JP6468520B2 - 医療用検査装置及び細胞検査方法 - Google Patents
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Description
前記流路部の内面の少なくとも一部は、水の接触角が25〜65度であることが好ましい。
前記超親水性ポリマー層は、ベタイン系ポリマーにより形成されていることが好ましい。
図1は、本発明の医療用検査装置1の模式図の一例である。医療用検査装置1は、流路部11を備え、該流路部11内にチャンバー部12を有している。流路部11の内面の全部又は一部に、親水性ポリマー層(図示せず)が形成(被覆)されている。なお、少なくともチャンバー部12の内面の全部又は一部(好ましくは全部)に親水性ポリマー層が形成されていることが好適である。
(1)、(2)の保持時間は、流路部11の大きさ、導入する液種、等により適宜設定すれば良いが、5分〜10時間が好ましく、10分〜5時間がより好ましく、15分〜2時間が更に好ましい。保持後、適宜、余分な親水性ポリマー溶液・分散液を排出し、乾燥してもよい。
AIBN(アゾビスイソブチロニトリル)を用いて、2−メトキシエチルアクリレートを80℃で6時間熱重合し、ポリ2−メトキシエチルアクリレートを作製した(分子量Mn:約15000、Mw:約50000)。そして、得られたポリ2−メトキシエチルアクリレートの0.2%メタノール溶液を作製した。
図1に示されるチャンバー部を備えたポリシクロオレフィン製流路内に、作製したポリ2−メトキシエチルアクリレート溶液(0.2質量%)を注入し、30分室温放置した後、液をピペットで吸出し、乾燥することで、医療用検査装置(流路部)を製造した。
L11:60mm
R11:1mm
L12:42mm
R12:9mm
ポリ2−メトキシエチルアクリレートの濃度を0.5質量%に変更した以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリ2−メトキシエチルアクリレートの濃度を1.0質量%に変更した以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリ2−メトキシエチルアクリレートの濃度を2.5質量%に変更した以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリシクロオレフィン製流路に代えて、同様のチャンバー部を備えたポリメタクリル酸メチル製流路を用いた以外は、実施例3と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリ2−メトキシエチルアクリレートの濃度を5.0質量%に変更した以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリ2−メトキシエチルアクリレート溶液(0.2質量%)を注入せず、ポリ2−メトキシエチルアクリレート層を形成しなかった以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリ2−メトキシエチルアクリレートの濃度を7.5質量%に変更した以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
ポリ2−メトキシエチルアクリレートの濃度を10.0質量%に変更した以外は、実施例1と同様にして医療用検査装置(流路部)を製造した。
(親水性ポリマー層(コーティング層)の膜厚)
内面の親水性ポリマー層の膜厚は、親水性ポリマー層が形成された流路部の断面を、TEMを使用し、加速電圧15kV、1000倍で測定(撮影)した。
医療用検査装置(流路部)の内部に、血漿に血小板を混合し、血小板濃度(播種密度)を4×107cells/cm2に調整した液を注入し、37℃で1時間静置した。内部をリン酸緩衝生理食塩水で洗浄した後、1%グルタルアルデヒドで固定した(37℃で2時間放置)。その後、再度リン酸緩衝生理食塩水及び蒸留水で洗浄した。
このサンプルをSEMで観察し、吸着した血小板の数を数えた。なお、比較例1の数を1として、相対値で比較した。
流路部の内面に蒸留水2μlを滴下し、30秒後の接触角をθ/2法(室温)で測定した。
医療用検査装置(流路部)の内部に、ヒト線維肉腫(HT1080:がん細胞の一種)の懸濁液(FBS、播種密度:1×104cells/cm2)を注入し、37℃で1時間静置した。内部をリン酸緩衝生理食塩水で洗浄した後、1%グルタルアルデヒドで固定した(37℃で2時間放置)。その後、再度リン酸緩衝生理食塩水及び蒸留水で洗浄した。
このサンプルをSEMで観察し、接着したがん細胞の数を数えた。なお、比較例1の数を1として、相対値で比較した。
医療用検査装置(流路部)の内部に、白血球の懸濁液(FBS、播種密度:1×104cells/cm2)を注入し、37℃で1時間静置した。内部をリン酸緩衝生理食塩水で洗浄した後、1%グルタルアルデヒドで固定した(37℃で2時間放置)。その後、再度リン酸緩衝生理食塩水及び蒸留水で洗浄した。
このサンプルをSEMで観察し、粘着した白血球の数を数えた。なお、比較例1の数を1として、相対値で比較した。
11 流路部
12 チャンバー部
L11 流路部の長さ
L12 チャンバー部の長さ
R11 チャンバー部以外の流路部11の幅
R12 チャンバー部の幅
Claims (9)
- チャンバー部を備えた流路部を有する医療用検査装置であって、
前記流路部の内面の少なくとも一部に、膜厚2〜200nmの親水性ポリマー層が形成され、
前記親水性ポリマー層は、アルコキシアルキルアクリレート及びアルコキシアルキルメタクリレートからなる群より選択される少なくとも1種の単独重合体及び/又は共重合体により形成されている血中循環腫瘍細胞の捕捉に用いられる医療用検査装置。 - 前記流路部は、アクリル樹脂、シクロオレフィン樹脂、カーボネート樹脂、及びスチレン樹脂からなる群より選択される少なくとも1種の素材で構成されるものである請求項1記載の医療用検査装置。
- 前記流路部の内面の少なくとも一部は、水の接触角が25〜65度である請求項1又は2記載の医療用検査装置。
- 前記流路部の内面に、前記親水性ポリマー層の他、水の接触角が0〜20度の超親水性ポリマー層が形成されている請求項1〜3のいずれかに記載の医療用検査装置。
- 前記超親水性ポリマー層は、ベタイン系ポリマーにより形成されている請求項4記載の医療用検査装置。
- 更に、細胞選別用フィルター構造、ピラー構造又はディッシュ構造(皿状のへこみ構造)を有する請求項1〜5のいずれかに記載の医療用検査装置。
- 請求項1〜6のいずれかに記載の医療用検査装置を用いて捕捉した血液又は体液中の血中循環腫瘍細胞を調べる細胞検査方法。
- 前記医療用検査装置の流路部に、血小板及び赤血球を除去した血液を導入する請求項7記載の細胞検査方法。
- 血小板及び赤血球の除去を遠心分離法で行う請求項8記載の細胞検査方法。
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