JP5254000B2 - 液体中に含まれる生物学的粒子を垂直濾過することによって分離する方法及び装置 - Google Patents
液体中に含まれる生物学的粒子を垂直濾過することによって分離する方法及び装置 Download PDFInfo
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Description
-少なくとも1つの孔を含む底部によって下部を閉鎖されている少なくとも1つのコンパートメントを含むタンク・ブロックと;
-それぞれがタンク・ブロックの孔と対向する少なくとも1つの孔を含むフィルタ支持スライドと;
-タンク・ブロックの下面と支持スライドの間にクランプされるフィルタ
を含む。
Claims (26)
- 診断の補助を目的として生物学的流体において希少な特定の細胞を検出するための方法であって、
a)関係のない細胞の溶解と、前記希少な特定の細胞の固定とを具備する、生物学的流体の処理ステップと、
b)3μmから100μmの間の目のサイズで且つ3 × 103乃至5 × 106/cm2の間にある密度の目を具備する、膜により構成されるフィルタを介して、前記生物学的流体を濾過する垂直濾過ステップの内の1つのステップであって、前記フィルタは基本濾過ゾーンを具備しており、それぞれの基本濾過ゾーンが0.6 cm乃至3 cmの直径を有する円板の表面積に等しい表面積を有し、基本濾過ゾーン数は、濾過される流体の容積と前記複数の基本濾過ゾーンの表面積の合計との比が0.14 ml/cm2から40 ml/cm2の間にあるように設定される、垂直濾過ステップと、
c)前記基本濾過ゾーンに保持された細胞の分析ステップと、を具備することを特徴とする前記方法。 - それぞれの基本濾過ゾーンが0.8 cmと1.5 cmとの間の直径を有する円板の表面積に等しい表面積を有することを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記垂直濾過ステップが0.05 バール乃至1 バールの減圧下に行われることを特徴とする請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記フィルタは、バッジを形成しており、前記生物学的流体の分析ステップは、前記基本濾過ゾーンを設置可能である分析濾過の手段を有する、前記バッジと連携する、ことを特徴とする請求項1から請求項3までのいずれか1項に記載の方法。
- 前記固定は、ホルムアルデヒドの添加により実施されることを特徴とする請求項1から請求項4までのいずれか1項に記載の方法。
- 前記生物学的流体は、血液であり、使用される前記フィルタの目が5 μm乃至25 μmであることを特徴とする請求項1から請求項5のいずれか1項に記載の方法。
- 該方法は、既に患者から採取された血液の生物学的サンプルを使用するステップを更に具備しており、前記処理ステップにおける前記溶解は、赤血球の細胞の溶解により構成されており、前記処理ステップは、血液の抗凝固段階を具備する、ことを特徴とする請求項6に記載の方法。
- 前記赤血球の溶解及び血液の抗凝固は、サポニン及びEDTAにより実施される、ことを特徴とする請求項6または請求項7に記載の方法。
- 前記生物学的流体が尿であり、使用される前記フィルタの目が8 μm乃至100 μmであることを特徴とする請求項1から請求項5までのいずれか1項に記載の方法。
- 該方法は、濾過される前記生物学的流体の体積を決定するステップと、
濾過モジュールのコンパートメントをより小さな体積の部分コンパートメントに分割するステップであって、各部分コンパートメントへの流体の体積と、前記部分コンパートメントに関連する前記基本濾過ゾーンの前記表面積の合計との比が、0.14 ml/cm2から40 ml/cm2の間にあるように分割する、ステップと、
を更に具備することを特徴とする請求項1から請求項9までのいずれか1項に記載の方法。 - 前記基本濾過ゾーンを再生する細胞の分析ステップc)において実施される分析方法は、細胞学的着色、免疫マーキング、PNA、FISH、PRINS(登録商標)、インシトゥPCR、またはその他の分子レベルの技術、分光測定、レーザー顕微鏡的解剖に続くDNAを標的とする分子分析から選択される、ことを特徴とする請求項1から請求項10までのいずれか1項に記載の方法。
- 少なくとも1つの孔(117)を含む底部(116)によって下部を閉鎖されている少なくとも1つのコンパートメント(113)を含むタンク・ブロック(11)と;
それぞれがタンク・ブロックの孔(117)と対向する少なくとも1つの孔(152)を含むフィルタ支持スライド(15)と;
タンク・ブロックの下面(110)と支持スライドの間にクランプされるフィルタ(13)と;を含む濾過モジュール(1)において、
前記フィルタは、少なくとも中央の目の部分において、3μmから100μmの間の目のサイズで且つ3 × 103乃至5 × 106/cm2の間にある密度の目を具備する、膜により構成されており、
タンク・ブロック底部におけるそれぞれの孔(117)の寸法とフィルタ支持スライダにおけるそれぞれの孔(152)の寸法は、タンク・ブロック底部のにおけるそれぞれの孔とこれと連携するフィルタ支持スライダにおける孔とから成る各々の対が限られた表面積の基本濾過ゾーンを前記フィルタ上に画定することであり、
それぞれのコンパートメントの有効容積がコンパートメント底部に存在する基本濾過ゾーン数に比例し、基本濾過ゾーンの表面積が0.6 cm乃至3 cmの直径を有する円板の表面積に等しく、
それぞれのコンパートメント(113)の有効容積とコンパートメント底部が有する孔の総表面積との比が0.14 ml/cm2から40ml/cm2の間にあることを特徴とする前記濾過モジュール。 - タンク・ブロック底部の少なくとも1つの孔(117)及びこれと対応するフィルタ支持スライドの孔(152)の寸法を、前記フィルタ上の対応する基本濾過ゾーンの表面積が0.8 cmから1.5 cmの間の直径を有する円板の面積に等しくなるように設定したことを特徴とする請求項12に記載の濾過モジュール。
- 少なくとも1つのコンパートメント(113)を取外し自在な少なくとも1枚の隔壁(119)によって部分コンパートメントに区分し、少なくとも1つの部分コンパートメントが少なくとも1つの孔を含むようにすることができ、前記部分コンパートメントの容積と部分コンパートメントの底部の孔の総表面積との比が0.14 ml/cm2から40 ml/cm2の間にあることを特徴とする請求項12または請求項13に記載の濾過モジュール。
- タンク・ブロック(11)の底部(110)とフィルタ(13)との間に、タンク・ブロック底部の孔(117)に対応する少なくとも1つの孔(121)を有し、この孔を少なくとも1つの突出唇状部(122)が囲む溝付きパッキン(12)をも設けたことを特徴とする請求項12から請求項14までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- フィルタ(13)とフィルタ支持体(15)との間に、フィルタ支持体(15)の孔(152)と対向する少なくとも1つの孔(140)を有する板状パッキン(14)をも設けたことを特徴とする請求項12から請求項15までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- フィルタ(13)がバッジを構成し、バッジの中央部が少なくとも1つの多孔ゾーン(131、131A、131B)を有し、バッジの周縁部がフィルタ支持体上での位置を指示する手段を含むフレーム(132)を形成することを特徴とする請求項12から請求項16までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- 方向指示手段が直径の異なる少なくとも2つの孔(133A、133B)であり、これらの孔がフィルタ支持体(15)に設けた対応の直径を有するピン(153A、153B)と協働することを特徴とする請求項17に記載の濾過モジュール。
- コンパートメント(113)の上部開口を閉鎖するための少なくとも1つの栓(17)をも含むことを特徴とする請求項12から請求項18までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- タンク・ブロック(11)がその下部に、外方へ延びて少なくとも1本の組立用ピン(16)と協働することによってフィルタ(13)をフィルタ支持体(15)とタンク・ブロック(11)との間に固定するフランジ(111)を有し、組立用ピン(16)がタンク・ブロックのフランジよりも上方へ延びる切断可能な端部を含むことを特徴とする請求項12から請求項19までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- すべての部品が滅菌可能な、またはRNA、DNAまたはタンパク質を排除できる材料から成ることを特徴とする請求項12から請求項20までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- 請求項12から請求項21までのいずれか1項に記載した濾過モジュール(1)を濾過装置に固定するための濾過モジュールの支持ブロック(2)であって、解放位置とクランプ位置との間を移動可能であり、フィルタをフィルタ支持体とタンク・ブロックとの間に固定する機能を果すことを特徴とする前記支持ブロック。
- 濾過モジュールが切断可能な端部(163)を有する少なくとも1本の固定ピン(16)を有する場合、フィルタが少なくとも1つの偏心輪(204)によって固定されたら少なくとも1本の固定ピンの前記端部が切断されるように前記少なくとも1つの偏心輪が構成されていることを特徴とする請求項22に記載の支持ブロック。
- 濾過装置の一部を構成することを特徴とする請求項22または請求項23に記載の支持ブロック。
- 請求項22から請求項24までのいずれか1項に記載した支持ブロックの補完手段(203)と協働することによって支持ブロックに対する濾過モジュールの方向を強制する手段(114)を含むことを特徴とする請求項12から請求項21までのいずれか1項に記載の濾過モジュール。
- 請求項25に記載した濾過モジュールの手段(114)と協働することによって、支持ブロックに対する濾過モジュールの方向を決定する手段(203)を含むことを特徴とする請求項22から請求項24までのいずれか1項に記載の支持ブロック。
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