JP6732313B2 - 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 - Google Patents
細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6732313B2 JP6732313B2 JP2019176857A JP2019176857A JP6732313B2 JP 6732313 B2 JP6732313 B2 JP 6732313B2 JP 2019176857 A JP2019176857 A JP 2019176857A JP 2019176857 A JP2019176857 A JP 2019176857A JP 6732313 B2 JP6732313 B2 JP 6732313B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell culture
- culture substrate
- light
- cell
- layer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 title claims description 409
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 110
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 311
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 195
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 claims description 166
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 162
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 116
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 70
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 49
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 27
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 13
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 claims description 11
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 claims description 11
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 claims description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 10
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 claims description 8
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 claims description 8
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 5
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 48
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 40
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 26
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000000463 material Substances 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 239000010408 film Substances 0.000 description 8
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 7
- 238000004528 spin coating Methods 0.000 description 7
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 6
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 5
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 5
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 5
- 238000004544 sputter deposition Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 238000007740 vapor deposition Methods 0.000 description 5
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 4
- 229920001721 polyimide Polymers 0.000 description 4
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- DMLAVOWQYNRWNQ-UHFFFAOYSA-N azobenzene Chemical compound C1=CC=CC=C1N=NC1=CC=CC=C1 DMLAVOWQYNRWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 108010008217 nidogen Proteins 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 3
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 3
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 3
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 2
- 102000004266 Collagen Type IV Human genes 0.000 description 2
- 108010042086 Collagen Type IV Proteins 0.000 description 2
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 description 2
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 2
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 2
- 229920000288 Keratan sulfate Polymers 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037369 Nidogen-1 Human genes 0.000 description 2
- 239000004642 Polyimide Substances 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 2
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 2
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L dermatan sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C([O-])=O)O1 AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L 0.000 description 2
- 229940051593 dermatan sulfate Drugs 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N keratan Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H](O)[C@@H]3O)O)[C@H](NC(C)=O)[C@H]2O)COS(O)(=O)=O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H]1O KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 238000000206 photolithography Methods 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000001931 thermography Methods 0.000 description 2
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- SHTNCSPEDGTLDP-UHFFFAOYSA-N 1-o-[1-(tert-butylamino)-3-(2-chloro-5-methylphenoxy)propan-2-yl] 4-o-[1,3-di(hexadecanoyloxy)propan-2-yl] butanedioate;hydrochloride Chemical compound Cl.CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCC(=O)OC(CNC(C)(C)C)COC1=CC(C)=CC=C1Cl SHTNCSPEDGTLDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 1
- 102000012432 Collagen Type V Human genes 0.000 description 1
- 108010022514 Collagen Type V Proteins 0.000 description 1
- 102000004510 Collagen Type VII Human genes 0.000 description 1
- 108010017377 Collagen Type VII Proteins 0.000 description 1
- 229920000089 Cyclic olefin copolymer Polymers 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 235000000177 Indigofera tinctoria Nutrition 0.000 description 1
- 102100027450 Laminin subunit alpha-5 Human genes 0.000 description 1
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N anthraquinone Natural products CCC(=O)c1c(O)c2C(=O)C3C(C=CC=C3O)C(=O)c2cc1CC(=O)OC PYKYMHQGRFAEBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004056 anthraquinones Chemical class 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 1
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 150000001988 diarylethenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 108060002895 fibrillin Proteins 0.000 description 1
- 102000013370 fibrillin Human genes 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 108010038082 heparin proteoglycan Proteins 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940097275 indigo Drugs 0.000 description 1
- COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N indigo powder Natural products N1C2=CC=CC=C2C(=O)C1=C1C(=O)C2=CC=CC=C2N1 COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001746 injection moulding Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 108010028309 kalinin Proteins 0.000 description 1
- 108010088360 laminin alpha5 Proteins 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000005499 meniscus Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000000059 patterning Methods 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000009832 plasma treatment Methods 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000306 polymethylpentene Polymers 0.000 description 1
- 239000011116 polymethylpentene Substances 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002050 silicone resin Polymers 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/10—Hollow fibers or tubes
- C12M25/12—Hollow fibers or tubes the culture medium flowing outside the fiber or tube
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/10—Petri dish
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/20—Material Coatings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/06—Plates; Walls; Drawers; Multilayer plates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/16—Particles; Beads; Granular material; Encapsulation
- C12M25/18—Fixed or packed bed
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M31/00—Means for providing, directing, scattering or concentrating light
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
前記細胞培養基材層は、細胞が接着可能な細胞接着領域と、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域とを有し、
前記細胞接着阻害領域は、前記細胞培養基材の変性物を含む。
本実施形態は、細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法の一例である。図1は、実施形態1の培養器具100の構成を示す模式図であり、(A)は、培養器具100の模式斜視図であり、(B)は、(A)におけるI−I方向からみた培養器具100の模式断面図であり、(C)は、培養器具100の平面図である。図1に示すように、培養器具100は、細胞培養基材層11と、容器12とを有する。細胞培養基材層11は、細胞が接着可能な細胞接着領域11aと、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域11bとを有する。細胞培養基材層11において、細胞接着領域11aは、4つの略円状の領域として形成されている。また、細胞培養基材層11において、細胞接着阻害領域11bは、細胞接着領域11a以外の領域として形成されている。容器12は、底面12aと、側壁12bとを有する。細胞培養基材層11は、底面12aの上に積層されている。
本実施形態は、細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法の他の例である。図3は、実施形態2の培養器具200の構成を示す模式図であり、(A)は、培養器具200の模式斜視図であり、(B)は、(A)におけるII−II方向からみた培養器具200の模式断面図であり、(C)は、培養器具200の平面図である。図2に示すように、培養器具200は、実施形態1の培養器具100の構成に加えて、光熱変換層13を含む。光熱変換層13は、細胞培養基材層11と底面12aとの間に配置されている。すなわち、光熱変換層13および細胞培養基材層11は、底面12aに対してこの順番で積層されている。この点を除き、実施形態2の培養器具200の構成は、実施形態1の培養器具100の構成と同様であり、その説明を援用できる。
本実施形態は、細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法の他の例である。図5は、実施形態3の培養器具300の構成を示す模式図であり、(A)は、培養器具300の模式斜視図であり、(B)は、(A)におけるII−II方向からみた培養器具300の模式断面図であり、(C)は、培養器具300の平面図である。図5に示すように、培養器具300は、実施形態2の培養器具200の構成において、光熱変換層13が底面12aの一部に形成されている。また、培養器具300は、細胞接着領域11aの一部が、底面12aと接触している。この点を除き、実施形態3の培養器具300の構成は、実施形態2の培養器具200の構成と同様であり、その説明を援用できる。
本実施形態は、細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法の他の例である。図7は、実施形態4の培養器具400の構成を示す模式図であり、(A)は、培養器具400の模式斜視図であり、(B)は、(A)におけるII−II方向からみた培養器具400の模式断面図であり、(C)は、培養器具400の平面図である。図7に示すように、培養器具400は、実施形態2の培養器具200の構成において、光熱変換層13と、細胞培養基材層11との間に、遮断層14が形成されている。この点を除き、実施形態4の培養器具400の構成は、実施形態2の培養器具200の構成と同様であり、その説明を援用できる。実施形態4の培養器具400では、光熱変換層13上に、遮断層14が積層されているため、細胞培養基材層11上で培養されている細胞と光熱変換層13との間には、遮断層14が介在する。このため、実施形態4の培養器具400によれば、光熱変換層13と細胞との接触を回避可能であり、これにより、例えば、光熱変換層13の形成に用いた溶剤または光熱変換ポリマーに未結合の側鎖(例えば、前述の色素構造等)もしくは未重合のモノマーの細胞に対する影響を抑制できる。
本発明の製造方法により、本発明の細胞培養器具を製造できること、および本発明の細胞培養器具を用いて、培養後の細胞塊の形状および大きさを制御できることを確認した。
波長:405nm
レーザ出力:0.5W
レーザの走査速度:80mm/秒
スポット径:45μm
本発明の製造方法において、光照射時の光熱変換層13の温度を確認した。
波長:405nm
レーザ出力:0.3、0.4、0.5、0.6、または0.7W
レーザの走査速度:80mm/秒
スポット径:45μm
本発明の製造方法により、本発明の細胞培養器具を製造できること、および本発明の細胞培養器具を用いて、培養後の細胞塊の形状および大きさを制御できることを確認した。
波長:1450nm
レーザ出力:0.6W
レーザの走査速度:5mm/秒以下
スポット径:75μm
本発明の製造方法により、本発明の細胞培養器具を製造できること、および本発明の細胞培養器具を用いて、培養後の細胞塊の形状および大きさを制御できることを確認した。
波長:405nm
レーザ出力:0.5W
レーザの走査速度:80mm/秒
スポット径:45μm
本発明の製造方法により、本発明の細胞培養器具を製造できること、および本発明の細胞培養器具を用いて、培養後の細胞塊の形状および大きさを制御できることを確認した。
波長:405nm
レーザ出力:0.5W
レーザの走査速度:80mm/秒
スポット径:45μm
ピッチ:0.3mm
本発明の製造方法により、本発明の細胞培養器具を製造できること、および本発明の細胞培養器具を用いて、培養後の細胞塊の形状および大きさを制御できることを確認した。
波長:405nm
レーザ出力:0.3W
レーザの走査速度:10mm/秒
スポット径:45μm
ピッチ:0.03mm
上記の実施形態および実施例の一部または全部は、以下の付記のように記載されうるが、以下には限られない。
(付記1)
細胞培養基材を含む細胞培養基材層を有し、
前記細胞培養基材層は、細胞が接着可能な細胞接着領域と、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域とを有し、
前記細胞接着阻害領域は、前記細胞培養基材の変性物を含む、細胞培養器具。
(付記2)
光を熱に変換可能な光熱変換層を有し、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置される、付記1記載の細胞培養器具。
(付記3)
前記細胞培養基材層と前記光変換層との接触を遮断する遮断層を有し、
前記遮断層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記遮断層上に配置される、付記2記載の細胞培養器具。
(付記4)
前記光熱変換層は、光を吸収する色素構造を含んだポリマーを含む、付記2または3記載の細胞培養器具。
(付記5)
前記細胞接着領域は、未変性の細胞培養基材を含む、付記1から4のいずれかに記載の細胞培養器具。
(付記6)
前記細胞培養基材は、細胞外基質である、付記1から5のいずれかに記載の細胞培養器具。
(付記7)
前記細胞培養基材は、タンパク質またはそのペプチド断片である、付記1から6のいずれかに記載の細胞培養器具。
(付記8)
前記細胞培養基材は、ラミニンまたはその断片である、付記1から7いずれかに記載の細胞培養器具。
(付記9)
細胞培養基材を含む細胞培養基材層を有する細胞培養器具に光を照射し、前記細胞培養基材を変性させ、細胞接着阻害領域を形成する阻害領域形成工程を含む、細胞培養器具の製造方法。
(付記10)
前記細胞培養器具は、光を熱に変換可能な光熱変換層を有し、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記阻害領域形成工程において、前記光熱変換層に前記光を照射する、付記9記載の製造方法。
(付記11)
前記細胞培養器具は、前記細胞培養基材層と前記光変換層との接触を遮断する遮断層を有し、
前記遮断層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記遮断層上に配置される、付記10記載の製造方法。
(付記12)
前記光熱変換層は、光を吸収する色素構造を含んだポリマーを含む、付記10または11記載の製造方法。
(付記13)
前記光は、赤外光であり、
前記阻害領域形成工程において、前記細胞培養基材層に前記赤外光を照射する、付記9から12のいずれかに記載の製造方法。
(付記14)
前記阻害領域形成工程において、前記細胞培養基材の温度が、50℃以上となるように、前記光を照射する、付記9から13のいずれかに記載の製造方法。
(付記15)
前記阻害領域形成工程前において、前記細胞培養基材は、未変性の細胞培養基材である、付記9から14のいずれかに記載の製造方法。
(付記16)
前記光は、レーザ光である、付記9から15のいずれかに記載の製造方法。
(付記17)
前記細胞培養基材は、細胞外基質である、付記9から16のいずれかに記載の製造方法。
(付記18)
前記細胞培養基材は、タンパク質またはそのペプチド断片である、付記9から17のいずれかに記載の製造方法。
(付記19)
前記細胞培養基材は、ラミニンまたはその断片である、付記9から18いずれかに記載の製造方法。
(付記20)
細胞培養基材を含む細胞培養基材層を有し、
前記細胞培養基材は、光照射により、細胞との接着性が変化する、細胞培養器具。
(付記21)
前記細胞培養基材は、光照射により生じた熱により、前記細胞との接着性を変化される、付記20記載の細胞培養器具。
(付記22)
前記細胞培養基材は、前記細胞との接着が可能であり、光照射により、前記細胞との接着が阻害される、付記20または21記載の細胞培養器具。
(付記23)
光を熱に変換可能な光熱変換層を有し、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置される、付記20から22のいずれかに記載の細胞培養器具。
(付記24)
前記光熱変換層は、光を熱に変換可能な光熱変換分子を含み、
前記光熱変換分子は、前記式(1)で表される、付記23記載の細胞培養器具。
(付記25)
前記細胞培養基材層と前記光変換層との接触を遮断する遮断層を有し、
前記遮断層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記遮断層上に配置される、付記23または24記載の細胞培養器具。
(付記26)
前記細胞培養基材は、細胞外基質である、付記20から25のいずれかに記載の細胞培養器具。
(付記27)
前記細胞培養基材は、タンパク質またはそのペプチド断片である、付記20から26のいずれかに記載の細胞培養器具。
(付記28)
前記細胞培養基材は、ラミニンまたはその断片である、付記20から27いずれかに記載の細胞培養器具。
(付記29)
細胞培養器具を用いて、細胞を培養する培養工程を含み、
前記細胞培養器具は、付記1から8および20から28のいずれかに記載の細胞培養器具である、細胞の培養方法(細胞の製造方法)。
(付記30)
前記培養工程後、前記細胞を回収する回収工程を含む、付記29記載の培養方法(細胞の製造方法)。
11 細胞培養基材層
11a 細胞接着領域
11b 細胞接着阻害領域
12 容器
12a 底面
12b 側壁
13 光熱変換層
14 遮断層
15 支持体層
Claims (18)
- 平面状の底面を有する容器と、
細胞培養基材を含む細胞培養基材層と、
光を熱に変換可能な光熱変換層とを有し、
前記光熱変換層は、前記平面状の底面上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層上には、細胞が配置されておらず、
前記細胞培養基材層は、細胞が接着可能な細胞接着領域と、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域とを有し、
前記細胞接着阻害領域は、前記細胞培養基材の熱変性物を含む、細胞培養器具。 - 細胞培養基材を含む細胞培養基材層と、
光を熱に変換可能な光熱変換層とを有し、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層上には、細胞が配置されておらず、
前記細胞培養基材層は、細胞が接着可能な細胞接着領域と、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域とを有し、
前記細胞接着阻害領域は、前記細胞培養基材の熱変性物を含み、
前記細胞接着領域と前記細胞接着阻害領域とは、同一平面上に存在する、細胞培養器具。 - 前記細胞培養基材層と前記光熱変換層との接触を遮断する遮断層を有し、
前記遮断層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記遮断層上に配置される、請求項1または2記載の細胞培養器具。 - 前記光熱変換層は、光を吸収する色素構造を含んだポリマーを含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の細胞培養器具。
- 前記細胞接着領域は、未変性の細胞培養基材を含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の細胞培養器具。
- 前記細胞培養基材は、細胞外基質である、請求項1から5のいずれか一項に記載の細胞培養器具。
- 前記細胞培養基材は、タンパク質またはそのペプチド断片である、請求項1から6のいずれか一項に記載の細胞培養器具。
- 前記細胞培養基材は、ラミニンまたはその断片である、請求項1から7のいずれか一項に記載の細胞培養器具。
- 細胞培養基材を含む細胞培養基材層を有する細胞培養器具に光を照射し、前記細胞培養基材を熱変性させ、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域を形成する阻害領域形成工程を含み、
前記細胞培養器具は、平面状の底面を有する容器と、光を熱に変換可能な光熱変換層とを有し、
前記光熱変換層は、前記平面状の底面上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層上には、細胞が配置されておらず、
前記阻害領域形成工程において、前記光熱変換層に前記光を照射する、細胞培養器具の製造方法。 - 細胞培養基材を含む細胞培養基材層を有する細胞培養器具に光を照射し、前記細胞培養基材を熱変性させ、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域を形成する阻害領域形成工程を含み、
前記細胞培養器具は、光を熱に変換可能な光熱変換層とを有し、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層上には、細胞が配置されておらず、
前記阻害領域形成工程において、前記光熱変換層に前記光を照射し
前記阻害領域形成工程後、前記細胞培養基材層は、細胞が接着可能な細胞接着領域と、前記細胞接着阻害領域とを有し、
前記細胞接着領域と、前記細胞接着阻害領域とは、同一平面上に存在する、細胞培養器具の製造方法。 - 前記細胞培養器具は、前記細胞培養基材層と前記光熱変換層との接触を遮断する遮断層を有し、
前記遮断層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層は、前記遮断層上に配置される、請求項9または10記載の製造方法。 - 前記阻害領域形成工程において、前記細胞培養基材の温度が、100℃以上となるように、前記光を照射する、請求項9から11のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記阻害領域形成工程前において、前記細胞培養基材は、未変性の細胞培養基材である、請求項9から12のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記光は、レーザ光である、請求項9から13のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記細胞培養基材は、細胞外基質である、請求項9から14のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記細胞培養基材は、タンパク質またはそのペプチド断片である、請求項9から15のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記細胞培養基材は、ラミニンまたはその断片である、請求項9から16のいずれか一項に記載の製造方法。
- 細胞培養基材を含む細胞培養基材層を有する細胞培養器具に光を照射し、前記細胞培養基材を熱変性させ、細胞の接着が阻害される細胞接着阻害領域を形成する阻害領域形成工程を含み、
前記細胞培養基材は、タンパク質またはそのペプチド断片であり、
前記細胞培養器具は、光を熱に変換可能な光熱変換層とを有し、
前記細胞培養基材層は、前記光熱変換層上に配置され、
前記細胞培養基材層上には、細胞が配置されておらず、
前記阻害領域形成工程において、前記光熱変換層に前記光の照射部の細胞培養基材の温度が、100℃以上となるように、前記光を照射する、細胞培養器具の製造方法。
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP19868326.0A EP3848450A4 (en) | 2018-10-01 | 2019-09-30 | Cell culture tool and method for manufacturing cell culture tool |
PCT/JP2019/038605 WO2020071332A1 (ja) | 2018-10-01 | 2019-09-30 | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 |
US17/282,065 US20210340482A1 (en) | 2018-10-01 | 2019-09-30 | Cell culture tool and method for producing cell culture tool |
CN201980062486.2A CN112752836A (zh) | 2018-10-01 | 2019-09-30 | 细胞培养器具和细胞培养器具的制造方法 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018186940 | 2018-10-01 | ||
JP2018186940 | 2018-10-01 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020114669A Division JP2020156518A (ja) | 2018-10-01 | 2020-07-02 | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020054341A JP2020054341A (ja) | 2020-04-09 |
JP6732313B2 true JP6732313B2 (ja) | 2020-07-29 |
Family
ID=70105744
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019176857A Active JP6732313B2 (ja) | 2018-10-01 | 2019-09-27 | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 |
JP2020114669A Pending JP2020156518A (ja) | 2018-10-01 | 2020-07-02 | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020114669A Pending JP2020156518A (ja) | 2018-10-01 | 2020-07-02 | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210340482A1 (ja) |
JP (2) | JP6732313B2 (ja) |
CN (1) | CN112752836A (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113293097B (zh) * | 2021-05-19 | 2023-03-21 | 法国介观生物技术有限公司 | 一种人工基底膜及包含其的细胞培养装置 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003088316A (ja) * | 2001-06-18 | 2003-03-25 | Fancl Corp | 玄 米 |
JP2003009860A (ja) * | 2001-06-27 | 2003-01-14 | Fuji Photo Film Co Ltd | 区画培養基板及びそれを用いたdnaチップ |
JP3975266B2 (ja) * | 2002-05-24 | 2007-09-12 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 細胞培養装置 |
WO2005103227A1 (ja) * | 2004-04-26 | 2005-11-03 | Dai Nippon Printing Co., Ltd. | 細胞培養用パターニング基板およびその製造方法 |
JP2010046012A (ja) * | 2008-08-21 | 2010-03-04 | Konica Minolta Holdings Inc | 細胞培養基材及び細胞培養方法 |
JP2012210158A (ja) * | 2011-03-30 | 2012-11-01 | Univ Of Tokyo | 細胞接着性光制御基材 |
CN103502425A (zh) * | 2011-04-11 | 2014-01-08 | 学校法人东邦大学 | 细胞粘附性光控制基材 |
JP6206792B2 (ja) * | 2013-04-03 | 2017-10-04 | 誠一 横尾 | 培地及び細胞の培養方法 |
JP2014226088A (ja) * | 2013-05-22 | 2014-12-08 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 光および加水分解性架橋剤、光および加水分解性ゲル、細胞培養器具、細胞配列・分別装置、細胞配列方法、細胞分別方法、並びに、組織体形成方法 |
NZ615444A (en) * | 2013-09-12 | 2014-12-24 | Waratah Nz Ltd | Saw apparatus with chain stretch detection |
US10876086B2 (en) * | 2015-06-01 | 2020-12-29 | Kataoka Corporation | Cell treatment method, laser processing machine, and cell culture vessel |
CN107735405B (zh) * | 2015-06-25 | 2022-04-08 | 克拉根制药株式会社 | 具有胶原模拟肽结构的聚合肽和凝胶 |
EP3450471B1 (en) * | 2016-06-08 | 2020-12-09 | National Institute of Advanced Industrial Science and Technology | Polymer compound and method for manipulating cell using same |
-
2019
- 2019-09-27 JP JP2019176857A patent/JP6732313B2/ja active Active
- 2019-09-30 CN CN201980062486.2A patent/CN112752836A/zh active Pending
- 2019-09-30 US US17/282,065 patent/US20210340482A1/en active Pending
-
2020
- 2020-07-02 JP JP2020114669A patent/JP2020156518A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20210340482A1 (en) | 2021-11-04 |
JP2020156518A (ja) | 2020-10-01 |
CN112752836A (zh) | 2021-05-04 |
JP2020054341A (ja) | 2020-04-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US12018239B2 (en) | Laser processing machine | |
Ovsianikov et al. | Engineering 3D cell-culture matrices: multiphoton processing technologies for biological and tissue engineering applications | |
JP5500461B2 (ja) | 2d光子リソグラフィ及びナノインプリントを使用してサブミクロン3d構造を製造するための3d金属鋳型ならびにそのプロセス | |
US8652833B2 (en) | Cell culture container and method of producing the same | |
US20090096133A1 (en) | Micropatterning of biological molecules using laser ablation | |
TWI675674B (zh) | 醫療器材、細胞培養方法、含氟環狀烯烴聚合物的用途以及含氟環狀烯烴聚合物組成物的用途 | |
Kavand et al. | Cell-imprint surface modification by contact photolithography-based approaches: direct-cell photolithography and optical soft lithography using PDMS cell imprints | |
JP6732313B2 (ja) | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 | |
JP4294425B2 (ja) | 細胞培養プレート | |
JP6473552B2 (ja) | 培養容器収容装置 | |
Okano et al. | In situ patterning and controlling living cells by utilizing femtosecond laser | |
JP5879942B2 (ja) | 細胞培養基材の製造方法、細胞培養基材、およびそれを用いた細胞シートの製造方法 | |
JP5895465B2 (ja) | 細胞培養容器の製造方法 | |
WO2020071332A1 (ja) | 細胞培養器具および細胞培養器具の製造方法 | |
Yu et al. | Microprocessing on single protein crystals using femtosecond pulse laser | |
Hidai et al. | Self-standing aligned fiber scaffold fabrication by two photon photopolymerization | |
Wu et al. | A highly reproducible micro U‐well array plate facilitating high‐throughput tumor spheroid culture and drug assessment | |
WO2004076610A1 (ja) | 細胞培養用マイクロチャンバー加工装置及び方法 | |
Ho et al. | Printing of woodpile scaffold using fresnel lens for tissue engineering | |
JP7386999B2 (ja) | 生体細胞によってコロニー形成される生体適合性ポリマーからなる3dスキャフォールド、及びその製造 | |
Hashamdar et al. | Micro texturing and laser irradiation, two stimulus of growth and differentiation to neural like cell on the PMMA polymer | |
Nakayama et al. | Photocontrol of Cell Adhesion and Proliferation by a Photoinduced Cationic Polymer Surface¶ | |
Deka et al. | Dynamic photopatterning of cells in situ by Q-switched neodymium-doped yttrium ortho-vanadate laser | |
Noguchi et al. | Cell patterning on photocrosslinkable polymer films with micropatternable surfaces | |
JP2004321065A (ja) | 細胞の培養方法、細胞の培養装置、細胞組織の培養に使用される立体フレームの形成方法、細胞組織の培養に使用される立体フレームの形成装置、及び細胞組織の培養に使用される立体フレーム |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190930 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20190930 |
|
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20191017 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191119 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200115 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200318 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200602 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200702 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6732313 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |