JP5960717B2 - 自閉症の診断、治療におけるバイオマーカーおよびその使用 - Google Patents
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Description
本発明は生体ペプチド、特に生体試料における生体ペプチドを分析するための方法、ならびに神経疾患および/または神経精神疾患、特に自閉症の診断に関連する方法に関する。本発明はさらに、自閉症の治療に関する。
医学の分野では、病理学的状態の診断または予後判定のためのおよび適用しようとする治療の有効性を評価するための新しい改善された生物学的マーカー(バイオマーカー)に対する一定の需要がある。一般的に、患者試料からのバイオマーカーの濃度は、統計学に関連して、病理学的状態の存在、重症度またはリスクの指標と見なされる。広く研究されたバイオマーカーのサブセットの一つは、血液、脳脊髄液または尿などの生体液中のペプチドである。生体試料中に存在する異なるペプチドの数は、分析の方法および試料のタイプに応じて、数十から数万まで多様である。従って、医学的に妥当性のある多くのペプチドバイオマーカーが未だに発見されていないことは明らかである。
このように、診断において有用な新しい生物学的マーカーを提供することが本発明の一つの目的である。例えば、診断目的のために、試料中、例えば、生体試料中の新規のマーカーの濃度を測定するための分析方法を提供することが、本発明のもう一つの目的である。さらに、特に自閉症、さらにはアスペルガー症候群、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、統合失調症、うつ病および双極性障害などの神経疾患および/または神経精神疾患を診断するための生物学的マーカーに基づく新しい改善された方法を提供することも、本発明の一つの目的である。本発明のさらにもう一つの目的は、単なる対症療法ではなく自閉症の疾患修飾性治療を提供することである。
− 診断される対象からの試料を用意するまたは得る工程;
− 該試料中の第一の局面のペプチドの濃度を測定する工程;および
− 該濃度を、健常な対照者からの同様の試料中の第一の局面のペプチドの濃度に基づく参照値と比較する工程
を含む、神経疾患または神経精神疾患の診断方法が提供され、
ここで、前記試料中の濃度が前記参照値よりも低いことが、神経疾患または神経精神疾患の存在を示唆する。
− 試料中の、配列:
を有するペプチドの濃度を測定する工程;ならびに
− 該濃度を、健常な対照者からの同様の試料中の同一のペプチドの濃度に基づく参照値と比較する工程
をさらに含み得、
ここで、前記試料中の濃度が前記参照値よりも高いことが、神経疾患または神経精神疾患の存在をさらに示唆する。
(a)診断される対象からの試料を用意するまたは得る工程;
(b)該試料中の補体因子Iの活性のレベルを測定する工程;および
(c)該活性を、健常な対照者からの同様の試料中の補体因子Iの活性のレベルに基づく参照値と比較する工程
を含む、自閉症の診断方法が提供され、
ここで、前記試料中の活性が前記参照値よりも高いことが、対象における自閉症の存在を示唆する。
(a)治療に先立って、対象における第一の局面に基づくバイオマーカーのレベルの基準値を測定する工程;
(b)評価される治療を該対象に施す工程;
(c)(b)に続いて、該対象における第一の局面のバイオマーカーのレベルを測定する工程;ならびに
(d)(a)および(c)で得られたレベルを比較する工程
を含む、対象における自閉症の治療の有効性を評価するための方法が提供され、
ここで、第一の局面に基づくバイオマーカーのレベルの増加が、治療に対する治療的応答を示唆する。
(a)治療に先立って、対象における補体因子I活性のレベルの基準値を測定する工程;
(b)評価すべき治療を該対象に施す工程;
(c)(b)に続いて、該対象における補体因子I活性のレベルを測定する工程;ならびに
(d)(a)および(c)で得られたレベルを比較する工程
を含む、対象における自閉症の治療の有効性を評価するための方法が提供され、
ここで、補体因子Iの活性の低下が、治療に対する治療的応答を示唆する。
[本発明1001]
アミノ酸配列NH 2 -SSKITHRIHWESASLLR * -COOH(SEQ ID NO:1)を有するペプチドであって、R * で示されるC末端残基が式(I)に表される側鎖を有する、ペプチド:
。
[本発明1002]
試料中の本発明1001に基づくペプチドの有無および/または濃度を測定する工程を含む、分析方法。
[本発明1003]
試料が生体試料である、本発明1002の方法。
[本発明1004]
生体試料が、血液試料、血漿試料、ヘパリン加血漿試料、EDTA-血漿試料、血清試料、尿試料、唾液試料、涙液試料、脳脊髄液試料、腹水試料、組織試料および生検材料からなる群より選択される、本発明1003の方法。
[本発明1005]
生体試料がヘパリン加血漿試料である、本発明1004の方法。
[本発明1006]
測定する工程が、MALDI-TOF、SELDI-TOF、LC-MSもしくはLC-MS/MSなどの質量分析法に基づく方法を用いて、またはELISA、RIA、FIAもしくはDELFIAなどの免疫化学的アッセイを用いて実施される、本発明1002〜1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
本発明1001のペプチドに特異的な抗体。
[本発明1008]
モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体である、本発明1007の抗体。
[本発明1009]
本発明1001のペプチドおよび/または本発明1007もしくは本発明1008の抗体を含む、診断における使用のための製品パッケージ。
[本発明1010]
プロテアーゼ阻害剤;本発明1001のペプチドの濃度を測定するための説明書;SEQ ID NO:2のペプチド;SEQ ID NO:3のペプチド;SEQ ID NO:2に特異的な抗体;SEQ ID NO:3に特異的な抗体の一つまたは複数をさらに含む、本発明1009の製品パッケージ。
[本発明1011]
(a)診断される対象からの試料を用意する工程;
(b)該試料中の本発明1001のペプチドの濃度を測定する工程;および
(c)該濃度を、健常な対照者からの同様の試料中の本発明1001のペプチドの濃度に基づく参照値と比較する工程
を含む、神経疾患または神経精神疾患の診断方法であって、
前記試料中の濃度が前記参照値よりも低いことが、神経疾患または神経精神疾患の存在を示唆する、方法。
[本発明1012]
(d)前記試料中の
の配列を有するペプチドの濃度を測定する工程;および
(e)該濃度を、健常な対照者からの同様の試料中の同一のペプチドの濃度に基づく参照値と比較する工程
をさらに含む、本発明1011の方法であって、
前記試料中の濃度が前記参照値よりも高いことが、神経疾患もしくは神経精神疾患の存在をさらに示唆する、本発明1011の方法。
[本発明1013]
濃度を測定する工程が本発明1002〜1006のいずれかの方法によって実施される、本発明1011〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
疾患が、自閉症、アスペルガー症候群、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、統合失調症、うつ病および双極性障害から選択される、本発明1011〜1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
疾患が自閉症である、本発明1014の方法。
[本発明1016]
診断方法における、本発明1001のペプチドの使用。
[本発明1017]
前記方法が自閉症の診断のためである、本発明1016の使用。
[本発明1018]
(a)診断される対象からの試料を用意する工程;
(b)該試料中の補体因子Iの活性のレベルを測定する工程;および
(c)該活性を、健常な対照者からの同様の試料中の該補体因子Iの活性のレベルに基づく参照値と比較する工程
を含む、自閉症の診断方法であって、
前記試料中の活性が前記参照値よりも高いことが、前記対象における自閉症の存在を示唆する、方法。
[本発明1019]
試料が、血液試料、血漿試料、ヘパリン加血漿試料、EDTA-血漿試料、血清試料、尿試料、唾液試料、涙液試料、脳脊髄液試料、腹水試料、組織試料および生検材料からなる群より選択される、本発明1018の方法。
[本発明1020]
本発明1015の方法を実施する工程、および結果を統合する工程をさらに含む、本発明1018または1019の方法。
[本発明1021]
本発明1018または1019の方法を実施する工程、および結果を統合する工程をさらに含む、本発明1015の方法。
[本発明1022]
それを必要とする対象に補体因子I阻害剤を投与する工程を含む、自閉症の治療方法。
[本発明1023]
補体因子I阻害剤が、6-アミジノ-2-ナフチルp-グアニジノベンゾエートジメタンスルホネート(FUT-175)、セルピン、ベンゼンスルホニルフルオライド、Pefabloc(登録商標)SC、スラミン、WAP型阻害剤、エラスターゼ特異的阻害剤(エラフィン)から選択される、本発明1022の方法。
[本発明1024]
自閉症の治療用の薬剤の製造のための、補体因子I阻害剤の使用。
[本発明1025]
補体因子I阻害剤が、6-アミジノ-2-ナフチルp-グアニジノベンゾエートジメタンスルホネート(FUT-175)、セルピン、ベンゼンスルホニルフルオライド、Pefabloc(登録商標)SC、スラミン、WAP型阻害剤、エラスターゼ特異的阻害剤(エラフィン)から選択される、本発明1024の使用。
[本発明1026]
自閉症の治療における使用のための補体因子I阻害剤。
[本発明1027]
6-アミジノ-2-ナフチルp-グアニジノベンゾエートジメタンスルホネート(FUT-175)、セルピン、ベンゼンスルホニルフルオライド、Pefabloc(登録商標)SC、スラミン、WAP型阻害剤、エラスターゼ特異的阻害剤(エラフィン)より選択される、本発明1026の使用のための補体因子I阻害剤。
[本発明1028]
スラミンである、本発明1026の使用のための補体因子I阻害剤。
[本発明1029]
FUT-175である、本発明1026の使用のための補体因子I阻害剤。
[本発明1030]
エラフィンである、本発明1026の使用のための補体因子I阻害剤。
[本発明1031]
(a)治療に先立って、対象における本発明1001のバイオマーカーのレベルのベースライン値を測定する工程;
(b)評価される治療を該対象に施す工程;
(c)(b)に続いて、該対象における本発明1001のバイオマーカーのレベルを測定する工程;ならびに
(d)(a)および(c)で得られたレベルを比較する工程
を含む、対象における自閉症の治療の有効性を評価するための方法であって、
本発明1001のバイオマーカーのレベルの増加が、治療的応答を示唆する、方法。
[本発明1032]
(a)治療に先立って、対象における補体因子I活性のレベルのベースライン値を測定する工程;
(b)評価される治療を該対象に施す工程;
(c)(b)に続いて、該対象における補体因子I活性のレベルを測定する工程;ならびに
(d)(a)および(c)で得られたレベルを比較する工程
を含む、対象における自閉症の治療の有効性を評価するための方法であって、
該補体因子Iの活性の低下が、治療的応答を示唆する、方法。
[本発明1033]
本発明1032の方法を実施する工程、および結果を統合する工程をさらに含む、本発明1031の方法。
[本発明1034]
本発明1031の方法を実施する工程、および結果を統合する工程をさらに含む、本発明1032の方法。
自閉症および自閉症スペクトラム障害(ASD)という用語は本発明の文脈において同一の意味を有して、DSM-IV基準(米国精神医学会精神障害の診断と統計の手引き:American Psychiatric Association Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders)に基づく自閉症の診断を指す。
新規の修飾されたペプチドバイオマーカー
第一の局面において、本発明はアミノ酸配列
を有する修飾されたペプチドを開示し、式中、R*で示されるC末端残基の側鎖はアルギニンに通常存在するNH2-C=NH分子を欠き、これによってR*残基の側鎖は式(I)に示される通りの構造を有する:
。
第二の局面において、本発明は、好ましくは生体試料における第一の局面のペプチドの有無および/または濃度を分析するための方法を開示する。分析は、質量分析法に基づく方法(MALDI-TOF、SELDI-TOF、LC-MS、LC-MS/MSなどを含む)または適切な公知の免疫化学的な方法(ELISA、RIA、DELFIAなどを含む)などの、このような分析に適した当技術分野において公知の任意の手段によって実施することができる。SELDI-TOFにおいて抗体でコーティングされたチップを用いるなど、分析のために免疫化学的方法と質量分析法に基づく方法とを組み合わせることも可能である。いくつかの場合において、試料は分析の前に濃縮または精製してもよい。濃縮は尿および脳脊髄液などの薄い試料において特に好ましい。このような濃縮および/または精製は、例えば、限外濾過(バイオマーカーの保持が望ましい場合は、好ましくは約1.0〜1.5kDの適切なMWカットオフを用いる;またはより高い分子量のタンパク質を除去するために約10kDのMWカットオフを用いることもできる)を用いることによって、タンパク質の選択的な沈殿によって、または試料中の液体のすべてまたは一部を蒸発させることによって実施することができる。クロマトグラフィーの技術も、試料を濃縮するためおよび精製を実施するための双方に有効である。pH 7におけるCM10表面への結合特性(実施例3)は、クロマトグラフィーによる精製スキームを最適化するための適切な起点を提供する。
第三の局面において、本発明は第一の局面のペプチドに特異的な抗体に関する。本明細書に示されるペプチド自体の開示を助けとして、当業者は本ペプチドに対する特異的なポリクローナルまたはモノクローナル抗体を得て、かつ特徴決定するために、当技術分野において周知の方法を応用することができる。
第四の局面において、第一の局面のペプチドおよび/または第三の局面の抗体を含む診断用の製品(キットなど)が開示される。好ましくは、診断用の製品は使用のための説明書;プロテアーゼ阻害剤;SEQ ID NO:2のペプチド;SEQ ID NO:3のペプチド;SEQ ID NO:2に特異的な抗体;SEQ ID NO:3に特異的な抗体の一つまたは複数をさらに含む。ペプチドは陽性対照/参照試料として用いられてよく、抗体は分析の免疫学的方法での使用のための検出試薬として用いられてよい。
第五の局面において、第一の局面のペプチドマーカーの測定に基づいて、好ましくは第二の局面の方法を用いて、神経疾患および/または神経精神疾患の診断方法が開示される。SEQ ID NO:1のペプチドマーカーは、WO/2004/079371に開示されるもののように公知の診断マーカー(好ましくはSEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3)の測定と好都合に組み合わせることができる。第一の局面のペプチドマーカーからの結果とさらなるマーカーを組み合わせると、改善された特性および/または感度を有する診断方法が提供される。
(a)診断される対象からの試料を用意するまたは得る工程;
(b)該試料中の補体因子Iの活性のレベルを測定する工程;および
(c)該活性を、健常な対照者からの同様の試料中の補体因子Iの活性のレベルに基づく参照値と比較する工程
を含む、自閉症の診断方法が提供され、
ここで、前記試料中の活性が前記参照値よりも高いことが、対象における自閉症の存在を示唆する。
Momeniらは、自閉症スペクトラム障害を有する小児が血漿中に高い補体因子I活性を有することを開示している(Autism Research and Treatment Volume 2012 (2012), Article ID 868576, doi:10.1155/2012/868576)(実施例6)。
第十一の局面において、
(a)治療に先立って、対象における第一の局面に基づくバイオマーカーのレベルのベースライン値を測定する工程;
(b)評価する治療を該対象に施す工程;
(c)(b)に続いて、該対象における第一の局面の該バイオマーカーのレベルを測定する工程;ならびに
(d)(a)および(c)で求められたレベルを比較する工程
を含む、対象における自閉症の治療の有効性を評価するための方法が提供され、
ここで、第一の局面に基づくバイオマーカーのレベルの上昇が、該治療に対する治療的応答を示唆する。
(a)治療に先立って、対象における補体因子I活性のレベルのベースライン値を測定する工程;
(b)評価される治療を該対象に施す工程;
(c)(b)に続いて、該対象における補体因子I活性のレベルを測定する工程;ならびに
(d)(a)および(c)で測定されたレベルを比較する工程
を含む、対象の自閉症の治療の有効性を評価するための方法が提供され、
ここで、補体因子Iの活性の低下が、治療に対する治療的応答を示唆する。
以下の実施例は非限定的と見なされるべきである。本明細書で用いられる参考資料は、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。
自閉症スペクトラム障害(ASD)を有するすべての小児は、自閉症の臨床専門家により検査を受けた。小児精神科医が、小児神経内科医または小児心理学者による検査も受けたすべての小児を調べた。すべての立ち会い医はDSM-IV基準(米国精神医学会精神障害の診断と統計の手引き)に基づく自閉症の診断に同意した。対照群は、同一の地域から募集された、神経疾患および/または神経精神疾患の徴候を持たない健常な小児から構成された。検査時点で過去2週間に何らかの種類の感染症を有した対照小児は本試験から除外した。
静脈血を3mLヘパリン試験管(Vacutainer System; Becton-Dickinson Inc., Plymouth, UK)に採取して、直ちに4℃において1300gで10分間の遠心分離によって血漿を分離した。続いて、EDTA無添加の阻害剤カクテル(Thermo Scientific, USAからのHaltプロテアーゼ阻害剤)(10μL/mL血漿)および追加でPefablock SC(Pentapharm Ltd Switzerland)20μL/mLを、得られた血漿の試料に加えた。得られた血漿を少量ずつ小分けして、直ちにドライアイスで凍結処理して、その後、さらなる保管のために(−80℃)に移した。採血から凍結処理までの手順全体を20分以内に完了した。
CM10プロテインチップアレイ表面を、BioRadからの標準プロトコルに従って調製した。8スポットのCM10プロテインチップアレイ(COOH官能基を有する)を緩衝液(低ストリンジェントな0.1M酢酸ナトリウム、pH 4)100μLで5分間、平衡化して、1回、反復した。血漿希釈液(1:50希釈)の調製にはリン酸ナトリウム緩衝液(25mM、pH- 7.0)を使用した。希釈した血漿をバイオプロセッサーのウェルに適用した。チップアレイを強振盪しながら45分間、インキュベートした。インキュベート後、試料を150μLの25mMリン酸ナトリウム緩衝液、pH-7(希釈の緩衝液と同一)で3回洗浄処理して、その後、150μLの1mM HEPES(N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N'-2-エタンスルホン酸)、pH 7で2回、素早くすすいだ。チップアレイをバイオプロセッサーから回収して、風乾した。その後、飽和CHCA(25mg/mL)の0.8μLを各スポットに加えて風乾させて、この工程をもう1回、反復した。その後、チップアレイをBioRadプロテインチップリーダーSELDIシステムパーソナルエディション(PCS 4000リーダー)により解析した。チップアレイの解析に先立って、約1000〜7000 Daの範囲の7つの異なるペプチドの混合物であるBioradの「オールインワンペプチド標準」を用いることによって外部較正を実施した。
実施例3の示差的に発現したバイオマーカーの構造を、MALDI-TOFTOF MSを用いることによって決定し、LC-FTICR MS/MSの情報によって確認した。関心対象のペプチド(SELDI-TOFによって同定されて、対照群と自閉症群で有意に異なったもの)を同定して配列を決定した。
実施例3で得られた結果(表I)の統計学的分析は、MedCalc(登録商標)ソフトウェア(MedCalc Software, Mariakerke, Belgium)などのコンピュータプログラムを用いて実施した。
この試験はMomeniら(Autism Research and Treatment Volume 2012 (2012), Article ID 868576, doi:10.1155/2012/868576)によって以前に刊行されている。該刊行物は参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。一部の重要な部分を以下に再現する。
6.1.1 参加者
ASDを有する30名の小児および典型的な対照小児30名が本試験に参加した。ASD群は男児23名および女児7名を含み、平均年齢は4.5歳(年齢範囲 3〜9歳)であった。対照群は男児13名および女児17名を含み、平均年齢は6.0歳(年齢範囲 3〜12歳)であった(表V)。
6.1.2.1 血液試料の採取
血液試料は小児科の看護師が採取して、自閉症と診断された小児からの血液試料は小児精神病の分野において特別な訓練を受けた小児精神科医の監督下にて採取された。静脈血を3mLのEDTA試験管(Vacutainer System; Becton-Dickinson Inc., Plymouth, UK)に採取して、その後、直ちに4℃において1,300gで10分間の遠心分離によって血漿を分離した。続いて、阻害剤カクテル(血漿1mL当たり30μL)を得られた血漿試料に加えた(カクテル阻害剤溶液:2.0M Tris、0.9M Na-EDTA、0.2Mベンズアミジン、92μM E-64、および48μM ペプスタチン;Sigma, St. Louis, Mich, USA)。血漿は−80℃で保存した。
蛍光発生基質の加水分解に基づく方法は、TsiftoglouおよびSim(Journal of Immunology, vol. 173, no.1, pp. 367-375, 2004)およびGuptaら(Journal of Autism and Developmental Disorders, vol. 26, no. 4, pp. 439-452, 1996)によって以前に説明されている。以下のアッセイ手順は、血漿中の補体因子I(fI)のアッセイに最適であることが見出された。血漿20μLを緩衝液(100mM リン酸緩衝液、pH 7.5、1mM EDTA、1mM DTTおよび1mM アジ化ナトリウムを含む)80μLと共に、温度平衡に達するように37℃で10分間、インキュベートした。続いて、25mMリン酸緩衝液、pH 7.4中、基質液(200μM Boc-Asp(OBz)-Pro-Arg-7-アミノ-4-メチルクマリン;Bachem, Bubendorf, Switzerland)100μLを加えて、混合液を37℃で60分間、インキュベートした(図9 参照)。反応を1.5M 酢酸 1mLの添加によって阻害して、7-アミノ-4-メチルクマリンの遊離を分光蛍光光度計(Hitachi-f 2000;λex;360nm;λem:440nm;スリット幅:2.5)で測定した。測定はすべて無作為化して二反復で実施した。基質の不在下での血漿の使用により、アッセイにおけるバックグラウンドの蛍光をモニターして、基質の存在下で得られる数値から引き算した。
血漿中fI活性は対数正規分布を示し、従って、ASD群と対照群の差の分析時には対数値を用いた。年齢(中央値の5歳を用いて二分した)および性別について調整するために、要因ANOVAを用いた。<0.05の値を統計学的に有意と判断した。Statistica 8.0(StatSoft(著作権)、Tulsa, Okla, USA)を用いた。血漿fI活性のアッセイ内およびアッセイ間の変動は、次式を用いて1回の測定の標準誤差(S方法)として表した:
式中、diはi回目の対の測定の差であり、nは差の数である。S方法は変動係数(%)として表された。
ASD群の小児の血漿fIが有意に高い活性を示した(幾何学平均(95%信頼限界):対照群:361(135〜967)に比べて、523(154〜1776);ANOVA P=0.015、年齢および性別について調整した;図10a)。
スラミン
自閉症と診断された患者に、週1回の静脈内注射当たり0.1gから開始して、スラミンを投与する。必要ならば、用量を0.1gずつ段階的に増量して注射1回当たり1gまで増量する。投与は、監督臨床医によって個別にさらに調整される。重度の副作用がある場合は、用量を下げるか治療を中断する。機能の改善は、上記の6.1.1で記載したパラダイムに基づいて週1回の評価によりベースラインと比較して追跡調査する。治療のコース期間中、ベースラインと比較して、機能における有意な改善を観察する。
自閉症と診断された患者にFUT-175を経口投与する。投与は0.1mg/kg/日(1日2回用量に分割)で開始して、必要ならば0.25mg/kg/日(1日2回または4回用量の分割)に、その後、0.5mg/kg/日(1日4回用量に分割)に増量する。投与は監督臨床医によって個別にさらに調整される。機能の改善は、上記の6.1.1で記載したパラダイムに基づいて週1回の評価によりベースラインと比較して追跡調査する。治療のコース期間中、ベースラインと比較して、機能における有意な改善を観察する。
自閉症と診断された患者に、10mgを1日2回から開始して、エラフィンを静脈内注射により投与する。必要ならば、用量は注射1回当たり20mg、100mg、200mgおよび続いて400mgまで増量する。投与は監督臨床医によって個別にさらに調整される。重度の副作用がある場合は、用量を下げる、または治療を中断する。機能の改善は、上記の6.1.1で記載したパラダイムに基づいて週1回の評価によりベースラインと比較して追跡調査する。治療のコース期間中、ベースラインと比較して、機能における有意な改善を観察する。
Claims (12)
- 試料中の請求項1に定義されるペプチドの有無および/または濃度を測定する工程を含む、分析方法。
- 試料が、血液試料、血漿試料、ヘパリン加血漿試料、EDTA-血漿試料、血清試料、尿試料、唾液試料、涙液試料、脳脊髄液試料、腹水試料、組織試料および生検材料からなる群より選択される生体試料である、請求項2記載の方法。
- 請求項1に定義されるペプチドに特異的な抗体。
- モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体である、請求項4記載の抗体。
- 請求項1に定義されるペプチドおよび/または請求項4もしくは請求項5に定義される抗体を含む、診断における使用のための製品パッケージ。
- プロテアーゼ阻害剤;請求項1に定義されるペプチドの濃度を測定するための説明書;SEQ ID NO:2のペプチド;SEQ ID NO:3のペプチド;SEQ ID NO:2に特異的な抗体;SEQ ID NO:3に特異的な抗体の一つまたは複数をさらに含む、請求項6記載の製品パッケージ。
- (a) 検査される対象からの試料を用意する工程;
(b) 該試料中の請求項1記載のペプチドの濃度を測定する工程;および
(c) 該濃度を、健常な対照者からの同様の試料中の請求項1記載のペプチドの濃度に基づく参照値と比較する工程
を含む、自閉症スペクトラム障害の検査方法であって、
該試料中の濃度が該参照値よりも低いことが、自閉症スペクトラム障害の存在を示唆する、方法。 - 請求項8または9記載の方法を実施する工程、および結果を統合する工程をさらに含む、
(a) 検査される対象からの試料を用意する工程;
(b) 該試料中の補体因子Iの活性のレベルを測定する工程;および
(c) 該活性を、健常な対照者からの同様の試料中の補体因子Iの活性のレベルに基づく参照値と比較する工程
を含む、自閉症スペクトラム障害の検査方法であって、
該試料中の活性が該参照値よりも高いことが、該対象における自閉症スペクトラム障害の存在を示唆する、方法。 - (a) 治療に先立って、対象における請求項1に定義されるペプチドのレベルのベースライン値を測定する工程;
(b) 評価される治療が対象に施された後、該対象における請求項1に定義されるペプチドのレベルを測定する工程;ならびに
(c) (a)および(b)で得られたレベルを比較する工程
を含む、対象における自閉症スペクトラム障害の治療の有効性を評価するための方法であって、
請求項1に定義されるペプチドのレベルの増加が、治療的応答を示唆する、方法。 - (a) 治療に先立って、対象における補体因子I活性のレベルのベースライン値を測定する工程;
(b) 評価される治療が対象に施された後、該対象における補体因子I活性のレベルを測定する工程;ならびに
(c) (a)および(b)で得られたレベルを比較する工程
を含み、
該補体因子Iの活性の低下が、治療的応答を示唆する方法を実施する工程、および結果を統合する工程をさらに含む、請求項11記載の方法。
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