JP5665271B2

JP5665271B2 - 骨髄腫の処置のためのｈｄａｃ阻害剤の使用

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Publication number: JP5665271B2
Application number: JP2008525092A
Authority: JP
Inventors: ピーター・ダブリュー・アタドジャ
Original assignee: ノバルティスアーゲー
Priority date: 2005-08-03
Filing date: 2006-08-01
Publication date: 2015-02-04
Anticipated expiration: 2026-08-01
Also published as: EP1912640A1; CN104324025A; RU2420279C3; ES2545076T3; JP2009503087A; CA2617274C; JP5876435B2; CA2617274A1; AU2006278718A1; RU2008107871A; US8883842B2; KR20080031937A; SI1912640T1; MX2008001610A; PT1912640E; JP2013173757A; US20100160257A1; US20080221126A1; PL1912640T3; RU2420279C2

Description

本発明は骨髄腫の処置用医薬の製造のためのＨＤＡＣ阻害剤の使用；動物に治療上有効量のＨＤＡＣ阻害剤、とりわけ本明細書に定義の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む、骨髄腫を有する温血動物、とりわけヒトの処置法；ＨＤＡＣ阻害剤および骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす化合物、好ましくはボルテゾミブ（bortezomib）、ならびに所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む、同時、個別または逐次使用のための組合せ剤；そして前記組合せを含む商品パッケージに関する。

「骨髄腫」なる用語は、本明細書において使用するとき、通常骨髄において発見されるタイプの細胞からなる腫瘍に関する。「多発性骨髄腫」なる用語は、本明細書において使用するとき、多発性骨髄腫瘍巣およびＭ成分（モノクローナル免疫グロブリンフラグメント）の分泌によって特徴付けられる血漿細胞の拡散性悪性新生物を意味し、これは骨疼痛、病的骨折、高カルシウム血症および正色素性正球性貧血をもたらす広範囲の溶骨性病変に関連する。多発性骨髄腫は常套の高用量化学療法の使用によっては治癒しない。

本明細書に定義の式（Ｉ）の化合物は、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（「ＨＤＡＣ阻害剤」）である。ヒストンの可逆性アセチル化は、転写因子の受容性を変化させることによってＤＮＡに作用する、主要な遺伝子発現のレギュレーターである。通常の細胞ではヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡ）およびヒストンアセチルトランスフェラーゼが共にヒストンのアセチル化レベルを制御してバランスを維持している。ＨＤＡの阻害は高アセチル化ヒストンの蓄積をもたらし、これは細胞応答の変化をもたらす。

驚くべきことに、本発明においてＨＤＡＣ阻害剤、とりわけ本明細書に定義の式（Ｉ）の化合物が骨髄腫細胞系およびＦｌｔ−１を発現する患者骨髄腫細胞の増殖を直接阻害することを見出した。さらに、かかる化合物は骨髄腫細胞遊走を阻害することがトランスウェル細胞遊走アッセイによって測定された。さらに、かかる化合物は骨髄間質細胞（ＢＭＳＣ）に接着する骨髄腫細胞の増殖、ならびに骨髄腫細胞とＢＭＳＣの結合によって誘導されるＩＬ−６の分泌の両方を阻害することができる。

したがって、本発明は骨髄腫の処置用医薬の製造のためのＨＤＡＣ阻害剤の使用に関する。

ＨＤＡＣ阻害剤化合物
本発明の組合せ剤に使用するためにとりわけ興味深いＨＤＡＣ阻害剤化合物は、式（Ｉ）

〔式中、
Ｒ_１はＨ；ハロ；または直鎖Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、とりわけメチル、エチルもしくはｎ−プロピルであり、ここでメチル、エチルおよびｎ−プロピル置換基は非置換であるか、または下記アルキル置換基の１個以上の置換基によって置換されており；
Ｒ_２はＨ；Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、好ましくはＣ_１−Ｃ_６アルキル、例えばメチル、エチルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_２−ＯＨ；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキルアルキル；シクロアルキルアルキル、例えばシクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ_６；−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ_６；アミノアシル；ＨＯＮ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝Ｃ（Ｒ_１）−アリール−アルキル−；および−（ＣＨ_２）_ｎＲ_７から選択され；
Ｒ_３およびＲ_４は同一または異なって、独立して、Ｈ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；アシル；ｏｒアシルアミノであるか、または
Ｒ_３およびＲ_４は、それらが結合している炭素と一体となって、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ_８を意味するか、または
Ｒ_２はそれが結合している窒素と一体となって、そしてＲ_３はそれが結合している炭素と一体となって、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；ヘテロアリール；ポリヘテロアリール；非芳香族性ポリヘテロ環；または混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環を形成してもよく

Ｒ_５はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アシル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；芳香族性多環；非芳香族性多環；混合アリールおよび非アリール多環；ポリヘテロアリール；非芳香族性ポリヘテロ環；ならびに混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環から選択され；
ｎ、ｎ_１、ｎ_２およびｎ_３は同一または異なって、そして独立して、０〜６から選択され、ｎ_１が１−６であるとき、各炭素原子は所望により独立して、Ｒ_３および／またはＲ_４で置換されていてもよく；
ＸおよびＹは同一または異なって、そして独立して、Ｈ；ハロ；Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、例えばＣＨ_３およびＣＦ_３；ＮＯ_２；Ｃ（Ｏ）Ｒ_１；ＯＲ_９；ＳＲ_９；ＣＮ；およびＮＲ_１０Ｒ_１１であり；
Ｒ_６はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；シクロアルキルアルキル、例えばシクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジルおよび２−フェニルエテニル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；ＯＲ_１２；ならびにＮＲ_１３Ｒ_１４であり；
Ｒ_７はＯＲ_１５；ＳＲ_１５；Ｓ（Ｏ）Ｒ_１６；ＳＯ_２Ｒ_１７；ＮＲ_１３Ｒ_１４；およびＮＲ_１２ＳＯ_２Ｒ_６から選択され；
Ｒ_８はＨ；ＯＲ_１５；ＮＲ_１３Ｒ_１４；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；およびヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチルから選択され；
Ｒ_９はＣ_１−Ｃ_４アルキル、例えばＣＨ_３およびＣＦ_３；Ｃ（Ｏ）−アルキル、例えばＣ（Ｏ）ＣＨ_３；ならびにＣ（Ｏ）ＣＦ_３から選択され；

Ｒ_１０およびＲ_１１は同一または異なって、そして独立して、Ｈ；Ｃ_１−Ｃ_４アルキル；および−Ｃ（Ｏ）−アルキルから選択され；
Ｒ_１２はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキルアルキル；アリール；混合アリールおよび非アリール多環；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ならびにヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチルから選択され；
Ｒ_１３およびＲ_１４は同一または異なって、そして独立して、Ｈ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；アミノアシルから選択されるか；または
Ｒ_１３およびＲ_１４は、それらが結合している窒素と一体となって、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；ヘテロアリール；ポリヘテロアリール；非芳香族性ポリヘテロ環；または混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環であり；
Ｒ_１５はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル；ヘテロアリールアルキル；および（ＣＨ_２）_ｍＺＲ_１２から選択され；
Ｒ_１６はＣ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；ポリヘテロアリール；アリールアルキル；ヘテロアリールアルキル；および（ＣＨ_２）_ｍＺＲ_１２から選択され；
Ｒ_１７はＣ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；芳香族性多環；ヘテロアリール；アリールアルキル；ヘテロアリールアルキル；ポリヘテロアリールおよびＮＲ_１３Ｒ_１４から選択され；
ｍは０〜６から選択される整数であり；そして
ＺはＯ；ＮＲ_１３；Ｓ；およびＳ（Ｏ）から選択される〕
に記載のヒドロキサメート化合物またはその薬学的に許容される塩である。

必要に応じて、「置換されていない」とは置換基が存在しないか、置換基が水素のみであることを意味する。

ハロ置換基はフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨード、好ましくはフルオロまたはクロロから選択される。

アルキル置換基には、他に記載がない限り直鎖および分枝鎖Ｃ_１−Ｃ_６アルキルを含む。適当な直鎖および分枝鎖Ｃ_１−Ｃ_６アルキル置換基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル等が含まれる。他に記載がない限り、アルキル置換基には置換されていないアルキル基および１個以上の、不飽和、すなわち１個以上の２重または３重Ｃ−Ｃ結合が存在するアシル；シクロアルキル；ハロ；オキシアルキル；アルキルアミノ；アミノアルキル；アシルアミノ；およびＯＲ_１５、例えばアルコキシが含まれる適当な置換基によって、置換されているアルキル基である。アルキル基の好ましい置換基には、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、オキシアルキル、アルキルアミノおよびアミノアルキルが含まれる。

シクロアルキル置換基には、他に記載がない限り、Ｃ_３−Ｃ_９シクロアルキル基、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等を含む。他に記載がない限り、シクロアルキル置換基は置換されていないシクロアルキル基および１個以上の、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、アミノアルキル、オキシアルキル、アルキルアミノおよびＯＲ_１５、例えばアルコキシを含む適当な置換基によって置換されているシクロアルキル基を含む。シクロアルキル基の好ましい置換基にはハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、オキシアルキル、アルキルアミノおよびアミノアルキルが含まれる。

アルキルおよびシクロアルキル置換基の上記記載はまた、他の置換基のアルキル部分、例えばこれに限定されないが、アルコキシ、アルキルアミン、アルキルケトン、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アルキルスルホニルおよびアルキルエステル置換基等に適用される。

ヘテロシクロアルキル置換基は、窒素、硫黄、酸素から選択される１〜３個のヘテロ原子を含む、３〜９員脂肪族環、例えば４〜７員脂肪族環を含む。適当なヘテロシクロアルキル置換基の例には、ピロリジル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロチオフラニル、ピペリジル、ピペラジル、テトラヒドロピラニル、モルフィリノ、１，３−ジアザパン、１，４−ジアザパン、１，４−オキサゼパンおよび１，４−オキサチアパンが含まれる。他に記載がない限り、環は非置換であるかまたは、炭素原子で１個以上の、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；ハロ；アミノ；アルキルアミノおよびＯＲ_１５、例えばアルコキシを含む適当な置換基によって置換されている。他に記載がない限り、窒素ヘテロ原子は非置換であるか、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；アシル；アミノアシル；アルキルスルホニル；およびアリールスルホニルによって置換されている。

シクロアルキルアルキル置換基はｎ５が１〜６の整数である式−（ＣＨ_２）_ｎ５−シクロアルキルの化合物を含む。適当なアルキルシクロアルキル置換基にはシクロペンチルメチル、シクロペンチルエチル、シクロヘキシルメチル等が含まれる。かかる置換基は非置換であるかまたは、アルキル位置もしくはシクロアルキル位置で、アルキルおよびシクロアルキルについて上記のものを含む適当な置換基によって置換されている。

アリール置換基には置換されていないフェニルおよび１個以上の、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；シクロアルキルアルキル、例えばシクロプロピルメチル；Ｏ（ＣＯ）アルキル；オキシアルキル；ハロ；ニトロ；アミノ；アルキルアミノ；アミノアルキル；アルキルケトン；ニトリル；カルボキシアルキル；アルキルスルホニル；アミノスルホニル；アリールスルホニルおよびＯＲ_１５、例えばアルコキシを含む適当な置換基によって置換されているフェニルが含まれる。好ましい置換基にはＣ_１−Ｃ_６アルキル；シクロアルキル、例えばシクロプロピルメチル；アルコキシ；オキシアルキル；ハロ；ニトロ；アミノ；アルキルアミノ；アミノアルキル；アルキルケトン；ニトリル；カルボキシアルキル；アルキルスルホニル；アリールスルホニルおよびアミノスルホニルが含まれる。適当なアリール基の例には、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルフェニル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシフェニル、トリフルオロメチルフェニル、メトキシフェニル、ヒドロキシエチルフェニル、ジメチルアミノフェニル、アミノプロピルフェニル、カルボエトキシフェニル、メタンスルホニルフェニルおよびトリルスルホニルフェニルが含まれる。

芳香族性多環にはナフチル、および１個以上の、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；アルキルシクロアルキル、例えばシクロプロピルメチル；オキシアルキル；ハロ；ニトロ；アミノ；アルキルアミノ；アミノアルキル；アルキルケトン；ニトリル；カルボキシアルキル；アルキルスルホニル；アリールスルホニル；アミノスルホニルおよびＯＲ_１５、例えばアルコキシを含む適当な置換基によって置換されているナフチルが含まれる。

ヘテロアリール置換基にはＮ、ＯおよびＳから選択される１個以上のヘテロ原子、例えば１〜４個のヘテロ原子を含む５〜７員芳香環を有する化合物を含む。典型的なヘテロアリール置換基にはフリル、チエニル、ピロール、ピラゾール、トリアゾール、チアゾール、オキサゾール、ピリジン、ピリミジン、イソオキサゾリル、ピラジン等が含まれる。他に記載がない限り、ヘテロアリール置換基は非置換であるかまたは、炭素原子で１個以上の、アルキル、上記アルキル置換基、および他のヘテロアリール置換基を含む適当な置換基によって置換されている。窒素原子は非置換であるか、または例えばＲ_１３；とりわけＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含む有用なＮ置換基によって置換されている。

アリールアルキル置換基は式−（ＣＨ_２）_ｎ５−アリール、−（ＣＨ_２）_ｎ５−１−（ＣＨ−アリール）−（ＣＨ_２）_ｎ５−アリールまたは−（ＣＨ_２）_ｎ５−１ＣＨ（アリール）（アリール）〔式中、アリールおよびｎ５は上記定義のとおりである〕の基を含む。かかるアリールアルキル置換基にはベンジル、２−フェニルエチル、１−フェニルエチル、トリル−３−プロピル、２−フェニルプロピル、ジフェニルメチル、２−ジフェニルエチル、５，５−ジメチル−３−フェニルペンチル等が含まれる。アリールアルキル置換基は非置換であるか、またはアルキル基もしくはアリール基、またはその両方で、上記アルキルおよびアリール置換基のとおりに置換されている。

ヘテロアリールアルキル置換基は式−（ＣＨ_２）_ｎ５−ヘテロアリール〔式中、ヘテロアリールおよびｎ５は上記定義のとおりであり、架橋基はヘテロアリール部分の炭素または窒素と結合している〕の基、例えば２−、３−または４−ピリジルメチル、イミダゾリルメチル、キノリルエチルおよびピロリルブチルを含む。ヘテロアリール置換基は非置換であるか、または上記ヘテロアリールおよびアルキル置換基のとおりに置換されている。

アミノアシル置換基は式−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｈ）（ＮＲ_１３Ｒ_１４）−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｒ_５〔式中、ｎ、Ｒ_１３、Ｒ_１４およびＲ_５は上記のとおりである〕の基を含む。適当なアミノアシル置換基には天然または非天然アミノ酸、例えばグリシニル、Ｄ−トリプトファニル、Ｌ−リシニル、Ｄ−またはＬ−ホモセリニル、４−アミノブチル酸アシルおよび±−３−アミン−４−ヘキセノイルが含まれる。

非芳香族性多環置換基は二環式および三環式縮合環系を含み、ここで各環は４〜９員であり、そして各環は０、１またはそれ以上の２重および／または３重結合を含み得る。非芳香族性多環の適当な例には、デカリン、オクタヒドロインデン、ペルヒドロベンゾシクロヘプテンおよびペルヒドロベンゾ−［ｆ］−アズレンが含まれる。かかる置換基は非置換であるか、上記シクロアルキル基のとおりに置換されている。

混合アリールおよび非アリール多環置換基は二環式および三環式縮合環系を含み、ここで各環は４〜９員であり、そして少なくとも１個の環は芳香族性であり得る。混合アリールおよび非アリール多環の適当な例には、メチレンジオキシフェニル、ビスメチレンジオキシフェニル、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン、ジベンゾスベラン、ジヒドロアントラセンおよび９Ｈ−フルオレンが含まれる。かかる置換基は非置換であるか、またはニトロによって、もしくは上記シクロアルキル基のとおりに置換されている。

ポリヘテロアリール置換基は二環式および三環式縮合環系を含み、ここで各環は独立して５〜６員であり、そして縮合環系が芳香族性であるようにＯ、ＮまたはＳから選択される１個以上のヘテロ原子、例えば１、２、３または４個のヘテロ原子を含み得る。ポリヘテロアリール環系の適当な例には、キノリン、イソキノリン、ピリドピラジン、ピロロピリジン、フロピリジン、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフラン、ベンズインドール、ベンゾオキサゾール、ピロロキノリン等が含まれる。他に記載がない限り、ポリヘテロアリール置換基は非置換であるか、または炭素原子で１個以上の、アルキル、上記アルキル置換基および式−Ｏ−（ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２））_１−３Ｈの置換基を含む適当な置換基によって置換されている。窒素原子は非置換であるか、または例えばＲ_１３、とりわけ有用な、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含むＮ置換基によって置換されている。

非芳香族性ポリヘテロ環式置換基は二環式および三環式縮合環系を含み、ここで各環は４〜９員であり、Ｏ、ＮまたはＳから選択される１個以上のヘテロ原子、例えば１、２、３または４個のヘテロ原子を含み、そして０もしくは１個、またはそれ以上のＣ−Ｃ２重結合または３重結合を含み得る。非芳香族性ポリヘテロ環の適当な例には、ヘキシトール、シスペルヒドロシクロヘプタ［ｂ］ピリジニル、デカヒドロベンゾ［ｆ］［１，４］オキサゼピニル、２，８−ジオキサビシクロ［３．３．０］オクタン、ヘキサヒドロチエノ［３，２−ｂ］チオフェン、ペルヒドロピロロ［３，２−ｂ］ピロール、ペルヒドロナフチリジン、ペルヒドロ−１Ｈ−ジシクロペンタ［ｂ，ｅ］ピランが含まれる。他に記載がない限り、非芳香族性ポリヘテロ環式置換基は非置換であるか、または炭素原子でアルキルおよび上記アルキル置換基を含む１個以上の置換基によって置換されている。窒素原子は非置換であるか、または例えばＲ_１３、とりわけ有用なＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含むＮ置換基によって置換されている。

混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環置換基は二環式および三環式縮合環系を含み、ここで各環は４〜９員であってもよく、Ｏ、ＮまたはＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含んでもよく、そして少なくとも１個の環が芳香族性でなければならない。混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環の適当な例には、２，３−ジヒドロインドール、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン、５，１１−ジヒドロ−１０Ｈ−ジベンズ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン、５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン、１，２−ジヒドロピロロ［３，４−ｂ］［１，５］ベンゾジアゼピン、１，５−ジヒドロ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］ジアゼピン−４−オン、１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロ−ベンゾ［ｂ］ピリド［２，３−ｅ］［１，４］ジアゼピン−５−オンが含まれる。他に記載がない限り、混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環式置換基は非置換であるか、または炭素原子で１個以上の、−Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−ＯＨ、アルキルおよび上記アルキル置換基を含む適当な置換基によって置換されている。窒素原子は非置換であるか、または、例えばＲ_１３；とりわけ有用なＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含むＮ置換基によって置換されている。

アミノ置換基は１級、２級および３級アミンならびに塩形の４級アミンを含む。アミノ置換基の例にはモノおよびジアルキルアミノ、モノおよびジアリールアミノ、モノおよびジアリールアルキルアミノ、アリール−アリールアルキルアミノ、アルキル−アリールアミノ、アルキル−アリールアルキルアミノ等が含まれる。

スルホニル置換基にはアルキルスルホニルおよびアリールスルホニル、例えばメタンスルホニル、ベンゼンスルホニル、トシル等が含まれる。

アシル置換基には式−Ｃ（Ｏ）−Ｗ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｗ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｗ、またはＣ（Ｏ）ＮＲ_１３Ｒ_１４〔式中、ＷはＲ_１６、Ｈまたはシクロアルキルアルキルである〕の基が含まれる。

アシルアミノ置換基には式−Ｎ（Ｒ_１２）Ｃ（Ｏ）−Ｗ、Ｎ（Ｒ_１２）Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｗ、および−Ｎ（Ｒ_１２）Ｃ（Ｏ）−ＮＨＯＨ〔Ｒ_１２およびＷは上記定義のとおりである〕の置換基が含まれる。

Ｒ_２置換基ＨＯＮ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝Ｃ（Ｒ_１）−アリール−アルキル−は式

の基である。

好ましい各置換基には下記のものまたはその薬学的に許容される塩が含まれる：
Ｒ_１がＨ、ハロまたは直鎖Ｃ_１−Ｃ_４アルキルである；
Ｒ_２がＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ_６、アミノアシルおよび−（ＣＨ_２）_ｎＲ_７から選択される；
Ｒ_３およびＲ_４が同一または異なって、そして独立してＨおよびＣ_１−Ｃ_６アルキルから選択されるか、または
Ｒ_３およびＲ_４がそれらが結合している炭素と一体となって、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ_８を意味する；
Ｒ_５がＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、芳香族性多環、非芳香族性多環、混合アリールおよび非アリール多環、ポリヘテロアリール、非芳香族性ポリヘテロ環、ならびに混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環から選択される；
ｎ、ｎ_１、ｎ_２およびｎ_３が同一または異なって、そして独立して、０〜６から選択され、ｎ_１が１〜６であるとき、各炭素原子は非置換であるか、または独立してＲ_３および／またはＲ_４で置換されている；
ＸおよびＹが同一または異なって、そして独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、ＣＦ_３、ＮＯ_２、Ｃ（Ｏ）Ｒ_１、ＯＲ_９、ＳＲ_９、ＣＮおよびＮＲ_１０Ｒ_１１から選択される；
Ｒ_６がＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アルキルシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ＯＲ_１２およびＮＲ_１３Ｒ_１４から選択される；

Ｒ_７がＯＲ_１５、ＳＲ_１５、Ｓ（Ｏ）Ｒ_１６、ＳＯ_２Ｒ_１７、ＮＲ_１３Ｒ_１４およびＮＲ_１２ＳＯ_２Ｒ_６から選択される；
Ｒ_８がＨ、ＯＲ_１５、ＮＲ_１３Ｒ_１４、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルから選択される；
Ｒ_９がＣ_１−Ｃ_４アルキルおよびＣ（Ｏ）−アルキルから選択される；
Ｒ_１０およびＲ_１１が同一または異なって、そして独立して、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）−アルキルから選択される；
Ｒ_１２がＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルから選択される；
Ｒ_１３およびＲ_１４が同一または異なって、そして独立して、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアシルから選択される；
Ｒ_１５がＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよび（ＣＨ_２）_ｍＺＲ_１２から選択される；
Ｒ_１６がＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよび（ＣＨ_２）_ｍＺＲ_１２から選択される；
Ｒ_１７がＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびＮＲ_１３Ｒ_１４から選択される；
ｍは０〜６から選択される整数であり；そして
ＺがＯ、ＮＲ_１３、ＳおよびＳ（Ｏ）から選択される。

有用な式（Ｉ）の化合物には、Ｒ_１、Ｘ、Ｙ、Ｒ_３およびＲ_４が各々Ｈであるもの、ｎ_２およびｎ_３の一方が０であり他方が１であるもの、とりわけＲ_２がＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＯＨであるものが含まれる。

ヒドロキサメート化合物の一つの適当な種類は、式（Ｉａ）

〔式中、ｎ_４は０〜３であり；
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ_６、アミノアシルおよび−（ＣＨ_２）_ｎＲ_７から選択され；そして
Ｒ_５はヘテロアリール；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；芳香族性多環；非芳香族性多環；混合アリールおよび非アリール多環；ポリヘテロアリールまたは混合アリール；ならびに非アリールポリヘテロ環である〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩である。

ヒドロキサメート化合物の他の適当な種類は、式（Ｉａ）

〔式中、ｎ_４は０〜３であり；
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ_６、アミノアシルおよび−（ＣＨ_２）_ｎＲ_７から選択され；そして
Ｒ_５はアリール；アリールアルキル；芳香族性多環；非芳香族性多環および混合アリール；ならびに非アリール多環、とりわけアリール、例えばｐ−フルオロフェニル、ｐ−クロロフェニル、ｐ−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキルフェニル、例えばｐ−メトキシフェニル、およびｐ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキルフェニル；ならびにアリールアルキル、例えばベンジル、オルト、メタ、またはパラ−フルオロベンジル、オルト、メタ、またはパラ−クロロベンジル、オルト、メタ、またはパラ−モノ、ジまたはトリ−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキルベンジル、例えばオルト、メタ、またはパラ−メトキシベンジル、ｍ，ｐ−ジエトキシベンジル、ｏ，ｍ，ｐ−トリイメトキシベンジルおよびオルト、メタ、またはパラ−モノ、ジまたはトリ−Ｃ_１−Ｃ_４アルキルフェニル、例えばｐ−メチル、ｍ，ｍ−ジエチルフェニルである〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩である。

他の興味深い種類は式（Ｉｂ）

〔式中、
Ｒ_２はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_６シクロアルキル；シクロアルキルアルキル、例えばシクロプロピルメチル；（ＣＨ_２）_２−４ＯＲ_２１から選択され、ここでＲ_２１はＨ、メチル、エチル、プロピルおよびｉ−プロピルであり；そして
Ｒ_５は非置換１Ｈ−インドール−３−イル、ベンゾフラン−３−イルもしくはキノリン−３−イル、または置換１Ｈ−インドール−３−イル、例えば５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イルもしくは５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル、ベンゾフラン−３−イルまたはキノリン−３−イル〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩である。

ヒドロキサメート化合物の他の興味深い種類は、式（Ｉｃ）

〔式中、
Ｚ_１を含む環は芳香族性または非芳香族性であり、ここで非芳香環は飽和または不飽和であり；
Ｚ_１はＯ、ＳまたはＮ−Ｒ_２０であり；
Ｒ_１８はＨ；ハロ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル（メチル、エチル、ｔ−ブチル）；Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル；アリール、例えば置換されていないフェニルまたは４−ＯＣＨ_３もしくは４−ＣＦ_３によって置換されているフェニル；またはヘテロアリール、例えば２−フラニル、２−チオフェニルまたは２−、３−もしくは４−ピリジルであり；
Ｒ_２０はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｃ_３−Ｃ_９シクロアルキル、例えばシクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；アシル、例えばアセチル、プロピオニルおよびベンゾイル；またはスルホニル、例えばメタンスルホニル、エタンスルホニル、ベンゼンスルホニルおよびトルエンスルホニルであり；
Ａ_１は独立してＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；−ＯＲ_１９；ハロ；アルキルアミノ；アミノアルキル；ハロ；またはヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチルである１、２または３個の置換基であり；
Ｒ_１９はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチルおよび（ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２））_１−３Ｈから選択され；
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ_６、アミノアシルおよび−（ＣＨ_２）_ｎＲ_７から選択され；
ｖは０、１または２であり；
ｐは０〜３であり；そして
ｑは１〜５であり、そしてｒは０であるか；または
ｑは０であり、そしてｒは１〜５である〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩である。他の変化し得る置換基は上記のとおりである。

とりわけ有用な式（Ｉｃ）の化合物は、Ｒ_２がＨまたはｐが１〜３である（ＣＨ_２）_ｐＣＨ_２ＯＨであるもの、とりわけＲ_１がＨであるもの；例えばＲ_１がＨであり、そしてＸおよびＹが各々Ｈであるもの、およびｑが１〜３でありｒが０であるか、またはｑが０でありｒが１〜３であるもの、とりわけＺ_１がＮ−Ｒ_２０であるものである。これらの化合物において、Ｒ_２は好ましくはＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＯＨであり、ｑおよびｒの合計は好ましくは１である。

ヒドロキサメート化合物の他の興味深い種類は式（Ｉｄ）

〔式中、
Ｚ_１はＯ、ＳまたはＮ−Ｒ_２０であり；
Ｒ_１８はＨ；ハロ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル（メチル、エチル、ｔ−ブチル）；Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル；アリール、例えば置換されていないフェニルまたは４−ＯＣＨ_３もしくは４−ＣＦ_３によって置換されているフェニル；またはヘテロアリールであり；
Ｒ_２０はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｃ_３−Ｃ_９シクロアルキル、例えばシクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチル；アシル、例えばアセチル、プロピオニルおよびベンゾイル；またはスルホニル、例えばメタンスルホニル、エタンスルホニル、ベンゼンスルホニル、トルエンスルホニルであり；
Ａ_１は独立してＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、−ＯＲ_１９またはハロである１、２または３個の置換基であり；
Ｒ_１９はＨ；Ｃ_１−Ｃ_６アルキル；Ｃ_４−Ｃ_９シクロアルキル；Ｃ_４−Ｃ_９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えばベンジル；およびヘテロアリールアルキル、例えばピリジルメチルから選択され；
ｐは０〜３であり；そして
ｑは１〜５であり、そしてｒは０であるか；または
ｑは０であり、そしてｒは１〜５である〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩である。他の変化し得る置換基は上記のとおりである。

とりわけ有用な式（Ｉｄ）の化合物は、Ｒ_２がＨまたはｐが１〜３である（ＣＨ_２）_ｐＣＨ_２ＯＨであるもの、とりわけＲ_１がＨであるもの；例えばＲ_１がＨであり、そしてＸおよびＹが各々Ｈであるもの、およびｑが１〜３でありｒが０であるか、またはｑが０でありｒが１〜３であるものである。これらの化合物においてＲ_２は好ましくはＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＯＨであり、そしてｑおよびｒの合計は好ましくは１である。

本発明はさらに、式（Ｉｅ）

の化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。変化し得る置換基は上記のとおりである。

とりわけ有用な式（Ｉｅ）の化合物は、Ｒ_１８がＨ、フルオロ、クロロ、ブロモ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基、置換されていないフェニル、パラ位で置換されているフェニル、またはヘテロアリール、例えばピリジル、環であるものである。

式（Ｉｅ）の化合物の有用な他の基は、Ｒ_２がＨであるかまたはｐが１〜３である（ＣＨ_２）_ｐＣＨ_２ＯＨであるもの、とりわけＲ_１がＨであるもの；例えばＲ_１がＨであり、そしてＸおよびＹが各々Ｈであるもの、およびｑが１〜３でありｒが０であるか、またはｑが０でありｒが１〜３であるものである。これらの化合物においてＲ_２は好ましくはＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＯＨであり、そしてｑおよびｒの合計は好ましくは１である。これらの化合物においてｐは好ましくは１であり、そしてＲ_３およびＲ_４は好ましくはＨである。

式（Ｉｅ）の有用な他の基は、Ｒ_１８がＨ、メチル、エチル、ｔ−ブチル、トリフルオロメチル、シクロヘキシル、フェニル、４−メトキシフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、２−フラニル、２−チオフェニル、または２−、３−もしくは４−ピリジルであるもの、２−フラニル、２−チオフェニルおよび２−、３−または４−ピリジル置換基が非置換であるか上記ヘテロアリール環のとおりに置換されており；Ｒ_２がＨまたはｐが１〜３である−（ＣＨ_２）_ｐＣＨ_２ＯＨであるもの；とりわけＲ_１がＨであり、そしてＸおよびＹが各々Ｈであるもの、およびｑが１〜３でありｒが０であるか、またはｑが０でありそしてｒが１〜３であるものである。これらの化合物においてＲ_２は好ましくはＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＯＨであり、そしてｑおよびｒの合計は好ましくは１である。

Ｒ_２０がＨまたはＣ_１−Ｃ_６アルキル、とりわけＨである式（Ｉｅ）のこれらの化合物は、上記式（Ｉｅ）の化合物の各亜種の重要なメンバーである。

Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［（２−ヒドロキシエチル）［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドおよびＮ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドまたはそれらの薬学的に許容される塩は、重要な式（Ｉｅ）の化合物である。

本発明はさらに式（Ｉｆ）

有用な式（Ｉｆ）の化合物には、Ｒ_２がＨまたはｐが１〜３である（ＣＨ_２）_ｐＣＨ_２ＯＨであるもの、とりわけＲ_１がＨであるもの；例えばＲ_１がＨであり、そしてＸおよびＹが各々Ｈであるもの、およびｑが１〜３でありｒが０であるか、またはｑが０でありｒが１〜３であるものが含まれる。これらの化合物においてＲ_２は好ましくはＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＯＨであり、そしてｑおよびｒの合計はこのましくは１である。

Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（ベンゾフル−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドまたはその薬学的に許容される塩は重要な式（Ｉｆ）の化合物である。

上記化合物はしばしば薬学的に許容される塩形で使用される。薬学的に許容される塩には、適当な場合、薬学的に許容される塩基付加塩および酸付加塩、例えばアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩のような金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩およびアミノ酸付加塩およびスルホン酸塩が含まれる。酸付加塩には塩酸塩、硫酸塩およびリン酸塩のような無機酸付加塩；およびアルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩および乳酸塩のような有機酸付加塩が含まれる。金属塩の例は、リチウム塩、ナトリウム塩およびカリウム塩のようなアルカリ金属塩；マグネシウム塩およびカルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩ならびに亜鉛塩である。アンモニウム塩の例は、アンモニウム塩およびテトラメチルアンモニウム塩である。有機アミン付加塩の例はモルホリンとの塩およびピペリジンとの塩である。アミノ酸付加塩の例はグリシンとの塩、フェニルアラニンとの塩、グルタミン酸との塩、およびリシンとの塩である。スルホン酸塩にはメシル酸塩、トシル酸塩およびベンゼンスルホン酸塩が含まれる。

式（Ｉ）の範囲内のさらなるＨＤＡＩ化合物、およびそれらの合成は、ＷＯ０２／２２５７７（公開日２００２年３月２１日、その全体を出典明示により本明細書の一部とする）に記載されている。ＷＯ０２／２２５７７の範囲内の２個の好ましい化合物は、
Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［（２−ヒドロキシエチル）｛２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド

またはその薬学的に許容される塩；および
Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド

またはその薬学的に許容される塩である。

本発明はとりわけ、常套の化学療法に抵抗性である骨髄腫の処置用医薬の製造のための、ＨＤＡＣ阻害剤の使用に関する。

本発明に使用するＨＤＡＣ阻害剤は上記アッセイにおいて、好ましくは５０〜２，５００ｎＭ、より好ましくは２５０〜２，０００ｎＭ、もっとも好ましくは５００〜１，２５０ｎＭのＩＣ_５０値を示す。

さらに本発明は、骨髄腫、とりわけ常套の化学療法に抵抗性である骨髄腫の処置法であって、治療上有効量のＨＤＡＣ阻害剤をそれを必要とする温血動物、とりわけヒトに、このましくは治療上有効量の上記定義の式（Ｉ）の化合物または少なくとも１個の塩形性基を有するかかる化合物の塩をそれを必要とする温血動物、好ましくはヒトに投与することを含んでなる方法に関する。

本明細書および請求項において、骨髄腫は好ましくは多発性骨髄腫（ＭＭ）を意味する。

「処置」なる用語は、本明細書において使用するとき、骨髄腫を有するかまたは当該疾患の前段階である患者の、患者の疾患の進行を遅延させる処置を含む。

ボルテゾミブは骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす、ＭＭの処置のための主な薬剤である。驚くべきことに、本発明において本発明のＨＤＡＣ阻害剤がボルテゾミブのＭＭ細胞に対する効果を増大することを見出した。

したがって、本発明はまた、有効成分がそれぞれの場合において遊離形または薬学的に許容される塩形で存在する、ＨＤＡＣ阻害剤、好ましくは上記定義の式（Ｉ）の化合物、および骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす化合物、ならびに所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む、同時、個別または逐次的に使用するための、とりわけ骨髄腫の処置法に使用するための組合せ剤に関する。好ましくは、かかる組合せ剤において骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす化合物はボルテゾミブである。

有効成分がそれぞれの場合において遊離形または薬学的に許容される塩形で存在する、ＨＤＡＣ阻害剤、および骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす化合物、ならびに所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む組合せ剤を、本明細書において本発明の組合せ剤と称する。

本発明の組合せ剤は組合せ製剤または医薬組成物であり得る。

「組合せ製剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、上記定義の有効成分を独立して、または異なる量の有効成分との別個の固定された組合せの使用によって、すなわち同時に、または異なる時点で投与することができるという意味における「パーツのキット」ととりわけ定義する。キットのパーツを例えば同時にまたは時間をずらして、すなわち異なる時点で、そして任意のパーツのキットのパーツを等しいまたは異なる時間間隔で投与することができる。大変好ましくは、時間間隔はパーツの組合せ使用において処置される疾患に対する効果が、任意の一つのみの有効成分の使用によって得ることができる効果よりも大きくなるように選択される。有効成分１の合計量の、組合せ製剤において投与される有効成分２の量に対する比は、例えば、処置される患者亜母集団の必要または異なる必要が具体的な患者の疾患、年齢、性別、体重等のためであり得る１人の患者の必要に対処するために変化し得る。好ましくは、少なくとも１つの有利な効果、例えば第１および第２の有効成分の効果の相互上昇、とりわけ相乗効果、例えば相加効果以上、さらなる有利な効果、より少ない副作用、第１および第２の有効成分の１つまたは２つの非有効投与量での組合せ治療効果、およびとりわけ第１および第２の有効成分の強い相乗効果が存在する。

さらに、本発明は骨髄腫に対して共同的に治療上有効である量で本発明の組合せ剤を、それを必要とする温血動物に投与することを含む、骨髄腫の処置法を提供する。

当業者は、本明細書に記載のＨＤＡＣ活性を阻害する化合物または本発明の組合せ剤の骨髄腫に対する有利な効果を証明するための関係のある試験モデルを選択することが十分可能である。ＨＤＡＣ活性を阻害する化合物または本発明の組合せ剤の薬理活性を例えば、適当な臨床試験または下記実施例の方法で示すことができる。適当な臨床試験は、例えば進行性骨髄腫を有する患者のオープンラベル非ランダム化用量漸増試験である。かかる試験によって、とりわけ本発明の組合せ剤の相乗効果が証明される。骨髄腫に対する有利な効果をこれらの試験結果から直接、または当業者に既知の試験デザインに変更することで測定することができる。例えば、一方の組合せパートナーに対して固定用量で投与し、そして第２の組合せパートナーに対して最大耐用量（ＭＴＤ）に達するまで漸増することができる。あるいは、プラセボ対照二重盲検試験を行って本明細書の本発明の組合せ剤の利点を証明することができる。

実施例
ＨＤＡＣ阻害剤
Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、化合物（ＩＩＩ）（Novartis Pharma, Basel, Switzerland）を脱イオン水に溶解し、−２０℃で保存し、次いで解凍し、細胞培養実験のために培地で希釈した。動物実験のために、薬剤を滅菌水に溶解した後腹膜内注射した。

ＭＭ誘導細胞系および患者細胞
ボルテゾミブ感受性（ＭＭ．１Ｓ）およびボルテゾミブ抵抗性（ＭＭ．１Ｒ）ヒトＭＭ細胞系、ならびにドキソルビシン（Ｄｏｘ４０）、ミトキサントロン（ＭＲ２０）、およびメルファラン（ＬＲ５）に抵抗性のＲＰＭＩ−８２２６細胞を、１０％胎児ウシ血清、２ｍｍｏｌ／ＬのＬ−グルタミン（GIBCO, Grand Island, NY）、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、および１００ｍｇ／ｍＬのストレプトマイシン（GIBCO）と共にＲＰＭＩ−１６４０培地（Cellgro, Mediatech, VA）中で培養した。薬剤抵抗性細胞系をドキソルビシン、ミトキサントロン、メルファランまたはボルテゾミブと共に培養してそれらの薬剤感受性の欠如を確認した。ＭＭ患者細胞を抗ＣＤ１３８ＭＡＣＳマイクロビーズ（Miltenyi, SanDiego, CA）での正の選択によって精製した（＞９５％ＣＤ１３８＋）。骨髄単核細胞（ＢＭＭＣ）および末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）標本をFicoll-Hipaque密度沈降によって得て、９６ウェルプレート中で化合物（ＩＩＩ）と共に、またはなしで、インキュベートした。

ＢＭＳＣ培養
骨髄標本をＭＭを有する患者から得た。Ficoll-Hipaque密度沈降によって分離した単核細胞を使用して長期ＢＭ培養を確立した。接着細胞単層が発生した後に、細胞を０．２５％トリプシンおよび０．０２％ＥＤＴＡを含むＨＢＳＳ中に収穫し、洗浄し、遠心分離によって回収した。ＢＭＳＣを平底９６ウェルプレートに一晩播種し、３×１０^４ＭＭ．１Ｓ細胞を４８時間加えた。上清１５０μＬを除去し、４８時間培養の最後の８時間の間、細胞に［３Ｈ］チミジン（０．５μＣｉ／ウェル）を加えた。ＤｕｏｓｅｔＥＬＩＳＡ（R＆D System）を使用してＭＭ．１Ｓ細胞と共に、またはなしで、化合物（ＩＩＩ）の存在下、または非存在下でのＢＭＳＣの４８時間培養物の上清中のＩＬ−６を測定した。

ＤＮＡ合成
ＭＭ細胞（３×１０^４細胞／ウェル）を９６ウェル培養プレート（Costar, Cambridge, MA）中で、培地、化合物（ＩＩＩ）、および／またはボルテゾミブまたは組み換えＩＬ−６（Genetics Institute, Cambridge, MA）の存在下で、４８時間３７℃でインキュベートした。ＤＮＡ合成を３Ｈ−チミジン（NEN Products, Boston, MA）取り込みによって測定した。４８時間培養の最後の８時間の間、細胞に３Ｈ−チミジン（０．５μＣｉ／ウェル）を加えた。全実験を３連で行った。

増殖阻害アッセイ
化合物（ＩＩＩ）のＭＭおよびＢＭＳＣ増殖に対する阻害効果を、細胞のＭＴＳ（Promega, Madison, WI）染料吸収を測定することによって評価した。２００μＬ培地＋薬剤中２４、４８または７２時間培養物由来の細胞に、培養の最後の４時間の間、各ウェルに４０μＬの５ｍｇ／ｍＬＭＴＳを加えた。吸収を４９０ｎｍで、分光光度計（Molecular Devices Corp., Sunnyvale, CA）を使用して測定した。

細胞サイクル分析
０、８、１２、１８、３６および４２時間、化合物（ＩＩＩ）（１μＭ）、化合物（ＩＩＩ）＋パン−カスパーゼ阻害剤ＺＶＡＤ−ＦＭＫ（２０μＭ）（Calbiochem, San Diego, CA）、または対照培地中で培養したＭＭ細胞型および患者ＭＭ細胞を、収穫し、ＰＢＳで洗浄し、７０％エタノールで固定し、１０ｍｇ／ｍＬＲＮａｓｅ（Roche Diagnostics Corp., Indianapolis, IN）で処置した。細胞を５ｍｇ／ｍＬプロピジウムアイオダイド（Sigma）で染色し、細胞サイクルプロファイルをプログラムＭソフトフェアを使用してＥｐｉｃｓフロー血球計算器（Coulter Immunology, Hialeah, FL）で測定した。データをＰｈｏｅｎｉｘフローシステムを使用して分析した。

アポトーシスの検出
上記細胞サイクル分析を使用してサブＧ１細胞を同定することに加えて、アポトーシスをまた、アネキシンＶ染色を使用して確認した。ＭＭ細胞を培地のみ、または培地＋１μＭの化合物（ＩＩＩ）で、３７℃で２４時間培養した。細胞を氷冷ＰＢＳで２回洗浄し、結合バッファー（１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１４０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ、２．５ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ_２）に再懸濁した（１×１０^６細胞／ｍＬ）。ＭＭ細胞（１×１０^５）をアネキシンＶ−ＦＩＴＣ（５μＬ；Pharmingen, San Diego, CA）およびＰＩ（５ｍｇ／ｍＬ）と１５分間室温でインキュベートした。アネキシンＶ＋ＰＩアポトーシス細胞をＥｐｉｃｓ細胞選別機（Coulter）を使用して数えた。

イムノブロッティング
患者ＭＭ細胞およびＭＭ．１Ｓ細胞を０．０１、０．１または１μＭの化合物（ＩＩＩ）と培養し；収穫し；洗浄し；そして溶解バッファー（ＲＩＰＡバッファー、２ｍｍｏｌ／ＬのＮａ_３ＶＯ_４、５ｍｍｏｌ／ＬのＮａＦ、１ｍｍｏｌ／Ｌのフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）、５ｍｇ／ｍＬのロイペプチンおよび５ｍｇ／ｍＬのアプロチニン）を使用して溶解した。細胞溶解物をＳＤＳ−ＰＡＧＥに付し、ポリビニリデンジフルオリド（ＰＶＤＦ）膜に転写し、抗アセチル化ヒストン（Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY）、抗ｐ２１抗体（Santa Cruz Biotech, Santa Cruz, CA）、抗ＰＡＲＰ；抗カスパーゼ−８、抗カスパーゼ−９および抗カスパーゼ−３（Cell Signaling, MA）；ならびに抗ポリユビキチン結合体、抗ＬＭＰ７、抗β５（Affiniti, Mamhead, Exeter, Devon, UK）で免疫ブロットする。膜をはぎ、抗チューブリンまたは抗βアクチン（Sigma, St Louis, MO）で再プローブして等価タンパク質のローディングを確認する。

プロテアソーム活性アッセイ
細胞質抽出物のプロテアソーム活性を蛍光プロテアソーム基質Ｓｕｃ−ＬＬＶＹＡＭＣ（Calbiochem, San Diego, CA）を使用して定量した。簡潔に述べると、細胞質抽出物を抽出し（５μＬ中タンパク質１００μｇ）、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．８）、０．５ｍＭのＥＤＴＡおよび１００μＭのＳｕｃ−ＬＬＶＹ−ＡＭＣを含む反応物２００μＬ中で、室温で９０分間インキュベートした。蛍光をマイクロタイタープレートフルオロメーター（励起波長、３６０ｎｍ；放射波長、４６０ｎｍ）で測定した。

ＥＭＳＡ
核抽出物のＥＭＳＡを行った。二本鎖ＮＦ−κＢコンセンサスオリゴヌクレオチドプローブ（５’−ＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣ−３’、Santa Cruz Biotechnology）を［γ−３２Ｐ］ＡＴＰ（２２２ＴＢｑ／ｍＭで５０μＣｉ；NEN, Boston, MA）で末端標識した。オリゴヌクレオチド１ｎｇおよび核タンパク質５μｇを含む結合反応を室温で２０分間、全体積１０ｍＬの結合バッファー［１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、０．５ｍＭのＤＴＴ、４％グリセロール（ｖ／ｖ）および０．５ｍｇのポリ（ｄＩ．ｄＣ）（Pharmacia, Peapack, NJ）］中で行った。

異種移植片マウスモデル
５〜６週齢のBeige-Nude-Xidマウスに、右側腹に１００μＬのＲＰＭＩ１６４０中３×１０^７ＭＭ細胞を、１００μＬのマトリゲルベース膜マトリックス（Becton Dickinson, Bedford, MA）と共に、既報のとおりに皮下摂取させた。腫瘍が測定可能となったとき、マウスを化合物（ＩＩＩ）２５ｍｇ／ｋｇを毎日腹腔内投与するグループ、または同じスケジュールでビークルのみ（０．９％塩酸ナトリウム）を投与する対照グループに割り当てた。化合物（ＩＩＩ）での処置は２５ｍｇ／ｋｇで行った。最長直行腫瘍径のキャリパー測定を２日ごとに測定して、楕円の三次元体積を意味する下記式：
４π／３×（幅／２）２×（長さ／２）
を使用して評価した。腫瘍が２ｃｍに達したとき動物を屠殺した。生存を処置の第一日目から死亡まで評価した。腫瘍増殖を処置の第一日目から最初の屠殺の日（９日目）まで評価した。

統計的分析
薬剤処置対対照培地において観察された差異の統計的有意をスチューデントｔ検定を使用して決定した。有意の最小レベルはｐ＜０．０５であった。化合物（ＩＩＩ）とデキサメタゾンの相乗効果および拮抗作用を分析するために中間用量効果分析を、商業的に入手可能なソフトウェアプログラムＣａｌｃｕｓｙｎ（Biosoft, Ferguson, MO, USA）と組み合わせて行った。マウスの生存曲線をＫａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ法を使用して計算した。対照群と処置群の間の生存時間の差をログランク検定を使用して比較した。中間生存時間をＦｉｓｈｅｒの正確確立検定を使用して比較した。２本の腕における腫瘍増殖速度を比較するために、線形混合効果モデル（ランダム係数モデル）をフィットした。

さらに、実施例は化合物（ＩＩＩ）が４８時間で１０ｎＭ未満の中間阻害濃度で、常套の化学療法に抵抗性のＭＭ細胞系、ならびにＭＭ患者細胞において、ＭＴＳアッセイおよびトリチウム化チミジン取り込みによって測定したとおり、骨髄腫細胞増殖を阻害することを示す。ＭＭ．１Ｓ骨髄腫細胞増殖はまた、骨髄微小環境の刺激効果を克服する能力を示す骨髄間質細胞と共培養したとき、阻害される。プロアポトーシス効果をウェスタンブロットによって確認した。カスパーゼ８、カスパーゼ９、カスパーゼ３およびＰＡＲＰの顕著な切断が２０ｎＭの化合物（ＩＩＩ）でＭＭ．１Ｓ細胞において観察され、このことは化合物（ＩＩＩ）介在アポトーシスにおける内因性および外因性両方のアポトーシス経路に含まれることを示した。ｐ２１の上方制御およびｃ−ｍｙｃの下方制御に関連していた。相乗活性がプロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブを含む組合せ剤において観察された。化合物（ＩＩＩ）誘導性ＨＤＡＣ阻害が低ナノモル濃度でヒストン高アセチル化をもたらした。α−チューブリンのアセチル化はアセチル基をリシン４０に付加することからなる翻訳後修飾であり、これはＨＤＡＣ６またはチューブリンデアセチラーゼ（ＴＤＡＣ）によって反転する。チューブリンアセチル化は微小管構造および効果の分化において重要な役割を果たす。さらに、ＴＤＡＣはポリユビキチン化ミスフォールドタンパク質およびダイニンと構成的に結合してミスフォールドタンパク質を微小管に沿ってアグリソームを輸送するダイニンモーターに補充し、これはＭＭ細胞のアポトーシスに対する重要な防御機構である。重要なことに、ＭＭ．１Ｓ細胞におけるＴＤＡＣの用量依存阻害が化合物（ＩＩＩ）の低ナノモル濃度で観察された。

骨髄腫に対して共同的に治療上有効な量の本発明の組合せ剤を含む医薬組成物を提供することは本発明の目的の一つである。この組成物において、組合せパートナーを同時に、逐次的に、または個別に、１個の組合せ単位投与形態または２個の別個の単位投与形態で投与することができる。単位投与形態はまた、組合せ剤を固定することができる。

組合せパートナーの個別投与のための医薬組成物、および固定された組合せ剤における投与のための医薬組成物、すなわち少なくとも２種の組合せパートナーを含む１個のガレヌス製剤を、本発明によって、自体既知の方法で製造することができ、そしてヒトを含む哺乳類（温血動物）に経腸、例えば経口または直腸、および非経腸投与に適した、少なくとも１種の治療上有効量の薬理学的に活性な組合せパートナーを単独で、または１種以上の薬学的に許容される担体と共に含む、とりわけ経腸または非経腸投与に適したものである。

新規医薬組成物は、例えば約１０％〜約１００％、好ましくは約２０％〜約６０％の有効成分を含む。経腸または非経腸投与用組合せ治療のための医薬組成物は、例えば単位投与形態のもの、例えば糖衣錠、錠剤、カプセル剤または座薬、およびさらにアンプルである。他に記載がない限り、これらは自体既知の方法、例えば常套の混合、造粒、糖コーティング、溶解または凍結乾燥手段によって製造される。かかる投与形態の個々の用量に含まれる組合せパートナーの単位成分は、必要な有効量が複数の投与単位の投与によって達成することができるので、それ自体が有効量を構成する必要はないということが理解される。

とりわけ、本発明の組合せ剤の各組合せパートナーの治療上有効量は同時または逐次、そして任意の順序で投与することができ、そして成分を個別に、または固定された組合せ剤として投与することができる。例えば、本発明の骨髄腫の処置法は、共同的に治療上有効量、好ましくは相乗効果量、例えば本明細書に記載の量に対応する日用量の、（ｉ）遊離形または薬学的に許容される塩形の組合せパートナー（ａ）の投与、および（ｉｉ）遊離形または薬学的に許容される塩形の組合せパートナー（ｂ）の同時もしくは任意の順序での逐次投与を含み得る。

本発明の組合せ剤の個々の組合せパートナーを治療コース中別個に異なる時点で、または別個もしくは１個の組合せ形態で同時に投与することができる。さらに、投与なる用語はまた、ｉｎｖｉｖｏで組合せパートナーそれ自体に変換される組合せパートナーのプロドラッグの使用を包含する。したがって、本発明は同時または異なる処置の全てのかかるレジメンを含むものとして理解され、「投与」なる用語はそのように理解される。

ＨＤＡＣ活性を阻害するために使用する化合物および本発明の組合せ剤で使用する各組合せパートナーの有効量は使用する具体的な化合物または医薬組成物、投与形態、処置する骨髄腫、処置する骨髄腫の重症度に依存して変化し得る。したがって、本発明の組合せ剤の投与レジメンは投与経路ならびに患者の腎臓および肝臓機能を含む様々な要素によって選択される。通常の技術を有する医師、臨床医または獣医は、ＨＤＡＣ活性を阻害する化合物の有効量、または状態の進行を予防、逆行または阻止するために必要な本発明の組合せ剤の１種の有効成分の有効量を、容易に決定および予測することができる。毒性なく効果を得る範囲内の有効成分の濃度を達成する最適な予測には、標的部位に対する有効成分の利用能の動力学に基づくレジメンが必要である。

さらに、本発明は本発明の組合せ剤と共に、骨髄腫の処置において同時、個別または逐次使用するための指示書を含む商品パッケージを提供する。

本発明はまた、骨髄腫の処置用医薬の製造のための、本明細書に定義の式（Ｉ）の化合物の使用、および本発明の組合せ剤の使用を提供する。

Claims

有効成分がそれぞれの場合に遊離形または薬学的に許容される塩形であるＨＤＡＣ阻害剤および常套の化学療法に抵抗性である多発性骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす化合物、ならびに所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む、同時、個別または逐次使用のための組合せ剤であって、
前記ＨＤＡＣ阻害剤が式（ＩＩＩ）

を有するＮ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドまたはその薬学的に許容される塩であり、
前記多発性骨髄腫細胞のアポトーシスを引き起こす化合物がボルテゾミブである、組合せ剤。
骨髄腫の処置に同時、個別または逐次使用するための、請求項１に記載の組合せ剤。