JP5818906B2 - 抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤 - Google Patents

Description

本発明は、抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤に関する。さらに詳しくは、本発明は、ＡＬＡ類を含む抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤に関する。

抗ガン剤は手術、放射線療法と並ぶがんの三大治療法の一つであるが、しばしば重篤な副作用を引き起こす。一般論として、強力な抗ガン剤ほど強い副作用がある。そのため、抗ガン剤の使用に関し、医師や患者は過酷な選択を迫られる。

このような背景から抗ガン剤の副作用を軽減する方法がいくつか提案されている。たとえば十全大補湯のような漢方薬を処方する方法、時間生物学に基づき抗ガン剤の投与のタイミングをコントロールする方法、抗ガン剤投与時に大量の輸液を行い臓器を保護する方法などが行われている。しかしながら、これらの方法によっても、抗ガン剤の副作用の軽減効果は十分でない。また、夜間の点滴や大量輸液などを行うには入院が必要となり、身体的にも医療経済的にもその負担は大きい。

また、抗ガン剤の副作用を軽減する方法として、副作用を低減可能な薬剤の開発も進められている。このような薬剤として、脳虚血の治療剤であるエダラボンにシスプラチンの腎機能に対する副作用軽減作用が認められ、非常に注目された。しかしながら、この薬剤は、開発中に腎不全による死亡例を含む重篤な副作用が見つかり上市には至らなかった。

そもそも、抗ガン剤の作用とは何であろうか。また、抗ガン剤の副作用が引き起こされるメカニズムとは、何であろうか。すでに多くの抗ガン剤が存在し、抗ガン剤の作用メカニズムが研究されている。多くの抗ガン剤はＤＮＡの複製や細胞周期を阻害することで抗ガン作用を示す。このような抗ガン剤は、生育の早いがん細胞に、より強い生育抑制効果を示す。しかしながら一方で、正常細胞にも同様の生育抑制効果を示すため、正常細胞の中でも生育の早い毛根や腸管にも障害を示す。これが、抗ガン剤の副作用の原因となる。

また、ある種の抗ガン剤は活性酸素種を発生することでがんを抑制、死滅させる。一方で、抗ガン剤により発生した活性酸素は少なからず正常細胞に害を示し、これが副作用の原因となる。この種の抗ガン剤の副作用を軽減する方法としては、抗酸化物質を与えることが考えられる。しかしながら、抗酸化物質は肝心の抗ガン剤の抗ガン効果を減じてしまうことは自明である。また、抗酸化物質は、この種の抗ガン剤の副作用の軽減はできても、他の種の抗ガン剤の副作用は軽減できないであろう。

以上のように強い抗ガン剤ほど副作用が大きい。逆に言うと副作用の少ない抗ガン剤はあまり抗ガン効果がない。また、抗ガン剤の副作用を抑える薬剤は抗ガン剤の抗ガン効果をも抑えてしまう。このジレンマを抜ける夢の抗ガン剤として分子標的薬が、鳴り物入りで登場した。しかしながら、イレッサでの間質性肺炎の例を見るまでもなく、分子標的薬もその副作用の問題から免れていない。また、分子標的薬は例外なくきわめて高価である。

このような背景から真に有効な抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の開発が、医師や患者から切望されてきた。また、真に有効な抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の開発が、高額の医療費にあえぐ社会的要請としても切望されてきた。

本発明の課題は、有効な抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を提供することにある。

本明細書において、ＡＬＡは、５−アミノレブリン酸を意味する。ＡＬＡは、δ−アミノレブリン酸ともいい、アミノ酸の１種である。ＡＬＡは、生体内の内在物質であり、ヘムの前駆体として知られている。ＡＬＡには様々な生理活性が知られており、がん等の診断や治療分野では、光動力学的治療（ＰＤＴ、Ｐｈｏｔｏ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｔｈｅｒａｐｙ）や光動力学的診断（ＰＤＤ、Ｐｈｏｔｏ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ）において広く用いられている。ＡＬＡはヘム系化合物の共通前駆体であるが、がん細胞においては、ＡＬＡを投与してもヘムが生成されず、ヘム系化合物の前駆体であるプロトポルフィリンＩＸ（ＰＰＩＸ）が蓄積することが知られている。蓄積したＰＰＩＸに光を照射すると蛍光を発するためにＰＤＤが可能となる。また、酸素存在下では、蓄積したＰＰＩＸに光を照射すると、活性酸素を発生するのでＰＤＴが可能となる。すなわち、ＡＬＡはＰＤＴの増感剤として抗ガン剤と関連するにすぎないのであり、抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤としてのＡＬＡの使用は、全く予想だにできない。

ＡＬＡは糖や脂質の代謝を向上させることが知られているが、抗ガン剤の副作用が糖や脂質の代謝に関係しているという報告はなく、抗ガン剤の副作用の予防や治療にＡＬＡが有効であるということは既存の情報から想像することはできない。

本発明者は、鋭意検討を重ね、ＡＬＡ類を含む抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を確立し、本発明を完成するに至った（もっとも、ＡＬＡ類がなぜ抗ガン剤の副作用軽減に有効なのかについての厳密な機序の解明は今後の科学上の課題である。）。

すなわち、本発明は、
抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤であって、
下記式（Ｉ）で示される化合物
（式中、Ｒ１は、水素原子又はアシル基を表し、Ｒ２は、水素原子、直鎖若しくは分岐状アルキル基、シクロアルキル基、アリール基又はアラルキル基を表す）
又はその塩
を含む
ことを特徴とする抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤に関する。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤は、さらに一種又は二種以上の金属を含有していてもよい。そのような金属は、鉄、マグネシウム、及び、亜鉛からなる群から選択されていてもよい。

また、前記抗ガン剤の副作用としては、いかなる抗ガン剤の副作用であってもよい。例えば、前記抗ガン剤の副作用は、腎臓に関する副作用、皮膚症状に関する副作用、全身症状に関する副作用、又は、消化管系に関する副作用であってもよい。また、前記抗ガン剤の副作用は、あらゆる抗ガン剤の副作用から、血液又は骨髄に関する副作用を除いたものであってもよい。

また、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤は抗ガン剤と併用することができる。

また、本発明は、さらに、（１）上記式（Ｉ）で示される化合物を含む抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤と（２）抗ガン剤、とを組み合わせてなる、がん治療用医薬に関する。これらの薬剤は同時又は異時に投与することができる。

本発明は、抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を提供する。本発明において、治療とは、抗ガン剤の副作用を完全に除去することのみならず、副作用の症状を改善することをも含む。予防についても、同様に、副作用の症状を完全に生じさせないことのみならず、本発明の予防剤を投与しなければ生じるであろう副作用の症状をより穏かなものとすることを含む。本発明の薬剤を使用することにより、優れた抗ガン剤の副作用の予防効果及び／又は治療効果を得ることができる。
また、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を投与することで、例えば、重篤な副作用のために、患者に対して、抗ガン剤を投与することが全くできない場合や標準的な量の抗ガン剤を投与することができない場合においても、当該患者に対して、標準的な量の抗がん剤投与が可能となり得る。このように、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を投与することで、抗ガン剤の本来の効果を最大限引き出すことができ、患者のＱＯＬの向上効果のみならず、患者の延命効果が期待し得る場合がある。
このように、本発明の薬剤は、抗ガン剤の治療を受ける患者にとって有益であるだけではなく、抗ガン剤の副作用によって生ずる社会的損失も軽減できる。

図１は、６週齢のＳＤラットにシスプラチンおよびＡＬＡを５つの投与条件により投与した際の、生存率の推移を投与条件ごとに示すグラフである。 図２は、６週齢のＳＤラットにシスプラチンおよびＡＬＡを５つの投与条件により投与した際の、実験開始日より１６日目における腎臓のＨＥ染色像である。 図３は、６週齢のＳＤラットに、シスプラチンおよびＡＬＡを４つの投与条件により投与した際の、体重の推移を投与条件ごとに示すグラフである。 図４は、６週齢のＳＤラットに、シスプラチンおよびＡＬＡを４つの投与条件により投与した際の、血清クレアチニンの推移を投与条件ごとに示すグラフである。 図５は、６週齢のＳＤラットに、シスプラチンおよびＡＬＡを４つの投与条件により投与した際の、尿素窒素（ＢＵＮ）の推移を投与条件ごとに示すグラフである。 図６は、６週齢のＳＤラットに、シスプラチンおよびＡＬＡを４つの投与条件により投与した際の、尿タンパク値の推移を投与条件ごとに示すグラフである。 図７は、６週齢のＳＤラットに、シスプラチンおよびＡＬＡを４つの投与条件により投与した際の、実験開始日より１６日目における腎臓を示す画像である。 図８は、Ｔ２４細胞（ヒト移行細胞膀胱癌細胞）に対するシスプラチンおよびＡＬＡの投与がＴ２４細胞の生存に与える影響を示すグラフである。 図９は、２５３Ｊ−ＢＶ細胞（ヒト尿路上皮癌細胞）に対するシスプラチンおよびＡＬＡの投与が２５３Ｊ−ＢＶ細胞の生存に与える影響を示すグラフである。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤としては、ＡＬＡ類を含有する抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤であれば特に制限されない。本発明の薬剤は、実施態様に応じて、適宜、抗ガン剤治療前に摂取することも、抗ガン剤治療と同時に摂取することも、抗ガン剤治療後に摂取することも、また、抗ガン剤副作用が生じた後に摂取することもできる。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を用いることにより、抗ガン剤の副作用が軽減され、それ故に、場合によっては、抗ガン剤の投与量を増加させることができる

また、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤は、抗ガン剤と組み合わせて、例えば合剤としても、また、キットとしても使用することもできる。

本発明において、抗ガン剤は、特に制限されない。このような抗ガン剤の限定的ではない例としては、白金含有抗腫瘍剤（シスプラチンなど）を挙げることができる。

本発明において、抗ガン剤の副作用とは、抗ガン剤による身体的な不具合全般を指す。抗ガン剤の副作用は多岐に渡る。そのような副作用の限定的ではない例としては、（１）ヘモグロビンの減少、溶血、貧血等の血液または骨髄に関する副作用、（２）脱力感、倦怠感、体重減少等の全身症状に関する副作用、（３）脱毛や発疹等の皮膚症状に関する副作用、（４）吐き気、悪心、便秘、下痢等の消化管系に関する副作用、（５）腎不全等の腎臓に関する副作用（腎毒性）、を挙げることができる。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤として用いる化合物は、ＡＬＡ類である。本明細書において、ＡＬＡ類とは、ＡＬＡ若しくはその誘導体又はそれらの塩をいう。

ＡＬＡ誘導体としては、下記式（Ｉ）で表される化合物を例示することができる。式（Ｉ）において、Ｒ１は、水素原子又はアシル基を表し、Ｒ２は、水素原子、直鎖若しくは分岐状アルキル基、シクロアルキル基、アリール基又はアラルキル基を表す。なお、式（Ｉ）において、ＡＬＡは、Ｒ１及びＲ２が水素原子の場合に相当する。

ＡＬＡ類は、生体内で式（Ｉ）のＡＬＡ又はその誘導体の状態で有効成分として作用すればよく、生体内の酵素で分解されるプロドラッグ（前駆体）として投与することもできる。

式（Ｉ）のＲ１におけるアシル基としては、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、オクタノイル、ベンジルカルボニル基等の直鎖又は分岐状の炭素数１〜８のアルカノイル基や、ベンゾイル、１−ナフトイル、２−ナフトイル基等の炭素数７〜１４のアロイル基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ２におけるアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル基等の直鎖又は分岐状の炭素数１〜８のアルキル基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ２におけるシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロドデシル、１−シクロヘキセニル基等の飽和、又は一部不飽和結合が存在してもよい、炭素数３〜８のシクロアルキル基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ２におけるアリール基としては、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル基等の炭素数６〜１４のアリール基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ２におけるアラルキル基としては、アリール部分は上記アリール基と同じ例示ができ、アルキル部分は上記アルキル基と同じ例示ができ、具体的には、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、フェニルブチル、ベンズヒドリル、トリチル、ナフチルメチル、ナフチルエチル基等の炭素数７〜１５のアラルキル基を挙げることができる。

好ましいＡＬＡ誘導体としては、Ｒ１が、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル基等である化合物が挙げられる。また、好ましいＡＬＡ誘導体としては、上記Ｒ２が、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル基等である化合物が挙げられる。また、好ましいＡＬＡ誘導体としては、上記Ｒ１とＲ２の組合せが、（ホルミルとメチル）、（アセチルとメチル）、（プロピオニルとメチル）、（ブチリルとメチル）、（ホルミルとエチル）、（アセチルとエチル）、（プロピオニルとエチル）、（ブチリルとエチル）の各組合せである化合物が挙げられる。

ＡＬＡ類のうち、ＡＬＡ又はその誘導体の塩としては、薬理学的に許容される酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩等を挙げることができる。酸付加塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩等の各無機酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、トルエンスルホン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、メタンスルホン酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩等の各有機酸付加塩を例示することができる。金属塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の各アルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウム塩等の各アルカリ土類金属塩、アルミニウム、亜鉛等の各金属塩を例示することができる。アンモニウム塩としては、アンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩等のアルキルアンモニウム塩等を例示することができる。有機アミン塩としては、トリエチルアミン塩、ピペリジン塩、モルホリン塩、トルイジン塩等の各塩を例示することができる。なお、これらの塩は使用時において溶液としても用いることができる。

以上のＡＬＡ類のうち、もっとも望ましいものは、ＡＬＡ、及び、ＡＬＡメチルエステル、ＡＬＡエチルエステル、ＡＬＡプロピルエステル、ＡＬＡブチルエステル、ＡＬＡペンチルエステル等の各種エステル類、並びに、これらの塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩である。とりわけ、ＡＬＡ塩酸塩、ＡＬＡリン酸塩を特に好適なものとして例示することができる。

上記ＡＬＡ類は、例えば、化学合成、微生物による生産、酵素による生産など公知の方法によって製造することができる。また、上記ＡＬＡ類は、水和物又は溶媒和物を形成していてもよく、またＡＬＡ類を単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることもできる。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤は、過剰症を生じない範囲で、さらに金属を含有するものが好ましく、かかる金属としては、本発明の効果に害を及ぼさない限り金属化合物を有利に用いることができる。本発明における金属としては、鉄、マグネシウム、亜鉛、ニッケル、バナジウム、コバルト、銅、クロム、モリブデンを挙げることができるが、鉄、亜鉛が好ましい。

鉄化合物としては、クエン酸第一鉄、クエン酸第一鉄ナトリウム、クエン酸鉄ナトリウム、クエン酸鉄アンモニウム、ピロリン酸第二鉄、ヘム鉄、デキストラン鉄、乳酸鉄、グルコン酸第一鉄、ジエチレントリアミン五酢酸鉄ナトリウム、ジエチレントリアミン五酢酸鉄アンモニウム、エチレンジアミン四酢酸鉄ナトリウム、エチレンジアミン五酢酸鉄アンモニウム、トリエチレンテトラアミン鉄、ジカルボキシメチルグルタミン酸鉄ナトリウム、ジカルボキシメチルグルタミン酸鉄アンモニウム、ラクトフェリン鉄、トランスフェリン鉄、塩化第二鉄、三二酸化鉄、鉄クロロフィリンナトリウム、フェリチン鉄、フマル酸第一鉄、ピロリン酸第一鉄、含糖酸化鉄、酢酸鉄、シュウ酸鉄、コハク酸第一鉄、コハク酸クエン酸鉄ナトリウム、硫酸鉄、硫化グリシン鉄等を挙げることができる。これらの中でも、クエン酸第一鉄やクエン酸第一鉄ナトリウムが好ましい。

亜鉛化合物としては、塩化亜鉛、酸化亜鉛、硝酸亜鉛、炭酸亜鉛、硫酸亜鉛、ジエチレントリアミン五酢酸亜鉛ジアンモニウム、エチレンジアミン四酢酸亜鉛ジナトリウム、亜鉛プロトポルフィリン、亜鉛含有酵母、グルコン酸亜鉛を挙げることができる。

上記金属は、それぞれ１種類又は２種類以上を用いることができ、金属の投与量としては、ＡＬＡ類の投与量に対してモル比で、０．０１〜１０倍量、好ましくは０．１〜５倍量、より好ましくは、０．２〜２倍量を挙げることができる。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤に含有されるＡＬＡ類と金属は、ＡＬＡ類と金属とを含む組成物としても、それぞれ単独でも投与することできるが、それぞれ単独で投与される場合でも同時に投与することが好ましい。しかし、厳密に、同時でなくともＡＬＡ類と金属との投与が相加的効果あるいは相乗的効果を奏することができるように、両者間で相当の間隔をおかずに行われるものであってもよい。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の投与経路としては、舌下投与も含む経口投与、あるいは吸入投与、点滴を含む静脈内投与、パップ剤等による経皮投与、座薬、又は経鼻胃管、経鼻腸管、胃ろうチューブ若しくは腸ろうチューブを用いる強制的経腸栄養法による投与等の非経口投与などを挙げることができるが経口投与が一般的である。
ここで、投与の対象は、典型的にはヒトであるが、愛玩動物、実験動物、家畜など非ヒト動物である場合も含む。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の剤型としては、上記経路投与に応じて適宜決定することができるが、注射剤、点滴剤、錠剤、カプセル剤、細粒剤、散剤、液剤、シロップ等に溶解した水剤、パップ剤、座薬剤等を挙げることができる。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を調製するために、必要に応じて、薬理学的に許容し得る担体、賦形剤、希釈剤、添加剤、崩壊剤、結合剤、被覆剤、潤滑剤、滑走剤、滑沢剤、風味剤、甘味剤、可溶化剤、溶剤、ゲル化剤、栄養剤等を添加することができ、具体的には、水、生理食塩水、動物性脂肪及び油、植物油、乳糖、デンプン、ゼラチン、結晶性セルロース、ガム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリアルキレングリコール、ポリビニルアルコール、グリセリンを例示することができる。なお、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を水溶液として調製する場合には、ＡＬＡ類の分解を防ぐため、水溶液がアルカリ性とならないように留意する必要があり、アルカリ性となってしまう場合は、酸素を除去することによって分解を防ぐこともできる。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の量・頻度・期間としては、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を利用しようとする者の年齢、体重、症状等により異なるが、好ましい投与量の例としては、成人一人当たり、４μｍｏｌ〜１３１００μｍｏｌ、好ましくは７μｍｏｌ〜４４００μｍｍｏｌ、より好ましくは１３μｍｏｌ〜３１００μｍｏｌ、さらに好ましくは２０μｍｏｌ〜８８０μｍｏｌを挙げることができる。もっとも、上記、好ましい投与量の範囲は、例示であって、限定するものではない。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の投与のタイミングとしては、抗ガン剤の投与を開始する少なくとも３日以上前から連続して本発明の薬剤を投与し、そして、抗ガン剤による治療継続中も本発明の薬剤の投与を続けるのがもっとも望ましい。しかし、抗ガン剤の投与を開始する時から本発明の薬剤の投与を開始し、そして、抗ガン剤による治療継続中も本発明の薬剤の投与を続けても、一定の効果が期待できる。さらには、抗ガン剤の投与を開始する前の期間にのみ本発明の薬剤を投与することでも、一定の効果が期待できる。
また、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を投与することで、例えば、重篤な副作用のために、患者に対して、抗ガン剤を投与することが全くできない場合や標準的な量の抗ガン剤を投与することができない場合においても、当該患者に対して、標準的な量の抗がん剤投与が可能となり得る。このように、本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤を投与することで、抗ガン剤の本来の効果を最大限引き出すことができ、患者のＱＯＬの向上効果のみならず、患者の延命効果が期待し得る場合がある。

本発明の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤は、他の既存の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤と組み合わせて使用することもできる。既存の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤の例としては、点滴による電解質の大量投与や十全大補湯などの漢方薬などが挙げられる。これらの薬剤とＡＬＡの抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤に関するメカニズムはそれぞれ根本的に異なると考えられるため、相加的な、場合によっては相乗的な効果が期待できる。

なお、本明細書において用いられる用語は、別段の定義が与えられていない限り、特定の実施態様を説明するために用いられるのであり、発明を限定する意図ではない。
また、本明細書において用いられる「含む」との用語は、文脈上明らかに異なる理解をすべき場合を除き、記述された事項（部材、ステップ、要素、数字など）が存在することを意図するものであり、それ以外の事項（部材、ステップ、要素、数字など）が存在することを排除しない。

別段の定義が無い限り、ここに用いられるすべての用語（技術用語及び科学用語を含む。）は、本発明が属する技術の当業者によって広く理解されるのと同じ意味を有する。ここに用いられる用語は、異なる定義が明示されていない限り、本明細書及び関連技術分野における意味と整合的な意味を有するものとして解釈されるべきであり、理想化され、又は、過度に形式的な意味において解釈されるべきではない。

以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。

抗ガン剤投与により生じる副作用に対する、ＡＬＡ類投与による副作用低減効果を確認するため、ラットに対してシスプラチンおよびＡＬＡを投与し、ラットへの影響について確認した。

ラットは、６週齢のＳＤラット（雄）を４４匹、日本エスエルシー株式会社より購入した。購入後、７日間馴化させてから実験に使用した。

実験期間は全１６日間とし、実験群をＡＬＡの投与条件により、下記のＩ〜Ｖの５群に分けた。ネガティブコントロール群（Ｉ群）を除く全ての実験群において、シスプラチン（ＣＤＤＰ）を、実験開始から第６日目に投与した。ＣＤＤＰの投与量は、８．０ｍｇ／ｋｇ体重とし、各ラットの腹腔内へ投与した。なお、ネガティブコントロール群として、Ｉ群にはシスプラチンの代わりに生理食塩水を投与した。また、ＩＩＩ群、ＶＩ群、Ｖ群については、下記スケジュールに沿って、ＡＬＡをも投与した。一方、ポジティブコントロール群（ＩＩ群）には、ＡＬＡを投与しなかった。なお、ＩＩＩ群、ＩＶ群、Ｖ群のＡＬＡの投与は、ＡＬＡ塩酸塩１０ｍｇ／ｋｇ体重＋クエン酸第一鉄ナトリウム１５．７ｍｇ／ｋｇ体重（蒸留水、重炭酸ナトリウムに溶解）を１日１回経口投与することにより行った。

（Ｉ群〜Ｖ群のＡＬＡ投与条件）
Ｉ群（ネガティブコントロール群）：実験開始より第６日目において、生理食塩水を投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝４
ＩＩ群（ポジティブコントロール群）：実験開始より第６日目において、ＣＤＤＰを投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝１０
ＩＩＩ群（「前投与群」）：実験開始日より第５日目までの計５日間ＡＬＡを投与した。また、第６日目においてＣＤＤＰを投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝１０
ＩＶ群（「後投与群」）：実験開始より第６日目において、ＡＬＡを投与し、その後に、ＣＤＤＰを投与した。また、第６日目〜第１５日目までの１０日間ＡＬＡを投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝９
Ｖ群（「全投与群」）：実験開始日より第１５日目までの１５日間、ＡＬＡを投与した。なお、第６日目においては、ＡＬＡを投与し、その後に、ＣＤＤＰを投与した。ｎ＝９

実験開始日より第１５日目までの１５日間において、２日に１度、採血を行った。また、ラットの毛つや、便状態、活動度についての観察を実施した。また、第１６日目に、各ラットの解剖を行い、腎臓を摘出した。摘出後に腎臓の切片を作成し、ＨＥ染色後、顕微鏡下で観察した。

本実験期間における各実験群のラットの生存率を図１に示す。図１に示すように、ポジティブコントロール群（ＩＩ群）においては、抗ガン剤の副作用により、実験開始日より第９日目に生存率の低下が見られた。これに対して、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群、Ｖ群）では、抗ガン剤による副作用により生存率の低下の開始時期が遅れた。また、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群、Ｖ群）では、第１６日目までの生存率の低下を抑制できたことが示されている。実験期間を通じてＡＬＡを投与した「全投与群」（Ｖ群）が、もっとも生存率が高かった。しかし、「前投与群」（ＩＩＩ群）や「後投与群」（ＩＶ群）であっても、抗ガン剤の副作用に対する一定の抑制効果が示された。したがって、抗ガン剤の副作用による生存率の低下に関して、ＡＬＡの投与による確実な治療効果および予防効果が示された。

第１６日目において各ラットより解剖にて摘出した腎臓をホルマリンにて固定後、切片を作成し、ＨＥ染色にて腎臓の状態を確認した。腎臓のＨＥ染色像を図２に示す。図２に示されるように、ＡＬＡの投与は、抗ガン剤の副作用による腎臓への障害を軽減している。実験期間を通じてＡＬＡを投与した「全投与群」（Ｖ群）が最も効果的であった。しかし、「前投与群」（ＩＩＩ群）および「後投与群」（ＩＶ群）でも一定の効果が示された。したがって、抗ガン剤の副作用による腎臓への障害に関して、確実な治療効果および予防効果が示された。

また、Ｉ群〜Ｖ群における各ラットの毛つや、便状態、および、活動度に関する評価を下記表１に示す。なお、実験開始日より第９日目から第１３日目まで副作用が強く観察された。このため、第９日目、第１１日目、第１３日目の状態を点数化して評価した。ここで、毛つやは皮膚症状に関する副作用を評価するものである。便状態は、消化管系に関する副作用を評価するものである。活動度は全身症状に関する副作用を評価するものであり、特に倦怠感に関する副作用を評価するものである。

なお、各項目は、マウス毎に下記基準にて評価し、第９日目、第１１日目、第１３日目の３日分を足した数値を評価対象のマウスの数で除したものである。
（毛つや）
５：非常に良い、４：通常状態、３：やや悪い、２：悪い、１：死亡
（便状態）
５：通常便、４：便が少ない、３：下痢ぎみ、２：下痢、１：死亡
（活動度）
５：通常状態、４：動きが弱い、３：ほとんど動かず、２：動かず、１：死亡
（総合評価）
５：非常に良い、４：通常状態、３：やや悪い、２：悪い、１：死亡

表１より明らかなように、ＡＬＡ投与は抗ガン剤により生じる様々な副作用に対して軽減作用があることが示された。実験期間を通じてＡＬＡを投与した「全投与群」（Ｖ群）が最も良好な結果を示した。しかし、「前投与群」（ＩＩＩ群）や「後投与群」（ＩＶ群）においても、一定の効果が示された。したがって、抗ガン剤の副作用に関して、ＡＬＡの投与による確実な治療効果及び予防効果が示された。

抗ガン剤投与による腎臓への副作用（腎毒性）に対する、ＡＬＡ類投与による副作用低減効果を確認するため、ラットに対してシスプラチンおよびＡＬＡを投与し、ラットの血清クレアチニン、尿素窒素値（ＢＵＮ）、尿タンパクへの影響について確認した。なお、血清クレアチニンおよび尿素窒素値（ＢＵＮ）は、血液サンプルから測定した。また、尿タンパクは、尿サンプルから測定した。
また、全身症状に対する副作用であり、かつ、消化管系に関する副作用でもある体重減少についても同時に観察した。

ラットは、６週齢のＳＤラット（雄）を４６匹、日本エスエルシー株式会社より購入した。購入後、７日間馴化させた。馴化期間終了時点において、各ラットの体重測定、採血、及び、採尿を行った。また、その翌日より４４匹にて実験を開始した。なお、馴化後の測定において血清クレアチニン、尿素窒素値（ＢＵＮ）、および、尿タンパクの値の悪い２個体を実験より排除した。

本実験においては、ＡＬＡの投与条件により、実験群を下記のＩ〜ＩＶの４群に分けた。それ以外は、実施例１と同様の方法により行った。

Ｉ群（ネガティブコントロール群）：実験開始より第６日目において、生理食塩水を投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝８
ＩＩ群（ポジティブコントロール群）：実験開始より第６日目において、ＣＤＤＰを投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝１４
ＩＩＩ群（「後投与群」）：実験開始より第６日目においてＡＬＡを投与し、その後にＣＤＤＰを投与した。また、第６日目〜第１５日目までの１０日間ＡＬＡを投与した。それ以外は、通常飼育を行った。ｎ＝１０
ＩＶ群（「全投与群」）：実験開始日より第１５日目までの１５日間、ＡＬＡを投与した。なお、第６日目においては、ＡＬＡを投与し、その後にＣＤＤＰを投与した。ｎ＝１１

実験開始日、第６日目、第７日目、第９日目、第１１日目、第１３日目、および、第１５日目に各ラットの体重を測定し、採血、および、採尿を実施した。採取した血液サンプルは、血清クレアチニン、尿素窒素値（ＢＵＮ）の測定に使用した。また、採取した尿サンプルは、尿タンパクの測定に使用した。また、第１６日目に、各ラットの解剖を行い、腎臓を摘出し観察した。

本実験期間における各実験群のラットの体重変動を図３に示す。図３に示されるように、ポジティブコントロール群（ＩＩ群）においては、抗ガン剤の副作用により、第１日目以降に体重の減少が見られた。これに対して、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群）では、抗ガン剤による副作用によって体重が減少するのが抑制された。さらに、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群）では、第５日目以降、再度体重の上昇が認められた。実験期間を通じてＡＬＡを投与した「全投与群」（ＩＶ群）が最も効果的であるが、「後投与群」（ＩＩＩ群）においても、一定の効果が示された。したがって、抗ガン剤の副作用である体重減少に関して、ＡＬＡの投与による確実な治療効果及び予防効果が示された。

本実験期間における各実験群のラットの血清クレアチニン値の変動を図４に示す。図４に示すように、ポジティブコントロール群（ＩＩ群）においては、抗ガン剤の副作用により、第３日目以降に血清クレアチニン量の急激な増加が見られた。一方、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群）では、抗ガン剤による副作用による血清クレアチニン値は第５日目に若干の上昇を見せたが、ほとんどネガティブコントロール群と変わらない値を維持した。

本実験期間における各実験群のラットの尿素窒素値（ＢＵＮ）の変動を図５に示す。図５に示すように、ポジティブコントロール群（ＩＩ群）においては、抗ガン剤の副作用により、第３日目以降に尿素窒素値（ＢＵＮ）の急激な増加が見られた。一方、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群）では、抗ガン剤による副作用による尿素窒素値は第５日目に若干の上昇を見せたが、ほとんどネガティブコントロール群と変わらない値を維持したことが示されている。

本実験期間における各実験群のラットの尿タンパクの値の変動を図６に示す。図６に示すように、ポジティブコントロール群（ＩＩ群）においては、抗ガン剤の副作用により、第１日目以降に尿タンパク値の急激な増加が見られた。一方、ＡＬＡを投与した群（ＩＩＩ群、ＩＶ群）では、抗ガン剤による副作用による尿タンパクの値は、ネガティブコントロール群（Ｉ群）と比較して第３日目に若干の上昇を見せたが、ほとんどネガティブコントロール群と変わらない値を維持したことが示されている。

図４〜図６明らかなように、ＡＬＡは、抗ガン剤の副作用による腎臓のダメージを軽減することができる。
実験期間を通じてＡＬＡを投与した「全投与群」（ＩＶ群）が最も効果的であるが、「後投与群」（ＩＩＩ群）においても、一定の効果が示された。したがって、抗ガン剤の腎臓への副作用に関して、ＡＬＡの投与による確実な治療効果及び予防効果が示された。

第１６日目に摘出した各ラットの腎臓の写真図を図７に示す。血清クレアチニン値、尿素毒素値（ＢＵＮ）、および、尿タンパクの値から実験期間中に腎機能に障害が生じたと判断できた個体の腎臓は、黄色く浮腫していた。図７において、黄色く浮腫していた腎臓を矢印で示す。

ＡＬＡの投与が、がん細胞に対する抗ガン剤の細胞毒性（抗ガン効果）に影響を与えないか検証した。
本実験においては、次のがん細胞を用いた。すなわち、Ｔ２４細胞（ヒト移行細胞膀胱癌細胞）および２５３Ｊ−ＢＶ細胞（ヒト尿路上皮癌細胞）である。また、抗ガン剤としては、シスプラチンを用いた。また、ＡＬＡとしては、ＡＬＡ塩酸塩を用いた。また、ＡＬＡの投与においては、併せて、クエン酸第一鉄ナトリウムを投与した。
ＡＬＡとクエン酸第一鉄ナトリウムの濃度は、実施例１および実施例２において抗ガン剤の副作用軽減効果が得られた濃度（ＡＬＡ塩酸塩：１０ｍｇ／ｋｇ体重（約５９．６７μＭ）、クエン酸第一鉄ナトリウム：１５．７ｍｇ／ｋｇ体重（約２９．８５μＭ））より約３．３５倍高い濃度（ＡＬＡ塩酸塩：２００μＭ、クエン酸第一鉄ナトリウム：１００μＭ）とした。なお、具体的には、実施例３の体重１ｋｇ当たりのＡＬＡとクエン酸第一鉄ナトリウムの濃度の量が、実施例１および実施例２における容積１リットル当たりのＡＬＡとクエン酸第一鉄ナトリウムの量の約３．３５倍となるように計算した（なお、以下のシスプラチンについての約１．５倍も同様に計算した。）。
一方、シスプラチンの濃度は、実施例１および実施例２で使用した濃度（８ｍｇ／ｋｇ体重（約２６．６６μＭ））の約１．５倍の４０μＭを最大とする、２倍希釈系列（４０μＭ、２０μＭ、１０μＭ、５μＭ、２．５μＭ、１．２５μＭ、０μＭ）とした。
各濃度における細胞毒性を、下記Ｉ群〜ＩＶ群において比較した。
Ｉ群：「無添加群」、すなわち、ＡＬＡを一切投与しなかった群
ＩＩ群：「前投与群」、すなわち、「前培養時」のみＡＬＡを投与した群
ＩＩＩ群：「同時投与群」、すなわち、「シスプラチン投与時」にのみＡＬＡを投与した群
ＩＶ群：「全投与群」、すなわち、「前培養時」と「シスプラチン投与時」にＡＬＡを投与した群
なお、各群の意味は、以下において、さらに明確に説明される。

本実験は、具体的には、下記のようにして行われた。

（１）Ｔ２４細胞（ヒト移行細胞膀胱癌細胞）または２５３Ｊ−ＢＶ細胞（ヒト尿路上皮癌細胞）を、１０ｃｍディッシュを用いて、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地にてサブコンフルエンスの状態まで培養させた。その後、トリプシン処理により回収した。
（２）Ｉ群（無添加群）およびＩＩＩ群（同時投与群）の試験群においては、（１）において回収した細胞を、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地に５００００ｃｅｌｌｓ／ｍｌの密度となるように懸濁した。また、ＩＩ群（前投与群）およびＩＶ群（全投与群）の試験群においては、（１）において回収した細胞を、２００μＭのＡＬＡ塩酸塩と、１００μＭのクエン酸第一鉄ナトリウムと、１０％ＦＢＳとを含むＤＭＥＭ培地に５００００ｃｅｌｌｓ／ｍｌの密度となるように懸濁した。
（３）続いて、（２）で得られた各懸濁液を、９６−ｗｅｌｌのマイクロプレートに１ｗｅｌｌあたり１００μｌずつ分注し、３７℃で２４時間前培養した。

（１）前培養後、それぞれのＷｅｌｌから培地を除去した。そして、Ｉ群（無添加群）およびＩＩ群（前投与群）には、各種濃度（４０、２０、１０、５、２．５、１．２５、０μＭ）のシスプラチンと１０％ＦＢＳとを含むＤＭＥＭ培地を加えて３７℃のＣＯ２インキュベーターで培養した。また、ＩＩＩ群（同時投与群）およびＩＶ群（全投与群）には、各種濃度（４０、２０、１０、５、２．５、１．２５、０μＭ）のシスプラチンと、２００μＭのＡＬＡ塩酸塩と、１００μＭのクエン酸第一鉄ナトリウムと、１０％ＦＢＳとを含むＤＭＥＭ培地を加えて３７℃のＣＯ２インキュベーターで培養した。
（２）シスプラチン存在下で４８時間培養後、各Ｗｅｌｌに１０μｌのＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８の基質であるＷＳＴ−８（同仁化学研究所）を加えて、３７℃で２時間発色反応を行なった。その後、各Ｗｅｌｌについて、４５０ｎｍの吸光度を測定することにより生存率を測定した。
なお、シスプラチンを含まない培地で培養した場合の吸光度を生存率１００％とした。また、細胞を含まない培地にＷＳＴ−８を加えて発色させた場合の吸光度を生存率０％とした。これにより、各Ｗｅｌｌについて「細胞の生存率（％）」を計算した。そして、「細胞の死滅率（％）」を、次の式により、計算した。

「細胞の死滅率（％）」＝１００−「細胞の生存率（％）」

Ｉ〜ＩＶ群の細胞の死滅率を、図８および図９に示す。なお、細胞の死滅は、シスプラチンによる細胞の生存の阻害であるため、図８及び図９においては、「細胞の死滅率（％）」を「阻害率（％）」として記載している。

図８は、シスプラチン投与によるＴ２４細胞（ヒト移行細胞膀胱癌細胞）の死滅率（％）を示す。なお、Ｉ群〜ＩＶ群におけるＴ２４細胞の５０％阻害濃度（５０％死滅濃度）（μＭ）は、それぞれ５．７３μＭ（Ｉ群）、５．２１μＭ（ＩＩ群）、４．８７μＭ（ＩＩＩ群）、５．５６μＭ（ＩＶ群）であった。

図９は、シスプラチン投与による２５３Ｊ−ＢＶ細胞（ヒト尿路上皮癌細胞）の死滅率（％）を示す。なお、Ｉ群〜ＩＶ群における２５３Ｊ−ＢＶ細胞の５０％阻害濃度（５０％死滅濃度）（μＭ）は、それぞれ、３．９２μＭ（Ｉ群）、３．９２μＭ（ＩＩ群）、２．８０μＭ（ＩＩＩ群）、２．８９μＭ（ＩＶ群）であった。

図８及び図９が示すように、シスプラチンの抗がん効果に対して、ＡＬＡの投与は、その投与時期および投与期間に関わらず、ほとんど抗ガン剤の効果を減弱していないことが示された。

進行期の大腸がんで腸閉塞を起こした女性について、２００９年８月１９日（この時点で６１歳）緊急手術をおこなった。手術時の所見によるとこぶし大の大腸がんがあり、がんを摘出し、腸閉塞を解除するも、多数の腹膜播種を認め余命３ヶ月の診断を受けた。

手術後、抗ガン剤治療として、ＦＯＬＦＯＸ（５−ＦＵ、アイソボリン、エルプラットの３剤併用）およびＦＯＬＦＩＲＩ（５−ＦＵ、アイソボリン、カンプトの３剤併用）に加えてアバスチンなどの分子標的薬を併用した。そして、この抗がん剤治療と並行して、一日あたりアミノレブリン酸リン酸塩５０ｍｇとクエン酸第一鉄ナトリウム５７．４ｍｇとを、経口摂取した。

その結果、手術後１年間は抗がん剤治療を続けることができた。１年後には、副作用のために抗ガン剤の投薬は断念したが、アミノレブリン酸リン酸塩５０ｍｇとクエン酸第一鉄ナトリウム５７．４ｍｇの経口摂取は継続し、告知された余命３ヶ月を大きく超え、１年半もの間、副作用が改善された状態で生存することができた。

患者は副作用として強い貧血症状を呈していたので、副作用改善の指標として貧血改善効果を比較対象として選択した。（ｉ）手術直前の２００９年８月１９日と、（ｉｉ）アミノレブリン酸リン酸塩とクエン酸第一鉄ナトリウムの摂取開始し約１年５ヵ月経過した２０１１年１月２８日とにおける、赤血球数、ヘモグロビン値、白血球数を以下の表２に示す。

上記表から理解されるとおり、手術直前にはがん性貧血による赤血球数とヘモグロビンの減少と、炎症による白血球の増加がみられるが、（ｉｉ）の摂取開始から約１年５ヵ月後の時点ではアミノレブリン酸リン酸塩とクエン酸第一鉄ナトリウムとの投与により赤血球数とヘモグロビンが増加して抗ガン剤の投与の副作用としての貧血が改善していることがわかる。一方、白血球数は、正常値に落ちついた。抗ガン剤による強い副作用が出たことを考えると、造血系にも強いダメージが与えられたと考えられるが、貧血が改善しているという結果は驚異的で、腹膜播種を抱えながらも医者の余命３ヶ月の告知を大きく超えた１年半後もＱＯＬが改善した生活を送ることができている。

本発明の薬剤は、抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤として有利に利用することができる。

Claims (5)

1. 抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤であって、
   下記式（Ｉ）で示される化合物
   （式中、Ｒ１は、水素原子又はアシル基を表し、Ｒ２は、水素原子、直鎖若しくは分岐状アルキル基、シクロアルキル基、アリール基又はアラルキル基を表す）
   又はその塩
   を含み、
   前記抗ガン剤の副作用が、腎臓に関する副作用、皮膚症状に関する副作用、全身症状に関する副作用、消化管系に関する副作用からなる群から選択される少なくとも一つの副作用である、
   ことを特徴とする抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤。
2. 請求項１に記載の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤であって、
   前記予防剤及び／又は治療剤が、さらに一種又は二種以上の金属を含有する
   ことを特徴とする抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤。
3. 請求項２に記載の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤であって、
   前記金属が、鉄、マグネシウム、及び、亜鉛からなる群から選択される
   ことを特徴とする抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤。
4. 請求項１に記載の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤であって、
   抗ガン剤と併用する
   ことを特徴とする、抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤。
5. 同時又は異時に投与する、（１）請求項１に記載の抗ガン剤の副作用の予防剤及び／又は治療剤と、（２）抗ガン剤、とを組み合わせてなる、がん治療用医薬。