JP5692838B2 - 感覚器障害モデル動物 - Google Patents
感覚器障害モデル動物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5692838B2 JP5692838B2 JP2009283702A JP2009283702A JP5692838B2 JP 5692838 B2 JP5692838 B2 JP 5692838B2 JP 2009283702 A JP2009283702 A JP 2009283702A JP 2009283702 A JP2009283702 A JP 2009283702A JP 5692838 B2 JP5692838 B2 JP 5692838B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glur1
- cortex
- animal
- synapses
- visually impaired
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims description 79
- 210000000697 sensory organ Anatomy 0.000 title claims description 33
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 claims description 71
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims description 44
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 claims description 27
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 claims description 27
- 230000027928 long-term synaptic potentiation Effects 0.000 claims description 25
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 claims description 23
- 210000004092 somatosensory cortex Anatomy 0.000 claims description 19
- BGMZUEKZENQUJY-UHFFFAOYSA-N 2-(4-iodo-2,5-dimethoxyphenyl)-1-methylethylamine Chemical compound COC1=CC(CC(C)N)=C(OC)C=C1I BGMZUEKZENQUJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 14
- 102000049773 5-HT2A Serotonin Receptor Human genes 0.000 claims description 12
- 108010072564 5-HT2A Serotonin Receptor Proteins 0.000 claims description 10
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 8
- 230000003238 somatosensory effect Effects 0.000 claims description 7
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 6
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 claims description 5
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 claims description 5
- -1 2,5-dimethoxy-4-iodophenyl Chemical group 0.000 claims description 3
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 claims 8
- 206010047571 Visual impairment Diseases 0.000 claims 2
- 208000029257 vision disease Diseases 0.000 claims 2
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 claims 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 54
- 108090000078 AMPA Receptors Proteins 0.000 description 50
- 102000003678 AMPA Receptors Human genes 0.000 description 50
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 48
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 47
- 230000004044 response Effects 0.000 description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 26
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 26
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 21
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 18
- 230000009782 synaptic response Effects 0.000 description 16
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 15
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 15
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 13
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 9
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 9
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 8
- 238000001690 micro-dialysis Methods 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 6
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 5
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 5
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 5
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 5
- 102000040125 5-hydroxytryptamine receptor family Human genes 0.000 description 4
- 108091032151 5-hydroxytryptamine receptor family Proteins 0.000 description 4
- 102100036834 Metabotropic glutamate receptor 1 Human genes 0.000 description 4
- FPCCSQOGAWCVBH-UHFFFAOYSA-N ketanserin Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1C(=O)C1CCN(CCN2C(C3=CC=CC=C3NC2=O)=O)CC1 FPCCSQOGAWCVBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960005417 ketanserin Drugs 0.000 description 4
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 108010014719 metabotropic glutamate receptor type 1 Proteins 0.000 description 4
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 230000003956 synaptic plasticity Effects 0.000 description 4
- 210000000857 visual cortex Anatomy 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 3
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 3
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 101100180402 Caenorhabditis elegans jun-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150104779 HTR2A gene Proteins 0.000 description 2
- 102000004868 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090001041 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 2
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004382 visual function Effects 0.000 description 2
- BIXYYZIIJIXVFW-UUOKFMHZSA-N (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-2-chloro-9-purinyl)-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O BIXYYZIIJIXVFW-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N (aminomethyl)phosphonic acid Chemical compound NCP(O)(O)=O MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 description 1
- 108010072553 5-HT2C Serotonin Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000006902 5-HT2C Serotonin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010005408 AMPA 2 glutamate receptor ionotropic Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000018899 Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010027915 Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N N-Methyl-D-aspartic acid Chemical compound CN[C@@H](C(O)=O)CC(O)=O HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229940099433 NMDA receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- LHNKBXRFNPMIBR-UHFFFAOYSA-N Picrotoxin Natural products CC(C)(O)C1(O)C2OC(=O)C1C3(O)C4OC4C5C(=O)OC2C35C LHNKBXRFNPMIBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000220010 Rhode Species 0.000 description 1
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000710960 Sindbis virus Species 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- DJKJXRLREATOMF-UHFFFAOYSA-M cesium;methanesulfonate Chemical compound [Cs+].CS([O-])(=O)=O DJKJXRLREATOMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 description 1
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 210000005220 cytoplasmic tail Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- RNTXMYSPASRLFT-UHFFFAOYSA-L disodium;2-[[n'-[hydroxy(oxido)phosphoryl]carbamimidoyl]-methylamino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(C)C(N)=NP([O-])([O-])=O RNTXMYSPASRLFT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000003512 metabotropic receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003703 n methyl dextro aspartic acid receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000007383 nerve stimulation Effects 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000008816 organ damage Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- VJKUPQSHOVKBCO-AHMKVGDJSA-N picrotoxin Chemical compound O=C([C@@]12O[C@@H]1C[C@]1(O)[C@@]32C)O[C@@H]3[C@H]2[C@@H](C(=C)C)[C@@H]1C(=O)O2.O=C([C@@]12O[C@@H]1C[C@]1(O)[C@@]32C)O[C@@H]3[C@H]2[C@@H](C(C)(O)C)[C@@H]1C(=O)O2 VJKUPQSHOVKBCO-AHMKVGDJSA-N 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000003518 presynaptic effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 210000002763 pyramidal cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000001609 raphe nuclei Anatomy 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000000862 serotonergic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002484 serotonin 2C antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940121356 serotonin receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 238000009958 sewing Methods 0.000 description 1
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- HRQDCDQDOPSGBR-UHFFFAOYSA-M sodium;octane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCS([O-])(=O)=O HRQDCDQDOPSGBR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N tungsten Chemical compound [W] WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010937 tungsten Substances 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
我々は先行研究として発達期(生後12日-14日)のバレル皮質において、ひげ経験により4層から2/3層にかけて形成されるシナプスにGluR1が移行するということ明らかにしている(非特許文献12)。
視覚を剥奪されたラットのバレル皮質においてセロトニン分泌量が有意に増加しており、セロトニン受容体の拮抗薬をバレル皮質に投与することによりGluR1のシナプスへの移行が阻害された。さらに視覚を剥奪することによりバレル皮質第II/III層のひげ-バレルの機能的マップがシャープになっており、これはGluR1がシナプスへ移行したためということが示された。
これらの結果から視覚機能の剥奪がセロトニンを介した経験依存的GluR1のシナプスへの移行促進によりひげ‐バレルの機能を向上させるということが明らかになった。本発明は、これらの知見に基づき、完成されたものである。
本発明の要旨は以下の通りである。
(1)青年期に視覚剥奪操作及び/又は薬物投与がなされ、大脳皮質の体性感覚野における経験依存的AMPA受容体シナプス移行が促進されていることを特徴とする感覚器障害モデル動物。
(2)内向き整流を示す組換えAMPA受容体を発現するベクターが大脳皮質の体性感覚野に注入されている(1)記載の感覚器障害モデル動物。
(3)AMPA受容体がGluR1である(1)又は(2)に記載の感覚器障害モデル動物。
(4)動物がげっ歯類であり、大脳皮質の体性感覚野がバレル皮質である(1)〜(3)のいずれかに記載の感覚器障害モデル動物。
(5)大脳皮質の体性感覚野における細胞外セロトニンレベルが増加している(1)〜(4)のいずれかに記載の感覚器障害モデル動物。
(6)大脳皮質の体性感覚野の機能的mapが鋭敏化している(1)〜(5)のいずれかに記載の社会的隔離モデル動物。
(7)動物がラットであり、青年期になされる視覚剥奪操作が生後21〜23日における視覚剥奪である(1)〜(6)のいずれかに記載の感覚器障害モデル動物。
(8)視覚剥奪が2日以内の期間でなされる(7)記載の感覚器障害モデル動物。
(9)青年期になされる薬物投与がセロトニン受容体のアゴニストの投与である(1)〜(8)のいずれかに記載の感覚器障害モデル動物。
(10)セロトニン受容体が5HT2A受容体である(9)記載の感覚器障害モデル動物。
(11)5HT2A受容体のアゴニストが1-(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)‐2-aminopropaneである(10)記載の感覚器障害モデル動物。
(12)動物がラットであり、青年期になされる薬物投与が生後21〜23日における1日あたり1.5-2.5 mMの局所投与での1-(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)‐2-aminopropaneの投与である(11)記載の感覚器障害モデル動物。
(13)シナプス長期増強が誘導されている(9)〜(12)のいずれかに記載の感覚器障害モデル動物。
(14)青年期に視覚剥奪操作及び/又は薬物投与を行い、大脳皮質の体性感覚野における経験依存的AMPA受容体シナプス移行を阻害することを含む、感覚器障害モデル動物の作製方法。
(15)(1)〜(13)のいずれかに記載の感覚器障害モデル動物に被験物質を投与することを含む、感覚器障害後の残った感覚器の機能向上に有効な物質のスクリーニング方法。
本明細書において、「経験依存的AMPA受容体シナプス移行」とは、感覚入力依存的にAMPA受容体がシナプスへ移行する現象のことをいい、その例としては、げっ歯類のヒゲを介した感覚的経験がバレル皮質においてAMPA受容体をシナプスへ移行させることなどが挙げられる。
Results & Discussion
我々は先行研究として発達期(生後12日-14日)のバレル皮質において、ひげ経験により4層から2/3層にかけて形成されるシナプスにGluR1が移行するということ明らかにしており(12)、今回我々は機能的ひげ‐バレルのマップが完成している後期発達期(生後21日-23日)において通常のひげ経験がGluR1をバレル皮質2/3層のシナプスに移行するかどうかを検討した。
GFPにより標識された組み換え型のGluR1のシナプスへの移行を検出するため我々は‘電気生理学的標識法’(8, 14)を用いた。この手法は細胞の膜電位が正のときの外向きの電流が内在性の受容体に比べてほとんど無い(内向き整流)ホモメリック受容体を形成するGFP-GluR1の過剰発現により、GFP-GluR1を含むシナプスはGFP-GluR1を含まないシナプスより高い内向き整流を示す(-60mVにおける応答 に対する +40mVでの応答の比)というものである。
我々は21日齢のラットのバレル皮質2/3層にGFP-GluR1を組み込んだヘルペスウィルスをインジェクションし、36時間後急性スライスを作成してから4層から2/3層の錐体細胞のシナプス電流をホールセル法により記録した(図1-1A)。AMPA受容体を介した応答は薬理学的に単離したものを測定した。ひげがintactな動物において感染細胞の内向き整流の増加がみられなかったことからこの日齢において経験依存的なGluR1のシナプスへの移行はもはや起こらないということが示された(図1-1B)。これに一貫したものとして、内在性のGluR1を含む受容体もひげがintactな動物においてシナプスに移行しないということも示された(図1-2A)。
次に21日-23日齢の4層から2/3層にかけて形成されるシナプスへのGluR1移行における視覚剥奪することの効果を検討するため、両眼の瞼を縫いつけ視覚を奪いその後すぐにバレル皮質にGFP-GluR1を組み込んだウィルスをインジェクションした。このような処置によりGFP-GluR1発現細胞において非感染細胞に比べて有意な内向き整流の増加が見られた(図1-1)。このことからこの日齢のバレル皮質では視覚を剥奪された状態においてGFP-GluR1がバレル皮質4-2/3層のシナプスへ移行するということが示された。さらに視覚剥奪により内在性のGluR1を含む受容体もシナプスに移行するということも示された(図1-2)。また視覚を剥奪した動物のひげを切り取ることによりGluR1のシナプスへの移行が起こらなくなったことから、視覚剥奪によるバレル皮質におけるGluR1のシナプスへの移行はひげ経験依存的であるということも示された(図1-3)。これらのことから21日-23日齢において視覚剥奪によりGluR1がバレル皮質4-2/3層のシナプスへ移行するということが明らかになった。
視覚を剥奪してから2日後においてLTPの誘導が阻害されるということから、視覚剥奪によるGluR1のシナプスへの移行はシナプスにおけるAMPA受容体の数を視覚剥奪から2日間で頭打ちにするということが示された(図1-4A,B)。このことに一貫して、21日齢において視覚剥奪を開始した動物は23日-25日齢においてGluR1のシナプスへの移行は見られなかった(図1-4C)。このことから視覚剥奪による大脳皮質の再構築は視覚剥奪を開始してから2日間で終止するということが明らかになった。
視覚剥奪によるバレル皮質におけるGluR1のシナプスへの移行はどのようなものを介しているのだろうか?先行研究においてセロトニンがバレル皮質の発達において重要な働きをするといわれている(15-17)。さらにはセロトニン受容体の活性化が扁桃体におけるLTPを促進する(18)ということから我々は、セロトニンがバレル皮質4-2/3層におけるGluR1シナプスへの移行を促進するのではないかという仮説を立てた。
最初に我々はin vivoマイクロダイアリシス法により視覚剥奪したラットもしくはintactラットのバレル皮質における細胞外セロトニンレベルを測定した。
視覚を剥奪した動物はintactの動物に比較して高いレベルのセロトニン放出を検出した(図2-1A)。視覚野におけるセロトニンについては視覚を剥奪した動物とintactの動物において差は見られなかった(図2-1A)。さらにバレル皮質におけるドーパミンについては視覚を剥奪した動物とintactの動物おいて同程度であった(図2-2)。
次に視覚剥奪によるGluR1のシナプスへの移行をセロトニンが仲介しているかどうかを調べるため、21日齢のバレル皮質2/3層にセロトニン2A(5HT2A)受容体のアンタゴニストであるketanserinをGFP−GluR1の組み込まれたヘルペスウィルスと同時に注入した。そして視覚を剥奪し、23日齢において脳スライスを作成した。ホールセル記録により感染細胞、非感染細胞において内向き整流に差が見られなかったためGFP-GluR1のシナプスへの移行は阻害されたということが示された(図2-1B)。このことから視覚剥奪によるGluR1のシナプスへの移行はセロトニンが仲介しているということが示された。
ここでもしGluR1のシナプスへの移行が視覚剥奪されたラットのバレル皮質において増加したセロトニンにより促進されているのならば、intactラットの通常のひげ経験で過剰のセロトニンの投与によりGluR1をシナプスへ移行させることができると考えられる。このことを確かめるため、21日齢のバレル皮質2/3層に5HT2A受容体のアゴニストであるDOIをGFP-GluR1の組み込まれたヘルペスウィルスと同時に注入した。ラットの両目はintactの状態で36時間後脳スライスを作成し、4層から2/3層におけるシナプス伝達をホールセル法により記録した。GFP-GluR1を発現している神経細胞において内向き整流の増加がみられたため、GFP-GluR1がシナプスへ移行しているということが示された(図3A)。このことからバレル皮質において増加したセロトニンがこの日齢において2/3層に発現している5HT2A受容体(19)を介してGluR1のシナプスへの移行を促進しており、結果として視覚剥奪による経験依存的なGluR1のシナプスへの移行が起こるということを示している。
さらにセロトニンが内在性のGluR1を含むAMPA受容体のシナプスへの移行を促進しているかということを検討するため、シナプス可塑性におけるセロトニンの増加の影響を試験した。今回我々は23日齢のintactの動物において急性スライスを作成し、バレル皮質2/3層においてDOI存在下もしくは非存在下でシナプス可塑性の誘導を試みた。1Hzの刺激と-40mVシナプス後電位によるペアリングプロトコールを用いた。このプトロコールによりDOI非存在下においてはLTDが誘導されるが、DOI存在下においてLTPが観察された(図3B)。このことからセロトニンは5HT2A受容体を介してGluR1のシナプスへの移行を促進しMetaplasticityを引き起こすということが示された。
視覚剥奪によるGFP-GluR1のバレル皮質4-2/3層のシナプスへの移行はラットのひげと2/3層のバレルカラムとの機能的関係をよりシャープにしていると考えられる。このことを確かめるため、バレル皮質2/3層の受容野における機能について視覚を剥奪した動物とintactの動物おいて測定した。我々は麻酔下の動物でin vivoシングルユニット記録により機能的ひげ-バレルのマップを評価した。23日齢においてひげ刺激による誘発されるスパイク数を測定した。ここで最も高い反応を示すひげをprincipal whiskerとした。今回Principal whisker を刺激した時の応答に対するその周囲のひげであるSurround whiskerの刺激による応答が視覚を剥奪した動物のバレル皮質において有意に低いということがみられた。つまりバレル皮質2/3層の機能的受容野が視覚剥奪によりシャープになったということが示された(図4A)。
さらにGluR1のシナプスへの移行によりひげーバレルの機能的マップがシャープなっているのかということを確かめるため、GluR1のシナプスへの移行を阻害するコンストラクトである(図1-2A) (12, 14) GFPタグのついたGluR1のcytoplasmic tail (GFP-GluR1ct)とGFPを21日齢の視覚を剥奪したラットのバレル皮質2/3層に発現させ、23日齢においてin vivoシングルユニット記録を行った。Principal whisker を刺激した時の応答に対するSurround whiskerの刺激による応答がGFP-GluR1ct発現させた動物のバレル皮質においてGFPを発現させた動物に対して有意に高いということがみられた。つまり視覚剥奪によりひげーバレルの機能的マップの改善はGFP-GluR1ctの発現により阻害されたということが示された(図4B)。このことから視覚機能を剥奪された動物においてみられたひげーバレルの機能的マップの鋭敏化はGluR1のシナプスへの移行依存的であるということが明らかになった。
今回我々は視覚剥奪によるGluR1のシナプスへの移行が結果としてバレル皮質2/3層のひげーバレルの機能的マップの鋭敏化させるということを示した。先行研究において視覚経験を剥奪することによりバレル皮質2/3層におけるAMPA受容体を介したminiature EPSCを減少させるという報告がある(4)。正味のAMPA受容体を介したシナプス伝達がこの領域で視覚剥奪により減少することは4層から2/3層にかけて形成されるシナプス伝達を強化し、それによりひげーバレルの機能的マップの鋭敏化が起こると考えられる。実際、視覚剥奪によるGluR1の2/3層から2/3層にかけて形成されるシナプスへの移行は見られなかった(図5)。
5HT2A受容体のアゴニストの投与によりintactラットにおいてGluR1を含むAMPA受容体のシナプスへの移行が見られたため、GluR1を含むAMPA受容体のシナプスへの移行の促進はセロトニンにより5HT2A受容体を介して起こるということが示された。先行研究においてひげを1本だけ残し他は切り取ってしまうsingle-whisker experienceにより残ったひげに対応するバレル皮質2/3層のシナプス応答が強化され、この現象はmGluR1を活性化することにより起こるという報告がある(20)。しかしながら今回mGluR1のアンタゴニストを投与しても視覚剥奪によるGluR1のシナプスへの移行は阻害することはできなかった(図6)。5HT2A受容体がmGluR1と同じ下流シグナル経路を共有することにより、セロトニンシグナルが今回のようなコンディションにおいてmGluR1の代わりに利用されるのかもしれない(21,22)。背側縫線核からのセロトニン作動性神経は様々な脳領域に投射するため(23)、視覚野やバレル皮質といったような異なった皮質領域を含む協調的再構築の制御にはグルタミン酸系よりも有用と考えられる。
動物
Long-Evans系統ラット21-23日齢を用いた。これらの動物は12時間の明暗条件下、食物と水は自由に摂取可能な状態で飼育した。すべての実験手続きは横浜市立大学実験動物使用ガイドラインを厳格に遵守し行われた。
バレル皮質へのウィルスのin vivoインジェクション
GFPタグの付加されたAMPA受容体サブユニット(GluR1-GFP, GluR1-ct-GFP,)とヘルペスウィルス作成は先行研究であるRumpelらの報告(27)をもとに行った。21日齢においてラットにketamine/xylazineによる麻酔を施した。その後頭皮を切開し、頭蓋骨を露出した。歯科用ドリルを用い、Bregma縫合より2mm後方、正中縫合より5mm外側の頭蓋骨を穿孔し、ガラスピペット(先端径 ~12μm)によりウィルス溶液をバレル皮質に注入した。術中ラットはヒートパッドにより体温を保持され、術後ラットの体の動きが戻ってきたところでホームケージに戻した。ラットの視覚のはく奪はウィルスの注入直後に行われた。
薬物投与
DOI (2,5-dimethoxy-4-iodoamphetamine)、セロトニン5HT2A、5HT2C 受容体作動薬, ketanserin, 5HT2A、5HT2C 受容体拮抗薬、もしくは 代謝型グルタミン酸受容体拮抗薬A IDA は生後21日齢においてGFP-GluR1を発現するヘルペスウィルスの注入と同時に注入された。(DOI:2mM, ketanserin:1mM, AIDA:1mM). LTPの実験において, DOI ( 20μM) はバスアプライにより投与された。
電気生理学
ウィルス注入から36時間後、ラットはイソフルレンガスによる麻酔下で脳を摘出され、脳は氷冷状態のダイセクションバッファー(25.0mM NaHCO3, 1.25mM NaH2PO4, 2.5mM KCl, 0.5mM CaCl2, 7.0mM MgCl2, 25.0mM glucose, 110.0mM choline chloride, 11.6mM ascorbic acid, 3.1mM pyruvic acid、5%CO2/95%O2)に素早く移した。脳スライスは300μmの厚さでダイセクションバッファー中において薄切され、薄切した脳スライスは5%CO2/95%O2でバブルした人工脳脊髄液(22-25℃, 118mM NaCl, 2.5mM KCl, 26.2mM NaHCO3 , 1mM NaH2PO4, 11mM glucose, 1.3mM MgCl2, 2.5mM CaCl2, Ph7.4)の中に保存した。その後脳スライスを記録チェンバーに移し0.1mM picrotoxin、4μM 2-chloroadenosineを含む人工脳脊髄液(22-25℃)で還流した。Rectification実験においてNMDA受容体拮抗薬である0.1mM D,L-APVを人工脳脊髄液に添加した。パッチピペット(3-7 MΩ)に細胞内液(115mM cesium methanesulfonate, 20mM CsCl, 10mM HEPES, 2.5mM MgCl2, 4mM Na2ATP, 0.4mM Na3GTP, 10mM sodium phosphocreatine, 0.6mM EGTA at PH7.25)を充填し、バレル皮質2/3層(脳表より150 - 500 μm)の感染細胞、非感染細胞においてホールセル記録法を行った。タングステン刺激電極は記録する細胞から200-300μm下方の第4層に置いた。記録は2つの細胞から同時に行い、刺激強度は10pA以上の応答を両方の細胞が示す強度に設定した。
-60mVと+40mV におけるAMPA受容体を介したシナプス応答の50-100回の平均を求め、その比を内向き整流比(rectification index)とした。Paired 記録実験においては、ホールセル法により近傍の50μm以内の感染細胞(GluR1-ct-GFP)と非感染細胞における応答を同時に記録した。AMPA/NMDA比は- 60mVにおける応答のピークの値と刺激の開始点から50ms後の+40mV における応答の比から求めた。
長期増強(long-term potentiation-LTP)を解析する実験において、視覚を剥奪された動物もしくはintactの動物から得られた脳スライスは5%CO2/95%O2でバブルした人工脳脊髄液(22-25℃, 118mM NaCl, 2.5mM KCl, 26.2mM NaHCO3 , 1mM NaH2PO4, 11mM glucose, 1.3mM MgCl2, 2.5mM CaCl2, Ph7.4)の中で維持された。AMPA受容体を介した-60mVにお蹴る応答を2つの経路から刺激頻度を0.33Hzにおいて記録した。一方の経路においてLTPはポストシナプスの膜電位を+20mVに脱分極させ、90秒間プレシナプスを5Hzで刺激するペアリングプロトコールにより誘導した。control pathwayであるもう一方の経路の応答の変化が50%以上の場合においてその実験は除外した。
In vivoマイクロダイアリシス
視覚を剥奪したもしくはintactのラットに麻酔下において脳定位的にステンレス製のガイドカニューラ(外径0.51 mm; AG-4, Eicom)をバレル皮質に植え込んだ。カニューラはBregma縫合より2mm後方、正中縫合より5mm外側、0,2mmの深さで挿入した。
マイクロダイアリシス実験を行う2時間前に膜長1mmの透析プローブ(外径0.31mm;AI-4-1, Eicom).をガイドカニューラの中に挿入した。2チャンネルのシーベル装置(SSU-20, Eicom)をプローブの入り口部分と出口部分に取り付け、人工脳脊髄液(147 mM NaCl; 4 mM KCl; 1.2 mM CaCl2; 0.9 mM MgCl2)を1.2μl/minの流速でマイクロダイアリシスポンプ(CMA/102, Carnegie Medicin, Stockholm, Sweden).を用い流入させた。マイクロダイアリシス実験は無麻酔、非拘束下で行った。2時間のサンプリング系の安定化後、6サンプル(36μl each)を30分毎計3時間サンプルバイアル(36μlの40mM酢酸 と200μl EDTAの混合液を含む ).に回収した。サンプルは定量実験まで-70℃において保存された。
5HTの定量
透析液中の5HTの濃度は高速液体クロマトグラフィー(EP-300; Eicom)により定量された。72μlのサンプルそれぞれはプレカラム(AC-ODS, Eicom)に移動相(0.1M phosphate buffer at pH 6.0, 0.13 mM EDTA, 2.3 mM sodium-1-octanesulfonate, and 20% methanol)とともに導入された。5HTは分離カラム(CA5-ODS, Eicomにより分離され、電気化学検出器(ECD-300, Eicom)により検出された。電極の電位はAg/AgCl参照電極から400mVに設定され、電極における電流の変化をデータプロセッサ(Chromatocorder 12; System Instruments)により記録した。5HTの濃度は標準液におけるピーク面積を参照し計算した。
In vivo記録
23日齢において、ラットをウレタン(31.25mg/kg, body weight)により麻酔し、上記と同様にバレル皮質上の頭蓋骨を穿孔した。同心円電極(Rhodes Medical)は脳表から200-400μm下方に挿入し、反対側のひげ1つずつを圧電素子に固定した金属針により刺激した。ひげ刺激により誘発されるスパイク応答はPowerlab4/25 (AD instruments)により記録した。ひげ刺激後5-50msに発生するスパイク数を計測し、それを応答の基準として扱った。
1. D. Bavelier, H. J. Neville, Nat Rev Neurosci 3, 443 (Jun, 2002).
2. N. Sadato et al., Nature 380, 526 (Apr 11, 1996).
3. J. P. Rauschecker, B. Tian, M. Korte, U. Egert, Proc Natl Acad Sci U S A 89, 5063 (Jun 1, 1992).
4. A. Goel et al., Nat Neurosci 9, 1001 (Aug, 2006).
5. M. S. Rioult-Pedotti, D. Friedman, J. P. Donoghue, Science 290, 533 (Oct 20, 2000).
6. S. Maren, Annu Rev Neurosci 24, 897 (2001).
7. I. Song, R. L. Huganir, Trends Neurosci 25, 578 (Nov, 2002).
8. Y. Hayashi et al., Science 287, 2262 (Mar 24, 2000).
9. M. Passafaro, V. Piech, M. Sheng, Nat Neurosci 4, 917 (Sep, 2001).
10. R. C. Malenka, M. F. Bear, Neuron 44, 5 (Sep 30, 2004).
11. R. L. Clem, A. Barth, Neuron 49, 663 (Mar 2, 2006).
12. T. Takahashi, K. Svoboda, R. Malinow, Science 299, 1585 (Mar 7, 2003).
13. E. A. Stern, M. Maravall, K. Svoboda, Neuron 31, 305 (Aug 2, 2001).
14. S. Shi, Y. Hayashi, J. A. Esteban, R. Malinow, Cell 105, 331 (May 4, 2001).
15. C. A. Bennett-Clarke, M. J. Leslie, R. D. Lane, R. W. Rhoades, J Neurosci 14, 7594 (Dec, 1994).
16. C. A. Bennett-Clarke, R. D. Lane, R. W. Rhoades, Brain Res 702, 255 (Dec 8, 1995).
17. K. Turlejski, R. L. Djavadian, M. Kossut, Neuroreport 8, 1823 (May 27, 1997).
18. A. Chen, C. J. Hough, H. Li, Neuroscience 119, 53 (2003).
19. Q. H. Li et al., J Comp Neurol 469, 128 (Jan 26, 2004).
20. R. L. Clem, T. Celikel, A. L. Barth, Science 319, 101 (Jan 4, 2008).
21. J. R. Raymond et al., Pharmacol Ther 92, 179 (Nov-Dec, 2001).
22. K. Maiese, Z. Z. Chong, F. Li, Curr Neurovasc Res 2, 425 (Dec, 2005).
23. R. P. Vertes, J Comp Neurol 313, 643 (Nov 22, 1991).
また、本発明により、視覚剥奪などの感覚器障害による、大脳皮質体性感覚野におけるAMPA受容体シナプス移行促進の分子メカニズムが解明できるようになった。
Claims (9)
- 後期発達期に5HT2A受容体のアゴニスト投与がなされ、大脳皮質の体性感覚野における、感覚入力依存的にGluR1がシナプスに移行する現象が促進されていることを特徴とする視覚障害モデル動物(ヒトを除く)。
- 内向き整流を示す組換えGluR1を発現するベクターが大脳皮質の体性感覚野に注入されている請求項1記載の視覚障害モデル動物。
- 動物がげっ歯類であり、大脳皮質の体性感覚野がバレル皮質である請求項1又は2のいずれかに記載の視覚障害モデル動物。
- 大脳皮質の体性感覚野における細胞外セロトニンレベルが増加している請求項1〜3のいずれかに記載の視覚障害モデル動物。
- 5HT2A受容体のアゴニストが1-(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)‐2-aminopropaneである請求項1記載の視覚障害モデル動物。
- 動物がラットであり、後期発達期になされる5HT2A受容体のアゴニスト投与が生後21〜23日における1日あたり1.5-2.5 mMの局所投与での1-(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)‐2-aminopropaneの投与である請求項5記載の視覚障害モデル動物。
- シナプス長期増強が誘導されている請求項1〜6のいずれかに記載の視覚障害モデル動物。
- 後期発達期に5HT2A受容体のアゴニスト投与を行い、大脳皮質の体性感覚野における、感覚入力依存的にGluR1がシナプスに移行する現象を促進することを含む、視覚障害モデル動物(ヒトを除く)の作製方法。
- 請求項1〜8のいずれかに記載の視覚障害モデル動物に被験物質を投与することを含む、視覚障害後の残った感覚器の機能向上に有効な物質のスクリーニング方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009283702A JP5692838B2 (ja) | 2009-12-15 | 2009-12-15 | 感覚器障害モデル動物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009283702A JP5692838B2 (ja) | 2009-12-15 | 2009-12-15 | 感覚器障害モデル動物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011125222A JP2011125222A (ja) | 2011-06-30 |
JP5692838B2 true JP5692838B2 (ja) | 2015-04-01 |
Family
ID=44288525
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009283702A Expired - Fee Related JP5692838B2 (ja) | 2009-12-15 | 2009-12-15 | 感覚器障害モデル動物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5692838B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011030565A (ja) * | 2009-07-06 | 2011-02-17 | Yokohama City Univ | 社会的隔離モデル動物 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK1558582T3 (da) * | 2003-07-22 | 2006-05-08 | Arena Pharm Inc | Diaryl og arylheteroarylureaderivater som modulatorer af aktiviteten af 5-HT2A-serotoninreceptoren anvendelige til profylakse eller behandling af forstyrrelser relateret dertil |
JP2010529125A (ja) * | 2007-06-07 | 2010-08-26 | ダイノジェン ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 胃食道逆流疾患の治療に有用な組成物 |
-
2009
- 2009-12-15 JP JP2009283702A patent/JP5692838B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2011125222A (ja) | 2011-06-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Raedt et al. | Increased hippocampal noradrenaline is a biomarker for efficacy of vagus nerve stimulation in a limbic seizure model | |
Nikolic et al. | Blocking TNFα‐driven astrocyte purinergic signaling restores normal synaptic activity during epileptogenesis | |
Coimbra et al. | Neuroanatomical approaches of the tectum-reticular pathways and immunohistochemical evidence for serotonin-positive perikarya on neuronal substrates of the superior colliculus and periaqueductal gray matter involved in the elaboration of the defensive behavior and fear-induced analgesia | |
Lozovaya et al. | Selective suppression of excessive GluN2C expression rescues early epilepsy in a tuberous sclerosis murine model | |
Francois et al. | State-dependent properties of a new T-type calcium channel blocker enhance CaV3. 2 selectivity and support analgesic effects | |
Wang et al. | Pharmaco-genetic therapeutics targeting parvalbumin neurons attenuate temporal lobe epilepsy | |
Weiss et al. | Neurochemical mechanisms underlying stress-induced depression | |
Campos et al. | In vitro and in vivo experimental models employed in the discovery and development of antiepileptic drugs for pharmacoresistant epilepsy | |
Lacey et al. | Enhanced NMDA receptor-dependent thalamic excitation and network oscillations in stargazer mice | |
Brambilla et al. | Interleukin‐1 inhibits firing of serotonergic neurons in the dorsal raphe nucleus and enhances GABAergic inhibitory post‐synaptic potentials | |
Iceman et al. | Medullary serotonin neurons are CO2 sensitive in situ | |
Portelli et al. | Inactivation of the constitutively active ghrelin receptor attenuates limbic seizure activity in rodents | |
Bertocchi et al. | Voltage-independent GluN2A-type NMDA receptor Ca2+ signaling promotes audiogenic seizures, attentional and cognitive deficits in mice | |
Yin et al. | A central amygdala–ventrolateral periaqueductal gray matter pathway for pain in a mouse model of depression-like behavior | |
KR20210050493A (ko) | 척수 손상의 치료 방법 | |
CN106062194A (zh) | 用于调整肌腱愈合的材料和方法 | |
Yu et al. | Endophilin A1 mediates seizure activity via regulation of AMPARs in a PTZ-kindled epileptic mouse model | |
Anderzhanova et al. | The stress susceptibility factor FKBP51 controls S-ketamine-evoked release of mBDNF in the prefrontal cortex of mice | |
Coverdell et al. | Genetic encoding of an esophageal motor circuit | |
de Oliveira Sergio et al. | Serotonin-2A receptor regulation of panic-like behavior in the rat dorsal periaqueductal gray matter: the role of GABA | |
JP4853844B2 (ja) | 慢性疼痛の病態モデル動物 | |
JP5692838B2 (ja) | 感覚器障害モデル動物 | |
de Oliveira et al. | Acetylcholine-mediated neurotransmission within the nucleus raphe magnus exerts a key role in the organization of both interictal and postictal antinociception | |
TWI380992B (zh) | 一種抑制nmda受體nr1之小段干擾rna、該小段干擾rna用以抑制皮下組織nmda受體nr1之方法、該小段干擾rna之用途以及一種減緩皮膚炎症性疼痛之藥物化合物 | |
Shi et al. | Synaptic vesicle protein2A decreases in amygdaloid-kindling pharmcoresistant epileptic rats |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20121206 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140610 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140807 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150120 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150130 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5692838 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |