JP6309005B2 - アルブミンを精製するための方法 - Google Patents
アルブミンを精製するための方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6309005B2 JP6309005B2 JP2015523347A JP2015523347A JP6309005B2 JP 6309005 B2 JP6309005 B2 JP 6309005B2 JP 2015523347 A JP2015523347 A JP 2015523347A JP 2015523347 A JP2015523347 A JP 2015523347A JP 6309005 B2 JP6309005 B2 JP 6309005B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- albumin
- chromatography
- mep hypercel
- igg
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
- C07K14/765—Serum albumin, e.g. HSA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/20—Partition-, reverse-phase or hydrophobic interaction chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
市販のヒト血清アルブミン(HSA)の大部分は、最初にCohnら[1946]により開発されたものに基づくエタノール沈殿法及びKistler及びNitschmann[1962]のその後の改良を使用して製造される。これらの方法を使用する分離は、様々なエタノール濃度、pH、イオン強度及び温度での血漿タンパク質の溶解度に基づく。しかし、アルブミンの精製のためのCohn精製法の主要な不利な点は、40%体積/体積までのエタノール濃度の使用及びこの手順を0℃未満で行う必要があるということである。それにも関わらず、エタノール沈殿によるアルブミン精製の持続した成功は、これらの方法が現代の血漿分画プロセスにおいて遭遇する大量処理において非常に有効であるという事実に主に起因する。
本発明の局面において、疎水性電荷誘導クロマトグラフィー樹脂にアルブミン濃縮溶液を通すこと、及び樹脂を通ったアルブミン溶液を回収することを含む、夾雑物を除去するためにアルブミンを精製する方法が提供される。
(a) 80mMより多いナトリウム;
(b) 19%質量/体積より多いアルブミン;
(c) 4μg/mL未満のIgA;
(d) 0.1mg/mL未満のIgG;
(e) 0.03mg/mL未満のアポリポタンパク質A1;
(f) 0.07mg/mL未満のα1−プロテイナーゼ阻害剤;及び/又は
(g) 1%質量/体積未満の凝集体/ポリマー
を含む。
少なくとも19%質量/体積の総タンパク質、並びに以下:
(a) 総タンパク質のうち少なくとも95%のアルブミン含有量;
(b) 2%質量/体積未満の凝集体、好ましくは1%質量/体積未満の凝集体;
(c) 2%質量/体積未満、より好ましくは1.5%質量/体積未満の二量体含有量;(d) 少なくとも97%質量/体積の単量体含有量;
(e) 0.5%質量/体積未満のフラグメント含有量;
(f) 28.6IU/mL未満のプレカリクレイン活性化因子(PKA)、より
好ましくは10IU/mL未満のPKA、なおより好ましくは1IU/mL未満のPKA;
(g) 0.1%質量/体積未満のα2−マクログロブリン;
(h) 0.01%質量/体積未満のアポリポタンパク質A1;
(i) 0.05%質量/体積未満のトランスフェリン;
(j) 0.05%質量/体積未満のα1−糖タンパク質;
(k) 0.1%質量/体積未満のα1−プロテイナーゼ阻害剤、好ましくは0.05%質量/体積未満のα1−プロテイナーゼ阻害剤;
(l) 0.05%質量/体積未満のハプトグロビン;
(m) 0.1%質量/体積未満のインター−α−トリプシン(inter−α−trypsin)阻害剤;
(n) 約45mmol/L〜約100mmol/Lのナトリウム、好ましくは約80mmol/L〜90mmol/;
(o) 5μg/mL未満のIgA、好ましくは2μg/mL未満のIgA;
(p) 0.2mg/mL未満のIgG、好ましくは0.01mg/mL未満のIgG;(q) 110μg/L未満のアルミニウム、80μg/L未満のアルミニウム、より好ましくは30μg/L未満のアルミニウム;
(r) 40mmol/L未満のカプリレート;
(s) 約130mosmol/kg〜約140mosmol/kgの浸透圧;及び
(t) 6NTU未満、好ましくは3NTU未満の濁度
のいずれか又はそれ以上を含む、精製アルブミン溶液が提供される。
本明細書全体を通して、文脈が別のものを必要としなければ、語「含む(comprise)」、又は「含む(comprises)」もしくは「含むこと」のような変形は、記載された要素もしくは整数又は要素もしくは整数の群を含むことを示すが、他のいずれの要素もしくは整数又は要素もしくは整数の群も排除することは示さないと理解されるだろう。
(a) 80mMより多いナトリウム;
(b) 19%質量/体積より多いアルブミン;
(c) 4μg/mL未満のIgA;
(d) 0.1mg/mL未満のIgG;
(e) 0.03mg/mL未満のアポリポタンパク質A1;
(f) 0.07mg/mL未満のα1−プロテイナーゼ阻害剤;及び/又は
(g) 1%質量/体積未満の凝集体/ポリマー
を含む。
(a) 総タンパク質のうち少なくとも95%のアルブミン含有量;
(b) 2%質量/体積未満の凝集体、好ましくは1%質量/体積未満の凝集体;
(c) 2%質量/体積未満、より好ましくは1.5%質量/体積未満の二量体含有量;(d) 少なくとも97%質量/体積の単量体含有量;
(e) 0.5%質量/体積未満のフラグメント含有量;
(f) 28.6IU/mL未満のプレカリクレイン活性化因子(PKA)、より好ましくは10IU/mL未満のPKA、なおより好ましくは1IU/mL未満のPKA;
(g) 0.1%質量/体積未満のα2−マクログロブリン;
(h) 0.01%質量/体積未満のアポリポタンパク質A1;
(i) 0.05%質量/体積未満のトランスフェリン;
(j) 0.05%質量/体積未満のα1−糖タンパク質;
(k) 0.1%質量/体積未満のα1−プロテイナーゼ阻害剤、好ましくは0.05%質量/体積未満のα1−プロテイナーゼ阻害剤;
(l) 0.05%質量/体積未満のハプトグロビン;
(m) 0.1%質量/体積未満のインター−α−トリプシン(inter−α−trypsin)阻害剤;
(n) 約45mmol/L〜約100mmol/Lのナトリウム、好ましくは約80mmol/L〜90mmol/L;
(o) 5μg/mL未満のIgA、好ましくは2μg/mL未満のIgA;
(p) 0.2mg/mL未満のIgG、好ましくは0.01mg/mL未満のIgG;(q) 110μg/L未満のアルミニウム、80μg/L未満のアルミニウム、より好ましくは30μg/L未満のアルミニウム;
(r) 40mmol/L未満のカプリレート;
(s) 約130mosmol/kg〜約140mosmol/kgの浸透圧;及び
(t) 6NTU未満、好ましくは3NTU未満の濁度
のいずれか1つ又はそれ以上を含む精製アルブミン溶液が提供される。
タンパク質溶液:精製ヒト血清アルブミン(HSA)及び精製ヒト免疫グロブリンG(IgG)をCSL Biotherapies(Broadmeadows、Victoria、Australia)から入手した。脂質及び真性グロブリンを枯渇したコーン上清I(SNI)、CM Sepharose−FFクロマトグラフィーからのアルブミン溶出液、及びSephacryl S200HRクロマトグラフィーからの精製アルブミンを含む加工中間体をCSL Biotherapies(Broadmeadows、Victoria、Australia)から入手した。全てのタンパク質溶液を、クロマトグラフィー前に0.22μm膜(Durapore(R)、Millipore Corporation、Bedford、MA、USA)に通してろ過した。
MEP Hypercelについての開発研究を開始する前に、アルブミン中間体中に存在する主な夾雑物タンパク質を同定し、そしてこれらの夾雑物の除去におけるSephacryl S200HRの有効性を理解するために、現在のSephacryl S200HR精製工程を十分特徴づけした。Sephacryl S200HRクロマトグラフィー前後のアルブミン中間体を、比濁分析(IMMAGE Immunochemistry system、Beckman−Coulter Inc.、Fullerton、CA、USA)を使用して特徴づけし、アルブミン、IgG、IgA及びIgMのレベルを決定し、そして免疫電気泳動を使用してトランスフェリン、α2−マクログロブリン、α1−糖タンパク質、α1−アンチトリプシン、インターαトリプシン阻害剤、ハプトグロビン、アポリポタンパク質A1、アポリポタンパク質B及びセルロプラスミンのレベルを決定した。
クロマトグラフィー後に、総不純物含有量は0.19%まで減少し、IgGが存在する最も豊富な不純物タンパク質であった。
市販のアルブミン溶液の安全性記録は主として低温殺菌工程(60℃10時間)を原因とする[More & Harvey、1991]。アルブミン溶液はカプリル酸ナトリウムの添加により安定化されるが、しかしカプリレートにより保護されない夾雑物タンパク質の存在は、低温殺菌の間の熱により誘導される変性に影響を受けやすい。CM Sepharose−FFクロマトグラフィーから溶出されたアルブミン中間体の対照サンプル及びSephacryl S200HRクロマトグラフィー由来の精製アルブミンの中間体サンプルを、限外ろ過(10kDa OMEGA膜;Pall Life Sciences、USA)により15−20%質量/体積まで濃縮し、そして32mMカプリル酸ナトリウムを調合した。これらのサンプルは低pHカプリレートインキュベーション工程にかけなかった。次いでサンプルを60℃で10時間加熱することにより低温殺菌した。低温殺菌の完了時に、サンプルの濁度をHach 2100AN濁度計(Hach Company、Loveland、CO、USA)を使用して評価した。
MEP Hypercelクロマトグラフィーのための操作パラメーターを、アルブミン及びIgGの精製サンプルを使用して検討した。アルブミン及びIgGの結合及び溶出を;50mMリン酸ナトリウム(pH7.0);50mM酢酸ナトリウム(pH5.5);50mM酢酸ナトリウム(pH5.5)+150mM NaCl;50mM酢酸ナトリウム(pH5.5)+300mM NaCl;50mM酢酸ナトリウム(pH7.0);及び110mM酢酸ナトリウム(pH7.0)を含む様々な平衡条件を使用して別々に決定した。精製IgG及び精製アルブミンサンプルを約5〜10mg/mLの濃度で適切な平衡緩衝液中で調製し、そしてクロマトグラフィー前に0.22μm膜(Durapore(R)、Millipore Corporation、Bedford、MA、USA)に通して濾過した。サンプルを平衡化MEP Hypercelカラム(17.5cm x 1.6cm ID;GE Healthcare BioSciences AB、Uppsala、Sweden)に樹脂1リットルあたり20gでロードした。未結合のタンパク質を、サンプルローディング期間及びその後のサンプル後洗浄の間に平衡緩衝液を使用して回収した。結合したタンパク質を酢酸ナトリウム緩衝液を使用してpH3.0で溶出した。全てのクロマトグラフィー工程を100cm/時の流量で行い、そして280nmでUnicornソフトウェア(GE Healthcare BioSciences AB、Uppsala、Sweden)を備えたAKTA Explorer 900を使用してモニタリングした。流出画分及び溶出液画分中に回収されたタンパク質の量を、比濁法を使用して決定した。
MEP Hypercelが首尾良くアルブミン及びIgGの混合物を分離し得るということを実証した後、イオン交換精製アルブミンを精製するMEP Hypercelの能力を評価した。CM Sepharose−FFクロマトグラフィーからのアルブミン溶出液をpH 7.0±0.1に調整し、そしてMEP Hypercelカラムにロードする前に0.22μmフィルター(Durapore(R)、Millipore Corporation、Bedford、MA、USA)に通して清澄化した。アルブミンサンプル(1000mL)を、110mM酢酸ナトリウム(pH7.0)で平衡化したMEP Hypercelカラム(17.5cm x 1.6cm ID)にロードし、続いて110mM酢酸ナトリウム(pH7.0)でサンプル後洗浄を行い、未結合タンパク質を回収し、そして結合したタンパク質を100mM酢酸ナトリウム(pH3.0)及び1M NaOHで洗浄することにより除去した。通過画分を10mL間隔で採取し、そして主要不純物タンパク質のIgG、IgA、IgM及びα2−マクログロブリンのレベルについてELISAにより評価した。
4つの主要不純物タンパク質はMEP Hypercel樹脂に対して異なる親和性を有すると思われたので、不純物タンパク質の結合に対する流量の影響を調べるために研究を行った。上記からのクロマトグラフィー条件を使用して、アルブミンサンプル(100mL)を50、100及び150cm/時の流量でMEP Hypercelカラム上にロードした。通過画分及び溶出液をバルクサンプルとして集め、そして比濁法によりアルブミンのレベルについて、そしてELISAによりIgG、IgA、IgM及びα2−マクログロブリンの主要不純物タンパク質について評価した。
アルブミン精製工程の代替を調べることに加えて、ヒト血清アルブミンのクロマトグラフィー精製における最初のアニオン交換クロマトグラフィー工程の効率を改善する方法を評価した。Capto DEAE樹脂は、DEAE Sepharose−FFに対する代替として使用され得、そしてそのより高い能力のために、タンパク質ローディングを約50%増加させることが可能となる。DEAE Sepharose−FF及びCapto DEAEの分離特徴が類似しているにも関わらず、いくつかの差異が観察された。最初にDEAE Sepharose−FFに由来する、CM Sepharose−FFからのアルブミン溶出液、及びCapto DEAE通過画分を、比濁法及びELISA分析により最初に特徴づけした。2つのアルブミンサンプルをpH7.0±0.1に調整し、そして0.22μm膜(Durapore)に通すことにより清澄化した。110mM酢酸ナトリウム(pH7.0)で平衡化されたMEP Hypercelカラムに100、200及び300mLのサンプル体積でロードした。通過画分及びサンプル後洗浄液をpH3.0溶出液と共にバルク画分として集めた。このバルク画分を、比濁法によりアルブミンレベルについて、そしてELISAによりIgG、IgA、IgM及びα2−マクログロブリンの主要不純物タンパク質について評価した。
MEP Hypercelのプロセス効率を既存のSephacryl S200HRと比較するために、MEP Hypercelパイロット規模処理に使用した条件をフルスケールバッチに推定した。これをSephacryl S200HR工程についての実際のデータと比較した。比較したパラメーターは;流量、カラムサイズ、サンプルローディング、緩衝液使用、及びプロセス及び工程所要時間を含んでいた。
脱脂されかつ真性グロブリンを枯渇したコーン上清I(15kg)を出発物質として使用した。この溶液を0.22μmフィルターを使用して清澄化した。Capto DEAE樹脂を充填したガラスカラム(1374mL)を10mM酢酸ナトリウム(pH5.2)を用いて平衡化した。Delip/Eug SNIを100g/Lのタンパク質ローディング及び100cm/時の流量でロードした。サンプルローディングの終わりに、カラムを3カラム体積の10mM酢酸ナトリウム(pH5.2)で洗浄した。サンプル適用及びサンプル後洗浄の間に集められた未結合タンパク質を免疫グロブリン処理に回した。結合したタンパク質を選択的に溶出した。アルブミンを含有する第一の溶出は、3カラム体積の25mM酢酸ナトリウム(pH4.5)で洗浄することにより起こる。結合タンパク質の残りを、2カラム体積の1M NaCl及び2カラム体積の1M NaOHで洗浄することにより溶出した。
Capto DEAEまたはDEAE Sepharose FFクロマトグラフィー由来のアルブミン溶出液を1M
NaOH及び1M酢酸を使用してpH5.4及び伝導率5.0mS/cmに調整した。
SN II+IIIまたはろ液Aを限外濾過により濃縮し、次いで5体積のPFWに対して透析ろ過してエタノール及び塩レベルを減少させた。透析濾過したSN II+IIIまたは画分Aを、1M NaOH及び1M酢酸を使用してpH4.5及び伝導率2.0mS/cmに調整した。リポタンパク質を結合するためにAerosil 380を160g/kgタンパク質で加えた。フィルタープレスを使用する清澄化を容易にするためにDiacelを400g/kgで加えた。フィルタープレスは25mM酢酸ナトリウム(pH4.5、伝導率2.0mS/cm)を使用して回収され得る。
脱脂されたコーン上清II+IIIを出発物質として使用し、pH4.7及び伝導率1.8mS/cmに調整した。この溶液を0.22μmフィルターを使用して清澄化した。ANX Sepharose−FF樹脂を充填したガラスカラム(35 mL)を酢酸ナトリウムで平衡化した(pH4.7、伝導率1.8mS/cm)。調整した脱脂SN II+IIIを、タンパク質ローディング300g/L及び流量100cm/時でロードした。サンプルローディングの終わりに、カラムを3カラム体積の酢酸ナトリウム(pH4.7、伝導率1.8mS/cm)で洗浄した。サンプル適用及びサンプル後洗浄の間に集められた未結合タンパク質を集めてアルブミン処理のために保持した。結合したタンパク質を、2カラム体積の1M NaCl及び2カラム体積の1M NaOHで洗浄することにより溶出した。
アルブミンを精製する方法を提供すると予測される。この方法は、例えば、Albumex 20プロセスと類似した既にクロマトグラフィー精製プロセスを有するより小さな血漿成分分画器に特に関連する。また、クロマトグラフィー精製プロセスがよく適しているそれら自身の血漿分画プロセスを確立しようと計画している小さな企業及び国にとって魅力的であると分かるはずである。
Arakawa T、Kita Y、Sato H、Ejima D (2009) MEP chromatography of antibody and Fc−fusion protein in aqueous arginine solution. Protein Expression and Purification 63:158−163.
Arakawa T、Futatsumori−Sugai M、Tsumoto K、Kita Y、Sato H、Ejima D (2010) MEP Hypercel chromatography II: Binding、washing and elution. Protein Expression and Purification 71:168−173.
Berglof JH、Eriksson S、Curling JM (1983) Chromatographic preparation and in vitro properties of albumin from human plasma. J App Biochem 5:282−292.
Bertolini J、Davies J、Wu J、Pritchard K、Seneviratne G、Stuckley K、Fogarty K、Goss NH (1999) Chromatographic purification of immunoglobulins. Plasma Product Biotechnology Meeting、Daydream Island、Australia、March 27−30.
Burton SC、Harding DRK (1998) Hydrophobic charge induction chromatography: salt independent protein adsorption and facile elution with aqueous buffers. J Chromatogr A 814:71−81.
Cabrera−Crespo J、Goncalves VM、Martins EA、Grellet S、Lopes AP、Raw I (2000) Albumin purification from human placenta. Biotechnol Appl Biochem 31:101−106.
Campbell WR、Hanna MI (1937) The albumin、globulins and fibrinogen of serum and plasma. J Biol Chem 119(1):15−33.
Che Y、Wilson FJ、Bertolini J、Schiff P、Maher DW (2006) Impact of manufacturing
improvements on clinical safety of albumin: Australian pharmacovigilance data for 1988−2005. Crit Care Resusc 8(4):334−338.
Chen J、Tetrault J、Ley A (2008) Comparison of standard and new generation hydrophobic interaction chromatography resins in the monoclonal antibody purification process. J Chromatogr A 1177:272−281.
Cohn EJ、Strong LE、Hughes WL、Mulford DJ、Ashworth JN、Melin M、Taylor HL (1946) Preparation and properties of serum and plasma proteins. IV. A system for the separation into fractions of the protein and lipoprotein components of biological tissues and fluids. J Am Chem Soc 68:459−475.
Coulon D、Cabanne C、Fitton V、Noubhani AM、Saint−Christophe E、Santarelli X (2004) Penicillin acylase purification with the aid of hydrophobic charge induction chromatography. Journal of Chromatography B 808:111−115.
Cullen GE、Van Slyke DD (1920) Determination of the fibrin、globulin and albumin
nitrogen of blood plasma J Biol Chem 41:587−597.
Ghose S、Hubbard B、Cramer S (2006) Evaluation and comparison of alternatives to
Protein A chromatography − Mimetic and hydrophobic charge induction chromatogr
aphic stationary phases. Journal of Chromatography A 1122:144−152.
Goheen SC、Matson RS (1985) Purification of human serum gamma globulins by hydrophobic interaction high−performance liquid chromatography. Journal of Chromatography 326:235−241.
Gruvegard M、Allmer K (2009) Designing next generation chromatography media for modern high−throughput plasma processes. Plasma Product Biotechnology Meeting、Menorca、Spain、May 11−15.
Kistler P、Nitschmann HS (1962) Large−scale production of human plasma fractions. Vox Sang 7:414−424.
Marrs SB (1993) Large scale albumin fractionation by chromatography. In Biotechnology if Blood Proteins (Rivat C、Stoltz J−F eds.) Colloque INSERM/John Libbey Eurotext Ltd. pp. 169−173.
Martins EA、Cheng E、Raw I (2011) Plasma fractionation facility at Instituto Butantan − Sao Paulo − Brazil. Plasma Product Biotechnology Meeting、Paphos、Cyprus、May 2011.
Melander W、Horvath C (1977) Salt effects on hydrophobic interactions in precipitation and chromatography of proteins; an interpretation of the lyotropic series. Archives of Biochemistry and Biophysics 183:200−215.
More JE、Harvey MJ (1991) Purification technologies for human plasma albumin. In
Blood Separation and Plasma Fractionation (Harris JR ed.) Wiley−Liss、New York、pp. 261−306.
Ohmura T、Sumi A、Ohtani W、Fuluhata N、Takeshima K、Kamide K、Noda M、Kondo M、Ishikawa S、Oohara K、Yokoyama K (1995) Recombinant human serum albumin、process
for producing the same and pharmaceutical preparation containing the same. US Patent 5440018.
Pezzini J、Joucla G、Gantier R、Toueille M、Lomenech A−M、Le Senechal C、Garbay
B、Santarelli X、Cabanne C (2011) Antibody capture by mixed mode chromatography: A comprehensive study from determination of optimal purification conditions to identification of contaminating host cell proteins. Journal of Chromatography A 1218:8197−8208.
Prin C、Bene MC、Gobert B、Montagne P、Faure GC (1995) Isoelectric restriction of human immunoglobulin isotypes. Biochim Biophys Acta、1243:287−290.
Ramos−Clamont G、del Carmen Candia−Plata M、Zamudio RG、Vazquez−Moreno L (2006) Novel hydrophobic interaction chromatography matrix for specific isolation and simple elution of immunoglobulins (A、G and M) from porcine serum. Journal of Chromatography A 1122:28−34.
Rucheton M、Stefas E、Graafland H (1997) Method for purifying an aqueous solution of raw albumin. US Patent 5677424.
Schwartz W、Judd D、Wysocki M、Guerrier L、Birck−Wilson E、Boschetti E (2001). Comparison of hydrophobic charge induction chromatography with affinity chromatography on protein A for harvest and purification of antibodies. J Chromatogr A、908:251−263.
Veron J−L、Gattel P、Pla J、Fournier P、Grandgeorge M (1993) Combined Cohn/chromatography purification process for the manufacture of high purity human albumin from plasma. In Biotechnology if Blood Proteins (Rivat C、Stoltz J−F eds.) Colloque INSERM/John Libbey Eurotext Ltd. pp. 183−188.
Yap HB、Young IF、Micucci V、Herrington RW、Turner PJ、Davies JR (1993) Development of a process for the preparation of human serum albumin using chromatographic methods. In Biotechnology if Blood Proteins (Rivat C、Stoltz J−F eds.) Colloque INSERM/John Libbey Eurotext Ltd. pp. 143−149.
Claims (9)
- 疎水性電荷誘導クロマトグラフィー樹脂にアルブミン濃縮溶液を通すこと、及び樹脂を通ったアルブミン溶液を回収することを含む、夾雑物を除去するためにアルブミンを精製する方法。
- 疎水性電荷誘導クロマトグラフィー樹脂が4−メルカプトエチルピリジンを含む、請求項1に記載の方法。
- アルブミン濃縮溶液が、コーン上清I、コーン上清II+III、上清/ろ液A、コーン上清IV及び画分Vから選択される、請求項1又は2に記載の方法。
- アルブミン濃縮溶液が透析ろ過されたコーン上清Iである、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- アルブミン濃縮溶液が脱脂され、かつ真性グロブリンを枯渇している、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- アルブミン濃縮溶液を疎水性電荷誘導クロマトグラフィー樹脂に通す前に、前記方法は、(a)アルブミンに対してネガティブモードで該溶液をアニオン交換樹脂に通す工程、及び(b)アルブミンに対してネガティブモードで該溶液をカチオン交換樹脂に通す工程を含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(a)のアニオン交換樹脂からの通過画分を、工程(b)におけるカチオン交換樹脂に通すことを含む、請求項6に記載の方法。
- 工程(b)のカチオン交換樹脂からの通過画分を、工程(a)におけるアニオン交換樹脂に通すことを含む、請求項6に記載の方法。
- 精製アルブミン溶液を低温殺菌することを含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載の
方法。
Applications Claiming Priority (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261676799P | 2012-07-27 | 2012-07-27 | |
US61/676,799 | 2012-07-27 | ||
EP12181515 | 2012-08-23 | ||
EP12181515.3 | 2012-08-23 | ||
US13/826,500 | 2013-03-14 | ||
US13/826,500 US20140031527A1 (en) | 2012-07-27 | 2013-03-14 | Method for polishing albumin |
AU2013203968 | 2013-04-11 | ||
AU2013203968A AU2013203968B2 (en) | 2012-07-27 | 2013-04-11 | A method for polishing albumin |
PCT/AU2013/000836 WO2014015388A1 (en) | 2012-07-27 | 2013-07-26 | A method for polishing albumin |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015524416A JP2015524416A (ja) | 2015-08-24 |
JP6309005B2 true JP6309005B2 (ja) | 2018-04-11 |
Family
ID=46939493
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015523347A Active JP6309005B2 (ja) | 2012-07-27 | 2013-07-26 | アルブミンを精製するための方法 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20140031527A1 (ja) |
EP (1) | EP2877484B1 (ja) |
JP (1) | JP6309005B2 (ja) |
KR (1) | KR20150033739A (ja) |
CN (1) | CN104507954B (ja) |
AU (1) | AU2013203968B2 (ja) |
BR (1) | BR112015001383A2 (ja) |
CA (1) | CA2880234A1 (ja) |
ES (1) | ES2655205T3 (ja) |
HK (1) | HK1210480A1 (ja) |
MY (1) | MY166857A (ja) |
RU (1) | RU2015106691A (ja) |
SG (1) | SG11201408817SA (ja) |
WO (1) | WO2014015388A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2887588T3 (es) * | 2015-08-13 | 2021-12-23 | Kamada Ltd | Composiciones derivadas de pasta de fracción de Cohn y uso de las mismas |
FR3040882A1 (fr) * | 2015-09-10 | 2017-03-17 | Lab Francais Du Fractionnement | Composition liquide d'albumine humaine a usage therapeutique |
CN112375137B (zh) * | 2020-11-30 | 2022-07-26 | 广西冠峰生物制品有限公司 | 一种有效降低pka含量的人血白蛋白的制备方法 |
CN113831405B (zh) * | 2021-11-17 | 2024-04-30 | 华兰生物工程重庆有限公司 | 一种人血白蛋白的纯化方法 |
WO2023200908A1 (en) * | 2022-04-14 | 2023-10-19 | Csl Behring Llc | Methods of preparing albumin preparations |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4228154A (en) * | 1979-02-26 | 1980-10-14 | Armour Pharmaceutical Company | Purification of plasma albumin by ion exchange chromatography |
FR2543448A1 (fr) * | 1983-04-01 | 1984-10-05 | Rhone Poulenc Spec Chim | Procede de fractionnement du plasma |
JPH03209396A (ja) * | 1990-01-10 | 1991-09-12 | Kurita Water Ind Ltd | アルブミンとグロブリンの分離方法 |
JPH04234326A (ja) * | 1990-12-27 | 1992-08-24 | Green Cross Corp:The | アルブミン製剤及びその製法 |
FR2672604B1 (fr) * | 1991-02-07 | 1995-05-05 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Procede pour isoler de l'albumine humaine a partir du surnageant iv, notamment iv-4, ou de la fraction v de cohn ou d'un surnageant ou fraction analogue. |
WO1993001207A1 (en) * | 1991-07-12 | 1993-01-21 | Gist-Brocades N.V. | Process for the purification of serum albumin |
US5728553A (en) * | 1992-09-23 | 1998-03-17 | Delta Biotechnology Limited | High purity albumin and method of producing |
JP3702474B2 (ja) * | 1994-06-01 | 2005-10-05 | 三菱ウェルファーマ株式会社 | 血清アルブミン製剤の製造方法 |
JP3840674B2 (ja) * | 1994-08-31 | 2006-11-01 | 三菱ウェルファーマ株式会社 | 遺伝子操作に由来するヒト血清アルブミンの精製方法 |
CN1296951A (zh) * | 1999-11-22 | 2001-05-30 | 上海中路生物工程有限公司 | 白蛋白和抗体的亲和生产工艺 |
US7323553B2 (en) * | 2002-04-26 | 2008-01-29 | Genentech, Inc. | Non-affinity purification of proteins |
US20060234907A1 (en) * | 2004-02-13 | 2006-10-19 | Werner Gehringer | Albumin solution and process for the production thereof |
EP1765866B1 (en) * | 2004-06-07 | 2014-01-08 | Therapure Biopharma Inc. | Isolation of plasma or serum proteins |
-
2013
- 2013-03-14 US US13/826,500 patent/US20140031527A1/en not_active Abandoned
- 2013-04-11 AU AU2013203968A patent/AU2013203968B2/en active Active
- 2013-07-26 CN CN201380039793.1A patent/CN104507954B/zh active Active
- 2013-07-26 BR BR112015001383A patent/BR112015001383A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-07-26 SG SG11201408817SA patent/SG11201408817SA/en unknown
- 2013-07-26 KR KR20157005077A patent/KR20150033739A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-07-26 EP EP13823892.8A patent/EP2877484B1/en active Active
- 2013-07-26 RU RU2015106691A patent/RU2015106691A/ru not_active Application Discontinuation
- 2013-07-26 JP JP2015523347A patent/JP6309005B2/ja active Active
- 2013-07-26 ES ES13823892.8T patent/ES2655205T3/es active Active
- 2013-07-26 WO PCT/AU2013/000836 patent/WO2014015388A1/en active Application Filing
- 2013-07-26 CA CA2880234A patent/CA2880234A1/en not_active Abandoned
- 2013-07-26 MY MYPI2014003635A patent/MY166857A/en unknown
-
2015
- 2015-11-13 HK HK15111245.3A patent/HK1210480A1/xx unknown
-
2019
- 2019-10-03 US US16/592,732 patent/US20200239546A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-10-13 US US18/046,371 patent/US20230159621A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SG11201408817SA (en) | 2015-02-27 |
US20200239546A1 (en) | 2020-07-30 |
ES2655205T3 (es) | 2018-02-19 |
KR20150033739A (ko) | 2015-04-01 |
AU2013203968A1 (en) | 2014-02-06 |
AU2013203968B2 (en) | 2016-02-04 |
US20140031527A1 (en) | 2014-01-30 |
BR112015001383A2 (pt) | 2017-07-04 |
RU2015106691A (ru) | 2016-09-20 |
JP2015524416A (ja) | 2015-08-24 |
CA2880234A1 (en) | 2014-01-30 |
CN104507954B (zh) | 2017-09-08 |
US20230159621A1 (en) | 2023-05-25 |
EP2877484A1 (en) | 2015-06-03 |
EP2877484B1 (en) | 2017-10-11 |
HK1210480A1 (en) | 2016-04-22 |
MY166857A (en) | 2018-07-24 |
WO2014015388A1 (en) | 2014-01-30 |
CN104507954A (zh) | 2015-04-08 |
EP2877484A4 (en) | 2016-04-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20230159621A1 (en) | Method for polishing albumin | |
JP4776615B2 (ja) | 抗体精製 | |
Maria et al. | Purification process of recombinant monoclonal antibodies with mixed mode chromatography | |
US20110237781A1 (en) | Method of preparing alpha-1 proteinase inhibitor | |
Tugcu et al. | Maximizing productivity of chromatography steps for purification of monoclonal antibodies | |
NZ281480A (en) | Monomeric igg antibody purification | |
JP2011523408A (ja) | 抗体精製方法 | |
US20110166332A1 (en) | Enhanced antibody aggregate removal with capto adhere in the presence of protein-excluded zwitterions | |
WO2015070069A1 (en) | Isolation and purification of dvd-igs | |
Fan et al. | Directing membrane chromatography to manufacture α1-antitrypsin from human plasma fraction IV | |
WO2023031965A1 (en) | Method to obtain a purified antibody composition | |
AU2012269240B2 (en) | Single unit chromatography antibody purification | |
US20090264630A1 (en) | Method of separating monomeric protein(s) | |
McCann et al. | Use of mep HyperCel for polishing of human serum albumin | |
EP4006047A1 (en) | Method for purifying antibody using adsorbent | |
JP2023549938A (ja) | タンパク質を精製するための緩衝液と方法 | |
Gagnon et al. | Recent advances in the purification of IgM monoclonal antibodies | |
WO2023007516A1 (en) | Method to control high molecular weight aggregates in an antibody composition | |
WO2021176311A1 (en) | An improved purification process for ranibizumab |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160519 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170228 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170524 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20170919 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180115 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20180122 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180306 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180313 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6309005 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |