JP6487448B2 - アルギネート/コラーゲンヒドロゲル中のfgf−18製剤 - Google Patents
アルギネート/コラーゲンヒドロゲル中のfgf−18製剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6487448B2 JP6487448B2 JP2016542689A JP2016542689A JP6487448B2 JP 6487448 B2 JP6487448 B2 JP 6487448B2 JP 2016542689 A JP2016542689 A JP 2016542689A JP 2016542689 A JP2016542689 A JP 2016542689A JP 6487448 B2 JP6487448 B2 JP 6487448B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- solution
- fgf
- alginate
- salt
- gel
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000003977 fibroblast growth factor 18 Human genes 0.000 title claims description 164
- 108090000370 fibroblast growth factor 18 Proteins 0.000 title claims description 164
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 title claims description 154
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 title claims description 152
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 title claims description 152
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 151
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title claims description 74
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims description 55
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims description 54
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims description 54
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 119
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title description 109
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 38
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 30
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 30
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 28
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 28
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 28
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 28
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 26
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 19
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 13
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 10
- 208000015100 cartilage disease Diseases 0.000 claims description 10
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 claims description 10
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 159000000007 calcium salts Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 4
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 claims 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 184
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 165
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 74
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 40
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 38
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 37
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 37
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 34
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 32
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 31
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 29
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 26
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 26
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 25
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 24
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 24
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 23
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 22
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 21
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 19
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 19
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 19
- 239000000463 material Substances 0.000 description 19
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 19
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 18
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 17
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 17
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 17
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 17
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 13
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 13
- 229950002135 sprifermin Drugs 0.000 description 13
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 description 12
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 11
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 10
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 9
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 9
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 9
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 9
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 9
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 9
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 9
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 9
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 208000013201 Stress fracture Diseases 0.000 description 8
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 8
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 8
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 7
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 7
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 7
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 7
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 7
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 6
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 6
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 6
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 6
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 5
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 5
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 5
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 5
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 5
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 description 5
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 5
- 238000007808 Cell invasion assay Methods 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 4
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 4
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 3
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940043267 rhodamine b Drugs 0.000 description 3
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 3
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 3
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 3
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 3
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 2
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 238000005429 filling process Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 2
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000002050 international nonproprietary name Substances 0.000 description 2
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 2
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 239000003190 viscoelastic substance Substances 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 102100030009 Azurocidin Human genes 0.000 description 1
- 101710154607 Azurocidin Proteins 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010061762 Chondropathy Diseases 0.000 description 1
- 208000005243 Chondrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100035308 Fibroblast growth factor 17 Human genes 0.000 description 1
- 108050002074 Fibroblast growth factor 17 Proteins 0.000 description 1
- 102100035323 Fibroblast growth factor 18 Human genes 0.000 description 1
- 102100037680 Fibroblast growth factor 8 Human genes 0.000 description 1
- 108090000368 Fibroblast growth factor 8 Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 1
- 208000007353 Hip Osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 101000878128 Homo sapiens Fibroblast growth factor 18 Proteins 0.000 description 1
- 101001109689 Homo sapiens Nuclear receptor subfamily 4 group A member 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 208000003947 Knee Osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- -1 acetone Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000002308 calcification Effects 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000022159 cartilage development Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L copper(II) chloride Chemical compound Cl[Cu]Cl ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 210000001513 elbow Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000005292 fiolax Substances 0.000 description 1
- 229920001002 functional polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 210000004247 hand Anatomy 0.000 description 1
- 210000001624 hip Anatomy 0.000 description 1
- 102000047217 human NR4A3 Human genes 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 210000005067 joint tissue Anatomy 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000002062 molecular scaffold Substances 0.000 description 1
- 230000003534 oscillatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000000614 rib Anatomy 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 210000001991 scapula Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- KKNIUBFRGPFELP-UHFFFAOYSA-N secretolin Chemical compound N=1C=CNC=1CC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(C(=O)NC(C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CC(O)=O)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(C)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(O)=O)C(C)O)CC1=CC=CC=C1 KKNIUBFRGPFELP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012056 semi-solid material Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002832 shoulder Anatomy 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 1
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/20—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/24—Collagen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/26—Mixtures of macromolecular compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/505—Stabilizers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/52—Hydrogels or hydrocolloids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
- A61L2300/414—Growth factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/06—Flowable or injectable implant compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/06—Materials or treatment for tissue regeneration for cartilage reconstruction, e.g. meniscus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Description
本発明の目的は、FGF−18タンパク質を含む新規製剤を提供することである。さらに詳しくは、前記製剤はFGF−18を含有する均一なヒドロゲルであり、このヒドロゲルは好ましくはイオン応答性ヒドロゲル、より好ましくはアルギネート/コラーゲンヒドロゲルである、本発明はまた、本発明の均一なヒドロゲルを調製するための方法を提供する。本明細書に記載のFGF−18を含有するヒドロゲルは、軟骨障害の治療での投与に有用であり得る。特に関係するものは、FGF−18タンパク質をさらに含むアルギネート/コラーゲンヒドロヒドロゲルである。
1)アルギネート、コラーゲン、及び等張剤/安定剤と一緒にFGF−18を含むか又はそれから成る溶液を調製し、そして
2)塩を含むか又はそれから成る溶液2を調製し、そして
3)両方の溶液を同時注入してゲルを形成する、工程を含み、
ここで、前記等張剤/安定剤は、ショ糖、マンニトール、トレハロース、D−ソルビトールなどの糖又は糖−アルコールであり、塩はジカチオン塩、例えば、マグネシウム塩、銅塩、亜鉛塩、又はカルシウム塩(例えば塩化カルシウム)である。好ましくは最終製剤のpHは、6〜8又は約6〜約8、さらに詳しくは7又は約7で維持される。好適な実施態様において、FGF−18は、以下からなる群から選択される:1)配列番号1の残基28(Glu)〜残基207(Ala)を含むか又はそれから成る配列に対応する、ヒトFGF−18の成熟型を含むか又はそれから成るポリペプチド、2)配列番号1の残基28(Glu)〜残基196(Lys)を含むか又はそれから成る、ヒトFGF−18の切断型を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び3)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド。より好ましくはFGF−18は、後に定義されるスプリフェルミンである。溶液1は、緩衝液、及び/又は任意の他の賦形剤をさらに含んでよい。
1)アルギネート、コラーゲン、FGF−18タンパク質、及び等張剤/安定剤(溶液1)を含む第1の容器と
2)塩(溶液2)を含む第2の容器と、
を含む、製品を提供し、
ここで、前記等張剤/安定剤は、ショ糖、マンニトール、トレハロース、D−ソルビトールなどの糖又は糖−アルコールであり、塩はジカチオン塩、例えば、マグネシウム塩、銅塩、亜鉛塩、又はカルシウム塩(例えば塩化カルシウム)である。好ましくは、FGF−18は、以下からなる群から選択される:1)配列番号1の残基28(Glu)〜残基207(Ala)を含むか又はそれから成る配列に対応する、ヒトFGF−18の成熟型を含むか又はそれから成るポリペプチド、2)配列番号1の残基28(Glu)〜残基196(Lys)を含むか又はそれから成る、ヒトFGF−18の切断型を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び3)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド。より好ましくはFGF−18は、後に定義されるスプリフェルミンである。溶液1は、緩衝液及び/又は任意の他の賦形剤をさらに含んでよい。次に各容器の内容物は、同時注入時に一緒にイン・サイチュで混合される。好ましくは前記製品の第1の容器と第2の容器は、2重チャンバー又は2重注入システムの2つのコンパートメントである。
− 本明細書において用語「FGF−18タンパク質」又は「FGF−18」は、ヒトFGF−18タンパク質の少なくとも1つの生物活性を維持しているタンパク質であることが意図される。FGF−18は、未変性でも、成熟型でも、切断型でもよい。ヒトFGF−18タンパク質の生物活性は、特に骨芽細胞活性(国際公開第98/16644号を参照)又は軟骨形成(国際公開第2008/023063号を参照)の上昇を含む。未変性の又は野生型のヒトFGF−18は、関節軟骨の軟骨細胞により発現されるタンパク質である。ヒトFGF−18は最初zFGF−5と呼ばれ、国際公開第98/16644号に詳細に記載されている。配列番号1は未変性のヒトFGF−18のアミノ酸配列に対応し、アミノ酸残基1(Met)〜27(Ala)からなるシグナルペプチドを有する。ヒトFGF−18の成熟型は、配列番号1の残基28(Glu)〜残基207(Ala)からのアミノ酸配列(180アミノ酸)に対応する。
− 用語「μg」又は「mcg」は互換的に使用され、質量のSI単位の一部を指す。
本発明の主要な目的は、アルギネート、コラーゲン、FGF−18タンパク質、安定剤としての糖、及び塩を含むか又はそれらから成るアルギネート/コラーゲンゲル製剤(又はヒドロゲル)である。前記ヒドロゲルは、均一である。このヒドロゲルは、緩衝液及び/又は任意の他の賦形剤をさらに含んでよい。好適な実施態様において安定剤は、糖又は糖−アルコール、例えばショ糖、マンニトール、トレハロース、又はD−ソルビトールであり、緩衝液はジカチオン塩、例えばマグネシウム塩、銅塩、亜鉛塩、又はカルシウム塩(例えば塩化カルシウム)である。
− FGF−18:0.00006〜0.2%w/v、例えば0.0036%w/v(実施例欄に示されたFGF−18濃度に基づいて、FGF−18が混合前に0.1〜300mcg/mlである時)、
− アルギネート:0.6〜3.33%w/v、例えば2.67%w/v(アルギネートが混合前に4重量%である時)、
− コラーゲン:0,00006〜0.003%w/vの範囲、例えば0.000133%w/v(コラーゲンが混合前に2mcg/mlである時)、
− 安定剤:0.6〜6%w/v、例えば4.67%w/v(例えばショ糖が混合前に70mg/mlである時)、
− ジカチオン塩:0.033〜0.66%w/v、例えば0.33%w/v(塩が混合前に10mg/mlである時)。
1)アルギネート、コラーゲン、及び安定剤と一緒に、FGF−18を含むか又はそれから成る第1の溶液(溶液1)を調製する工程、
2)塩を含むか又はそれから成る第2の溶液(溶液2)を調製する工程、及び
3)両方の溶液を同時注入して、ゲルを形成する工程、
を含み、
ここで、前記安定剤は、糖又は糖−アルコール、例えばショ糖、マンニトール、トレハロース、又はD−ソルビトールであり、塩はジカチオン塩、例えばマグネシウム塩、銅塩、亜鉛塩、又はカルシウム塩(例えば塩化カルシウム)である。溶液1は、緩衝液及び/又は任意の他の賦形剤をさらに含んでよい。溶液1は均一である。好適な実施態様において、最終製剤のpHは、6〜8又は約6〜約8、及びさらに詳しくは7又は約7である。好ましくは、FGF−18は、以下からなるからなる群から選択される:1)配列番号1の残基28(Glu)〜残基207(Ala)を含むか又はそれから成る配列に対応する、ヒトFGF−18の成熟型を含むか又はそれから成るポリペプチド、2)配列番号1の残基28(Glu)〜残基196(Lys)を含むか又はそれから成る、ヒトFGF−18の切断型を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び3)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド。より好ましくはFGF−18は、本明細書で定義されるスプリフェルミンである。
本発明のヒドロゲルの溶液1が凍結乾燥型である時、これは、工程3の前に(すなわち、同時注入前に)再構成される (reconstituted)。
1)アルギネート、コラーゲン、FGF−18タンパク質、及び安定剤(溶液1)を含むか又はそれから成る第1の容器、及び
2)塩(溶液2)を含むか又はそれから成る第2の容器
を含む、医薬的又は獣医学的使用のための製品を提供し、
ここで、安定剤は、糖又は糖−アルコール、例えばショ糖、マンニトール、トレハロース、又はD−ソルビトールであり、塩はジカチオン塩、例えばマグネシウム塩、銅塩、亜鉛塩、又はカルシウム塩(例えば塩化カルシウム)である。溶液1は、緩衝液及び/又は任意の他の賦形剤をさらに含んでよい。溶液1は均一である。好ましくは、FGF−18は、以下からなる群から選択される:1)配列番号1の残基28(Glu)〜残基207(Ala)を含むか又はそれから成る配列に対応する、ヒトFGF−18の成熟型を含むか又はそれから成るポリペプチド、2)配列番号1の残基28(Glu)〜残基196(Lys)を含むか又はそれから成る、ヒトFGF−18の切断型を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び3)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド。より好ましくはFGF−18は、本明細書で定義されるスプリフェルミンである。
本実施例の組換え切断型FGF−18(trFGF−18又はスプリフェルミン)は、国際公開第2006/063362号に記載された技術に従って、大腸菌(E. coli)での発現により自家調製された。以下の実施例では、スプリフェルミンとFGF−18は交換可能に使用される。
− アルギン酸ナトリウム、Sigma Aldrich, A2158。
− アルギン酸ナトリウム、FMC BioPolymer Keltone LVCR (薬剤等級アルギネート)
− ショ糖, Merck 1.07653.9029
− ヒトの皮膚からのI型コラーゲン、CalbioChem 234149、及びCalbioChem 234138
− 塩化カルシウム(CaCl2)、Merck 1.02382.0250,
− D−(+)−グルコン酸δ−ラクトン、Sigma Aldrich G4750
− キトサン75% DD HMW、Sigma Aldrich 419419
− キトサン95% DD LMW、Faravelli 43000
− キトサン95% DD HMW、Heppe medical 24711。
ゲル化時間と温度
すべての製剤について、ゲル化時間を「傾斜試験 (tilting test)」により評価した。直径3cmのガラス製のシャーレでゲルを調製し、異なる温度でインキュベートした。所定の時間間隔でシャーレを傾け、ゲル化時間は、製剤が流れを示さなくなる時間と見なした。
ヒドロゲルのレオロジー特性を、直径40mmので円錐−プレート形状(1°の傾き)を有するAR2000レオメーター(TA Instruments)を使用して試験した。試験中に試料がスライドするのを回避するために、両方のプレートに研磨ディスクを塗布した。全ての試料の厚さは、試料の体積に応じて、約1〜2mmに含まれた。溶媒トラップを使用して、水飽和雰囲気を維持して、測定中の溶媒の蒸発を防いた。
ヒドロゲルの典型的な特性の1つは、その親水性のために、水溶液の存在下で膨潤できる能力である。ゲルの膨潤挙動を評価するために、これらをモック滑液(MSF)中に浸漬し、経時的に重量を測定した。この実験は、底部に0.4μmの多孔性膜を有する吊りインサートを備えた12ウェルプレート中で、三重測定で行った。
いったんゲルが形成されたら、走査電子顕微鏡法を使用してポリマーネットワークの三次元構造を分析した。活性なアルギネート系ゲルは、「ゲル化時間」に関する項で報告された手順に従って、1mlのポリマー液体溶液と0.5mlのカルシウム溶液を混合して、直径3cmのガラスシャーレ中で調製した。次に、得られたゲルを37℃で30分間インキュベートした。6つの試料を、3重量%又は4重量%のアルギネートの濃度のポリマー液体溶液(いずれも0、1、又は2μg/mlのI型コラーゲンを含む)から出発して調製した。次にゲルを48時間凍結乾燥した。凍結乾燥サイクルは、凍結工程、1次乾燥工程、及び2次乾燥工程を含んた。凍結工程中に、室温から−45℃への温度勾配を適用し、次に−45℃の段階を4時間行った。この後に1次乾燥工程が続き、50mTorrの圧力で1℃/分の速度で−45℃から−10℃への温度勾配を適用し、次に−10℃で50mTorrの段階を24時間30分続けた。2次乾燥工程は、2つの段階を含んだ:50mTorrの圧力で1℃/分の速度で−10℃〜21℃への第1の温度勾配を適用し、次に21℃で50mTorrの段階を12時間30分続け、次に50mTorrの圧力で1℃/分の速度で21℃〜37℃への第2の温度勾配を適用し、次に37℃で50mTorrの段階を6時間続けた。最後に、室温と大気圧に達した。次に各試料を染色し、次にSEMにより分析した。
膨潤試験に使用したものと同じ試料を、インビトロ放出試験でも分析した。具体的には、−80℃で保存した回収相(「膨潤挙動アッセイ」のセクションに記載のように)をHPLCにより分析した。選択された試料は、ビアコア(Biacore)でも分析した(データは示していない)。
エクスビボ動物モデルで予備試験を行い、アルギネート製剤が実際の膝関節に接着する能力を調べた。試験した製剤は、実施例9に報告される細胞浸潤アッセイの結果に基づいて選択した。具体的には、使用されたモデルは、牛の膝を構成する脛骨の上部と大腿骨の下部とから構成された。微小破壊術を行う際に外科医が作成する孔を模倣するために、芯抜き器を使用して、深さ1cmで直径0.4cmの孔を膝の両方の部分に作成した。次に孔に、最終濃度1.3μg/mlのI型コラーゲンと36μg/mlのFGF−18をゲル中に含有する4重量%のアルギネート製剤を充填した。2つの異なるシリンジ(1つはアルギネート溶液を含有し、1つはカルシウム溶液を含有する)を連結するために、注入用の弁を使用して試験を行った。2つのシリンジのプランジャーを同時に押して、弁が溶液を混合できるようにした。この製剤を直立と逆さまの位置で孔に注入して、異なる可能な現実のシナリオでのインビボ投与の可能性を検証した。37℃で約2時間インキュベーション後、孔からゲルを取り出して目視検査によりその状態を確認した。
発光法用の96ウェルプレート(アッセイプレート)を、50μL/ウェルのアルギン酸ナトリウムの4%溶液と25μL/ウェルの10mg/mL塩化カルシウムの溶液で被覆し、37℃、5%CO2で30分間インキュベートして、基底ヒドロゲルの形成を可能にする。
予備調製
予備調製作業中に、i.a.注射液について許容されるオスモル濃度(目標:350mOsm/kg)を有する水溶液を得るために、アルギネート又はキトサンに他の賦形剤を混合した。次に液体溶液を、それらのゲル化時間と温度について試験した。5分以内に及び/又は約37℃の温度でヒドロゲルを形成することができる製剤を、異なる濃度のFGF−18を用いてさらに調製した(データは示していない)。
イオン応答性ゲルの調製(アルギネート)
総論
ポリマー鎖間の架橋剤として作用する2価カチオン(例えばCa2+)の存在下で、ポリマーネットワークを形成してヒドロゲルを生じることができるため、アルギン酸ナトリウムを使用して、イオン応答性ゲルを得た。この製剤は、2つの溶液からなり、1つはポリマーを含有し、他の1つはイオンを含有した。いったん一緒に混合されると、溶液はゲルを形成した。
生理的なイオン量がゲル化プロセスを促進するのに十分ではなかったことを試験した後、2価カチオンCa2+を塩化カルシウムの形態で、架橋剤として選択した。不要な石灰化現象の原因である可能性のあるカルシウムの使用を避けるために、塩化マグネシウムも試験したが、この試みは成功しなかった。
活性な製剤を得るために、2つの溶液へのFGF−18の添加の試験をした。以下のすべての試験において、2つの溶液の比を、2:1体積/体積のアルギネート溶液対カルシウム溶液で一定に保った。アルギネート溶液へのFGF−18アルギネート溶液の添加は、目視検査によって検出される沈殿現象を引き起こした。可能な解決策として、アルギネートは、0.25g/LのF68界面活性剤を含有するPBS緩衝液に溶解した。しかしそれでもまだ沈殿が起きていた。この問題を克服するために、アルギネートの可溶化の前に、FGF−18を緩衝液に添加した。こうして、ポリマー溶液中の沈殿は回避され、タンパク質は均一に分布したが、得られたゲルの物理的な一貫性は、水中で調製されたプラセボと比較して劣っているように見えた。さらに、ゲル形成後に残存液相を分析すると、微細な沈殿が見つかった。さらなる試験により、塩化カルシウムとPBSとの間の相互作用により沈殿が引き起こされ、これがおそらくリン酸カルシウムの形成をもたらすことが証明された。このため、ポリマーの液体溶液とカルシウム溶液の両方からPBSは除去され、ミリQ水のみが溶媒として使用された。
より高密度のメッシュサイズを有するゲルを得る目的で、4重量%までのアルギネート濃度の上昇が考慮された。これは、材料に、インビボでより長く抵抗する能力と、封入されたタンパク質のより長期の保持を付与する能力とを、与えるはずである。可能性のある副作用を低減するために、カルシウム含有量の最小化も検討された:他の全てのパラメータ一定に保って、ゲルを得るために最低限必要な量は、4mg/mlであることがわかった。カルシウムとポリマー溶液との混合は、ゲルの迅速な形成を引き起こすため、最終製剤のpHおよびオスモル濃度を測定することはできなかった。従って、ポリマー液体溶液の浸透圧は、70mg/mlのショ糖を用いて、約300mOsm/kgの値に調整した。この添加はゲル形成に変化を引き起こし、ショ糖の非存在下では残存液相は観察されなかった。これは、ショ糖がアルギネート又はカルシウムと相互作用することによりゲル形成を妨害した、という仮説が立てられた。従って、再度カルシウム濃度を10mg/mlに上げて、ゲルを形成させると、残存液体と沈殿は生じなかった。
温度応答性ゲル(キトサン)の調製
総論
キトサン製剤のスクリーニングのために、ポリマー液体溶液の調製は、3種類の異なるキトサンを利用した:高分子量(HMW)を有する95%の脱アセチル化度(DD)、低MW(LMW)を有する95%DD、及び高MW(HMW)を有する75%DD。ポリマーの液体溶液は、5℃で又は25℃で激しく撹拌しながら、酢酸0.1N溶液に徐々にキトサンを添加することにより調製した。ポリマーの量は、ポリマー液体溶液中で1重量%、1.5重量%、又は2%重量の最終ポリマー濃度を有するように計算された。いったんキトサンが完全に可溶化された後、ミリQ水中の10mM、100mM、又は500mMの濃度のKH2PO4の溶液を撹拌しながら添加して、ポリマー液体溶液中の1mM、10mM、又は50mMのいずれかの最終濃度を得た。最後に、ミリQ水中20重量%濃度のβ−グリセロリン酸(β−GP)の溶液を加えて、最終的な液体溶液のpHを6.0、6.5、又は7.0のいずれかに調整した。これは、多すぎる量のβ−GPを必要として、350mOsm/kgの目標オスモル濃度値を超えるか、又は既に室温でゲルを得られてしまうため、絶えず所望のpH値に到達することは必ずしも可能ではなかった。ポリマーの液体溶液は適宜、ゲル形成まで37℃でインキュベートした。すべてのスクリーニングした製剤のオスモル濃度を測定し、350mOsm/kgより高いオスモル濃度を有する製剤、すなわち最終β−GP濃度が2.5重量%超の製剤を捨てた。
温度応答性ゲルは、局所環境の温度を変化することにより溶液−ゲル化(ゾル−ゲル)遷移を受けるポリマー材料に基づく。キトサンは、温度変化に伴うゾル−ゲル遷移を受け得ることが報告されているが、このプロセスは、ポリマーの分子量(MW)、その脱アセチル化度(DD)、溶液中のポリマー濃度、温度、時間、ポリマーの可溶化中の混合速度、溶液の最終pH、及び他の賦形剤の存在により大きく影響される。
この製剤を改善するために、β−GPの濃度を1.65〜1.7重量%の値でほぼ一定に維持し、キトサン濃度を1.5重量%〜1.8重量%に変化させ、及びHECの量を徐々に0.1重量%まで低下させて、以下の試験を行った。
ゲル化時間と温度
この作業で試験されるすべての製剤は、イン・サイチュで形成されるゲルとして使用するように計画される。従って、重要な要件は、イオン応答性ゲルと温度応答性ゲルの両方についての、迅速なゲル化時間である。実際、良好なゲル化プロセスを有するが、そのゲル化プロセスは速すぎることも無く(注入を可能にする)、遅すぎることも無い(材料を失うリスクが無い)製剤を同定することが重要であった。ゲル化時間は、傾斜試験により決定された:溶液を上下反対にすると、液体の流れが観察されない時、ゲルが形成されると考えられた。
アルギネート系の製剤の場合、ゲル化プロセスは、カルシウム溶液濃度とカルシウムとアルギネート溶液との相対的比率により、影響を受けた。ガラス製シャーレにまずアルギネートを加え、次にカルシウム溶液を加え、2つの溶液をできるだけ均一にするようにして、ゲルを調製した。塩化カルシウムの量が充分でない場合、37℃で長時間インキュベートした後でも、ゲル形成は観察されなかった。架橋剤(カルシウム)の量を増やし、ポリマー溶液:カルシウム溶液の比率を調整すると、2つの溶液を一緒に混合すると、ほぼ瞬間的にゲルが形成された。ある場合には、残存する液体相が観察された。37℃でインキュベーション後の液体の完全な消失に必要な時間は、ゲル化時間と見なされた。
調製と取り扱い段階中に室温で液体であり、注入後に、すなわち37℃にて生理学的条件下でゲルになるように、温度応答性ゲルが設計された。試験は、異なるキトサン系の製剤を5℃、25℃、及び37℃でインキュベートして、ゲル化時間を温度の関数として追跡して傾斜試験により行われた。結果は表3に要約される。
機械的特性
ヒドロゲルは、高い水保持能力を有する親水性ポリマーネットワークでできた1群の半固体材料である。一般にヒドロゲルは、粘性液体と弾力性固体との中間の機械的特性(粘弾性)を有する(Anseth et al., 1996)。これらの機械的特性は、インビボ環境の標的と似た条件下で決定され測定されることが重要である。
膨潤挙動
ヒドロゲル材料について評価すべき典型的なパラメータは、液体の存在下で膨潤または収縮する能力である。いったんインビボ条件下で注入された材料の挙動を予測するために試験が使用され、ここで、これは生理滑液と接触するであろう。
走査電子顕微鏡(SEM)分析
いったんゲルが形成された時の材料の微細構造を調べるために、SEM画像を取った。分析は、新たに調製し次に凍結乾燥したゲルについて行った。
インビトロ放出試験
膨潤試験の状況から、考慮された各時点で各ウェルの受容相を採取して、インビトロ放出試験を行った。活性アルギネート系ゲルからのすべての試料を、RP−HPLCにより分析した。さらに、選択された試料は、RP−HPLCで得られた結果を確認するために、より特異的で高感度の分析法であるビアコアによっても分析された。
a)PBS中1重量%のHSAの溶液、
b)PBS+F68中1重量%のHSAの溶液、
c)及びd) a)及びb)と同じであるが、HSAの濃縮溶液でウェルを前処理、
e)及びf) a)及びb)と同じであるが、FGF−18の濃縮バルクでウェルを前処理。
インビトロ細胞浸潤アッセイ
アルギネート系のヒドロゲルの場合のように、注入後3D構造を生成することができる製剤中のFGF−18の投与は、注入部位に活性分子(API)を局在化させる目的を有する。同時にこの製剤は、成長する軟骨が固定される足場を作成する。このため、選択されたアルギネート系ゲルの重要な要件は、材料と軟骨細胞との適合性、及び細胞により侵潤される能力である。従って、FGF−18を有するヒドロゲルをイン・サイチュで形成することに基づいて、代替製剤の細胞浸潤、細胞障害性、及び化学走化性について試験を行った。
これらのアルギネート製剤に基づく処置は、微小破壊戦略に連結することができる。すなわち、この技術とのゲルの適合性を証明するために、エクスビボの動物モデルについて予備試験が必要とされ、このために牛の膝を使用した。
方法欄に記載のように行われた細胞増殖アッセイは、ゲル中に捕捉されたFGF−18が、図10に示されるように、生物活性があり、明瞭な用量応答曲線を有することを示した。
イオン応答性ゲルは、架橋剤として塩化カルシウムを添加するとアルギン酸ナトリウムから得られ、一方、温度応答性ゲルは、β−GPを添加してpHを調整すると、ポリマーの沈殿無しでキトサンから得られた。
凍結乾燥製剤
FGF−18、糖(ショ糖)、及びI型コラーゲンを含むポリマー液体溶液を調製後(実施例2を参照)、溶液をバイアルに分配した。各バイアル(10ml,Fiolax Clear 45×24、forma vitrum SCHOTT)に、2mlのポリマー液体溶液を充填した。すべての充填バイアルを、凍結乾燥プロセスに供した。詳細には、このプロセスは以下の工程を含んだ:
− 25℃から−40℃へ1時間の冷却段階。ここで、製品の凍結が開始する。
− −40℃で4時間の凍結段階。ここで、製品は凍結して維持される。
− 真空段階。ここで、圧力が真空まで劇的に低下する。
− 第1の乾燥段階。30分で温度が−40℃から−10℃に進み、次に−10℃に10時間とどまる。
− 第2の乾燥段階。30分で温度が−10℃から21℃に進み、次に21℃に34時間とどまる。
− 第2の乾燥段階。16時間で温度が21℃から37℃に進み、次に37℃に20時間とどまる。
・ pH
・ 水分含有量
・ FGF18含有量
・ アルギネート含有量
・ アルギネートMW分布
・ 粘度
・ 機械的特性
・ 細胞浸潤能力。
pH: すべての3つの異なる温度でのインキュベーション時間にわたって、製剤のpH値の顕著な変動は記録されなかった。FD製剤のpHは液体製剤より高い(これが供された濾過及び凍結乾燥プロセスに起因する可能性が最も高い)が、これは経時的には変化しなかった。図12に示されたデータは、製剤が通常の保存条件下で12週まで安定であることを示唆した。
1. Ellsworth et al., 2002, Osteoarthritis and Cartilage, 10: 308-320.
2. Shimoaka et al., 2002, JBC 277(9):7493-7500
3. 国際公開第WO2008023063号
4. 国際公開第2004032849号
5. 国際公開第2012172072号
6. Ringe J. et al., 2012, Nature Reviews Rheumatology, 8(8):493-498.
7. C. Dispenza et al., 2011, Polym. CHem., 2, 192
8. J.K. Tessmar, A.M. Gopferich, 2007, Adv. Drug Delivery Rev. 59:274-291
9. C. Lo Presti et al., 2011, Reactive & Functional Polymers, 71:155-167
10. 国際公開第2008063418号
11. S.R. Van Tomme et al., 2008, INt. J. Pharm. 355: 1-18
12. 国際公開第98/16644号
13. 国際公開第2006/063362号
14. Ousters et al., 2007, Osteoarthritis and Cartilage, 15:1241-1248
15. Rayatopischeh et al., 2011, J. Biomed. Mater. Res. 98A:235-244
16. Tsai et al., 1998, BIotech. Techniques 12:21-23
17. Cheng et al., 2010, Tissue Engineering 16A:695-703
18. Schuetz et al., 2008, Eur. J. Pharm.Biopharm. 68:19-25
19. Yan et al., 2010, J.Biomat. Appl. 24:625-637
20. Ahmadi et al., 2008, J. Biomed. Mater. Res. 86A:824-832.
21. Hoemann et al., 2007, J. Biomed. Mater Res. 83A:521-529
22. Filion et al. 2007, Biomacromol. 8:3224-3234
Anseth et al., 1996, BIomarcromol. 17:1647-1657
24. Peppas et al., 2000, Eur. J. Pharm. Biophar. 50:27-46
25. Dang et al., 2011, Carbohydrate Plymers 83:171-178
25. 国際公開第2012113812号
配列番号1:未変性のヒトFGF−18のアミノ酸配列。
配列番号2:組換え切断型FGF−18(スプリフェルミン)のアミノ酸配列。
Claims (17)
- FGF−18、アルギネート、コラーゲン、安定剤としてのショ糖、及びジカチオン塩を含むか又はそれらから成る、均一なヒドロゲル。
- 以下の2つの溶液:
a.FGF−18、アルギネート、コラーゲン及び安定剤としてのショ糖を含むか又はそれらから成る、第1の均一溶液(溶液1)、及び
b.ジカチオン塩を含むか又はそれから成る第2の溶液(溶液2)
から形成される、請求項1に記載の均一なヒドロゲル。 - 前記ジカチオン塩が、カルシウム塩、マグネシウム塩、銅塩、又は亜鉛塩である、請求項1又は2に記載の均一なヒドロゲル。
- FGF−18が、
a)配列番号1のアミノ酸残基28〜207を含むか又はそれから成るポリペプチド、
b)配列番号1のアミノ酸残基28〜196を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び
c)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド
からなる群から選択される、請求項1〜3のいずれか1項に記載の均一なヒドロゲル。 - 前記各溶液において、アルギネートが3〜4重量%の濃度であり、コラーゲンが1〜2mcg/mlの濃度であり、ショ糖が10〜100mg/mlの濃度であり、塩が1〜20mg/mlの濃度である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の均一なヒドロゲル。
- 溶液1:溶液2の比率が2:1(体積対体積)である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の均一なヒドロゲル。
- a.FGF−18、アルギネート、コラーゲン、安定剤としてのショ糖を含むか又はそれらから成る、第1の均一溶液を調製する工程と、
b.ジカチオン塩を含むか又はそれから成る第2の溶液を調製する工程と、
c.両方の溶液を注入又は同時注入する前に前記2つの溶液を混合して、ヒドロゲルを形成する工程と
を含む、均一なヒドロゲルの製造方法。 - 前記ジカチオン塩が、カルシウム塩、マグネシウム塩、銅塩、又は亜鉛塩である、請求項7に記載の方法。
- FGF−18が、
a)配列番号1のアミノ酸残基28〜207を含むか又はそれから成るポリペプチド、
b)配列番号1のアミノ酸残基28〜196を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び
c)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド
からなる群から選択される、請求項7又は8に記載の方法。 - 前記各溶液において、アルギネートが3〜4重量%の濃度であり、コラーゲンが1〜2mcg/mlの濃度であり、ショ糖が10〜100mg/mlの濃度であり、塩が1〜20mg/mlの濃度である、請求項7〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 溶液1:溶液2の比率が2:1(体積対体積)である、請求項7〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 2つの容器を含む、軟骨障害を治療するための製品であって、
a.第1の容器は、第1の均一溶液を含むか又はそれから成り、ここで、前記第1の溶液は、FGF−18、アルギネート、コラーゲン、及び安定剤としてのショ糖を含むか又はそれらから成り、及び
b.第2の容器は、第2の溶液を含むか又はそれから成り、ここで、前記第2の溶液はジカチオン塩を含むか又はそれから成る、製品。 - 前記ジカチオン塩が、カルシウム塩、マグネシウム塩、銅塩、又は亜鉛塩である、請求項12に記載の製品。
- FGF−18が、
a)配列番号1のアミノ酸残基28〜207を含むか又はそれから成るポリペプチド、
b)配列番号1のアミノ酸残基28〜196を含むか又はそれから成るポリペプチド、及び
c)配列番号2を含むか又はそれから成るポリペプチド、
からなる群から選択される、請求項12又は13に記載の製品。 - 前記各溶液において、アルギネートが3〜4重量%の濃度であり、コラーゲンが1〜2mcg/mlの濃度であり、ショ糖が10〜100mg/mlの濃度であり、塩が1〜20mg/mlの濃度である、請求項12〜14のいずれか1項に記載の製品。
- 溶液1:溶液2の比率が2:1(体積対体積)である、請求項12〜15のいずれか1項に記載の製品。
- 第1の容器及び第2の容器は、2重チャンバーシステムの2つのコンパートメントであるか、又は2重針注入装置の2つのコンパートメントである、請求項12〜16のいずれか1項に記載の製品。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP13199591 | 2013-12-24 | ||
EP13199591.2 | 2013-12-24 | ||
PCT/EP2014/079205 WO2015097236A2 (en) | 2013-12-24 | 2014-12-23 | Fgf-18 formulation in alginate/collagen hydrogels |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017502042A JP2017502042A (ja) | 2017-01-19 |
JP6487448B2 true JP6487448B2 (ja) | 2019-03-20 |
Family
ID=49882942
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016542689A Active JP6487448B2 (ja) | 2013-12-24 | 2014-12-23 | アルギネート/コラーゲンヒドロゲル中のfgf−18製剤 |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9795714B2 (ja) |
EP (1) | EP3086822B1 (ja) |
JP (1) | JP6487448B2 (ja) |
KR (1) | KR102434024B1 (ja) |
CN (1) | CN106068131B (ja) |
AU (1) | AU2014372578B2 (ja) |
BR (1) | BR112016014717B1 (ja) |
CA (1) | CA2934638C (ja) |
ES (1) | ES2806026T3 (ja) |
HK (1) | HK1225657A1 (ja) |
IL (1) | IL246407B (ja) |
MX (1) | MX368970B (ja) |
NZ (1) | NZ721597A (ja) |
RU (1) | RU2698210C2 (ja) |
SG (1) | SG11201604972TA (ja) |
WO (1) | WO2015097236A2 (ja) |
ZA (1) | ZA201604610B (ja) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2658909C2 (ru) | 2013-02-14 | 2018-06-26 | НАНОПАРЕЙЛ, ЭлЭлСи | Гибридные войлоки из нановолокон, полученных электропрядением |
ES2865723T3 (es) | 2013-12-24 | 2021-10-15 | Ares Trading Sa | Formulación de FGF-18 en geles de xiloglucano |
PT3107592T (pt) * | 2014-02-20 | 2018-12-03 | Merck Patent Gmbh | Implante que compreende fgf-18 |
US10408686B2 (en) * | 2016-01-15 | 2019-09-10 | Temptime Corporation | Gel-based temperature indicators |
EP3821920A4 (en) * | 2018-07-13 | 2022-03-02 | T-ACE Medical Co., Ltd. | SUIT FOR ENDOSCOPIC SURGERY |
JP7388722B2 (ja) * | 2018-08-10 | 2023-11-29 | 国立大学法人 東京大学 | アルギン酸中空マイクロファイバ |
US20210369875A1 (en) * | 2018-11-06 | 2021-12-02 | National Cancer Center | Alginic acid-based injectable hydrogel system |
CN111068116B (zh) * | 2019-12-28 | 2022-03-22 | 河北柯瑞生物医药有限公司 | 一种注射用软骨修复温敏凝胶及其制备方法 |
US20230256138A1 (en) * | 2020-05-14 | 2023-08-17 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Composite product for the osteoarticular regeneration of cartilage lesion |
CN112263505A (zh) * | 2020-10-29 | 2021-01-26 | 广州栋方生物科技股份有限公司 | 一种铜肽组合物及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2254350A1 (en) * | 1998-11-17 | 2000-05-17 | Hsc Research And Development Limited Partnership | Method for bioengineering cartilage |
US6451346B1 (en) * | 1998-12-23 | 2002-09-17 | Amgen Inc | Biodegradable pH/thermosensitive hydrogels for sustained delivery of biologically active agents |
US6355204B1 (en) * | 2000-06-07 | 2002-03-12 | Owens-Brockway Plastic Products Inc. | Method of manufacturing a dual-chamber container |
WO2004000347A1 (en) * | 2002-06-21 | 2003-12-31 | Novo Nordisk A/S | Stabilised solid compositions of factor vii polypeptides |
AU2003279835B2 (en) | 2002-10-07 | 2009-09-10 | Zymogenetics, Inc. | Methods of administering FGF18 |
EP1799232B1 (en) | 2004-10-12 | 2015-10-07 | FMC Biopolymer AS | Self-gelling alginate systems and uses thereof |
US8741326B2 (en) * | 2006-11-17 | 2014-06-03 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Modified two-component gelation systems, methods of use and methods of manufacture |
WO2009127940A1 (fr) * | 2008-04-14 | 2009-10-22 | Adocia | Composition osteogenique comprenant un complexe facteur de croissance/polymere amphiphile un sel soluble de cation e un support organique |
JP2011160817A (ja) * | 2010-02-04 | 2011-08-25 | Univ Of Tokyo | 移植支援材料 |
CN103221066A (zh) * | 2010-10-15 | 2013-07-24 | 国立大学法人京都大学 | 缓释性药物组合物 |
US10034737B2 (en) * | 2011-02-22 | 2018-07-31 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Nano-reservoirs technology for use in bone and/or cartilage regeneration |
TWI527590B (zh) | 2011-06-17 | 2016-04-01 | 艾瑞斯貿易公司 | Fgf-18之凍乾調配物 |
ES2865723T3 (es) | 2013-12-24 | 2021-10-15 | Ares Trading Sa | Formulación de FGF-18 en geles de xiloglucano |
-
2014
- 2014-12-23 SG SG11201604972TA patent/SG11201604972TA/en unknown
- 2014-12-23 MX MX2016008442A patent/MX368970B/es active IP Right Grant
- 2014-12-23 CN CN201480076244.6A patent/CN106068131B/zh active Active
- 2014-12-23 US US15/105,710 patent/US9795714B2/en active Active
- 2014-12-23 CA CA2934638A patent/CA2934638C/en active Active
- 2014-12-23 EP EP14835555.5A patent/EP3086822B1/en active Active
- 2014-12-23 NZ NZ721597A patent/NZ721597A/en unknown
- 2014-12-23 ES ES14835555T patent/ES2806026T3/es active Active
- 2014-12-23 WO PCT/EP2014/079205 patent/WO2015097236A2/en active Application Filing
- 2014-12-23 JP JP2016542689A patent/JP6487448B2/ja active Active
- 2014-12-23 AU AU2014372578A patent/AU2014372578B2/en active Active
- 2014-12-23 BR BR112016014717-0A patent/BR112016014717B1/pt active IP Right Grant
- 2014-12-23 RU RU2016129817A patent/RU2698210C2/ru active
- 2014-12-23 KR KR1020167019786A patent/KR102434024B1/ko active IP Right Grant
-
2016
- 2016-06-22 IL IL246407A patent/IL246407B/en active IP Right Grant
- 2016-07-06 ZA ZA2016/04610A patent/ZA201604610B/en unknown
- 2016-12-06 HK HK16113919A patent/HK1225657A1/zh unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX2016008442A (es) | 2017-01-11 |
AU2014372578B2 (en) | 2018-03-01 |
US20160303291A1 (en) | 2016-10-20 |
EP3086822A2 (en) | 2016-11-02 |
CA2934638A1 (en) | 2015-07-02 |
ZA201604610B (en) | 2018-11-28 |
RU2016129817A3 (ja) | 2018-08-24 |
WO2015097236A2 (en) | 2015-07-02 |
BR112016014717A2 (pt) | 2017-09-19 |
US9795714B2 (en) | 2017-10-24 |
KR20160101163A (ko) | 2016-08-24 |
HK1225657A1 (zh) | 2017-09-15 |
AU2014372578A1 (en) | 2016-07-14 |
CN106068131A (zh) | 2016-11-02 |
RU2698210C2 (ru) | 2019-08-23 |
MX368970B (es) | 2019-10-23 |
EP3086822B1 (en) | 2020-04-15 |
KR102434024B1 (ko) | 2022-08-22 |
IL246407A0 (en) | 2016-08-31 |
RU2016129817A (ru) | 2018-01-30 |
JP2017502042A (ja) | 2017-01-19 |
SG11201604972TA (en) | 2016-07-28 |
BR112016014717B1 (pt) | 2020-12-01 |
WO2015097236A3 (en) | 2015-09-17 |
NZ721597A (en) | 2022-07-01 |
CA2934638C (en) | 2022-07-12 |
ES2806026T3 (es) | 2021-02-16 |
CN106068131B (zh) | 2020-01-17 |
AU2014372578A2 (en) | 2016-11-17 |
IL246407B (en) | 2020-01-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6487448B2 (ja) | アルギネート/コラーゲンヒドロゲル中のfgf−18製剤 | |
Meinel et al. | Silk constructs for delivery of musculoskeletal therapeutics | |
US20220151917A1 (en) | Freeze-dried polymer compositions for mixing with platelet rich plasma to form implants for tissue repair and/or compositions for therapeutic intra-articular injections | |
US20240115760A1 (en) | Lyophilized polymer scaffold compositions, processes for preparation and use in anabolic wound repair | |
KR102622290B1 (ko) | 크실로글루칸 겔 중의 fgf-18 제형물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20171012 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180626 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180926 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190122 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190221 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6487448 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |