JP6251257B2

JP6251257B2 - Ｂａｃｅ１阻害薬としてのジフルオロ−ヘキサヒドロ−シクロペンタオキサジニル類及びジフルオロ−ヘキサヒドロ−ベンゾオキサジニル類

Info

Publication number: JP6251257B2
Application number: JP2015519008A
Authority: JP
Inventors: ヒルペルト，ハンス
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2012-06-26
Filing date: 2013-06-24
Publication date: 2017-12-20
Anticipated expiration: 2033-06-24
Also published as: EP2864324A1; CR20140528A; PE20142450A1; MX2014014937A; MA37763A1; BR112014029742A2; EA025273B1; PH12014502623B1; EA201590066A1; CN104470915B; AU2013283524B2; CO7151509A2; CN104470915A; MA37763B1; AU2013283524A1; IL236138A; US9181232B2; JP2015521640A; IL236138A0; WO2014001228A1

Description

背景技術
アルツハイマー病（ＡＤ）は、中枢神経系の神経変性疾患であり、そして、高齢者人口における進行性認知症の主な原因である。その臨床症状は、記憶、認識、時間及び場所の見当識、判断力ならびに論理的思考の機能障害であるが、また重度の情緒障害でもある。現在のところ、この疾患又はその進行を防ぐか、あるいは、その臨床症状を安定に回復させることができる処置法は存在しない。ＡＤは、高い平均余命を持つ全ての社会において主要な健康問題になっており、またその医療制度にとって重大な経済的負担にもなっている。

ＡＤは、中枢神経系（ＣＮＳ）における２つの主要な病理である、アミロイド斑及び神経原線維変化の発生を特徴とする（Hardy et al.¹, Selkoe²）。両方の病理はまた、ダウン症候群（２１トリソミー）の患者においても共通に観察されるが、これらの患者も若年期にＡＤ様症状を呈する。神経原線維変化は、微小管結合タンパク質タウ（ＭＡＰＴ）の細胞内凝集体である。アミロイド斑は、細胞外空間に存在し、その主成分は、Ａβ−ペプチドである。後者は、β−アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）から一連のタンパク分解切断工程により誘導される、タンパク分解断片の一群である。ＡＰＰの幾つかの型が同定されており、その中で最も豊富なものは、６９５、７５１及び７７０アミノ酸長のタンパク質である。これらは全て、単一遺伝子からディファレンシャルスプライシングにより生じる。Ａβ−ペプチドは、ＡＰＰの同じドメインに由来するが、そのＮ−及びＣ−末端が異なり、その主要な種は４０及び４２アミノ酸長のものである。凝集Ａβ−ペプチドがＡＤの病理発生における必須の分子であることを強く示唆する幾つかの証拠が存在する：１）Ａβ−ペプチドから形成されたアミロイド斑は、ＡＤ病理の不変部分である；２）Ａβ−ペプチドは、ニューロンに対して毒性がある；３）家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）において、疾患遺伝子のＡＰＰ、ＰＳＮ１、ＰＳＮ２における突然変異は、Ａβ−ペプチドのレベルの上昇及び早期の脳アミロイドーシスをもたらす；４）このようなＦＡＤ遺伝子を発現するトランスジェニックマウスは、ヒトの疾患と多くの類似点を持つ病態を呈する。Ａβ−ペプチドは、β−及びγ−セクレターゼと呼ばれる２種のタンパク分解酵素の連続作用によりＡＰＰから産生される。β−セクレターゼは、最初にＡＰＰの細胞外ドメインにおいて、膜貫通ドメイン（ＴＭ）の外側約２８アミノ酸を切断することによって、ＴＭ−及び細胞質ドメインを含有するＡＰＰのＣ−末端断片（ＣＴＦβ）が産生する。ＣＴＦβは、γ−セクレターゼの基質であって、これが、ＴＭ内の幾つかの隣接位置で切断することにより、Ａβペプチド及び細胞質断片が産生する。γ−セクレターゼは、少なくとも４種の異なるタンパク質の複合体であり、その触媒サブユニットは、プレセニリンタンパク質（ＰＳＥＮ１、ＰＳＥＮ２）の可能性が高い。β−セクレターゼ（ＢＡＣＥ１、Ａｓｐ２；ＢＡＣＥは、β−部位ＡＰＰ切断酵素を表す）は、膜貫通ドメインにより膜中に固定されているアスパルチルプロテアーゼである（Vassar et al.³）。これは、人体の多くの組織において発現するが、そのレベルは、ＣＮＳにおいて特に高い。マウスにおけるＢＡＣＥ１遺伝子の遺伝子除去によって、その活性はＡβ−ペプチドの生成をもたらすＡＰＰのプロセシングにとって不可欠であり、ＢＡＣＥ１の非存在下ではＡβ−ペプチドが産生されないことが明確に示された（Luo et al.⁴, Roberds et al.⁵）。ヒトＡＰＰ遺伝子を発現するように遺伝子操作されており、かつ老化過程で広範なアミロイド斑及びアルツハイマー病様病態を呈するマウスは、ＢＡＣＥ１対立遺伝子の１つの遺伝子除去によりβ−セクレターゼ活性が減少すると、そういった病態を呈することがない（McConlogue et al.⁶）。よって、ＢＡＣＥ１活性の阻害薬は、アルツハイマー病（ＡＤ）における治療的介入のために有用な物質となりうることが推測される。国際公開公報第2011071135号⁷は、ＢＡＣＥ１阻害薬として適切なオキサジン誘導体を開示している。

更に、神経組織（例えば、脳）内、同組織上又は同組織周囲のβ−アミロイドペプチドの形成、又は形成及び沈着は、本化合物により阻害される（すなわち、ＡＰＰ又はＡＰＰ断片からのＡβ産生の阻害）。

本発明の目的は、式Ｉの新規化合物、これらの製造法、本発明の化合物に基づく医薬及びこれらの生産、更にはアルツハイマー病のような病気の制御又は予防における式Ｉの化合物の使用である。式Ｉの新規化合物は、低いＥＲ値等の改善された薬理学的特性を有する。

本発明は、ＢＡＣＥ１阻害特性を有するジフルオロ−シクロペンタオキサジニル類及びジフルオロベンゾオキサジニル類である式Ｉの新規化合物、これらの製造法、これらを含有する医薬組成物及び治療活性物質としてのこれらの使用を提供する。

発明の分野
本発明は、式Ｉ：

［式中、置換基及び変数は、以下及び特許請求の範囲に記載されるとおりである］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩を提供する。

本化合物は、Ａｓｐ２（β−セクレターゼ、ＢＡＣＥ１又はメマプシン−２）阻害活性を有しており、そのため、β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置において使用することができる。

発明の詳細な説明
本発明の目的は、式Ｉの化合物及びこの薬学的に許容しうる塩、上記化合物の調製法、これらを含有する医薬及びこれらの製造法、更にはＢＡＣＥ１活性の阻害に関連する疾患及び障害（アルツハイマー病等）の治療的及び／又は予防的処置における上記化合物の使用である。更には、神経組織（例えば、脳）内、同組織上又は同組織周囲のβ−アミロイド斑の形成、又は形成及び沈着は、本化合物により、ＡＰＰ又はＡＰＰ断片からのＡβ産生を阻害することによって阻害される。

本説明に使用される一般用語の以下の定義は、問題の用語が単独で出現するか他の基との組合せで出現するかに関わらず適用される。

用語「Ｃ_１−６−アルキル」は、単独で又は他の基との組合せで、直鎖であっても、分岐（単一分岐又は多分岐）していてもよい炭化水素ラジカル（ここで、アルキル基は、一般に、１〜６個の炭素原子を含有する）、例えば、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル、イソプロピル（ｉ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル（イソブチル）、２−ブチル（sec−ブチル）、ｔ−ブチル（tert−ブチル）、イソペンチル、２−エチル−プロピル、１，２−ジメチル−プロピル等を表す。特定の「Ｃ_１−６−アルキル」は、１〜５個の炭素原子を有する基である。具体的な基は、メチル、エチル及びｔ−ブチルである。最も具体的な基は、メチルである。

用語「シアノ−Ｃ_１−６−アルキル」は、単独で又は他の基との組合せで、１つ又は複数のシアノ、特定には１〜５個のシアノ、より特定には１個のシアノによって置換されている本明細書に定義されるＣ_１−６−アルキルを指す。例は、シアノ−メチル等である。

用語「ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル」は、単独で又は他の基との組合せで、１つ又は複数のハロゲン、特定には１〜５個のハロゲン、より特定には１〜３個のハロゲン、最も特定には１個のハロゲン又は３個のハロゲンによって置換されている本明細書に定義されるＣ_１−６−アルキルを指す。特定のハロゲンは、フルオロである。例は、ジフルオロメチル、クロロメチル、フルオロメチル等である。具体的な基は、−ＣＨ_２Ｆである。

用語「Ｃ_１−６−アルコキシ−Ｃ_１−６−アルキル」は、単独で又は他の基との組合せで、１つ又は複数の本明細書に定義されるＣ_１−６−アルコキシによって置換されているＣ_１−６−アルキルを指す。例は、ＭｅＯ−Ｍｅ、１ＭｅＯ−Ｅｔ、２ＭｅＯ−Ｅｔ、１ＭｅＯ−２ＥｔＯ−プロピル等である。

用語「シアノ」は、単独で又は他の基との組合せで、Ｎ≡Ｃ−（ＮＣ−）を指す。

用語「ハロゲン」は、単独で又は他の基との組合せで、クロロ（Ｃｌ）、ヨード（Ｉ）、フルオロ（Ｆ）及びブロモ（Ｂｒ）を示す。特定の「ハロゲン」は、Ｃｌ及びＦである。

用語「アリール」は、単独で又は他の基との組合せで、６〜１４個、特定には６〜１０個の炭素原子を含有し、かつ少なくとも１個の芳香環又は複数の縮合環（その中で、少なくとも１個の環は、芳香族である）を有する、芳香族炭素環基を指す。「アリール」の例としては、ベンジル、ビフェニル、インダニル、ナフチル、フェニル（Ｐｈ）等が挙げられる。特定の「アリール」基は、フェニルである。

用語「ヘテロアリール」は、単独で又は他の基との組合せで、６〜１４個、特定には６〜１０個の環原子を含有し、かつＮ、Ｏ及びＳ、特定にはＮ及びＯから個々に選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含有する、単一の４〜８員環又は複数の縮合環を有する芳香族炭素環基（その基において、少なくとも１個の複素環は、芳香族である）を指す。特定のヘテロアリール基は、単一の５員環又は単一の６員環を有する。「ヘテロアリール」の例としては、ベンゾフリル、ベンゾイミダゾリル、１Ｈ−ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアジニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾトリアゾリル、フリル、イミダゾリル、インダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、インドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル（ピラジル）、１Ｈ−ピラゾリル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−［１］ピリンジニル等が挙げられる。特定の「ヘテロアリール」基は、ピリジニル、ピラジニル及びチオフェニルである。具体的な基は、ピリジン−２−イル、ピラジン−２−イル及びチオフェン−２−イルである。

用語「Ｃ_１−６−アルコキシ」は、単独で又は他の基との組合せで、直鎖であっても、分岐（単一分岐又は多分岐）していてもよい−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキルラジカル（ここで、アルキル基は、一般に、１〜６個の炭素原子を含む）、例えば、メトキシ（ＯＭｅ、ＭｅＯ）、エトキシ（ＯＥｔ）、プロポキシ、イソプロポキシ（ｉ−プロポキシ）、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ（イソ−ブトキシ）、２−ブトキシ（sec−ブトキシ）、ｔ−ブトキシ（tert−ブトキシ）、イソペンチルオキシ（ｉ−ペンチルオキシ）等を表す。特定の「Ｃ_１−６−アルコキシ」基は、１〜４個の炭素原子を有する。具体的な基は、メトキシ及びエトキシである。

用語「ハロゲン−Ｃ_１−６−アルコキシ」は、単独で又は他の基との組合せで、１つ又は複数のハロゲン、特定にはフルオロによって置換されている本明細書に定義されるＣ_１−６−アルコキシを指す。特定の「ハロゲン−Ｃ_１−６−アルコキシ」基は、フルオロ−Ｃ_１−６−アルコキシである。

用語「Ｃ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシ」は、単独で又は他の基との組合せで、１つ又は複数の本明細書に定義されるＣ_２−６−アルキニルによって置換されている本明細書に定義されるＣ_１−６−アルコキシを指す。特定の「Ｃ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシ」基は、５−ブタ−２−イニルオキシである。

用語「Ｃ_２−６−アルキニル」は、単独で又は他の基との組合せで、１、２又は３個の三重結合を含む、２〜６個の炭素原子、特定には２〜４個の炭素原子の一価の直鎖又は分岐鎖飽和炭化水素基を示す。「Ｃ_２−６−アルキニル」の例としては、エチニル及びプロピニルが挙げられる。

用語「薬学的に許容しうる塩」は、ヒト及び動物の組織との接触での使用に適する塩を指す。無機及び有機酸との適切な塩の例は、特に限定されないが、酢酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、塩酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタン−スルホン酸、硝酸、リン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、コハク酸、硫酸（sulfuric acid）、硫酸（sulphuric acid）、酒石酸、トリフルオロ酢酸等である。特定の酸は、ギ酸、トリフルオロ酢酸及び塩酸である。

用語「薬学的に許容しうる担体」及び「薬学的に許容しうる助剤」は、製剤の他の成分と併用できる、希釈剤又は賦形剤のような担体及び助剤を指す。

用語「医薬組成物」は、所定の量又は割合の特定の成分を含む製品、更には直接又は間接的に特定量で特定の成分を混合することに由来する任意の製品を包含する。特定には、これは、１つ又は複数の活性成分、及び不活性成分を含むオプションの担体を含む製品、更には直接もしくは間接的に、任意の２つ以上の成分の混合、錯体形成もしくは凝集に由来するか、あるいは、１つ又は複数の成分の解離に由来するか、あるいは、１つ又は複数の成分の他のタイプの反応もしくは相互作用に由来する任意の製品を包含する。

用語「阻害薬」は、特定のリガンドの特定の受容体への結合と競合、結合を減少又は妨害するか、あるいは、特定のタンパク質の機能の阻害を減少又は妨害する化合物を示す。

用語「半最大阻害濃度」（ＩＣ_５０）は、インビトロで生物学的プロセスの５０％阻害を得るために必要な特定の化合物の濃度を示す。ＩＣ_５０値は、ｐＩＣ_５０値（−ｌｏｇＩＣ_５０）に対数変換することができ、より高い値は、指数関数的により大きい効力を指す。ＩＣ_５０値は絶対値ではないが、実験条件、例えば、用いられる濃度に依存する。ＩＣ_５０値は、Cheng-Prusoff式を使用して、絶対阻害定数（Ｋｉ）に変換することができる⁸。用語「阻害定数」（Ｋｉ）は、ある受容体に対する特定の阻害薬の絶対結合親和性を示す。これは、競合結合アッセイを使用して測定され、競合リガンド（例えば、放射性リガンド）が存在しない場合に、特定の阻害薬が受容体の５０％を占める濃度に等しい。Ｋｉ値は、ｐＫｉ値（−ｌｏｇＫｉ）に対数変換することができ、より高い値は、指数関数的により大きい効力を指す。

「治療有効量」は、疾患状態を処置するために被験体に投与される場合、疾患状態についてそのような処置を行うために十分な、化合物の量を意味する。「治療有効量」は、化合物、処置されている疾患状態、処置される疾患の重篤度、被検体の年齢及び相対的な健康状態、投与の経路及び形態、診察にあたる医師又は獣医の判断、ならびに他の要因に応じて変化する。

用語「本明細書に定義される」及び「本明細書に記載される」は、変数について言及するとき、その変数の広い定義、ならびに存在するならば、特定の定義、より特定の定義及び最も特定の定義がその言及によって包含される。

用語「処理する」、「接触させる」及び「反応させる」は、化学反応について言及するとき、２つ以上の試薬を、適切な条件下で加えるか又は混合して、表示及び／又は目的生成物を製造することを意味する。表示及び／又は目的生成物を製造する反応が、最初に加えられた２つの試薬を組み合わせた直接の結果である必要はないこと、すなわち混合物中に製造された１つ又は複数の中間体が存在してよく、最終的にそれが表示及び／又は目的生成物の形成につながることを理解すべきである。

血液脳関門は、脳内に治療物質が侵入するのを妨害する。Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）は、腸、脳及び腎臓を含む多くの組織における流出輸送体である。Ｐ−糖タンパク質は、治療物質を細胞外に能動輸送することができるので、それは、特定の治療物質の脳内への透過に関与していると考えられている。流出比（ＥＲ）は、Ｐ−ｇｐの阻害度に使用することができる高感度パラメーターである。

用語「芳香族」は、文献、特に、ＩＵＰＡＣに定義されるような芳香族性の従来の概念を示す⁹。

用語「薬学的に許容しうる賦形剤」は、医薬品の製剤化において使用される、治療活性を有さずかつ無毒の任意の成分、例えば、崩壊剤、結合剤、増量剤、溶剤、緩衝剤、等張化剤、安定剤、抗酸化剤、界面活性剤又は潤滑剤を示す。

化学構造内にキラル炭素が存在する場合は、そのキラル炭素を有する全ての立体異性体がその構造に包含されることを意図する。

本発明はまた、医薬組成物、使用方法及び上記化合物の調製方法を提供する。

全ての別々の実施態様は組合せることができる。

本発明の１つの実施態様は、式Ｉ：

［式中、
Ｒ^１は、
ｉ）アリール、
ｉｉ）シアノ、シアノ−Ｃ_１−６−アルキル、ハロゲン、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_１−６−アルコキシ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_２−６−アルキニル及びＣ_１−６−アルキルから個々に選択される１〜４個の置換基によって置換されているアリール、
ｉｉｉ）ヘテロアリール、及び
ｉｖ）シアノ、シアノ−Ｃ_１−６−アルキル、ハロゲン、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_１−６−アルコキシ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_２−６−アルキニル及びＣ_１−６−アルキルから個々に選択される１〜４個の置換基によって置換されているヘテロアリール
からなる群より選択され；
Ｒ^２は、
ｉ）水素、
ｉｉ）Ｃ_１−６−アルキル、及び
ｉｉｉ）ハロゲン
からなる群より選択され；
Ｒ^３は、
ｉ）Ｃ_１−６−アルキル、及び
ｉｉ）ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル
からなる群より選択され；
Ｒ^４は、
ｉ）水素、及び
ｉｉ）Ｃ_１−６−アルキル
からなる群より選択され；そして
Ｒ^５は、
ｉ）水素、及び
ｉｉ）Ｃ_１−６−アルキル
からなる群より選択され；
ｎは、１又は２である］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩である。

本発明の１つのある実施態様は、式Ｉａ：

［式中、ｎ及びＲ^１は、本明細書に記載されるとおりである］
で表される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、シアノ、ハロゲン、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル及びＣ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているヘテロアリールである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、
ｉ）シアノ及びハロゲンから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているピリジニル、
ｉｉ）シアノ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル及びＣ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているピラジニル、及び
ｉｉｉ）１〜２個のハロゲンによって置換されているチオフェニル
から選択される、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、シアノ及びハロゲンから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているピリジニルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、シアノ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル及びＣ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているピラジニルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、１〜２個のハロゲンによって置換されているチオフェニルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−イル、５−シアノ−ピリジン−２−イル、５−クロロ−ピリジン−２−イル、５−フルオロメチル−ピラジン−２−イル、５−シアノ−ピラジン−２−イル、５−クロロ−ピリジン−２−イル、５−シアノ−ピリジン−２−イル、５−クロロ−チオフェン−２−イル又は５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−シアノ−ピリジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−クロロ−ピリジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−フルオロメチル−ピラジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−シアノ−ピラジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−クロロ−チオフェン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^１が、５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−イルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^２が、ハロゲンである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^２が、Ｆである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^３が、Ｃ_１−６−アルキルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^３が、メチルである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^４が、水素である、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、Ｒ^５が、水素である、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、ｎが、１である、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、ｎが、２である、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、以下：
５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−フルオロメチル−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−シアノ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル−アミド、
５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−クロロ−チオフェン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、及び
５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
からなる群より選択される、本明細書に記載される式Ｉの化合物又はその薬学的に許容しうる塩を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−フルオロメチル−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−シアノ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−クロロ−チオフェン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドである、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、本明細書に記載される式Ｉの化合物を合成するプロセスであって、式Ｉ’の化合物と式ＸＩＶの化合物：

［式中、ｎ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５は、本明細書に記載されるとおりである］
を反応させることを含むプロセスを提供する。

本発明の１つのある実施態様は、上記に定義されるプロセスによって調製される、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、治療活性物質として使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、ＢＡＣＥ１活性の阻害薬として使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための治療活性物質として使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための治療活性物質として使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、本明細書に記載される式Ｉの化合物と薬学的に許容しうる担体及び／又は薬学的に許容しうる助剤を含む医薬組成物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、ＢＡＣＥ１活性の阻害において使用するための医薬の製造のための、本明細書に記載される式Ｉの化合物の使用を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための医薬の製造のための、本明細書に記載される式Ｉの化合物の使用を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための医薬の製造のための、本明細書に記載される式Ｉの化合物の使用を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、ＢＡＣＥ１活性の阻害において使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置において使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、アルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置において使用するための、本明細書に記載される式Ｉの化合物を提供する。

本発明の１つのある実施態様は、ＢＡＣＥ１活性の阻害において使用するための、特にβ−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、すなわちアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための方法であって、ヒト又は動物に、本明細書に記載される式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。

更に、本発明は、全ての光学異性体、すなわち、ジアステレオ異性体、ジアステレオマー混合物、ラセミ混合物、全てのこれらの対応するエナンチオマー及び／又は互変異性体、更にはこれらの溶媒和物を包含する。

当業者であれば、式Ｉの化合物が、互変異性体形態、例えば、下記の互変異性体形態：

で存在することができることを理解されよう。

全ての互変異性体形態が本発明に包含される。

式Ｉの化合物は、１つ又は複数の不斉中心を含有してもよく、よってラセミ体、ラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物及び個々のジアステレオマーとして存在することができる。分子上の種々の置換基の性質に応じて、更なる不斉中心が存在してもよい。このような各不斉中心により、独立に２個の光学異性体が生じ、そして、可能な光学異性体及びジアステレオマーの全ては、混合物として及び純粋又は部分精製化合物として本発明に包含されることを意図する。本発明は、これらの化合物のこのような全ての異性体形態を包含することを意図する。これらのジアステレオマーの独立した合成法及びそれらのクロマトグラフィー分離法は、本明細書に開示される方法論の適切な変法により、当該分野において既知のとおり達成することができる。これらの絶対立体化学は、必要ならば、既知の絶対立体配置の不斉中心を含有する試薬で誘導体化された、結晶性生成物又は結晶性中間体のＸ線結晶学により決定することができる。必要に応じて、本化合物のラセミ混合物は、個々のエナンチオマーが単離されるように分離してもよい。分離は、化合物のラセミ混合物をエナンチオマーとして純粋な化合物にカップリングさせてジアステレオマー混合物を生成させ、続いて、個々のジアステレオマーを分別結晶法又はクロマトグラフィーのような標準法により分離するというような、当該分野で周知の方法により実施することができる。式Ｉの化合物の異性体のある例は、式Ｉｂの化合物又は式Ｉｃの化合物：

（式中、残基は、いずれかの実施態様に記載される意味を有する）、特定には、式Ｉｃの化合物である。

光学的に純粋なエナンチオマーが提供される実施態様において、光学的に純粋なエナンチオマーとは、この化合物が、＞９０重量％の目的異性体、特定には、＞９５重量％の目的異性体、又はより特定には、＞９９重量％の目的異性体を含有することを意味する（前記重量パーセントは、この化合物の異性体の総重量に基づく）。キラルとして純粋な化合物又はキラル濃縮化合物は、キラル選択的合成法によって、又はエナンチオマーの分離によって調製することができる。エナンチオマーの分離は、最終生成物について、あるいは、適切な中間体について実施することができる。

式Ｉの化合物は、以下のスキームにより調製することができる。出発物質は、市販されているか、又は既知の方法により調製することができる。特に断りない限り、前に定義された任意の残基及び変数は、前に定義された意味を持ち続ける。

一般式ＩＶの化合物は、式ＩＩのニトロ化合物と一般式ＩＩＩのα，β−不飽和ケトンを、例えば、イソシアネート、特定にはフェニルイソシアネート等の活性化剤、及び触媒量の塩基、特定にはアルキルアミン、より特定にはトリエチルアミンの存在下、ベンゼンもしくはトルエン、特定にはベンゼン、又はアルキルエーテル、特定にはジエチルエーテル等の溶媒中で反応させることによって調製され、一般式ＩＶのジヒドロイソオキサゾールを与える。

一般式ＶＩのジフルオロ−ジヒドロイソオキサゾールを与える一般式ＩＶのジヒドロイソオキサゾールのフッ素化は、フッ素化剤、特定には三フッ化モルホリノ硫黄（Ｖ）の存在下、不活性溶媒、特定にはジクロロメタン中で実施される。

一般式ＶＩＩＩのイソオキサゾリジンは、ハロゲン化アリール、特定には臭化アリール、例えば、臭化アリールＶＩＩと、アルキルリチウム試薬、特定にはｎ−ブチルリチウムを反応させて、アリールリチウム種を得て、これを、ルイス酸、特定には三フッ化ホウ素エーテラートの存在下、エーテル、特定にはテトラヒドロフランとトルエンからなる溶媒混合物中、−１００℃〜−２０℃、特定には−７８℃で、一般式ＶＩのジヒドロイソオキサゾールと反応させることによって調製することができる。

一般式ＩＸａ及びＩＸｂのキラルなイソオキサゾリジンを与える一般式ＶＩＩＩのラセミ体のイソオキサゾリジンの分割は、溶離剤としてｎ−ヘプタンとエタノールの混合物を使用して、例えば、Chiralpak ADカラムのようなキラル相での高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって達成することができる。

一般式Ｘのアミノアルコールへの一般式ＩＸのキラルなイソオキサゾリジンの水素化分解は、アルコール、特定にはエタノール等のプロトン性溶媒中、触媒としてパラジウム、特定にはパラジウム炭素、及び水素源、例えば、ギ酸の塩、特定にはギ酸アンモニウムを使用する転移水素化分解によって最もよく達成することができる。

一般式ＸＩのオキサジンは、一般式Ｘのアミノアルコールとシアン化臭素を、アルコール、特定にはエタノール等の溶媒中、高温で反応させることによって調製することができる。あるいは、この反応は、例えば、アセトニトリル等の溶媒の存在下で、シアン化臭素及び酢酸ナトリウム等の緩衝液を使用し、続いて、エーテル、特定には、１，４−ジオキサン等の溶媒中、鉱酸、特に、塩酸の存在下で中間体を環化する２連続工程で実施することができる。

一般式ＸＩＩのニトロ−オキサジンを与える一般式ＸＩのオキサジンのニトロ化は、溶媒を使用することなく、原液の硫酸及び発煙硝酸を用いる標準的な手順に従う。

一般式ＸＩＩの中間体中のニトロ基の還元は、アルコール、特定にはエタノール又はメタノール等のプロトン性溶媒中、パラジウム炭素等の触媒を使用する水素化によって達成することができ、一般式ＸＩＩＩのアニリンが生成する。

一般式Ｉａ’のアミドを与える一般式ＸＩＩＩのアニリンと一般式ＸＩＶのカルボン酸の選択的アミドカップリングは、アルコール、特定にはメタノール等の溶媒中、４−（４，６−ジメトキシ［１．３．５］トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（ＤＭＴＭＭ）水和物を用いて実施することができる。

酸との対応する薬学的に許容しうる塩は、当業者に既知の標準法によって、例えば、式Ｉの化合物を、例えば、ジオキサン又はＴＨＦ等の適切な溶媒に溶解して、そして、適量の対応する酸を加えることによって得ることができる。この生成物は、通常、濾過によって、又はクロマトグラフィーによって単離することができる。塩基との薬学的に許容しうる塩への式Ｉの化合物の変換は、そのような化合物をそのような塩基で処理することによって行うことができる。このような塩を形成するための１つの可能な方法は、例えば、１／ｎ当量の塩基性塩［例えば、Ｍ（ＯＨ）ｎ（ここで、Ｍ＝金属又はアンモニウムカチオン、ｎ＝水酸化物アニオンの数）等］を適切な溶媒（例えば、エタノール、エタノール−水混合物、テトラヒドロフラン−水混合物）中の化合物の溶液へ添加して、そして、蒸発又は凍結乾燥により溶媒を除去するものである。

その調製法が実施例に記載されていない場合、式Ｉの化合物及び全ての中間体生成物は、類似法によって、又は本明細書に説明される方法によって調製することができる。出発物質は、市販されているか、当該分野において既知であるか、又は当該分野において既知の方法により、もしくはそれと同様に調製することができる。

当然のことながら、本発明における一般式Ｉの化合物は、官能基で誘導体化して、インビボで親化合物に変換して戻ることができる誘導体を提供することができる。

薬理試験
式Ｉの化合物及びその薬学的に許容しうる塩は、有用な薬理学的特性を持つ。本発明の化合物は、ＢＡＣＥ１活性の阻害に関連することが見い出された。本化合物を本明細書に後述の試験法によって調べた。

細胞Ａβ−低下アッセイ：
ヒトＡＰＰｗｔ遺伝子（ＡＰＰ６９５）のｃＤＮＡを発現するベクターで安定にトランスフェクトしたヒトＨＥＫ２９３細胞を使用して、細胞アッセイにおける化合物の効力を評価した。細胞は、９６ウェルマイクロタイタープレート中、細胞培養培地（Iscove、＋１０％（v/v）ウシ胎仔血清、グルタミン、ペニシリン／ストレプトマイシン）に播種して約８０％コンフルエンスにし、そして、化合物を、８％ＤＭＳＯを含有するＦＣＳを含まない１／１０容量の培地中に１０×濃度で加えた（ＤＭＳＯの最終濃度は、０．８％ v/vに保持した）。加湿インキュベーター中３７℃及び５％ＣＯ_２で１８〜２０時間インキュベーション後、Ａβ４０濃度の測定のために培養上清を回収した。９６ウェルＥＬＩＳＡプレート（例えば、Nunc MaxiSorb）を、Ａβ４０のＣ−末端を特異的に認識するモノクローナル抗体でコーティングした¹⁰。例えば、１％ＢＳＡによる非特異結合部位のブロッキング及び洗浄後、培養上清を適切に希釈して、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合Ａβ検出抗体（例えば、抗体４Ｇ８、Senetek, Maryland Heights, MO）と一緒に加え、５〜７時間インキュベートした。続いて、マイクロタイタープレートのウェルを、０．０５％トゥイーン２０を含有するトリス緩衝食塩水で充分に洗浄して、アッセイは、クエン酸緩衝液中のテトラメチルベンジジン／Ｈ_２Ｏ_２により発色させた。１容量の１ＮＨ_２ＳＯ_４により反応を停止後、反応液をＥＬＩＳＡリーダー中にて４５０nmの波長で測定した。培養上清中のＡβの濃度は、既知量の純粋なＡβペプチドで得られた標準曲線から算出した。

Ｐ−ｇｐ（Ｐ−糖タンパク質）アッセイ
輸送実験に使用する細胞株
ＬＬＣ−ＰＫ１細胞株（ATCC #CL-101）は、ブタの腎臓上皮細胞株である。ＭＤＲ１（ヒト多剤耐性タンパク質１）をトランスフェクトした細胞株は、Dr. A. Schinkel, The Netherlands Cancer Institute（Amsterdam, The Netherlands）から得た。全ての細胞株を、透過性インサート（９６−インサートプレートMiIllipore、面積０．１１cm²、孔径０．４μm）にて、０．７３×１０^６細胞／mlで培養した。輸送測定は、播種の４日後に実施した。細胞単層の気密度を、細胞外マーカーのルシファーイエロー（１０μM）の透過性によって制御した。２５nm/sを超えるルシファーイエロー透過度を示す実験は排除した。

インビトロ輸送実験
ＬＬＣ−ＰＫ１及びＬ−ＭＤＲ１（ヒトＭＤＲ１を外因的に発現するＬＬＣ−ＰＫ１）細胞を使用する双方向性経細胞輸送
実験は、ＴＥＣＡＮ自動液体ハンドリングシステムで実施した。簡単に述べると、全ての区画から培地を除去し、レシーバー側の培地を培養培地に置き換えた。経細胞輸送測定を、ドナー側に基質と細胞外マーカーのルシファーイエローを一緒に加えることによって開始した。阻害薬を両側に加えた（１μMエラクリダー（elacridar））。輸送実験を基底外側から頂端部方向と頂端部から基底外側方向の両方にて、それぞれ３ウェルで実施した。プレートを、Liconicインキュベーター内にて、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。２時間のインキュベート後にドナー及び反対（アクセプター）側からサンプルを採取した。両区画の基質の濃度をシンチレーション計数（ジゴキシン）又はＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって決定した。細胞外マーカー（ルシファーイエロー）を、スペクトラフルオプラス読取機を使用して４３０／５３５nm（Ｅｘ／Ｅｍ）で定量した。各実験で、３つの異なるインサートをそれぞれの条件で使用し、平均を算出した。

データ解析
ＬＬＣ−ＰＫ１及びＬ−ＭＤＲ１細胞を使用する双方向性経細胞輸送
経細胞輸送について、データの評価に下記の方程式を使用した：

式中、Ｐ_ａｐｐ、Ａ、Ｃ_０及びｄＱ／ｄｔは、それぞれ、見掛けの透過度、フィルターの表面積、初期濃度及び時間周期あたりの輸送量を表す。Ｐ_ａｐｐ値は、単一時点（２時間）を基準にして計算した。

輸送流出比（ＥＲ）は、下記のように計算した：

式中、Ｐ_ａｐｐＢＡは、基底外側から頂端部方向の透過度であり、Ｐ_ａｐｐＡＢは、頂端部から基底外側方向の透過度である。Ｐ_ａｐｐは、細胞外マーカーのルシファーイエローのフラックスに対して補正せず、これを細胞単層の性質を評価するために使用した。

ＣＹＰ阻害アッセイ
シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）２Ｃ９、２Ｄ６及び３Ａ４の阻害は、ヒト肝ミクロソーム及びＣＹＰ選択的基質代謝反応を使用して評価した。（最終）０．２mg/mlのプールされたヒト肝ミクロソーム、５μMの基質（ＣＹＰ２Ｃ９についてジクロフェナク［４’ヒドロキシラーゼ］、ＣＹＰ２Ｄ６についてデキストロメトルファン［Ｏ−デメチラーゼ］又はＣＹＰ３Ａ４についてミダゾラム［１’ヒドロキシラーゼ］）、０．２５μLのＤＭＳＯ含有試験阻害薬及びＮＡＤＰＨ再生系を含有するように、５０μlのインキュベーションを作製した。５０、１６．７、５．６、１．９、０．６及び０．２μMの試験阻害薬濃度を１連で評価した。インキュベーションを事前に１０分間３７℃に温めた後、ＮＡＤＰＨ再生系を加えて開始した。５分（デキストロメトルファンの場合２０分）後、２０ng/ml ４−ＯＨ−ジクロフェナク−１３Ｃ６、２０ng/mlデキストロルファン−Ｄ３及び２０ng/mL １−ＯＨ−ミダゾラム−Ｄ４を含有する５０μlの冷アセトニトリルを加えて、インキュベーションをクエンチした。クエンチしたインキュベートを−２０℃で少なくとも１時間保存した後、遠心（２０，０００×ｇ、２０分間）した。上清を除去し、水で１：１に希釈した後、RapidFireサンプル注入システム及びＡＰＩ４０００質量分析計を使用して分析した。基質、代謝物及び安定な標識代謝物標準のピーク面積をＭＳ／ＭＳを使用して決定した。酵素反応によって生成した代謝物と内部標準のピーク面積比をその後の計算に使用した。（ＤＭＳＯ）対照活性のパーセンテージを各インキュベートについて計算し、ＩＣ_５０値を非線形回帰によって推定した。スルファフェナゾール、キニジン又はケトコナゾールを、各ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｄ６又はＣＹＰ３Ａ４の阻害実験でそれぞれ試験して、アッセイ感度及び再現性を正確にした（ヒトシトクロムＰ４５０活性についての検証済みアッセイ¹¹）。

PatchXpress ｈＥＲＧ阻害アッセイ
自動パッチクランプシステムPatchXpress（登録商標）7000A（Molecular Devices, Sunnyvale, CA）によるｈＥＲＧチャネル阻害を定量する詳細な方法は、Guo等によって記載されている¹²。簡単に述べると、ヒトether-a-go-go-関連遺伝子（ｈＥＲＧ）でトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を、１０％ウシ胎仔血清、２mMグルタミン及び０．２５mg/mlジェネティシンを補填したEx-cell 302培地中で培養し、ＣＯ_２インキュベーター内にて３７℃で維持した。パッチクランプ電気生理のために、外部緩衝液（mM）は、１５０ＮａＣｌ、１０Ｈｅｐｅｓ、４ＫＣｌ、１．２ＣａＣｌ_２、１ＭｇＣｌ_２（ｐＨ７．４、ＨＣｌで調整）を含有し、内部記録溶液（mM）は、１４０ＫＣｌ、６ＥＧＴＡ、５Ｈｅｐｅｓ、ＭｇＣｌ_２、５ＡＴＰ−Ｎａ_２（ｐＨ７．２、ＫＯＨで調整）を含有した。細胞を記録チャンバーにロードし、平坦なガラス電極（Sealchip（商標））を用いてギガオームシールを形成した後、細胞膜を破壊することによって全細胞構成を達成した。次に、膜電位を−８０mVでクランプし、ｈＥＲＧチャネルを０．１Ｈｚで送達される１秒間の脱分極パルスによって活性化して、−４０mVまでの５００ms再分極パルス中でｈＥＲＧ電流を測定した。許容可能なｈＥＲＧ電流記録を得た後、細胞をまずビヒクル対照として０．３％ＤＭＳＯ、続いて、３つの上昇するフルログ間隔濃度の試験物質、最後に１μMのＥ−４０３１（陽性対照として）に曝露させて、ｈＥＲＧ電流を完全に遮断した。各試験物質を、３種以上の細胞で、３０μMまで又はBD Gentest（商標）溶解度スキャナーで決定した溶解限度までの濃度で試験した。各濃度におけるｈＥＲＧ電流の阻害を、ビヒクル対照で記録されたものに対して標準化し、Hill方程式にあてはめて、ＩＣ_２０及び／又はＩＣ_５０を計算した。

カテプシンＤ及びカテプシンＥ蛍光基質動態アッセイ
一般的なアッセイ原理
後述するＭＲ１２１蛍光アッセイは、ＭＲ１２１がトリプトファンと非蛍光性の基底状態複合体を形成することに基づいている。溶液中では、ミリモル濃度のトリプトファンでこの形成が起こる。このメカニズムを使用して、プロテアーゼ用の一般的な生化学的アッセイを設計することができる。基質ペプチドのＮ末端をトリプトファンで、Ｃ末端をフルオロフォアＭＲ１２１で標識する（カテプシンＤの場合、１０アミノ酸ペプチドＷＴＳＶＬＭＡＡＰＣ−ＭＲ１２１を使用し；カテプシンＥの場合、ＭＲ１２１−ＣＫＬＶＦＦＡＥＤＷを使用した）。プロテアーゼ活性が存在しない場合、基質はインタクトなままであり、ＭＲ１２１蛍光は高い局所Ｔｒｐ濃度によって減少する。基質が酵素によって切断されると、ＭＲ１２１蛍光は回復する。

アッセイ手順
蛍光基質カテプシンＤ及びカテプシンＥの動態アッセイを、室温にて、３８４ウェルマイクロタイタープレート（Corningの黒色で透明な平底の非結合表面プレート）中、５１μlの最終容量で実施した。試験化合物をＤＭＳＯで段階希釈し（１５種の濃度、１／３希釈段階）、１μlの希釈化合物を、アッセイ緩衝液（１００mM酢酸ナトリウム、０．０５％ＢＳＡ、ｐＨ５．５；最終濃度：２００nM）で希釈した４０μlのカテプシンＤ（ヒト肝臓由来、Calbiochem）、又はアッセイ緩衝液（１００mM酢酸ナトリウム、０．０５％ＢＳＡ、ｐＨ４．５；最終濃度：０．０１nM）で希釈した４０μlの組み換えヒトカテプシンＥ（R&D Systems）と１０分間混合した。カテプシンＤアッセイ緩衝液（最終濃度：３００nM）で希釈した１０μlのカテプシンＤ基質ＷＴＳＶＬＭＡＡＰＣ−ＭＲ１２１、又はカテプシンＥアッセイ緩衝液（最終濃度：３００nM）で希釈した１０μlのカテプシンＥ基質ＭＲ１２１−ＣＫＬＶＦＦＡＥＤＷを加えた後、プレートを２分間激しく振とうした。プレート中の酵素反応を、vision reader（Perkin Elmer）（励起波長：６３０nm；発光：６９５nm）にて、反応時間中のＭＲ１２１蛍光の増加を検出する動態測定により少なくとも３０分間追跡した。動態の線形範囲における傾きを計算し、試験化合物のＩＣ_５０を、曲線フィッティング用の４パラメーター方程式を使用して決定した。

グルタチオン抱合体の検出
グルタチオン抱合体の検出のアッセイ条件は、C.M.Dieckhaus等¹³によって記載された手順に従う。

結果

医薬組成物
式Ｉの化合物及び薬学的に許容されるうる塩は、治療活性物質として、例えば、医薬製剤の形態で使用することができる。医薬製剤は、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬及び軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤又は懸濁剤の剤形で、経口投与することができる。しかし、投与はまた、例えば坐剤の剤形で直腸内に、又は例えば注射液の剤形で非経口的に行うこともできる。

式Ｉの化合物及びその薬学的に許容されうる塩は、医薬製剤の製造のため、薬学的に不活性な無機又は有機の担体と共に加工することができる。乳糖、トウモロコシデンプン又はそれらの誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩等が、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠及び硬ゼラチンカプセル剤のためのそのような担体として使用することができる。軟ゼラチンカプセル剤に適切な担体は、例えば、植物油、ロウ、脂肪、半固体及び液体ポリオール類等である。しかし、活性物質の性質に応じて、軟ゼラチンカプセル剤の場合は、通常担体を必要としない。液剤及びシロップ剤の製造に適切な担体は、例えば、水、ポリオール類、グリセリン、植物油等である。坐剤に適切な担体は、例えば、天然又は硬化油、ロウ、脂肪、半液体又は液体ポリオール類等である。

さらに、医薬製剤は、薬学的に許容されうる助剤、例えば、保存剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、着香剤、浸透圧を変化させる塩、緩衝剤、マスキング剤又は酸化防止剤を含有することができる。これらはまた、更に他の治療有用物質を含有することができる。

式Ｉの化合物又はその薬学的に許容されうる塩と治療上不活性な担体とを含有する医薬も本発明の目的であり、１つ又は複数の式Ｉの化合物及び／又はその薬学的に許容されうる塩と、所望により、１つ又は複数のその他の治療有用物質とを、１つ又は複数の治療上不活性な担体と共にガレヌス製剤の投与形態にすることを含む、製造方法も、本発明の目的である。

用量は、広い限界内で変化させることができ、当然ながら各特定の症例における個々の要求に適合させる必要がある。経口投与の場合には、成人の用量は、１日に約０．０１mg〜約１０００mgの一般式Ｉの化合物、又は対応する量のその薬学的に許容されうる塩と変化させることができる。１日量を、１回量として又は分割量として投与してよく、加えて、必要性が示される場合、上限を超えることもできる。

下記の実施例は本発明を限定することなく説明するが、単に代表的なものとして役立つ。医薬製剤は、好都合には、式Ｉの化合物を約１〜５００mg、特に１〜１００mg含有する。以下は本発明による組成物の例である：

実施例Ａ
通常の方法で、以下の組成の錠剤を製造する：

製造手順
１．成分１、２、３及び４を混合し、精製水で顆粒化する。
２．顆粒を５０℃で乾燥させる。
３．顆粒を適切な微粉砕装置に通す。
４．成分５を加え、３分間混合し、適切な成形機で圧縮する。

実施例Ｂ−１
以下の組成のカプセル剤を製造する：

製造手順
１．成分１、２及び３を適切なミキサーで３０分間混合する。
２．成分４及び５を加え、３分間混合する。
３．適切なカプセルに充填する。

式Ｉの化合物、乳糖及びトウモロコシデンプンを、最初にミキサーで、次に微粉砕機で混合する。混合物をミキサーに戻し、タルクを加え、十分に混合する。混合物を、機械により適切なカプセル、例えば、硬ゼラチンカプセルに充填する。

実施例Ｂ−２
以下の組成の軟ゼラチンカプセル剤を製造する：

製造手順
式Ｉの化合物を、他の成分の加温溶融物に溶解し、そして、混合物を適切な大きさの軟ゼラチンカプセルに充填する。充填された軟ゼラチンカプセルを、通常の手順に従って処理する。

実施例Ｃ
以下の組成の坐剤を製造する：

製造手順
坐薬用錬剤をガラス又はスチール容器中で溶融し、十分に混合し、そして、４５℃に冷却する。その後、微粉砕した式Ｉの化合物をそれに加え、それが完全に分散するまで撹拌する。混合物を適切な大きさの坐剤成形型に注ぎ、放置して冷却し、次に坐剤を成形型から取り外し、パラフィン紙又は金属箔で個別に包む。

実施例Ｄ
以下の組成の注射液を製造する：

製造手順
式Ｉの化合物を、ポリエチレングリコール４００と注射用水（一部）の混合物に溶解する。酢酸でｐＨを５．０に調整する。水の残量を加えて、容量を１．０mlに調整する。溶液を濾過し、適切な過剰量を使用してバイアルに充填し、滅菌する。

実施例Ｅ
以下の組成のサッシェ剤を製造する：

製造手順
式Ｉの化合物を、乳糖、微晶質セルロース及びナトリウムカルボキシメチルセルロースと混合し、ポリビニルピロリドンの水中混合物で顆粒化する。顆粒をステアリン酸マグネシウム及び香味添加剤と混合し、サッシェに充填する。

実験の部
以下の実施例は、本発明の例示のため提供される。それらは、本発明の範囲を制限するものと見なされるべきではなく、単に本発明の代表的なものとして見なされるべきである。

中間体ジヒドロイソオキサゾールＩＶの合成
中間体ＩＶ−１：ｒａｃ−（３ａＲ，６ａＲ）−３−メチル−３ａ，５，６，６ａ−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール−４−オン

不活性雰囲気下、エーテル（１５ml）中のニトロエタン（４．６６ｇ、４．４４ml、６２．１mmol）の溶液を、室温にて、エーテル（９０ml）中のシクロペンタ−２−エノン（５ｇ、５．１ml、６０．９mmol）の溶液で処理し、続いて、トリエチルアミン（７０．８mg、９７．６μl、７００μmol）を添加し、フェニルイソシアネート（１４．８ｇ、１３．６ml、１２４mmol）を滴下した。明黄色の溶液を週末にかけて２５℃で撹拌した。後処理として、オフホワイトの懸濁液を濾過し、エーテルで３回洗浄した。濾液を蒸発させ、次に、粗生成物をジクロロメタン（１５ml）中でトリチュレートし、固体を濾別し、ジクロロメタンで洗浄した。橙色の濾液を蒸発させた後、粗生成物を、溶離剤としてヘプタンと酢酸エチル＝２：１〜１：２の勾配を使用したシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。ｒａｃ−（３ａＲ，６ａＲ）−３−メチル−３ａ，５，６，６ａ−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール−４−オン（５．９５ｇ、収率７０％）を黄色の液体として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝１３９［Ｍ］^＋。加えて、ｒａｃ−（３ａＲ，６ａＳ）−３−メチル−３ａ，４，５，６ａ−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール−６−オン（０．３７ｇ、収率４．３％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝１３９［Ｍ］^＋。

中間体ＩＶ−２：ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−３−メチル−５，６，７，７ａ−テトラヒドロ−３ａＨ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オン

不活性雰囲気下、エーテル（２０ml）中のニトロエタン（５．３６ｇ、５．１ml、７１．４mmol）の溶液を、室温にて、エーテル（１２０ml）中のシクロヘキサ−２−エノン（６．７３ｇ、６．７８ml、７０mmol）の溶液で処理し、続いて、トリエチルアミン（７０．８mg、９７．６μl、７００μmol）を添加し、フェニルイソシアネート（１７．０ｇ、１５．６ml、１４３mmol）を滴下した（約１分間）。清澄な溶液を２５℃で４８時間撹拌したが、２時間後に固体が沈殿し始めた。後処理として、固体物質を濾過し、エーテルで３回洗浄した。黄色の濾液を蒸発させ、次に、黄色の粗生成物をジクロロメタン（３０ml）中に懸濁し、固体を濾別し、ジクロロメタンで３回洗浄した。濾液を蒸発させた後、粗生成物を、溶離剤としてヘプタンと酢酸エチル＝５：１〜４：１〜１：１の勾配を使用したシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−３−メチル−５，６，７，７ａ−テトラヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４（３ａＨ）−オン（７．２７ｇ、収率６８％）を橙色の液体として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝１５４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。加えて、ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＳ）−３−メチル−３ａ，５，６，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−７−オン（０．５２ｇ、収率４．９％）を明褐色の固体として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝１５４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

一般手順Ｂ：中間体ジヒドロイソオキサゾールＶＩの合成
不活性雰囲気下、ジクロロメタン（１７ml）中の式ＩＶのジヒドロイソオキサゾール（１２．２mmol）の溶液を、０℃にて、三フッ化モルホリノ硫黄Ｖ（２６．９mmol）で滴下処理した。溶液を室温まで放温し、１５時間撹拌した。後処理として、混合物を０℃まで冷却し、温度を２０℃未満に維持しながら飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。３０分間撹拌した後、水層をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。粗生成物を、バルブ・ツー・バルブ（bulb-to-bulb）蒸留及び溶離剤としてヘプタンと酢酸エチルの混合物を使用したシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、純粋なジヒドロイソオキサゾールＶＩを得た。

中間体ＶＩ−１：ｒａｃ−（３ａＲ，６ａＲ）−３−メチル−３ａ，５，６，６ａ−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール−４−オン（中間体ＩＶ−１）から開始して、生成物ｒａｃ−（３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−メチル−４，５，６，６ａ−テトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾールを明黄色の液体として得た（収率７３％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝１６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体ＶＩ−２：ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−３−メチル−５，６，７，７ａ−テトラヒドロ−３ａＨ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オン（中間体ＩＶ−２）から開始して、生成物ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾールを、ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−４−フルオロ−３−メチル−３ａ，６，７，７ａ−テトラヒドロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾールとの１：１混合物として、無色の液体として得て、これをさらに精製することなく工程に加えた。ＭＳ：ｍ／ｚ＝１７６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋及びＭＳ：ｍ／ｚ＝１５６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

一般手順Ｃ：中間体イソオキサゾリジンＶＩＩＩ及びＩＸの合成
不活性雰囲気下、テトラヒドロフラン（１０ml）とトルエン（３０ml）の混合物中の式ＶＩＩの臭化アリール（１３mmol）の溶液を、−７８℃にて、温度を−７０℃未満に維持しながら、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の１．６Ｍ、７．８ml）で１０分間かけて処理した。撹拌を−７８℃で１時間続けた。

トルエン（７０ml）中の式ＶＩのジヒドロイソオキサゾール（６．２１mmol）の溶液を、−７８℃にて、三フッ化ホウ素エーテラート（１２．４mmol）で処理し、続いて、温度を−７０℃未満に維持しながら、絶縁カニューレを使用して１０分間かけて上記アリールリチウム試薬を添加した。その後、混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。合計２時間後、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、溶離剤としてヘプタン又はシクロヘキサンと酢酸エチルの混合物を使用したシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、純粋な式ＶＩＩＩのイソオキサゾリジンを得た。

中間体ＶＩＩＩ−１：ｒａｃ−（３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−メチル−４，５，６，６ａ−テトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾールから開始して、生成物ｒａｃ−（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾールを明黄色の油状物として得た（収率７３％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２５８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体ＶＩＩＩ−２：ｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾールとｒａｃ−（３ａＲ，７ａＲ）−４−フルオロ−３−メチル−３ａ，６，７，７ａ−テトラヒドロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾールの１：１混合物から開始して、生成物ｒａｃ−（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾールを明黄色の油状物として得た（収率２９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体ＩＸ−１：ｒａｃ−（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾールを、溶離剤としてｎ−ヘプタンとエタノールの９０：１０混合物を使用したキラル相（Chiralpak AD）の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって分割して、速く溶離したエナンチオマーとして（３Ｒ，３ａＳ，６ａＳ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール（中間体ＩＸｂ−１）（収率３０％）と、遅く溶離したエナンチオマーとして目的の（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール（中間体ＩＸａ−１）（収率２７％）を共に明黄色の油状物として得た。

中間体ＩＸ−２：ｒａｃ−（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾールを、溶離剤としてｎ−ヘプタンとエタノールの９５：５混合物を使用したキラル相（Chiralpak AD）の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって分割して、速く溶離したエナンチオマーとして（３Ｒ，３ａＳ，６ａＳ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール（中間体ＩＸｂ−２）（収率１１％）と、遅く溶離したエナンチオマーとして目的の（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール（中間体ＩＸａ−２）（収率２２％）を得た。

一般手順Ｄ：中間体アミノアルコールＸの合成
エタノール（８ml）中の式ＩＸのイソオキサゾリジン（１．５２mmol）の溶液に、パラジウム（炭素上１０％、８１mg）及びギ酸アンモニウム（７６７mg）を加え、混合物の撹拌を２２℃で２．５時間続けた。その後、懸濁液を濾過し、濾液を蒸発させ、残渣を酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウム水溶液で分液した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発させて、純粋な式Ｘのアミノアルコールを得た。

中間体Ｘａ−１：（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール（中間体ＩＸａ−１）から開始して、生成物（１Ｒ，２Ｒ）−２−［（Ｓ）−１−アミノ−１−（２−フルオロ−フェニル）−エチル］−３，３−ジフルオロ−シクロペンタノールを白色の結晶性固体として得た（収率９８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２６０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｘａ−２：（３Ｓ，３ａＲ，６ａＲ）−４，４−ジフルオロ−３−（２−フルオロ−フェニル）−３−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｄ］イソオキサゾール（中間体ＩＸａ−２）から開始して、生成物（１Ｒ，２Ｒ）−２−［（Ｓ）−１−アミノ−１−（２−フルオロ−フェニル）−エチル］−３，３−ジフルオロ−シクロヘキサノールを白色の固体として得た（収率９８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

一般手順Ｅ：中間体オキサジンＸＩの合成
エタノール（７．５ml）中の式Ｘのアミノアルコール（１．４mmol）の溶液を、室温にて、シアン化臭素の溶液（アセトニトリル中の５Ｍ；２．８５mmol）で処理した。反応混合物を、密封管中、８５℃で３〜６時間加熱した。反応を完了させるために、１．４mmlのシアン化臭素を加えた。合計２２時間後、溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルと飽和炭酸ナトリウム水溶液で分液した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、溶離剤としてヘプタン又はシクロヘキサンと酢酸エチルの混合物を使用したシリカ−ＮＨ_２ゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、純粋な式ＸＩのイソオキサゾリジンを得た。

中間体ＸＩａ−１：（１Ｒ，２Ｒ）−２−［（Ｓ）−１−アミノ−１−（２−フルオロ−フェニル）−エチル］−３，３−ジフルオロ−シクロペンタノールから開始して、生成物（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−フェニル）−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンを白色の泡状物として得た（収率８０％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２８５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体ＸＩａ−２：（１Ｒ，２Ｒ）−２−［（Ｓ）−１−アミノ−１−（２−フルオロ−フェニル）−エチル］−３，３−ジフルオロ−シクロヘキサノールから開始して、生成物（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−フェニル）−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンを非晶質の白色物質として得た（収率６７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２９９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

一般手順Ｆ：中間体ニトロ−オキサジンＸＩＩの合成
式ＸＩのオキサジン（０．１mmol）を２２℃で濃硫酸（２ml）に滴下した。得られた溶液を０℃まで冷却し、赤色発煙硝酸（０．０５８ml）で処理し、撹拌を０℃で２時間続けた。後処理として、反応混合物を砕いた氷にゆっくり加え、飽和炭酸ナトリウム溶液を使用してｐＨを１０に調整した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させて、純粋な式ＸＩＩのニトロ−オキサジンを得た。あるいは、粗生成物を、溶離剤としてヘプタン又はシクロヘキサンと酢酸エチルの混合物を使用したシリカ−ＮＨ_２ゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、純粋な式ＸＩＩのニトロ−オキサジンを得た。

中間体ＸＩＩａ−１：（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−フェニル）−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンから開始して、生成物（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−５−ニトロ−フェニル）−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンを白色の泡状物として得た（収率８７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体ＸＩＩａ−２：（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−フェニル）−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンから開始して、生成物（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−５−ニトロ−フェニル）−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンを白色の固体として得た（収率８８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３４４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

一般手順Ｇ：中間体アニリンＸＩＩＩの合成
エタノール（４ml）及びトリエチルアミン（０．０９５ml）中の式ＸＩＩのニトロ−オキサジン（０．６８mmol）の懸濁液を、触媒としてパラジウム（炭素上１０％；７２mg）を使用して、大気圧にて、２２℃で１．５時間水素化した。後処理として、反応混合物を濾過し、濾液を蒸発させて、純粋な式ＸＩＩＩのアニリンを得た。

中間体ＸＩＩＩａ−１：（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−５−ニトロ−フェニル）−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンから開始して、生成物（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンを白色の泡状物として得た（収率９７％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３００．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体ＸＩＩＩａ−２：（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−５，５−ジフルオロ−４−（２−フルオロ−５−ニトロ−フェニル）−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンから開始して、生成物（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミンを白色の固体として得た（収率７５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１４．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最終アミドＩの合成のための一般手順Ｑ
メタノール（７２０μl）中の酸ＸＩＶ（９５．８μmol）の溶液を０℃まで冷却した。４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（１２５μmol）を加えた。５分後、メタノール（２４０μl）中の式ＸＩＩＩのアニリン（９５．８μmol）の溶液を滴下した。混合物を０℃で１時間、次に、室温で一晩撹拌した。後処理として、溶媒を減圧下で除去し、次に、残渣を飽和重炭酸ナトリウム溶液で処理した。残留固体を濾過し、水で洗浄し、減圧下で乾燥させた。粗生成物を、溶離剤としてヘプタンと酢酸エチルの混合物を使用したシリカ−ＮＨ_２ゲルで精製して、純粋な式Ｉの最終アミドを得た。あるいは、粗生成物を、溶離剤として水とアセトニトリル（＋０．１％のトリエチルアミン）の勾配を使用したＨＰＬＣで精製した。

以下の実施例を一般手順Ｑに従って調製した。

実施例１
５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−１）と５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−カルボン酸（CAS 1221447-98-8¹⁴）を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を非晶質の無色の物質として得た（収率３４％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例２
５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−１）と５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を白色の粉状物として得た（収率８２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３０．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例３
５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［（Ｓ）−３−（（１Ｒ，２Ｒ）−２−アミノ−６，６−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−１）と５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を非晶質の無色の物質として得た（収率６９％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例４
５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−１）と５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−カルボン酸（CAS 1262803-63-3¹⁵）を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を白色の固体として得た（収率５２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７０．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例５
５−フルオロメチル−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−１）と５−フルオロメチル−ピラジン−２−カルボン酸（CAS 1262803-66-6）を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を白色の固体として得た（収率７５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例６
５−シアノ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−１）と５−シアノ−ピラジン−２−カルボン酸（CAS 1211533-09-3）を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を明黄色の固体として得た（収率２８％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３１．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例７
５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−２）と５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を白色の固体として得た（収率８５％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４５３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例８
５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−２）と５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を白色の固体として得た（収率７２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４４４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例９
５−クロロ−チオフェン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−４−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２−イルアミン（中間体ＸＩＩＩａ−２）と５−クロロ−チオフェン−２−カルボン酸（CAS 24065-33-6）を手順Ｑに従ってカップリングさせて、標記化合物を白色の固体として得た（収率７２％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４５８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

Claims

式Ｉ：

［式中、
Ｒ^１は、
ｉ）アリール、
ｉｉ）シアノ、シアノ−Ｃ_１−６−アルキル、ハロゲン、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_１−６−アルコキシ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_２−６−アルキニル及びＣ_１−６−アルキルから個々に選択される１〜４個の置換基によって置換されているアリール、
ｉｉｉ）ヘテロアリール、及び
ｉｖ）シアノ、シアノ−Ｃ_１−６−アルキル、ハロゲン、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_１−６−アルコキシ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｃ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシ、Ｃ_２−６−アルキニル及びＣ_１−６−アルキルから個々に選択される１〜４個の置換基によって置換されているヘテロアリール
からなる群より選択され；
Ｒ^２は、
ｉ）水素、
ｉｉ）Ｃ_１−６−アルキル、及び
ｉｉｉ）ハロゲン
からなる群より選択され；
Ｒ^３は、
ｉ）Ｃ_１−６−アルキル、及び
ｉｉ）ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル
からなる群より選択され；
Ｒ^４は、
ｉ）水素、及び
ｉｉ）Ｃ_１−６−アルキル
からなる群より選択され、そして
Ｒ^５は、
ｉ）水素、及び
ｉｉ）Ｃ_１−６−アルキル
からなる群より選択され；
ｎは、１又は２である］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩。
Ｒ^１が、シアノ、ハロゲン、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル及びＣ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているヘテロアリールである、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^１が、
ｉ）シアノ及びハロゲンから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているピリジニル、
ｉｉ）シアノ、ハロゲン−Ｃ_１−６−アルキル及びＣ_２−６−アルキニル−Ｃ_１−６−アルコキシから個々に選択される１〜２個の置換基によって置換されているピラジニル、及び
ｉｉｉ）１〜２個のハロゲンによって置換されているチオフェニル
から選択される、請求項１〜２のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^１が、５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−イル、５−シアノ−ピリジン−２−イル、５−クロロ−ピリジン−２−イル、５−フルオロメチル−ピラジン−２−イル、５−シアノ−ピラジン−２−イル、５−クロロ−ピリジン−２−イル、５−シアノ−ピリジン−２−イル、５−クロロ−チオフェン−２−イル又は５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−イルである、請求項１〜３のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^２が、ハロゲンである、請求項１〜４のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^２が、Ｆである、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^３が、Ｃ_１−６−アルキルである、請求項１〜６のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^３が、メチルである、請求項１〜７のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^４が、水素である、請求項１〜８のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
Ｒ^５が、水素である、請求項１〜９のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
ｎが、１である、請求項１〜１０のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
ｎが、２である、請求項１〜１０のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
以下：
５−ブタ−２−イニルオキシ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−フルオロメチル−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−シアノ−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル−アミド、
５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−シアノ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、
５−クロロ−チオフェン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，８ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４ａ，５，６，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−４Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド、及び
５−（１，１−ジフルオロ−エチル）−ピラジン−２−カルボン酸［３−（（４Ｓ，４ａＲ，７ａＲ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４−メチル−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｅ］［１，３］オキサジン−４−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド
からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容しうる塩。
請求項１〜１３のいずれかに定義される式Ｉの化合物を調製するためのプロセスであって、式Ｉ’の化合物と式ＸＩＶの化合物：

［式中、ｎ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５は、請求項１〜１２のいずれかに定義されるとおりである］
を反応させることを含むプロセス。
治療活性物質として使用するための、請求項１〜１３のいずれかに記載の式Ｉの化合物。
β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための治療活性物質として使用するための、請求項１〜１３に記載の式Ｉの化合物。
請求項１〜１３のいずれかに記載の式Ｉの化合物と薬学的に許容しうる担体及び／又は薬学的に許容しうる助剤とを含む、医薬組成物。
ＢＡＣＥ１活性の阻害において使用するための、特に、β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、又はアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための請求項１７記載の医薬組成物。
β−アミロイドレベル及び／又はβ−アミロイドオリゴマー及び／又はβ−アミロイド斑及び更にはアミロイド沈着の増加を特徴とする疾患及び障害、特にアルツハイマー病の治療的及び／又は予防的処置のための医薬の製造のための、請求項１〜１３のいずれかに記載の式Ｉの化合物の使用。