JP6612137B2 - 角層細胞標本の作製方法 - Google Patents

Description

本発明は、角層細胞標本の作製方法に関する。

皮膚状態を知るための１つの方法として、粘着テープ等を皮膚表面に粘着、剥離して粘着テープ等の粘着面に皮膚角層細胞粘着テープなどの粘着面に付着した皮膚角層細胞を必要によりスライドガラスなどへさらに写し取りこれをヘマトキシリンエオシン染色にて染色し解析を行う方法などが用いられている（非特許文献１〜３）。
このような染色は個々人の皮膚の状態を詳しく理解し、それに対応した化粧品が多く作られるようになった昨今では非常によく実施される作業である。更には、少量の染色液で結果を得る為の染色方法として、皮膚より採取した粘着テープをスライドガラスなどへ角層を写し取ることなく、そのまま染色を行う手法なども開発されている（特許文献１）。

特開2011-169655

橿淵暢夫，村松宣江：角層細胞による肌評価法の開発．粧技誌．，23（1）：55-57，1989 松本雅之，林昭次，新井清一：剥離パターンによる角層評価（第1報）角層剥離パターンの数量化．粧技誌，32：33-42，1998. 松本雅之，林照次，新井清一：角層剥離パターンによる角層評価（第2報）―季節変化と年代差について―．香粧会誌，24：1-6，2000.

粘着テープを直接染色した標本は、観察のためスライドガラスなどへ貼付する必要があった。しかし、角層を採取した粘着テープは染色により貼付面の粘着剤が剥離し、スライドガラスへ貼付することが困難となり皮膚を観察することが難しい現状があった。
更に、染色に不慣れな人間がスライドガラスを取り扱う際、手などをけがする恐れがあった。
また、多量の標本を扱う場合には重量も問題があり、軽く、保管場所も小さく済むことも求められていた。

本発明者らは鋭意検討した結果、角層細胞が付着した透明粘着テープをグリセリンを含む透明なシートで挟むことによって、本課題が解決させることが分かった。

シートは標本を観察できる透明性があり、折り曲げることが可能で、角層細胞が付着した透明粘着テープを挟んだ状態を保つ程度の厚さであることが必要である。
シートを２枚用意し、２枚のシートで挟む場合は、折り曲げることはないが、後で述べるように挟むときになるべくシートの間に気泡が入らないようにするには、ある程度の柔軟性があった方が作業性がよい。
また、操作の利便性などを考慮するとシート素材を適宜加工して袋状にすることがなお望ましい。

上記の条件を満たすシートであれば使用でき、素材は特に限定されることはないがポリプロピレン、ポリスチレンなど透明度の高いものであれば広範囲で使用が可能である。特に、ポリプロピレン素材の中でも、透明性などを改良した二軸延伸ポリプロピレン（以下OPP）による素材を用いることが望ましい。
グリセリンの量は、透明粘着テープをシートで挟んだ時に観察に障害となる気泡が生じない程度の量がよい。
グリセリンを使用することによって、標本が空気に触れることがなく、長期間保存できる。

以下に実施例を挙げて説明する

（１）角層細胞の採取方法
角層細胞は、顔面頬部よりセロハンテープ（商品名、ニチバン）にて採取した（以下、角層テープとする）。
（２）角層細胞の染色方法
採取した角層細胞をセロハンテープのまま、エオシン染色を行った。
（３）角層細胞の標本作成方法
市販のOPP袋（商品名、オルディパック 小物用Ｍ）へグリセリンを適量付着させた後、先に染色を行った角層テープをOPP袋へ封入した。その後、得られた標本を倒立型リサーチ顕微鏡IX71（オリンパス株式会社）の対物レンズ4倍で観察を行い、顕微鏡用デジタルカメラDP70（オリンパス株式会社）にて画像をjpeg形式で取り込んだ。得られた標本画像を図１へ示す。なお、比較対照として、セロハンテープにて角層を採取した後、角層をキシレンへ１晩浸漬しスライドガラスへ転写後、同様の染色を行った標本画像を図２へ示す。
観察の結果、スライドガラスと遜色のない、染色標本が得られた。
これにより、スライドガラスの取り扱いによるけがの心配がなくなり、だれでも簡便に観察できる方法が提供できるようになった。
さらにスライドガラスを使用しないので、重量が減り、多量の標本が容易に保管管理ができるようになった。

グリセリンを入れたOPP袋へ角層細胞テープを入れた顕微鏡画像。 角層細胞をスライドガラスへ転写しヘマトキシリンエオシン染色を行った染色画像。

Claims (2)

1. 透明なシートで、グリセリン及び角層細胞が付着した透明粘着テープを挟むことを特徴とする角層細胞標本の作製方法。
2. 透明なシートが二軸延伸ポリプロピレンフィルムである請求項１記載の角層細胞標本の作製方法。