JP6388635B2 - 炎症の予防又は治療へのセドヘプツロースの使用 - Google Patents
炎症の予防又は治療へのセドヘプツロースの使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6388635B2 JP6388635B2 JP2016503672A JP2016503672A JP6388635B2 JP 6388635 B2 JP6388635 B2 JP 6388635B2 JP 2016503672 A JP2016503672 A JP 2016503672A JP 2016503672 A JP2016503672 A JP 2016503672A JP 6388635 B2 JP6388635 B2 JP 6388635B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- inflammation
- sedoheptulose
- inflammatory
- carkl
- disease
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7004—Monosaccharides having only carbon, hydrogen and oxygen atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Description
糖質
グルコース及びフルクトースはSigma Aldrichから購入した。セドヘプツロースは植物オオベンケイソウ又はムラサキベンケイソウ(sedum telephium)から単離し(Haschemi et al., Cell Metab. 15 (2012), 813-826)、クロマトグラフィーによって更に精製した。
オーストリアの「有機栽培保証認定」を有する新鮮なニンジンを小片にスライスし、液体窒素で急速凍結した。同じ手順を室内で栽培したオオベンケイソウ植物の採取したばかりの葉に適用した。各組織の3つのサンプルをプールし、ガラスビーズによって粉末までホモジナイズした。サンプルの糖質に富んだ画分を、13C標準を混ぜた20%H2O及び80%MeOH抽出液によって単離し、質量分析と組み合わせた標準ガスクロマトグラフィー(GC−MS)のために処理した。グルコース及びセドヘプツロースをその個々の質量によって同定し、その相対量を13C含量に対して正規化した個々の分析物の各々のピーク面積から導いた。グルコース及びセドヘプツロースを、一晩絶食した又はニンジンを供給した個体に由来する等量の血清においても測定した。ニンジンを蒸し、幾らかのオリーブ油、塩及びコショウを風味付けに使用した。ニンジン含有食の2時間前及び2時間後に、ヒト血清をVACUETTE(商標) Z Serum Sepチューブに血液から調製した。血清サンプルを先述のように処理し、上記及びRuiz-Matute AI et al., Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. (2011) May 15 879(17-18)に詳述されるようにGC−MSによっても分析した。
指定の飲料は地元の食料品店で購入され、全てパック詰めされているものであった。(4回の技術的反復試験の各々について)各飲料から1mlを取り出し、SpeedVacで減圧(正:vacuum)濃縮した。これに続いてMeOH/H2O(80:20)沈殿及び遠心分離工程を行い、沈殿物から上清中の糖質画分を取り出した。各上清をSpeedVacで再び凍結乾燥し、等量の水で再水和し、技術的反復試験試料をプールした。糖質分析のために、Dionex ICS−3000 DC無金属システムをCarboPac PA1カラム(250×4mm)及びCarboPac PA1ガードカラム(どちらもDionex製)とともに1mL/分の流量で用いた。最初の20分間は溶出を16mM NaOHによって均一濃度で行った。次いで、20分〜40分は100mM NaOHまでの線形勾配を適用し、続いて2分間かけて200mMまで増大し、47分まで保持した。16mM NaOHによる開始条件を49分の時点で再び達成し、70分まで維持した。パルスアンペロメトリック検出のパラメーターは、Dionexの技術注記21(Dionex ED40電気化学的検出器を用いた糖質のパルスアンペロメトリック検出の最適設定)において推奨されるものと全く同じである。クロマトグラムを、各100μMの確かなグルコース、フルクトース及びセドヘプツロース標準のクロマトグラムによって評価した。
腹部手術を受けた患者の皮下(正:subcutaneous)白色脂肪組織に由来する間質血管細胞画分(SVF)を先述のように(Lindroos et al, Cell Metab. (2013), Jul 2;18(1):62-74.)単離した。簡潔に述べると、脂肪組織をCollagenase II(Worthington)で消化し、濾過した。SVFを遠心分離によって成熟脂肪細胞から分離した後、SVF画分中の赤血球を溶解させた(Buffer EL、Qiagen)。精製SVFをDMEM/F12、10%FBS(Gibco、Life Technologies)中で培養した。細胞がコンフルエンスに達し次第、グルコース無含有DMEM/F12(Biowest)で洗浄し、培地を1.5g/Lのグルコース及びフルクトース、又は各1g/Lのグルコース、フルクトース及びセドヘプツロースをそれぞれ含有する全糖質負荷が3g/LのDMEM/F12に置き換えた。コンフルエンスの2日後(0日目)に、1μMデキサメタゾン、1.74μMインスリン、5μMトログリタゾン、0.5μM IBMX、17μMパントテン酸及び33μMビオチンを添加することによって分化を誘導した。2日後にIBMX及びデキサメタゾンを除外し、4日目にインスリン及びトログリタゾンを除去した。6日目に培地の50%を置き換えた。2日後に細胞をRNA単離のために採取した(RNeasy miniキット、Qiagen)。
前面及び後面皮下脂肪組織並びに精巣上体白色脂肪組織をトランスジェニックCARKL−マウス及び野生型同腹子対照から単離した。脂肪組織をヒトサンプルについて上記したように消化した。遠心分離の後、浮遊成熟脂肪細胞の層を除去し、100rcfで10分間再遠心分離した。150μLの充填脂肪細胞を6ウェルプレートにおいてDMEM/F12、15%ウシ血清(PAA)中、浮動カバーガラス下で培養した。単離の24時間後に、ウェルをPBSで2回洗浄し、培地を1.5g/Lのグルコース及びフルクトース、又は各1g/Lのグルコース、フルクトース及びセドヘプツロースをそれぞれ含有する全糖質負荷が3g/LのDMEM/F12に交換した。3日後に、細胞をRNA単離のためにTRI試薬(Sigma)を用いて採取した。
肝細胞を雄性野生型及びCARKL過剰発現マウスから、マウスを肝臓in situコラゲナーゼ灌流によって屠殺した後に単離した。灌流後、肝臓を迅速に取り出し、細片化し、セルストレーナー(Fisher Scientific, Inc)を通して50ml容の滅菌チューブに濾過した。得られる濾液中の肝細胞を遠心分離工程によって非実質細胞から精製した。単離肝細胞を、10%FBS及び3g/Lの指定の糖質ミックス(グルコース及びフルクトース(GF)、又はグルコース、フルクトース及びセドヘプツロース(GFS))を含有する各DMEM培地1ml当たり0.25×106の濃度でプレートに少なくとも2日間播種した後、実験を行った。
マウスの骨を雄性野生型及びCARKL過剰発現マウスから摘出し、骨髄をフラッシュし、洗浄し、溶解により赤血球を除去し、続いて25mMグルコース及び20ng/mlのM−CSFを含有するDMEM中で分化させた。4日後に、破骨細胞分化用の細胞を採取し、分化培地の入ったcorning osteo assayプレートに播種し(下記を参照されたい)、初代骨髄由来マクロファージ(BMDM)のために培地を取り替え、更にM−SCFを2日間を添加した。次いで、分化BMDMを10%FBS及び3g/Lの指定の糖質ミックス(グルコース及びフルクトース(GF)、又はグルコース、フルクトース及びセドヘプツロース(GFS))を含有する各DMEM培地に少なくとも2日間播種した後、実験を行った。
破骨細胞前駆体細胞(20ng/mlのM−CSFで4日間処理した骨髄細胞)を、24ウェルCorning Osteo Assayプレートに10%FBS及び3g/Lのグルコース及びフルクトース(GF)、又はグルコース、フルクトース及びセドヘプツロース(GFS)を含有するα−MEM培地中、10ng/mlのM−CSF及び100ng/mlのRANKLの存在下でプレーティングした。培地を3日毎に取り替えた。7日後に、細胞を漂白剤によって取り出し、水で3回洗浄した後、Corning(技術審査)の標準プロトコルに従うVon Kossa染色を行い、無傷アッセイ表面と吸収窩とのコントラストを強調させた。各ウェルの全体を20倍対物レンズを備えるTissueFaxによって撮影し、目に見える全ての吸収窩を計数し、盲検で分析した。
XF−Analyzer(Seahorse Bio.)を用いて、種々の糖質によって誘導される細胞代謝の変化を測定した。細胞外酸性化速度(ECAR、mpH/分)及び酸素消費速度(OCR、pmol/分)を、初代ヒト脂肪細胞及び初代マウス肝細胞において製造仕様書に従って記録した。簡潔に述べると、細胞を脂肪細胞については1ウェル当たり104細胞、肝細胞については1ウェル当たり0.5×105細胞の密度でseahorseの細胞プレートに播種した。実験日に細胞を糖質無含有培地で洗浄し、糖質ミックス(グルコース及びフルクトース(GF)、又はグルコース、フルクトース及びセドヘプツロース(GFS))を3g/Lの濃度で含有する指定の培地中で1時間インキュベートした。グルコース誘導ECARを測定するために、細胞を炭素無含有培地で1時間飢餓状態にした後、自動注入によりグルコース(1g/L)をウェルに添加した。グルコース誘導ECARをグルコース添加前のそれぞれのECAR(基礎=100%)に対して正規化した。種々の糖質源によって誘導される変化は、各炭素源の影響を示す相対変化(%)として表した。
簡潔に述べると、市販のキット(QIAGEN、Applied Biosystems)を用いて全RNAを抽出し、逆転写した。定量リアルタイムPCRをAbiPRISM 7900HTリアルタイムサイクラーでiTaq SYBR Green Supermix with ROX(BioRad)を用いて行い、CARKL、アディポネクチン、UCP−1、TNFa、IL−6、MCP−1及びβ−アクチンの発現を先述のように(Haschemi et al., Cell Metab. 15 (2012), 813-826)測定した。標的遺伝子の発現をβ−アクチンの発現に対して正規化した。標的遺伝子の相対発現はΔΔCT法によって算出した。
ADP Questアッセイ(DiscoveRx)を用いて、ADP蓄積による経時的なS7P形成を製造仕様書に従って間接的に測定した。組み換えセドヘプツロースキナーゼを大腸菌(E. coli)において予め産生させ、アフィニティー精製によって精製した(Haschemi et al., Cell Metab. 15 (2012), 813-826)。
マウスの活動当たりの呼吸商(VCO2産生/VO2消費)及びエネルギー消費(EE、kcal/日/kg0.75)を、代謝ケージ(Harvard Apperatus)において間接熱量測定法によって測定した。CARKLトランスジェニックマウス又は野生型同腹子のいずれか1匹を、1つのケージに1日収容した後、日中(8am〜4pm)及び夜間(8pm〜4am)の活動当たりの平均呼吸商及びエネルギー消費の記録を開始した。
4時間予め飢餓状態にした雌性CARKL−トランスジェニックマウス及び野生型同腹子対照に、体重1kg当たり0.75Uのインスリンを腹腔内注射した。血糖を注射前並びに注射の15分後、30分後、45分後及び60分後にワンタッチグルコースストリップ(Accu Check、Roche)を用いて測定した。
簡潔に述べると、肝細胞を指定の通りに培養した後、培地を除去し、細胞を10%ホルマリンで固定した。60%イソプロパノールで洗浄した後、ウェルをOil Red O溶液(Sigma-Aldrich)とともにインキュベートして10分間染色し、水で4回洗浄した後、倍率20倍で写真を撮影した。
細胞をポリスチレン容器組織培養処理ガラススライド上で成長させ、液体窒素で急速凍結し、−80℃に維持した。酵素組織化学的手順はVan Noorden and Frederiksに記載のテトラゾリウム塩法に基づくものとした。G6PD活性の実証のためのインキュベーション培地は、0.1Mトリスマレイン酸塩緩衝液(pH7.5)、15mMグルコース−6−リン酸、0.8mM NADP、0.4mM塩化マグネシウム、0.45mM 1−メトキシフェナジンメトスルフェート、5mMアジ化ナトリウム及び5mMテトラニトロブルーテトラゾリウムクロリド中に18%(w/v)ポリビニルアルコール(平均分子量70000〜100000)を含有するものとした。培地はインキュベーションの直後に新たに調製した。対照反応物は40mMグルコサミン−6−リン酸を付加的に含有するものとした。細胞をオービタルシェーカーによる連続混合下、室温で15分間インキュベートした。インキュベーションの後、細胞を60℃のリン酸緩衝食塩水で3×5分間洗浄し、乾燥させ、グリセロールゼラチンにマウントし、1日以内に倍率10倍で撮影した。
亜致死マウスin vivo内毒素血症のために、7mg/kgのLPS(Sigma Aldrich)を雄性CARKLトランスジェニック又は野生型同腹子に腹腔内注射した。血清をVACUETTE(商標) mini Z Serum Sepチューブによって全血から単離した。サイトカインを、milliplex mapマウスサイトカインプロファイラーにより製造仕様書(Millipore)に従って測定した。全ての動物実験を、倫理動物使用許可プロトコル及びウィーン医科大学によって認可される規約(BMWF−66.009/0140−II/10b/2010)に従って行った。
研究設計:2003年3月までに集められたInflammation and Carotid Artery - Risk for Atherosclerosis Study(ICARAS、Schillinger et al., (2005) Circulation 111 (17):2203-2209.)の578人の神経学的に無症候の患者を本分析に選定した。選定及び除外基準は以前に公表されている。簡潔に述べると、第一の選定基準である無症候性頸動脈疾患は、過去12ヶ月間に一過性脳虚血発作(TIA)、一過性黒内障及び脳卒中又は残存症状がそれぞれないことと定義される。徹底的な健康診断(既往歴、身体状態及び血液検査を含む)に加えて、患者にベースライン時及び研究選定後6ヶ月〜9ヶ月の経過観察時に頸動脈の超音波検査を先述のように(Schillinger et al., (2005) Circulation 111 (17):2203-2209.)行った。心血管イベントの発生率を2006年1月まで記録した。この分析は地方倫理委員会によって認可され(EC−No.1933/2012)、ヘルシンキ宣言及びその修正条項に指定される倫理基準に従って行われた。
ヒトにおける食事由来のセドヘプツロースの取込み
セドヘプツロースが代謝活性糖質となるのに極めて重要な工程である、栄養セドヘプツロースが食事から消化管を介してヒト血液に吸収されるか否かを決定するために、グルコース(C6)及びセドヘプツロース(C7)レベルをニンジン及びヒト血清において測定した。ニンジンにおけるC6/C7比を決定するために、植物組織をホモジナイズし、小分子画分を抽出し、同時に相対グルコース及びセドヘプツロース量をGC−MSによって測定した(図1A)。高いセドヘプツロースレベルを有する多肉植物であるオオベンケイソウの葉を、陽性対照として並行して分析した。オオベンケイソウの葉はグルコース及びおよそ2倍多いセドヘプツロースを含有しており、およそ0.5のC6/C7比が得られた。新鮮な食品グレードの有機ニンジンでは、ほぼ同量のグルコース及びセドヘプツロースが検出され、したがってC6/C7比はおよそ1であった。ジャガイモはニンジンとは対照的に、セドヘプツロースを含有しないことが報告されており(Kardon et al., FEBS Lett. (2008) Oct 15, 582(23-24))、したがって非常に高い(又は更には無限の)C6/C7比を有すると期待される。次に、ニンジンからの食事由来のセドヘプツロースがヒト血液に達するか否かについて、幾らかのオリーブ油、塩及びコショウとともに主に蒸したニンジンを含有する食事(成人男性で約700g)の前後にグルコース及びセドヘプツロースの血清レベルをモニタリングすることによって検討した。食事の2時間後に、セドヘプツロース血清レベルのおよそ2倍の増大がヒトで観察された(図1B)。この結果から、栄養セドヘプツロースがヒト消化管によって吸収され、血液に入り、その後の代謝で糖質として利用可能となることが明らかに示された。血清グルコースレベルは食品摂取後2時間以内に既に平常値に戻り、それによりヒトがセドヘプツロース及びグルコースを異なって代謝することが示唆される。
次に、グルコース、フルクトース及びセドヘプツロースの濃度をCoca−Cola(商標)、Red Bull(商標)、オレンジジュース、リンゴジュース、トマトジュース及びニンジンジュースの糖質抽出物において測定し、一般的な飲料のC6/C7指数を確立し、それにより実際のヒトセドヘプツロース曝露について推定した。ソフトドリンク及び栄養ドリンクはグルコース及びフルクトースを含有したが、セドヘプツロースは含有しなかった(図1C)。フルーツジュースはソフト/栄養ドリンクと同量のC6(グルコース及びフルクトースの総和)を含有していたが(100mM範囲)、ソフト/栄養ドリンクとは対照的にセドヘプツロースも100μM範囲で含有していた。野菜ジュースではグルコース及びフルクトースレベルは低下し、セドヘプツロース濃度が大幅に増大することが見出された(mM範囲)。モル比及び重量比として算出された個々の飲料のC6/C7比を図1Dに示す。2つのフルーツジュースでおよそ2000/1のC6/C7比が見出された。トマトジュース及びニンジンジュースでは、この比はそれぞれ75/1及び20/1であり、Coca−Cola(商標)及びRed Bull(商標)は検出可能な量のセドヘプツロースを含有していなかった。したがって、これらの飲料のC6/C7比は算出することができず、したがって付加的にC7を添加しない場合、かかる食品では該当なし(N.A.)である。これらの発見から、加工食品が複合糖質、ひいてはセドヘプツロースを欠いていることが明らかに示される。特に、これらのデータは絶対数で、ニンジンジュースの天然炭素混合物がソフト/栄養ドリンクよりも選ばれる場合、9kgの食事由来のグルコース当たり1kgの食事由来のセドヘプツロースが消費されることを示し、バランスの悪いヒトの栄養摂取による慢性セドヘプツロース欠乏の結果は現在知られていない。
セドヘプツロースキナーゼCARKL、ひいてはセドヘプツロース代謝が様々な哺乳動物組織でどのように分布及び制御されるかを理解するために、種々の組織をmRNA発現レベルについて試験した。公表されている概日発現プロファイルのデータベース(CircaDB)では、CARKL発現はマウス肝臓(周期20.0、図2A)及び副腎(周期24.0、データは示さない)において変動することが見出された。セドヘプツロース−7Pレベルは植物において変動し、リボース部分を再変換する炭素固定の再生期にピークに達することが以前に報告されている。哺乳動物の概日時計は一部酸化還元状態によって定められている。CARKL過剰発現RAW264.7細胞により、高セドヘプツロースキナーゼ発現が還元ニコチンアミド、アデニンジヌクレオチド(NADH)のような酸化還元因子の4倍の増大、更にはグルタチオン(GSH)レベルの増大を誘導することが示された(図2B及びHaschemi et al., Cell Metab. 15 (2012), 813-826)。CARKLの欠乏、ひいてはセドヘプツロース代謝回転の欠如は逆の効果を示した(図2C)。このデータから、セドヘプツロース代謝が概日リズムの制御下にあり、同時に細胞酸化還元状態の調節因子として作用することが示される。どの組織が栄養セドヘプツロースを消費するかを特定するために、セドヘプツロースキナーゼ(CARKL)のmRNAレベルをマウスcDNA組織ライブラリーにおいて測定した(図2D)。セドヘプツロースキナーゼはセドヘプツロース代謝の律速酵素であり、肝臓、腎臓、褐色及び白色脂肪組織(BAT及びWAT)、消化器、腺、男性生殖器系並びに脳において高度に発現された。これらの結果から、食事由来のセドヘプツロースが多くの組織、特に肝臓、腎臓及び脂肪組織等の代謝的に活性な臓器にとって全身性の糖質源となり得ることが実証される。
セドヘプツロースへの曝露の代謝結果を調査するために、全糖質負荷を一定に維持しながら培養培地中のヒト及びマウス細胞をフルクトースと組み合わせたグルコース(GF)又はグルコース、フルクトース及びセドヘプツロース(GFS)に曝露した。脂肪細胞、肝細胞及びマクロファージの機能を試験して、栄養糖質負荷を補完するセドヘプツロースの重要性を評価した。これらの実験に用いたセドヘプツロースはムラサキベンケイソウ植物から単離した。
セドヘプツロースキナーゼを全身で遍在的に過剰発現するトランスジェニックマウスを、CARKLを過剰発現する遺伝子組み換え初代細胞を単離し、セドヘプツロース代謝をin vivoで試験するために生成した。CARKLトランスジェニックマウスは任意の明らかな表現型を示さず、その臓器重量はWT同腹子対照動物の臓器重量とは異なっていなかった(データは示さない)。セドヘプツロース代謝の増大が基質セドヘプツロース濃度の増大、又はその律速酵素であるセドヘプツロースキナーゼ(CARKL)のレベルの上昇によって達成され得ると仮定された。これをin vitroキナーゼアッセイにおいて試験するために、一定量の組み換えCARKLタンパク質を漸増用量のセドヘプツロースとともにインキュベートした。これにより、ADP形成によって測定されるセドヘプツロース代謝回転率が増強した(図4A)。同じ効果がCARKLタンパク質濃度の増大によっても観察されたが、セドヘプツロース濃度は一定に維持されていた(図4B)。これらの結果から、CARKL過剰発現がセドヘプツロース代謝の増大の効果を調査するのに有効なモデルであることが実証される。次に、肝臓組織がセドヘプツロースを内因的に代謝するようであったため(図2D)、増大させたCARKL発現レベルでのC7及びC6代謝の効果を研究するために初代肝細胞を単離した。
肝細胞におけるセドヘプツロースキナーゼ過剰発現の細胞表現型を確認した後、生物全体に対するセドヘプツロース代謝回転の増大の代謝効果を、代謝の全身指標として日中及び夜間における間接熱量測定法によって測定される対照及びセドヘプツロースキナーゼトランスジェニックマウスの身体活動当たりの呼吸商(RQ;RQ=呼気CO2/酸素消費)及びエネルギー消費を比較することによって調査した(図4F及び図4G)。セドヘプツロースキナーゼ過剰発現動物(CARKL)は、野生型(WT)同腹子と比較してより低いRQ値を有する。CARKLマウスは酸素消費の増大、ひいてはRQ値の低下を示し、それにより細胞に対するセドヘプツロースの効果を一部反映していた。さらに、CARKLマウスは対照マウスと比較してより低い活動当たりのEEを有する傾向がある。雌性CARKLトランスジェニック及びWTマウスのインスリン感受性もインスリン耐性試験(ITT)によって比較し、セドヘプツロース代謝がin vivoでインスリンシグナル伝達にも影響を及ぼすか否かを調査した。インスリン注射(腹腔内)はセドヘプツロースキナーゼを過剰発現するマウスにおいてWT対照よりも迅速に血糖レベルを低下させ、これらの動物においてセドヘプツロース代謝の増大によってもインスリン感受性が増大することが示された(図4H)。これに関連して、TNFa及び低酸素症治療による成熟脂肪細胞におけるインスリン耐性の誘導がセドヘプツロースキナーゼ喪失を生じることに言及することが重要である(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSM1261655で利用可能な公開遺伝子発現包括データ)。
肝細胞における広範な脂質沈着は脂肪肝疾患を生じ、肝線維症、肝硬変、最終的には肝細胞癌腫を引き起こす炎症(すなわち非アルコール性脂肪性肝炎(NASH))を伴い得る。WT及びCARKL過剰発現マウスに由来する肝細胞の脂質含量を比較すると、CARKLマウスに由来する肝細胞がそのWT対照よりも少ない脂肪滴を含有することが見出された(図5A)。
ペントースリン酸経路(PPP)の酸化アームの律速酵素であるグルコース−6−リン酸デヒドロゲナーゼ(G6PD)は、すなわちヌクレオチド合成及び酸化還元当量のためのC5体を生成するものであり、p53(腫瘍抑制因子)によって直接阻害されることが以前に示されている(Jiang et al., Nat Cell Biol. (2011) Mar; 13(3):310-6)。ヒト腫瘍において最も頻繁に突然変異する遺伝子であるp53の突然変異は、G6PDの過活性化及び肝細胞における脂質蓄積を生じる。セドヘプツロースキナーゼはPPPの非酸化的アームの律速キナーゼであり、少なくともマクロファージにおいて酸化的PPPフラックスを低減することが以前に示されている。セドヘプツロース代謝による肝細胞のG6PD活性の起こり得る調節を試験するために、WT及びCARKL過剰発現細胞の酵素活性を比較した(図5B)。WT対照細胞では、G6PD活性は均等に分布することが観察され、CARKLマウスに由来する細胞では細胞の内部空間におけるG6PDの再局在化、ひいては活性の低減が観察された。興味深いことに、WT細胞を、セドヘプツロースを含む細胞培養培地中でインキュベートすることによって同じ表現型が達成された(図示せず)。セドヘプツロースキナーゼ過剰発現及びセドヘプツロースインキュベーションによるG6PDの再局在化及び/又は阻害が、肝細胞における脂質蓄積の低減の原因であるか否か(図4A)については未だ確立されていない。それにもかかわらず、このデータをマクロファージのデータと組み合わせることで、場合によっては少なくともG6PD活性を負に調節することによって、セドヘプツロースレベルの上昇が癌細胞におけるp53喪失の対抗手段となり得ることが示される。別の例は、成長因子エストロゲンに応答してCARKL発現が減少し(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geoprofiles/; ID: 53372898; GDS3285 / 219713_at / SHPKで利用可能な公開GeneChip保存データ)、更にG6PD活性及び続く腫瘍成長の増大を生じ得るエストロゲン依存性乳癌細胞である。
骨は極めて動的な組織である。骨の形成と吸収との絶妙なバランスは骨の適当な機械的安定性に極めて重要である。骨の形成と吸収と間の不均衡は、骨脆弱性及び病的骨折を引き起こす骨密度減少及び骨微細構造の障害の高度に蔓延する病態である骨粗鬆症の原因となる。骨吸収に関与する細胞である破骨細胞はその機能がセドヘプツロース代謝に強く影響を受ける単球系に由来するため、破骨細胞の機能がC6/C7比によって調整され得るか否かを試験した。
急性免疫活性化モデル及び成熟脂肪組織の軽度の炎症におけるCARKL過剰発現、及びマウス免疫系に対するその影響のデータを本実施例によって提示する。CARKLマウスにおいて急性炎症を亜致死リポ多糖(LPS)注射によって誘発すると、野生型対照に比較したサイトカイン応答の抑制が生じた(図6A)。19のサイトカインパネルを、LPS注射(7mg/kg、IP)の24時間後に単離したWT及びCARKLマウス血清においてマウスサイトカインプロファイラーによって測定した。12のサイトカインが、in vivoでCARKL過剰発現によって調節されるサイトカインを強調するカットオフと定義される50%平均変化の閾値に達した。IL−13、MIP1α、RNATES、IL−12(p70)、IL−2、TNF−α、MCP1、KC、GM−CSF、IL−6、IL−17及びIL−15は、野生型同腹子と比較してCARKLマウスにおいて少なくとも50%の平均変化で減少した。サイトカインIL−6、IL−17及びIL−15は更に75%平均変化の閾値に達した。急性炎症に加えて、成熟脂肪組織における炎症性サイトカインの基礎レベルもCARKL及びWT対照マウスの2つの異なるデポー(皮下及び精巣上体脂肪組織)で評価した。LPS誘導炎症、TNFa及びMCP1のmRNAレベルの低減と一致して、マクロファージを脂肪組織に動員し、炎症性サイトカインに属する初代アディポカインがCARKL過剰発現によって鈍化することが見出された(図6B〜図6E)。
Inflammation and Carotid Artery - Risk for Atherosclerosis Study(ICARAS、Schillinger et al., (2005) Circulation 111 (17):2203-2209)の535人の神経学的に無症候の患者をCARKL遺伝子の3’−UTRにおけるrs465563[A]→[G]置換について遺伝子型決定した。33人(6.2%)の患者が観察期間中に脳卒中を患った。これらの患者では、rs465563対立遺伝子の分布は残りの研究集団の対立遺伝子頻度と比較して顕著に異なっていた(χ2=12.639、df=2、p=0.002、図6Fを参照されたい)。詳細には、[G]−対立遺伝子の同型のキャリアは[A]−同型個体と比較して3.93(95%CI:1.72〜9.01)、異型個体と比較して3.10(95%CI:1.40〜6.87)の相対リスクをそれぞれ有していた。rs465563遺伝子型情報の統計的独立性を、年齢、性別、心筋梗塞及び脳卒中の病歴、ニコチン消費、体格指数並びに幾つかの併存疾患(脂質異常症、高血圧、真性糖尿病)を共変量とする二値ロジスティック回帰モデルによって評価した(モデル:χ2=30.476、df=11、p=0.001)。このモデルでは、[G];[G]遺伝子型のキャリア状態(オッズ比=5.015、95%CI:1.803〜13.943)が[A]−対立遺伝子について同型の患者と比較した場合の有意な予測因子として与えられる。さらに、初期無脳卒中生存時間がrs465563キャリア状態に依存するか否かを、カプラン−マイヤープロットを描くことによって評価した。実際に、[G]−対立遺伝子の同型キャリア(1518.3日、95%CI:1419.2〜1617.4)は異型個体(1619.1日、95%CI:1584.8〜1653.3、p=0.005)及び[A];[A]−遺伝子型のキャリア(1788.1日、95%CI:1755.7〜1820.4、p=4.9〜10−4)よりも顕著に短い無症候生存を示した(図6G)。rs465563:[G]−対立遺伝子について同型の個体は、[A]−対立遺伝子のキャリアよりも顕著に短い無症候時間を示す。
Claims (15)
- 炎症の予防又は治療のためのセドヘプツロース含有組成物。
- 前記炎症が慢性炎症である、請求項1に記載の組成物。
- 前記炎症が全ての臓器特異的症状、特に急性呼吸促迫症候群(ARDS)又は多臓器不全症候群(MODS)を含む、特に多発外傷又は感染に応答した広範囲の全身性炎症と定義される全身性炎症反応症候群(SIRS)又は敗血症である、請求項1に記載の組成物。
- 前記炎症が末梢血における炎症性サイトカイン、特に腫瘍壊死因子α若しくはインターロイキン−6、又は他の炎症マーカー、特にc反応性タンパク質若しくは血清アミロイドαのレベルの増大に反映される慢性(軽度)全身性炎症と定義され、老化、脂肪症、アテローム性動脈硬化症、耐糖能異常及び2型糖尿病、神経変性障害、特に認知症、大鬱病性障害(MDD)及び癌に関与するメタ炎症又は炎症性老化である、請求項1又は2に記載の組成物。
- 前記炎症が、因果的に又は別の面で、炎症関連障害、好ましくは脂肪症、耐糖能異常、真性糖尿病及び糖尿病合併症、メタボリック症候群、アテローム性動脈硬化症、炎症性腸疾患、特にクローン病、潰瘍性大腸炎及びより奇異な病気、慢性ウイルス性肝炎、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎及び全てのステージの脂肪肝疾患を含む慢性炎症性肝疾患、慢性閉塞性肺疾患(COPD)及び気管支喘息、中枢神経系の炎症性疾患、特に多発性硬化症、アルツハイマー病及びパーキンソン病、又は末梢神経系の炎症性疾患、特に糖尿病性多発ニューロパチー、ギランバレー症候群及び関連の症候群、並びに自己免疫性コラーゲン組織疾患又は慢性感染と関連する神経炎/ニューロパチー、特にライム病、骨粗鬆症、骨関節炎、関節炎、特に関節リウマチ、又は剛直性脊椎炎及び他のリウマチ障害、特に自己免疫性結合組織障害及び筋炎、任意の病因及び兆候の血管炎、加齢性黄斑変性(AMD)慢性炎症性皮膚障害、特に乾癬及びアトピー性皮膚炎、歯周炎、大鬱病性障害、並びに癌の発症機序に関与する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記炎症が、癌の原因、進行、転移、治療に対する抵抗性、治療後の再発及び癌の兆候、特に癌に関連する悪液質、貧血、疲労及び抑鬱を含む癌の発症機序に関与する、請求項1、2、4及び5のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記炎症が急性若しくは慢性移植片拒絶反応、特に同種肺、肝臓、腎臓、心臓、腸若しくは膵島細胞移植の拒絶反応、又は逆に自己、同系若しくは同種骨髄、末梢血幹細胞(PBSC)若しくは臍帯血移植後の急性若しくは慢性移植片対宿主病に関与する、請求項1に記載の組成物。
- 前記炎症が特に腎代替療法に用いられる腹膜透析の結果としての脂肪組織の炎症、神経系の炎症、血管の炎症及び腹膜の炎症からなる群から選択される、請求項1に記載の組成物。
- セドヘプツロースが1日当たり0.001g〜300gの量で投与される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物。
- 非経口、皮下、経口、静脈内、腫瘍内、筋肉内又は腹腔内注射により投与される、請求項1〜9のいずれか一項に記載の組成物。
- 0.001g〜300gの量のセドヘプツロースを含有する粉末、粒状物、錠剤、ペレット、カプセル又はシロップとして投与される、請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物。
- ヘキソキナーゼ阻害剤、マンノヘプトース又は2−デオキシ−D−グルコースと組み合わせて投与される、請求項1〜11のいずれか一項に記載の組成物。
- 患者に移植される臓器を、セドヘプツロースを含む保存液に保存する、臓器移植患者における炎症を低減する目的のために、移植目的の臓器を保存する方法。
- 前記保存液がセドヘプツロースを、移植される臓器に付着した又はそれを覆う全ての液体材料の濃度と定義される0.001mg/ml〜500mg/mlの濃度で含む、請求項13に記載の方法。
- セドヘプツロースを0.001mg/ml〜500mg/mlの濃度で含有する、腹膜透析の結果としての炎症を予防するための、腹膜透析液。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP13160443.1A EP2781219A1 (en) | 2013-03-21 | 2013-03-21 | Use of sedoheptulose for prevention or treatment of inflammation |
EP13160443.1 | 2013-03-21 | ||
PCT/EP2014/055679 WO2014147214A1 (en) | 2013-03-21 | 2014-03-21 | Use of sedoheptulose for prevention or treatment of inflammation |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016516077A JP2016516077A (ja) | 2016-06-02 |
JP6388635B2 true JP6388635B2 (ja) | 2018-09-12 |
Family
ID=47901873
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016503672A Active JP6388635B2 (ja) | 2013-03-21 | 2014-03-21 | 炎症の予防又は治療へのセドヘプツロースの使用 |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9694026B2 (ja) |
EP (2) | EP2781219A1 (ja) |
JP (1) | JP6388635B2 (ja) |
CN (2) | CN115364112A (ja) |
AU (1) | AU2014234230B2 (ja) |
BR (1) | BR112015023463A2 (ja) |
CA (1) | CA2903151C (ja) |
DK (1) | DK2976089T3 (ja) |
ES (1) | ES2930249T3 (ja) |
HU (1) | HUE060237T2 (ja) |
MX (1) | MX2015013378A (ja) |
NZ (1) | NZ711523A (ja) |
PL (1) | PL2976089T3 (ja) |
PT (1) | PT2976089T (ja) |
WO (1) | WO2014147214A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201506396B (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2781218A1 (en) | 2013-03-21 | 2014-09-24 | Medizinische Universität Wien | Use of sedoheptulose as a nutritional supplement |
CN106309458A (zh) * | 2016-07-28 | 2017-01-11 | 中南大学湘雅医院 | 2‑脱氧‑d‑葡萄糖及其在药学上可接受的盐在制备治疗银屑病药物方面的应用 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE78166T1 (de) | 1985-10-22 | 1992-08-15 | Silvetti Anthony N | Monosaccharide enthaltende zusammensetzung zum heilen von wunden. |
JPH04335877A (ja) | 1991-05-13 | 1992-11-24 | Eimu:Kk | 十薬食品・飲料並びに製造法 |
US9492582B2 (en) * | 2000-11-08 | 2016-11-15 | Fxs Ventures, Llc | Ophthalmic and contact lens solutions containing simple saccharides as preservative enhancers |
US20090252834A1 (en) | 2004-05-10 | 2009-10-08 | Michael Griffin Hayek | Compositions comprising glucose anti-metabolites |
ATE458409T1 (de) | 2004-07-30 | 2010-03-15 | Vb Medicare Pvt Ltd | Süssstoffzusammensetzung mit reduziertem kaloriengehalt |
WO2006093848A2 (en) | 2005-02-28 | 2006-09-08 | Mcneil Nutritionals, Llc | Brown sugar substitute |
JP5048238B2 (ja) * | 2005-11-16 | 2012-10-17 | エスエス製薬株式会社 | ウワウルシ乾燥エキス含有経口製剤 |
GB0720516D0 (en) | 2007-10-18 | 2007-11-28 | Cadbury Schweppes Plc | Comestible products |
KR100912277B1 (ko) * | 2007-11-21 | 2009-08-17 | 한국생명공학연구원 | 내열성 효소를 이용하여 세도헵툴로스를 제조하는 방법 |
CN101919872B (zh) * | 2010-07-21 | 2011-12-07 | 广东粤龙药业有限公司 | 景酮糖酐在制备抗乙肝药物中的应用 |
GB201303698D0 (en) | 2012-10-26 | 2013-04-17 | Tate & Lyle Ingredients | Sweetener syrups |
CN103059071B (zh) * | 2013-01-08 | 2016-03-16 | 华东理工大学 | 一种单糖的纳滤分离方法 |
EP2781218A1 (en) | 2013-03-21 | 2014-09-24 | Medizinische Universität Wien | Use of sedoheptulose as a nutritional supplement |
-
2013
- 2013-03-21 EP EP13160443.1A patent/EP2781219A1/en not_active Withdrawn
-
2014
- 2014-03-21 CN CN202211174309.3A patent/CN115364112A/zh active Pending
- 2014-03-21 MX MX2015013378A patent/MX2015013378A/es unknown
- 2014-03-21 PT PT147117543T patent/PT2976089T/pt unknown
- 2014-03-21 JP JP2016503672A patent/JP6388635B2/ja active Active
- 2014-03-21 PL PL14711754.3T patent/PL2976089T3/pl unknown
- 2014-03-21 BR BR112015023463A patent/BR112015023463A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-03-21 EP EP14711754.3A patent/EP2976089B1/en active Active
- 2014-03-21 CA CA2903151A patent/CA2903151C/en active Active
- 2014-03-21 ES ES14711754T patent/ES2930249T3/es active Active
- 2014-03-21 US US14/778,850 patent/US9694026B2/en active Active
- 2014-03-21 NZ NZ711523A patent/NZ711523A/en unknown
- 2014-03-21 WO PCT/EP2014/055679 patent/WO2014147214A1/en active Application Filing
- 2014-03-21 CN CN201480028530.5A patent/CN105283188A/zh active Pending
- 2014-03-21 DK DK14711754.3T patent/DK2976089T3/da active
- 2014-03-21 HU HUE14711754A patent/HUE060237T2/hu unknown
- 2014-03-21 AU AU2014234230A patent/AU2014234230B2/en active Active
-
2015
- 2015-09-01 ZA ZA2015/06396A patent/ZA201506396B/en unknown
-
2017
- 2017-06-14 US US15/622,235 patent/US10660910B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US9694026B2 (en) | 2017-07-04 |
NZ711523A (en) | 2020-09-25 |
DK2976089T3 (da) | 2022-11-07 |
ZA201506396B (en) | 2018-05-30 |
US20170281661A1 (en) | 2017-10-05 |
CA2903151C (en) | 2021-11-30 |
EP2781219A1 (en) | 2014-09-24 |
CA2903151A1 (en) | 2014-09-25 |
CN115364112A (zh) | 2022-11-22 |
PL2976089T3 (pl) | 2023-01-30 |
BR112015023463A2 (pt) | 2017-07-18 |
PT2976089T (pt) | 2022-11-22 |
ES2930249T3 (es) | 2022-12-09 |
MX2015013378A (es) | 2016-01-08 |
US10660910B2 (en) | 2020-05-26 |
EP2976089B1 (en) | 2022-08-17 |
WO2014147214A1 (en) | 2014-09-25 |
CN105283188A (zh) | 2016-01-27 |
AU2014234230A1 (en) | 2015-09-17 |
HUE060237T2 (hu) | 2023-02-28 |
JP2016516077A (ja) | 2016-06-02 |
EP2976089A1 (en) | 2016-01-27 |
US20160045525A1 (en) | 2016-02-18 |
AU2014234230B2 (en) | 2018-08-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Frydrych et al. | Diabetes and sepsis: risk, recurrence, and ruination | |
US10660910B2 (en) | Use of sedoheptulose for prevention or treatment of inflammation | |
AU2019202147B2 (en) | Use Of Sedoheptulose As A Nutritional Supplement | |
Kang et al. | The role of visfatin in diabetic nephropathy | |
Tu et al. | Protective role of bayberry extract: associations with gut microbiota modulation and key metabolites | |
WO2019186553A1 (en) | Methods for elevation of lipid and cholesterol metabolism | |
NZ711528B2 (en) | Use of sedoheptulose as a nutritional supplement | |
Symonds et al. | Maternal diet through pregnancy–the key to future good health of the next generation | |
Pastore et al. | Mechanisms of Fibrogenesis in NASH | |
Hawley | Dietary Regulation of Successful Aging |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160301 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20161129 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170125 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170822 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171031 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180116 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180410 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180717 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180814 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6388635 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |