JP6560808B2 - 抗(+)メタンフェタミンモノクローナル抗体 - Google Patents
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Description
本発明は、国立衛生研究所により授与された助成金番号DA014361、DA011560、及びGM103450の下で、政府支援によって成された。米国政府は、本発明において一定の権利を有する。
本出願は、2013年3月13日出願の米国出願第13/802,688号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列表の紙面の複写、及びコンピュータ可読形態の同一の配列表を以下に添付し、参照によって本明細書に組み込む。コンピュータ可読形態で記録された情報は、37 C.F.R.1.821(f)に従って、書面の配列表と一致する。
メタンフェタミンは、2つの鏡像異性体、右旋性及び左旋性において発生する。デキストロメタンフェタミン(または(+)メタンフェタミン)は本薬物の公知の精神刺激効果を保有するが、レボメタンフェタミンはCNS不活性である。メタンフェタミンは不法に、純デキストロメタンフェタミンとして、またはラセミ混合物においてのいずれかで販売され得る。本明細書で使用する「(+)メタンフェタミン」及び「デキストロメタンフェタミン」という用語は、右旋性鏡像異性体のみを持つ試料を指し、一方で「メタンフェタミン」という用語は、ラセミ混合物を指す。しかしながら、メタンフェタミン(すなわち、ラセミ混合物)の薬理効果を説明するとき、これらの特性は、レボメタンフェタミンがCNS不活性であるために、(+)メタンフェタミンの特性と置き換え可能であることを理解されたい。
本発明に従い、本明細書で有用な抗(+)メタンフェタミン抗体は、メタンフェタミン使用に関連する医学的問題を治療的に減弱させる全ての抗体を含む。メタンフェタミン使用に関連する医学的問題は、上で詳細に説明する。
別の態様では、本発明の抗(+)メタンフェタミン抗体を、少なくとも1つの好適な相溶性のアジュバントまたは賦形剤と混合し、メタンフェタミン使用、乱用、及び/または中毒の徴候または症状に苦しむ生きた対象にうまく及び効果的に投与(付与)する治療用医薬組成物をもたらす。典型的には、これは高純度の水性組成物である。好適な抗(+)メタンフェタミン抗体を節IBにおいて上で説明する。好適な対象の非限定的な例としては、ヒトまたは実験動物が挙げられる。一部の実施形態では、対象は実験動物である。実験動物の非限定的な例としては、齧歯動物、イヌ、ネコ、非ヒト霊長類が挙げられる。ある特定の実施形態では、動物は齧歯動物である。齧歯動物の非限定的な例としては、マウス、ラット、モルモットなどが挙げられる。他の実施形態では、対象はヒトである。
METH様ハプテン(S)−(+)−3−(9−カルボキシノニルオキシ)メタンフェタミン((+)−METH M010として省略)(Peterson EC et al.J Pharmacol Exp Ther(2007)322:30−39、Carroll FI et al.Med Chem(2009)52,7301−7309)を、カルボジイミド連結手順を使用してウシ血清アルブミン(BSA)と共有結合させた(Davis MT and Preston JF Anal Biochem(1981)116:402−407)。この合成は、METH(+)MO10ハプテン上のカルボン酸末端とBSA上の末端アミノ酸との間の共有結合の形成を伴う。最終産生物の(+)−METH MO10ハプテン対BSAエピトープ濃度(5:1)を質量分析によって決定した。
mAb治療後の経時的な3つの抗METH mAb(抗体51、mAb10D1、及びmAb4G9)のインビボにおける結合機能を、mAb前(平均の(+)−METH血清定常状態濃度について)とMETHの血清薬物動態に対してのmAb後との効果の比較、及び0日目から13日目までのMETH血清濃度時間曲線下領域によって評定した。研究の0日目は、sc(+)−METH浸透圧ポンプの移植から1日後に開始した。投薬群を表1に示す。
表1
実施例2に記載のように抗体51を調合した。
表3
キメラ抗体51(ch−抗体51)は、ネズミ親抗体である抗体51に基づき、用語が当技術分野で使用される、キメラ抗体である。ch−抗体51は、(+)−メタンフェタミン(METH)及び一部の構造的に関係がある刺激剤(すなわち、(+)−アンフェタミン及び(+)−MDMA)とヒト体内で効率的に結合するように設計したキメラモノクローナル抗体である。Ch−抗体51は、重鎖及び軽鎖両方の3つ全てのCDRを含む、マウス抗体の重鎖及び軽鎖の可変フレームワーク領域を維持するように設計したが、ヒトIgG2 Fc領域を含む。これらの研究は、構造的に関係がある刺激剤、神経伝達物質、選択した薬品、及び他の乱用薬物(表4)に結合するch−抗体51の潜在性を検査するために設計した。アッセイには、[3H]−METHを用いて、競合的結合形式の修正したラジオイムノアッセイ(RIA)を使用した(Peterson et al.,J Pharmacol Exp Ther(2008)325:124−133中のRIAと同様)。アッセイは、放射性標識したMETH([3H]−METH)を、標識していない見込みあるリガンド(濃度は典型的に0.03〜5000nMの範囲である)、ch−抗体51、及び磁気ビーズと共役させたタンパク質Gと共にインキュベートすることによって開始する。平衡に達した後、結合した抗体及びリガンドを持つビーズを、磁石によって溶液から分離させ、上清を吸引する。mAbに結合した[3H]−METHの量を、液体シンチレーション計数によって定量化する。関係刺激物の各々について、完全阻害曲線を構築して、KDまたはKI値を決定した(図7を参照されたい)。残りの試験リガンドについては、同一の方法を使用したが、広範ではなくリガンドの2つの濃度のみを試験した。加えて、化合物の高濃度のプールを使用して、ch−抗体51との[3H]−METHの結合の阻害を試みた。METH結合がリガンドのいずれのプールによっても50%以上阻害された場合、アッセイを別個に化合物を用いて繰り返し、個別の交差反応性リガンドを識別した。
表4.ch−抗体51交差反応性について試験したリガンド
表5.関係刺激剤の交差反応試験からの結果。
表7.1μMでの個別のリガンド交差反応性試験からの結果
Claims (9)
- (a)配列番号5のアミノ酸配列を含む軽鎖CDR1;
(b)配列番号6のアミノ酸配列を含む軽鎖CDR2;
(c)配列番号7のアミノ酸配列を含む軽鎖CDR3;
(d)配列番号8のアミノ酸配列を含む重鎖CDR1;
(e)配列番号9のアミノ酸配列を含む重鎖CDR2;および
(f)配列番号10のアミノ酸配列を含む重鎖CDR3、
を含み、(+)メタンフェタミンと特異的に結合する、単離キメラまたはヒト化抗体。 - 前記抗体が、配列番号1および配列番号2からなる群から選択される配列を含む核酸配列によってコードされる、請求項1に記載の単離抗体。
- 対象におけるメタンフェタミン使用に関連する少なくとも1つの医学的問題を治療するための、請求項1に記載の単離抗体を含む、医薬組成物。
- 前記治療が、対象におけるメタンフェタミン使用の少なくとも1つの症状または徴候の減弱、好転、または改善を含む、請求項3に記載の医薬組成物。
- 前記メタンフェタミン使用に関連する医学的問題が、メタンフェタミン中毒およびメタンフェタミン乱用からなる群から選択される、請求項3に記載の医薬組成物。
- 前記メタンフェタミン使用に関連する医学的問題が、急性メタンフェタミン過剰摂取、慢性メタンフェタミン過剰摂取、およびメタンフェタミン使用再発からなる群から選択される、請求項3に記載の医薬組成物。
- 前記抗(+)メタンフェタミン抗体が、(+)メタンフェタミン、(+)メタンフェタミンの代謝産物、または(+)メタンフェタミン様類似体内のエピトープと結合する、請求項3に記載の医薬組成物。
- 前記抗体が、対象の脳内への(+)メタンフェタミン侵入の速度を遅延させる、請求項3に記載の医薬組成物。
- 前記抗体が、メタンフェタミン中毒の対象におけるメタンフェタミン使用再発の頻度を低減させる、請求項3に記載の医薬組成物。
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