JP6688164B2 - 皮膚毛細血管の観察方法 - Google Patents
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Description
1)外部刺激に対する皮膚表層の毛細血管の応答を顕微観察する方法であって、
撮影台の被写体配置部に、流体を注入するための流体注入部及び開口部を備えたスペーサーを設置する工程、
被験者の身体部位を前記スペーサーの開口部を覆うように、スペーサーに接触させる工程、
前記流体注入部を介してスペーサー開口部内に流体を注入する工程、及び
スペーサー開口部に呈示された皮膚表面の毛細血管を顕微鏡システムにより観察する工程、を含む毛細血管の観察方法。
2)上記1)の方法に用いられる装置であって、
被写体配置部を備えた撮影台と、前記被写体配置部を介して被写体と反対側に配置された顕微鏡システム、画像データを表示する画像表示部、及び画像データを処理する画像処理部を備え、前記被写体配置部の表面に、流体を注入するための流体注入部及び開口部を備えたスペーサーが設置された、毛細血管の観察装置。
(1)撮影台の被写体配置部に、流体を注入するための流体注入部及び開口部を備えたスペーサーを設置する工程、
(2)被験者の身体部位を前記スペーサーに接触させる工程、
(3)前記流体注入部を介してスペーサー開口部内に流体を注入する工程、及び
(4)スペーサー開口部に呈示された皮膚表面の毛細血管を顕微鏡システムにより観察する工程
図1に本発明の毛細血管の観察方法を実施するための一実施形態である装置の全体構成図を示す。以下、これを参照して説明する。
被写体配置部1は、被写体である身体部位を配置する撮影台の部位であり、被写体と反対側に設置される顕微鏡システム3により被写体を観察可能であれば、その部材は特に限定されないが、通常ガラス板を用いるのが好ましい。
撮影台2は、前記被写体配置部1を備え、被写体配置部を介して被写体と反対側に顕微鏡システム3を配置することができればその形状や構成は特に限定されない。例えば、面の1つに被写体配置部が配置され、顕微鏡システムを内部に配置可能な大きさの直方体、立方体、円筒等の形状の筐体や、被写体配置部を含む平板を支柱で支持した構造を使用できる。
また、顕微鏡システム3は、スペーサー6の開口部内に露出した被写体を観察可能であれば位置が固定されていてもよいが、顕微鏡システム3と被写体との距離や観察視野を調整できるような可動式のステージやジャッキ等の位置調整機構と接続され、位置を調整可能とされていてもよい。
図2にスペーサー部分の断面模式図を示す。被験者の身体部位がスペーサー6に押し当てられた際、スペーサーの開口部において被写体配置部1に接することなく保持される。
ここで、開口部の形状は、矩形でも円形でも、その他の形状でもよい。すなわち、スペーサーの形状は、円形或いは四角形等のリング状である。開口部のサイズは、観察する視野の大きさ及び皮膚表面の平坦性を勘案して適宜選択することができ、開口部の内部面積が、好ましくは1mm2以上、より好ましくは225mm2以上で、好ましくは900mm2以下、より好ましくは625mm2以下である。また、好ましくは1mm2〜900mm2、より好ましくは225mm2〜625mm2である。
例えば、矩形とする場合には、その内周は、好ましくは1〜100mm×1〜100mm、より好ましくは5〜50mm×5〜50mm、より好ましくは10〜25mm×10〜25mmが挙げられ、更には10mm×10mm、15mm×15mmが挙げられる。
また、当該素材は任意の色であり得るが、スペーサー外からの光の遮断を抑える観点から、無色透明又は白色半透明であるのが好ましい。
流体注入部7は、スペーサーの開口部内に流体を注入、或いはスペーサー開口部内部から流体を排出するための流路であり、軟質塩化ビニル、シリコンゴム、等の可撓性を有する樹脂材料、ステンレス等の金属材料等により形成される管状の部材である。
流体注入部7は、スペーサーの側面(上側面、中側面、下側面;例えば、図2)や上面(例えば、図3)に、1箇所以上接続させることができる。
流体注入部7の一端には、例えばシリンジまたは各種ポンプの如く、流体注入部に対して流体を供給するための装置が装着され、流体の注入・排出が行われる。
流体注入部7は注入用のものが一つ以上あればその数や注入・排出の割り当ては限定されない。例えば、一つ以上の流体注入部7を注入のみに用いて排出用を設けなくてもよいし、同一の流体注入部7を注入と排出の両方に用いてもよい。また、複数の流体注入部7を注入用と排出用に分けて用いてもよい。
ここで、屈折率はJIS K 7142に準拠し23℃においてアッベ屈折計により測定することができ、また文献値(化学便覧(日本化学会編)等)をもとに計算して求めることもできる。
ここで、毛細血管の状態とは、毛細血管の数、分布(均一・不均一)、形状等が挙げられる。
<1>外部刺激に対する皮膚表層の毛細血管の応答を顕微観察する方法であって、
撮影台の被写体配置部に、流体を注入するための流体注入部及び開口部を備えたスペーサーを設置する工程、
被験者の身体部位を前記スペーサーに接触させる工程、
前記流体注入部を介してスペーサー開口部内に流体を注入する工程、及び
スペーサー開口部に呈示された皮膚表面の毛細血管を顕微鏡システムにより観察する工程、を含む毛細血管の観察方法。
<2>流体が1種以上の化学物質を溶解した溶液である<1>の方法。
<3>流体が温水又は冷水である<1>の方法。
<4>スペーサーの開口部内の面積が1〜900mm2である<1>〜<3>のいずれかの方法。
<5>スペーサーの厚さが0.1〜6.0mmである<1>〜<4>のいずれかの方法。
<6>スペーサーの素材がシリコンゴムである<1>〜<4>のいずれかの方法。
<7>毛細血管の数、形状又は分布を解析する、<1>〜<6>のいずれかの方法。
<8><1>〜<7>のいずれかの方法に用いられる装置であって、
被写体配置部を備えた撮影台と、前記被写体配置部を介して被写体と反対側に配置された顕微鏡システム、画像データを表示する画像表示部、及び画像データを処理する画像処理部を備え、前記被写体配置部の表面に、流体を注入するための流体注入部及び開口部を備えたスペーサーが設置された、毛細血管の観察装置。
<10>上記<1>又は<8>において、スペーサーの厚さは、好ましくは0.1mm以上、より好ましくは0.5mm以上であり、且つ好ましくは6mm以下、より好ましくは1mm以下である。また、好ましくは0.1〜6mm、より好ましくは2〜5mmである。
室温にて二酸化炭素を水道水に5分間バブリングし、炭酸水(屈折率約1.3)を調製した。この炭酸水を、シリンジを用いてチューブのもう一端に流し込むことで、開口内に炭酸水を注入した。
前腕内側部をスペーサー上に載せ動画を撮影した。スペーサー開口部内に炭酸水を注入し、スペーサーと上腕の隙間から空気を排出することでスペーサー開口内部に炭酸水を満たした状態で、観察を開始し2分間動画を取得した。
その結果、炭酸水注入直後に比べて、炭酸水注入2分後には血管が明瞭に観察された(図5)。本結果より、炭酸水の刺激による毛細血管の状態の変化を連続的に観察できることが示された。
2 撮影台
3 顕微鏡システム
3a レンズ
3b 光源
3c カメラ
4 画像処理部
5 画像表示部
6 スペーサー
7 流体注入部
8 身体部位
9 支柱
10 シリンジ
11 XYZ軸ステージ
Claims (7)
- 外部刺激に対する皮膚表層の毛細血管の応答を顕微観察する方法であって、
撮影台の被写体配置部に、流体を注入するための流体注入部及び開口部を備えたスペーサーを設置する工程、
被験者の身体部位を、前記スペーサーの開口部を覆うように前記スペーサーに接触させ
る工程、
前記流体注入部を介してスペーサー開口部内に流体を注入する工程、及び
スペーサー開口部に呈示された皮膚表面の毛細血管を顕微鏡システムにより観察する工程、を含む毛細血管の観察方法。 - 流体が1種以上の化学物質を溶解した溶液である請求項1記載の方法。
- 流体が温水又は冷水である請求項1記載の方法。
- スペーサーの開口部内の面積が1〜900mm2である請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
- スペーサーの厚さが0.1〜6.0mmである請求項1〜4のいずれか1項記載の方法。
- スペーサーの素材がシリコンゴムである請求項1〜5のいずれか1項記載の方法。
- 毛細血管の数、形状又は分布を解析する、請求項1〜6のいずれか1項記載の方法。
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