JP6425745B2 - 胚の発生を分析するための方法および装置 - Google Patents

Description

（発明の背景）
本発明は、胚の発生を分析するための方法および装置に関する。特に、一部の実施形態は、胚の発生に関する複数のパラメーター（変数／表示）、例えば、ある特定の細胞分裂事象についてのタイミングの値を確立するための方法および装置に関する。

不妊症は、世界的に８０００万を超える人に影響している。すべてのカップルの１０％が原発性または続発性不妊症を経験すると推定されている。ｉｎ ｖｉｔｒｏ受精（ＩＶＦ）は、他の方法では妊娠することができなかったカップルに、妊娠を確立する機会をもたらし得る選択的な医療処置である。これは、実験室で卵子（卵母細胞）が女性の卵巣から採取され、次いで精子と受精されるプロセスである。次いでこのプロセスで創製された胚は、可能性のある着床のために子宮内に配置される。受精（精子注入）と移植との間で、胚は、典型的には、例えば、インキュベーターのインキュベーションチャンバー内で２〜６日間にわたって保管され、この時間中に、これらは、例えばイメージングによって定期的に監視されて、これらの発生が評価され得る。インキュベーター内の条件、例えば、温度および大気組成などは、一般に、輸卵管および子宮内の条件をエミュレートすることを視野に入れて制御される。

典型的なＩＶＦサイクルでは、単一の患者からのいくつかの卵子が受精され、得られる胚がインキュベートされることになる。しかし、すべてのインキュベートされた胚が、患者の子宮に移植されるわけではないことが通常である。これは、潜在的に危険な多胎出産のリスクを低減するためである。胚は、典型的には、インキュベートされた胚の発生能力の評価に基づいて、移植のために選択されることになる。生児出生へと発達する最大の可能性を有すると判定された胚が、これらのコホート中の他の胚に対して優先的に選択されることになる。したがって、ＩＶＦ処置の重要な側面は、コホートを構成する胚の発生能力を評価すること、すなわち、胚品質を判定することであり、この場合、胚品質は、移植後に子宮内で順調に着床し、発生し、健康な赤ん坊の出生に至る胚の見込みを代表する予測である。

最近開発された胚品質を評価するための強力なツールは、タイムラプス胚イメージングである。タイムラプス胚イメージングは、胚の発生中にこれらの画像を得ることを伴う。これは、細胞分裂などの様々な発生事象のタイミングが確立されることを可能にすることができる。これらのタイミングは、時に、胚についてのモルフォキネティックパラメーターと呼ばれる場合がある。試験により、どのように様々な胚発生事象のタイミングおよび継続時間を胚の発生能力と相関させることができるかが示された。例えば、１つの細胞から２つの細胞への相対的に早い時間の分裂は、高品質な胚の表示であることが判明した。他のモルフォキネティックパラメーター、例えば、２つの細胞から４つの細胞に分裂するときの２つの分裂におけるシンクロニシティの程度も、胚品質に感受性であることが判明した。より一般に、胚のｉｎ−ｖｉｔｒｏ発生に関するパラメーターから胚の発生能力を評価するための様々な手法が提案されている。したがって、タイムラプスイメージングを使用して胚品質を評価するとき、例えば、異なる段階における細胞均一性（均等性）、前核（ＰＮ）の出現、および多核形成（ＭＮ）の存在の観点から、様々な胚発生事象のタイミングに関する様々なパラメーターおよび／または胚の発生に関する他の特性についての値を確立することが重要となり得る。一連のタイムラプス画像から胚の発生に関するパラメーターの値を確立するために、ユーザーは、典型的には、動画として一連のタイムラプス画像を閲覧して、目的の事象と関連した画像（したがって、タイミング）を識別し、他の特性（不均等性、ＰＮ出現、およびＭＮなど）を評価することができる画像を識別することになる。画像のタイムラプスシリーズから目的パラメーターの値を確立するこのプロセスは、時にアノテーションと呼ばれる。

タイムラプス胚イメージングを実施するための１つの周知の装置は、Ｕｎｉｓｅｎｓｅ ＦｅｒｔｉｌｉＴｅｃｈ Ａ／Ｓ（Ａａｒｈｕｓ、デンマーク）によって開発され、それから入手可能なＥｍｂｒｙｏＳｃｏｐｅ（ＲＴＭ）デバイスおよび関連したＥｍｂｒｙｏＶｉｅｗｅｒ（ＲＴＭ）ソフトウェアである。

アノテーションは一般に、熟練した発生学者によって実施され、実施するのに相対的に長い時間を要し得る。これは、それぞれの目的パラメーターについて妥当な臨床的評価を行うことに加えて、ユーザーは、相対的に長い一連の画像であり得るものを見てまわる必要があり、さらに、典型的には、各患者のいくつかの異なる胚についてこれを行うことになるためである。
米国特許第７，６７２，３６９Ｂ２号［１］には、目的パラメーターが、細胞モデルの模擬画像を観察されたデータと比較することによって自動的に確立され得る手法が開示されている。米国特許第７，９６３，９０６Ｂ２号［２］には、画像の自動化された画像処理についてのスキームも記載されている。自動化された方法は、手作業のアノテーションの必要性を回避するが、熟練した臨床的評価の対応する欠如は、懸念の原因を与え得る。

米国特許第７，６７２，３６９号明細書 米国特許第７，９６３，９０６号明細書

したがって、現在の技法に従ってタイムラプス画像から胚の発生に関する目的パラメーターの値を確実に確立するプロセスは、相対的に時間のかかるプロセスであり得る。したがって、例えば、ユーザーがアノテーションをより迅速に実施するのを助けることによって、ユーザーが一連の画像から胚の発生に関する複数の目的パラメーターの値を確立するのを助けることができるスキームの要望がある。

（発明の要旨）
本発明の第１の態様によれば、ユーザーが胚の発生の間の異なる時間における胚の一連の画像から胚の発生に関する複数の目的パラメーター（変数／表示）の値を確立するのを助けるための方法であって、（ａ）複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップと；（ｂ）現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、一連の画像内から１つの画像を自動的に選択するステップであって、画像は、現在の目的パラメーターに従って選択される、ステップと；（ｃ）ディスプレイにユーザーに選択された画像を表示するステップと；（ｄ）ユーザー入力に応答して、選択された画像周辺の一連の画像をスクロールすることによってディスプレイに表示される画像を変更するステップと；（ｅ）ユーザー入力に応答して、現在の目的パラメーターの値を確立するステップとを含む、方法が提供されている。

一部の、しかしすべてではない実施形態によれば、上記方法は、（ｆ）現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択し、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すステップをさらに含み得る。

一部の実施形態によれば、ステップ（ｆ）においてステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すことは、すべての目的パラメーターの値が確立されるまで、ステップ（ｆ）を繰り返すことも含む。

一部の実施形態によれば、画像は、一連の画像の分析に基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される。

一部の実施形態によれば、一連の画像の分析は、一連の画像を含む画像間の変化の量の表示を判定することを含む。

一部の実施形態によれば、画像は、一連の画像を含む画像と目的パラメーターとの間の予め既定された関連性によってステップ（ｂ）において自動的に選択される。

一部の実施形態によれば、予め既定された関連性は、それぞれの目的パラメーターと関連した予め既定されたタイミングを、それぞれの画像と関連したタイミングと比較することに基づく。

一部の実施形態によれば、上記方法は、（ｈ）さらなる胚についての複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップと；（ｉ）現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、さらなる胚の一連の画像内から１つの画像を自動的に選択するステップであって、画像は、現在の目的パラメーターに従って選択される、ステップと；（ｊ）ディスプレイに、ユーザーに選択された画像を表示するステップと；（ｋ）１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、ディスプレイに表示された画像を一連の画像からの別の画像に変更するステップと；（ｌ）ユーザー入力に応答して、さらなる胚について現在の目的パラメーターの値を確立するステップと；（ｍ）現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択するステップ、ステップ（ｉ）〜（ｍ）を繰り返すステップによって、さらなる胚の一連の画像からさらなる胚の発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けることをさらに含む。

一部の実施形態によれば、異なる胚の異なる目的パラメーターの値は、胚の一方についての異なる目的パラメーターを確立し、次いで胚の他方についての異なる目的パラメーターを確立することによって；または異なる胚についての目的パラメーターを確立し、次いで異なる胚の別の目的パラメーターを確立することによって順に確立される。

一部の実施形態によれば、目的パラメーターは、胚の発生事象についての時間を含む。

一部の実施形態によれば、画像は、現在の目的パラメーターと関連した発生事象についての予測されたタイミングに基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される。

一部の実施形態によれば、目的パラメーターの値は、胚特性のユーザー分類である。

一部の実施形態によれば、画像は、現在の目的パラメーターと関連した胚特性が明らかであると予測される画像の予測されたタイミングに基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される。

一部の実施形態によれば、ステップ（ａ）において現在の目的パラメーターを選択すること、および／またはステップ（ｆ）において別の目的パラメーターを選択することは、ユーザー入力に基づく。

一部の実施形態によれば、ステップ（ａ）において現在の目的パラメーターを選択すること、および／またはステップ（ｆ）において別の目的パラメーターを選択することは、予め規定されたシーケンスに従って目的パラメーターを選択することによって自動的に実施される。

一部の実施形態によれば、ステップ（ｆ）は、ステップ（ｅ）のユーザー入力に応答して自動的に実施される。

一部の実施形態によれば、現在の目的パラメーターの値は、ユーザー入力がステップ（ｅ）で受け取られるときディスプレイに表示される一連の画像からの１つの画像と関連したタイミングに従って判定される。

一部の実施形態によれば、方法は、確立された複数の目的パラメーターの値の表現を表示することをさらに含む。

一部の実施形態によれば、確立された複数の目的パラメーターの値の表現は、確立された複数の目的パラメーターの値の表形式表現またはグラフィック表現を含む。

一部の実施形態によれば、方法は、確立されなかった複数の目的パラメーターの少なくとも一部の予測された値の表現を表示することをさらに含む。

一部の実施形態によれば、方法は、確立された複数の目的パラメーターの値および確立されなかった複数の目的パラメーターの予測された値が、異なって表現されることをさらに含む。

一部の実施形態によれば、方法は、複数の目的パラメーターについて確立された値の１つ以上から胚についての発生能力を判定することをさらに含む。

本発明の第２の態様によれば、本発明の第１の態様の方法を実施するための機械可読命令を持つ非一時的コンピュータープログラム製品が提供されている。

本発明の第３の態様によれば、本発明の第１の態様の方法を実施するための機械可読命令がロードされ、それを実行するように作動可能な装置が提供されている。

本発明の第４の態様によれば、胚の発生の間の異なる時間における胚の一連の画像から胚の発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けるための装置であって、プロセッサーエレメント、ならびにディスプレイおよび１つ以上のユーザー入力デバイスを含むユーザーインターフェースエレメントを含み、プロセッサーエレメントは、（ａ）複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップ；（ｂ）現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために一連の画像内から１つの画像を選択するステップであって、画像は、現在の目的パラメーターに従って自動的に選択される、ステップ；（ｃ）ディスプレイにユーザーに選択された画像を表示するステップ；（ｄ）１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、ディスプレイに表示された画像を、一連の画像からの別の画像に変更するステップ；および（ｅ）１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、現在の目的パラメーターの値を確立するステップを装置に実施させるように構成されている、装置が提供されている。

一部の、しかしすべてではない実施形態によれば、装置は、（ｆ）現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択し、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すようにさらに構成され得る。

本発明の第１の態様および他の態様に関して上述した本発明の特徴および態様は、必要に応じて、かつ上述した具体的な組合せだけでなく、本発明の他の態様による本発明の実施形態に同等に適用可能であり、これらと組み合わせてもよいことが察知されるであろう。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
発生の間の異なる時間における少なくとも１つの胚の一連の画像から前記少なくとも１つの胚の前記発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けるための方法であって、
（ａ）前記複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップと；
（ｂ）前記現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、前記一連の画像内から１つの画像を自動的に選択するステップであって、前記画像は、前記現在の目的パラメーターに従って選択される、ステップと；
（ｃ）ディスプレイに前記ユーザーに前記選択された画像を表示するステップと；
（ｄ）ユーザー入力に応答して、前記ディスプレイに表示された前記画像を、前記一連の画像からの別の画像に変更するステップと；
（ｅ）ユーザー入力に応答して、前記現在の目的パラメーターの値を確立するステップと；
（ｆ）前記現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択し、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すステップと
を含む、方法。
（項目２）
ステップ（ｆ）においてステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すことが、すべての目的パラメーターの値が確立されるまでステップ（ｆ）を繰り返すことも含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記画像が、前記一連の画像の分析に基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目４）
前記一連の画像の前記分析が、前記一連の画像を含む画像間の変化の量の表示を判定することを含む、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目５）
前記画像が、前記一連の画像を含む前記画像と前記目的パラメーターとの間の予め規定された関連性によってステップ（ｂ）において自動的に選択される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目６）
前記予め規定された関連性が、それぞれの前記目的パラメーターと関連した予め規定されたタイミングを、それぞれの前記画像と関連したタイミングと比較することに基づく、項目５に記載の方法。
（項目７）
さらなる胚の一連の画像から前記さらなる胚の発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けることをさらに含み、
（ｈ）前記さらなる胚の前記複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップと；
（ｉ）前記現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、前記さらなる胚の前記一連の画像内から１つの画像を自動的に選択するステップであって、前記画像は、前記現在の目的パラメーターに従って選択される、ステップと；
（ｊ）ディスプレイに前記ユーザーに前記選択された画像を表示するステップと；
（ｋ）ユーザー入力に応答して、前記ディスプレイに表示された前記画像を、前記一連の画像からの別の画像に変更するステップと；
（ｌ）ユーザー入力に応答して、前記さらなる胚について前記現在の目的パラメーターの値を確立するステップと；
（ｍ）前記現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択するステップと、ステップ（ｉ）〜（ｍ）を繰り返すステップと
を含む、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目８）
異なる前記胚についての異なる前記目的パラメーターの値が、
前記胚の一方についての異なる目的パラメーターを確立し、次いで前記胚の他方についての異なる前記目的パラメーターを確立することによって；または
異なる前記胚について１つの目的パラメーターを確立し、次いで異なる前記胚の別の目的パラメーターを確立することによって
順に確立される、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記目的パラメーターが、前記少なくとも１つの胚についての発生事象の時間を含む、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記画像が、前記現在の目的パラメーターと関連した発生事象について予測されたタイミングに基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記目的パラメーターの前記値が、胚特性のユーザー分類である、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
前記画像が、前記現在の目的パラメーターと関連した前記胚特性が明らかであると予測される画像の予測されたタイミングに基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
ステップ（ａ）において現在の目的パラメーターを選択すること、および／またはステップ（ｆ）において別の目的パラメーターを選択することが、ユーザー入力に基づく、項目１から１２のいずれかに記載の方法。
（項目１４）
ステップ（ａ）において現在の目的パラメーターを選択すること、および／またはステップ（ｆ）において別の目的パラメーターを選択することが、予め規定されたシーケンスに従って目的パラメーターを選択することによって自動的に実施される、項目１から１２のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
ステップ（ｆ）が、ステップ（ｅ）の前記ユーザー入力に応答して自動的に実施される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１６）
前記現在の目的パラメーターの値が、前記ユーザー入力がステップ（ｅ）で受け取られるとき、前記ディスプレイに表示される前記一連の画像からの１つの画像と関連したタイミングに従って判定される、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１７）
確立された前記複数の目的パラメーターの前記値の表現を表示するステップをさらに含む、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目１８）
確立された前記複数の目的パラメーターの前記値の前記表現が、確立された前記複数の目的パラメーターの前記値の表形式表現またはグラフィック表現を含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
確立されなかった前記複数の目的パラメーターの少なくとも一部の予測された値の表現を表示するステップをさらに含む、項目１７または１８に記載の方法。
（項目２０）
確立された前記複数の目的パラメーターの前記値および確立されなかった前記複数の目的パラメーターの前記予測された値が、異なって表現される、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記複数の目的パラメーターについて確立された前記値の１つ以上から前記少なくとも１つの胚についての発生能力を判定するステップをさらに含む、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目２２）
ステップ（ａ）で選択される前記現在の目的パラメーターおよびステップ（ｆ）で選択される前記別の目的パラメーターが、異なる胚と関連するか、または同じ胚と関連した異なる目的パラメーターである、前記項目のいずれかに記載の方法。
（項目２３）
項目１から項目２２のいずれかに記載の方法を実施するための機械可読命令を持つ非一時的コンピュータープログラム製品。
（項目２４）
項目１から項目２２のいずれかに記載の方法を実施するための機械可読命令がロードされ、それを実行するように作動可能な装置。
（項目２５）
発生の間の異なる時間における少なくとも１つの胚の一連の画像から前記少なくとも１つの胚の前記発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けるための装置であって、プロセッサーエレメント、ならびにディスプレイおよび１つ以上のユーザー入力デバイスを含むユーザーインターフェースエレメントを含み、前記プロセッサーエレメントは、
（ａ）前記複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップ；
（ｂ）前記現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、前記一連の画像内から１つの画像を選択するステップであって、前記画像は、前記現在の目的パラメーターに従って自動的に選択される、ステップ；
（ｃ）前記ディスプレイに前記ユーザーに前記選択された画像を表示するステップ；
（ｄ）前記１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、前記ディスプレイに表示された前記画像を、前記一連の画像からの別の画像に変更するステップ；
（ｅ）前記１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、前記現在の目的パラメーターの値を確立するステップ；および
（ｆ）前記現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択し、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すステップ
を前記装置に実施させるように構成されている、装置。
（項目２６）
添付の図面の図３〜１７を参照して本明細書に実質的に先に記載されたような方法。
（項目２７）
添付の図面の図３〜１７を参照して本明細書に実質的に先に記載されたような装置。

次に本発明を、以下の図面を参照して単なる例として記載する。

図１は、得られた画像に関して、卵割時間（ｔ２〜ｔ５）、細胞周期（ｃｃ１〜ｃｃ３）の継続時間、ならびに同調性（ｓ２およびｓ３）を示す胚卵割パターンについての本明細書で使用するいくつかの命名法を概略的に表す。 図２は、本明細書で使用するタイミングの専門用語のいくつかの関連した様相とともに、初期の精子注入（時間ｔ＝０における）からの、および卵割時間ｔ２〜ｔ８における異なる胚発生事象における胚を概略的に表す。 図３は、本発明の一実施形態による１つ以上の胚の発生に関するパラメーターの値を確立するための装置を概略的に表す。 図４は、本発明の一実施形態による１つ以上の胚の発生に関するパラメーターの値を確立するための方法を概略的に表す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図５〜１５は、本発明の一実施形態による胚の発生に関するパラメーターの値を確立するコンピューター実装方法の様々な段階におけるコンピューター表示を概略的に示す。 図１６は、本発明の一実施形態による１つ以上の胚の発生に関するパラメーターの値の表示を概略的に示す。 図１７は、本発明の別の実施形態による１つ以上の胚の発生に関するパラメーターの値の表示を概略的に示す。

（詳細な説明）
文脈により別段に要求されない限り、本明細書で使用する用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるこれらの意味に従って解釈されるべきである。一部の用語は、以下の定義に従って本明細書で使用され得る（文脈により別の意味を要求されない限り）。

卵割時間（細胞分裂時間）は、新しく形成された割球がコンフルエントな細胞膜によって完全に分離されている、既定されたスタート点（ゼロ時間）と比べて最初の観察される時点として定義され、したがって、卵割時間は、割球卵割の完了の時間である。本文脈では、時間は、通常、精子注入の時間（例えば、マイクロインジェクションとも呼ばれる卵細胞内精子注入法（ＩＣＳＩ）の時間）後の時間として表現される。しかし、これは、精子および卵母細胞の混合（伝統的なＩＶＦにおける）の時間後、または新しい生物（接合体）を形成するための配偶子の順調な融合が初めて観察される、すなわち、第２の極体を除外する時間後でもあり得る。同様に、これは、前核の出現もしくは衰退／消失、または他の重要な発生的なパラメーターの時間後であり得る。したがって、卵割時間は、以下のように定義され得る。
− ｔ２：２割球胚への卵割の時間
− ｔ３：３割球胚への卵割の時間
− ｔ４：４割球胚への卵割の時間
− ｔ５：５割球胚への卵割の時間
− ｔ６：６割球胚への卵割の時間
− ｔ７：７割球胚への卵割の時間
− ｔ８：８割球胚への卵割の時間
− ｔｎ：ｎ割球胚への卵割の時間

第１の細胞周期継続時間ｃｃ１は、受精と娘細胞の第１の対（すなわち、第１の第２世代細胞）をもたらす卵割時間ｔ２との間の期間である。第２の細胞周期継続時間ｃｃ２は、娘細胞の第１の対をもたらす卵割時間ｔ２と孫娘細胞の第１の対（すなわち、第１の第３世代細胞）をもたらす卵割時間ｔ３との間の期間である。第３の細胞周期継続時間ｃｃ３は、孫娘細胞の第１の対をもたらす卵割時間ｔ３とひ孫娘細胞の第１の対（すなわち、第１の第４世代細胞）をもたらす卵割時間ｔ５との間の期間である。第４の細胞周期継続時間ｃｃ４は、ひ孫娘細胞の第１の対をもたらす卵割時間ｔ５と玄孫娘（ｇｒｅａｔ−ｇｒｅａｔ−ｇｒａｎｄｄａｕｇｈｔｅｒ）細胞の第１の対（すなわち、第１の第５世代細胞）をもたらす卵割時間ｔ９との間の期間である。

したがって、これらの細胞周期継続時間は、それぞれの新しい世代のために分割する割球の最も速いものに基づく。しかし、より遅い割球の分裂と関連した追加の細胞周期継続時間が存在する。

例えば、細胞周期継続時間ｃｃ２に加えて、娘細胞の第１の対をもたらす卵割時間ｔ２と孫娘細胞の第２の対をもたらす卵割時間ｔ４との間の期間に対応する細胞周期継続時間ｃｃ２ｂが存在する。この点において、細胞周期継続時間ｃｃ２は、専門用語において簡単にするために細胞周期継続時間ｃｃ２ａと呼ばれる場合もある。

さらに、細胞周期継続時間ｃｃ３に加えて、孫娘細胞の第１の対をもたらす卵割時間ｔ３とひ孫娘細胞の第２の対をもたらす卵割時間ｔ６との間の期間に対応する細胞周期継続時間ｃｃ３ｂが存在する。孫娘細胞の第２の対をもたらす卵割時間ｔ４とひ孫娘細胞の第３の対をもたらす卵割時間ｔ７との間の期間に対応する細胞周期継続時間ｃｃ３ｃも存在する。孫娘細胞の第２の対をもたらす卵割時間ｔ４とひ孫娘細胞の第４の対をもたらす卵割時間ｔ８との間の期間に対応する細胞周期継続時間ｃｃ３ｄも存在する。この点において、細胞周期継続時間ｃｃ３は、専門用語における一貫性のために細胞周期継続時間ｃｃ３ａと呼ばれる場合もある。

したがって、細胞周期の継続時間は、以下のように定義される。
− ｃｃ１＝ｔ２：第１の細胞周期。
− ｃｃ２（ｃｃ２ａとも呼ばれる）＝ｔ３−ｔ２：第２の細胞周期、２割球胚としての期間の継続時間。
− ｃｃ２ｂ＝ｔ４−ｔ２：両方の割球の第２の細胞周期、２および３割球胚としての期間の継続時間。
− ｃｃ３（ｃｃ３ａとも呼ばれる）＝ｔ５−ｔ３：第３の細胞周期、３および４割球胚としての期間の継続時間。
− ｃｃ２＿３＝ｔ５−ｔ２：第２および第３の細胞周期、２、３、および４割球胚としての期間の継続時間（すなわち、ｃｃ２＋ｃｃ３）。
− ｃｃ４＝ｔ９−ｔ５：第４の細胞周期、５、６、７、および８割球胚としての継続時間。

シンクロニシティは、以下の通り定義される。
− ｓ２＝ｔ４−ｔ３：２割球胚から４割球胚への分裂における同調性。
− ｓ３＝ｔ８−ｔ５：４割球胚から８割球胚への分裂における同調性。
− ｓ３ａ＝ｔ６−ｔ５；ｓ３ｂ＝ｔ７−ｔ６；ｓ３ｃ＝ｔ８−ｔ７：４割球胚から８割球胚への発生に関与する個々の細胞分裂の継続時間。
− ｃｃ３ｂ、ｃｃ３ｃ、ｃｃ３ｄ＝それぞれ、ｔ６−ｔ３；ｔ７−ｔ４；およびｔ８−ｔ４：より遅い割球の第３の細胞周期、それぞれ３、４、および５割球胚としての、４、５、および６割球胚としての、ならびに４、５、６、および７割球胚としての期間の継続時間。

図１および２は、上記に論じたものなどのいくつかの胚発生事象のタイミングおよび継続時間に関する本明細書で使用する専門用語のいくつかの様相を概略的に表す。図１は、発生の様々な段階における胚のいくつかの画像を示し、様々な発生事象と関連した様々なタイミング、例えば、ｔ２、ｔ３、ｔ４、ｔ５、ｃｃ１、ｃｃ２（ｃｃ２ａと本明細書で呼ばれる場合もある）、ｃｃ３（ｃｃ３ａと本明細書で呼ばれる場合もある）、ｓ２、およびｓ３などを示す。図２は、１、２、３、４、５、６、７、および８割球段階を通じた胚の発生を左から右に概略的に表す。それぞれの細胞分裂段階が完了する時間ｔ２〜ｔ８が、下の軸に沿って概略的にマークされている。図２は、細胞周期継続時間ｃｃ１、ｃｃ２ａ、ｃｃ２ｂ、ｃｃ３ａ、ｃｃ３ｂ、ｃｃ３ｃ、およびｃｃ３ｄ、ならびにシンクロニシティＳ２およびＳ３も概略的に示す。

卵割期間は、細胞膜中の凹み（細胞質卵割の始まりを示す）の最初の観察から、細胞質細胞卵割が完了し、その結果、割球がコンフルエントな細胞膜によって完全に分離されるときまでの時間として定義される。細胞質分裂の継続時間とも呼ばれる。

受精および卵割は、いくつかの点で、少なくとも８割球段階まで、または胚細胞緊密化のスタートまで、胚の一次形態学的事象であると見なされる場合がある。卵割時間、細胞周期、分裂の同調性、および卵割期間は、これらの一次形態学的事象から定義することができる形態学的胚パラメーターの例であり、これらの形態学的胚パラメーターのそれぞれは、例えば、時間で測定される２つの形態学的事象間の時間の継続時間として定義され得る。
既に述べたように、胚の発生と関連した様々なパラメーター、例えば、上記に論じたタイミングに対応する（または基づく）パラメーターなどから胚の発生能力の尺度を確立することが公知であり、これを行うために、該当する目的パラメーターの値を、胚が該当する段階を通じて発達する際の胚のタイムラプス画像から判定してもよい。胚の発生能力を判定するためのいくつかの手法では、他の発生的な特性も目的となり得る。例えば、胚の品質の評価は、以下の特性について確立された値を考慮し得る。

− ＮＯＴ２ＰＮ：２つの前核が胚に対して適切に識別されているか否かの表示。この特性は、適切な発生段階において胚の画像から視覚的に判定され得、胚について識別された前核の数によって「０」、「１」、「２」、「３」、または「４もしくはそれ超」に対応する値をとり得る（「２」の値が通常である）。

− ＭＮ２：２割球（細胞）段階において観察される（任意の）多核形成の表示。この特性は、適切な発生段階において胚の画像から視覚的に判定され得、２割球段階における多核形成を示すと判定された細胞の数に対応する「０」、「１」、または「２」に対応する値をとり得る。

− ＭＮ４：４割球段階において観察される（任意の）多核形成の表示。この特性は、適切な発生段階において胚の画像から視覚的に判定され得、４割球段階における多核形成を示すと識別された細胞の数に対応する「０」、「１」、「２」、「３」、または「４」に対応する値をとり得る。

− ＵＮＥＶＥＮ２：２割球段階における割球の（不）均等性の表示。この特性は、適切な発生段階において胚の画像から視覚的に判定され得、「均等」（２割球胚中の割球が均等であると分類される）または「不均等」（２割球胚中の割球が不均等であると分類される）に対応する値をとり得る。

− ＵＮＥＶＥＮ４：４割球段階における割球の（不）均等性の表示。この特性は、適切な発生段階において胚の画像から視覚的に判定され得、「均等」（４割球胚中の割球が均等であると分類される）または「不均等」（４割球胚中の割球が不均等であると分類される）に対応する値をとり得る。

これらのパラメーターの一部の値の確立は、例えば、胚を含む細胞が均等であるか、または均等でないかに関して主観の要素を含み得ることが察知されるであろう。具体的な値について採用される専門用語（例えば、「均等」、「不均等」）は、重要でなく、値は、別のやり方で、例えば、異なる潜在的な状態に関連した数値（例えば、均等について「０」、不均等について「１」）によって「真」または「偽」として同等に特徴付けることができることも察知されるであろう。

胚品質は、移植後に子宮内で順調に着床および発生する胚の能力の尺度である。高品質の胚は、低品質胚より、移植後に子宮内で順調に着床および発生して健康な赤ん坊になる高い確率を有する。しかし、実際の移植および女性の受容性が最終的な結果に影響するので、高品質胚でも着床の保証にはならない。

バイアビリティーおよび品質は、互換的に使用され得る。胚品質（またはバイアビリティー）の測定値は、胚の品質（またはバイアビリティー）を反映するように意図されたパラメーターであり、その結果、品質パラメーターのある特定の値（例えば、どのようにパラメーターが定義されるかに応じて高いまたは低い値）を有する胚は、高品質（またはバイアビリティー）のものである高い確率、および低品質（またはバイアビリティー）である低い確率を有する。一方、品質（またはバイアビリティー）パラメーターのある特定の他の値を有する胚は、高品質（またはバイアビリティー）を有する低い確率、および低品質（またはバイアビリティー）である高い確率を有する。

用語「発生能力」は、胚盤胞段階まで発達し、着床し、妊娠をもたらし、かつ／または生きて生まれる赤ん坊をもたらす胚の推定見込みを反映するのに使用され得る。一部の実施形態では、発生能力は、胚品質の判定であり得る。発生能力は、胚品質と同一視され得る。正の発生能力（すなわち、良好な（高い）胚品質）を有する胚は、負の発生能力（または芳しくない（低い）胚品質）を有する胚と比較して、移植後に子宮内で胚が胚盤胞段階まで発達し、かつ／もしくは順調な着床をもたらし、かつ／もしくは発達し、かつ／または妊娠をもたらし、かつ／または生きて生まれる赤ん坊をもたらす可能性が高いものである。

したがって、良好な（高い）品質のものであると判定された胚は、低品質胚と比較して移植後に子宮内で順調に着床し、かつ／または発達するより高い確率を有すると判定される。しかし、実際の移植および女性の受容性が最終的な結果に高度に影響するので、高品質胚は着床の保証にはならないことが察知されるであろう。

一部の場合では、用語「胚」は、その段階でそれが胎児となる受精後８週間までの子宮内での着床後の受精卵母細胞を記述するのに使用される場合がある。この定義によれば、受精卵母細胞は、着床が起こるまで初期胚または接合体と呼ばれることが多い。しかし、用語「胚」は、本明細書において使用される場合、初期胚期を含む、より広い定義を有することになる。用語「胚」は、本明細書において使用される場合、卵母細胞の受精から桑実胚、胚盤胞段階、孵化、および着床までのすべての発生段階を包含する。したがって、用語の胚は、受精卵母細胞、接合体、２−細胞、４−細胞、８−細胞、１６−細胞、胚細胞緊密化、桑実胚、胚盤胞、拡大胚盤胞、および孵化胚盤胞の段階のそれぞれ、ならびに間のすべての段階（例えば、３−細胞または５−細胞）を表すのに本明細書で存在し得る。

胚は、およそ球状であり、ゼラチン様シェルによって取り囲まれた１つ以上の細胞（割球）、透明帯として公知の無細胞マトリックスから構成されている。透明帯は、胚孵化まで様々な機能を実施し、胚評価の良好なランドマークである。透明帯は、球状かつ半透明であり、細胞残屑から明らかに区別可能であるはずである。

胚は、卵母細胞が精子細胞（精子）の融合または注射によって受精されるとき形成される。胚の用語は、孵化（すなわち、透明帯（ｚｏｎａ ｐｅｌｕｃｉｄａ）の破裂）および後に続く着床後にも伝統的に使用される。ヒトについて、受精卵母細胞は、最初の８週間にわたって接合体または胚と伝統的に呼ばれる。その後（すなわち、８週間後、かつすべての主要臓器が形成されたとき）、それは胎児と呼ばれる。しかし、接合体、胚、および胎児の間の区別は、一般に、明確に定義されていない。胚および接合体の用語は、互換的に本明細書で使用され得る。

本明細書に記載のものなどの本発明の実施形態に従って分析される胚は、先に凍結される場合があり、例えば、受精直後に（例えば、１−細胞期において）凍結保存され、次いで解凍される胚であり得る。代わりに、これらは、新たに調製される場合があり、例えば、ＩＶＦまたはＩＣＳＩ技法によって卵母細胞から新たに調製される胚であり得る。胚の発生が凍結によって停止されている限りにおいて、受精後の発生事象のタイミングは、凍結と解凍との間の時間を無視することによって定義され得ることが察知されるであろう。代わりに、スタート時間は、解凍後の第２の極体の除外、または前核の出現／消失などの第１の発生事象の１つとして定義される場合がある。

受精は、精子細胞が卵母細胞によって認識され、受け入れられる時点であると見なされ得る。精子細胞は、卵母細胞の減数分裂サイクルが第２の減数分裂性分裂の中期において一時停止された後、卵子活性化の誘因となる。これは、第２の極体の生成および押出をもたらす。精子と卵子が融合して数時間後、ＤＮＡ合成が始まる。男性および女性の前核（ＰＮ）が出現する。ＰＮが卵子の中心に移動し、膜が分解し、ＰＮが消失する（衰退する）。２つのゲノムのこの組合せは、配偶子合体と呼ばれる。この後に、細胞分裂が始まる。

前核が消失する時間は、ｔ２ＰＮと呼ばれる場合がある。前核（ＰＮ）に関しての用語「衰退する（した）」および「消失する（消失した）」は、互換的に本明細書で使用され得る。

胚発生中、割球数は、幾何学的に増加する（１−２−４−８−１６−など）。同調的な細胞卵割は、一般に、ヒト胚における胚細胞緊密化まで８−細胞期またはそれより後まで維持される。その後、細胞卵割は、非同調性となり、最終的に個々の細胞は、それら自体の細胞周期を持つ。不妊症処置中に生成されたヒト胚は、８−割球段階の前にレシピエントに移植することができる。一部の場合では、ヒト胚はまた、移植前に胚盤胞段階まで培養される。これは、好ましくは、多くの良好な品質の胚が利用可能であり、または長時間のインキュベーションが着床前遺伝子診断（ＰＧＤ）の結果を待つのに必要であるとき行われる。しかし、インキュベーション技術が改善するにつれて長時間のインキュベーションに向かう傾向がある。

本発明の実施形態のいくつかの例示的なインプリメンテーションが、胚盤胞関連パラメーターを確立するのに使用され得る。

胚盤胞品質基準／尺度は、胚品質基準／尺度の一例である。胚盤胞品質基準は、例えば、胚細胞緊密化、すなわち、初期の胚細胞緊密化から孵化胚盤胞への胚の発達に関係し得る。胚細胞緊密化は、タイトジャンクションおよびデスモソームによる割球同士間の接触の強化が、細胞間隙の低減および細胞輪郭のぼけをもたらすプロセスである。胚細胞緊密化の前に、胚の割球が個々に続く場合があり、胚細胞緊密化の前に、胚発生は、肉眼によって観察し、容易にアノテートすることができる別個のかつほとんど同調的な細胞分裂の経路をたどる。胚細胞緊密化後、胚発生は、桑実胚から胚盤胞へのある程度連続的な発達によって特徴付けられ、この場合、個々の割球は、追跡することが困難となるが、それにもかかわらず、いくつかの段階は、該当する発生段階について得られる画像の目視検査によってこれらの段階と関連したパラメーターの値を確立することによって特徴付けられ得る。

胚細胞緊密化のスタート（ＳＣ）は、２つまたはそれ超の割球間の胚細胞緊密化が観察される最初の時間を説明する。したがって、ＳＣは、胚細胞緊密化プロセスの開始をマークする。

桑実胚（Ｍ）は、割球同士間の原形質膜が目に見えない最初の時間と関連する。胚細胞緊密化プロセスが完了するとき、胚細胞緊密化を形成する割球のいずれの間の原形質膜も目に見えず、胚を桑実胚として定義することができる。ほとんどの場合、桑実胚は、第４の同調性期間Ｓ４に近いか、またはそのちょうど冒頭における（すなわち、ｔ９における）第３の同調性期間Ｓ３の後（すなわち、ｔ８の後）に見られるが、より早い場合がある。まれに、胚は、胚細胞緊密化がヒト胚において開始される前に１６細胞またはそれ超まで卵割する。

栄養外胚葉の初期分化（ＩＤＴ）は、別個の栄養外胚葉細胞が認識される最初の時間として定義される。胞胚形成のスタート（ＳＢ）は、流体が満たされた腔、胞胚腔を観察することができる最初の時間として定義される。これは、「空洞化の始まり」とも呼ばれる。これは、胚の桑実胚段階と胚盤胞段階との間の移行期間の開始を説明する。胚は、実際の胚盤胞段階に入る前にある時間にわたってこの移行段階に残ることが多い。空洞化の始まりは、通常、栄養外胚葉細胞の分化直後に現れる。外部環境に接触した桑実胚の外層は、細胞空間内に塩および水を活発にポンプ輸送し始め、その結果として、腔（胞胚腔）が形成し始める。

胚盤胞（Ｂ）は、栄養外胚葉細胞と内部細胞塊細胞との間に明らかな区別がある場所として定義され得る。

内部細胞塊を認識することができる最初の時間として定義される内部細胞塊の初期分化（ＩＤＩＣＭ）。ＩＤＩＣＭは、内部細胞塊発生の開始を説明する。細胞同士間の境界が明確に定義されていないと思われるｇａｂ接合部の接続された細胞のエキセントリックに配置されたクラスター。

胚盤胞の拡大の始まり（ＥＢ）は、胚が囲卵空間（ｐｅｒｉｖｉｔｅｌｉｎｅ ｓｐａｃｅ）を満たし、透明帯（Ｚｏｎａ Ｐｅｌｕｃｉｄａｅ）の移動／拡大をスタートする最初の時間として定義され得る。ＥＢは、胚の拡大の開始を記述し得る。胚盤胞が拡大するにつれて、透明帯は、明白により薄くなる。

孵化胚盤胞（ＨＢ）は、栄養外胚葉細胞が透明帯を脱出／貫通したか、またはある特定の画分が孵化した最初の時間として定義され得る。

完全に孵化した胚盤胞（ＦＨ）は、孵化が透明帯を脱いで完了するときとして定義される。

胚盤胞発生と関連した様々なタイミングは、以下の通り定義され得る：
ｔＭ＝精子注入から桑実胚の形成までの時間（時間）
ｔＳＢ＝精子注入から胞胚形成のスタートまでの時間（時間）
ｔＢ＝精子注入から胚盤胞の形成までの時間（時間）
ｔＥＢ＝精子注入から拡大胚盤胞の形成までの時間（時間）
ｔＨＢ＝精子注入から孵化胚盤胞までの時間（時間）

このようなタイミングはまた、値が本明細書に記載の本発明の一部の実施形態によって確立され得る目的パラメーターも代表する。

図３は、本発明のある特定の実施形態によって胚８の発生に関するパラメーターの値をユーザーが確立するのを支援するための装置２を概略的に表す。装置２は、胚イメージングシステム６に連結した汎用コンピューター４を含む。胚イメージングシステム６は、一般に慣例的であり得、確立された技法に従って発生の様々な段階で胚８の画像を得るように構成されている。一般に、胚イメージングシステム６は、典型的には、監視期間にわたってただ１つの胚ではなく、複数の胚の画像を得るように構成されることになることが察知されるであろう。例えば、典型的な試験は、いくつかの胚、例えば、７２の胚の分析を伴い得る。胚イメージングシステムは、次の胚をイメージングするために先に進む前に１つずつそれぞれの胚の画像（複数の焦点面で撮られる画像を潜在的に伴って）を記録するように構成され得る。例えば、５分を要し得る、すべての胚がイメージングされた後、個々の胚のイメージングのサイクルを繰り返して、次の時点のそれぞれの胚のそれぞれの画像をもたらすことができる。

汎用コンピューター４は、本明細書にさらに記載するように、胚の発生の間の異なる時間に得られた胚の一連の画像から胚の発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けるための方法を実行するように適応されている（プログラムされている）。

したがって、コンピューターシステム４は、本発明の一実施形態によって胚画像データの処理を実施するように構成されている。コンピューター４は、中央処理装置（ＣＰＵ）２４、リードオンリーメモリ（ＲＯＭ）２６、ランダムアクセスメモリ（ＲＡＭ）２８、ハードディスクドライブ３０、ハードウェアインターフェース４６、ディスプレイドライバー３２、ならびにディスプレイスクリーン３４、ならびにキーボード３８およびマウス４０を伴ったユーザー入力／出力（ＩＯ）回路３６を含む。これらのデバイスは、共通のバス４２を介して接続されている。コンピューター４は、共通のバス４２を介して接続されたグラフィックスカード４４も含む。グラフィックスカードは、グラフィックスプロセシングユニット（ＧＰＵ）、およびＧＰＵ（ＧＰＵメモリー）にしっかりと連結したランダムアクセスメモリを含む。胚イメージングシステム６は、従来の技術的な技法に従ってハードウェアインターフェース４６を介してコンピューター４に通信可能に連結されている。

ＣＰＵ２４は、ＲＯＭ２６、ＲＡＭ２８、またはハードディスクドライブ３０内に記憶されたプログラム命令を実行して、ＲＡＭ２８またはハードディスクドライブ３０内に記憶され得る胚画像データの処理を実施することができる。ＲＡＭ２８およびハードディスクドライブ３０は、システムメモリーと一括して呼ばれる。一部のインプリメンテーションでは、本発明の実施形態による処理は、イメージングシステム６から直接コンピューター４によって得られた胚画像に基づき得る。他のインプリメンテーションでは、本発明の実施形態による処理は、先に得られ、コンピューター４のメモリー、例えば、ＨＤＤ３０のＲＡＭ２８内に記憶された胚画像に基づき得る（すなわち、胚イメージングシステム６自体は、本発明の実施形態の必須のエレメントでない）。コンピューター４の態様は、ＣＰＵが、本明細書に記載の本発明のある特定の実施形態によって処理を実施するために、例えば、ＲＡＭ２８、ＲＯＭ２６、またはＨＤＤ３０に記憶され得るプログラムを実行させるように構成されていることを除いて概ね慣例的であり得る。処理、例えば、画像処理の一部の態様は、いくつかの例では、ＧＰＵ内で実行させることができる。

ある特定の例示的なインプリメンテーションによる胚８は、一連のタイムラプス画像を得るのに、胚イメージングシステム６を使用して定期的に監視される（典型的には、胚イメージングシステムは、例えば、患者１人当たり最大で１２の胚を伴って最大で６人の患者について、複数の胚の一連のタイムラプス画像を得ることになる）。胚は、好ましくは、１時間当たり少なくとも２回など、１時間当たり少なくとも３回など、１時間当たり少なくとも４回など、１時間当たり少なくとも６回など、１時間当たり少なくとも１２回などの１時間当たり少なくとも１回監視される（イメージングされる）。監視は、好ましくは、胚が、胚を培養するのに使用されるインキュベーター内に位置していながら行われる。これは、任意の確立されたタイムラプス方法に従って胚の画像を取得することによって実施され得る。

一般的な意味において、本発明のある特定の実施形態による本明細書に記載の様々な方法は、胚の発生と関連した事象をユーザーがアノテートする（すなわち、胚の発生に関する目的パラメーター、例えば、特定の細胞分裂事象のタイミング、および／または均等性、多核形成の存在などの胚の特性の分類などの値を確立する）のを支援することに基づく。

従来の技法と共通して、ユーザーは、胚の画像のタイムラプスシリーズを含む画像の目視検査から胚についての目的パラメーターの値を確立することができる。画像は、装置２のディスプレイスクリーン３４上に表示される。しかし、以下にさらに論じるように、本発明のある特定の実施形態によれば、特定の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを補助するために、一連の画像からの一画像が特定の目的パラメーターに基づいて初期画像として自動的に選択されてユーザーに表示される。次いでユーザーは、必要であれば、ユーザーが目的パラメーターの値を確立することができるまで、タイムシリーズで自動的に選択された画像周辺の画像を通じて後方および／または前方にスクロールすることができる。例えば、現在の目的パラメーターがｔ３である場合（すなわち、ユーザーは、３細胞への分裂と関連したタイミングを確立するプロセス中にある）、一連の画像からの一画像が、ｔ３である現在の目的パラメーターに基づいて自動的に選択される。次いでユーザーは、初期画像からスタートして画像をスクロール／ステップして、細胞が３細胞に分裂する時間を識別することができる。ユーザーがｔ３に対応すると見なされる画像を識別するとき（例えば、ユーザーの臨床的な知識に基づいて）、ユーザーは、これを示すために入力を提供し得る（例えば、キーボード３８、またはマウス４０、または他のユーザー入力デバイスでボタンを押すことによって）。該当するパラメーターの値の実際の臨床的な判定は、従来の技法に従って行われ得る。しかし、現存する技法と比較してある特定に実施形態によって異なることは、一連の画像を含む画像がユーザーに提示される様式、およびユーザーが特定のパラメーターの値を示す様式である。特に、現存する技法によれば、ユーザーは、典型的には、目的パラメーターの１つの値を確立することができるポイントに到達するまで、一連の画像を動画として再生し（または画像のスタックに素早く目を通し）、次いでユーザーが入力を提供して、パラメーターが何であるか、およびその値の両方を識別する。

図４は、本発明の一部の実施形態によって１つ以上の胚の発生に関するパラメーターの値を確立するための方法を概略的に表すフローダイヤグラムである。図４に従って実施される方法は、ユーザー入力を伴い、ＣＰＵ２４がロードされたプログラムに従って方法をインプリメントして、図３のコンピューター４を使用してインプリメントすることができるコンピューター実装方法である。広く要約すれば、方法は、それぞれの目的パラメーターについて、発生中の胚のタイムラプス監視と関連した一連の画像からユーザーに初期に提示されるべき一画像を選択する。特定の目的パラメーターについてユーザーに提示されるべき初期画像は、現在の目的パラメーターに応じて自動的に選択される（すなわち、選択は、ユーザーによってではなく、コンピューターによって行われる）。目的は、初期画像について、該当するパラメーター（すなわち、特定の初期画像が自動的に選択されたパラメーター）の値を確立するために良好な出発点をユーザーに提供することである。次いでユーザーは、必要であれば、一連の画像を通じて前方および／または後方にステップするようにユーザー入力を提供することによって表示される画像を初期画像からの別の画像に変更して、ユーザーが該当する目的パラメーターを確立するための臨床判断を行うことを可能にすることができる。ユーザーが現在の目的パラメーターについて妥当な臨床判断を行った後、ユーザーは、ユーザーの臨床判断に従ってこのパラメーターについて確立された値を示すように入力を提供することができ、この値は、記憶され得る。このプロセスを、所与の胚のそれぞれの目的パラメーター、および／または複数の異なる胚の所与の目的パラメーターについて反復して繰り返すことができる。

したがって、ステップＳ１では、複数の胚の一連のタイムラプス画像が得られる。この例では、方法は、単一の患者に由来する９つの胚からのタイムラプス画像を分析するためにインプリメントされていると仮定されることになる。典型的には、ステップＳ１は、本明細書に記載の方法に従って処理するために、ＨＤＤ３０などの記憶装置からそれぞれの画像をロードすることによって実施されることになる。一連の画像の元の供給源は、重要でない。画像は、方法をインプリメントする装置に連結したイメージング装置、例えば、図３の配列においてコンピューター４に連結したイメージング装置６からのものであり得る。代わりに、画像は、無関係のイメージング装置から以前に得られ、ＨＤＤ３０に移されていてもよい。画像は一般に、従来のものであり得る。

ステップＳ２では、現在の試験についてアノテートされるべき複数の目的パラメーターが確立される。これは、当面の特定のインプリメンテーションに依存することになる。胚の発生能力を評価するための異なる手法は、異なるモルフォキネティックパラメーターを利用することができる。したがって、ステップＳ２で確立される複数のパラメーターは、当面の具体的なインプリメンテーションに依存することになる（すなわち、どれであっても、胚の発生能力を評価するための手法が使用される、望まれるパラメーターに基づく）。典型的には、複数の目的パラメーターは、例えば、胚品質を評価するためのその好適な技法に従って方法をインプリメントする特定の診療所のあつらえられた構成に基づいて予め定義されることになり、または方法をインプリメントするように構成された装置／コンピュータープログラムの供給業者によって固定されている場合がある。原則として、ユーザーは、特定の試験のための目的パラメーターを選択する機会を提供され得る。アノテートするための目的パラメーターの確立は、一連の画像の特性に基づく場合もある。例えば、コンピューター４は、それぞれの胚についてのそれぞれのタイムシリーズの継続時間に基づいて、アノテーションのための目的パラメーターを自動的に判定するように構成され得る。例えば、５日に及ぶタイムシリーズについてアノテートするためのパラメーターは、一般に、３日に及ぶタイムシリーズについてアノテートするためのパラメーターと異なることになる（第４の日および第５の日に起こる発生事象についての追加のパラメーターがあることになるためである）。

この特定の例示的なインプリメンテーションについて、現在試験中の胚について確立される（または確立されるように少なくとも試みられる）複数の目的パラメーターは、複数のタイミングおよび複数の形態学的特徴を含むと仮定される。目的のタイミングは、ｔ２、ｔ３、ｔ４、ｔ５、ｔ６、ｔ７、およびｔ８（上記に定義した）であると仮定され、目的の形態学的特徴は、ＮＯＴ２ＰＮ、ＭＮ２、ＵＮＥＶＥＮ２、ＭＮ４、およびＵＮＥＶＥＮ４（やはり上記に定義した）であると仮定される。したがって、この例では、合計１２の目的パラメーターがある。しかし、値が確立されるべきパラメーターの具体的な数および組成は、本発明の実施形態の基礎をなす原理にとって重要でないことが察知されるであろう。

本発明の実施形態は、ユーザーが複数の胚についての複数のパラメーターの値を確立するのを支援しようとするものである。各値は、順に判定される。図４に表した例示的なインプリメンテーションについて、胚は、順に考慮され、一方すべての該当する目的パラメーターが各胚について判定されると仮定される（すなわち、該当する目的パラメーターが１つの胚について最初に判定され、次いで別の胚について判定されるなどである）。すなわち、反復の２つのループがあり、図４に表した手法によれば、処理は、反復の外側のループ内で異なる胚を通じて、かつ反復の内側のループ内でそれぞれの胚についての目的パラメーターを通じて反復する。しかし、値が確立されようとされる順序は、重要でない。例えば、別のインプリメンテーションでは、目的パラメーターは、すべての胚について順に確立され得る（すなわち、１つの目的パラメーターがすべての胚について確立され得、次いで別の目的パラメーターがすべての胚について確立され得る、などである）。パラメーターの値は、それが確立されることが可能である程度に確立されるだけとなることが察知されるであろう。例えば、特定の胚が２−細胞期を越えて分裂しない場合、後続の発生事象と関連したパラメーター、例えば、ｔ３、ｔ４、ＭＮ４などの値を判定することは可能でないことになる。

したがって、図４に表した処理のステップＳ３では、１つの胚が複数の胚から選択される（すなわち、ステップＳ３は、反復の外側ループの冒頭に対応する）。ステップＳ３で選択された胚は、現在の胚と呼ばれる場合があり、目的パラメーターの値が次に探し求められる胚である。上述したように、分析するための９つの胚がこの例では存在すると仮定されている。それぞれの胚（およびこれらの対応する一連の画像）は、識別番号１〜９と関連付けることができる。これは、自由裁量によるものであり得か、または例えば、特定の胚がインキュベートされる／された位置と関連した識別子、もしくは任意の他のスキームに基づき得る。図４に表した手法によれば、胚は、これらのそれぞれの識別番号に従って順に分析するために自動的に選択されると仮定される。したがって、図４に表したステップＳ３を通じた第１の反復では、識別番号１と関連した胚が、現在の胚であると選択される。別の例では、ユーザーは、次に分析される特定の胚の表示を提供するように勧められる場合があり、これは、ステップＳ３における胚選択の基礎を形成し得る。例えば、ユーザーは、彼らが望む場合、自動的に選択された胚の分析をスキップする機会を提供される場合がある。

ステップＳ４では、目的パラメーターが、値が確立されるように求められる複数の目的パラメーターから選択される（したがってステップＳ４は、反復の内側のループの冒頭に対応する）。ステップＳ４で選択された目的パラメーターは、現在の目的パラメーターと呼ばれる場合があり、値が現在の胚について次に探し求められるパラメーターである。上述したように、各胚について確立するように求める１２のパラメーターの値が存在するとこの例では仮定される。それぞれのパラメーターは、自由裁量による順序で選択され得るが、この例では、これらのパラメーターは、予め規定された順序で考慮され、それは、それぞれのパラメーターと関連した発生段階が、それぞれの胚についてタイムシリーズを含む画像中に明らかであると予期される順序に少なくとも部分的に基づく。特に、目的パラメーターは、ＮＯＴ２ＰＮ；ｔ２；ｔ３；ｔ４；ｔ５；ｔ６；ｔ７；ｔ８；ＭＮ２；ＵＮＥＶＥＮ２；ＭＮ４；およびＵＮＥＶＥＮ４の順序で考慮されると仮定される。この順序は、細胞分裂のタイミングｔ２〜ｔ８に関するパラメーターが順に確立され、次いでこの後、より早期の段階における胚のモルフォロジーに関するいくつかの特性が考慮される（例えば、ＭＮ２およびＵＮＥＶＥＮ２）ので、部分的にのみ対応する発生段階の順序付けに基づく。図４の手法について、したがって、目的パラメーターは、この予め規定された順序付けに従って順に分析するために自動的に選択され得る。したがって、図４に表したステップＳ４を通じた第１の反復では、パラメーターＮＯＴ２ＰＮが現在の目的パラメーターとして選択される。別の例では、ユーザーは、次に分析される特定の目的パラメーターの表示を提供し、またはそのパラメーターを修正するように勧められる場合があり、これは、ステップＳ４における選択の基礎を形成し得る。例えば、ユーザーは、特定のパラメーターをスキップする機会を提供される場合がある。

ステップＳ５では、現在の胚および現在の目的パラメーターの初期画像と呼ばれる場合がある、タイムシリーズからの一画像が自動的に選択される。この初期画像は、ステップＳ６でユーザーが閲覧するために、装置のディスプレイスクリーンに提示される。初期画像は、現在の目的パラメーターに関連した該当する発生に対応する胚の画像のタイムシリーズにおける一ポイントを表すように意図されている。重要なことに、ステップＳ６でユーザーに提示される画像は、自動的に判定される。これは、目的パラメーターの判定をスタートするポイントを識別しようとするために画像のタイムシリーズを見てまわるという負担についてユーザーを救済する。初期画像／タイミングを予測することができる様々なやり方があり、異なるやり方が、異なる目的パラメーターについて使用される場合がある。

例えば、一手法によれば、初期画像は、様々な目的パラメーターと関連した発生事象について典型的なタイミングを表すデータベースに基づいて選択され得る。データベースは、例えば、以前の経験／公開データに基づく場合がある。例えば、データベースは、２つの前核が胚について観察されるか否かは、Ｔ_ＰＮ周辺の時間で明らかである可能性が最も高い場合があることを示し得る。このことに基づいて、この特性を評価するための適切な初期画像が、Ｔ_ＰＮに時間が最も近いタイムシリーズ中の画像として選択され得る。同様に、データベースは、ｔ２の値は、典型的には、Ｔ_{ｔ２ＬＯＷ}〜Ｔ_{ｔ２ＨＩＧＨ}の範囲内に入ることが予期され得ることを示す場合があり、したがって、このパラメーターの値を評価するための適切な初期画像は、Ｔ_{ｔ２ＬＯＷ}周辺、またはおそらく直前のタイムシリーズ中の画像であり得る。代わりに、対応する範囲は、以前のアノテートされた発生のタイミングに基づいて胚の予期される発生のタイミングに基づき得る。例えば、ｔ５について予期される範囲（Ｔ_{ｔ５ＬＯＷ}〜Ｔ_{ｔ５ＨＩＧＨ}）は、例えば、より早期の発生事象からｔ５までの予期される追加の時間を考慮することによって、ｔ２、ｔ３、またはｔ４の１つ以上のアノテートされた値に基づき得る。

別の手法によれば、それぞれの目的パラメーターについて選択される初期画像は、タイムシリーズを含む画像の数値的処理から判定され得る。例えば、従来の画像解析技法を使用して、タイムシリーズを含む画像の連続的な対間の変化の量を特徴付けてもよい。従来の技法によって判定されるこのような「活性」曲線の例示的なプロットを、図１の底部の方に示す。スパイクが活性曲線中で起こる時間は、例えば、細胞分裂事象と関連した相対的に高い形態学的変化の時間を表す。例えば、図１を参照すると、時間ｔ２周辺で明らかなスパイクがあり、また、時間ｔ３およびｔ４の周辺で活性のさらなるスパイクがあり、時間ｔ５周辺で再びスパイクがある。スパイクの位置を使用して、特定の目的パラメーターについての初期画像を自動的に選択することができる。

一般に、画像を処理して、任意の特定の目的パラメーターに関連して表示するための適切な初期画像を判定することができる様々な異なるやり方がある。例えば、米国特許第７，６７２，３６９Ｂ２号［１］および第７，９６３，９０６Ｂ２号［２］に記載されたものと同様の原理を使用して、特定の細胞発生事象のタイミングを自動的に確立することができ、次いで該当する発生事象と関連したパラメーターの値をユーザーが確立するのを支援するために本発明の実施形態によって使用するためにユーザーに表すための初期画像を、これらのタイミングから判定することができる。さらに、使用される具体的な方法は、目的パラメーターの特質に依存し得る。例えば、細胞分裂事象のタイミングに対応する目的パラメーターについて、胚の形態学的な活性を判定すること（例えば、連続的な画像中で相対的に大きい差異がある時間を識別すること）に基づく方法を使用してもよい。例えば、前核の出現に関する他のパラメーターについて、他の方法が使用される場合があり、例えば、特定の事象について、具体的なタイミング、例えば、ＮＯＴ２ＰＮを確立することについて精子注入後の１６〜１８時間を、定義することができる。他の予め規定されたタイミングを、必要に応じて他の形態学的なグレーディング特性（均等性、多核化など）を判定するのに使用することができる。さらに、いくつかの特性のいくつかの確立中の値について判定される初期画像は、以前にアノテートされた事象に基づき得る。例えば、ｔ２が、胚が分裂して２つの細胞になる時間を示すのにアノテートされた後、これを使用して、ＭＮ２およびＥＶＥＮ２の値を確立するのにユーザーに表示するための適切な初期画像を選択することができる。例えば、ｔ２後の最初の画像を、これらの特性についての初期画像として選択してもよい。したがって、ステップＳ６では、ユーザーは、現在の目的パラメーターによって選択された初期画像を自動的に提示される。ステップＳ５を通じた第１の反復について、この特定のインプリメンテーションにおける現在の目的パラメーターは、ＮＯＴ２ＰＮである。したがって、ステップＳ５では、現在の胚についての発生段階を示すことが予測される初期画像が選択され、この中でユーザーは、従来の臨床的評価に基づいてＮＯＴ２ＰＮの値を確立することができる。上述したように、ＮＯＴ２ＰＮの値を確立するための初期画像は、どれであっても精子注入後１６時間などの予め規定された時間に最も近い（または直前の）画像を選択することによって判定され得る。

図５は、本発明の一実施形態による図３の装置のディスプレイスクリーン３４に表示されるユーザーインターフェースの表示構成要素を概略的に示す。この表示は、図４の処理を通じた第１の反復中のステップＳ６に対応する段階における、すなわち、現在の胚が胚１であり、現在の目的パラメーターがＮＯＴ２ＰＮであるディスプレイスクリーン３４を表す。この表示は、次に説明するように様々な要素を含む。

主な要素は、現在表示されている胚画像である。

胚画像の右に、現在の試験を含む胚の番号の表示がある。表題「胚」の下に２４の番号を付けられたボックスがあり、最初の９つのボックス（１〜９と番号を付けられた）が、試験を含む９つの胚があることを示すために陰影とともに示されている。さらに、ボックスのこのリスト中のボックス番号１（胚１に対応する）は、現在表示されている画像が胚１に関連していることを示すために異なる陰影とともに示されている。

ボックスの右に、表題「パラメーター（Ｐａｒａｍｅｔｅｒ）」の下に、現在の試験についての目的パラメーターの表示がある。表題「パラメーター（Ｐａｒａｍｅｔｅｒ）」の下に１２のボックスがあり、これらは、異なる目的パラメーターによって標識されている（例えば、ＮＯＴ２ＰＮ、ｔ２、ｔ３・・・など）。さらに、ボックスのこのリスト中のＮＯＴ２ＰＮと標識されたパラメーターボックスは、これが現在の目的パラメーターであることを示すために異なる陰影とともに示されている（すなわち、表示された画像は、この目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを支援する視野で自動的に選択されている）。現在の試験についての目的パラメーターを示すボックスの右に、これらのパラメーターについて既に確立された任意の値の表示がある。

胚画像の左に、ユーザーが現在の目的パラメーターについて選択し得る可能な値を示すボックスの列がある。ＮＯＴ２ＰＮの値を確立する場合について、可能な値は、胚画像の左の上の５つのボックスによって示された「０」、「１」、「２」、「３」、「４またはそれ超」である。これらの５つのボックスの下は、「ＮＡ」と標識されたボックスであり、これは、ユーザーが、現在の目的パラメーターおよび胚について値が確立されていないことを示すのに使用することができる。

胚画像の左のボックスのこの列の底部に、「バック（Ｂａｃｋ）（−）」および「スキップ（Ｓｋｉｐ）（＋）」と標識されたボックスがあり、これらは、ユーザーが、現在表示されている画像に対して画像のタイムシリーズを通じて後方または前方にステップするように選択することができる。例えば、かつ図４のステップＳ７で概略的に示したように、ユーザーが、現在表示されている自動的に選択された画像（すなわち、ステップＳ５で確立された初期画像）が、現在の目的パラメーターの値を確立することを可能にしないと判断する場合、ユーザーは、マウス４０を使用してこれらのナビゲーションボタンを選択し、またはキーボード３８上の「−」および「＋」キーなどの対応する「ショートカット」キーを押し、またはスクロールホイールなどのいくつかの他のユーザー入力デバイスを使用することによって、初期に選択された画像に対して前方および／または後方に画像のタイムシリーズを通じてステップする（スクロールする）ことによって他の画像に変更することができる。ユーザーは、ユーザーが現在の目的パラメーターの適切な値を判定することにおいて彼らの臨床判断を適用することを可能にすると見なされる画像が見つかるまで、自動的に選択された初期画像の周辺で後方および／または前方にスクロールし続けることができる。

ステップＳ８では、ユーザーは、現在の目的パラメーターについて確立された値の表示を装置に提供する。これは、アノテーション表示と本明細書で呼ばれる場合もある。アノテーション表示は、ユーザーが、マウス４０を使用して、または対応する「ショートカット」キーを押して現在のパラメーターの可能な値を示すボックスの１つを選択することを含み得る。

ステップＳ９では、装置４は、現在の胚および現在の目的パラメーターについてのアノテーション表示（確立された値）の記録を記憶する。例えば、これは、従来のデータ記憶技法に従ってＲＡＭ２８またはＨＤＤ３０中の記録として記憶され得る。現在の目的パラメーターについてのアノテーション表示がステップＳ９で受け取られた後、処理は、ステップＳ１０に進み、そこでこれは、現在の胚についてアノテートするための別のパラメーターがあるか否かが判定される。別のパラメーターがあると判定される場合、処理は、ステップＳ４に戻り、そこで次のパラメーターがアノテーションのために選択される。

この特定の例におけるステップＳ１０を通じた第１の反復について、現在の目的パラメーターは、ＮＯＴ２ＰＮであり、現在の胚（胚１）について確立するための１１のさらなる目的パラメーターがある。したがって、この段階で、処理の後に「あり」とマークされたブランチが続き、ステップＳ４に戻り、そこで値が確立されるべき次の目的パラメーター、この例ではｔ２が選択される。次いでステップＳ５〜Ｓ１０が、胚１として残っている現在の胚について繰り返されるが、目的パラメーターは、今ではｔ２である。

したがって、現在の目的パラメーターがｔ２である図４に表した方法の反復のステップＳ６では、ユーザーは、現在の目的パラメーターがｔ２であるという事実を考慮することによってステップＳ５において選択された初期画像を自動的に提示される。したがって、この反復のステップＳ５では、現在の胚の発生段階を示すように予測される初期画像が選択され、それから、ユーザーが従来の臨床的評価に基づいてｔ２の値を確立することができる。上述したように、ｔ２の初期画像が確立され得る様々なやり方がある。例えば、一部のインプリメンテーションによれば、初期画像は、画像のタイムシリーズを数値的に処理して、連続的な画像の間で重要な変化が起こっている場所を識別することに基づき得る。画像間の変化の程度は、従来の画像処理技法に従って判定され得る。次いでピーク検出を適用して胚モルフォロジーにおける重要な再配列がある最初の時間を識別することができ、これは、ｔ２の予測されるタイミングに事実上対応すると見なすことができる。次いで初期画像を、この予測されたタイミングに基づいて選択することができる。例えば、初期画像は、どれであっても、予測されたタイミングに最も近い画像、または予測されたタイミングの前の最新の画像、または所与の量（例えば、１時間）だけ予測されたタイミングに先行する画像であり得る。

図６は、図５と同様であり、それから理解されることになるが、現在の胚が胚１であり、現在の目的パラメーターがｔ２である図４の処理を通じた反復の間のステップＳ６に対応する段階で、ディスプレイスクリーン３４に表示されているものを概略的に示す。表示は、図５に見つかる要素と広く対応する様々な要素を含む。しかし、ｔ２について確立された値を示すのにユーザーがどのように入力を提供するかにおいて差異がある。これは、ｔ２は、タイミングに対応する値（事実上連続的な変数）を有し、一方、ＮＯＴ２ＰＮは、可能な値の不連続な数値に対応する値を有するという事実を反映する。したがって、図５は、ＮＯＴ２ＰＮについて複数の不連続な可能な値に対応する複数のボックスを示す一方、図６の対応する領域は、「ｔ２（エンター（Ｅｎｔｅｒ））」と標識された単一のボックスを含む。したがって、ユーザーは、ステップＳ５で自動的に判定された初期画像からスタートし、ｔ２に対応する段階における胚を示すと見なされる画像まで見てまわる。これは、現在の目的パラメーターがｔ２である反復のステップＳ７で実施される。この画像が識別された後、ユーザーの臨床判断に従って、ユーザーは、現在表示されている画像が、ｔ２について確立される値に対応する時間におけるものであることを示すのに、「ｔ２（エンター（Ｅｎｔｅｒ））」ボタンを単に選択してもよい。ユーザーは、通常のやり方でマウスによって駆動されるカーソルを使用してこのボタンを、その上をクリックすることによって選択してもよく、またはこの場合では「エンター」である、規定されたキーボードのショートカットを押してもよい。

したがって、ステップＳ８では、ユーザーからのアノテーション表示は、ユーザーがキーボード上の「エンター」ボタンを押すことを単に含み得る。これに応答して、処理は、ステップＳ９に進み、そこでｔ２について確立された値の記録が記憶され、次いでステップＳ１０に進み、そこでいずれかのさらなるパラメーターが現在の胚についてアノテートされるか否かが判定される。

こうして、処理は、アノテーションが第１の胚についてのすべての目的パラメーターについて確立されるまで、ステップＳ４〜Ｓ１０を通じて反復するように進む。

図７〜１４は、図５および６と同様であり、これらから理解されることになるが、現在の胚が、様々な目的パラメーターについて胚１である図４の処理を通じた様々な反復の間のステップＳ６に対応する段階において、ディスプレイスクリーン３４上に表示されているものを概略的に示す。各図について、現在の目的パラメーターは、「パラメーター」が頭に付けられた列中でより薄い陰影によって示されており、各図について、対応するパラメーターが採用することができる値は、図５および６について上記に論じたように胚画像の左のボタンを使用して入力され得る。この特定の胚について、ｔ３およびｔ４についてのタイミングは、タイムシリーズの分解能内で同時であると判定され、したがって単一の画像から確立される場合があることが留意され得る（図７）。

プロセスがステップＳ４〜Ｓ１０を通じて反復して、胚１についてのすべての目的パラメーターの値を確立した後、処理は、ステップＳ１０からステップＳ１１への「なし」とマークされたブランチに続く。ここで、アノテートするいずれかの他の胚があるか否かが判定される。もしある場合、処理は、ステップＳ３に戻り、そこでアノテーションのための次の胚が選択され、次いで、新しく選択された現在の胚についてのすべての目的パラメーターについてステップＳ４〜ステップＳ１０を周ってさらに反復するためにステップＳ４に進む。図４に表した例では、ステップＳ３からＳ１１の間の外側ループを通じた９回の反復があることになり、その後、すべての目的パラメーターおよび胚について可能な限り値が確立されることになる。

すべての胚が考慮され、アノテートするさらなる胚がないとステップＳ１１で判定された後、処理はステップＳ１２に進む。

ステップＳ１２では、確立された様々なパラメーターの値の表示が出力される。これは、さらに使用するために記憶されるべきデータファイルの形態であり得るかか、またはユーザーに提示される表示の形態であり得る。

図１６は、１つのこのような表示を表し、この場合、確立された値は、該当する胚識別番号（「ウェル」と頭に付けられた列中に列挙される）に対して行中に表されている各胚と関連した値を用いて表形式で示されている。図１６の表に表した値は、このような値を使用して胚の発生能力を判定するための任意の確立された技法に従って引き続いて使用することができるものである。方法が、確立された値から胚品質の尺度を判定すること（それ自体は、任意の公知の技法に従って実施され得る）をさらに含むインプリメンテーションでは、図１６中の表形式の表現は、この尺度を示す列も含み得る。これは、表題「現在のスコア」の下で図１６中に概略的に示されているが、この特定の表現について、スコアは、まだ判定されていない。

すべての目的パラメーターの値を確立することは可能でないことが図１６で分かることになる。例えば、胚のうちのいくつか（３、５、および６と番号を付けられた胚）について、ＮＯＴ２ＰＮを越えて確立されたパラメーターはなかった。これは、これらの胚がパラメーターＮＯＴ２ＰＮについて０ＰＮ（すなわち、ゼロ個のＰＮ）の値で識別されているためである。これは、これらの胚が、生存可能でなく、さらに発達せず、したがってさらなる値が他のパラメーターについて確立されなかったことを示す。この点において、図４に表した処理の間に、胚が、パラメーターの１つについて確立された値（例えば、ＮＯＴ２ＰＮについて０ＰＮの値）に基づいて生存可能でない判定される場合、処理は、他の目的パラメーターの値を確立することを試みることなく、次の胚に直接スキップするように構成することができる。同様に、胚４についての様々なパラメーターの値を確立することが可能でなかったことが図１６から分かり、これは、胚４がｔ４を越えて発達しなかった事実を反映し得る。いくつかの例では、図４に表したプロセスに入る前に特定の胚について値を確立しようと試みないと決定される場合があり、次いでこれらの胚は、図４に表したプロセスの間にスキップされることになる。

図１６に表したものなどの表は、試験についてのアノテーションの完了時に閲覧される場合があり、または図４に表した処理の間の任意の段階で、例えば、ユーザーによる要求に応じてユーザーに提示される場合がある。この場合、値が既に確立されたパラメーターが、ユーザーに提示され得る。まだ確立されていないパラメーターについては、ユーザーは、代わりに予測された値を提示され得る。例えば、細胞分裂タイミングについて、ユーザーは、該当するパラメーターについてステップＳ５で確立されているものに対応する予測されたタイミングを提示され得る。ユーザーが確立された値および予測された値の両方を提示される場合、これらは、異なって表示され得る。例えば、既に積極的に確立された値は、黒色で提示される場合があり、一方、予測された値は、グレーアウトされる場合がある。

表形式の形態で確立された値に関する情報を提示することに加えて、情報は、グラフィック形態で提示される場合がある。この例を図１７に表す。この場合、１〜６、９、および１０と標識された８つの胚についてのデータが示されている（すなわち、このデータは、図１６に表したデータと異なる試験に基づく）。各胚について、時間バーが、異なる着色されたバンドによって表されている異なる卵割事象間の期間で提示されている（すなわち、着色されたバンドは、胚が異なる数の細胞を含む期間の継続時間を表す）。これは、ユーザーが一試験における異なる胚についての相対的な発生フェーズの相対的な継続時間を察知するための準備機構をもたらす。さらに、表示は、様々なパラメーターの受容可能であるか、または好適な値の表示をもたらすために、図１７に見られる濃い矩形などのマーキングで重ねられる場合がある。このグラフィック手法は、ユーザーにどの胚が十分に発達し、どの胚があまり発達していないかについての即時の感覚を与えることができる。例えば、同じ世代内の細胞分裂における高い程度のシンクロニシティは、一般に、良好な品質の胚の表示である。図１７では、３細胞胚として費やされた期間が、最も薄い陰影で示されている。例えば、胚１０について、この領域の小さいサイズは、例えば、胚３についてのより大きいサイズより潜在的に良好な品質の胚の表示である。図１７に提示した表現は、いくつかの例では、タイムラインマーキングでもたらされる場合がある。

したがって、上述し、そして図４に表した種類の手法は、ユーザーがタイムラプス画像胚から複数の目的パラメーターの値を確立するタスクを実施するのを支援するスキームをもたらす。本発明の実施形態による手法は、現存する技法より速いことが見出された。これは、ユーザーがアノテートされるべきパラメーターに従って選択される初期画像を自動的に提示され、それによって該当する発生事象を「白紙の状態から」識別するために一連の画像全体を見てまわるというタスクからユーザーを救済するためである。さらに、各段階において、ユーザーは、特定の目的パラメーターの値を確立することと関連した画像を提示されるので、ユーザーは、パラメーターが何であるかの表示を提供する必要なく、値の表示を単に提供することができる。これは、例えば、ユーザーは、現在表示されている画像が、対応するパラメーターが何であるかにかかわらず、割り当てられる特定のタイミングを適切に表すと見なされる場合、単に同じ入力（例えば、「エンター」ボタンを押すこと）を提供することができることを意味する。さらに、アノテーション表示の提供に応答して、ユーザーは、ユーザーが次の目的パラメーターをアノテートするのを助けるための新しい画像を自動的に提示され得る。全体的に、この手法は、現存する技法より速く、直観的な手法をもたらすことが判明した。

本発明の上述した例示的な実施形態は、本発明の他の例示的な実施形態に従って様々なやり方で改変され得ることが察知され得る。

例えば、図４で実施されるステップの具体的な順序付けは、異なるインプリメンテーションで異なり得る。例えば、反復プロセスにおいてステップＳ５を含めるのではなく、これは、それぞれの目的パラメーターについての適切な初期画像を確立するのに１回実施される場合がある。すなわち、ステップＳ５に対応するが、すべての目的の取り決めについて初期画像を判定するステップが、例えば、ステップＳ３とＳ４との間で実施される場合がある。

こうして、ユーザーが胚の一連の画像から胚の発生に関する複数の目的パラメーター（例えば、細胞分裂）の値（例えば、タイミング）を確立するのを助けるための方法および装置を記載してきた。それぞれの目的パラメーターについて、画像が、目的パラメーターの値を確立しようとするユーザーに表示するために選択される。例えば、選択される画像は、目的パラメーターの値を反映する画像であると予測された画像であり得る。例えば、選択される画像は、特定の発生事象について計算されたタイミングに基づき得る。タイミングは、画像の数値的分析から計算される場合があり、または予め決定されている場合がある。ユーザーが、選択された画像から目的パラメーターの値を判定することができない場合、ユーザーは、ユーザーが目的パラメーターの値を判定することができるまで、隣接する画像をスクロールすることができる。次いで目的のプラウド（ｐｒｏｕｄ）の値を、ユーザー入力、例えば、一連の画像から現在表示されている画像と関連したタイミングが、目的パラメーターの値であると解釈されるべきであるという表示をユーザーが提供することに応答して確立することができる。異なる目的パラメーターを反復様式で確立することができ、この様式では、ユーザーに表示するための初期画像は、それぞれの目的パラメーターについてその目的パラメーターに基づいて選択される。

本発明のさらなる特定の態様および好適な態様は、添付の独立請求項および従属請求項に示されている。従属請求項の特徴を、特許請求の範囲で明示的に示されているもの以外の組合せで、独立請求項の特徴と組み合わせてもよいことが察知され得る。
参考文献
［１］米国特許第７，６７２，３６９Ｂ２号
［２］米国特許第７，９６３，９０６Ｂ２号

Claims (25)

1. 発生の間の異なる時間における少なくとも１つの胚の一連の画像から前記少なくとも１つの胚の前記発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けるための方法であって、
   （ａ）前記複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップと；
   （ｂ）前記現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、前記一連の画像内から１つの画像を自動的に選択するステップであって、前記画像は、前記現在の目的パラメーターに従って選択される、ステップと；
   （ｃ）ディスプレイに前記ユーザーに前記選択された画像を表示するステップと；
   （ｄ）ユーザー入力に応答して、前記ディスプレイに表示された前記画像を、前記一連の画像からの別の画像に変更するステップと；
   （ｅ）ユーザー入力に応答して、前記現在の目的パラメーターの値を確立するステップと；
   （ｆ）前記現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択し、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すステップと
   を含む、方法。
2. ステップ（ｆ）においてステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すことが、すべての目的パラメーターの値が確立されるまでステップ（ｆ）を繰り返すことも含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記画像が、前記一連の画像の分析に基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される、請求項１または２に記載の方法。
4. 前記一連の画像の前記分析が、前記一連の画像を含む画像間の変化の量の表示を判定することを含む、請求項３に記載の方法。
5. 前記画像が、前記一連の画像を含む前記画像と前記目的パラメーターとの間の予め規定された関連性によってステップ（ｂ）において自動的に選択される、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
6. 前記予め規定された関連性が、それぞれの前記目的パラメーターと関連した予め規定されたタイミングを、それぞれの前記画像と関連したタイミングと比較することに基づく、請求項５に記載の方法。
7. さらなる胚の一連の画像から前記さらなる胚の発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けることをさらに含み、
   （ｈ）前記さらなる胚の前記複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップと；
   （ｉ）前記現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、前記さらなる胚の前記一連の画像内から１つの画像を自動的に選択するステップであって、前記画像は、前記現在の目的パラメーターに従って選択される、ステップと；
   （ｊ）ディスプレイに前記ユーザーに前記選択された画像を表示するステップと；
   （ｋ）ユーザー入力に応答して、前記ディスプレイに表示された前記画像を、前記一連の画像からの別の画像に変更するステップと；
   （ｌ）ユーザー入力に応答して、前記さらなる胚について前記現在の目的パラメーターの値を確立するステップと；
   （ｍ）前記現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択するステップと、ステップ（ｉ）〜（ｍ）を繰り返すステップと
   を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
8. 異なる前記胚についての異なる前記目的パラメーターの値が、
   前記胚の一方についての異なる目的パラメーターを確立し、次いで前記胚の他方についての異なる前記目的パラメーターを確立することによって；または
   異なる前記胚について１つの目的パラメーターを確立し、次いで異なる前記胚の別の目的パラメーターを確立することによって
   順に確立される、請求項７に記載の方法。
9. 前記目的パラメーターが、前記少なくとも１つの胚についての発生事象の時間を含む、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
10. 前記画像が、前記現在の目的パラメーターと関連した発生事象について予測されたタイミングに基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される、請求項９に記載の方法。
11. 前記目的パラメーターの前記値が、胚特性のユーザー分類である、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
12. 前記画像が、前記現在の目的パラメーターと関連した前記胚特性が明らかであると予測される画像の予測されたタイミングに基づいてステップ（ｂ）において自動的に選択される、請求項１１に記載の方法。
13. ステップ（ａ）において現在の目的パラメーターを選択すること、および／またはステップ（ｆ）において別の目的パラメーターを選択することが、ユーザー入力に基づく、請求項１から１２のいずれかに記載の方法。
14. ステップ（ａ）において現在の目的パラメーターを選択すること、および／またはステップ（ｆ）において別の目的パラメーターを選択することが、予め規定されたシーケンスに従って目的パラメーターを選択することによって自動的に実施される、請求項１から１２のいずれかに記載の方法。
15. ステップ（ｆ）が、ステップ（ｅ）の前記ユーザー入力に応答して自動的に実施される、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
16. 前記現在の目的パラメーターの値が、前記ユーザー入力がステップ（ｅ）で受け取られるとき、前記ディスプレイに表示される前記一連の画像からの１つの画像と関連したタイミングに従って判定される、請求項１〜１５のいずれかに記載の方法。
17. 確立された前記複数の目的パラメーターの前記値の表現を表示するステップをさらに含む、請求項１〜１６のいずれかに記載の方法。
18. 確立された前記複数の目的パラメーターの前記値の前記表現が、確立された前記複数の目的パラメーターの前記値の表形式表現またはグラフィック表現を含む、請求項１７に記載の方法。
19. 確立されなかった前記複数の目的パラメーターの少なくとも一部の予測された値の表現を表示するステップをさらに含む、請求項１７または１８に記載の方法。
20. 確立された前記複数の目的パラメーターの前記値および確立されなかった前記複数の目的パラメーターの前記予測された値が、異なって表現される、請求項１９に記載の方法。
21. 前記少なくとも１つの胚についての発生能力が、前記複数の目的パラメーターについて確立された前記値の１つ以上から判定できることを特徴とする、請求項１〜２０のいずれかに記載の方法。
22. ステップ（ａ）で選択される前記現在の目的パラメーターおよびステップ（ｆ）で選択される前記別の目的パラメーターが、異なる胚と関連するか、または同じ胚と関連した異なる目的パラメーターである、請求項１〜２１のいずれかに記載の方法。
23. 請求項１から請求項２２のいずれかに記載の方法を実施するための機械可読命令を持つ非一時的コンピュータープログラム。
24. 請求項１から請求項２２のいずれかに記載の方法を実施するための機械可読命令がロードされ、それを実行するように作動可能な装置。
25. 発生の間の異なる時間における少なくとも１つの胚の一連の画像から前記少なくとも１つの胚の前記発生に関する複数の目的パラメーターの値をユーザーが確立するのを助けるための装置であって、プロセッサーエレメント、ならびにディスプレイおよび１つ以上のユーザー入力デバイスを含むユーザーインターフェースエレメントを含み、前記プロセッサーエレメントは、
    （ａ）前記複数の目的パラメーターの中から現在の目的パラメーターを選択するステップ；
    （ｂ）前記現在の目的パラメーターの値を確立することにおいて使用するのにユーザーに表示するために、前記一連の画像内から１つの画像を選択するステップであって、前記画像は、前記現在の目的パラメーターに従って自動的に選択される、ステップ；
    （ｃ）前記ディスプレイに前記ユーザーに前記選択された画像を表示するステップ；
    （ｄ）前記１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、前記ディスプレイに表示された前記画像を、前記一連の画像からの別の画像に変更するステップ；
    （ｅ）前記１つ以上のユーザー入力デバイスによって受け取られたユーザー入力に応答して、前記現在の目的パラメーターの値を確立するステップ；および
    （ｆ）前記現在の目的パラメーターとして別の目的パラメーターを選択し、ステップ（ｂ）〜（ｅ）を繰り返すステップ
    を前記装置に実施させるように構成されている、装置。

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