行であり且つ互いに間隔をあけて配置される複数の基準焦点面が、決定される。具体的には、約100μmの直径を有する胚Sに対して、約1μmの間隔で受光面と平行に配置される複数の基準焦点面が、決定される。複数の基準焦点面は、受光面から約110μmの距離に至る領域にわたって配置される。これにより、複数の基準焦点面が存在する領域の中に胚Sの全てが含まれる。そして、複数の基準焦点面の多くが、胚Sと交差する。なお、上記の具体的な数値は、一例であり、これらによって各要素の数値は限定されない。
リフォーカス処理部220は、複数の撮影画像と、複数の照明器101の位置情報と、基準焦点面の情報とに基づいて、リフォーカス処理を行い、各基準焦点面上の各画素つまり各点の輝度値を求める。
合焦画像生成部230は、ステップS2300で行われたリフォーカス処理の結果に基づき、ディスプレイ等に出力可能である複数の基準焦点面の合焦画像である基準合焦画像を生成する。なお、基準焦点面は、合焦画像が形成される面であるため、合焦画像平面又はリフォーカシング画像平面とも呼ぶ。図18において、胚Sの複数の基準焦点面FPの基準合焦画像Iaが、例示される。図18は、複数の基準焦点面FPの基準合焦画像Iaをその配置順序に従って一列に積み重ねて示す模式図である。図18では、複数の基準合焦画像Iaの一部が示されている。また、一列に並ぶ基準合焦画像Iaを表示部150の表示画面151に画像として表示した例が、図19に示される。図19は、基準合焦画像Iaを画像として表示した例の写真を示す図であるが、胚Sに4つの細胞が含まれる例を示す。各基準焦点面FPの基準合焦画像Iaでは、胚Sを通った光を受光する画素の領域、つまり胚Sの像が映し出される写出領域Mが、形成される。
対象物抽出部240は、図20に示すように、各基準焦点面FPの基準合焦画像Iaにおいて、胚Sの像が写し出されている写出領域Mの輪郭を特定し、この輪郭の外側にある背景を基準合焦画像Iaから除去した背景除去合焦画像Ibを生成する。輪郭の特定は、例えば以下のように行ってもよい。対象物抽出部240は、ハフ変換(Hough変換)を利用して画像から円を検出し、検出された円のうち、最も半径の大きいものを輪郭としてもよい。あるいは対象物抽出部240は、対象物である胚の大きさ例えば直径100μmを基準として、検出された円のうち直径の大きさが、最も基準に近い円を輪郭としてもよい。胚Sの輪郭の特定の一例を説明する。胚Sの形状の一例は、約100μmの半径を有する球である。対象物抽出部240は、胚Sのエッジ点を抽出するために、画像Iaにラプラシアンフィルタをかける。対象物抽出部240は、フィルタリング結果を用いて、画像Iaに含まれる複数の画素を分類する。例えば、対象物抽出部240は、入力画像(ここでは画像Ia)の輝度分布に基づいて、閾値を設定する。閾値の例は、輝度のヒストグラムを用いて、低輝度の画素が全画素数の25%になる境界点である。対象物抽出部240は、閾値以下の輝度を有する画素をエッジ点として抽出する。対象物抽出部240は、抽出したエッジ点に対して、ハフ変換(Hough transform)を行って、円を抽出する。例えば、80μmから120μmの範囲の半径を有する円を抽出することで、胚Sに対応する円を抽出する。ハフ変換により、円の中心と半径が導出されるため、画像Ia上に輪郭としての円を特定することができる。なお、図20は、複数の背景除去合焦画像Ibをそれぞれに対応する基準焦点面FPの配置順序に従って一列に積み重ねて示す、図18と同様の模式図である。また、一列に積み重ねられて並ぶ背景除去合焦画像Ibを表示部150の表示画面151に画像として表示した例が、図21に示される。図21は、背景除去合焦画像Ibを画像として表示した例の写真を示す図であるが、胚Sに4つの細胞が含まれる例を示す。
図22に示すように、3D画像生成部250は、複数の背景除去合焦画像Ibのうちから、胚Sの写出領域Mが最も強いコントラストの輪郭を含む輪郭基準合焦画像Ibaを抽出する。3D画像生成部250は、以下のように、第1輪郭基準合焦画像Iba1及び第2輪郭基準合焦画像Iba2のいずれが強いコントラストの輪郭を有するか否かを判定しても良い。例えば、第1輪郭基準合焦画像Iba1に含まれる輪郭と判断された画素がa1個ある。3D画像生成部250は、輪郭と判断された画素ごとに、複数の隣接する画素との輝度差の最大値を求める。この最大値の合計をA1とする。例えば、第2輪郭基準合焦画像Iba2に含まれる輪郭と判断された画素がa2個ある。3D画像生成部250は、輪郭と判断された画素ごとに、複数の隣接する画素との輝度差の最大値を求める。この最大値の合計をA2とする。3D画像生成部250は、{(A1)/(a1)}>{(A2)/(a2)}であれば、第1輪郭基準合焦画像Iba1が、第2輪郭基準合焦画像Iba2より強いコントラストの輪郭を含むと判断する。
3D画像生成部250は、輪郭基準合焦画像Ibaから抽出された2次元的な輪郭の形状と、第1記録部121に記憶される胚Sの形状とから、胚Sの立体的な輪郭つまり3次元的な輪郭を特定する。例えば、第1記録部121は「胚Sの形状は球形である」ことを記憶している。具体的には、図22及び図23に示すように、3D画像生成部250は、輪郭基準合焦画像Iba内の写出領域Mの円形状の輪郭Maと、第1記録部121に記憶される胚Sの形状は球形であることから、胚Sの3次元的な輪郭Scを、輪郭Maの半径を半径とする球形であると特定する。図23は、胚Sの3次元的な輪郭の一例を示す模式図である。
3D画像生成部250は、複数の背景除去合焦画像Ibと胚Sの3次元的な輪郭Scとを関連付け、複数の背景除去合焦画像Ibそれぞれから3次元的な輪郭Scの外部に相当する領域を除去して基準断面画像Icを生成する。基準断面画像Icは、ステップS2200で決定された複数の基準焦点面FPでの胚Sの断面画像に相当する。
3D画像生成部250は、胚Sの3次元的な輪郭Sc及び複数の基準断面画像Icを用いて、胚Sの3次元モデルである3DモデルAを、ディスプレイ等に出力可能な画像データとして生成する。3DモデルAは、胚Sの球形輪郭Sc及び複数の基準断面画像Icに関する情報を含み、基準断面画像Icをその断面画像として含む。3DモデルAは、表示部150の表示画面151に画像として表示される場合、図25の状態Aと同様となる。
画像操作部260は、3D画像生成部250が生成した胚Sの3DモデルAを動作可能に表示部150に表示する。画像操作部260は、CG操作入力部140に入力される指令に基づき、表示部150上の胚Sの3DモデルAを移動する。画像操作部260は、CG操作入力部140を介して胚Sにおける種々の位置の断面の選択を受け付ける。さらに、画像操作部260は、選択された断面の簡易画像としての参考断面画像Biを胚Sの3DモデルA上、又は3DモデルAと別に表示し得る。
画像生成装置200の画像操作部260は、胚Sの3DモデルAを、3DモデルAの基準軸Cの回動、断面Bのスライド等の動作を可能に、表示部150に表示する。
画像操作部260は、図26A〜図26Cに示すように、CG操作入力部140を介して入力される指令に従い、表示部150の表示画面151上の胚Sの3DモデルAの基準軸Cを回動させる、又は断面Bをスライドさせ、それにより、3DモデルAの種々の参考断面画像Biを表示する。そして、表示されている断面Bの位置が所望の位置となる、又は表示されている参考断面画像Biが所望の断面である場合、つまり、表示画面151で所望の断面又はその位置が示されている場合、ユーザが、CG操作入力部140を介して、当該断面の詳細を表示する指令を与える(ステップS4200でyes)。これにより、詳細に表示すべき胚Sの断面の位置も決定される。このとき、CG操作入力部140での入力により、表示画面151上のリフォーカスアイコン157が選択され実行される。この結果、断面画像生成部270は、表示すべき胚Sの断面を生成するために、ステップS4300に進む。一方、リフォーカスアイコン157が実行されない、胚Sの断面を詳細に表示する指令が発せられない場合(ステップS4200でnо)、画像操作部260は、ステップS4100の動作を実施する。
断面画像生成部270は、決定された断面の位置と、複数の基準断面画像Icに含まれる情報とを用いて、決定された断面の詳細な画像を生成する。具体的には、断面画像生成部270は、リフォーカス処理により、決定された断面を焦点面とする合焦画像を生成する。つまり、断面画像生成部270は、決定された断面において、基準断面画像Icの基準焦点面FPと重なる又は交差する部分の画素の輝度値に、当該基準断面画像Icの画素の輝度値をそのまま適用する。断面画像生成部270は、決定された断面において、基準断面画像Icの基準焦点面FPと重なりも交差もしない領域内の画素である補間画素の輝度値を、この補間画素の近傍に位置する基準焦点面FPの基準断面画像Icの画素の輝度値を使用して、算出する。そして、断面画像生成部270は、基準断面画像Icの画素の輝度値と、補間画素の輝度値とを用いて、決定された胚Sの断面の合焦画像である詳細な断面画像をディスプレイ等に出力可能な画像データとして生成し、表示画面151に表示する。
以上のように、本実施の形態に係る画像生成装置200によれば、対象物である胚Sを通る複数の基準焦点面についての複数の基準合焦画像を生成し、生成した基準合焦画像を使用して胚Sの3次元画像の生成が可能である。胚Sを通る複数の基準焦点面についての基準合焦画像を用いることによって、胚Sが半透明又は透明であっても、胚Sの3次元画像はその内部に含む細胞等の要素も含めて立体的に表示され得る。また、胚Sの全ての領域において、合焦画像を生成するのではなく、複数の基準焦点面について合焦画像を生成するため、胚Sの3次元画像の生成に要する処理量の低減も可能である。
次に、実施の形態2について説明する。実施の形態2では、画像生成システムが、表示部150の表示画面151に、胚Sの3DモデルAに先行して、胚Sの代表的な断面画像である最適断面画像を表示する点が、実施の形態1と異なる。以下に、実施の形態2について、実施の形態1と異なる点を中心に説明する。
図31を参照すると、実施の形態2に係る画像生成システム10Aの機能的な構成の一例を示すブロック図が示されている。本実施の形態では、撮影装置100の複数の照明器101は、平坦な面上で格子状に配列されて設置されている。画像生成装置200Aは、実施の形態1の画像生成システム10の画像生成装置200に対して、最適断面決定部280及び最適断面画像生成部290をさらに備えている。第1記録部121は、予め定められた焦点面及び撮影対象物である胚Sの形状等の情報に加え、胚Sの初期胚モデルを予め記憶している。画像生成システム10Aは、表示部150に表示すべき胚Sのモデルを第1記録部121の初期胚モデルから選択する指令の入力を受け付ける胚モデル入力部160を、備えている。
以上のように構成された画像生成システム10Aによる表示部150への最適断面画像の表示動作について説明する。図34は、実施の形態2に係る画像生成システム10Aの最適断面画像の表示動作の一例を示すフローチャートである。なお、以下では、胚Sが、図17に示すような2つの細胞S1及びS2を含む場合について説明する。
画像生成システム10Aの画像生成装置200Aの最適断面決定部280は、表示部150に、第1記録部121に記憶されている胚Sの胚モデルを表示する。
画像生成システム10Aのユーザは、図32に示されるような表示部150に示される胚Sの胚モデルのテーブルを参照し、胚モデル入力部160による入力を介して、表示部150に最適断面画像を表示すべき胚のモデルIDを選択する。このとき、ユーザは、例えば、照明器101による撮影時の胚の培養時間等と、胚モデルのテーブルに示される培養時間とを比較することによって、撮影時に対応する胚のモデルを選定してもよい。
最適断面決定部280は、選択された胚モデルに含まれる細胞の数と、図33に示されるような第1記録部121に記憶されている最適断面設定テーブルとに基づき、最適断面つまり最適焦点面の要素を決定する。具体的には、最適断面決定部280は、最適焦点面の数と、最適焦点面での断面画像に含まれ得る最大細胞数とを、決定する。
次いで、最適断面決定部280は、胚Sにおける最適焦点面の位置を算出する。このとき、最適断面決定部280は、記憶部120から、複数の照明器101の位置情報と対応付けられた複数の撮影画像を取得する。さらに、最適断面決定部280は、図35に示されるように、平坦面上に格子状に並んで配置された複数の照明器101のうちの直線上に並ぶ照明器101による照明器群Gを選定する。そして、最適断面決定部280は、取得した撮影画像の中から、照明器群Gの照明器101それぞれの照明時に撮影された撮影画像を選定し、これらの撮影画像からなる撮影画像群を形成する。なお、図35は、複数の照明器を、照明器からイメージセンサ102に向かう方向で見た際の照明の配置図を示す。図35中の丸で示された照明器101は点光源であり、例えば光源と直径10μmのピンホールによって実現されている。図中の丸は照明器101の中心位置を示している。照明器101の間隔ptは例えば300μmである。図35中に点線で示した円は胚Sの平面位置であり、胚Sは図中黒丸で示した照明器101のほぼ真下に配置されている。胚Sは直径約100μmである。さらに、最適断面決定部280は、撮影画像群の撮影画像それぞれにおいて、胚S及び胚S内の2つの細胞S1及びS2の形状に適合する線を抽出する。具体的には、胚S及び2つの細胞S1及びS2は、いずれも球形であるため、最適断面決定部280は、胚Sの円形状と、胚Sの円形状の中に含まれる2つの細胞S1及びS2の円形状とを、各撮影画像から抽出する。胚Sの輪郭は例えば以下のように特定する。胚の形状は凡そ球であり、その半径は約100μmである。まずエッジ点を抽出するために、画像Iaにラプラシアンフィルタをかける。フィルタリング結果を閾値で分類する。閾値は例えば入力画像(ここでは画像Ia)の輝度分布に基づいて設定する。例えば輝度のヒストグラムより、低輝度の画素が全画素数の25%になる点を閾値とする。輝度が閾値以下の画素をエッジ点として抽出する。抽出したエッジ点に対して、ハフ変換(Hough transform)を行って、円を抽出する。このとき、半径を、例えば80μmから120μmの範囲として円を抽出することで、胚Sに対応する円を抽出する。ハフ変換により、円の中心と半径が導出されるため、画像Ia上に輪郭としての円を特定することができる。さらに細胞S1及びS2は、決定された胚Sの輪郭である円の内側のエッジ点を用いて、ハフ変換を行うことで抽出する。ハフ変換の際に、半径を30μm以上60μm以下の範囲で抽出するものとし、2つの円は重なりを許して抽出する。
最適断面決定部280は、撮影画像群内の複数の撮影画像の間で、撮影画像に含まれる同一の要素を特定する。例えば、最適断面決定部280は、図36に示すように、撮影画像群内の複数の撮影画像A、B及びCの間で、胚Sの形状を示す円1と、胚S内の2つの細胞のうちの第1の細胞S1の形状を示す円2と、2つの細胞のうちの第2の細胞S2の形状を示す円3とを、互いに対応付けて特定する。なお、図36は、撮影画像群内の複数の撮影画像A、B及びCの間での各要素の対応関係を示す図である。図36では、撮影画像A、B及びCが用いられているが、撮影画像群内の複数の撮影画像の全てが用いられてもよい。このとき、最適断面決定部280は、円2及び3を含む円1と、円2及び3とは交差しないという条件のもと、円1、円2及び円3を特定してもよい。さらに、最適断面決定部280は、複数の撮影画像の間で、円が同等の大きさを有すること、円の位置が規則性を伴ってずれていること等の条件のもと、円1、円2及び円3を特定してもよい。
最適断面決定部280は、図37に示すように、撮影画像A、B及びCそれぞれにおいて特定した円1、円2及び円3の特徴点である中心の位置を算出する。最適断面決定部280は特定された円の円周上に含まれる複数の点から同じ距離である点を円の中心の位置として算出してもよい。図37は、撮影画像A、B及びCの各要素の中心の位置を示す図である。これら円1、円2及び円3の中心の位置は、イメージセンサ102の受光面の画素の位置に対応する。このため、最適断面決定部280は、撮影画像A、B及びCそれぞれに対する円1、円2及び円3の中心の相対的な位置を算出してもよい。ここで、第1の細胞S1の円2の中心、及び第2の細胞S2の円3の中心は、撮影画像における第二対象物の特徴点の一例である。しかしながら、撮影画像における第二対象物の特徴点は、円の中心に限定されない。第二対象物が、細胞S1及びS2のように球形状を有さない場合、重心、内心、外心、垂心、頂点、偶角点等の、位置の特定が可能な点が、特徴点とされてもよい。例えば、第二対象物が多角形である場合、撮影画像上の第二対象物に対して、重心、内心、外心、垂心又は頂点等の特徴点が設定される。ステップS5500及びS5600の処理によって、撮影画像間で、胚S、細胞S1及び細胞S2の特徴点が、対応付けられる。本例では、撮影画像間で胚S、細胞S1及び細胞S2それぞれが対応付けられた後に、各撮影画像において胚S、細胞S1及び細胞S2の特徴点が設定されていたが、これに限定されない。各撮影画像において胚S、細胞S1及び細胞S2の特徴点が設定された後に、撮影画像間で、胚S、細胞S1及び細胞S2、並びに、胚S、細胞S1及び細胞S2の特徴点が対応付けられてもよい。
最適断面決定部280は、撮影画像A、B及びCの間における同一の円の中心位置の距離を算出する、つまり、撮影画像A、B及びCの間における同一の円の中心の位置関係を算出する。具体的には、図38に示すように、最適断面決定部280は、撮影画像A、B及びCそれぞれの円1の中心位置間の距離、つまり撮影画像A、B及びC間における円1の中心位置のずれ量を算出する。同様に、最適断面決定部280は、撮影画像A、B及びCそれぞれの円2の中心位置間の距離を算出する。さらに、最適断面決定部280は、撮影画像A、B及びCそれぞれの円3の中心位置間の距離を算出する。図38は、撮影画像A、B及びC間の各要素の中心の位置関係を示す図である。なお、撮影画像A、B及びCの間における同一の円の中心位置間の距離とは、当該円の中心をそれぞれ通る3つの平行線の間の距離である。図38では、撮影画像A、B及びCの間における同一の円の中心位置間の距離は、照明器群Gの照明器101の配列方向に沿った距離としている。
最適断面決定部280は、撮影画像A、B及びCの間における同一の円の中心位置間の距離と、撮影画像A、B及びCに対応する照明器101の位置とから、胚S、第1の細胞S1及び第2の細胞S2それぞれの外形を形成する球の中心の位置を算出する。例えば、図39に示すように、撮影画像Aの円1の中心Caと撮影画像Cの円1の中心Ccとの距離D1と、撮影画像Cの円1の中心Ccと撮影画像Bの円1の中心Cbとの距離D2とに従って、中心Ca、Cb及びCcが、イメージセンサ102の受光面上に並べられる。なお、図39は、撮影画像A、B及びCの要素の中心と照明器との位置関係を示す図である。
最適断面決定部280は、第1の細胞S1の中心及び第2の細胞S2の中心を含む平面を最適焦点面つまり最適断面と決定する。例えば、図40に示すように、ステップS5800において、撮影画像A、B及びCでの第1の細胞S1の円2の3つの中心の位置と、照明器101ga、101gb及び101gcの位置とによって、第1の細胞S1の中心C2の立体的な位置が算出されている。同様に、撮影画像A、B及びCでの第2の細胞S2の円3の3つの中心の位置と、照明器101ga、101gb及び101gcの位置とによって、第2の細胞S2の中心C3の立体的な位置が算出されている。なお、図40は、胚Sに含まれる2つの細胞S1及びS2の中心C2及びC3の間の位置関係を示す図である。なお、本実施の形態では細胞は細胞S1と細胞S2の2つであるため、第1の細胞S1の中心及び第2の細胞S2の中心を含む平面を最適断面とした。細胞が3つ以上の場合には、複数個の細胞の中心について、最も多くの細胞の中心を含む平面を、最適断面と決定してもよい。また、複数個の細胞の中心について、それぞれの細胞の中心から求める平面への垂線の長さの合計が最小となる平面を、最適断面と決定してもよい。
最適断面決定部280は、決定した最適焦点面の位置情報をリフォーカス処理部220に送る。リフォーカス処理部220は、記憶部120に記憶されている撮影画像を使用して、複数の撮影画像と、複数の照明器101の位置情報と、最適焦点面の位置情報とに基づいて、リフォーカス処理を行い、最適焦点面上の各画素の輝度を求める。なお、リフォーカス処理部220は、実施の形態1において断面画像生成部270による断面画像生成動作と同様に、基準焦点面FPの基準断面画像Icに含まれる情報を利用して、最適焦点面上の各画素の輝度を求めてもよい。
最適断面画像生成部290は、ステップS6000で行われたリフォーカス処理の結果に基づきディスプレイ等に出力可能な画像データである最適断面画像を合焦画像として生成し、表示部150に表示する。表示部150の表示画面151上での最適断面画像の表示例が、図41及び図42に示される。図41は、胚Sの最適断面画像が表示部150の表示画面151上に表示される一例を示す図である。図42は、胚Sの最適断面画像を画像として表示した例の写真を示す図であるが、胚Sに4つの細胞が含まれる例を示す。
表示画面151上では、胚Sの最適断面画像Iоに加えて、焦点面変更アイコン158が表示されている。画像生成システム10Aのユーザは、胚Sの他の断面画像を表示させる場合、CG操作入力部140を介して焦点面変更アイコン158を選択し実行させる(ステップS6200でyes)。一方、CG操作入力部140を介した最適断面画像Iоからの表示断面の変更の指令が発せられない場合、最適断面画像Iоが表示され続ける(ステップS6200でnо)。
焦点面変更アイコン158の実行後、画像生成装置200Aの画像操作部260は、表示部150の表示画面151上に、図43及び図44に示すような焦点面変更画面を表示する。なお、図43は、表示部150がその表示画面151上に表示する焦点面変更画面の一例を示す図である。図44は、焦点面変更画面を画像として表示した例の写真を示す図であるが、胚Sに4つの細胞が含まれる例を示す。
CG操作入力部140の操作を介してリフォーカスアイコン157を実行する(ステップS6400でyes)ことによって、画像生成装置200Aの画像操作部260は、表示されている断面平面Bの位置を胚Sの詳細な断面画像を表示すべき断面の位置として決定する。そして、画像生成装置200Aのリフォーカス処理部220及び合焦画像生成部230は、断面平面Bを焦点面とした合焦画像である胚Sの詳細な断面画像を生成し、表示画面151に表示する(ステップS6500)。胚Sの詳細な断面画像の生成は、実施の形態1での断面画像生成部270による生成と同様に実施されてもよい。しかしながら、記憶部120に記憶されている撮影画像を用いて、断面平面Bを焦点面とするリフォーカス処理を実施することによって、胚Sの詳細な断面画像が生成されてもよい。また、リフォーカスアイコン157が実行されない場合(ステップS6400でnо)、表示部150の表示画面151において、表示されている胚Sの断面画像が維持される。
以上のように、本実施の形態に係る画像生成装置200Aによれば、撮影対象物である胚Sの特徴点である細胞の中心を最も多く含む断面が選定され、選定された断面の合焦画像が表示される。表示される断面の合焦画像は、胚Sの多くの特徴を表示することができる。よって、画像生成装置200Aは、ユーザに有益な情報を自動的に生成し提供することができる。
次に、実施の形態1及び2の変形例1について説明する。本変形例は、画像生成システムによるリフォーカス処理に関する変形例である。上記実施の形態では、図10のステップS1350で照明位置が選択されたが、本変形例では、撮影画像が選択される。以下に、本変形例について、実施の形態と異なる点を中心に説明する。
次に、実施の形態1及び2の変形例2について説明する。本変形例は、画像生成システムによるリフォーカス処理に関する変形例である。上記実施の形態では、図10のステップS1320及びステップS1330で、合焦画像内の画素が順に選択されたが、本変形例では、撮影画像内の画素が順に選択される。つまり、本変形例では、先に撮影画像内の画素が選択され、その選択された画素に対応する焦点面上の点が後で決定される点が上記実施の形態と異なる。このように決定された焦点面上の点に対応する合焦画像内の画素に、撮影画像内の選択された画素の輝度値が反映される。以下に、本変形例について、実施の形態と異なる点を中心に説明する。
リフォーカス処理部220は、ステップS1100で撮影した画像のすべてについてリフォーカス処理が終了したかどうかを判定する。リフォーカス処理とは、ステップS1322からステップS1392までの処理を意味する。すべての画像についてすでにリフォーカス処理が終了している場合(ステップS1322においてyes)は、リフォーカス処理部220は、ステップS1400へ進む。ステップS1100で撮影した画像のいずれかについてリフォーカス処理が終了していない場合(ステップS1322においてno)は、リフォーカス処理部220は、ステップS1332へ進む。
リフォーカス処理部220は、記憶部120に記憶されている、ステップS1100で撮影された画像の中から、1つの撮影画像を選択する(ステップS1332)。ここで選択される1つの撮影画像は、リフォーカス処理がまだ行われていない画像である。以下において、ステップS1332で選択された1つの画像を選択画像という。
リフォーカス処理部220は、選択画像に対応する照明位置情報を取得する。例えば、リフォーカス処理部220は、図6に示した画像と照明位置情報との対応関係を参照して照明位置情報を取得する。ここでは、照明器101aの位置情報が取得された場合について説明する。
リフォーカス処理部220は、選択画像の全画素に対して、加算処理が終了したかを判定する(ステップS1342)。ここで、選択画像の全画素について加算処理が終了している場合(ステップS1342においてyes)は、加算処理を終了してステップS1322へ戻る。一方、選択画像のいずれかの画素について加算処理が終了していない場合(ステップS1342においてno)は、ステップS1352へ進む。加算処理とは、ステップS1342からステップS1392までの処理を意味する。
リフォーカス処理部220は、選択画像中の1つの画素を選択する。ここで選択される1つの画素は、加算処理がまだ行われていない画素である。図47に、選択画像に含まれる複数の画素に対応する受光面上の複数の点1302a〜1302eを示す。ここでは、図48に示すように、受光面上の点1302aに対応する画素を選択画像から選択した場合について説明する。なお、以後、ステップS1352で選択された画素を加算画素とも表記する。
リフォーカス処理部220は、図48に示すように、受光面上の点1302aと照明器101aの位置とを結ぶ直線と焦点面1100とが交差する交点1303aの位置を計算する。以下において、交点1303aを加算点とも表記する。
リフォーカス処理部220は、受光面上の点1302aに対応する選択画像内の加算画素の輝度値を、焦点面上の加算点(交点1303a)に対応する合焦画像内の1以上の画素の輝度値に加算する。
リフォーカス処理部220は、合焦画像中の1つ以上の画素の輝度値に、ステップS1382で計算された輝度値を加算する。
次に、実施の形態1及び2の変形例3について説明する。本変形例は、画像生成システムに関する変形例である。本変形例では、決定された焦点面に応じて適応的に照明位置を決定し、決定された照明位置にある照明器を用いて対象物を撮影する点が実施の形態と異なる。以下に、本変形例について、実施の形態と異なる点を中心に説明する。
図51は、変形例3に係る画像生成システム10Bの機能的な構成を示すブロック図である。図51において、図1と実質的に同一の構成要素については、同一の符号を付し、適宜説明を省略する。画像生成システム10Bは、撮影装置100と、画像生成装置200Bと、記憶部120と、表示部150とを備える。
撮影装置100は、複数の照明器101と、画素ごとに光の強度を記録するイメージセンサ102と、撮影制御部103とを備える。
画像生成装置200Bは、焦点面決定部210と、照明範囲決定部300と、リフォーカス処理部220と、合焦画像生成部230と、対象物抽出部240と、3D画像生成部250と、画像操作部260と、断面画像生成部270とを備える。
次に、上述のように構成される画像生成システム10Bのリフォーカス処理動作について説明する。図54は、変形例3に係る画像生成システム10Bのリフォーカス処理動作の一例を示すフローチャートである。図54において、図7と実質的に同一のステップについては、同一の符号を付し、適宜説明を省略する。
以上、1つ又は複数の態様に係る画像生成システムについて、実施の形態及びその変形例に基づいて説明したが、本開示は、これら実施の形態及び変形例に限定されるものではない。本開示の趣旨を逸脱しない限り、当業者が思いつく各種変形を本実施の形態及び変形例に施したものや、異なる実施の形態における構成要素を組み合わせて構築される形態も、1つ又は複数の態様の範囲内に含まれてもよい。
100 撮影装置
101、101a、101b 照明器
102 イメージセンサ
150 表示部
151 表示画面
200、200A、200B 画像生成装置
210 焦点面決定部
220 リフォーカス処理部
230 合焦画像生成部
240 対象物抽出部
250 3D画像生成部
260 画像操作部
270 断面画像生成部
280 最適断面決定部
290 最適断面画像生成部
300 照明範囲決定部
Bi 参考断面画像
S 胚(対象物)
Claims (13)
- 複数の照明器と、
対象物が載置される表面と複数のセンサ画素とを有するイメージセンサと、
前記複数の照明器及び前記イメージセンサの間に位置する仮想的な複数の基準焦点面に対応する複数の基準合焦画像を生成し、前記複数の基準合焦画像を用いて、前記対象物の3次元画像を生成する制御回路とを備え、
前記イメージセンサは、前記複数の照明器のそれぞれが照明する毎に、前記複数のセンサ画素で受光される光に基づく輝度値を用いて、複数の撮影画像を取得し、
前記複数の基準合焦画像は、複数の合焦画素で構成されており、
前記制御回路は、
(a1)前記イメージセンサにより撮影された複数の撮影画像を取得し、
(a2)前記複数の基準焦点面の情報を取得し、ここで、前記複数の基準焦点面は、前記対象物を通り且つ互いに間隔をあけて位置しており、
(a3)前記複数の基準焦点面の情報と前記複数の撮影画像とを用いて、前記複数の基準合焦画像を構成する複数の合焦画素に対応する前記センサ画素の輝度値を取得することで、前記複数の基準合焦画像を生成し、
(a4)前記複数の基準合焦画像のうちの前記対象物の輪郭のコントラストが最も高い前記基準合焦画像を用いて、前記対象物の輪郭を抽出し、
(a5)抽出した前記対象物の輪郭に基づき前記対象物の立体的な輪郭を特定し、
(a6)前記複数の基準合焦画像それぞれから、前記立体的な輪郭の外側に相当する領域を除去することによって、前記対象物の複数の基準断面画像を生成し、
(a7)前記複数の基準断面画像を用いて、前記対象物の3次元画像を生成し、前記3次元画像を表示画面に表示させる
画像生成装置。 - 前記制御回路は、
外部から入力される指令に従って、表示している前記対象物の3次元画像上で前記対象物の断面を選択し、
選択した前記対象物の断面の画像を、前記複数の基準合焦画像を構成する複数の画素の輝度を用いて生成し、
前記対象物の断面の画像を構成する複数の断面画素の輝度値をそれぞれ、前記断面画素上の前記基準合焦画像の画素の輝度値又は前記断面画素の近傍の前記基準合焦画像の画素の輝度値を用いて、算出する
請求項1に記載の画像生成装置。 - 前記断面画素の輝度値の算出に用いられる前記断面画素の近傍の前記基準合焦画像の画素は、前記断面画素を挟んで位置する2つの前記基準焦点面それぞれの前記基準合焦画像の画素である
請求項2に記載の画像生成装置。 - 前記制御回路は、前記対象物の参考用断面を示す参考断面画像を生成し且つ前記参考断面画像を前記表示画面に表示させ、
前記制御回路は、前記参考断面画像を構成する複数の画素の輝度値を、前記参考断面画像の画素上の前記基準合焦画像の画素の輝度値とすることによって、前記参考断面画像を生成する
請求項2または3に記載の画像生成装置。 - 前記制御回路は、前記照明器の位置と前記合焦画素の位置と前記センサ画素の位置とが直線上に並ぶ関係にある前記センサ画素それぞれの輝度値を用いることによって、前記合焦画素の輝度値を算出する
請求項1〜4のいずれか一項に記載の画像生成装置。 - 前記対象物は胚であり、前記基準合焦画像に含まれる前記胚の輪郭は、円状であり、前記胚の立体的な輪郭は、球状である
請求項1〜5のいずれか一項に記載の画像生成装置。 - イメージセンサ上に位置する対象物の画像を生成する画像生成方法であって、
(b1)複数の照明器のそれぞれを照明する毎に、前記イメージセンサの複数のセンサ画素で受光される光に基づく輝度値を用いて、複数の撮影画像を取得し、
(b2)前記複数の照明器及び前記イメージセンサの間に位置する仮想的な複数の基準焦点面を設定し、ここで、前記複数の基準焦点面は、前記対象物を通り且つ互いに間隔をあけて位置し、
(b3)前記複数の基準焦点面に対応する複数の基準合焦画像を生成することであって、前記複数の基準焦点面の情報と前記複数の撮影画像とを用いて、前記複数の基準合焦画像を構成する複数の合焦画素に対応する前記センサ画素の輝度値を取得することで、前記複数の基準合焦画像を生成し、
(b4)前記複数の基準合焦画像のうちから前記対象物の輪郭のコントラストが最も高い前記基準合焦画像を用いて、前記対象物の輪郭を抽出し、
(b5)抽出した前記対象物の輪郭に基づき前記対象物の立体的な輪郭を特定し、
(b6)前記複数の基準合焦画像それぞれから、前記立体的な輪郭の外側に相当する領域を除去することによって、前記対象物の複数の基準断面画像を生成し、
(b7)前記複数の基準断面画像を用いて、前記対象物の3次元画像を生成し、前記3次元画像を表示画面に表示させ、
前記(b1)〜(b7)の少なくとも1つは制御回路により実行される
画像生成方法。 - (c1)前記対象物の3次元画像上で前記対象物の断面を選択し、
(c2)選択した前記対象物の断面の画像を、前記複数の基準合焦画像を構成する複数の画素の輝度を用いて生成し、
(c3)前記対象物の断面の画像を構成する複数の断面画素の輝度値をそれぞれ、前記断面画素上の前記基準合焦画像の画素の輝度値又は前記断面画素の近傍の前記基準合焦画像の画素の輝度値を用いて、算出する
請求項7に記載の画像生成方法。 - 前記断面画素の輝度値の算出では、前記断面画素の近傍の前記基準合焦画像の画素として、前記断面画素を挟んで位置する2つの前記基準焦点面それぞれの前記基準合焦画像の画素を用いる
請求項8に記載の画像生成方法。 - (d1)前記対象物の参考用断面を示す参考断面画像を生成し且つ前記参考断面画像を前記表示画面に表示させ、前記参考断面画像の生成では、前記参考断面画像を構成する複数の画素の輝度値を、前記参考断面画像の画素上の前記基準合焦画像の画素の輝度値とする
請求項8または9に記載の画像生成方法。 - 前記照明器の位置と前記合焦画素の位置と前記センサ画素の位置とが直線上に並ぶ関係にある前記センサ画素それぞれの輝度値を用いて、前記合焦画素の輝度値を算出する
請求項7〜10のいずれか一項に記載の画像生成方法。 - 前記対象物は胚であり、前記基準合焦画像に含まれる前記胚の輪郭は、円状であり、前記胚の立体的な輪郭は、球状である
請求項7〜11のいずれか一項に記載の画像生成方法。 - コンピュータに実行させるプログラムであって、
(e1)イメージセンサ上に位置する対象物の複数の撮影画像を取得し、ここで、前記複数の撮影画像は、複数の照明器のそれぞれを照明する毎に、前記イメージセンサの複数のセンサ画素で受光される光に基づく輝度値を用いて、前記イメージセンサによって取得され、
(e2)前記複数の照明器及び前記イメージセンサの間に位置する仮想的な複数の基準焦点面を設定し、ここで、前記複数の基準焦点面は、前記複数の照明器及び前記イメージセンサの間で、前記対象物を通り且つ互いに間隔をあけて位置し、
(e3)前記複数の基準焦点面に対応する複数の基準合焦画像を生成することであって、前記複数の基準焦点面の情報と前記複数の撮影画像とを用いて、前記複数の基準合焦画像を構成する複数の合焦画素に対応する前記センサ画素の輝度値を取得することで、前記複数の基準合焦画像を生成し、
(e4)前記複数の基準合焦画像のうちから前記対象物の輪郭のコントラストが最も高い前記基準合焦画像を用いて、前記対象物の輪郭を抽出し、
(e5)抽出した前記対象物の輪郭に基づき前記対象物の立体的な輪郭を特定し、
(e6)前記複数の基準合焦画像それぞれから、前記立体的な輪郭の外側に相当する領域を除去することによって、前記対象物の複数の基準断面画像を生成し、
(e7)前記複数の基準断面画像を用いて、前記対象物の3次元画像を生成し、前記3次元画像を表示画面に表示させる
プログラム。
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