JP5284536B2 - 藻類から細胞内生成物および細胞塊および砕片を得るためのシステム、装置および方法、ならびにその誘導物および使用法 - Google Patents
藻類から細胞内生成物および細胞塊および砕片を得るためのシステム、装置および方法、ならびにその誘導物および使用法 Download PDFInfo
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Description
細胞溶解方法および装置
燃料および他の材料の原料としての藻類に対する関心にかんがみて、大規模に藻類細胞を処理する方法および装置を開発することは、こうした目的で藻類細胞を処理するときに極めて有益である。こうした方法および装置を以下に述べる。
脂質抽出の定量化および最適EMP抽出パラメータの確認
下記に述べる実験では、本明細書に記載されるEMP装置を使用して脂質抽出の定量化および最適抽出パラメータの確認を記載する。以下に記載する結果は、図14のデータに対応する。
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。このバッチは、約1L/分の流量でEMPユニットに重力で供給した。合計20.8Lの藻類培養物を処理した。処理した流れを、脂質分析のために収集後に最上層からすくった。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:433mg/L
脂質含有量:乾燥質量の5.5%(23.86mg/L)
pH:7.1
導電率:8.82mS/cm
抽出プロセスの詳細:
抽出試料の容積:20.8L
流量:1L/分
電圧:4.3V
電流:22アンペア
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。このバッチは、約1L/分の流量でEMPユニットに重力で供給した。合計9.2Lの藻類培養物を処理した。処理した流れは、表面に浮かぶ脂質層を収集する先細りの長首を有するように設計された脂質収集装置に収集された。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:207mg/L
脂質含有量:乾燥質量の13%(26.91mg/L)
pH:6.8
導電率:9.31mS/cm
抽出プロセスの詳細:
抽出試料の容積:9.2L
流量:1L/分
電圧:3.4V
電流:20アンペア
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。このバッチは、約1L/分の流量でEMPユニットに重力で供給した。合計11Lの藻類培養物を処理した。処理した流れを、脂質分析のために収集後に最上層からすくった。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:207mg/L
脂質含有量:乾燥質量の13%(26.91mg/L)
pH:6.8
導電率:9.31mS/cm
抽出プロセスの詳細:
抽出試料の容積:11L
流量:1L/分
電圧:3.4V
電流:20アンペア
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。2リットルの藻類培養物を処理した。処理した流れを2リットルの容量フラスコに収集し、最上部の脂質層を分析用に回収した。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:410mg/L
脂質含有量:乾燥質量の8.2%(33.62mg/L)
pH:7.1
導電率:8.99mS/cm
抽出プロセスの詳細:
抽出試料の容積:2.01L
流量:1.5L/分
電圧:12.4V
電流:18アンペア
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを12インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。1.87リットルの藻類培養物を処理した。処理した流れを2リットルの容量フラスコに収集し、最上部の脂質層を分析用に回収した。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:800mg/L
脂質含有量:乾燥質量の19.9%(159.2mg/L)
pH:7.6
導電率:8.15mS/cm
抽出プロセスの詳細:
抽出試料の容積:1.87L
流量:0.2ガロン/分(0.756L/分)
電圧:4.8V
電流:20.2アンペア
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを12インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。1.87リットルの藻類培養物を処理した。処理した流れを2リットルの容量フラスコに収集し、最上部の脂質層を分析用に回収した。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:500mg/L
脂質含有量:乾燥質量の16.15%(80.75mg/L)
pH:7.5
導電率:8.18mS/cm
抽出プロセスの詳細:
抽出試料の容積:1.87L
流量:1.13L/分
電圧:4.7V
電流:20アンペア
所与の藻類バッチについての最適EMP抽出パラメータを確認するために、広範囲のパラメータのマトリックスでEMPを試験した。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。試験のマトリックスを構成している個々の試料を小さな116mlの瓶に収集した。底部の細胞の塊および砕片と水を注射器で抜き取り、抽出試料瓶には最上部の脂質層だけを残した。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:210mg/L
脂質含有量:乾燥質量の24%(50mg/L)
pH:7.8
導電率:7.89mS/cm
抽出結果:
抽出試料の容積:116ml
処理前の藻類試料116mlに元々存在した脂質の量:5.8mg
抽出試料はフォルチ法によって解析した。試験条件のマトリックスを構成する関連パラメータおよび抽出効率を表1に示した。
本明細書に記載されるEMPユニットから抽出された脂質を定量するために、以下の実験を行った。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。試料は116mlの瓶または400mlの瓶のいずれかに収集した。底部の細胞の塊および砕片と水を注射器で抜き取り、抽出試料瓶には最上部の脂質層だけを残した。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:320mg/L
脂質含有量:乾燥質量の18%(57.6mg/L)
pH:7.3
導電率:7.93mS/cm
抽出プロセスの詳細:
流量:0.95L/分
電圧:5.3V
電流:20アンペア
結果:
抽出試料1:
容積:412ml
抽出効率:83.31%
抽出試料2:
容積:116ml
抽出効率:80.69%
抽出試料3:
容積:116ml
抽出効率:95.64%
所与の藻類バッチについての最適EMP抽出パラメータを確認するために、本明細書に記載されるEMP装置を異なる4組の条件で試験した。成長室からの20リットルのナンノクロロプシス オキュラータのバッチを6インチのEMPユニットで処理した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。
対照試料の詳細(試料#1130−0):
乾燥質量濃度:320mg/L
脂質含有量:乾燥質量の11%(35mg/L)
pH:7.5
導電率:8.15mS/cm
試料1130−3:流量=0.25ガロン/分、電圧=3.7V、電流=15アンペア
試料1130−4:流量=0.25ガロン/分、電圧=4.0V、電流=20アンペア
試料1130−8、9:流量=0.38ガロン/分、電圧=4.0V、電流=20アンペア
試料1130−12:流量=0.38ガロン/分、電圧=3.7V、電流=15アンペア
新しいパイプEMP装置をMXキャビテーションおよび加熱と共に試験して以前の試験と比較した。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータをパイプSSEシステムで処理した。パイプSSEシステムの構成部品は、パイプEMPユニット、パイプEMPユニットのまわりの加熱ストリップシステム、およびMXキャビテーションユニットである。MXキャビテーションユニットはパイプEMPユニットより前に設けられている。任意にMXキャビテーションユニットおよびEMPユニットのまわりの加熱システムを使用することができる。キャビテーションは1分間行った。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。試料は120mlの瓶に収集した。底部の細胞の塊および砕片と水を注射器で抜き取り、抽出試料瓶には最上部の脂質層だけを残した。
対照バッチの詳細:
乾燥質量濃度:280mg/L
脂質含有量:乾燥質量の21%
pH:7.7
導電率:7.42mS/cm
抽出結果および観察:
抽出試料の容積:120ml
所与のバッチの藻類について可能な最も高い効率で脂質を抽出するために、本明細書に記載されるEMP装置を複数の異なる組の条件で試験した。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータを6インチのEMPユニットで処理して脂質を抽出した。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。試料は1リットルの瓶に収集した。底部の細胞の塊および砕片と水を注射器で抜き取り、抽出試料瓶には最上部の脂質層だけを残した。
対照バッチの詳細(試料#20100104−10):
乾燥質量濃度:285mg/L
脂質含有量:乾燥質量の6.67%(19mg/L)
pH:8.4
導電率:7.99mS/cm
抽出結果:
抽出試料の容積:1L
処理前の藻類試料1Lに元々存在した脂質の量:19mg
暗所および寒冷中に一晩貯蔵した場合の脂質抽出効率への影響を検討した。同じ藻類バッチからの試料を試験12で試験し、翌日に試験13で試験した。試験12で試験した同じ藻類バッチを、翌日も試験した(同じ元の藻類培養物について同じ試験を行った;生体試料を成長タンクから抜き取った日に、すなわちリアルタイムに、1つの試験を行った。そして、2日目に、一晩放置した後試料の残りを試験した)。1バッチのナンノクロロプシス オキュラータをパイプSSEシステムで処理した。パイプSSEシステムの構成部品は、パイプEMPユニット、パイプEMPユニットのまわりの加熱ストリップシステム、およびMXキャビテーションユニットである。MXキャビテーションユニットはパイプEMPユニットより前に設けられている。任意にMXキャビテーションユニットおよびEMPユニットのまわりの加熱システムを使用することができる。キャビテーションは1分間行った。バッチ流量は流量計とポンプを使用して調節した。試料は120mlの瓶に収集した。底部の細胞の塊および砕片と水を注射器で抜き取り、抽出試料瓶には最上部の脂質層だけを残した。
抽出試料の容積:120ml
炭水化物およびタンパク質を採取するためのキャビテーションおよびEMPの使用
図14は、藻類から炭水化物およびタンパク質を採取するための試験手順の結果を示す。この試験手順は以下のように行われた。藻類スラリーは、最初は室温においてEMPユニット中で処理した。EMPで処理されたスラリーを、貯蔵タンクに収集した。次いで、これをMXユニットに通して気胞を作った。次いで、気胞が作られたスラリーを数分間静置した。多くの密な藻類細胞の塊および砕片が最上部に上昇して浮いた状態で残った。浮いている細胞の塊および砕片は分析のために最上部から収集された。
M=(d1−d2)×V
タンパク質組成=x/Mmgのタンパク質/藻類乾燥質量mg。
当業者なら、本発明が、上記の目的および利点、ならび本発明に特有のものを得るのに十分に適していることを容易に理解するであろう。好ましい実施形態を現在代表するものとして本明細書に記載した方法、システム、および装置は、例示的であり、本発明の範囲を限定するものとして意図するものではない。当業者ならその変更および他の使用を思いつくであろうが、これらは、本発明の趣旨に包含されるものであり、特許請求の範囲によって定義される。
Claims (11)
- 水性懸濁液中の藻類細胞から少なくとも1つの細胞内成分を採取するための装置であって、
a)カソードとして作用する少なくとも1つの第1の導電体およびアノードとして作用する第2の導電性ハウジングであって、第1の導電体の外面とハウジングの内面の間に空間が画定されて、水性懸濁液用の流路を提供するように、少なくとも1つの第1の導電体がハウジング内に配置されており、第1の導電体とハウジングの片面または両面の少なくとも一部が除去されて、第1の導電体とハウジングの上またはそのまわりへの藻類細胞の蓄積を低下させるまたは防止する少なくとも1つのランド部によって分離された少なくとも2つの螺旋状溝を作っている、第1の導電体およびハウジングと、
b)パルス電流を与えるために第1の導電体とハウジングに動作可能に接続された電力源であって、パルス電流が、第1の導電体とハウジングと水性懸濁液の間に適用されて、藻類細胞を破裂させて、破裂した藻類細胞の塊および砕片ならびに水性懸濁液中への藻類細胞からの細胞内成分の放出をもたらす、電力源と、
c)第1の導電体とハウジングに動作可能に接続された二次タンクであって、水性懸濁液が、流路から二次タンク中へ流れて、少なくとも1つの細胞内成分を水性懸濁液中の破裂した藻類細胞から分離することができるようになっている二次タンクと、
を備えた装置。 - 第1の導電体が金属管である、請求項1に記載の装置。
- 第1の導電体および第2のハウジングがそれぞれ金属管である、請求項1に記載の装置。
- 第1の導電体および第2のハウジングが円形の金属管である、請求項3に記載の装置。
- 金属管が異なる形状である、請求項3に記載の装置。
- 金属ハウジングの内径と第1の導電体の外径はサイズが約0.050インチ異なる、請求項4に記載の装置。
- ハウジングが金属管であり、少なくとも1つの導電体が、間を置いて配置された複数の導電体を含み、複数の導電体が絶縁要素によって互いに分離されており、ハウジングと間を置いて配置された複数の導電体のそれぞれとの間に多数の流路が作られている、請求項1に記載の装置。
- 複数の導電体のそれぞれが金属管である、請求項7に記載の装置。
- 水性懸濁液中の藻類細胞から少なくとも1つの細胞内成分を採取する方法であって、
a)請求項1に記載の装置を準備するステップであって、装置が、導電性鉱物および藻類細胞を含む水性懸濁液をさらに含み、水性懸濁液が、装置の流路に配置されているステップと、
b)少なくとも1つの第1の導電体とハウジングと水性懸濁液に十分な量のパルス電流を適用して、細胞内容物の膨張と収縮を交互に引き起こすことにより、藻類細胞を破裂させて、破裂した藻類細胞の塊および砕片ならびに水性懸濁液中への藻類細胞からの細胞内成分の放出をもたらすステップと、
c)破裂した藻類細胞の塊および砕片ならびに放出された細胞内成分を含む水性懸濁液を二次タンクに流して、バイオマスおよび水性懸濁液から細胞内成分を分離するステップと、
d)少なくとも1つの細胞内成分を破裂した藻類細胞の塊および砕片ならびに水性懸濁液から分離するステップと、
を含む方法。 - 藻類細胞を含む水性懸濁液から、破裂した藻類細胞の塊および砕片を採取する方法であって、
a)請求項1に記載の装置を準備するステップであって、装置が、マイクロバブルを生成するために二次タンク内に配置された要素と、装置の流路に配置されている、導電性鉱物および藻類細胞を含む水性懸濁液と、二次タンクに配置され水性懸濁液を循環させるポンプとをさらに含むステップと、
b)少なくとも1つの第1の導電体とハウジングと水性懸濁液に十分な量のパルス電流を適用して、藻類細胞を破裂させて、水性懸濁液中への破裂した藻類細胞からの細胞内成分の放出ならびに破裂した藻類細胞の塊および砕片をもたらすステップと、
c)放出された細胞内成分ならびに破裂した藻類細胞の塊および砕片を含む水性懸濁液を二次タンクに流して、放出された細胞内成分および水性懸濁液からバイオマスを分離するステップと、
d)ポンプおよび要素を作動させてマイクロバブルを生成し、放出された細胞内成分に付着して水性懸濁液中を浮上する複数のマイクロバブルならびに破裂した藻類細胞の塊および砕片の水性懸濁液中の沈降をもたらすステップと、
e)破裂した藻類細胞の塊および砕片を、放出された細胞内成分および水性懸濁液から分離するステップと、
を含む方法。 - マイクロバブルを生成するために二次タンクに配置された要素がミキサーである、請求項10に記載の方法。
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