JP5903968B2 - 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 - Google Patents
細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5903968B2 JP5903968B2 JP2012065937A JP2012065937A JP5903968B2 JP 5903968 B2 JP5903968 B2 JP 5903968B2 JP 2012065937 A JP2012065937 A JP 2012065937A JP 2012065937 A JP2012065937 A JP 2012065937A JP 5903968 B2 JP5903968 B2 JP 5903968B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell culture
- droplet
- functional layer
- culture substrate
- substrate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
(1)基材と、前記基材上に設けられた、細胞を培養するための機能性層とを有する細胞培養基材の評価方法であって、
機能性層の表面に液滴を供給する工程と、
供給した液滴にさらに液体を注入して液滴を拡張させるか又は供給した液滴から液体を吸引して液滴を収縮させる工程と、
拡張又は収縮する液滴の接触角を測定する工程と、
を有し、
接触角が増大及び減少を繰り返す現象を観測し、その観測結果に基づいて機能性層の状態の評価を行う前記細胞培養基材の評価方法。
(3)機能性層が、温度変化により細胞接着性が変化する温度応答性ポリマーを含む上記(1)又は(2)に記載の細胞培養基材の評価方法。
(4)上記(1)〜(3)のいずれかに記載の評価方法を実施するための装置であって、
細胞培養基材が配置されるステージと、
ステージ上に配置された細胞培養基材の機能性層の表面に液滴を供給し、さらに供給した液滴に液体を注入し又は供給した液滴から液体を吸引するための液滴調節手段と、
液体の注入により拡張するか又は液体の吸引により収縮する液滴を撮影するための撮像手段と、
撮像手段により撮影した画像に基づき液滴の接触角を算出する接触角算出部と、
を有する細胞培養基材の評価装置。
準備した細胞培養基材について、上記(1)〜(3)のいずれかに記載の評価方法を実施する工程と、
を有し、
評価の結果、機能性層の状態が良と判定されたものとを製品とする細胞培養基材の製造方法。
(実施例1)
・細胞培養基材の製造
ポリ−N−イソプロピルアクリルアミド(アルドリッチ社)を2%含み、N−イソプロピルアクリルアミドを、最終モノマー濃度が40重量%となるようにイソプロピルアルコール(IPA)に溶解させて溶液を調製した。続いて、ポリスチレン製の基材を用い、この基材上に前記のN−イソプロピルアクリルアミド溶液をコーティングし、電子線照射装置を用いて電子線照射を行い、基材上にポリ−N−イソプロピルアクリルアミド(PIPAAm)からなる機能性層をグラフト重合により形成した。その後、この積層体を5℃のイオン交換水を用いて洗浄し、乾燥して細胞培養基材を得た。得られた細胞培養基材をエチレンガスオキサイド滅菌処理した。
製造した細胞培養基材を、接触角測定装置DM−501(商品名、協和界面科学社製)のステージに水平に載置し、ポリ−N−イソプロピルアクリルアミドの下限臨界溶解温度(T=32℃)未満である室温(25℃)において、機能性層の表面にマイクロシリンジの先端から純水1.5μLを滴下して液滴を形成した。続いて、この液滴にマイクロシリンジの先端を挿入した状態でさらに液体を注入し、液滴を拡張させた。拡張する液滴の様子を側方からCCDカメラで観測し、ソフトウェアFAMAS(商品名、協和界面科学社製)により液滴の接触角θ及び接触半径rを経時的に測定した。測定結果を図3及び図4に示す。また、温度条件をポリ−N−イソプロピルアクリルアミドの下限臨界溶解温度以上である40℃に設定し、上記と同様にして拡張する液滴の接触角θ及び接触半径rを経時的に測定した。測定結果を図5及び図6に示す。
最終モノマー濃度が35重量%となるように溶解させた溶液を用いて機能性層を形成した以外は、上記実施例1と同様にして室温及び40℃における液滴の接触角θ及び接触半径rを測定した。測定結果を図3〜図6に示す。
最終モノマー濃度が30重量%となるように溶解させた溶液を用いて機能性層を形成した以外は、上記実施例1と同様にして室温及び40℃における液滴の接触角θ及び接触半径rを測定した。測定結果を図3〜図6に示す。
何らポリマー等が固定化されていないポリスチレン製の基材を用いて、上記実施例1と同様の測定を行い、室温及び40℃における液滴の接触角θ及び接触半径rを求めた。測定結果を図3〜図6に示す。
10 基材
11 ステージ
12 液滴調節手段
13 温度調節手段
14 撮像手段
15a 接触角算出部
15b 接触半径算出部
16 光源
17 拡散板
20 機能性層
L、L1〜L3 液滴
S 針状管体
r 接触半径
θ 接触角
Claims (5)
- 基材と、前記基材上に設けられた、細胞を培養するための機能性層とを有する細胞培養基材の評価方法であって、
機能性層の表面に液滴を供給する工程と、
供給した液滴にさらに液体を注入して液滴を拡張させるか又は供給した液滴から液体を吸引して液滴を収縮させる工程と、
拡張又は収縮する液滴の接触角を測定する工程と、
を有し、
接触角が増大及び減少を繰り返すスティックスリップ現象を観測し、そのスティックスリップ現象の観測結果に基づいて機能性層の状態の評価を行う前記細胞培養基材の評価方法。 - 機能性層の状態の評価を、接触角が増大及び減少を繰り返す回数に基づいて行う請求項1に記載の細胞培養基材の評価方法。
- 機能性層が、温度変化により細胞接着性が変化する温度応答性ポリマーを含む請求項1又は2に記載の細胞培養基材の評価方法。
- 請求項1〜3のいずれかに記載の評価方法を実施するための装置であって、
細胞培養基材が配置されるステージと、
ステージ上に配置された細胞培養基材の機能性層の表面に液滴を供給し、さらに供給した液滴に液体を注入し又は供給した液滴から液体を吸引するための液滴調節手段と、
液体の注入により拡張するか又は液体の吸引により収縮する液滴を撮影するための撮像手段と、
撮像手段により撮影した画像に基づき液滴の接触角を算出する接触角算出部と、
を有する細胞培養基材の評価装置。 - 基材と、前記基材上に設けられた、細胞を培養するための機能性層とを有する細胞培養基材を準備する工程と、
準備した細胞培養基材について、請求項1〜3のいずれかに記載の評価方法を実施する工程と、
を有し、
評価の結果、機能性層の状態が良と判定されたものとを製品とする細胞培養基材の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012065937A JP5903968B2 (ja) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012065937A JP5903968B2 (ja) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013192544A JP2013192544A (ja) | 2013-09-30 |
JP5903968B2 true JP5903968B2 (ja) | 2016-04-13 |
Family
ID=49392236
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012065937A Active JP5903968B2 (ja) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5903968B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2899528B2 (en) * | 2014-01-24 | 2023-05-17 | Krüss GmbH | Contact angle measurement apparatus |
JP6511340B2 (ja) * | 2015-06-09 | 2019-05-15 | 大日本印刷株式会社 | 機能性層の評価方法 |
CN107505236A (zh) * | 2017-09-13 | 2017-12-22 | 宁波新边界科学仪器有限公司 | 一种具有新型液体分配方法的接触角测量方法及其装置 |
JP7057967B2 (ja) * | 2018-03-29 | 2022-04-21 | 大日本印刷株式会社 | 細胞培養装置 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3728686B2 (ja) * | 1997-06-05 | 2005-12-21 | アークレイ株式会社 | 有機高分子材料からなる液体保持具を製造する方法 |
JP5349728B2 (ja) * | 2003-10-09 | 2013-11-20 | 一般財団法人川村理化学研究所 | 細胞培養基材及び細胞培養方法 |
JP5496488B2 (ja) * | 2008-10-22 | 2014-05-21 | 学校法人東京女子医科大学 | 細胞パターン回収ツール |
JP4483994B1 (ja) * | 2009-02-26 | 2010-06-16 | 株式会社豊田中央研究所 | 細胞培養担体及びその利用 |
-
2012
- 2012-03-22 JP JP2012065937A patent/JP5903968B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2013192544A (ja) | 2013-09-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Lerman et al. | The evolution of polystyrene as a cell culture material | |
Zheng et al. | Precise control of cell adhesion by combination of surface chemistry and soft lithography | |
Cooperstein et al. | Biological cell detachment from poly (N-isopropyl acrylamide) and its applications | |
JP5942387B2 (ja) | 細胞培養容器及び培養細胞回収方法 | |
JP5903968B2 (ja) | 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 | |
Tekin et al. | Responsive microgrooves for the formation of harvestable tissue constructs | |
Sun et al. | Using self-polymerized dopamine to modify the antifouling property of oligo (ethylene glycol) self-assembled monolayers and its application in cell patterning | |
WO2020080364A1 (ja) | 細胞培養基材、細胞培養基材の製造方法、及びスフェロイドの製造方法 | |
JP5928008B2 (ja) | 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 | |
JP5849806B2 (ja) | 細胞培養基材の検査方法及び検査装置、並びに細胞培養基材の製造方法 | |
KR102465721B1 (ko) | 세포 배양 기재 | |
JP5849792B2 (ja) | 細胞培養基材の評価方法及び評価装置、並びに細胞培養基材の製造方法 | |
WO2010010837A1 (ja) | 細胞培養支持体および細胞培養方法 | |
Chen et al. | Engineering cell de-adhesion dynamics on thermoresponsive poly (N-isopropylacrylamide) | |
JP6060790B2 (ja) | 細胞培養用基材の製造方法 | |
JP5957850B2 (ja) | 細胞培養容器の製造方法 | |
Afzali et al. | Cell adhesion and migration on thickness gradient bilayer polymer brush surfaces: Effects of properties of polymeric materials of the underlayer | |
WO2014116874A1 (en) | Engineered physical alignment of stem cell-derived cardiomyocytes | |
Mancinelli et al. | Recreating cellular barriers in human microphysiological systems in-vitro | |
JP6349638B2 (ja) | 細胞培養基材の製造方法 | |
JP2013013328A (ja) | 折り畳み可能な構造体を含むデバイス | |
JP2019080561A (ja) | 多能性幹細胞培養用の多孔質基材及び多能性幹細胞の未分化維持培養方法 | |
JP5866983B2 (ja) | 細胞培養容器 | |
JP7183612B2 (ja) | 多能性幹細胞の培養基材及び多能性幹細胞の製造方法 | |
JP2014176308A (ja) | マイクロアレイ、その製造方法、及びその用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150123 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20151014 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20151027 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20151217 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160216 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160229 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5903968 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |