JP5984512B2 - Use of fermented soybean composition and food and drink - Google Patents
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Description
本発明は、糖尿病及びその合併症の効果的、かつ安全な予防、改善又は治療に好適な大豆発酵組成物及びその製造方法、並びに抗糖尿病組成物及び飲食品に関する。 The present invention relates to a fermented soybean composition suitable for effective and safe prevention, improvement or treatment of diabetes and its complications, a method for producing the same, an antidiabetic composition, and a food and drink.
生活習慣病の１つである糖尿病は、近年増加傾向にある。厚生労働省がまとめた平成１９年国民健康・栄養調査報告によれば、糖尿病が強く疑われる人、糖尿病の可能性が否定できない人をあわせると約２，２１０万人になり、４０歳以上の３人に１人が糖尿病乃至その予備軍であるとされている。
糖尿病により血糖値が高い状態が続くと、血管障害が生じ、神経障害、網膜症、白内障、腎障害、壊疽等の重篤な合併症が引き起こされる。
Diabetes, which is one of lifestyle-related diseases, has been increasing in recent years. According to the 2007 National Health and Nutrition Survey Report compiled by the Ministry of Health, Labor and Welfare, the total number of people who are strongly suspected of diabetes and who cannot deny the possibility of diabetes is approximately 22.1 million. One person is said to have diabetes or its reserves.
If the blood glucose level continues to be high due to diabetes, vascular disorders occur, causing serious complications such as neuropathy, retinopathy, cataracts, kidney damage, and gangrene.
前記糖尿病は、インスリン依存性のＩ型とインスリン非依存性のＩＩ型に分けられる。
前記Ｉ型糖尿病は、インスリンを産生する膵臓のβ細胞が何らかの原因により破壊され、インスリンが産生されない状態になることで発症する。Ｉ型糖尿病患者においては、経口血糖降下薬などの飲み薬は無効で、血糖値を下げるためには外部からのインスリン投与しか手段がない。インスリンは小腸で分解され、腸管吸収されないため、皮下又は筋肉注射により血糖値のコントロールを行わなくてはならず、患者へかなりの負担がかかる。
前記ＩＩ型糖尿病を引き起こす原因は、過栄養、運動不足、ストレス過剰、高脂肪食過剰摂取等の生活習慣に基づく肥満と考えられている。この肥満により血糖や血圧、血中のコレステロールの量を調節するインスリンに対する感受性が低下し、インスリン抵抗性ＩＩ型糖尿病が発症する。
The diabetes is divided into insulin-dependent type I and insulin-independent type II.
Type I diabetes occurs when the β-cells of the pancreas that produce insulin are destroyed for some reason and no insulin is produced. In patients with type I diabetes, taking drugs such as oral hypoglycemic drugs are ineffective, and only insulin administration from the outside can be used to lower blood glucose levels. Since insulin is broken down in the small intestine and is not absorbed into the intestine, blood glucose levels must be controlled by subcutaneous or intramuscular injection, which places a considerable burden on the patient.
The cause of the type II diabetes is considered to be obesity based on lifestyle such as overnutrition, lack of exercise, excessive stress, and excessive intake of high fat diet. This obesity reduces the sensitivity to insulin that regulates blood sugar, blood pressure, and the amount of cholesterol in the blood, leading to the development of insulin-resistant type II diabetes.
前記Ｉ型糖尿病における症状メカニズムの詳細は不明であるが、遺伝的要因による自己免疫疾患が原因となり、活性酸素などによりβ細胞が破壊され発症すると考えられている。 Although the details of the symptom mechanism in type I diabetes are unclear, it is thought to be caused by autoimmune diseases caused by genetic factors, and β cells are destroyed by active oxygen or the like.
前記Ｉ型糖尿病においてはβ細胞が破壊、脱落しており、内因性のインスリンを誘導することは出来ない。したがって、血糖値を下げるにはインスリンに代わる、インスリン様作用物質を用いることが必要である。また、活性酸素によるβ細胞の障害を防ぐため、抗酸化物質を用いることも必要である。 In the type I diabetes, β cells are destroyed and lost, and endogenous insulin cannot be induced. Therefore, it is necessary to use an insulin-like agent instead of insulin in order to lower the blood glucose level. In addition, it is necessary to use an antioxidant in order to prevent β-cell damage due to active oxygen.
前記ＩＩ型糖尿病において症状が表れるメカニズムとしては、（１）食事過多などによる過剰なグルコースの血中への吸収、（２）血糖値の上昇に伴う脂肪細胞の肥大化、並びに肥大脂肪細胞からの腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）の産生増加、及びアディポネクチンの産生低下、（３）インスリン感受性の低下、（４）慢性的な血糖値の上昇、（５）グルコース及び生体内蛋白質から生成される終末糖化産物群(ＡＧＥ)による組織障害などが考えられる。 The mechanism of symptoms in type II diabetes is as follows: (1) absorption of excessive glucose into the blood due to excessive diet, (2) hypertrophy of adipocytes accompanying an increase in blood glucose level, and Increased production of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and decreased production of adiponectin, (3) decreased insulin sensitivity, (4) chronic increase in blood glucose level, (5) produced from glucose and in vivo protein Tissue damage caused by advanced glycation end products (AGE) may be considered.
前記（１）につき、グルコースの血中への吸収は、摂取された炭水化物が消化管においてα−アミラーゼ、α−グルコシダーゼ等の消化酵素によって消化され、最終的に単糖類であるグルコースに分解されて腸管膜上の繊毛から吸収されることによる。吸収されたグルコースは血中に移行し、一時的に過血糖症状が起こる。ＩＩ型糖尿病患者においては、インスリンが作用せず、高血糖値が維持される結果、グルコースにより血管が障害を受け、神経障害、網膜症、白内障などの重篤な合併症が惹起される。したがって、前記消化酵素を阻害することにより、グルコースの生成を抑制することで、摂取された糖類は吸収されることなく体外へ排出される。これにより炭水化物摂取による急激な血糖値上昇は抑制され、特に糖尿病患者での高血糖値の維持状態は緩和され得る。 With regard to (1), the absorption of glucose into the blood is that the ingested carbohydrate is digested by digestive enzymes such as α-amylase and α-glucosidase in the digestive tract and finally decomposed into glucose which is a monosaccharide. By being absorbed from cilia on the intestinal membrane. The absorbed glucose is transferred into the blood, and hyperglycemic symptoms occur temporarily. In type II diabetic patients, insulin does not act and high blood glucose levels are maintained. As a result, blood vessels are damaged by glucose, and serious complications such as neuropathy, retinopathy, and cataract are caused. Therefore, by inhibiting the digestive enzyme and suppressing the production of glucose, the ingested saccharide is discharged outside the body without being absorbed. As a result, a rapid increase in blood glucose level due to carbohydrate intake is suppressed, and the maintenance state of high blood glucose level in diabetic patients can be alleviated.
前記（２）及び前記（３）につき、インスリンのシグナル伝達は、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）により阻害されることが示されており、インスリン感受性の低下を引き起こす因子としてマクロファージから産生されるＴＮＦ−αが考えられている（非特許文献１参照）。これに対し、脂肪細胞から産生されるアディポネクチンは、ＴＮＦ−αに拮抗的な作用を示し、インスリンに対する感受性を増強させることが知られている（非特許文献２参照）。成熟脂肪細胞は、脂肪を細胞内へ取り込む細胞であるが、その蓄積量が増えると脂肪細胞は次第に肥大化し肥大脂肪細胞となる。成熟脂肪細胞が肥大脂肪細胞になると、ＴＮＦ−αの分泌は上昇し、一方、アディポネクチンの分泌は低下する。即ち、高脂肪食による肥満などの環境因子により肥大脂肪細胞の増加と共にインスリン抵抗性が惹起される。したがって、前駆脂肪細胞からアディポネクチンを産生する成熟脂肪細胞への分化を誘導し、更にマクロファージや肥大肥満細胞からのＴＮＦ−α産生を抑制することにより、インスリンに対する感受性を高め、ＩＩ型糖尿病の予防、改善、及びその治療が可能となり得る。 Regarding (2) and (3) above, it has been shown that insulin signaling is inhibited by tumor necrosis factor-α (TNF-α), and is produced from macrophages as a factor causing a decrease in insulin sensitivity. TNF-α is considered (see Non-Patent Document 1). In contrast, adiponectin produced from adipocytes is known to exhibit an antagonistic action on TNF-α and enhance sensitivity to insulin (see Non-Patent Document 2). Mature fat cells are cells that take fat into the cells, but as the amount of accumulation increases, fat cells gradually become hypertrophic fat cells. When mature adipocytes become hypertrophic adipocytes, TNF-α secretion increases while adiponectin secretion decreases. That is, insulin resistance is caused by an increase in hypertrophic fat cells due to environmental factors such as obesity caused by a high fat diet. Therefore, it induces differentiation from preadipocytes into mature adipocytes that produce adiponectin, and further suppresses TNF-α production from macrophages and hypertrophic mast cells, thereby increasing sensitivity to insulin and preventing type II diabetes. Improvements and their treatment may be possible.
前記（４）につき、インスリン感受性の低下により慢性的に誘導された血糖値の上昇に対し、内因性のインスリン量を増加させることにより改善乃至治療効果を増強することが考えられる。内因性インスリン濃度の低下については、ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）が関与している。前記ＤＰＰ−ＩＶは、インスリン誘導ホルモンであるグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の不活性化に関与する酵素として知られている。前記ＧＬＰ−１は、グルコース濃度依存的にインスリンを産生誘導することから、ＤＰＰ−ＩＶを阻害することにより高インスリン濃度を維持し、その結果、インスリン耐性組織を刺激するのに十分なインスリン濃度が得られる（非特許文献３及び４参照）。糖尿病治療薬として開発されたＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は、臨床において優れた成績を上げており、新しい作用機序を持つ薬剤として、現在最も注目されている医薬品の１つである。更に、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は、飽満に導く作用も有しており、食欲を調整し、肥満症の治療薬としても開発されている（非特許文献５参照）。即ち、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は、肥満によって誘導されるＩＩ型糖尿病治療において有用な薬剤となり得る。 Regarding (4) above, it is conceivable to enhance the improvement or therapeutic effect by increasing the amount of endogenous insulin against the increase in blood glucose level that is chronically induced by the decrease in insulin sensitivity. Dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV) is involved in reducing endogenous insulin levels. The DPP-IV is known as an enzyme involved in inactivation of glucagon-like peptide-1 (GLP-1), which is an insulin-inducing hormone. Since GLP-1 induces insulin production in a glucose concentration-dependent manner, it maintains a high insulin concentration by inhibiting DPP-IV. As a result, the insulin concentration is sufficient to stimulate insulin-resistant tissues. (See Non-Patent Documents 3 and 4). A DPP-IV inhibitor developed as a therapeutic agent for diabetes has an excellent clinical performance, and is one of the pharmaceuticals that is currently attracting the most attention as a drug having a new mechanism of action. Furthermore, DPP-IV inhibitors also have an effect of leading to satiety, adjust appetite, and have been developed as therapeutic agents for obesity (see Non-Patent Document 5). That is, the DPP-IV inhibitor can be a useful drug in the treatment of type II diabetes induced by obesity.
前記（５）につき、終末糖化産物群(ＡＧＥ)の生成は、糖尿病のような高血糖状態で細胞内グルコース代謝物の濃度が上昇した場合に、グルコースと生体内タンパク質とが非酵素的糖化反応することで起こる。生成したＡＧＥは、マクロファージなど炎症細胞の細胞膜上のＡＧＥ受容体に結合し、細胞を活性化させて活性酸素、ＴＮＦ−α等の炎症因子の産生を誘導する（非特許文献６参照）。これらの炎症因子は、血管を障害し、動脈硬化症、白内障、腎障害、神経障害等の糖尿病の合併症発症の引き金となることが知られている。したがって、ＡＧＥ阻害組成物は、ＩＩ型糖尿病治療において有用となり得る。 With regard to (5) above, the generation of terminal glycation product group (AGE) is based on the non-enzymatic glycation reaction between glucose and in vivo protein when the concentration of intracellular glucose metabolites increases in a hyperglycemic state such as diabetes. To happen. The produced AGE binds to the AGE receptor on the cell membrane of inflammatory cells such as macrophages and activates the cells to induce production of inflammatory factors such as active oxygen and TNF-α (see Non-Patent Document 6). These inflammatory factors are known to damage blood vessels and trigger the onset of diabetic complications such as arteriosclerosis, cataracts, kidney damage, and neuropathy. Thus, AGE-inhibiting compositions can be useful in the treatment of type II diabetes.
また、高血糖による生体の代謝異常に関連して生体内活性酸素種（ＲＯＳ）産生が増加し、フリーラジカルの発生により細胞が障害を受けることが示されている。こうしたことから糖尿病患者における血管障害や神経障害は、酸化ストレスによって誘導されている可能性が示唆されている（非特許文献７参照）。即ち、ＲＯＳによって誘導される細胞障害から細胞を保護する物質は、動脈硬化症、白内障、腎障害、神経障害などＲＯＳの血管障害により誘導される糖尿病の合併症に対する予防及び治療効果が期待される。 In addition, it has been shown that production of reactive oxygen species (ROS) in vivo increases in relation to abnormal metabolism in the living body due to hyperglycemia, and cells are damaged by the generation of free radicals. From these facts, it is suggested that vascular disorders and neurological disorders in diabetic patients may be induced by oxidative stress (see Non-Patent Document 7). That is, a substance that protects cells from cell damage induced by ROS is expected to have preventive and therapeutic effects on diabetic complications induced by vascular disorders of ROS such as arteriosclerosis, cataract, renal disorder, and neuropathy. .
以上のように、抗糖尿病作用にも様々な作用機構が存在すると考えられ、これらの作用機序を併せ持つ組成物を得ることができれば、Ｉ型糖尿病及びＩＩ型糖尿病の予防、改善乃至治療において非常に効果的である。そのような組成物は、糖尿病のみならず、その合併症の予防、改善乃至治療にも効果を奏することが期待され、また、医薬品において問題となり得るコスト、副作用等の問題をクリアしていることが強く求められている。しかしながら、これまでにそのような組成物は得られていないのが現状である。 As described above, it is considered that various mechanisms of action exist for anti-diabetic action, and if a composition having these action mechanisms can be obtained, it is very useful in prevention, improvement or treatment of type I diabetes and type II diabetes. It is effective. Such a composition is expected to be effective not only in diabetes but also in the prevention, improvement or treatment of its complications, and has cleared problems such as cost and side effects that may be a problem in pharmaceuticals. Is strongly demanded. However, the present situation is that no such composition has been obtained so far.
本発明は、このような現状に鑑み、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、安価で安全性が高く、抗糖尿病作用において異なった作用機序を併せ持ち、Ｉ型糖尿病及びＩＩ型糖尿病の少なくともいずれかの予防、改善乃至治療において効果的に作用を発揮し、更に糖尿病の合併症の予防、改善乃至治療効果を有する大豆発酵組成物及びその製造方法、並びに抗糖尿病組成物及び飲食品を提供することを目的とする。 In view of such a current situation, an object of the present invention is to achieve the following object. That is, the present invention is inexpensive, highly safe, has different mechanisms of action in antidiabetic action, and exhibits an effective action in prevention, improvement or treatment of at least one of type I diabetes and type II diabetes. Furthermore, it aims at providing the soybean fermented composition which has the prevention of the complication of diabetes, improvement thru | or a therapeutic effect, its manufacturing method, an anti-diabetic composition, and food-drinks.
本発明者らは、前記目的を達成すべく鋭意検討を行った結果、大豆摩砕物の固形画分を発酵させた大豆発酵物から抽出した大豆発酵抽出物を含有する大豆発酵組成物が、脂肪細胞の分化を誘導し、アディポネクチン産生を誘導すること、及びマクロファージ株化細胞からのＴＮＦ−α産生を抑制することを見出した。また、前記大豆発酵組成物が、試験管内試験において、消化酵素を阻害すること、及びマウスを用いたデンプン負荷試験においてデンプン投与後の血糖値上昇を有意に抑制することを見出した。また、前記大豆発酵組成物が、ＤＰＰ−ＩＶの酵素活性を阻害すること、及びＡＧＥの生成を抑制することを見出した。また、前記大豆発酵組成物が、活性酸素種によって誘導される細胞障害から細胞を保護することを見出した。更に、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）投与マウスを用いた、膵臓β細胞の破壊によるインスリン分泌障害性のＩ型糖尿病モデルにおいて、前記大豆発酵組成物を経口投与することにより血糖値の上昇を抑制することを見出した。以上より、本発明者らは、本発明の完成に至った。 As a result of intensive studies to achieve the above object, the present inventors have found that a soybean fermented composition containing a fermented soybean extract extracted from a fermented soybean fermented solid fraction of soybean grind is a fat. It has been found that cell differentiation is induced, adiponectin production is induced, and TNF-α production from macrophage cell lines is suppressed. Moreover, it discovered that the said soybean fermented composition inhibited digestive enzyme in an in vitro test, and suppressed the blood glucose level rise after starch administration in the starch load test using a mouse | mouth. Moreover, it discovered that the said soybean fermentation composition inhibited the enzyme activity of DPP-IV, and suppressed the production | generation of AGE. It has also been found that the soybean fermentation composition protects cells from cell damage induced by reactive oxygen species. Furthermore, in an insulin secretion disorder type I diabetes model using streptozotocin (STZ) administration mice and pancreatic β cell destruction, it has been found that oral administration of the soybean fermented composition suppresses an increase in blood glucose level. It was. As described above, the present inventors have completed the present invention.
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞ 大豆摩砕物の固形画分を発酵させた大豆発酵物から抽出した大豆発酵抽出物を含有することを特徴とする大豆発酵組成物である。
＜２＞ 大豆発酵物が、納豆菌、テンペ菌、乳酸菌及び酵母菌の少なくともいずれかを用いて発酵された前記＜１＞に記載の大豆発酵組成物である。
＜３＞ モロヘイヤ抽出物を更に含有する前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の大豆発酵組成物である。
＜４＞ 大豆発酵抽出物が、熱水及びエタノール水溶液のいずれかで抽出されてなる前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の大豆発酵組成物である。
＜５＞ 大豆摩砕物の固形画分を発酵させて大豆発酵物を得る発酵工程と、
前記大豆発酵物から大豆発酵抽出物を得る抽出工程とを含むことを特徴とする大豆発酵組成物の製造方法である。
＜６＞ 大豆摩砕物の固形画分を発酵させた大豆発酵物から抽出した大豆発酵抽出物を含有し、脂肪細胞分化誘導作用、アディポネクチン産生誘導作用、腫瘍壊死因子−α産生抑制作用、アディポネクチン産生量低下抑制作用、消化酵素阻害作用、血糖値上昇抑制作用、ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＶ酵素活性阻害作用、終末糖化産物群生成抑制作用、及び酸化ストレスによる細胞障害に対する保護作用の少なくともいずれかを有することを特徴とする組成物である。
＜７＞ 前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の大豆発酵組成物を含有することを特徴とする抗糖尿病組成物である。
＜８＞ 前記＜６＞に記載の組成物を含有することを特徴とする飲食品である。
＜９＞ 前記＜７＞に記載の抗糖尿病組成物を含有することを特徴とする飲食品である。
The present invention is based on the above findings by the present inventors, and means for solving the above problems are as follows. That is,
<1> A soybean fermented composition containing a fermented soybean extract extracted from fermented soybean fermented with a solid fraction of soybean grind.
<2> The soybean fermented composition according to <1>, wherein the fermented soybean is fermented using at least one of natto, tempeh, lactic acid, and yeast.
<3> The soybean fermented composition according to any one of <1> to <2>, further containing a moroheiya extract.
<4> The soybean fermented composition according to any one of <1> to <3>, wherein the fermented soybean extract is extracted with either hot water or an aqueous ethanol solution.
<5> a fermentation process for fermenting a solid fraction of soybean grind to obtain a fermented soybean;
And an extraction step of obtaining a soybean fermentation extract from the soybean fermentation product.
<6> Contains a fermented soybean extract extracted from fermented soybean fermented soy ground fraction, and induces adipocyte differentiation, adiponectin production, tumor necrosis factor-α production, adiponectin production It has at least any one of a dose reduction inhibitory action, a digestive enzyme inhibitory action, a blood sugar level rise inhibitory action, a dipeptidyl peptidase-IV enzyme activity inhibitory action, a terminal glycation product group formation inhibitory action, and a protective action against cell damage caused by oxidative stress. It is a composition characterized by these.
<7> An antidiabetic composition comprising the soybean fermented composition according to any one of <1> to <4>.
<8> A food or drink comprising the composition according to <6>.
<9> A food or drink comprising the antidiabetic composition according to <7>.
本発明によれば、前記目的を達成することができ、安価で安全性が高く、抗糖尿病作用において異なった作用機序を併せ持ち、Ｉ型糖尿病及びＩＩ型糖尿病の少なくともいずれかの予防、改善乃至治療において効果的に作用を発揮し、更に糖尿病の合併症の予防、改善乃至治療効果を有する大豆発酵組成物及びその製造方法、並びに抗糖尿病組成物及び飲食品を提供することができる。 According to the present invention, the above-mentioned object can be achieved, and it is inexpensive, highly safe, has a different mechanism of action in anti-diabetic action, and can prevent or improve at least one of type I diabetes and type II diabetes. It is possible to provide a soybean fermented composition, a method for producing the same, an anti-diabetic composition, and a food and drink that have an effect on treatment effectively, and further have preventive, ameliorative or therapeutic effects on diabetic complications.
（大豆発酵組成物）
本発明の大豆発酵組成物は、大豆摩砕物の固形画分を発酵させた大豆発酵物から抽出した大豆発酵抽出物を含有し、好ましくはモロヘイヤ抽出物を含有し、更に必要に応じてその他の成分を含有する。
(Soy fermentation composition)
The soybean fermented composition of the present invention contains a soybean fermented extract extracted from a fermented soybean fermented fermented solid fraction of soybean grind, preferably contains a moroheiya extract, and further contains other extracts as necessary. Contains ingredients.
＜＜大豆摩砕物の固形画分＞＞
前記大豆摩砕物の固形画分は、原料として大豆又はその類縁種（以下「大豆等」と称する）を用い、その摩砕物の液相を除去した固形画分である。原料となる大豆等の種類、生産条件などとしては、特に制限はなく、市販品を用いることができる。前記大豆摩砕物の固形画分の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、大豆等を水に浸漬し十分に吸水させた後、豆挽機を用いて水とともに大豆等を摩砕し、得られた摩砕大豆懸濁液から、絞り器によって液相を除去し、固相を回収する方法などが挙げられる。
<< Solid fraction of soybean soup >>
The solid fraction of the soybean grind is a solid fraction obtained by using soybean or its related species (hereinafter referred to as “soybean etc.”) as a raw material and removing the liquid phase of the grind. There is no restriction | limiting in particular as kind, production conditions, etc. of soybeans used as a raw material, and a commercial item can be used. The method for producing the solid fraction of the soybean grind is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose.For example, after soaking soybeans in water and sufficiently absorbing water, a soybean grinder is used. Examples include a method of grinding soybeans and the like together with water, removing the liquid phase from the obtained ground soybean suspension with a squeezer, and recovering the solid phase.
前記豆挽機としては、特に制限はなく、公知のものから適宜選択することができ、例えば、スーパーマスコロイダー（増幸産業株式会社製）などが挙げられる。前記摩砕の条件としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、セラミック製高速グラインダーにより摩砕する。
また、前記絞り器としては、特に制限はなく、公知のものから適宜選択することができ、例えば、ＫＭ−１０００（ミナミ産業株式会社製）などが挙げられる。液相を除去する条件としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、自然落下により除去する。
There is no restriction | limiting in particular as said bean grinder, It can select from a well-known thing suitably, For example, a super mass collider (made by Masuko Sangyo Co., Ltd.) etc. are mentioned. There is no restriction | limiting in particular as conditions for the said grinding, According to the objective, it can select suitably, For example, it grinds with a ceramic high-speed grinder.
Moreover, there is no restriction | limiting in particular as said aperture_diaphragm | restriction, It can select from a well-known thing suitably, For example, KM-1000 (made by Minami Sangyo Co., Ltd.) etc. are mentioned. There is no restriction | limiting in particular as conditions for removing a liquid phase, According to the objective, it can select suitably, For example, it removes by natural fall.
前記固形画分としては、上記製造方法において回収されたままのものでも、それを乾燥したものでもよいが、前記固形画分の含水率としては、２０質量％以下が好ましい。
前記大豆摩砕物の固形画分の組成としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、乾物における含有量が、粗蛋白質２０質量％〜３０質量％、粗脂肪１０質量％〜１５質量％、可溶無窒素物２５質量％〜３５質量％、粗繊維１０質量％〜２０質量％であることが好ましい。なお、前記組成の分析は、例えば、近赤外分光法などによって行うことができる。
The solid fraction may be as collected in the above production method or may be dried, but the water content of the solid fraction is preferably 20% by mass or less.
There is no restriction | limiting in particular as a composition of the solid fraction of the said soybean ground material, Although it can select suitably according to the objective, Content in dry matter is 20 mass%-30 mass% of crude protein, 10 mass of crude fats. % To 15% by mass, soluble nitrogen-free material 25% to 35% by mass, and crude fiber 10% to 20% by mass. The composition analysis can be performed by, for example, near infrared spectroscopy.
＜＜大豆発酵物＞＞
前記大豆発酵物は、前記大豆摩砕物の固形画分を発酵させてなる。
前記固形画分を発酵させる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、飲食品用途、菌自体の有する栄養素、発酵香などの観点から、納豆菌、テンペ菌、乳酸菌、酵母菌が好ましい。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、高い機能性を持った生成物が高収量で得られる点で、納豆菌が特に好ましく、テンペ菌、乳酸菌及び酵母菌の少なくともいずれかと納豆菌との組み合わせも好適に用いることができる。
なお、前記菌としては、安全性が保証されている限り、自然的に、又は人為的な変異手段により生成し、菌学的性質が変異した変異株も用いることができる。
<< fermented soybeans >>
The fermented soybean product is obtained by fermenting the solid fraction of the soy ground product.
The method for fermenting the solid fraction is not particularly limited and may be appropriately selected according to the purpose. However, from the viewpoints of food and beverage use, nutrients of the bacteria themselves, fermented aroma, etc. Lactic acid bacteria and yeast are preferred. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together. Among these, Bacillus natto is particularly preferable in that a product having high functionality can be obtained in a high yield, and a combination of Bacillus natto with at least one of Tempe, lactic acid, and yeast can be suitably used. .
In addition, as long as safety | security is ensured as said microbe, the mutant strain which produced | generated by the natural or artificial variation | mutation means and the bacteriological property was mutated can also be used.
前記納豆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｖａｒ． ｎａｔｔｏ）としては、特に制限はなく、市販されている一般的な納豆菌を用いることができ、例えば、株式会社成瀬醗酵化学研究所から入手することができる。 The natto (Bacillus subtilis var. Natto) is not particularly limited and can be a general natto that are commercially available, for example, can be obtained from Naruse Fermentation Chemical Laboratory Co., Ltd..
前記テンペ菌としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｏｒｙｚａｅ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒなどが挙げられる。これらの中でも、発酵の容易さの観点からＲｈｉｚｏｐｕｓ ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓが好ましい。なお、これらのテンペ菌は、インドネシアからの輸入品として、或いは日本の種麹業者から容易に入手することができる。 There is no restriction | limiting in particular as said Tempe bacteria, According to the objective, it can select suitably, For example, Rhizopus oligosporus , Rhizopus oryzae , Rhizopus stolonifer etc. are mentioned. Among these, Rhizopus oligosporus is preferable from the viewpoint of ease of fermentation. These Tempe bacteria can be easily obtained as imported products from Indonesia or from a Japanese seed vaccination trader.
前記乳酸菌としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラクトバシルス・アシドフィルス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ)、ラクトバシルス・ビフィズス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｉｆｉｄｕｓ)、ストレプトコッカス・フェカリス(Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ)、ラクトバシルス・ブルガリカス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ)、ラクトバシルス・サンフランシスコ(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｎｆｒａｎｃｉｓｃｏ)、ラクトバシルス・カゼイ(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ)、ストレプトマイセス・ラクチス(Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ)などが挙げられる。これらの中でも、乳酸の生成量の点で、ラクトバシルス・アシドフィルスが好ましく、味の点で、ラクトバシルス・ビフィズスが好ましい。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの乳酸菌の選択によって、最終的な発酵物の味、香り、栄養素等を変化させることができる。なお、これらの乳酸菌は、いずれも公知の菌で、容易に入手することができる。 As the lactic acid bacteria is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose, for example, Lactobacillus acidophilus (Lactobacillus acidophilus), Lactobacillus bifidus (Lactobacillus bifidus), Streptococcus faecalis (Streptococcus faecalis), Lactobacillus bulgaricus Kas (Lactobacillus bulgaricus), Lactobacillus San Francisco (Lactobacillus sanfrancisco), Lactobacillus casei (Lactobacillus casei), Streptomyces lactis (Streptomyces lactis) and the like. Among these, Lactobacillus acidophilus is preferable in terms of the amount of lactic acid produced, and Lactobacillus bifido is preferable in terms of taste. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together. By selection of these lactic acid bacteria, the final fermented product taste, aroma, nutrients, and the like can be changed. These lactic acid bacteria are all known bacteria and can be easily obtained.
前記酵母菌としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属、カンジダ属、クルイベロミセス属などが挙げられる。これらの中でも、飲食品用途の観点から、サッカロミセス属の酵母が好ましく、清酒酵母、ビール酵母が特に好ましい。これらの酵母菌は、例えば、財団法人日本醸造協会から入手することができる。 There is no restriction | limiting in particular as said yeast, According to the objective, it can select suitably, For example, Saccharomyces genus, Schizosaccharomyces genus, Candida genus, Kluyveromyces genus etc. are mentioned. Among these, yeast of the genus Saccharomyces is preferable, and sake yeast and brewer's yeast are particularly preferable from the viewpoint of food and drink use. These yeasts can be obtained from, for example, the Japan Brewing Association.
前記菌の接種量としては、菌が増殖し得る限り特に制限はなく、菌の種類に応じて適宜選択できるが、通常１×１０３個／ｇ〜１×１０８個／ｇである。前記接種量が、１×１０３個／ｇ未満であると、菌による発酵に時間がかかることがあり、１×１０８個／ｇを超えると、菌の増殖が抑制されて発酵が進まないことがある。 The inoculation amount of the bacterium is not particularly limited as long as the bacterium can grow, and can be appropriately selected according to the type of bacterium, but is usually 1 × 10 3 cells / g to 1 × 10 8 cells / g. If the inoculation amount is less than 1 × 10 3 cells / g, it may take time for fermentation by bacteria, and if it exceeds 1 × 10 8 cells / g, the growth of bacteria is suppressed and fermentation does not proceed. Sometimes.
前記発酵条件、例えば、発酵温度、発酵時間、発酵の形態、ｐＨ、通気条件等も適宜決定されうるが、使用する菌の増殖等の特性に適した条件とすることが好ましい。 The fermentation conditions, for example, fermentation temperature, fermentation time, fermentation form, pH, aeration conditions, and the like can be appropriately determined, but it is preferable that the conditions are suitable for characteristics such as growth of the bacteria used.
前記発酵温度としては、前記菌による発酵が進む限り特に制限はなく、使用する菌の種類に応じて適宜選択することができるが、通常１０℃〜５５℃であり、２０℃〜５０℃が好ましく、２５℃〜４５℃がより好ましい。 The fermentation temperature is not particularly limited as long as the fermentation by the bacteria proceeds, and can be appropriately selected according to the type of bacteria to be used, but is usually 10 ° C to 55 ° C, preferably 20 ° C to 50 ° C. 25 ° C to 45 ° C is more preferable.
前記発酵時間としては、菌が増殖し得る限り特に制限はなく、菌の種類に応じて適宜選択することができるが、通常１時間〜５日間であり、３時間〜３日間が好ましく、６時間〜２日間がより好ましい。 There is no restriction | limiting in particular as said fermentation time as long as a microbe can proliferate, Although it can select suitably according to the kind of microbe, it is 1 hour-5 days normally, 3 hours-3 days are preferable, and 6 hours ~ 2 days is more preferred.
前記発酵は、通常、静置で行われるが、適宜攪拌を行ってもよく、適宜通気を行ってもよい。
前記攪拌を行う場合の条件としては、特に制限はなく、十分攪拌されていればよい。
The fermentation is usually performed by standing, but may be appropriately stirred or aerated appropriately.
There is no restriction | limiting in particular as conditions in the case of performing the said stirring, What is necessary is just to fully stir.
前記発酵時のｐＨとしては、菌が増殖し得る限り特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、通常４．５〜８．５であり、５．５〜７．５が好ましい。なお、ｐＨの調整には、ｐＨ調整用の塩酸又は水酸化ナトリウムを使用してもよいし、ｐＨ調整用バッファーを使用してもよい。 The pH at the time of fermentation is not particularly limited as long as the bacteria can grow, and can be appropriately selected according to the purpose, but is usually 4.5 to 8.5, and 5.5 to 7.5. preferable. For pH adjustment, pH adjusting hydrochloric acid or sodium hydroxide may be used, or a pH adjusting buffer may be used.
＜＜大豆発酵抽出物＞＞
本発明における大豆発酵抽出物は、前記大豆発酵物から抽出されてなる。前記大豆発酵抽出物は、更に濃縮又は希釈してもよく、凍結乾燥、加熱乾燥等の乾燥処理に付して使用してもよい。その形態は特に限定されず、例えば、溶液、懸濁液、半固体（例えば、ペースト状等）、固体（例えば、粉末、顆粒等）などであってもよい。
<< Soybean Fermented Extract >>
The soybean fermented extract in the present invention is extracted from the soybean fermented product. The soybean fermented extract may be further concentrated or diluted, and may be used after being subjected to a drying treatment such as freeze drying or heat drying. The form is not particularly limited, and may be, for example, a solution, a suspension, a semi-solid (for example, a paste), a solid (for example, a powder, a granule, or the like).
前記抽出に用いられる溶媒としては、特に制限はなく、公知のものを用いることができ、例えば、水；メタノール、エタノール、ブタノールなどのアルコール；アセトン；ヘキサン；これらの混合物（アルコール水溶液等）などが挙げられる。これらの中でも、人体への悪影響がない点で、水、エタノール及びこれらの混合物が好ましく、効率的に活性物質を抽出できる点で、熱水、エタノール水溶液がより好ましく、エタノール水溶液が特に好ましい。
前記熱水とは、温度が７０℃以上の水のことを指し、水の温度としては、抽出効率の点で、８０℃〜１００℃が好ましく、９０℃〜１００℃がより好ましい。
前記アルコール水溶液の濃度としては、８０体積％〜１００体積％が好ましく、９０体積％〜１００体積％がより好ましい。
There is no restriction | limiting in particular as a solvent used for the said extraction, For example, water; Alcohols, such as methanol, ethanol, and butanol; Acetone; Hexane; These mixtures (alcohol aqueous solution etc.) etc. Can be mentioned. Among these, water, ethanol and a mixture thereof are preferable in that there is no adverse effect on the human body, and hot water and an aqueous ethanol solution are more preferable, and an aqueous ethanol solution is particularly preferable in that an active substance can be efficiently extracted.
The hot water refers to water having a temperature of 70 ° C. or higher, and the temperature of water is preferably 80 ° C. to 100 ° C., more preferably 90 ° C. to 100 ° C. in terms of extraction efficiency.
As a density | concentration of the said alcohol aqueous solution, 80 volume%-100 volume% are preferable, and 90 volume%-100 volume% are more preferable.
前記抽出の方法としては、特に制限はなく、公知の方法を用いることができ、例えば、前記溶媒を前記大豆発酵物に加え、攪拌して抽出後、遠心分離機により固液分離する方法などが挙げられる。前記遠心分離機としては、例えば、デカンター連続式横型遠心分離機、自動バスケット型遠心分離機などが挙げられ、これらは組み合わせて用いてもよい。 The extraction method is not particularly limited, and a known method can be used. For example, a method of adding the solvent to the soybean fermented product, stirring and extracting, followed by solid-liquid separation with a centrifuge, etc. Can be mentioned. Examples of the centrifuge include a decanter continuous horizontal centrifuge and an automatic basket centrifuge, and these may be used in combination.
前記濃縮の方法としては、特に制限はなく、公知の濃縮方法を用いることができる。
濃縮後の前記大豆発酵抽出物のＢｒｉｘ値としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、９〜１２が好ましい。
There is no restriction | limiting in particular as the said concentration method, A well-known concentration method can be used.
There is no restriction | limiting in particular as a Brix value of the said soybean fermentation extract after concentration, Although it can select suitably according to the objective, 9-12 are preferable.
＜＜モロヘイヤ抽出物＞＞
前記モロヘイヤ抽出物の原料であるモロヘイヤとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、シナノキ科モロヘイヤの地上部が挙げられる。前記地上部としては、例えば、葉をそのまま用いてもよいし、葉を乾燥させたもの（乾燥モロヘイヤ）を用いてもよいし、乾燥モロヘイヤを粉砕した乾燥モロヘイヤ粉砕物（粉末）を用いてもよい。これらの中でも、モロヘイヤの有する有用成分を抽出しやすい点で、乾燥モロヘイヤ粉砕物が好ましい。
前記乾燥モロヘイヤ粉末としては、ミルなどを使用して適宜調製したものでも、市販品でもよく、該市販品としては、例えば、モロヘイヤ末（福田龍株式会社製）などが挙げられる。
<< Moloheiya extract >>
There is no restriction | limiting in particular as moroheiya which is a raw material of the said morohaea extract, According to the objective, it can select suitably, For example, the above-ground part of lindenaceae moroheiya is mentioned. As the above-mentioned ground part, for example, a leaf may be used as it is, a dried leaf (dried moroheiya) may be used, or a dried moroheiya pulverized product (powder) obtained by pulverizing the dried moroheiya may be used. Good. Among these, a dried morohea pulverized product is preferable because it is easy to extract useful components possessed by morohaya.
The dried moroheiya powder may be appropriately prepared using a mill or the like, or may be a commercially available product. Examples of the commercially available product include Morohaya powder (manufactured by Ryu Fukuda Co., Ltd.).
前記モロヘイヤ抽出物は、前記モロヘイヤを溶媒で抽出した抽出液、或いは、前記抽出液を更に濃縮又は希釈したものである。その形態は特に限定されず、例えば、溶液、懸濁液、半固体（例えば、ペースト状等）、固体（例えば、粉末、顆粒等）などであってもよい。
前記溶媒としては、特に制限はなく、公知のものを用いることができ、例えば、水；メタノール、エタノール、ブタノールなどのアルコール；アセトン；ヘキサン；これらの混合物などが挙げられる。これらの中でも、効率的に活性物質を抽出できる点で、水が好ましく、熱水がより好ましい。熱水の定義、温度の好ましい範囲、及びアルコール水溶液の濃度の好ましい範囲は、上述したのと同様である。
抽出の方法としては、特に制限はなく、公知の方法を用いることができ、例えば、溶媒を前記モロヘイヤに加え、攪拌して抽出後、遠心分離機により固液分離する方法などが挙げられる。前記遠心分離機としては、例えば、デカンター連続式横型遠心分離機、自動バスケット型遠心分離機などが挙げられ、これらは組み合わせて用いてもよい。
The moroheiya extract is an extract obtained by extracting the moroheiya with a solvent, or a solution obtained by further concentrating or diluting the extract. The form is not particularly limited, and may be, for example, a solution, a suspension, a semi-solid (for example, a paste), a solid (for example, a powder, a granule, or the like).
There is no restriction | limiting in particular as said solvent, A well-known thing can be used, For example, water; Alcohol, such as methanol, ethanol, and butanol; Acetone; Hexane; Among these, water is preferable and hot water is more preferable because an active substance can be efficiently extracted. The definition of hot water, the preferred range of temperature, and the preferred range of the concentration of the aqueous alcohol solution are the same as described above.
There is no restriction | limiting in particular as a method of extraction, A well-known method can be used, For example, the method of adding a solvent to the moroheiya, stirring, extracting, and carrying out solid-liquid separation with a centrifuge etc. is mentioned. Examples of the centrifuge include a decanter continuous horizontal centrifuge and an automatic basket centrifuge, and these may be used in combination.
前記大豆発酵抽出物と前記モロヘイヤ抽出物との混合比（大豆発酵抽出物／モロヘイヤ抽出物、体積比）としては、特に制限はなく適宜選択することができるが、１／２０〜１０／１が好ましく、１／１０〜５／１がより好ましい。 The mixing ratio of the soybean fermented extract and the moroheiya extract (soybean fermented extract / moroheia extract, volume ratio) is not particularly limited and may be appropriately selected. Preferably, 1/10 to 5/1 is more preferable.
＜＜その他の成分＞＞
その他の成分としては、特に制限はなく、例えば、茶カテキン、アントシアニン、ルチン、ヘスペリジン、ケルセチン、イソフラボン、タンニン、クロロゲン酸、エラグ酸、クルクミン、リグナン、サポニンなどが挙げられる。前記茶カテキンの原料である茶の種類、抽出方法などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、有効成分であるポリフェノール多く含むことが好ましい。前記茶カテキンにおける具体的な総ポリフェノール含量としては、６０質量％以上が好ましい。
<< Other ingredients >>
Other components are not particularly limited, and examples include tea catechin, anthocyanin, rutin, hesperidin, quercetin, isoflavone, tannin, chlorogenic acid, ellagic acid, curcumin, lignan, and saponin. There is no restriction | limiting in particular as the kind of tea which is the raw material of the said tea catechin, an extraction method, etc., Although it can select suitably according to the objective, It is preferable that many polyphenols which are active ingredients are included. The specific total polyphenol content in the tea catechin is preferably 60% by mass or more.
前記大豆発酵抽出物に対する前記その他の成分の質量比（その他の成分／大豆発酵抽出物）としては、特に制限はなく適宜選択することができるが、１／３，０００以上が好ましく、１／１，５００以上がより好ましい。前記質量比が、１／３，０００未満であると、前記その他の成分の機能性が発揮されないことがある。 The mass ratio of the other components to the soybean fermented extract (other components / soybean fermented extract) is not particularly limited and may be appropriately selected, but is preferably 1 / 3,000 or more, and 1/1. 500 or more is more preferable. If the mass ratio is less than 1 / 3,000, the functionality of the other components may not be exhibited.
（大豆発酵組成物の製造方法）
本発明の大豆発酵組成物の製造方法は、発酵工程と抽出工程とを含み、更に必要に応じて濾過工程などその他の工程を含む。
(Method for producing soybean fermented composition)
The manufacturing method of the soybean fermented composition of this invention contains a fermentation process and an extraction process, and also includes other processes, such as a filtration process, as needed.
＜発酵工程＞
前記発酵工程は、大豆摩砕物の固形画分を発酵させて大豆発酵物を得る工程である。発酵工程において用いられる大豆摩砕物の固形画分としては、上述したものを使用することができる。また、発酵条件（例えば、発酵温度、発酵時間、発酵の形態、ｐＨ、通気条件等）も上述したとおりである。
<Fermentation process>
The said fermentation process is a process of fermenting the solid fraction of a soybean ground material, and obtaining a soybean fermented material. What was mentioned above can be used as a solid fraction of the soybean ground material used in a fermentation process. Moreover, fermentation conditions (for example, fermentation temperature, fermentation time, fermentation form, pH, aeration conditions, etc.) are also as described above.
＜抽出工程＞
前記抽出工程は、前記大豆発酵物を抽出して大豆発酵抽出物を得る工程である。本工程において用いられる抽出方法は、上述したとおりである。
<Extraction process>
The extraction step is a step of extracting the fermented soybean product to obtain a fermented soybean extract. The extraction method used in this step is as described above.
＜その他の工程＞
＜＜濾過工程＞＞
前記濾過工程は、前記大豆発酵抽出物を濾過する工程である。
前記濾過の方法としては、特に制限はなく、公知の濾過装置を用いることができ、例えば、フィルタープレス、ラインフィルターなどを用いることができる。なお、これらは併用してもよい。
<Other processes>
<< Filtration process >>
The filtration step is a step of filtering the fermented soybean extract.
There is no restriction | limiting in particular as said filtration method, A well-known filtration apparatus can be used, For example, a filter press, a line filter, etc. can be used. These may be used in combination.
＜＜濃縮工程＞＞
前記濃縮工程は、前記大豆発酵抽出物を濃縮する工程である。前記濃縮の方法としては、特に制限はなく、公知の濃縮方法を用いることができる。
濃縮後の前記大豆発酵抽出物のＢｒｉｘ値としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、９〜１２が好ましい。
<< Concentration process >>
The concentration step is a step of concentrating the soybean fermented extract. There is no restriction | limiting in particular as the said concentration method, A well-known concentration method can be used.
There is no restriction | limiting in particular as a Brix value of the said soybean fermentation extract after concentration, Although it can select suitably according to the objective, 9-12 are preferable.
（抗糖尿病組成物）
本発明の抗糖尿病組成物は、本発明の前記大豆発酵組成物を含み、更に必要に応じてその他の成分を含む。
その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、従来公知のインスリン分泌促進薬、インスリン抵抗性改善薬、α−グルコシダーゼ阻害薬、ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬、インスリン製剤などが挙げられる。
(Anti-diabetic composition)
The anti-diabetic composition of the present invention includes the soybean fermented composition of the present invention, and further includes other components as necessary.
The other components are not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose. For example, conventionally known insulin secretion promoters, insulin resistance improvers, α-glucosidase inhibitors, DPP-IV inhibitors, Examples include insulin preparations.
（飲食品）
本発明の飲食品は、本発明の抗糖尿病組成物を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。本発明の飲食品としては、例えば、本発明の抗糖尿組成物をそのまま、或いはペレット、粉末、顆粒などの形態として使用してもよく、食品添加物、調味料、ふりかけとして使用してもよい。また、本発明の抗糖尿組成物を食材中に含有せしめて使用してもよい。これにより、機能性食品或いは健康食品を得ることができる。
(Food)
The food / beverage products of this invention contain the antidiabetic composition of this invention, and also contain another component as needed. As the food and drink of the present invention, for example, the anti-diabetic composition of the present invention may be used as it is or in the form of pellets, powders, granules, etc., and may be used as a food additive, seasoning or sprinkle. . Moreover, you may use the antidiabetic composition of this invention, making it contain in a foodstuff. Thereby, functional food or health food can be obtained.
本発明の大豆発酵抽出物を含有する組成物は、後述する実施例で示すように、脂肪細胞分化誘導作用、アディポネクチン産生誘導作用、腫瘍壊死因子−α産生抑制作用、アディポネクチン産生量低下抑制作用、消化酵素阻害作用、血糖値上昇抑制作用、ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＶ酵素活性阻害作用、終末糖化産物群生成抑制作用、及び酸化ストレスによる細胞障害に対する保護作用の少なくともいずれかを有するので、脂肪細胞分化誘導剤、アディポネクチン産生誘導剤、腫瘍壊死因子−α産生抑制剤、アディポネクチン産生量低下抑制剤、消化酵素阻害剤、血糖値上昇抑制剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ酵素活性阻害剤、終末糖化産物群生成抑制剤、及び酸化ストレスによる細胞障害に対する保護剤の少なくともいずれかとしても好適に利用できる。また、前記組成物、又は前記各剤は、例えば、研究用試薬や、前記抗糖尿病組成物を含有する飲食品のように、飲食品としても好適に利用できる。 The composition containing the fermented soybean extract of the present invention has an adipocyte differentiation inducing action, an adiponectin production inducing action, a tumor necrosis factor-α production inhibiting action, an adiponectin production lowering inhibiting action, as shown in Examples described later. It has at least one of digestive enzyme inhibitory action, blood sugar level increase inhibitory action, dipeptidyl peptidase-IV enzyme activity inhibitory action, terminal glycation product group formation inhibitory action, and protective action against cell damage due to oxidative stress, and induces adipocyte differentiation Agent, adiponectin production inducer, tumor necrosis factor-α production inhibitor, adiponectin production decrease inhibitor, digestive enzyme inhibitor, blood glucose level increase inhibitor, dipeptidyl peptidase IV enzyme activity inhibitor, terminal glycation product group inhibitor And / or as a protective agent against cell damage caused by oxidative stress It can be suitably used. Moreover, the said composition or each said agent can be utilized suitably also as food / beverage products like the reagent for research, and the food / beverage products containing the said anti-diabetic composition, for example.
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated concretely, this invention is not limited to these Examples at all.
（実施例１：大豆発酵組成物の製造）
図１に大豆発酵組成物の製造工程のフローチャートを示す。
＜工程１：大豆発酵物の調製＞
大豆を水で洗浄し、水に１７時間浸漬し十分に吸水させた。大豆が吸水し十分に柔らかくなったことを確認し、豆挽機（スーパーマスコロイダー、増幸産業株式会社製）を用いて水とともに大豆を摩砕した。前記摩砕には、セラミック製高速グラインダーを用いた。
摩砕された大豆をステンレス製のタンクに移し、均一になるように攪拌した。その後、摩砕大豆懸濁液をよく撹拌しながら１００℃で２０分間加熱した。加熱後、絞り器（ＫＭ−１０００、ミナミ産業株式会社製）を用いて摩砕大豆懸濁液から液相を除去し、固相（大豆固形画分）を回収した。このとき、液相の除去は、自然落下によって行った。得られた大豆固形画分１００ｋｇを適度に加温し、十分に攪拌した後に、納豆菌（成瀬醗酵化学研究所から入手）０．２Ｌ（菌数：１．０×１０１０個）を均一に添加した。納豆菌接種後の大豆固形画分をステンレス容器又はポリエチレン袋に移し、通気性を確保した状態で、４０℃の恒温培養器又は恒温室内で１８時間発酵を行った。得られた大豆発酵物は、使用時まで冷凍保管した。
(Example 1: Production of soybean fermented composition)
The flowchart of the manufacturing process of a soybean fermented composition is shown in FIG.
<Step 1: Preparation of fermented soybeans>
Soybeans were washed with water and immersed in water for 17 hours to sufficiently absorb water. After confirming that the soybean had absorbed water and became sufficiently soft, the soybean was ground with water using a bean grinder (Supermass colloider, manufactured by Masuko Sangyo Co., Ltd.). A ceramic high speed grinder was used for the grinding.
The ground soybeans were transferred to a stainless steel tank and stirred uniformly. Thereafter, the ground soybean suspension was heated at 100 ° C. for 20 minutes with good stirring. After heating, the liquid phase was removed from the ground soybean suspension using a squeezer (KM-1000, manufactured by Minami Sangyo Co., Ltd.), and the solid phase (soy solid fraction) was recovered. At this time, the liquid phase was removed by natural fall. After moderately warming and sufficiently stirring 100 kg of the obtained soybean solid fraction, 0.2 L (the number of bacteria: 1.0 × 10 10 ) of natto bacteria (obtained from Naruse Fermentation Chemical Laboratory) was uniformly obtained. Added. The soybean solid fraction after inoculation with Bacillus natto was transferred to a stainless steel container or a polyethylene bag, and fermented for 18 hours in a constant temperature incubator at 40 ° C. or in a constant temperature room while ensuring air permeability. The obtained fermented soybeans were stored frozen until use.
＜工程２：エタノール抽出＞
ステンレス製のタンクに９５体積％エタノール３，０００Ｌを入れ、７０℃に加温した。次いで、前記大豆発酵物９００ｋｇを投入し、１８時間静置した。静置後、４０℃まで冷却し、２時間撹拌した。攪拌終了後、フィルタープレスを用いて濾過を行い、澄明な濾液を回収した。この濾液を３３０Ｌになるまで減圧濃縮し、大豆発酵抽出物を得た。
<Step 2: Ethanol extraction>
In a stainless steel tank, 3,000 L of 95% by volume ethanol was placed and heated to 70 ° C. Next, 900 kg of the fermented soybeans were added and allowed to stand for 18 hours. After standing, it was cooled to 40 ° C. and stirred for 2 hours. After the stirring, filtration was performed using a filter press, and a clear filtrate was recovered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to 330 L to obtain a fermented soybean extract.
＜工程３：モロヘイヤ抽出物の調製＞
ステンレス製のタンクに水２，０５０Ｌを入れ、７０℃に加温した。続いて乾燥モロヘイヤ粉砕物（モロヘイヤ末、福田龍株式会社製）６３ｋｇを投入し、９０℃まで加温後、１時間撹拌した。攪拌終了後、遠心分離機を用いて固液分離を行った。液層のみを回収し、フィルタープレスを用いて濾過を行い、澄明な濾液（モロヘイヤ抽出物）２，５００Ｌを得た。
<Step 3: Preparation of Morohaya extract>
2,050 L of water was placed in a stainless steel tank and heated to 70 ° C. Subsequently, 63 kg of dried Morohaya pulverized material (Morohaya powder, manufactured by Ryu Fukuda Co., Ltd.) was added, and the mixture was heated to 90 ° C. and stirred for 1 hour. After completion of the stirring, solid-liquid separation was performed using a centrifuge. Only the liquid layer was collected and filtered using a filter press to obtain 2500 L of a clear filtrate (Morohaya extract).
＜工程４：混合及び濃縮＞
工程２で得られた大豆発酵抽出物と、工程３で得られたモロヘイヤ抽出物をステンレス製のタンク内で混合した。この混合液を７５０Ｌになるまで減圧濃縮した。その後、クエン酸ナトリウムを用いてｐＨを３．７に調整した。ｐＨ調整後、９０℃で１０分間加熱殺菌し、１０℃で１２時間静置させた。その後、フィルタープレス及び０．５μｍラインフィルターを組み合わせて濾過を行い、澄明な溶液を回収した。Ｂｒｉｘ値９〜１２に調整した。Ｂｒｉｘ値調整後、９０℃で１０分間加熱殺菌し、０．５μｍラインフィルターを用いて精密濾過した。得られた澄明液を大豆発酵組成物とした。
<Step 4: Mixing and concentration>
The soybean fermented extract obtained in step 2 and the moroheiya extract obtained in step 3 were mixed in a stainless steel tank. The mixture was concentrated under reduced pressure until 750 L. Thereafter, the pH was adjusted to 3.7 using sodium citrate. After pH adjustment, the mixture was sterilized by heating at 90 ° C. for 10 minutes and allowed to stand at 10 ° C. for 12 hours. Thereafter, filtration was performed in combination with a filter press and a 0.5 μm line filter, and a clear solution was recovered. The Brix value was adjusted to 9-12. After adjusting the Brix value, the mixture was sterilized by heating at 90 ° C. for 10 minutes and microfiltered using a 0.5 μm line filter. The obtained clear liquid was used as a soybean fermentation composition.
（実施例２：モロヘイヤ熱水抽出物の混合による成分変化の解析）
前記工程２で得られた大豆発酵抽出物、及び該大豆発酵抽出物と前記工程３で得られたモロヘイヤ抽出物とを混合した溶液の成分分析をＨＰＬＣにより行った。
各試料を移動溶液（メタノール）で２倍希釈し、１０μＬをＨＰＬＣカラムに注入した。前記カラムとしては、ＯＤＳカラム（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ１８Ｓ、内径×長さ：４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、資生堂株式会社製）を用い、流速１．０ｍＬ／分、カラム温度４０℃で、水１００体積％からメタノール／水（体積比）＝５０／５０まで５０分間、次いでメタノール１００体積％で１０分間のグラジエント溶出を行い、検出波長２３０ｎｍにおいて吸光度を測定した。結果を図２Ａ及び図２Ｂに示す。
(Example 2: Analysis of component change due to mixing of Morohaya hot water extract)
The component analysis of the soybean fermented extract obtained in the step 2 and the solution obtained by mixing the soy fermented extract and the moroheiya extract obtained in the step 3 was performed by HPLC.
Each sample was diluted 2-fold with a transfer solution (methanol) and 10 μL was injected onto the HPLC column. As the column, an ODS column (Capcellpak C18S, inner diameter × length: 4.6 mm × 150 mm, manufactured by Shiseido Co., Ltd.) was used, with a flow rate of 1.0 mL / min and a column temperature of 40 ° C., from 100% by volume of water to methanol / Gradient elution was performed with water (volume ratio) = 50/50 for 50 minutes and then with 100% by volume of methanol for 10 minutes, and the absorbance was measured at a detection wavelength of 230 nm. The results are shown in FIGS. 2A and 2B.
図２Ａは、大豆発酵抽出物、図２Ｂは、該大豆発酵抽出物とモロヘイヤ抽出物とを混合した組成物のＨＰＬＣ分析結果である。図２Ａと図２Ｂとの比較から、モロヘイヤ抽出物を混合することにより、一部ピークの上昇、並びに新しいピークの出現が認められた。 FIG. 2A is a result of HPLC analysis of a fermented soybean extract, and FIG. 2B is a result of HPLC analysis of a composition obtained by mixing the fermented soybean extract and a moroheiya extract. From the comparison between FIG. 2A and FIG. 2B, a rise in a partial peak and the appearance of a new peak were recognized by mixing the moroheiya extract.
（実施例３：脂肪細胞の分化誘導作用）
前駆脂肪細胞であるマウス線維芽細胞（３Ｔ３−Ｌ１、ヒューマンサイエンス研究資源バンクから入手可能）を、基本培地を添加した９６ウェルのマイクロプレートに３×１０４個／ウェルで播種し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで２４時間培養した。細胞がコンフルエントになったのを確認後、更に２日間インキュベーションした。培地を除去し、分化誘導培地Ｉ（ＤＭＥＭ培地；１０μｇ／ｍＬインスリン、１０質量％牛胎児血清、４．５ｇ／Ｌグルコース）９０μＬに置換し、実施例１で得られた大豆発酵組成物を１０μＬ添加した。２日毎に各被験物質を含む分化誘導培地Ｉに培地交換しながら８日間培養した。
細胞をＰＢＳ（リン酸緩衝液）で２回洗浄した後、１０％（１０倍希釈）ホルマリンを加え、室温で１０分間処理した。細胞をＰＢＳで２回洗浄した後、オイルレッドＯ染色液（シグマ社製）を加え、室温で２０分間染色した。６０体積％イソプロパノールで１回洗浄し、その後、ＰＢＳで２回洗浄し、顕微鏡下、細胞内脂肪滴の蓄積を観察して細胞内脂肪滴が認められる細胞を分化成熟した脂肪細胞とみなし、写真を撮影した。結果を図３に示す。
対照として、分化誘導を行わなかった（基本培地のみで培養した）無処置のもの（無処置群）、大豆発酵組成物の代わりに純水を添加した対照（対照群）、大豆発酵組成物の代わりにトリグリタゾン（ＴＧＺ）を添加した陽性対照（陽性対照（ＴＧＺ）群）も同様の試験を行った。なお、前記大豆発酵エキスは、発酵抽出液を純水で１２８倍に希釈し、陽性対照として用いたＴＧＺは、３ｍｍｏｌ／Ｌの濃度に調整して細胞に添加した。
(Example 3: Adipocyte differentiation inducing action)
Mouse fibroblasts (3T3-L1, available from the Human Science Research Resource Bank), which are preadipocytes, are seeded at 3 × 10 4 cells / well in a 96-well microplate supplemented with a basic medium, at 37 ° C. The cells were cultured for 24 hours in a 5% CO 2 incubator. After confirming that the cells were confluent, the cells were further incubated for 2 days. The medium was removed and replaced with 90 μL of differentiation induction medium I (DMEM medium; 10 μg / mL insulin, 10% by weight fetal calf serum, 4.5 g / L glucose), and 10 μL of the soybean fermented composition obtained in Example 1 was replaced with 10 μL. Added. Culture was performed for 8 days while changing the medium to differentiation induction medium I containing each test substance every two days.
After the cells were washed twice with PBS (phosphate buffer), 10% (10-fold diluted) formalin was added and treated at room temperature for 10 minutes. After the cells were washed twice with PBS, an oil red O staining solution (manufactured by Sigma) was added and stained at room temperature for 20 minutes. Wash once with 60% by volume isopropanol, then twice with PBS, observe the accumulation of intracellular lipid droplets under a microscope, and consider the cells with intracellular lipid droplets as differentiated and matured adipocytes. Was taken. The results are shown in FIG.
As control, differentiation induction was not performed (cultured only with the basic medium) (non-treatment group), a control (control group) in which pure water was added instead of the soybean fermentation composition, and the soybean fermentation composition A similar test was performed for a positive control (positive control (TGZ) group) to which triglitazone (TGZ) was added instead. The fermented soybean extract was diluted 128-fold with pure water with pure water, and TGZ used as a positive control was adjusted to a concentration of 3 mmol / L and added to the cells.
図３より、インスリンを含まない基本培地のみで前駆脂肪細胞を培養した無処置群では、脂肪細胞への分化は認められなかった（図３Ａ参照）のに対し、インスリン含有培地で培養した対照群では細胞内に脂肪滴を蓄積した分化脂肪細胞が認められた（図３Ｂ参照）。一方、インスリン含有培地に大豆発酵組成物を添加することにより、明らかに細胞内の脂肪滴蓄積量が増加し、大豆発酵組成物による脂肪細胞への分化の促進が認められた（図３Ｄ参照）。この効果は、陽性対照として用いたＴＧＺ ３ｍｍｏｌ／Ｌ（図３Ｃ参照）よりも強い作用であった。 From FIG. 3, in the untreated group in which the preadipocytes were cultured only in the basic medium not containing insulin, differentiation into adipocytes was not observed (see FIG. 3A), whereas in the control group cultured in the insulin-containing medium. Then, differentiated adipocytes in which lipid droplets accumulated in the cells were observed (see FIG. 3B). On the other hand, by adding the soybean fermentation composition to the insulin-containing medium, the accumulation amount of lipid droplets in the cells was clearly increased, and the promotion of differentiation into adipocytes by the soybean fermentation composition was observed (see FIG. 3D). . This effect was stronger than TGZ 3 mmol / L (see FIG. 3C) used as a positive control.
（実施例４：脂肪細胞からのアディポネクチン誘導作用）
実施例３において、希釈倍率１２８倍、６４倍、３２倍、１６倍、８倍又は４倍の実施例１で得られた大豆発酵組成物を加えて培養した３Ｔ３−Ｌ１細胞の培養終了時に各ウェルの培養上清を回収し、含まれるアディポネクチン量をアディポネクチン測定キット（マウス・アディポネクチンＥＬＩＳＡキット；ＣｙｃＬｅｘ社製）を用いて定量した。結果を図４に示す。
なお、対照として、前記大豆発酵組成物の代わりに純水を添加した対照、並びに前記大豆発酵組成物の代わりに３ｍｍｏｌ／Ｌ又は１０ｍｍｏｌ／ＬのＴＧＺを添加した陽性対照も同様の試験を行った。
(Example 4: Adiponectin-inducing action from adipocytes)
In Example 3, at the end of the culture of 3T3-L1 cells cultured by adding the soybean fermented composition obtained in Example 1 at a dilution ratio of 128 times, 64 times, 32 times, 16 times, 8 times or 4 times. The culture supernatant of the wells was collected, and the amount of adiponectin contained was quantified using an adiponectin measurement kit (mouse adiponectin ELISA kit; manufactured by CycLex). The results are shown in FIG.
In addition, as a control, the same test was performed for a control in which pure water was added instead of the soybean fermentation composition and a positive control in which 3 mmol / L or 10 mmol / L TGZ was added instead of the soybean fermentation composition. .
図４より、大豆発酵組成物を添加して培養した３Ｔ３−Ｌ１細胞の培養上清では、高いアディポネクチンの産生量が認められた。この効果は、大豆発酵組成物の１２８倍希釈においても陽性コントロールであるＴＧＺ ３ｍｍｏｌ／Ｌ及び１０ｍｍｏｌ／Ｌと同程度であった。 From FIG. 4, a high production amount of adiponectin was observed in the culture supernatant of 3T3-L1 cells cultured with the soybean fermentation composition added. This effect was similar to TGZ 3 mmol / L and 10 mmol / L, which are positive controls, even when the soybean fermentation composition was diluted 128 times.
（実施例５：ＬＰＳ刺激マクロファージ細胞株（Ｒａｗ２６４）からのＴＮＦ−α産生抑制作用）
Ｒａｗ２６４細胞（理化学研究所バイオリソースセンターから入手可能）を２４ウェルのマイクロプレートに５×１０５個／ウェルで播種し、希釈倍率１６倍、８倍、４倍、２倍又は１倍の実施例１で得られた大豆発酵組成物を１／１０量の容量で加えて、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで２時間培養した。ＬＰＳ（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；シグマ社製）を０．０１μｇ／ｍＬの濃度で加え、更に１８時間〜２２時間培養した。培養後、各ウェルの培養上清を回収し、含まれるＴＮＦ−α量をＴＮＦ−α測定キット（レビスＴＮＦα−マウス；株式会社シバヤギ製）を用いて定量した。培養終了時にトリパンブルー（和光純薬工業株式会社製）染色により細胞のバイアビリティを確認し、細胞毒性が認められない濃度での評価を行った。結果を図５に示す。
なお、対照として、前記大豆発酵組成物の代わりに純水を添加した対照（ＬＰＳ刺激＋）、及びＬＰＳを添加しなかった対照（ＬＰＳ刺激−）も同様に評価した。
(Example 5: TNF-α production inhibitory action from LPS-stimulated macrophage cell line (Raw 264))
Raw 264 cells (available from RIKEN BioResource Center) are seeded in a 24-well microplate at 5 × 10 5 cells / well and diluted at a dilution factor of 16, 8, 4, 2, or 1 The soybean fermented composition obtained in 1) was added in a volume of 1/10, and cultured at 37 ° C. in a 5% CO 2 incubator for 2 hours. LPS (Lipopolysaccharide; manufactured by Sigma) was added at a concentration of 0.01 μg / mL, and further cultured for 18 to 22 hours. After the culture, the culture supernatant of each well was collected, and the amount of TNF-α contained was quantified using a TNF-α measurement kit (Levis TNFα-mouse; manufactured by Shiba Goat Co., Ltd.). At the end of the culture, the viability of the cells was confirmed by staining with trypan blue (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), and evaluation was performed at a concentration at which no cytotoxicity was observed. The results are shown in FIG.
In addition, the control (LPS stimulation +) which added the pure water instead of the said soybean fermentation composition as a control, and the control (LPS stimulation-) which did not add LPS were evaluated similarly.
図５より、Ｒａｗ２６４細胞をＬＰＳで刺激することによりＴＮＦ−αの産生誘導が認められた。一方、大豆発酵組成物を添加することにより、用量依存的なＴＮＦ−α産生抑制が認められた。 From FIG. 5, TNF-α production induction was observed by stimulating Raw264 cells with LPS. On the other hand, a dose-dependent suppression of TNF-α production was observed by adding the soybean fermentation composition.
（実施例６：３Ｔ３−Ｌ１とＲａｗ２６４の共培養によるアディポネクチン産生低下に対する抑制作用）
前記Ｒａｗ２６４細胞を５×１０５個／ｍＬに調整し、希釈倍率１２８倍、６４倍、３２倍、又は１６倍の実施例１で得られた大豆発酵組成物を加え、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで２時間処理した。実施例３と同様に９６ウェルのマイクロプレートで培養して分化させた３Ｔ３−Ｌ１細胞の各ウェルに大豆発酵組成物で処理したＲａｗ２６４細胞を５×１０４個／ウェルで重層し、４８時間培養した。培養後、各ウェルの培養上清を回収し、含まれるアディポネクチン量をアディポネクチン測定キット（マウス・アディポネクチンＥＬＩＳＡキット；株式会社サイクレックス製）を用いて定量した。測定値は、３Ｔ３−Ｌ１単独の培養上清の値を１００％とし、それに対する％を縦軸に示した。結果を図６に示す。
なお、対照として、前記大豆発酵組成物の代わりに純水を添加した対照（Ｒａｗ２６４＋）、及びＲａｗ２６４を重層しなかった対照（Ｒａｗ２６４−）も同様に評価した。
(Example 6: Inhibitory effect on reduction of adiponectin production by co-culture of 3T3-L1 and Raw264)
The raw 264 cells were adjusted to 5 × 10 5 cells / mL, and the soybean fermentation composition obtained in Example 1 at a dilution factor of 128, 64, 32, or 16 was added, and the mixture was added at 37 ° C., 5% CO 2. Treated for 2 hours in 2 incubators. Raw 264 cells treated with a soybean fermentation composition were layered at 5 × 10 4 cells / well in each well of 3T3-L1 cells cultured and differentiated in a 96-well microplate as in Example 3, and cultured for 48 hours. did. After the culture, the culture supernatant of each well was collected, and the amount of adiponectin contained was quantified using an adiponectin measurement kit (mouse adiponectin ELISA kit; manufactured by Cyclex Corporation). The measured value was 3% of 3T3-L1 alone, and the value of the culture supernatant was shown on the vertical axis. The results are shown in FIG.
In addition, the control (Raw264 +) which added the pure water instead of the said soybean fermentation composition as a control, and the control (Raw264-) which did not overlay Raw264 were evaluated similarly.
図６から、３Ｔ３−Ｌ１細胞とＲａｗ２６４細胞との共培養により、培養上清中のアディポネクチン量の低下が認められた。一方、大豆発酵組成物でＲａｗ２６４細胞を処理することにより、アディポネクチン産生量の低下抑制作用が認められた。 From FIG. 6, a decrease in the amount of adiponectin in the culture supernatant was observed by co-culture of 3T3-L1 cells and Raw 264 cells. On the other hand, by treating Raw 264 cells with a soybean fermented composition, an inhibitory effect on the decrease in adiponectin production was observed.
（実施例７：α−アミラーゼ阻害作用）
７Ｕ／ｍＬのα−アミラーゼ溶液（和光純薬工業株式会社製）５０μＬに希釈倍率３２０倍、１６０倍、８０倍、４０倍、２０倍、又は１０倍の実施例１で得られた大豆発酵組成物２０μＬを加え５分間処理した後、４質量％デンプン溶液５０μＬを加えた。７．５分間反応させた後、０．０１Ｎのヨウ素液５０μＬ、及び蒸留水１５０μＬを加え、波長４５０ｎｍで吸光度を測定した。大豆発酵組成物の代わりに同量の純水を使ったものを対照とし、阻害率は、下記式により算出した。結果を図７に示す。
α−アミラーゼ阻害率（％）＝｛（対照吸光度−検体吸光度）／対照吸光度｝×１００
(Example 7: α-amylase inhibitory action)
Soybean fermentation composition obtained in Example 1 with a dilution rate of 320 times, 160 times, 80 times, 40 times, 20 times, or 10 times in 50 μL of 7 U / mL α-amylase solution (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) After adding 20 μL of the product and treating for 5 minutes, 50 μL of 4% by weight starch solution was added. After reacting for 7.5 minutes, 50 μL of 0.01 N iodine solution and 150 μL of distilled water were added, and the absorbance was measured at a wavelength of 450 nm. A control using the same amount of pure water instead of the soybean fermented composition was used as a control, and the inhibition rate was calculated by the following formula. The results are shown in FIG.
α-amylase inhibition rate (%) = {(control absorbance−specimen absorbance) / control absorbance} × 100
図７から、大豆発酵組成物は、多糖類から二糖類に変換する酵素であるα−アミラーゼの活性を用量依存的に抑制することが分かった。即ち、食事によって取り込まれた多糖類は、二糖類に変換されることなく、更にグルコースに変換されることなく体外へ排出され、食後の血糖値の上昇が緩和されると考えられる。 From FIG. 7, it was found that the soybean fermented composition suppressed the activity of α-amylase, which is an enzyme that converts polysaccharides into disaccharides, in a dose-dependent manner. That is, it is considered that polysaccharides taken in by meals are excreted from the body without being converted into disaccharides and further without being converted into glucose, and the increase in blood glucose level after meals is alleviated.
（実施例８：α−グルコシダーゼ阻害作用）
０．０７Ｕ／ｍＬのα−グルコシダーゼ溶液（シグマ社製）５０μＬに希釈倍率８倍、４倍、又は２倍の実施例１で得られた大豆発酵組成物１０μＬを加え、５分間処理した後、ｐ−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ−α−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（ナカライテスク株式会社製）の５ｍｍｏｌ／Ｌ溶液５０μＬを加えた。５分間反応させた後、波長４０５ｎｍで吸光度を測定した。大豆発酵組成物の代わりに同量の純水を使ったものを対照とし、阻害率は下記式により算出した。結果を図８に示す。
α−グルコシダーゼ阻害率（％）＝｛（対照吸光度−検体吸光度）／対照吸光度｝×１００
(Example 8: α-glucosidase inhibitory action)
After adding 10 μL of the soybean fermented composition obtained in Example 1 at a dilution factor of 8 times, 4 times, or 2 times to 50 μL of a 0.07 U / mL α-glucosidase solution (manufactured by Sigma), the mixture was treated for 5 minutes. 50 μL of a 5 mmol / L solution of p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside (manufactured by Nacalai Tesque) was added. After reacting for 5 minutes, the absorbance was measured at a wavelength of 405 nm. A control using the same amount of pure water instead of the soybean fermented composition was used as a control, and the inhibition rate was calculated by the following formula. The results are shown in FIG.
α-glucosidase inhibition rate (%) = {(control absorbance−specimen absorbance) / control absorbance} × 100
図８から、大豆発酵組成物は、二糖類から単糖のグルコースに変換する酵素であるα−グルコシダーゼの活性を用量依存的に抑制することが分かった。即ち、食事によって取り込まれた二糖類はグルコースに変換されることなく体外へ排出され、食後の血糖値の上昇が緩和されると考えられる。 From FIG. 8, it was found that the soybean fermented composition suppresses the activity of α-glucosidase, which is an enzyme that converts disaccharide to monosaccharide glucose, in a dose-dependent manner. That is, it is considered that disaccharides taken in by meals are discharged out of the body without being converted to glucose, and the increase in blood glucose level after meals is alleviated.
（実施例９：デンプン負荷マウスの血中グルコース濃度上昇抑制作用）
予備飼育した７週齢の雄性ＩＣＲマウス（日本エスエルシー株式会社から入手可能）を、２０時間絶食させた後、蒸留水に懸濁した実施例１で得られた大豆発酵組成物１００ｍｇ／ｋｇ又は３００ｍｇ／ｋｇとデンプンとを胃ゾンデを用いて強制経口投与した。対照群には蒸留水を同様に投与した。デンプンは、２ｇ／ｋｇで経口投与し、投与３０分間、６０分間、１２０分間後に非麻酔下尾静脈より採血し、直接血糖測定器(エキストラ、アボットジャパン株式会社製)を用いて血中グルコース濃度を測定した。得られた値は、平均値±標準偏差で表記した。対照群と被験物質投与群間における統計学的な差の検定は、Ｄｕｎｎｅｔの多重比較検定法を用いて行った。検定での有意水準は５％未満とし、図中には、＊：５％未満で表示した。結果を図９に示す。
(Example 9: Suppressing effect on increase in blood glucose level of starch-loaded mice)
A pre-bred 7-week-old male ICR mouse (available from Japan SLC Co., Ltd.) was fasted for 20 hours and then suspended in distilled water, 100 mg / kg of the soybean fermented composition obtained in Example 1 or 300 mg / kg and starch were orally administered by gavage using a stomach tube. Distilled water was similarly administered to the control group. Starch is orally administered at 2 g / kg, blood is collected from the unanesthetized tail vein 30 minutes, 60 minutes, and 120 minutes after administration, and blood glucose concentration is directly measured using a blood glucose meter (Extra, manufactured by Abbott Japan Co., Ltd.). Was measured. The obtained value was expressed as an average value ± standard deviation. Statistical differences between the control group and the test substance-administered group were tested using Dunnet's multiple comparison test. The significance level in the test was less than 5%, and *: less than 5% was shown in the figure. The results are shown in FIG.
図９から、多糖類であるデンプンを投与することにより、投与３０分間後では急激な血中グルコース濃度の上昇が認められた。これは、体内の酵素であるアミラーゼ、及びグルコシダーゼによりデンプンがグルコースに分解され腸管より吸収されたことによると考えられる。一方、デンプンと同時に大豆発酵組成物を投与することにより、投与６０分間後では有意な血中グルコース濃度上昇の抑制が認められた。このことから、大豆発酵組成物により、食後の急激な血糖値の上昇が緩和され、グルコースによる血管障害が抑制されると考えられる。 From FIG. 9, a rapid increase in blood glucose concentration was observed 30 minutes after administration by administering starch, which is a polysaccharide. This is considered to be because starch was decomposed into glucose by amylase and glucosidase, which are internal enzymes, and absorbed from the intestinal tract. On the other hand, by administering the soybean fermentation composition simultaneously with starch, significant increase in blood glucose concentration was observed 60 minutes after administration. From this, it is considered that the rapid increase in blood glucose level after eating is alleviated by the soybean fermented composition, and the vascular injury due to glucose is suppressed.
（実施例１０：ＤＰＰ−ＩＶ阻害作用）
実施例１で得られた大豆発酵組成物について、希釈倍率３２倍、１６倍、８倍、４倍、２倍、又は１倍のＤＰＰ−ＩＶ阻害活性をＤＰＰ−ＩＶ阻害活性測定キット（ＤＰＰ−ＩＶ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ；Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社製）を用いて付属のプロトコルに準じて測定した。対照には、同量の純水を用い、ＤＰＰ−ＩＶ阻害率は、下記式により算出した。結果を図１０に示す。
ＤＰＰ−ＩＶ阻害率（％）＝｛（対照吸光度−検体吸光度）／対照吸光度｝×１００
(Example 10: DPP-IV inhibitory action)
With respect to the soybean fermented composition obtained in Example 1, the DPP-IV inhibitory activity measurement kit (DPP-) having a dilution factor of 32 times, 16 times, 8 times, 4 times, 2 times, or 1 time was determined. IV Inhibitor Screening Assay Kit (manufactured by Cayman Chemical) was measured according to the attached protocol. As a control, the same amount of pure water was used, and the DPP-IV inhibition rate was calculated by the following formula. The results are shown in FIG.
DPP-IV inhibition rate (%) = {(control absorbance−specimen absorbance) / control absorbance} × 100
図１０から、大豆発酵組成物は、用量依存的にＤＰＰ−ＩＶの酵素活性を抑制することが分かった。これにより、大豆発酵組成物は、インスリン誘導ホルモンの分解を抑制し、インスリン量を増加させることにより血中のグルコース濃度を低下させると考えられる。 From FIG. 10, it was found that the soybean fermented composition inhibits the enzyme activity of DPP-IV in a dose-dependent manner. Thereby, it is thought that a soybean fermented composition reduces the glucose level in blood by suppressing the decomposition | disassembly of an insulin induction hormone and increasing the amount of insulin.
（実施例１１：ＡＧＥ生成抑制作用）
実施例１で得られた大豆発酵組成物について、希釈倍率４倍、２倍、又は１倍のＡＧＥ生成阻害率を以下の方法により測定した。
１０質量％グリシン（和光純薬工業株式会社製）４５０μＬ、１０質量％グルコース（和光純薬工業株式会社製）４５０μＬ及び被験物質１００μＬを混合して６０℃反応させた。２４時間反応させた後、波長４５０ｎｍで吸光度を測定した。対照には同量の純水を用い、ＡＧＥ生成阻害率は、次の式により算出した。結果を図１１に示す。
ＡＧＥ生成阻害率（％）＝｛（対照吸光度−検体吸光度）／対照吸光度｝×１００
(Example 11: AGE production inhibitory action)
About the soybean fermented composition obtained in Example 1, the dilution rate of 4 times, 2 times, or 1 time was measured by the following method.
450 μL of 10 mass% glycine (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 450 μL of 10 mass% glucose (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 100 μL of the test substance were mixed and reacted at 60 ° C. After reacting for 24 hours, the absorbance was measured at a wavelength of 450 nm. The same amount of pure water was used as a control, and the AGE production inhibition rate was calculated by the following formula. The results are shown in FIG.
AGE production inhibition rate (%) = {(control absorbance−sample absorbance) / control absorbance} × 100
図１１から、大豆発酵組成物は、グリシンとグルコースとの非酵素的糖化反応によって合成されるＡＧＥ生成を用量依存的に抑制することが分かった。即ち、大豆発酵組成物は、糖尿病の高血糖状態において多量に生成されるＡＧＥを抑制することにより、血管障害に起因する糖尿病合併症の発症及び進展を抑制すると考えられる。 From FIG. 11, it was found that the soybean fermented composition dose-dependently suppresses AGE production synthesized by a non-enzymatic saccharification reaction between glycine and glucose. That is, it is considered that the fermented soybean composition suppresses the onset and development of diabetic complications resulting from vascular disorders by suppressing AGEs that are produced in large amounts in the hyperglycemic state of diabetes.
（実施例１２：酸化ストレスによる細胞障害に対する保護作用）
マウス線維芽細胞（３Ｔ３−Ｌ１；ヒューマンサイエンス研究資源バンクから入手可能）、又はラット副腎褐色腫細胞（ＰＣ−１２；ヒューマンサイエンス研究資源バンクから入手可能）を、基本培地を添加した９６ウェルのマイクロプレートに１×１０5個／ウェルで播種し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで２４時間培養した。ＰＣ−１２については、神経成長因子(ＮＧＦ；ＳＩＧＭＡ社製)を５０ｎｇ／ｍＬの濃度となるように細胞に添加して培養し、神経細胞に分化させた。
培養後、細胞を無血清のＤＭＥＭ培地８０μＬに置換し、実施例１で得られた大豆発酵組成物を１０μＬ添加し、１時間培養した。
酸化ストレス誘導剤として２０ｍｍｏｌ／Ｌの２，２’−Ａｚｏｂｉｓ（２−ａｍｉｄｉｎｏｐｒｏｐａｎｅ）Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＡＡＰＨ；フナコシ株式会社製）を１０μＬ添加し、更に３時間培養した。
培養後、細胞の生存率をＣｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ｋｉｔ Ｉ（ＭＴＴ）（Ｒｏｃｈｅ社製）を用いたＭＴＴ法により求めた。結果を図１２Ａ及び図１２Ｂに示す。
なお、対照として、前記大豆発酵組成物の代わりに純水を添加した対照（ＡＡＰＨ＋）、及びＡＡＰＨを添加しなかった対照（ＡＡＰＨ−）も同様に評価した。
(Example 12: Protective action against cell damage caused by oxidative stress)
Mouse fibroblasts (3T3-L1; available from the Human Sciences Research Resource Bank) or rat adrenal pheochromocytoma cells (PC-12; available from the Human Sciences Research Resource Bank) were added to a 96-well microscopic medium supplemented with basal media. The plate was seeded at 1 × 10 5 cells / well and cultured at 37 ° C. in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. For PC-12, nerve growth factor (NGF; manufactured by SIGMA) was added to the cells to a concentration of 50 ng / mL, cultured, and differentiated into nerve cells.
After culturing, the cells were replaced with 80 μL of serum-free DMEM medium, 10 μL of the soybean fermented composition obtained in Example 1 was added, and cultured for 1 hour.
As an oxidative stress inducer, 10 μL of 20 mmol / L 2,2′-Azobis (2-amidinopropane) Dihydrochloride (AAPH; manufactured by Funakoshi Co., Ltd.) was added and further cultured for 3 hours.
After culturing, the cell viability was determined by the MTT method using Cell Proliferation Kit I (MTT) (Roche). The results are shown in FIGS. 12A and 12B.
In addition, the control (AAPH +) which added the pure water instead of the said soybean fermentation composition as a control, and the control (AAPH-) which did not add AAPH were evaluated similarly.
図１２Ａは、大豆発酵組成物を添加した培地でＰＣ−１２細胞を培養し、酸化ストレスを与えたときの細胞生存率（％）を示し、図１２Ｂは、大豆発酵組成物を添加した培地で３Ｔ３−Ｌ１細胞を培養し、酸化ストレスを与えたときの細胞生存率（％）を示す。
図１２Ａ及び図１２Ｂより、ＡＡＰＨによる酸化ストレス負荷により細胞生存率の低下が認められた。大豆発酵組成物を添加することにより用量依存的な細胞生存率の増加が認められ、活性酸素による細胞障害から細胞を保護する作用が示された。このことから、糖尿病における酸化ストレスによって誘導される動脈硬化症、白内障、腎障害、神経障害などの糖尿病合併症の発症及び進展を抑制することが示された。更に、Ｉ型糖尿病の発症におけるβ細胞の障害を抑制することが示された。
FIG. 12A shows the cell viability (%) when PC-12 cells were cultured in a medium supplemented with a soybean fermentation composition and subjected to oxidative stress, and FIG. 12B shows a medium supplemented with a soybean fermentation composition. The cell survival rate (%) when 3T3-L1 cells are cultured and oxidative stress is applied is shown.
From FIG. 12A and FIG. 12B, the fall of cell viability was recognized by the oxidative stress load by AAPH. A dose-dependent increase in cell viability was observed by adding the soybean fermentation composition, and the effect of protecting cells from cell damage caused by active oxygen was shown. From this, it was shown that the onset and progress of diabetic complications such as arteriosclerosis, cataract, renal disorder and neuropathy induced by oxidative stress in diabetes were suppressed. Furthermore, it has been shown to inhibit the damage of β cells in the development of type I diabetes.
（実施例１３：ストレプトゾトシン誘発Ｉ型糖尿病モデルにおける血糖値上昇抑制作用）
予備飼育した６週齢の雄性ＩＣＲマウス（日本エスエルシー株式会社から入手可能）を、２０時間絶食させた後、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ；シグマ社製）を１２０ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内投与した。ＳＴＺ投与４日後に非麻酔下、尾静脈より採血し、直接血糖測定器(エキストラ、アボットジャパン株式会社製)を用いて血中グルコース濃度を測定した。血糖値２５０ｍｇ／ｄＬ以上を示した個体について、膵臓β細胞破壊によるインスリン分泌障害性のＩ型糖尿病が誘発されたと判断し、実験に使用した。
血糖値が均等になるように各群５匹で群分けを行い、水道水で希釈して３％に調整した実施例１で得られた大豆発酵組成物を給水ビンに入れ飲水投与した。投与後７日及び１４日後に尾静脈より採血し、上記と同様の方法で血中グルコース濃度を測定した。得られた値は、平均値±標準偏差で表記した。対照群と被験物質投与群間における統計学的な差の検定は、Ｄｕｎｎｅｔの多重比較検定法を用いて行った。検定での有意水準は５％未満とし、図中には、＊：５％未満で表示した。結果を図１３に示す。
(Example 13: Suppressing effect on blood glucose level in streptozotocin-induced type I diabetes model)
Pre-bred 6-week-old male ICR mice (available from Japan SLC Co., Ltd.) were fasted for 20 hours, and streptozotocin (STZ; manufactured by Sigma) was administered intraperitoneally at a dose of 120 mg / kg. Four days after STZ administration, blood was collected from the tail vein under non-anaesthesia, and the blood glucose concentration was measured using a direct blood glucose meter (Extra, manufactured by Abbott Japan Co., Ltd.). An individual who showed a blood glucose level of 250 mg / dL or more was judged to have induced insulin secretion disorder type I diabetes due to pancreatic β cell destruction, and was used in the experiment.
Each group was divided into 5 groups so that the blood sugar level was uniform, and the soybean fermented composition obtained in Example 1 diluted with tap water and adjusted to 3% was placed in a water supply bottle and administered with drinking water. Seven days and 14 days after administration, blood was collected from the tail vein, and blood glucose concentration was measured in the same manner as described above. The obtained value was expressed as an average value ± standard deviation. Statistical differences between the control group and the test substance-administered group were tested using Dunnet's multiple comparison test. The significance level in the test was less than 5%, and *: less than 5% was shown in the figure. The results are shown in FIG.
図１３から、対照群ではＳＴＺ投与４日目以降においても血中グルコース濃度の上昇が認められたが、大豆発酵組成物を飲水投与した群では投与後の血糖値の上昇は認められなかった。投与７日後では、大豆発酵組成物を飲水投与した群は、対照群に比べ有意な抑制効果が認められた。このことからＩ型糖尿病において大豆発酵組成物はインスリン様活性を示し血糖値の上昇を抑制することが考えられる。 From FIG. 13, in the control group, an increase in blood glucose level was observed even after the 4th day of STZ administration, but in the group administered with the soy fermentation composition, no increase in blood glucose level was observed. Seven days after the administration, the group administered with the soy fermentation composition was drastically suppressed as compared with the control group. This suggests that the fermented soybean composition exhibits insulin-like activity and suppresses the increase in blood glucose level in type I diabetes.
実施例３〜１１、及び１３から、本発明の大豆発酵組成物は血糖値上昇抑制に対する多面的な作用を示すことが分かった。また、実施例１２から、糖尿病における酸化ストレスによって誘導される合併症の発症及び進展を抑制することが分かった。したがって、本発明の大豆発酵組成物が糖尿病及び糖尿病合併症の治療、改善、又は予防に効果的に働くことが示された。 From Examples 3 to 11 and 13, it was found that the soybean fermented composition of the present invention exhibits a multifaceted action for suppressing an increase in blood glucose level. Moreover, from Example 12, it turned out that the onset and progress of the complication induced by the oxidative stress in diabetes are suppressed. Therefore, it was shown that the soybean fermented composition of the present invention works effectively for the treatment, amelioration, or prevention of diabetes and diabetic complications.
本発明の大豆発酵組成物は、副作用がなく、安全性が高く、抗糖尿病において異なった作用機序を併せ持つので、Ｉ型糖尿病やＩＩ型糖尿病を効果的、かつ安全に治療、改善、又は予防することができる。また、酸化ストレスによって誘導される動脈硬化症、白内障、腎障害、神経障害などの糖尿病合併症の発症及び進展を抑制することができる。したがって、前記大豆発酵組成物は、抗糖尿病組成物及び飲食品として好適に利用される。
The soybean fermented composition of the present invention has no side effects, high safety, and has different mechanisms of action in anti-diabetes, so that type I diabetes and type II diabetes can be effectively, safely treated, improved, or prevented. can do. In addition, the onset and progress of diabetic complications such as arteriosclerosis, cataract, renal disorder, and neuropathy induced by oxidative stress can be suppressed. Therefore, the soybean fermented composition is suitably used as an antidiabetic composition and a food and drink.
Claims (13)
モロヘイヤ抽出物とを含有し、
前記大豆発酵抽出物が、エタノール水溶液で抽出されてなる大豆発酵組成物を含有することを特徴とする脂肪細胞の分化誘導用組成物。 A soybean fermented extract extracted from a fermented soy bean fermented with a solid fraction of soybean grind,
Containing moroheiya extract,
A composition for inducing differentiation of adipocytes, wherein the soybean fermented extract contains a soybean fermented composition extracted with an aqueous ethanol solution.
モロヘイヤ抽出物とを含有し、
前記大豆発酵抽出物が、エタノール水溶液で抽出されてなる大豆発酵組成物を含有することを特徴とするアディポネクチンの産生誘導又は産生量の低下抑制用組成物。 A soybean fermented extract extracted from a fermented soy bean fermented with a solid fraction of soybean grind,
Containing moroheiya extract,
A composition for inducing production of adiponectin or suppressing a decrease in production, wherein the fermented soybean extract contains a soy fermentation composition extracted with an aqueous ethanol solution.
モロヘイヤ抽出物とを含有し、
前記大豆発酵抽出物が、エタノール水溶液で抽出されてなる大豆発酵組成物を含有することを特徴とするＴＮＦ−αの産生抑制用組成物。 A soybean fermented extract extracted from a fermented soy bean fermented with a solid fraction of soybean grind,
Containing moroheiya extract,
A composition for inhibiting production of TNF-α, wherein the soybean fermented extract contains a soybean fermented composition extracted with an aqueous ethanol solution.
モロヘイヤ抽出物とを含有し、
前記大豆発酵抽出物が、エタノール水溶液で抽出されてなる大豆発酵組成物を含有することを特徴とするα−アミラーゼの酵素活性阻害用組成物。 A soybean fermented extract extracted from a fermented soy bean fermented with a solid fraction of soybean grind,
Containing moroheiya extract,
The composition for inhibiting enzyme activity of α-amylase, wherein the soybean fermented extract contains a soybean fermented composition extracted with an aqueous ethanol solution.
モロヘイヤ抽出物とを含有し、
前記大豆発酵抽出物が、エタノール水溶液で抽出されてなる大豆発酵組成物を含有することを特徴とするジペプチジルペプチダーゼ−ＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）の酵素活性阻害用組成物。 A soybean fermented extract extracted from a fermented soy bean fermented with a solid fraction of soybean grind,
Containing moroheiya extract,
The composition for inhibiting enzyme activity of dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV), wherein the soybean fermented extract contains a soybean fermented composition extracted with an aqueous ethanol solution.
モロヘイヤ抽出物とを含有し、
前記大豆発酵抽出物が、エタノール水溶液で抽出されてなる大豆発酵組成物を含有することを特徴とする終末糖化産物群（ＡＧＥ）の生成抑制用組成物。 A soybean fermented extract extracted from a fermented soy bean fermented with a solid fraction of soybean grind,
Containing moroheiya extract,
A composition for inhibiting production of advanced glycation end products (AGE), wherein the soy fermentation extract contains a soy fermentation composition extracted with an aqueous ethanol solution.
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| JP2005080655A (en) * | 2003-09-10 | 2005-03-31 | Suetsuna Yoko | New composition containing isoflavone and activated oxygen inhibitor |
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Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
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