JP5826005B2 - 腸管出血性大腸菌検出用培地 - Google Patents
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従って、本発明の課題は、血清型によらず、腸管出血性大腸菌全般を選択的に検出できる培地を提供することにある。
また、本発明は、上記の培地に検体を接種し、培養後青色のコロニーを検出することを特徴とする腸管出血性大腸菌の検出方法を提供するものである。
(d)青色の色原体化合物を遊離し得るβ−ガラクトシダーゼ基質は腸管出血性大腸菌のコロニーの呈色性の点から、本発明培地の検出時の濃度として0.01〜1g/L含有するのが好ましく、0.05〜0.5g/L含有するのがより好ましい。
実施例1
(1)培地の作製
各培地組成を表1に示した。
本発明培地は1リットル使用量を1リットルの精製水に加え、100℃、20分間加温溶解し、約50℃になるまで冷却後、セフィキシム及び亜テルル酸カリウムを加えよく混合した後プラスチックシャーレ(90φmm)に20mlずつ分注して培地が固まるまで静置し本発明の腸管出血性大腸菌検出用培地を作製した。また対照品として本発明培地より乳糖を抜いたもの及びセロビオースを抜いたものをそれぞれ同様に作製した。
陽性コントロールとしてトリプトソイ寒天培地(TSA)は1リットル使用量を1リットルの精製水に加え、121℃、15分間高圧蒸気滅菌し良く撹拌後、プラスチックシャーレ(90φmm)に20mlずつ分注して培地が固まるまで静置した。
供試菌株はトリプトソイ寒天培地で24時間前培養したものを供試菌として用い、これを白金線を用いて画線塗抹により接種し、35℃、24時間培養後のコロニー色調を確認した。
結果を表2〜表4に示す。表中、TSAはトリプケース・ソイブイヨン培地を示す。また、乳糖抜き、セロビオース抜き等は、本発明培地(表1)から、それらの成分を抜いた培地であることを示す。
ここで乳糖は全ての大腸菌及びE.hermanniiの両方が利用できる糖であり、乳糖を加えた場合には全ての菌がピンク色の呈色をもたらす事が容易に推測できるにもかかわらず、低濃度の乳糖を加えた場合、腸管出血性大腸菌には全くピンク色の発色を認めず、青色の色原体化合物由来の発色のみが増強されたという事実は全く予測外であった。
Claims (4)
- (a)セフィキシム、(b)亜テルル酸塩、(c)胆汁酸又はその塩、(d)青色の色原体化合物を遊離し得るβ−ガラクトシダーゼ基質、(e)乳糖0.01〜2g/L(検出時の濃度)、及び(f)セロビオース5〜20g/L(検出時の濃度)を含有する腸管出血性大腸菌検出用培地。
- (d)青色の色原体化合物を遊離し得るβ−ガラクトシダーゼ基質が、青色の色原体化合物を遊離し得るβ−ガラクトピラノシドである請求項1記載の腸管出血性大腸菌検出用培地。
- 更に、ニュートラルレッドを検出時の濃度とし0.001〜0.008g/L含有する請求項1又は2記載の腸管出血性大腸菌検出用培地。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の培地に検体を接種し、培養後、青色のコロニーを検出することを特徴とする腸管出血性大腸菌の検出方法。
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