JP6709216B2 - 金属錯体製剤 - Google Patents

Description

本発明は、小過剰の遊離キレート剤をさらに含む大環状キレート剤のランタニド金属錯体の製剤の調製方法に関する。本方法は、規定の過剰のキレート剤の添加前に、固相結合スカベンジャーキレート剤を使用して、過剰のランタニド金属イオンを除去する。また、提供されるのは、ＭＲＩ造影剤の調製方法、並びに本方法において有用な固相結合キレート剤メグルミン塩である。

ランタニド金属、特にガドリニウムの金属錯体は、インビボでの医用画像の分野において、ＭＲＩ造影剤として興味深い。ガドリニウムの金属錯体に基づくＭＲＩ造影剤は詳しく総説されている［例えば、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１２，７５１−７７８（２００５）及びＡｉｍｅ ｅｔ ａｌ，Ａｄｖ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５７，１７３−２３７（２００５）を参照されたい］。

しかし、遊離ガドリニウムイオンは、インビボで著しい毒性を示す。米国特許第５，８７６，６９５号は、カルシウムとの錯体のように「弱い金属キレート錯体」であるガドリニウム金属錯体の製剤中に添加剤を含むことにより、この問題に対処している。この考えは、過剰の「弱い金属キレート錯体」が、偶発的に遊離又は存在する可能性がある任意のガドリニウムイオンと効率的に錯形成し、したがって、ＭＲＩ造影組成物の安全性を向上させるというものである。

欧州特許第２５１３０４３号には、ガドリニウムが、適宜金属配位基で官能化された陽イオン交換樹脂と錯化するガドリニウム金属錯体の調製方法が開示されている。固相結合したガドリニウムは、続いてアミノカルボン酸キレート剤と反応し、所望のガドリニウム錯体を遊離する。任意の過剰のガドリニウムは、固相と結合したままである。

欧州特許第２２４２５１５号には、大環状キレートとランタニドとの錯体及び０．００２％〜０．４％の間の１ｍｏｌ／ｍｏｌ量の遊離大環状キレートを含む、液体医薬製剤を調製するためのプロセスが開示されており、プロセスは、以下の連続するステップを含む。
ｂ）大環状キレートとランタニドとの錯体、及び賦形剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］（式中、Ｌは大環状キレートであり、Ｘ及びＸ’は、特にカルシウム、ナトリウム、亜鉛及びマグネシウムから無関係に選ばれる金属イオンである。）の形でない遊離大環状キレート、及び遊離ランタニドを含む液体医薬組成物を、遊離大環状キレートの溶液及び遊離ランタニドの溶液を混合することにより調製し、それによって、大環状キレートによるランタニドの錯化が得られ、遊離大環状キレートの量及び遊離ランタニドの量は、すべてのランタニドが錯化されるような量ではないステップと、
ｃ）ステップｂ）において得られた医薬製剤中の遊離ランタニドの濃度Ｃ_{lan l}を測定し、遊離大環状キレートの濃度Ｃ_{ch l}は０に等しいステップと、
ｄ）第１に、ステップｂ）において得られた製剤に、必要な遊離大環状キレートの量を加えることで、Ｃ_{ch l}及びＣ_{lan l}を調整して、遊離ランタニドの錯化を完了し、それによって、Ｃ_{lan l}＝０を達成し、及び、
第２に、Ｃ_{ch l}＝Ｃ_{t ch l}（式中、Ｃ_{t ch l}は、最終的な液体医薬製剤中の遊離大環状キレートの目標濃度であり、０．００２％〜０．４％ ｍｏｌ／ｍｏｌの間の範囲で選択される。）を達成し、
最終的な液体医薬製剤中の遊離大環状キレートの量は、最終的な液体医薬製剤中の錯化された大環状キレートの量に対する遊離大環状キレートの割合に対応するステップ。

欧州特許第２２４２５１５号には、この方法が、好ましくは、最終的な液体医薬製剤中の遊離大環状キレートＣ_{t ch l}の理論上の目標濃度を測定する先行するステップａ）をさらに含むことが教示されている。

米国特許出願公開第２０１２／００８２６２４号には、医薬製剤が粉末状で得られることを除いて、欧州特許第２２４２５１５号と同様のプロセスが開示されている。

欧州特許第２２４２５１５号及び米国特許出願公開第２０１２／００８２６２４号はいずれも、工業的規模の医薬製造プロセスについては、秤量のみで必要な正確度で０．１ｍｏｌ％の遊離大環状キレート剤の添加を実現することが困難であることが強調されている。これは、含まれるキレート剤の量に１０００倍の差があること、さらに、キレート剤の吸湿性によるとされた。特許請求の範囲に記載の発明は、上述の通り、第１に、過剰のランタニド金属イオンとの金属錯化を行い、次いで、第２に、未錯化の過剰のランタニドの濃度を正確に測定するものである。その測定値は、続いて、過剰のランタニドと錯形成し、且つ所望の０．１％モル過剰の大環状キレートを得るために、追加のキレート剤をどのくらい加えなければならないか正確に計算するために使用される。

欧州特許第２２４２５１５号の参考例３には、ｐＨ６〜７の水中、８０℃でのＤＯＴＡ（１０ｇ、２５ｍｍｏｌ）と化学量論量の酸化ガドリニウム（Ｇｄ₂Ｏ₃、１２．５ｍｍｏｌ）との反応により、Ｇｄ−ＤＯＴＡを調製する実験室規模の調製が含まれる。次いで、ｐＨは５に調整され、残留遊離ガドリニウムは、Ｃｈｅｌｅｘ樹脂と２時間撹拌し、続いて濾過することにより除去される。欧州特許第２２４２５１５号には、次いで、Ｇｄ−ＤＯＴＡ錯体をエタノール水溶液から沈殿させ、８０％の単離収率の白色粉末が得られることが教示されている。欧州特許第２２４２５１５号には、０．００２％〜０．４％ ｍｏｌ／ｍｏｌの間の範囲の過剰の大環状キレート剤を有する液体医薬組成物を、特に工業的規模で提供するために、参考例３の方法をどのように適合させることができるのか教示されていない。さらに、欧州特許第２２４２５１５号の実施例３により教示されるＣｈｅｌｅｘ樹脂の使用はナトリウムイオンを遊離し、これは、別の精製ステップが行われない限り、生成物を汚染する。欧州特許第２２４２５１５号の実施例３はまた、液体医薬製剤を調製する工業的な製造プロセスには不適当である精製ステップ及び単離ステップを必要とする特定のガドリニウム錯体の調製についても記載している。

国際公開第２０１４／１１４６６４号は、まず、シクレンからのＤＯＴＡの合成、続いて、再結晶並びに陽イオン及び陰イオン交換クロマトグラフィーの両方による多段階の精製を含む、Ｇｄ−ＤＯＴＡメグルミン（ガドテル酸メグルミン）を調製するためのプロセスを提供する。次いで、精製されたＤＯＴＡをＧｄ₂Ｏ₃と反応させてＧｄ−ＤＯＴＡ錯体を得、続いて、メグルミンを添加して所望の生成物を得る。しかし、国際公開第２０１４／１１４６６４号には、０．１％過剰のＤＯＴＡの工業的規模の製造を実現する方法が教示されていない。

国際公開第２０１４／１６１９２５号には、Ｇｄ−ＤＯＴＡ及び類似の錯体を工業的規模で調製するとき、使用前にキレート剤の水分含有量を分析し、それに応じて使用するモル量を補正することが必要であることが教示されている。国際公開第２０１４／１６１９２５号には、ＤＯＴＡの水分含有量が相対湿度条件と共に変化することが指摘されている。

過剰のこのようなキレート剤を取り入れた大環状キレート剤のランタニド金属錯体の製剤を調製する代替方法が依然として必要とされている。これらの方法は、好ましくは、工業的規模の医薬製造に適しているべきであり、このような製剤を含むＭＲＩ造影剤の提供にも適しているべきである。

欧州特許出願公開第２７９９０９０号

本発明は、液体医薬製剤の調製方法を提供し、製剤は、ランタニド金属と大環状キレート剤との金属錯体を、金属錯体の０．００２〜０．４ｍｏｌ／ｍｏｌ％の間の範囲の量の未錯化形キレート剤と共に含む。このような製剤は、ＭＲＩ造影剤の提供において有用である。

本方法は、先行技術の測定ステップ及び調整ステップの必要性を回避し、これは、時間及び労力の両方に関して有用な単純化である。

その代わりに、本方法は、固相結合スカベンジャーキレート剤を用いることにより、過剰のランタニドイオンが存在しなくてもランタニドキレート剤金属錯体が得られる方法を提供する。さらに、ランタニドキレート剤錯体は水溶液中に維持されるので、錯体の水分含有量の補正は不要である。本プロセスは、遊離ランタニドイオンを含まないランタニド金属錯体の中間溶液を提供するので、規定の過剰の遊離キレート剤を有する所望の製剤を与えるために添加する過剰の大環状キレート剤の量を容易に計算することができる。

本発明はまた、以下で説明するトランスメタル化によって、ランタニド錯化及びその後のスカベンジャーキレート剤による処理が、カルシウムなどの配位金属イオンに基づく何らかの不純物のキレート剤からの除去において効果的であるという利点も有する。

本発明の方法はまた、メグルミン塩の形の樹脂結合スカベンジャーキレート剤も提供する。これは、ランタニドの錯化後に、ナトリウムイオンではなくメグルミニウム（ｍｅｇｌｕｍｉｎｉｕｍ）イオンが遊離されるという大きな利点を有する。これは、生成されるランタニド金属錯体のナトリウムイオン含有量が最小限に抑えられるという特定の利点を有する。

本発明の方法は、工業的規模で実施することができて、且つ樹脂結合スカベンジャーキレート剤は、医薬製剤の別のバッチの製造に適した材料を再生するために、使用後に適宜リサイクルすることができるという別の利点を有する。

第１の態様において、本発明は、液体医薬製剤の調製方法を提供し、製剤は、ランタニド金属と大環状キレート剤との金属錯体を、金属錯体の０．００２〜０．４ｍｏｌ／ｍｏｌ％の間の範囲の量の未錯化形キレート剤と共に含み、プロセスは、以下のステップを含む。
（ｉ）適した溶媒中で、キレート剤と過剰のランタニド金属とを錯化して、過剰のランタニドを含む金属錯体の第１の溶液を与えるステップと、
（ｉｉ）溶液を、固相結合スカベンジングキレート剤と１回又は複数回接触させることにより、ステップ（ｉ）の第１の溶液から過剰のランタニドを除去して、過剰のランタニドをスカベンジングキレート剤と錯化させるステップと、
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）の第１の溶液から固相を分離して、過剰のランタニドを含まない金属錯体を含む第２の溶液を与えるステップと、
（ｉｖ）ステップ（ｉｉｉ）の第２の溶液に対して０．００２〜０．４ｍｏｌ／ｍｏｌ％の間の範囲の未錯化形キレート剤を添加して、液体医薬製剤を与えるステップと、
未錯化形キレート剤は、配位金属イオンを含まない。

「キレート剤」という用語は、これらの従来の意味を有し、通常、５員、６員又は７員キレート環（好ましくは、５員又は６員のこのような環）が、（金属ドナー原子を結合する炭素原子又は非配位のヘテロ原子のいずれかの非配位の骨格を有することによる）配位の結果生じるように配列した複数の金属ドナー原子を含む配位金属錯体を形成する配位子を指す。「大環状」という用語は、配位化学の分野におけるその従来の意味を有し、少なくとも一部の金属ドナー原子が環系の一部として共有結合されたキレート剤を指す。

「未錯化形キレート剤」という語句は、「遊離キレート剤」、すなわち、どのような配位金属イオンも持たないことを指す。したがって、未錯化形キレート剤は、どのような配位したランタニド又は他の金属イオンも持たず、したがって、その後の金属錯化のために完全に利用できる。「未錯化形キレート剤」は、金属ドナー基、例えば、カルボン酸の塩として存在するときのように、イオンの形の金属イオンを含んでもよい。

「固相結合スカベンジングキレート剤」という語句は、ランタニド錯化に使用される溶媒に不溶の固相材料に共有結合されたキレート剤を指す。結合したキレート剤は、溶液中の遊離金属イオンと錯形成し、したがって、溶液から任意のこのような金属イオンを除去又は「スカベンジング」することができる。スカベンジャーキレート剤は、「大環状キレート剤」とは異なるように選ばれ、したがって、ランタニド金属の生成定数が「大環状キレート剤」よりも適切に小さく、本特許請求の範囲の大環状キレート剤のランタニド金属錯体からランタニド金属イオンを置換できないように適切に選ばれる。スカベンジャーキレート剤は、好ましくは、溶液中の遊離金属イオンを捕捉する反応速度が速いように選ばれる。その理由から、直鎖状（すなわち、非大環状）のスカベンジャーキレート剤が好ましい。固相に結合しているので、スカベンジャーキレート剤は、それが接触している溶液から、濾過及び任意選択の洗浄により容易に分離される。適した固相材料には、合成ポリマー及びコポリマーが含まれる。

欧州特許第２２４２５１５号の実施例３の方法は、ナトリウムイオンが放出されるであろう問題を有する。このようなナトリウムイオンは、液体医薬製剤の浸透圧を増すであろう。それは、造影剤の製造において使用される中間溶液又は組成物にとって望ましくないが、その理由は、高浸透圧造影剤が、軟組織の浮腫、炎症及び組織損傷に結合するからである［Ｃｏｈａｎ ｅｔ ａｌ，Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，２００（３），５９３−６０４．ｄｏｉ：１０．１１４８／ｒａｄｉｏｌｏｇｙ．２００．３．８７５６８９９（１９９６）］。したがって、造影剤の製造プロセスは、製品の浸透圧に影響を与えるイオン種を導入すべきでない。

ＤＯＴＡの場合、ガドテル酸のナトリウム塩は結晶化しやすいことが知られており［Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３２（１６），３５０１−３５０８（１９９３）］、したがって、ＧｄＤＯＴＡ−メグルミンがＮａＧｄＤＯＴＡとして沈殿するリスクを最小限に抑えるために、ナトリウムレベルをできるだけ低く保つことが重要である。

「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」又は「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」という用語は、本出願を通じてこれらの従来の意味を有し、薬剤又は組成物は、記載の必須の特徴又は成分を有していなければならないが、その他は、追加で存在してもよいことを意味する。「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、好ましいサブセットとして、他の特徴又は成分が存在しない記載の成分を組成物が有することを意味する「実質的に〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」を含む。

ステップ（ｉ）の錯化に適した溶媒は当技術分野において既知であり［Ｔｈｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃｏｎｔｒａｓｔ Ａｇｅｎｔｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ Ｉｍａｇｉｎｇ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｍｅｒｂａｃｈ，Ｌ．Ｈｅｌｍ ＆ Ｅ．Ｔｏｔｈ（Ｅｄｓ），Ｗｉｌｅｙ（２０１３）］、好ましくは水性である。大環状キレート剤（例えば、ＤＯＴＡ）によるランタニドの錯化は、ゆっくりと熟成して、最終的に熱力学的に安定な金属錯体を与える幾分安定な初期錯体を伴う多段階プロセスである。ステップ（ｉ）では、当分野で既知の通り、ステップ（ｉｉ）に進む前に、例えば、加熱、長時間の反応時間、ｐＨの上昇、又はこれらの組合せにより、安定なランタニド錯体が生成されたことを確認することが好ましい［Ｍｏｒｅａｕ ｅｔ ａｌ，Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．，１０（２０）， ５２１８−３２（２００４）］。

ステップ（ｉ）のランタニド金属の過剰量は、ランタニド大環状キレート剤金属錯体の化学量論組成を知って、モル比を計算することにより得られる。これは、通常、１：１錯体である。このような情報は、Ｔｈｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃｏｎｔｒａｓｔ Ａｇｅｎｔｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ Ｉｍａｇｉｎｇ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｍｅｒｂａｃｈ，Ｌ．Ｈｅｌｍ ＆ Ｅ．Ｔｏｔｈ（Ｅｄｓ），Ｗｉｌｅｙ（２０１３）に、ガドリニウム錯体については、Ｐｏｒｔら［Ｂｉｏｍｅｔａｌｓ，２１，４６９−４９０（２００８）］により、ＤＯＴＡ錯体については、Ｖｉｏｌａ−Ｖｉｌｌｅｇａｓら［Ｃｏｏｒｄ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，２５３，１９０６−１９２５（２００９）］により記載されている。使用されるランタニド及び当該キレート剤の両方の％化学的純度も考慮される。

ステップ（ｉｉ）の接触は、「第１の溶液」の全体がＣｈｅｌｅｘ樹脂に曝されるように適切に行われる。これは、２つの主要な方法、又はそれらの組合せによって行うことができる。第１の選択肢は、固相樹脂を「第１の溶液」と混合することである。或いは、固相をカラムとして提供することができ、「第１の溶液」はカラムを通じて溶出される。これは、それ自体はクロマトグラフ法ではないが、「第１の溶液」をＣｈｅｌｅｘ樹脂に曝す便利な方法である。次いで、ステップ（ｉｉｉ）の分離は、ランタニド結合樹脂を除去するために溶液を濾過するか、又はカラム溶出により溶出液をそれぞれ回収することによって達成される。いずれの選択肢についても、「第１の溶液」をＣｈｅｌｅｘ樹脂に複数回曝すことができる。好ましくは、濾過した樹脂又は固相カラムのいずれかを適した溶媒で洗浄して、「第２の溶液」のより完全な回収を確実にすることができる。

ステップ（ｉｖ）の添加は、好ましくは、第１又は第２の溶液のいずれかにおける遊離ランタニドの濃度／量の事前のインプロセス分析なしで行われる。それは、このようなステップが本方法には不要であるからである−ステップ（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の除去及び分離は、既知（すなわち、実質上ゼロの）濃度の遊離ランタニドを含む「第２の溶液」を与える。したがって、ステップ（ｉｖ）の添加は、ステップ（ｉ）の大環状キレート剤の出発モル量に基づいて、ステップ（ｉ）の錯化反応において仮定した１００％変換に基づいて計算された「未錯化形キレート剤」の量に基づいて行われる。その１００％変換は、このような反応の効率に関する当技術分野において既知のものと一致する。遊離キレート剤は、固体として、又は溶液として、好ましくは溶液として添加することができる。ステップ（ｉ）を実施するために大環状キレート剤の溶液を調製するときは、最も好ましい方法は、ランタニドの添加前にその溶液から適切な体積部分を取り除くものである（例えば、１０００Ｌの反応体積又は同等物から約１Ｌを取り除く）。次いで、この体積部分は、ステップ（ｉｖ）の添加に好都合に使用される。この手法は、複数の溶液の調製及び／又は純度もしくは水分を補正するための複数の計算の実施を不要にする。

第１の態様の方法は、実験室、パイロットプラント又は工業的な製造規模での実施に適している。本方法は、１ｋｇ〜８００ｋｇ、好ましくは１００ｋｇ〜６５０ｋｇのスケールでのキログラムスケールの製造に特に適している。

第１の態様の方法は、プロセスの一部として、カルシウム−ＤＯＴＡ錯体として大環状キレート剤（例えば、ＤＯＴＡ）中に存在する多くの配位した不純物金属（カルシウムなど）がガドリニウムによって置換され、次いで、その後のステップ（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）のスカベンジャーキレート剤処理によって除去されるという利点を有する。したがって、ステップ（ｉ）の過剰のランタニドはまた、好ましくは、任意の配位した不純物金属をキレート剤から置換し、置換される不純物金属は、ランタニドよりも小さい、大環状キレート剤との生成定数を有する。それは、上述の通り、ランタニド錯化が、熱力学的生成物−ランタニド金属錯体が得られるような「熱力学的条件」下で行われるからである。

これは、追加の大環状キレート剤精製ステップを不要にするという利点を有する。したがって、過剰のランタニドは、Ｃａ−ＤＯＴＡ及びガドリニウムイオンのスキーム１に示すように、トランスメタル化反応を誘発する。

スキーム１：遊離カルシウムイオンを生じるＣａＤＯＴＡのトランスメタル化
わずかに過剰のガドリニウムがＤＯＴＡを完全に錯化させてＧｄ−ＤＯＴＡを与え、ＤＯＴＡ配位不純物金属イオン（カルシウムなど）が、あまり有利でない熱力学的安定性により、遊離イオンとして溶液中に効果的にトランスメタル化される。

様々なＤＯＴＡ−金属イオン錯体のリスト及びこれらの熱力学的安定性については、表１を参照されたい。

したがって、Ｇｄ−ＤＯＴＡよりも安定度定数が小さい任意の配位金属イオン（カルシウム、マンガン、亜鉛、銅又はマグネシウムなど）は、Ｇｄのトランスメタル化によって遊離され、次いで、ステップ（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）において、スカベンジャーキレート剤により除去されるであろう。

好ましい実施形態
第１の態様の方法において、ステップ（ｉ）のランタニド金属の過剰量は、好ましくは０．０１〜５、より好ましくは０．０１〜１、最も好ましくは０．０５〜０．５ｍｏｌ／ｍｏｌ％である。

Ｃｈｅｌｅｘ−１００樹脂が使用されるとき、Ｃｈｅｌｅｘ樹脂は、カルシウムよりもガドリニウムに対して高い親和性を有する。これは、ステップ（ｉ）の錯化反応において大過剰のガドリニウムを使用すると、大過剰のスカベンジャー樹脂の添加が必要になる（第１に遊離ガドリニウムを除去するため、第２に遊離カルシウム（又は同様の金属イオン）を除去するため。）であろうから、あまり効率的でないスカベンジングプロセスにつながることを意味する。したがって、ステップ（ｉ）の錯化反応において、ごくわずかに過剰のガドリニウムを使用することが有利である。

大環状キレート剤が、上述の通り、配位したカルシウム又は同様の金属イオンを含むと考えられる場合は、範囲（０．５Ｍ ＧｄＤＯＴＡ溶液中、約０．０１〜０．１ｍｏｌ％又は１０〜１００ｐｐｍ）のごくわずかに過剰のガドリニウムが好ましい。このような範囲は、カルシウム（金属）除去に十分なスカベンジャー能力（ｓｃａｖｅｎｇｅｒ ｃａｐａｃｉｔｙ）を確保するには十分低いが、任意のＣａ−ＤＯＴＡ錯体（又は関連する化学種）の完全なトランスメタル化を確実にするには十分高い。

この範囲内（約０．０１〜０．１ｍｏｌ％）の最低レベルの過剰のランタニド金属は、遊離ランタニドイオンの存在について陽性試験が観察されるまで、このようなランタニドのアリコートを漸増的に添加することによって達成することができる。このような「スポット試験」は、存在／非存在の質問に対して、はい／いいえの答えを与えるが、遊離ランタニドの濃度に関する情報はもたらさない。スポット試験は、当分野で既知の通り、キシレノールオレンジを用いた目で見える呈色を利用して行うことができる［Ｂａｒｇｅ ｅｔ ａｌ，Ｃｏｎｔｒａｓｔ Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，１，１８４−１８８（２００６）。Ｂａｒｇｅらは、遊離Ｇｄ³⁺を示すオレンジ色の呈色の目視による検出は、１０μＭ以下までの濃度のＧｄ³⁺の検出に効果的であることを教示している。或いは、ガドリニウムについては、過剰のガドリニウムは、当分野で既知の通り、キシレノールオレンジ法又はＡｒｓｅｎａｚｏ ＩＩＩ法により測定することができる［それぞれ、Ｂａｒｇｅ ｅｔ ａｌ，Ｃｏｎｔｒａｓｔ Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，１，１８４−１８８（２００６）及びＣｌｏｇｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．，６９７，１０１−１０８（２０１１）］。キシレノールオレンジ及びＡｒｓｅｎａｚｏ ＩＩＩは、例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから市販されている。遊離ガドリニウムがないことをスポット試験が示す場合は、さらにガドリニウムを添加することができる。さらに高いレベル（＞０．１ｍｏｌ％から５ｍｏｌ％まで）の過剰のランタニドは、秤量のみで実現することができる。

第１の態様の方法において、未錯化形キレート剤は、大環状ランタニド錯体に対して、好ましくは０．０２５〜０．２５、より好ましくは０．０５〜０．２０、最も好ましくは０．１０〜０．１５ｍｏｌ／ｍｏｌ％の間の範囲の量である。未錯化形キレート剤は、ランタニド金属イオンを適切に含まず、また、好ましくは、配位したカルシウム、亜鉛及びマグネシウムイオンも含まない。

第１の態様の方法において、ランタニド金属は、好ましくは、ガドリニウム、プラセオジム、ジスプロシウム、ユウロピウム又はツリウムであり、最も好ましくはガドリニウムである。

大環状キレート剤は、好ましくは七座又は八座であり、より好ましくはＮ及び／又はＯドナー原子を含む。ドナー原子は、好ましくは、以下により提供される。カルボキシレート、アミン、アルコール又はホスホネート供与基。大環状キレート剤は、より好ましくは、アミノカルボン酸タイプのものである。大環状キレート剤が、アミノカルボン酸クラスのものであるとき、このようなキレート剤は、好ましくは、以下を含む。ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ又はＰＣＴＡ。大環状キレート剤は、最も好ましくは、ＤＯＴＡ又はその塩を含む。

生体医用画像におけるＤＯＴＡ及びその金属錯体は、Ｓｔａｓｉｕｋ及びＬｏｎｇにより記載されている［Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．，４９，２７３２−２７４６（２０１３）］。

第１の態様の方法において、ランタニド金属はガドリニウムであり、且つ大環状キレート剤はＤＯＴＡを含むことが好ましい。最も好ましくは、ガドリニウム−ＤＯＴＡ錯体は、ガドリニウム−ＤＯＴＡのメグルミン塩を含む。

スカベンジャーキレート剤は、好ましくはイミノ二酢酸（ＩＤＡ）、ＥＤＴＡ又はＤＴＰＡを、より好ましくはイミノ二酢酸を含む。好ましい固相結合スカベンジングキレート剤は、Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）１００であり、これは、キレート剤ＩＤＡが結合したスチレン−ジビニルベンゼンコポリマーである。Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）１００は、ナトリウム塩又はアンモニウム塩の形でＢｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから市販されている。市販業者は、所与の量の金属を除去するために使用する樹脂の適切な量に関する情報を提供している。中性のｐＨでは、Ｃｈｅｌｅｘは陽イオン交換樹脂として機能するため、Ｇｄ（ＤＯＴＡ）などの負に荷電したランタニド金属錯体に対する親和性がない。これには、このような錯体の固相への非特異的結合が最小限であり、したがって収率への影響が最小限であるという利点がある。

スカベンジングキレート剤は、好ましくは、スカベンジングキレート剤のメグルミン塩として存在する。このような材料は第３の態様（下記）に記載されている。

ステップ（ｉ）のランタニド錯化プロセスは、通常、本質的に多段階である。ガドリニウムについては、まず、すべてのＧｄ₂Ｏ₃を溶解して、溶液中に遊離ガドリニウムイオンを与えるために、低ｐＨ（ｐＨ約２）が必要である。この低ｐＨでは、カルボキシレート基が部分的にプロトン化されているので、アミノカルボキシレートキレート剤（例えば、ＤＯＴＡ）のカルボキシレート基は、すべてのガドリニウムイオンを完全に錯化できない。次いで、塩基（好ましくはメグルミン）の添加によりｐＨを（約ｐＨ４〜５まで）高くして、カルボン酸陰イオンの生成を促進し、これは金属錯化を促進する。形成された初期のＧｄ−ＤＯＴＡ錯体は、実際にはビス−プロトン化され（ｂｉｓ−ｐｒｏｔｏｎａｔｅｄ）、次いで、ゆっくりと熟成して、最終的に熱力学的（及び動力学的）に安定性の高いＧｄ−ＤＯＴＡ錯体を与える［Ｍｏｒｅａｕ ｅｔ ａｌ，Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．，１０（２０），５２１８−５２３２（２００４）］。熟成プロセスは、より高いｐＨ及び加熱により促進される（通常、約ｐＨ５で数時間加熱して反応が完了する）。好ましくは、７を超えるｐＨは、あらゆるガドリニウムイオンを加水分解して、その後にＧｄ₂Ｏ₃が再生する原因となるリスクがあるので避ける。

第１の態様のランタニド金属錯体をメグルミン塩として得るとき、ステップ（ｉ）の錯化は、好ましくは、メグルミンを用いてｐＨを４．５〜５．５に調整して完了させる。

ステップ（ｉｉ）の除去は、好ましくはｐＨ４．０〜６で、より好ましくは４．５〜５．５で行われ、約ｐＨ５が理想的である。

ステップ（ｉｖ）の添加は、好ましくは、まず過剰のキレート剤を添加し、次いで、中性のｐＨ（約ｐＨ７．０〜７．４）まで中和することにより行われる。所望のランタニド大環状錯体がメグルミン塩であるとき、この中和は、好ましくは、メグルミンを用いて行われる。

本発明の大環状キレート剤は、様々な供給業者から市販されている。ＤＯＴＡは、Ｄｅｓｒｅｕｘの方法により合成することもできる［Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９，１３１９−１３２４（１９８０）］。大環状キレート剤の合成についてさらに詳しくは、Ｋｏｔｅｌらにより記載されている［Ｔｈｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃｏｎｔｒａｓｔ Ａｇｅｎｔｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ Ｉｍａｇｉｎｇ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｍｅｒｂａｃｈ，Ｌ．Ｈｅｌｍ ＆ Ｅ．Ｔｏｔｈ（Ｅｄｓ），Ｗｉｌｅｙ（２０１３）の第３章、８３−１５５頁］。

メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）は、様々な供給業者から市販されている。好ましくは、医薬グレードの材料が使用される。

第２の態様において、本発明は、
（ａ）第１の態様の方法を実施して、そこに記載の液体医薬製剤を得るステップと、
（ｂ）適宜、ステップ（ａ）の液体医薬製剤を生体適合性担体で希釈するステップと、
（ｃ）ステップ（ｂ）の製剤を医薬として許容される容器又はシリンジに分注して、分注された容器又はシリンジを与えるステップと、
（ｄ）無菌製造条件下でステップ（ａ）〜（ｃ）、或いはステップ（ｃ）の分注された容器又はシリンジの最終滅菌のいずれかを実施して、哺乳動物の投与に適した形の医薬として許容される容器又はシリンジ内のＭＲＩ造影剤を与えるステップと
を含む、ＭＲＩ造影剤の調製方法を提供する。

第２の態様における液体医薬製剤、ランタニド、大環状キレート剤及びステップ（ａ）の方法の好ましい実施形態は、（上述の）第１の態様に記載の通りである。

「造影剤」という用語は、インビボでの医用画像の分野におけるその従来の意味を有し、且つ哺乳動物の投与に適した形の薬剤を指し、これは、被験体のみを撮像して得られるであろうよりも鮮明な、関心のある領域又は臓器内の画像を提供するのを助ける。「ＭＲＩ造影剤」は、通常、哺乳動物の投与に適した常磁性又は強磁性物質であり、これは、被験体内の撮像のための関心領域における関連する核（例えば、¹Ｈ ＮＭＲでは¹Ｈ）のＴ１及び／又はＴ２緩和時間を短くする。

「被験体」という用語により、哺乳動物生体内、好ましくは無処置の哺乳動物体内、より好ましくは生きている被験者を意味する。「哺乳動物の投与に適した形の」という語句により、無菌、パイロジェンフリーであり、毒性又は有害作用を生じる化合物がなく、生体適合性のｐＨ（約ｐＨ４．０〜１０．５）で処方される組成物を意味する。このような組成物には、インビボで塞栓を引き起こすリスクがある恐れのある微粒子がなく、生体液（例えば、血液）との接触時に沈殿が起こらないように処方される。このような組成物はまた、生物学的に適合性の賦形剤のみを含み、好ましくは等張性である。

他のインビボでの造影剤と同じく、造影剤は、撮像される哺乳動物の被験体に対して最小限の薬理効果を有するように設計される。好ましくは、造影剤は、低侵襲的に、すなわち、医学の専門的知識のもとで行われるとき、被験体への重大な健康上のリスクを伴わずに、哺乳動物の身体に投与することができる。このような低侵襲な投与は、好ましくは、局所又は全身麻酔薬を必要としない、被験体の末梢静脈への静脈内投与である。

「生体適合性担体」という用語により、組成物が生理学的に許容される、すなわち、毒性又は過度の不快感を伴わずに哺乳動物の身体に投与することができるように、流体、特に液体を意味する。生体適合性担体は、適切には、無菌、パイロジェンフリーの注射用水；（注射用の最終製品が等張性となるように有利にバランスさせてもよい）生理食塩水などの水溶液；生体適合性の緩衝剤を含む緩衝水溶液（例えば、リン酸緩衝液）；１以上の浸透圧調節物質（例えば、血漿陽イオンと生体適合性の対イオンとの塩）、糖類（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセロール）、又は他の非イオン性ポリオール材料（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液などの注射可能な担体液である。好ましくは、生体適合性担体は、パイロジェンフリーの注射用水（ＷＦＩ）、等張食塩水又はリン酸緩衝液である。

「無菌製造」という語句は、無菌製造、すなわち非発熱性条件下、例えば、クリーンルーム環境において関連するプロセスステップを実施することを指す。「無菌化（ｓｔｅｒｉｌｉｓｉｎｇ）」又は「滅菌（ｓｔｅｒｉｌｉｓａｔｉｏｎ）」という用語は、これらの従来の意味を有し、無菌、パイロジェンフリーの組成物を得るために微生物を破壊するプロセスを指す。「最終滅菌」という語句はその従来の意味を有し、ＧＭＰ（優良製造規範）に先行するステップを実施するが、プロセス全体において、できるだけ遅く滅菌ステップを実施することを指す。成分及び試薬は、以下を含む、当技術分野において既知の方法により滅菌することができる。滅菌濾過、例えば、ガンマ線照射、オートクレーブ処理、乾熱処理又は（例えば、エチレンオキシドを用いる）化学処理或いはこれらの組合せを利用する最終滅菌。「オートクレーブ処理」という用語はその従来の意味を有し、過熱水蒸気を使用して滅菌する１つの特定の滅菌方法を指す。オートクレーブ処理及び他の滅菌方法は、Ａｃｈｉｅｖｉｎｇ Ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｎ．Ｈａｌｌｓ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９９４）に記載されている。第２の態様の方法において、最終滅菌が好ましい。最終滅菌の好ましい方法はオートクレーブ処理である。

「分注された容器又はシリンジ」という用語は、充填された容器、すなわち、組成物のアリコートが分注された容器、すなわち、分注されたバイアルを指す。

第２の態様の方法における使用に適した容器、バイアルとクロージャー及びシリンジは医薬グレードであり、広く市販されている。

第３の態様において、本発明は、固相結合スカベンジングキレート剤を提供し、固相結合スカベンジングキレート剤は、スカベンジングキレート剤のメグルミン塩として存在する。

第３の態様の固相結合スカベンジングキレート剤の好ましい実施形態は、（上述の）第１の態様に記載の通りである。第３の態様の固相結合スカベンジングキレート剤は、好ましくは、イミノ二酢酸（ＩＤＡ）を含む。

スカベンジャーキレート剤が、メグルミン塩として使用されるとき、このような材料は、対イオン（例えば、Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）−１００のナトリウム塩又はアンモニウム塩）を交換する従来のイオン交換クロマトグラフィー技術、インキュベーション又は過剰のメグルミン溶液による溶離により調製することができる。次いで、固相は、適宜使用前に水分含有量を減少させてもよいが、湿った形で適切に使用される。

或いは、プロトン化した形の樹脂（例えば、実施例１と同様の手順で、市販のＣｈｅｌｅｘを強酸で洗浄することにより得られる。）を加えることで、メグルミニウムスカベンジャー樹脂をｉｎ ｓｉｔｕで生成させることもできる。次いで、ヒドロキソニウムＣｈｅｌｅｘ樹脂は、メグルミンを含む錯化反応混合物中、ｉｎ ｓｉｔｕで対応するメグルミニウムの形を生じる。

このようなメグルミン樹脂は、ランタニド金属錯体のメグルミン塩を調製するとき、生成物のナトリウムイオン／塩含有量が減少するという特定の利点を有する。したがって、市販のＣｈｅｌｅｘ（登録商標）樹脂中のスカベンジャーキレート（ＩＤＡ）の対イオンはナトリウムであり、したがって、捕捉されるすべてのガドリニウムイオンについて、３個のナトリウムイオンが反応混合物中に放出される。ナトリウム汚染を避けるために、Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）樹脂は、すべてのナトリウムイオンがメグルミニウムイオンと交換されるように調製することができる。その結果、スカベンジャー樹脂にガドリニウムイオンが捕捉されるとき、３個のメグルミニウムイオンが放出される。

使用後に、結合した金属イオンを有するスカベンジャーキレート樹脂は、適宜、その後に再使用するために、過剰のメグルミン又は他の対イオンで処理することにより再生されてもよい。Ｃｈｅｌｅｘの場合、標準的な再生方法は、市販業者が提供する取扱説明書に記載されている。ガドリニウムの完全な除去は、樹脂の水性酸洗浄後の溶出液のＩＣＰ−ＡＥＳ又はＩＣＰ−ＭＳにより、又は上述の「スポット試験」により確認されるであろう。

第４の態様において、本発明は、第１の態様の医薬製剤の調製方法における第３の態様の固相結合スカベンジングキレート剤の使用、又は第２の態様のＭＲＩ造影剤の調製方法を提供する。

第４の態様の固相結合スカベンジングキレート剤の好ましい実施形態は、（上述の）第１の態様に記載の通りである。

ガドリニウムイオンが、ナトリウム（Ｎａ−Ｃｈｅｌｅｘ）イオン又はメグルミニウム（Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ）イオンのいずれかに置換され、塩化物イオン含有量が、Ｃｈｅｌｅｘ樹脂による塩化ガドリニウム標準液の処理に影響されないことを示す図である。 本発明の同じガドリニウム除去手順が、Ｇｄ−ＤＯＴＡ／過剰のガドリニウムの混合物に使用されたときに効果的であることを示す図である。図２はまた、遊離ＤＯＴＡが生成されないため、ｃｈｅｌｅｘはＧｄ−ＤＯＴＡからガドリニウムを除去できないことを示す。

本発明を以下に詳述される非限定的な実施例により説明する。実施例１は、本発明によるメグルミンスカベンジャーキレート剤樹脂の調製を提供する。実施例２は、２つの異なるＣｈｅｌｅｘ樹脂が、ＧｄＣｌ₃の標準液からガドリニウムイオンを首尾よく除去することを示す。樹脂のナトリウム形は、溶液のナトリウム含有量を増加させることが示され、樹脂のメグルミニウム形は、溶液のメグルミニウム含有量を増加させることが示される。

実施例３は、実施例２の２つの異なるＣｈｅｌｅｘ樹脂が、過剰の遊離ガドリニウムと共にＧｄ−ＤＯＴＡ錯体を含む組成物からガドリニウムイオンを首尾よく除去することを示す。実施例３はまた、クロマトグラム（図２）において、遊離ＤＯＴＡが存在しないので、Ｃｈｅｌｅｘ樹脂が、Ｇｄ−ＤＯＴＡ錯体からＧｄ³⁺を除去できないことを示す。

実施例４は、このような成分の混合物中のＧｄ−ＤＯＴＡ、遊離ＤＯＴＡ及びメグルミンを分析可能なＨＰＬＣ−ＣＡＤ法を提供する。

実施例５は、本発明による過剰のＤＯＴＡを含むＧｄ−ＤＯＴＡ錯体製剤の合成を提供する。

実施例６は、本発明による、スカベンジャー樹脂のメグルミン化のための方法を提供する。

略記
ＢＴ−ＤＯ３Ａ：１０−（２，３−ジヒドロキシ−１−ヒドロキシメチルプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸；
Ｃｙｃｌｅｎ：１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン；
ＤＯ３Ａ：１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸；
ＤＯＴＡ：１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸；
ＤＴＰＡ：ジエチレントリアミン五酢酸；
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸；
ＧＭＰ：優良製造規範；
ＨＰ−ＤＯ３Ａ：１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸−１０−（２−ヒドロキシプロピル）；
ＨＰＬＣ：高性能液体クロマトグラフィー；
ＨＰＬＣ−ＣＡＤ：ＨＰＬＣ荷電化粒子検出器；
ＩＣＰ−ＡＥＳ：誘導結合プラズマ原子発光分光法
ＩＣＰ−ＭＳ：誘導結合プラズマ質量分析法；
ＭｅＣＮ：アセトニトリル；
ｍｉｎ：分；
ＭＲＩ：磁気共鳴画像法；
ＮＯＴＡ：１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸；
ＰＣＴＡ：３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ−１，１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸；
ＷＦＩ：注射用水。

実施例１：メグルミン化（ｍｅｇｌｕｍｉｎｉｚｅｄ）Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）樹脂（「Ｍ ^eg −Ｃｈｅｌｅｘ」）の調製
焼結ガラスフィルター上のＣｈｅｌｅｘ−１００樹脂（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ；１００ｇ）を１Ｍ ＨＣｌ（１Ｌ）で４回に分けて４時間にわたり処理した。次いで、溶出液がｐＨ６．５になるまで樹脂を水で洗い、水（４００ｍＬ）中のメグルミン（１０ｇ）の溶液を１時間にわたり樹脂と平衡化させた。樹脂をｐＨ８になるまで再び水で洗い、次いで、濾過して真空下で１分間乾燥し、湿った樹脂を得た。この樹脂は、この形（「Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ」）で使用される。

実施例２：Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）樹脂を用いたガドリニウムイオンの除去
塩化ガドリニウム標準液を標準的なＣｈｅｌｅｘ（ナトリウムイオン形；「Ｎａ−Ｃｈｅｌｅｘ」又はメグルミン化Ｃｈｅｌｅｘ（実施例１；「Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ」）のいずれかで処理した。

それぞれの湿ったＣｈｅｌｅｘ（Ｎａ又はメグルミン）樹脂（０．５ｇ）に、５ｍＬのＧｄＣｌ₃標準液（１ｍｇ／ｍＬ）を加えた。次いで、懸濁液を３０℃で一晩、振盪台に置いたままにした。懸濁液の（実施例４の方法を用いた）ＨＰＬＣ−ＣＡＤ分析は、Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘで処理されたガドリニウム溶液のナトリウム汚染はなく、一方、Ｎａ−Ｃｈｅｌｅｘで処理された溶液のナトリウムイオン濃度は、はるかに高いことを示した。アルセナゾ色素試験は、どちらの溶液でも遊離ガドリニウムを示さなかった（この方法を用いた検出限界は８ｐｐｍである）。結果を図１に示す。

実施例３：Ｃｈｅｌｅｘ（登録商標）樹脂を用いたＧｄ−ＤＯＴＡ／過剰ＤＯＴＡ製剤からのガドリニウムイオンの除去
既知の過剰の遊離ガドリニウム（１６０μｇ／ｍＬ）を含むＧｄ−ＤＯＴＡ−メグルミン反応混合物（濃度〜３８０ｍｇ／ｍＬ）を、標準的な（Ｎａ−Ｃｈｅｌｅｘ）Ｃｈｅｌｅｘ又はメグルミン化（Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ）Ｃｈｅｌｅｘで処理した。

０．５ｇの湿ったＣｈｅｌｅｘ樹脂（Ｎａ−Ｃｈｅｌｅｘ又はＭ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ；実施例１）に、上述のＧｄ−ＤＯＴＡ−メグルミン／遊離Ｇｄ混合物の５ｍＬのアリコートを加えた。懸濁液を３０℃で一晩、振盪台に置いたままにした。

生じた懸濁液の（実施例４の方法を用いた）ＨＰＬＣ−ＣＡＤ分析は、Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ処理されたガドリニウム溶液のさらなるナトリウム汚染（ナトリウムイオンをいくらか含むＤＯＴＡを用いた。）を示さなかったが、Ｎａ−Ｃｈｅｌｅｘ処理された溶液は、ナトリウムのレベルが上昇した。アルセナゾ色素試験は、どちらの溶液でも遊離ガドリニウムを示さなかった。Ｍ^eg−Ｃｈｅｌｅｘ処理された反応混合物中のメグルミン濃度はわずかに増加し、ガドリニウム交換を示した。結果を図２に示す。

実施例４：ＨＰＬＣ−ＣＡＤ法：ＧｄＤＯＴＡ−メグルミン溶液中のＤＯＴＡ測定
検出器：ＥＳＡ Ｃｏｒｏｎａ、荷電化粒子検出器；
カラム：ＳｅＱｕａｎｔ ＺＩＣ−ｐＨＩＬＩＣ（５μｍ、１５０＊４．６ｍｍ）。

サンプル調製：２０μＬ（約０．５Ｍ）の反応混合物に、Ｚｎ（ＯＡｃ）₂（１０μＬ、１０ｍｇ／ｍＬ）、次いで、水（２７０μＬ）、続いて、ＭｅＣＮ（７００μＬ）＊を加えた。
注入量：２０μＬ；
移動相：１００ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）、アセトニトリル（Ｂ）。

カラムを、サンプル注入前に初期組成（１５：８５ Ａ：Ｂ）で、流量１ｍＬ／ｍｉｎで少なくとも５分間コンディショニングした。
勾配：

以下の保持時間が観察された。
保持時間（ｍｉｎ）
メグルミン ２１．３
ＧｄＤＯＴＡ ２３．２
ＺｎＤＯＴＡ＊ ２８．１
＊ＤＯＴＡは、ＺｎＤＯＴＡ錯体として間接的に分析した。

実施例５：過剰のＤＯＴＡを含むＧｄ−ＤＯＴＡ錯体製剤の調製
ＤＯＴＡ（２１１ｋｇ）を沸騰水（１６００ｋｇ）に溶解し、Ｇｄ₂Ｏ₃（９４，８ｋｇ）を加えた。温度を７０℃に設定し、スラリーを一晩撹拌した。溶液中の遊離ガドリニウムイオン（１３９０μｇ／ｇ）の存在を比色滴定により確認した。

温度を５０℃に調節し、溶液中でｐＨ５，５に達するようにメグルミンを加えた。初めにメグルミン９４，８ｋｇを加え、最終的なｐＨの調整は、メグルミンの水溶液（１，５Ｍ）で行った。

スカベンジャー樹脂（Ｐｕｒｏｐａｃｋ Ｃ１５０、５０Ｌ、実施例６にしたがってプレコンディショニングした。）をカラムに入れた。ＧｄＤＯＴＡ溶液を、溶液の全体積を２時間で通過させるのに十分な流速で、ポンプでカラムに通した。遊離ガドリニウムの濃度（４５μｇ／ｍＬ）を比色滴定を用いて決定した。比色滴定による検出限界未満の遊離ガドリニウムのレベル（４μｇ／ｇ）になるようにするため、カラムをもう１回通過させてＧｄＤＯＴＡ溶液のイオン交換を続け、ＧｄＤＯＴＡ−メグルミン溶液を得た。

精製されたＧｄＤＯＴＡ−メグルミン錯化混合物のアリコートに別のプロセスステップの処理をした。ＧｄＤＯＴＡの濃度をＩＲ測定並びに溶液の重量測定により決定し、ＧｄＤＯＴＡの総量が２６９，８ｋｇであることを確認した。次いで、遊離ＤＯＴＡ（２，７９リットルの１０１，１ｇ／ｍＬ溶液；合計３０７，６ｇ）を加えた。

次いで、メグルミン溶液（１Ｍ）を、７，２のｐＨが得られるまで少量ずつ加えた。真空中での蒸留（１４０℃）により、重量は６３０ｋｇまで減少した。溶液を４０℃で１０時間保持した。ＧｄＤＯＴＡの濃度は１，０６Ｍと確認され、遊離ＤＯＴＡの量は５３７ｕｇ／ｍＬと確認された。

実施例６：メグルミン化Ｐｕｒｏｐａｃｋ Ｃ１５０（登録商標）樹脂（「Ｍ ^eg −ＰＰＣ」）の調製
Ｐｕｒｏｐａｃｋ Ｃ１５０樹脂を、標準的な手順にしたがってプロトン形にコンディショニングした。樹脂床から中性の水が溶出されるまで樹脂を水ですすいだ。

メグルミンの溶液（４００ｇ／ｋｇ樹脂）を樹脂床に１０時間循環させ、中性のｐＨになるまで樹脂を再び水ですすいだ。

Claims (22)

1. ランタニド金属と大環状キレート剤との金属錯体を、金属錯体の０．００２〜０．４ｍ
   ｏｌ／ｍｏｌ％の間の範囲の量の未錯化形の大環状キレート剤と共に含む液体医薬製剤の
   調製方法であって、前記方法が、
   （ｉ）適した溶媒中で、大環状キレート剤と過剰のランタニド金属とを錯化して、過剰
   のランタニドを含む金属錯体の第１の溶液を与えるステップと、
   （ｉｉ）溶液を、スカベンジャー樹脂と１回又は複数回接触させることにより、ステッ
   プ（ｉ）の第１の溶液から過剰のランタニドを除去して、過剰のランタニドをスカベンジ
   ャー樹脂と錯化させるステップと、
   （ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）の第１の溶液から固相を分離して、過剰のランタニドを含
   まない金属錯体を含む第２の溶液を与えるステップと、
   （ｉｖ）ステップ（ｉｉｉ）の第２の溶液に対して０．００２〜０．４ｍｏｌ／ｍｏｌ
   ％の間の範囲の未錯化形の大環状キレート剤を添加して、液体医薬製剤を与えるステップ
   と
   を含み、
   未錯化形の大環状キレート剤は、配位金属イオンを含まず、
   スカベンジャー樹脂が、スカベンジャーキレート剤のメグルミン塩として存在する固相
   結合スカベンジャーキレート剤である、
   調製方法。
2. ステップ（ｉ）のランタニド金属の過剰量が０．００１〜５ｍｏｌ／ｍｏｌ％である、
   請求項１に記載の方法。
3. 未錯化形の大環状キレート剤が、０．０２５〜０．２５ｍｏｌ／ｍｏｌ％の間の範囲の
   量である、請求項１又は請求項２に記載の方法。
4. 未錯化形の大環状キレート剤が、ランタニドイオン、カルシウムイオン、亜鉛イオン及
   びマグネシウムイオンを含まない、請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載の方法。
5. ランタニド金属がガドリニウムである、請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の
   方法。
6. 大環状キレート剤が、ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３
   Ａ及びＰＣＴＡを含む、請求項１乃至請求項５のいずれか１項に記載の方法。
7. 大環状キレート剤がＤＯＴＡを含む、請求項６に記載の方法。
8. スカベンジャー樹脂が固相結合スカベンジャーキレート剤である、請求項１乃至請求項
   ７のいずれか１項に記載の方法。
9. スカベンジャーキレート剤が、イミノ二酢酸、ＥＤＴＡ又はＤＴＰＡを含む、請求項８
   に記載の方法。
10. スカベンジャーキレート剤がイミノ二酢酸を含む、請求項９に記載の方法。
11. ステップ（ｉ）の過剰のランタニドが、１以上の任意の配位した不純物金属を大環状キ
    レート剤から置換し、各不純物金属は、ランタニドよりも小さい、大環状キレート剤との
    生成定数を有する、請求項１乃至請求項１０のいずれか１項に記載の方法。
12. ランタニド金属と大環状キレート剤との金属錯体が、ガドリニウム−ＤＯＴＡ錯体であ
    り、
    前記ガドリニウム−ＤＯＴＡ錯体において、ランタニド金属がガドリニウムであり、及
    び大環状キレート剤がＤＯＴＡを含む、請求項１乃至請求項１１のいずれか１項に記載の
    方法。
13. ガドリニウム−ＤＯＴＡ錯体が、ガドリニウム−ＤＯＴＡのメグルミン塩を含む、請求
    項１２に記載の方法。
14. スカベンジャーキレート剤がイミノ二酢酸を含む、請求項１乃至請求項１３のいずれか
    １項に記載の方法。
15. ステップ（ｉ）の錯化が、メグルミンを用いてｐＨを４．５〜５．５に調整することに
    より完了される、請求項１乃至請求項１４のいずれか１項に記載の方法。
16. ＭＲＩ造影剤の調製方法であって、
    （ａ）請求項１乃至請求項１５のいずれか１項に記載の方法を実施して、請求項１乃至請
    求項１５のいずれか１項に記載された液体医薬製剤を得るステップと、
    （ｂ）ステップ（ａ）の製剤を医薬として許容される容器又はシリンジに分注して、分注
    された容器又はシリンジを与えるステップと、
    を含み、
    ステップ（ａ）およびステップ（ｂ）を無菌製造条件下で実施するか、或いはステップ
    （ｂ）の分注された容器又はシリンジを最終滅菌するか、のいずれかを実施することによ
    り、哺乳動物の投与に適した形の、医薬として許容される容器又はシリンジ内のＭＲＩ造
    影剤を得る、
    を含む方法。
17. ステップ（ａ）とステップ（ｂ）との間に、ステップ（ａ）の液体医薬製剤を生体適合
    性担体で希釈するステップをさらに含む、請求項１６に記載の方法。
18. 前記希釈するステップが、無菌製造条件下で実施される、請求項１７に記載の方法。
19. 最終滅菌が利用される、請求項１６又は請求項１７に記載の方法。
20. 請求項１乃至請求項１９のいずれか１項に記載の方法に用いるための、固相結合スカベ
    ンジャーキレート剤であって、スカベンジャーキレート剤のメグルミン塩として存在する
    、固相結合スカベンジャーキレート剤。
21. イミノ二酢酸を含む、請求項２０に記載の固相結合スカベンジャーキレート剤。
22. 請求項１乃至請求項１５のいずれか１項に記載の医薬製剤の調製方法、或いは
    請求項１６乃至請求項１９のいずれか１項に記載のＭＲＩ造影剤の調製方法
    のいずれかの調製方法における、請求項２０又は請求項２１に記載の固相結合スカベンジャーキレート剤の使用。