JP5425053B2 - 微量物質検出装置 - Google Patents
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Description
例えば、DNAの場合は、例えば、特許文献1に開示されているように、標識物質である免疫反応材を被検出対象物質となるDNAに結合させ、そのDNAと相補的なDNAを結合させた支持体によって免疫反応剤を結合させたDNAを捕らえ、免疫反応によって上記免疫反応材に特異的に結合する蛍光物質等を標的となるDNAに結合させて、その蛍光を測定することで被検出対象物質の検出・定量を行う。
このような、被検出対象物質の検出・定量のための作業は、手作業で行われる。
又、標識物質として、例えば、酸化還元酵素を用いる場合もある。この場合は、酸化還元反応により生じる電流等を測定することにより、被検出対象物質の検出や定量を行う。
まず、前述したように、被検出対象物質と標識物質との結合から検出・定量までの全ての作業を自動化した装置はなく、DNA等の被検出対象物質の検出・定量のための作業は全て手作業で行われていた。その為、検出に長い時間や多くの労力を要してしまい、且つ、正確な検出を行うためには作業者の熟練を要してしまうという問題があった。
また、例えば、特許文献3や特許文献4に記載されているような装置は、複数のセルや流路が設けられていること等により、複雑な構成となっている。
また、酸化還元反応によって発生する電流等を測定する方法の場合、2つの電極のうちの一方をイオン交換膜等で隔離されバッファ液が封入された内部に設置し、他方をその外部の酸化還元反応が行なわれる箇所に設置しておく必要がある。このように構成することにより 一方の電極側に酸化還元反応で発生したイオンのみが移動することになり、それによって、2つの電極間に酸化還元反応による電流を生じさせることができる。
又、請求項2による微量物質検出装置は、請求項1記載の微量物質検出装置において、上記コーティングは、ゼオライト、イオン交換樹脂、イオン透過樹脂、含水樹脂、バッファ液を含んだ樹脂のうちの何れかによるものであることを特徴とするものである。
又、請求項3による微量物質検出装置は、請求項1又は請求項2記載の微量物質検出装置において、上記一対の電極は金属箔からなる薄板状の電極であることを特徴とするものである。
又、請求項4による微量物質検出装置は、請求項1〜請求項3の何れかに記載の微量物質検出装置において、上記測定部には、絶縁シートが設置されており、上記一対の電極は、上記絶縁シートに貼り付けられているものであることを特徴とするものである。
又、請求項2による微量物質検出装置は、上記測定部に設置された電極の一方に施されたコーティングが、ゼオライト、イオン交換樹脂、イオン透過樹脂、含水樹脂、バッファ液を含んだ樹脂のうちの何れかによるものであるため、前述のように、測定部を複雑な構成とする必要がなく、更に微量物質検出装置を安価且つ容易に製造することができる。
又、請求項3による微量物質検出装置は、上記電極は金属箔からなる薄板状の電極であるため、微量物質検出装置の構成を簡素化し、安価且つ容易に製造することができる。
又、請求項4による微量物質検出装置は、測定部に絶縁シートが設置されており、上記陽極及び上記陰極は上記絶縁シートに貼り付けられているものであるため、微量物質検出装置の構成をより簡素化し、安価且つ容易に製造することができる。
なお、コーティングが施された部分をコーティング部55とする。
なお、本実施の形態においては、上記絶縁シート49に上記電極51を貼り付けてからコーティングを施しているが、上記電極51の全体に予めコーティングを施したものを上記絶縁シート49に貼り付けることも考えられる。この場合、上記電極51と上記絶縁シート49の間にもコーティング部55が存在することになる。
尚、この磁気ビーズ91と酸化還元酵素93は、DNA89と特異的に結合するように処理されているものである。
なお、上記陽イオン103以外の物質は上記コーティング部55を通過することはない。
尚、この被検出対象物質の測定は、上記電極51・53間の電圧を測定することでも行うことができる。
まず、本実施の形態による微量物質検出装置によると、被検出対象物質であるDNA89への磁気ビーズ91と標識物質としての酸化還元酵素93の結合、DNA89の精製、DNA89の検出・定量までの一連の作業を、比較的簡単な構成の装置で自動的に行うことができ、微量物質の検出のための労力を大幅に軽減することができると共に作業に要する時間を大幅に短縮することができる。これは、第1〜第7押当式バルブ15、29、31、37、61、63、65によって試料溶液を混合する混合部33、試料溶液を反応させる反応部35、試料溶液から精製された被検出対象物質の測定を行う測定チャンバ45等をチューブ1に連続的に設け、又、試料溶液を移動させるための負圧を発生させるポンプ67と、磁気ビーズ91に結合した被検出対象物質を吸着・保持する第1、第2磁気制御部43、69と、反応部の温度制御を行う温度制御用ヒータ39及び反応部内の攪拌を行う超音波振動装置41を設け、上記第1〜第7押当式バルブ15、29、31、37、61、63、65、ポンプ67、第1、第2磁気制御部43、69、温度制御ヒータ39、超音波振動装置41は制御装置71によって制御するように構成したからである。
又、上記一連の作業を自動的に行うことができるため、熟練者でなくとも正確且つ迅速な微量物質の検出・定量を行うことができる。
又、上記磁気ビーズ91と被検出対象物質であるDNA89を結合させているので、上記第1、第2磁気制御部43、69とポンプ67を利用した上記DNA89のチューブ1内での移動の制御や精製が容易に可能となる。
又、上記反応部35には、上記温度制御ヒータ39と上記超音波振動装置41が設置されているため、被検出対象物質であるDNA89への磁気ビーズ91と酸化還元酵素93の結合を、効率よく行うことができる。
又、第1〜第7押当式バルブ15、29、31、37、61、63、65を用いているため、複雑な機械的構成を要することなく、自動的な制御が可能な微量物質検出装置を実現することができる。
又、電流や電圧を測定することで、被検出対象物質の検出・定量を行うため、安価で簡単な構成の装置で測定を行うことができる。特に、ラジオアイソトープ等を用いない構成であるため、被曝の心配がなく安全に測定を行うことができる。
又、測定チャンバ45内には、イオン交換樹脂等によるコーティングを施された電極51とコーティングを施されていない電極53が設置され、これら電極51及び電極53は絶縁シートに貼り付けられている。そのため、上記測定チャンバ45内をイオン交換膜等による隔壁で2つの室に仕切り、夫々の室に電極を設置し、一方の部屋にバッファ液を封入するような複雑な構成としなくても、酸化還元反応によって上記電極51と上記電極53との間に電位差を生じさせることができ、被検出対象物質の検出・定量が可能となる。また、このような簡易な構成であるため、微量物質検出装置の製造を安価に且つ容易に行うことができる。
例えば、標識物質としては、酸化還元酵素以外のものを使用する場合も考えられる。
又、被検出対象物質もDNAに限られず、その他核酸やたんぱく質など、様々な種類のものが考えられる。
又、押当式以外にゲートバルブ等のバルブを使用することが考えられる。
又、混合部と反応部と測定部を一本のチューブとせず、それぞれの部材がバルブによって接続されている構成も考えられる。
又、バッファ液に使用する緩衝液も、被検出対象物質や標識物質の種類などに応じて、様々な種類のものを使用する場合が考えられる。
又、陽極及び陰極の形状や位置、コーティングの材料は、様々なものが考えられる。例えば、コーティングの材料は、ゼオライト、イオン透過樹脂、含水樹脂、バッファ液を含んだ樹脂等でもよい。
又、本実施の形態では、絶縁シートの同じ面に陽極と陰極を配置したが、絶縁シートの一方の面に陽極を配置し、他方の面に陰極を配置する場合も考えられる。このような場合は、測定チャンバを小型化することができる。又、絶縁シートを筒状にして、その内側に電極を貼り付けるような構成も考えられる。
又、絶縁シートの材質も、絶縁性のものであればよく、ポリプロピレン以外にも様々なものが考えられる。
7 検体
11 バッファ液
15 第1押当バルブ
25 第1試薬
27 第2試薬
29 第2押当バルブ
31 第3押当バルブ
33 混合部
35 反応部
37 第4押当バルブ
39 温度制御用ヒータ
41 超音波振動装置
43 第1磁気制御部
45 測定チャンバ
49 絶縁シート
51 陽極
53 陰極
55 コーティング部
61 第5押当バルブ
63 第6押当バルブ
65 第7押当バルブ
67 ポンプ
69 第2磁気制御部
71 制御装置
89 DNA
93 酸化還元酵素
95 酸化酵素
97 被酸化物質
Claims (4)
- チューブと、
上記チューブに接続され上記チューブ内を吸引/加圧することにより上記チューブ内において上記試料溶液を移動させる吸引/加圧手段と、
上記チューブに設けられ被検出対象物質が含まれる検体と磁気ビーズと標識物質とバッファ液を混合させ上記被検出対象物質と上記磁気ビーズと上記標識物質とを混合させる混合部と、
上記チューブであって上記吸引/加圧手段と上記混合部との間にそれぞれバルブを介して連設され上記混合部で混合された被検出対象物質が含まれる検体と磁気ビーズと標識物質とバッファ液を反応・結合させて試料溶液とする反応部と、
上記チューブであって上記吸引/加圧手段と上記反応部との間にそれぞれバルブを介して迂回した状態で設けられ、上記試料溶液が導入され、上記被検出対象物質に結合された上記標識物質による化学反応を発生させ、それにより生じた電気的な変位を測定する測定部と、
上記測定部に設置された一対の電極と、
上記反応部と上記測定部に設けられ磁力により上記磁気ビーズと結合した被検出対象物質を吸着・保持する磁気制御部と、
上記磁気制御部と上記吸引/加圧手段と上記各バルブを制御する制御装置と、を具備し、
上記一対の電極の一方には、樹脂のコーティングが施されていて、該コーティングにより設けられたコーティング部は上記標識物質による化学反応により荷電された物質のみを透過するものであることを特徴とする微量物質検出装置。 - 請求項1記載の微量物質検出装置において、
上記コーティングは、ゼオライト、イオン交換樹脂、イオン透過樹脂、含水樹脂、バッファ液を含んだ樹脂のうちの何れかによるものであることを特徴とする微量物質検出装置。 - 請求項1又は請求項2記載の微量物質検出装置において、
上記一対の電極は金属箔からなる薄板状の電極であることを特徴とする微量物質検出装置。 - 請求項1〜請求項3の何れかに記載の微量物質検出装置において、
上記測定部には、絶縁シートが設置されており、
上記一対の電極は、上記絶縁シートに貼り付けられているものであることを特徴とする微量物質検出装置。
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