JP5229221B2 - チェックポイント・キナーゼのインヒビターとしてのトリアゾロキナゾリノン誘導体 - Google Patents

Description

細胞周期チェックポイントは、細胞周期移行の順序及びタイミングを制御する調節経路である。それらは、ＤＮＡ複製及び染色体分離などの重大な事象を高い忠実度で完結させることを保障する。これらの細胞周期チェックポイントの調節は、腫瘍細胞が多くの化学療法と放射線照射に応答する様式においての重要な決定因子である。多くの有効ながん療法はＤＮＡ損傷を惹き起こすことにより効力を発するが、これらの薬剤に対する耐性が、がん治療を有意に制限することが問題である。薬物耐性のいくつかのメカニズムの内、重要なもののひとつは、チェックポイント経路の重要な意味を持つ活性化を制御することによる細胞周期の進行を阻止することによるものである。このものは細胞周期を停止させて、修復のための時間を提供し、さらに修復を促進する遺伝子の転写を誘導して、その結果として即時の細胞死を回避する。例えば、Ｇ２チェックポイントでのチェックポイント停止を失効させることにより、ＤＮＡ損傷が誘導する腫瘍細胞死を相乗的に増強し、耐性を回避することが可能となり得る。

ヒトＣＨＫ１は、ホスファターゼｃｄｃ２５（このものはｃｄｃ２／サイクリンＢの活性化を阻止し、有糸分裂を開始させることに関与し得る）をセリン２１６上でリン酸化することにより、細胞周期の停止を調節する役割を演じている。したがって、ＣＨＫ１を阻害すると、ＤＮＡの修復が完結する前に有糸分裂が開始され、ＤＮＡ傷害剤を増強することとなり、結果としてそれが腫瘍細胞死を惹き起こすこととなる。

本発明の目的は、ＣＨＫ１（Ｃｈｅｋ１ともいう）のインヒビターである新規化合物を提供することにある。
本発明の目的はまたＣＨＫ１のインヒビターである新規化合物を含有してなる医薬組成物を提供することにある。
本発明の目的はまたかかるＣＨＫ１活性のインヒビターを投与することを特徴とするがんの治療法を提供することにある。

発明の要旨
本発明はＣＨＫ１活性を阻害する置換トリアゾロキナゾリノン類を包含する化合物を提供する。本発明はまた、かかる阻害化合物を含有してなる組成物、及びがんの治療を必要とする患者に該化合物を投与することにより、ＣＨＫ１活性を阻害する方法をも提供する。

発明の詳細な説明
本発明の化合物はＣＨＫ１の活性を阻害する上で有用である。本発明の第一の実施態様において、ＣＨＫ１のインヒビターは、式（Ａ）：

［式中、
ａは０又は１であり；ｂは０又は１であり；ｍは０、１、又は２であり；ｎは０、１、２、３、４、５又は６であり；ｐは０、１又は２であり；
ＸとＹ間の破線は二重結合が存在してもよいことを表し；
Ｗは、Ｏ、Ｓ及びＮ−Ｒ^４から選択され；
Ｘ及びＹは独立してＣＨ_２及びＮＨから選択され；
環Ｚは、アリール、へテロアリール、へテロシクリル、（Ｃ_４−Ｃ_８）シクロアルケニル及び（Ｃ_４−Ｃ_８）シクロアルキルから選択され；

Ｒ^１は独立して、Ｈ、ＣＦ_３、オキソ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルケニル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルキニル、ＣＯ_２Ｈ、ハロ、ＯＨ、Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_６ペルフルオロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^７Ｒ^８、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７Ｒ^８、Ｓ（Ｏ）_ｍ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^２は独立して、Ｈ、ＣＦ_３、オキソ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルケニル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルキニル、ＣＯ_２Ｈ、ハロ、ＯＨ、Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_６ペルフルオロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^７Ｒ^８、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７Ｒ^８、Ｓ（Ｏ）_ｍ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよいか、又は２つのＲ^２が一緒になって、各環が３〜７員で、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個、２個若しくは３個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状若しくは二環状のヘテロ環を形成してもよく、当該単環状若しくは二環状のヘテロ環はＲ^６ａから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^３は、Ｈ、ＣＦ_３、オキソ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルケニル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルキニル、ＣＯ_２Ｈ、ハロ、ＯＨ、Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_６ペルフルオロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^７Ｒ^８、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７Ｒ^８、Ｓ（Ｏ）_ｍ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^４は、Ｈ、ＣＦ_３、オキソ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルケニル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_２−Ｃ_１０アルキニル、ＣＯ_２Ｈ、ハロ、ＯＨ、Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_６ペルフルオロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^７Ｒ^８、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７Ｒ^８、Ｓ（Ｏ）_ｍ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^６は、ＣＦ_３、オキソ、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂアリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂヘテロシクリル、ＣＯ_２Ｈ、ハロ、ＣＮ、ＯＨ、Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_６ペルフルオロアルキル、Ｏ_ａ（Ｃ＝Ｏ）_ｂＮＲ^７Ｒ^８、オキソ、ＣＨＯ、（Ｎ＝Ｏ）Ｒ^７Ｒ^８、Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７Ｒ^８、Ｓ（Ｏ）_ｍ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、ＳＨ又は（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキルであり、当該アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、及びシクロアルキルはＲ^６ａから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^６ａは、ＣＦ_３、（Ｃ＝Ｏ）_ａＯ_ｂ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、Ｏ_ａ（Ｃ_１−Ｃ_３）ペルフルオロアルキル、（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^ａ、オキソ、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、（Ｃ_２−Ｃ_１０）アルケニル、（Ｃ_２−Ｃ_１０）アルキニル、（Ｃ_３−Ｃ_６）シクロアルキル、（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−アリール、（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−ヘテロシクリル、（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−Ｎ（Ｒ^ｂ）_２、Ｃ（Ｏ）Ｒ^ａ、（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−ＣＯ_２Ｒ^ａ、Ｃ（Ｏ）Ｈ、及び（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−ＣＯ_２Ｈから選択され、当該アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、及びヘテロシクリルは、Ｒ^ｂ、ＯＨ、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルコキシ、ハロゲン、ＣＯ_２Ｈ、ＣＮ、Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、オキソ、及びＮ（Ｒ^ｂ）_２から選択される３個までの置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^７及びＲ^８は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ_ｂ ^２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、へテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく、又はＲ^７及びＲ^８がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員で、該窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個若しくは２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状若しくは二環状のヘテロ環を形成してもよく、当該単環状若しくは二環状のヘテロ環はＲ^６ａから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；

Ｒ^ａは、Ｈ、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_６）シクロアルキル、アリール、又はヘテロシクリルであり；そして
Ｒ^ｂは独立して、Ｈ、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、アリール、へテロシクリル、（Ｃ_３−Ｃ_６）シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ_１−Ｃ_６アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＳ（Ｏ）_ｍＲ^ａである］
で示される化合物又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体である。

本発明の第二の実施態様において、ＣＨＫ１活性のインヒビターは、式（Ｂ）：

［式中、
すべての他の置換基及び変数は第一の実施態様に定義のとおりである］
で示されるか、又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体である。
本発明の第三の実施態様において、ＣＨＫ１活性のインヒビターは、式（Ｃ）：

［式中、
環Ｚはフェニル及びナフチルから選択され；
すべての他の置換基及び変数は第一の実施態様に定義のとおりである］
で示されるか、又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体である。
本発明の第四の実施態様において、ＣＨＫ１活性のインヒビターは、式（Ｄ）：

［式中、
ｎは、０、１、２、３又は４であり；
すべての他の置換基及び変数は第一の実施態様に定義のとおりである］
で示されるか、又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体である。
本発明の第五の実施態様において、ＣＨＫ１活性のインヒビターは、式（Ｅ）：

［式中、
すべての他の置換基及び変数は第一の実施態様に定義のとおりである］
で示されるか、又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体である。

本発明の具体的化合物としては以下の化合物を含む：
９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−４）；
９−ピリジン−３−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−５）；
９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−６）；
９−（１Ｈ−ピロール−２−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−７）；
９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−８）；
９−（１−イソブチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−９）；
９−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１０）；
９−（１，３，５−トリメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１１）；
９−（５−メチル−２−フリル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１２）；
９−（４−メチル−２−チエニル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１３）；

９−（３−チエニル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１４）；
９−（４−メチル−３−チエニル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１５）；
９−（３−フリル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１６）；
９−（２−フリル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１７）；
９−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１８）；
９−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１９）；
９−（２−クロロピリジン−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２０）；
９−（６−モルホリン−４−イルピリジン−３−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２１）；
９−ピリジン−４−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２２）；
９−キノリン−３−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２３）；

９−ピリミジン−５−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２４）；
９−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２５）；
９−［４−（アミノメチル）フェニル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２６）；
６−（２−アミノエトキシ）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（２−４）；
６−（３−アミノプロポキシ）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（２−５）；
６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１１）；
６−（３−アミノプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１３）；
６−ブロモ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１４）；
６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１５）；
６−（３−アミノプロピル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１６）；

６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−１（２Ｈ）−オン（３−１７）；
８，９，１０，１１−テトラヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１８）；
ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１９）；
６−（３−ヒドロキシプロピル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（４−２）；
６−［３−（メチルアミノ）プロピル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−６）；
６−｛３−［（２，２，２−トリフルオロエチル）アミノ］プロピル｝［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−７）；
６−［３−（エチルアミノ）プロピル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−８）；
６−（３−アミノ−２−フルオロプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（６−５）；
６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−８）；
６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１０）；

６−（３−アミノプロピル）−５．６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１１）；
６−ピリジン−３−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１２）；
６−［４−（アミノメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１３）；
６−［４−（モルホリン−４−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１４）；
６−（１，２，３，６−テトラヒドロ−４−ピリジニル）−ベンゾ［ｇ］−１，２，４−トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１５）；
６−（６−アミノピリジン−３−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１６）；
６−［３−（モルホリン−４−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１７）；
６−［３−（ピペリジン−１−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１８）；
６−［３−（アミノメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１９）；
６−（２−アミノエチル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２０）；

６−イソキノリン−５−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２１）；
６−キノリン−５−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２２）；
６−（３−アミノフェニル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２３）；
６−ピペリジン−４−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２４）；
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−［４−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）フェニル］アセトアミド（７−２５）；
６−（４−アミノフェニル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２６）；
６−ピリジン−４−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２７）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２８）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−フルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２９）；
６−（３−アミノプロピル）−９，１１−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３０）；

ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｚ）−３−（１０−メチル−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３１）；
６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３２）；
６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−１０−クロロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３３）；
６−［４−（アミノメチル）フェニル］−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３４）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−クロロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３５）；
６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９，１０−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３６）；
６−（３−アミノプロピル）−９，１０−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３７）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３８）；
６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−８）；
２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−９）；及び
６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−１０）；
又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体。

本発明化合物のＴＦＡ塩は以下の化合物を含む：
９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−４）；
９−ピリジン−３−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−５）；
９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−６）；
９−（１Ｈ−ピロール−２−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−７）；
９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−８）；
９−（１−イソブチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−９）；
９−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１０）；
９−（１，３，５−トリメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１１）；
９−（５−メチル−２−フリル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１２）；
９−（４−メチル−２−チエニル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１３）；

９−（３−チエニル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１４）；
９−（４−メチル−３−チエニル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１５）；
９−（３−フリル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１６）；
９−（２−フリル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１７）；
９−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１８）；
９−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−１９）；
９−（２−クロロピリジン−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２０）；
９−（６−モルホリン−４−イルピリジン−３−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２１）；
９−ピリジン−４−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２２）；
９−キノリン−３−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２３）；

９−ピリミジン−５−イル［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２４）；
９−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２５）；
９−［４−（アミノメチル）フェニル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２６）；
６−（２−アミノエトキシ）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（２−４）；
６−（３−アミノプロポキシ）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（２−５）；
６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１１）；
６−（３−アミノプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１３）；
６−ブロモ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１４）；
６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１５）；
６−（３−アミノプロピル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１６）；

６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−１（２Ｈ）−オン（３−１７）；
８，９，１０，１１−テトラヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１８）；
ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１９）；
６−（３−ヒドロキシプロピル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（４−２）；
６−［３−（メチルアミノ）プロピル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−６）；
６−｛３−［（２，２，２−トリフルオロエチル）アミノ］プロピル｝［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−７）；
６−［３−（エチルアミノ）プロピル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−８）；
６−（３−アミノ−２−フルオロプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（６−５）；
６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−８）；
６−（３−アミノプロピル）−５．６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１１）；

６−ピリジン−３−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１２）；
６−［４−（アミノメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１３）；
６−［４−（モルホリン−４−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１４）；
６−（１，２，３，６−テトラヒドロ−４−ピリジニル）−ベンゾ［ｇ］−１，２，４−トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１５）；
６−（６−アミノピリジン−３−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１６）；
６−［３−（モルホリン−４−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１７）；
６−［３−（ピペリジン−１−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１８）；
６−［３−（アミノメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１９）；
６−（２−アミノエチル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２０）；
６−イソキノリン−５−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２１）；

６−キノリン−５−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２２）；
６−（３−アミノフェニル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２３）；
６−ピペリジン−４−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２４）；
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−［４−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）フェニル］アセトアミド（７−２５）；
６−（４−アミノフェニル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２６）；
６−ピリジン−４−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２７）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２８）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−フルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−２９）；
６−（３−アミノプロピル）−９，１１−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３０）；
ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｚ）−３−（１０−メチル−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３１）；

６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３２）；
６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−１０−クロロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３３）；
６−［４−（アミノメチル）フェニル］−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３４）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−クロロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３５）；
６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９，１０−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３６）；
６−（３−アミノプロピル）−９，１０−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３７）；
６−（３−アミノプロピル）−１０−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−３８）；
６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−８）；及び
６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−１０）；
又はその立体異性体。

本発明のさらに具体的な化合物は、６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１０）の塩酸塩；又はその立体異性体である。

本発明の化合物は、不斉中心、キラル軸及びキラル面を有し（記載例：Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ ａｎｄ Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃａｒｂｏｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（炭素化合物の立体化学），Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４，ｐａｇｅｓ １１１９−１１９０）、ラセミ体、ラセミ混合物、及び個々のジアステレオマーとして存在する可能性があり、そのすべての可能な異性体及びその混合物など、光学異性体を含め、かかる立体異性体のすべてが本発明に包含される。さらに、本明細書に開示した化合物は、互変異性体として存在し得るものであり、たとえ一方の互変異性体構造しか記載されていなくても、両方の互変異性体形状が本発明の範囲に包含されるものとする。

本発明はまた、本明細書に開示された化合物のプロドラッグをも包含するものとする。該化合物のいずれものプロドラッグが、よく知られた薬理学的技法を用いて、調製することができる。

いずれかの変数（例えば、Ｒ^１、Ｒ^６、Ｒ^６ａなど）が、いずれかの構成要件中に一度ならず出現する場合、各出現に際しての定義は、その出現ごとに独立したものである。また、置換基と変数の組み合わせは、かかる組合せが安定な化合物を生じる場合にのみ許容される。置換基から環系に引いた線は、そこに示した結合が置換可能な環原子のいずれかに結合し得ることを表す。環系が二環系である場合、その結合は二環系部分のいずれか一方の環上の適当な原子のいずれかに結合するものとする。

本発明化合物上の置換基と置換パターンは、当業者が選択し、化学的に安定で、また容易に入手し得る出発原料から、当該技術分野で既知の方法並びに下記に提示する方法により容易に合成し得る化合物を提供し得るものであると理解される。置換基がそれ自体１個を超える基により置換されている場合、安定な構造が結果として生じる限り、それら複数の基は同じ炭素上にあってもよいし、異なる炭素上にあってもよいと理解される。“１個以上の置換基で置換されていてもよい”という文言は、“少なくとも１個の置換基により置換されていてもよい”という文言と同等であると解釈すべきであり、そのような場合、好適な実施態様では、ゼロないし３個の置換基を有する。

当業者は、化学的に安定で、かつ容易に入手し得る出発原料から、当該技術分野で既知の技法により容易に合成し得る化合物を提供するために、１個以上の炭素原子の代わりに、１個以上のケイ素（Ｓｉ）原子を本発明化合物に取り込ませることが可能であると理解される。炭素とケイ素は、それらの共有結合半径が異なり、同族のＣ元素とＳｉ元素の結合を比較した場合、結合距離と立体的配列に差異を生じる。これらの差異は、炭素と比べた場合、ケイ素含有化合物の大きさと形状に微妙な変化を生じる。当業者は、大きさと形状の違いが、効力、溶解性、標的外活性の欠如、パッケージング特性等々に微妙な、又は劇的な変化をもたらし得ることを理解しよう（Ｄｉａｓｓ，Ｊ．Ｏ．ｅｔ ａｌ．Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ（２００６）５：１１８８−１１９８；Ｓｈｏｗｅｌｌ，Ｇ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００６）１６：２５５５−２５５８）。

本明細書にて使用する場合、「アルキル」は特定数の炭素原子を有する分枝及び直鎖の飽和脂肪族炭化水素基を含むものとする。例えば、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキルのＣ_１−Ｃ_１０は、直線状又は分枝状の配列の１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の炭素を有する基を包含すると定義される。例えば、「Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル」は、具体的には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｉ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどである。

用語「シクロアルキル」は特定数の炭素原子を有する単環式又は二環式の飽和脂肪族炭化水素基を意味する。例えば、「シクロアルキル」は、シクロプロピル、メチル−シクロプロピル、２，２−ジメチル−シクロブチル、２−エチル−シクロペンチル、シクロヘキシルなどを包含する。

用語「シクロアルケニル」は特定数の炭素原子を有する単環式又は二環式の部分的不飽和脂肪族炭化水素基を意味する。例えば、「シクロアケニル」は、シクロプロペニル、メチル−シクロプロペニル、２，２−ジメチル−シクロブテニル、２−エチル−シクロペンテニル、シクロヘキセニルなどを包含する。

「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合する指定した炭素原子数の環状又は非環状のアルキル基を表す。したがって、「アルコキシ」は上記のアルキル及びシクロアルキルの定義を包含する。

炭素原子数が特定されていない場合、「アルケニル」という用語は、２ないし１０個の炭素原子を含み、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖状、分枝状又は環状の非芳香族炭化水素基をいう。好ましくは、１つの炭素−炭素二重結合が存在し、４つまでの非芳香族炭素−炭素二重結合が存在し得る。したがって、「Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル」は２ないし６個の炭素原子を有するアルケニル基を意味する。アルケニル基は、エテニル、プロペニル、ブテニル、２−メチルブテニル及びシクロへキセニルを含む。アルケニル基の直鎖、分枝又は環状部分は二重結合を含み、置換アルケニル基が指示されている場合、置換されていてもよい。

用語「アルキニル」とは、２ないし１０個の炭素原子を含み、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する直鎖状、分枝状又は環状の炭化水素基をいう。３つまでの炭素−炭素三重結合が存在し得る。したがって、「Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル」とは、２ないし６個の炭素原子を有するアルキニル基を意味する。アルキニル基はエチニル、プロピニル、ブチニル、３−メチルブチニルなどを含む。アルキニル基の直鎖、分枝又は環状部分が三重結合を含み、置換アルキニル基が指示されている場合、置換されていてもよい。

特定の事例において、置換基は、（Ｃ_０−Ｃ_６）アルキレン−アリールのように、ゼロを含む炭素の範囲で定義し得る。アリールがフェニルであると解釈される場合、この定義はフェニル自体、並びにＣＨ_２Ｐｈ、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｐｈ、ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）Ｐｈなどをも包含する。

本明細書にて使用する場合、「アリール」は各環７個までの原子の安定な単環状又は二環状の炭素環を意味するものとし、その場合、少なくとも１つの環が芳香族である。かかるアリール要素の例は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントリル又はアセナフチルである。

ヘテロアリールという用語は、本明細書にて使用する場合、安定な単環式又は二環式の環であって、各環７個までの原子を有し、少なくとも１つの環が芳香族であり、かつＯ、Ｎ及びＳからなる群より選択される１ないし４個のヘテロ原子を含む環を表す。この定義の範囲内のヘテロアリール基は、アクリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、キノキサリニル、ピラゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、キノリニル、イソキノリニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、インドリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、テトラヒドロキノリンなどである。下記へテロ環の定義に従うと、「ヘテロアリール」とはまた含窒素へテロアリールのＮ−オキシド誘導体も包含すると理解される。ヘテロアリール置換基の結合は、炭素原子を介するか、又はヘテロ原子を介して起こり得る。

当業者も認識するように、本明細書にて使用される場合の「ハロ」又は「ハロゲン」とは、クロロ（Ｃｌ）、フルオロ（Ｆ）、ブロモ（Ｂｒ）及びヨード（Ｉ）を包含するものとする。

用語「ヘテロ環（ヘテロサイクル）」又は「ヘテロシクリル」とは、本明細書にて使用する場合、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群より選択される１ないし４個のヘテロ原子を含む３員ないし１０員の芳香族又は非芳香族へテロ環を意味するものとし、二環式基を包含する。それ故、「ヘテロシクリル」は上記のヘテロアリール、並びにそのジヒドロ及びテトラヒドロ類似体を包含する。さらに、「ヘテロシクリル」の例は、以下のものを包含する：ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフトピリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、オキサゾリン、イソキサゾリン、オキセタニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、テトラヒドロピラニル、テトラゾリル、テトラゾロピリジル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソクロメニル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル及びテトラヒドロチエニル、並びにそのＮ−オキシド。ヘテロシクリル置換基の結合は炭素原子を介して、又はヘテロ原子を介して起こり得る。

該アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクリル置換基は、他に特に断りのない限り、未置換であっても、未置換であってもよい。例えば、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルは、ＯＨ、オキソ、ハロゲン、アルコキシ、ジアルキルアミノ、又はヘテロシクリル（例えば、モルホリニル、ピペリジニルなど）から選択される１個、２個又は３個の置換基により置換されていてもよい。この場合、もし１個の置換基がオキソであり、他方がＯＨであるならば、以下のものがその定義に包含される：−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ_２（ＯＨ）ＣＨ_２ＣＨ（Ｏ）など。

特定の事例において、Ｒ^７及びＲ^８は、それらが結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得るものと定義され、当該へテロ環はＲ^６ａから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよい。このように形成され得るヘテロ環の例は以下のとおりであるが、留意すべきは、このヘテロ環はＲ^６ａから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよいことである：

式（Ａ）の実施態様において、環Ｚは以下から選択される：

式（Ａ）の別の実施態様において、環Ｚは以下から選択される：

式（Ａ）の別の実施態様において、環Ｚを含むコア分子は以下から選択される：

式（Ｂ）の実施態様において、環Ｚを含むコア分子は以下から選択される：

式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ｎは０、１、２、３又は４である。
式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ｎは０、１又は２である。
式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ｎは１である。
式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ｎは０である。
式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、Ｒ^４はアルキル、アリール、ヘテロシクリル又はＨであり、当該アルキル、アリール及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ＷはＯであり、Ｒ^２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、アリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ＷはＯであり、Ｒ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）には１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ＷはＯであり、Ｒ^１はプロピル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該プロピルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ＷはＯであり、Ｒ^２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、アリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ａ）又は（Ｂ）の別の実施態様において、ＷはＯであり、Ｒ^２はアリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルには（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ハロ、オキソ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＯＨから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＨ_２から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１個以上のＯＨ及びハロが置換していてもよい。

式（Ｃ）の実施態様において、ｎは０、１、２、３又は４である。
式（Ｃ）の別の実施態様において、ｎは０、１又は２である。
式（Ｃ）の別の実施態様において、ｎは１である。
式（Ｃ）の別の実施態様において、ｎは０である。
式（Ｃ）の別の実施態様において、Ｒ^２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、アリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｃ）の別の実施態様において、Ｒ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｃ）の別の実施態様において、Ｒ^１はプロピル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該プロピルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｃ）の別の実施態様において、Ｒ^２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、アリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；またＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｃ）の別の実施態様において、Ｒ^２はアリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ハロ、オキソ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＯＨから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＨ_２から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルは１個以上のＯＨ及びハロが置換していてもよい。

式（Ｄ）の実施態様において、Ｒ^２はアリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。
式（Ｄ）の別の実施態様において、Ｒ^２はアリール、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。
式（Ｄ）の別の実施態様において、Ｒ^２はハロである。

式（Ｄ）の別の実施態様において、Ｒ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｄ）の別の実施態様において、Ｒ^１はプロピル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該プロピルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｄ）の別の実施態様において、Ｒ^２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、アリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；またＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｄ）の別の実施態様において、Ｒ^２はアリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ハロ、オキソ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＯＨから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＨ_２から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１個以上のＯＨ及びハロが置換していてもよい。

式（Ｄ）の別の実施態様において、ｎは０、１、又は２であり；Ｒ^２はヘテロシクリル、ハロゲン、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＣＦ_３、（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル、及びアリールから選択され、当該ヘテロシクリル、アルケニル、アリールは、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＮＨ_２、ハロゲン、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ヘテロシクリル、及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＮＨ_２から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ^１は、Ｈ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ハロゲン、（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル、ヘテロシクリル、及びアリールから選択され、当該アルキル、アルケニル、ヘテロシクリル及びアリールは、ハロゲン、−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＮＨ_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ^ｂ）_２−ＣＦ_３、Ｎ（Ｒ^ｂ）_２、ＯＨ、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）ＣＦ_３、及び−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ^ｂは独立して、Ｈ及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルから選択される。

式（Ｅ）の別の実施態様において、Ｒ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｅ）の別の実施態様において、Ｒ^１はプロピル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該プロピルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｅ）の別の実施態様において、Ｒ^２はＨ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、アリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルはＲ^６から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；またＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＲ’Ｒ”から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＲ^６が置換していてもよく、かつ当該Ｒ’及びＲ”は独立して、Ｈ、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_１−Ｃ_１０アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂＣ_３−Ｃ_８シクロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂアリール、（Ｃ＝Ｏ）Ｏ_ｂヘテロシクリル、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル、アリール、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、へテロシクリル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、ＳＯ_ｍＲ^ａ、及び（Ｃ＝Ｏ）_ａＮＲ^ｂ _２から選択され、当該アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アルケニル、及びアルキニルは、Ｒ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく、又はＲ’及びＲ”がそれらの結合する窒素と一緒になって、各環が３〜７員であって、窒素に加えて、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は２個のさらなるヘテロ原子を含んでいてもよい単環状又は二環状のヘテロ環を形成し得、当該単環状又は二環状のへテロ環はＲ^６ａから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。

式（Ｅ）の別の実施態様において、ｎは０、１、又は２であり；Ｒ^２はヘテロシクリル、ハロゲン、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＣＦ_３、（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル、及びアリールから選択され、当該ヘテロシクリル、アルケニル、アリールは、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＮＨ_２、ハロゲン、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ヘテロシクリル、及び−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＮＨ_２から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ^１は、Ｈ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ハロゲン、（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル、ヘテロシクリル、及びアリールから選択され、当該アルキル、アルケニル、ヘテロシクリル及びアリールは、ハロゲン、−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＮＨ_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ^ｂ）_２−ＣＦ_３、Ｎ（Ｒ^ｂ）_２、ＯＨ、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）ＣＦ_３、及び−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ^ｂは独立して、Ｈ及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルから選択される。

式（Ｅ）の別の実施態様において、Ｒ^２はアリール、ハロ、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル及びヘテロシクリルから選択され、当該アリール、シクロアルキル、及びヘテロシクリルには（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ハロ、オキソ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＯＨから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＨ_２から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１個以上のＯＨ及びハロが置換していてもよい。

式（Ｅ）の別の実施態様において、ｎは０、１、又は２であり；Ｒ^２は（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＣＦ_３及びハロから選択され；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＨ_２から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１個以上のＯＨ及びハロが置換していてもよい。
式（Ｅ）の別の実施態様において、ｎは０、１、又は２であり；Ｒ^２は（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＣＦ_３及びハロから選択され；かつＲ^１はプロピルアミンである。
式（Ｅ）の別の実施態様において、ｎは０であり；かつＲ^１は（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキル−ＮＨ_２から選択され、当該（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキルには１ないし３個のＯＨ及びハロが置換していてもよい。

本発明には、式（Ａ）で示される化合物の遊離形と同時に、医薬的に許容され得るその塩及び立体異性体が包含される。本明細書にて例示される単離した特定の化合物の一部のものは、アミン化合物のプロトン化塩である。用語「遊離形」とは、非塩形状のアミン化合物をいう。包含される医薬的に許容され得る塩は、本明細書に記載された具体的化合物について例示される単離した塩を包含するのみならず、式（Ａ）で示される化合物の遊離形の典型的な医薬的に許容され得る塩のすべてをも包含する。記載されている特定の塩化合物の遊離形は、当該技術分野で既知の技法により単離し得る。例えば、当該遊離形は、当該塩を希釈水性ＮａＯＨ、炭酸カリウム、アンモニア及び重炭酸ナトリウムなどの適切な希釈塩基水溶液で処理することにより再生させ得る。該遊離形は、特定の物理的性質、例えば、極性溶媒に対する溶解度などが、その塩の形状と幾分異なり得るが、その酸及び塩基塩は、本発明の目的にとって、その他の点ではそれらのそれぞれの遊離形のものと医薬的に等価である。

本発明化合物の医薬的に許容され得る塩は、塩基性又は酸性基を含む本発明化合物から常套の化学的方法により合成することができる。一般に、塩基性化合物の塩は、イオン交換クロマトグラフィーによるか、又は遊離塩基を、化学当量若しくは過剰の所望とする塩形成無機若しくは有機酸と適当な溶媒中又は様々な溶媒の組合わせ中で反応させることにより調製する。同様に、酸性化合物の塩は、適切な無機又は有機の塩基と反応させることにより形成される。

したがって、本発明化合物の医薬的に許容され得る塩は、塩基性の本発明化合物と無機酸又は有機酸とを反応させることにより形成される、本発明化合物の慣用の非毒性塩を包含する。例えば、慣用の非毒性塩は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などから誘導される塩、並びに有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ−安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）などから調製される塩を包含する。

本発明化合物が酸性である場合、適当な「医薬的に許容され得る塩」は、無機塩基及び有機塩基を含む医薬的に許容され得る非毒性塩基から調製される塩をいう。無機塩基から誘導される塩は、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第一鉄、第二鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン塩、亜マンガン塩、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩を包含する。特に好適な塩は、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウムの塩である。医薬的に許容され得る有機非毒性塩基から誘導される塩は、第一級、第二級及び第三級のアミン、天然産置換アミンなどの置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、アルギニン、ベタインカフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ^１−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩を包含する。

上記の医薬的に許容され得る塩及びその他の典型的な医薬的に許容され得る塩の調製については、文献（Ｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ（医薬用塩），”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７：６６：１−１９）により詳しい記載がある。

本発明化合物が潜在的に内部塩又は両性イオンであることも銘記される；その理由はその場合、生理条件下で、当該化合物の脱プロトンされた酸性基（例えば、カルボキシル基）がアニオン性であり得るし、またこの電荷が、プロトン化若しくはアルキル化された塩基性基（例えば、四級窒素原子など）のカチオン性電荷に対してバランスを欠く可能性があるからである。

有用性
本明細書にて提供される化合物、組成物及び方法は、とりわけ、がんの治療に有用であると思われる。該化合物、組成物及び方法により治療し得るがんは、限定されるものではないが、以下のとおりである：心臓系：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫及び奇形腫；肺：気管支癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞上皮（細気管支）癌、気管支腺癌、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫；胃腸：食道（扁平上皮癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（導管腺癌、インスリノーマ、グルカゴン産生腫瘍、ガストリン産生腫瘍、カルチノイド腫瘍、ＶＩＰ産生腫瘍）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺種、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）、結腸、結腸直腸、直腸；尿生殖路：腎臓（腺癌、ウイルムス腫瘍［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病）、膀胱及び尿道（扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（セミノーマ、奇形腫、胎生期癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、間質細胞癌、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）；肝臓：肝癌（肝細胞癌）、胆管癌、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫；骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫脊索腫、骨軟骨腫（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫及び巨細胞腫；神経系：頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣細胞腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形膠芽腫、乏突起膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）；婦人科：子宮（子宮内膜癌）、子宮頚部（子宮頚癌、前腫瘍性子宮頚部形成異常）、卵巣（卵巣癌［漿膜性のう胞腺癌、ムチン性のう胞腺癌、未分類癌］顆粒膜−莢膜細胞腫瘍、セルトリ−ライディッヒ細胞腫瘍、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰部（扁平上皮癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮癌、ブドウ状肉腫（胎児性横紋筋肉腫））、卵管（癌腫）、乳房；血液学的：血液（骨髄性白血病［急性及び慢性］、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫］；皮膚：悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、奇胎形成異常母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬；及び副腎：神経芽細胞腫。したがって、本明細書にて提供される場合の用語「がん性細胞」としては、上に特定した症状のいずれか１つに罹患する細胞が挙げられる。

本発明の化合物、組成物及び方法により治療し得るがんは、限定されるものではないが、乳房、前立腺、結腸、結腸直腸、肺、脳、精巣、胃、卵巣、膵臓、皮膚、小腸、大腸、喉頭、頭頚部、口内、骨、肝臓、膀胱、腎臓、甲状腺及び血液のものである。

本発明の化合物、組成物及び方法により治療し得るがんは、卵巣、乳房、結腸直腸、肺（非小細胞）、膵臓、食道、胃及び頭頚部のものである。
本発明の化合物、組成物及び方法により治療し得るがんは、乳房、前立腺、結腸、卵巣、結腸直腸及び肺のものである。
本発明の化合物、組成物及び方法により治療し得るがんは、乳房、結腸、（結腸直腸）及び肺のものである。
本発明の化合物、組成物及び方法により治療し得るがんは、リンパ種及び白血病である。

本発明の化合物、組成物及び方法により、卵巣がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、乳がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、結腸直腸がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、肺（非小細胞）がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、膵臓がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、食道がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、胃がんを治療し得る。
本発明の化合物、組成物及び方法により、頭頚部がんを治療し得る。

本発明の化合物は、がんの治療に有用な医薬の製造にも有用である。
本発明の化合物は、ヒトを含む哺乳動物に、単独で、又は医薬的に許容され得る担体、賦形剤又は希釈剤と組合わせて、標準的薬学のプラクティスに従って、医薬組成物として投与し得る。本化合物は経口的に、又は静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、直腸及び局所の投与経路など非経口的に投与することができる。

有効成分を含有する医薬組成物は、経口使用に適した形状、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性若しくは油性懸濁液、分散性粉末若しくは顆粒、エマルジョン、ハード若しくはソフトカプセル、又はシロップ若しくはエリキシルとし得る。経口使用を企図する組成物は医薬組成物の製造上、当該分野で技術的に公知の方法に従って調製し得る；また、かかる組成物は製剤上、上品で口当たりのよい製剤とするために、甘味剤、芳香剤、着色剤及び保存剤からなる群より選択される１種以上の剤を含有してもよい。錠剤は有効成分と、錠剤の製造に適する非毒性の医薬的に許容され得る賦形剤とを混合して含有する。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム）；顆粒化剤及び崩壊剤（例えば、微結晶性セルロース、ナトリウム・クロスカルメロース、コーンスターチ、又はアルギン酸）；結合剤（例えば、デンプン、ゼラチン、ポリビニル−ピロリドン又はアラビアゴム）；及び滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク）などである。錠剤は未被覆であってもよいし、又は薬物の不快な味をマスクするために、若しくは胃腸管での分解と吸収を遅延させて、それによって長時間作用を持続させるために、公知の技術的方法により被覆してもよい。例えば、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース若しくはヒドロキシプロピルセルロースなどの水溶性味遮蔽物質又はエチルセルロース、酢酸酪酸セルロースなどの時間遅延物質を用いてもよい。

経口使用の剤形はハードゼラチンカプセルとしても提供し得るが、その場合、有効成分は不活性の固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンなどと混合させる；あるいはソフトゼラチンカプセルとしても提供し得るが、その場合、有効成分はポリエチレングリコールなどの水溶性担体、又は油性媒体、例えば、ラッカセイ油、流動パラフィン、若しくはオリーブ油と混合させる。

水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適する賦形剤と一緒に活性物質を含有する。かかる賦形剤は懸濁化剤、例えば、ナトリウム・カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム及びアラビアゴムなどである；分散剤又は湿潤剤は天然産のホスファチド（例えば、レシチン）、又はアルキレンオキシドと脂肪酸の縮合産物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、又はエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合産物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、又はエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルとの縮合産物（例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール）、又はエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合産物（例えば、モノオレイン酸ポリエチレンソルビタン）でよい。水性懸濁液はさらに１種以上の保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル若しくはｎ−プロピル）、１種以上の着色剤、１種以上の芳香剤、及び１種以上の甘味剤（例えば、スクロース、サッカリン若しくはアスパルテーム）などを含有し得る。

油性懸濁液は、有効成分を植物油（例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油若しくはヤシ油）、又は鉱油（例えば、流動パラフィン）などに懸濁することにより製剤化することができる。この油性懸濁液は増粘剤（例えば、ミツロウ、硬パラフィン若しくはセチルアルコールなど）を含有し得る。口当たりのよい経口製剤とするために、上記のような甘味剤及び芳香剤を添加してもよい。これらの組成物はブチル化ヒドロキシアニソール又はアルファ−トコフェロールなどの抗酸化剤を添加して保存してもよい。

水を加えることによる水性懸濁液の調製に適した分散性粉末及び顆粒により、分散剤又は湿潤剤、懸濁剤及び１種以上の保存剤と混合した有効成分が提供される。適当な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤はすでに上記したものにより例示される。さらなる賦形剤、例えば、甘味剤、芳香剤及び着色剤も存在し得る。これらの組成物はアスコルビン酸などの抗酸化剤の添加により保存され得る。

本発明の医薬組成物は水中油型のエマルジョンの形状でもよい。油相は植物油（例えば、オリーブ油若しくはラッカセイ油）、又は鉱油（例えば、流動パラフィン）、又はこれらの混合物でもよい。適当な懸濁化剤は天然産のホスファチド（例えば、ダイズレシチン）、及び脂肪酸とヘキシトール無水物由来のエステル又は部分エステル（例えば、モノオレイン酸ソルビタン）、及び当該部分エステルとエチレンオキシドの縮合産物（例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）でよい。該エマルジョンは甘味剤、芳香剤、保存剤及び抗酸化剤をも含み得る。

シロップ又はエリキシルは甘味剤（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール又はスクロース）により製剤化し得る。かかる製剤は粘活剤、保存剤、芳香及び着色剤及び抗酸化剤をも含み得る。
該医薬組成物は無菌の注射用水性溶液の形態でもよい。使用可能な許容される媒体と溶媒は、水、リンゲル溶液及び等張性塩化ナトリウム溶液である。

無菌の注射用製剤は、有効成分を油相に溶かした、無菌の注射用水中油型マイクロエマルジョンでもよい。例えば、有効成分を先ずダイズ油とレシチンの混合物に溶かしてもよい。次いで、その油溶液を水とグリセロールの混合物中に導入し、加工処理してマイクロエマルジョンとしてもよい。

注射用溶液又はマイクロエマルジョンは、局所のボーラス注射により患者の血流中に導入してもよい。あるいは、当該化合物の一定の循環濃度を維持するような方法で、溶液又はマイクロエマルジョンを投与することが有利でもあり得る。かかる一定濃度を維持するためには、連続静脈内送達装置を利用し得る。かかる装置の一例は、デルテック・カッド−プラス（ＣＡＤＤ−ＰＬＵＳ；商標）モデル５４００静脈内用ポンプである。

該医薬組成物は、筋肉内及び皮下投与用の無菌注射用水性又は油脂性懸濁液の形状であってもよい。この懸濁液は公知の技術に従い、上記の適当な分散若しくは湿潤剤及び懸濁化剤を用いて製剤化し得る。無菌の注射用製剤は、非毒性の非経口投与可能な希釈剤又は溶媒中の無菌注射用溶液又は懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオールの溶液）でもよい。さらに、無菌の固定油を溶剤又は懸濁媒体として従来から用いている。この目的のためには、合成のモノ−又はジグリセリドを含む刺激のないいずれの固定油も採用し得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が注射用製剤に使用し得る。

例えば、本発明化合物の５０ｍｇ／ｍＬの製剤は、以下の手順に従い調製し得る：１．本発明化合物５．６ｇとマンニトール５．０ｇを秤量する；２．天秤上にガラス容器（２５０ｍＬのビーカーが好ましい）の風袋を量り、約８５ｍＬの水を容器に容れる；３．磁気攪拌バーを容器中に入れ、渦巻きを生じる十分なスピードで攪拌する；４．Ｌ−乳酸０．４２ｍＬを容器に加える；５．マンニトール５ｇを容器に加え、１０分間混合する；６．本発明化合物を加え、容器を溶液ですすいで残りの化合物を回収する；７．少なくとも１５分間、又は溶液中の可視固体がなくなるまで攪拌する；８．溶液のｐＨを測定する。ｐＨが３．４〜６．４の範囲に達するまで、１Ｎ−ＮａＯＨ溶液を加える（約２ｍｌを要すると予測される）；９．追加の水を加えて目標の重量とし、さらに１０分間混合する；１０．ｐＨが３．０〜４．０の範囲内にあることを確認する；そして、１１．瓶上部濾過装置により無菌濾過溶液とする。

本発明化合物は、薬物を直腸投与する坐剤の形状でも投与し得る。これらの組成物は、適当な非刺激性の賦形剤であって、常温では固体であるが、直腸温度では液体であり、その結果、直腸内で融解して薬物を放出するような賦形剤と薬物を混合することにより調製し得る。かかる物質はカカオ脂、グリセリン化ゼラチン、硬化植物油、種々分子量のポリエチレングリコールとポリエチレングリコールの脂肪酸エステルとの混合物を包含する。

局所での使用には、本発明化合物を含有するクリーム、軟膏、ジェリー、溶液又は懸濁液などが用いられる。（この適用の目的には、局所適用剤としてうがい薬及び含嗽剤も包含するものとする）。

本発明化合物は鼻腔内用の形態で、適当な鼻腔内媒体と送達装置を局所的に使用するか、又は当業者周知の皮膚透過性皮膚パッチの形態で、経皮経路により投与し得る。経皮送達システムの形状で投与する場合、勿論、一定の投与量を投薬レジメン全般で断続的であるよりもむしろ連続的であるように投与する。本発明化合物はカカオ脂、グリセリン化ゼラチン、硬化植物油、種々分子量のポリエチレングリコールとポリエチレングリコールの脂肪酸エステルとの混合物などの基剤を用いる坐剤としても送達し得る。

本発明化合物をヒト対象に投与する場合、その日用量は通常処方医が決定するが、その用量は一般に、年齢、体重、及び個々の患者の反応、並びに患者症候の重症度によって変る。

本発明化合物を利用する投薬レジメンは、種々の因子に応じて、例えば、タイプ、種、年齢、体重、性別及び治療すべき癌のタイプ；治療すべき癌の重症度（すなわち、病期）；投与経路；患者の腎臓及び肝臓機能；及び使用する特定の化合物又はその塩；に応じて選択し得る。通常の知識を有する医師又は獣医師は、治療（例えば、疾患の進行を予防、抑制（完全に又は部分的に）又は停止させるため）に必要とされる薬物の有効量を容易に決定し、処方し得る。

例えば、本発明化合物は１日あたり総用量１０００ｍｇまでとして投与し得る。本発明化合物は１日１回（ＱＤ）、又は複数回の日用量に分割して、例えば、１日２回（ＢＩＤ）、及び１日３回（ＴＩＤ）投与し得る。本発明化合物は１日あたり総用量１０００ｍｇまで、例えば、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ又は１０００ｍｇとして投与し得るが、この用量は１日１回の用量で投与し得るし、又は上記のように１日複数回に分割することもできる。

本発明化合物は３週ごとに１回、又は３週ごとに週２回、又は３週の周期の各週に週１回投与することもできよう。本発明化合物は、５４〜２１６０ｍｇ／ｍ^２／日の用量範囲で投与し得よう。化合物は経口又はＩＶ（静脈内）で投与し得よう。ＩＶ投与は可能性として２〜２４時間にわたり実施し得よう。

さらに、投与は連続的、すなわち、毎日、又は断続的であり得る。本明細書にて使用する場合、「断続的」又は「断続的に」という用語は、規則的な又は不規則な間隔での停止及び開始を意味する。例えば、本発明化合物の断続的投与とは、１週ごとに１日ないし６日投与することであるか、又は周期的に投与することを意味するか（例えば、２ないし８週間連続的に毎日投与し、次いで、１週までの間投与せずに休止期間とする）、又は隔日に投与することを意味し得る。

さらに、本発明化合物は上記スケジュールのいずれかに従って、２〜３週間連続的に投与し、次いで休止期間とし得る。例えば、本発明化合物を上記スケジュールのいずれか１つに従って、２ないし８週間投与し、次いで１週間の休止期間とするか、又は１週間に３日ないし５日間、１００〜５００ｍｇの投与量で１日２回、投与し得る。別の特定の実施態様において、本発明化合物は連続２週間、１日３回投与し、次いで１週間の休止とし得る。

本発明化合物のいずれか１つ以上の特定投与量及び投与スケジュールは、併用治療に使用されるいずれか１種以上の治療薬にも適用し得る（以下、「第二治療剤」という）。
さらに、この第二治療剤の特定投与量及び投与スケジュールもさらに変わり得るが、その最適投与量、投与スケジュール及び投与経路は、使用すべき特定の第二治療剤に基づき決定される。

勿論、本発明化合物の投与経路は、第二治療剤の投与経路から独立している。一実施態様において、本発明化合物の投与は経口投与である。別の実施態様において、本発明化合物の投与は静脈内投与である。したがって、これらの実施態様に従い、本発明化合物は経口又は静脈内に投与し、第二治療剤は、経口、非経口、腹腔内、静脈内、動脈内、経皮、舌下、筋肉内、直腸内、口腔内、鼻腔内、リポソーム内、吸入経由、膣内、眼内、カテーテル若しくはステントによる局所送達経由、皮下、脂肪内、関節内、鞘内に、又は徐放性投与形態で投与することができる。

さらに、本発明化合物及び第二の治療剤は、同じ投与様式で、すなわち、両方の薬剤を例えば、経口、ＩＶにより投与してもよい。しかしながら、本発明化合物を１つの投与様式、例えば、経口で投与し、第二治療剤を別の投与様式、例えば、ＩＶで投与するか、あるいは本明細書にすでに記載したいずれか他の投与様式で投与することも、本発明の範囲内である。

第一の治療手順、本発明化合物の投与は、第二の治療手順（すなわち、第二治療剤）の前に、第二治療剤での治療の後に、第二治療剤での治療と同時に、又はその組み合わせで実施し得る。例えば、全治療期間は本発明化合物について決定することができる。第二治療剤は本発明化合物での治療の開始前に投与するか、又は本発明化合物での治療後に投与することができる。さらに、抗がん剤は本発明化合物の投与期間内に投与し得るが、本発明化合物の治療期間全部をとおして実施する必要はない。

本発明化合物は、治療剤、化学療法剤及び抗がん剤との組合わせでも有用である。ここに開示した化合物と治療剤、化学療法薬及び抗がん剤との組合わせは、本発明の範囲内である。かかる薬剤の例は文献（Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（癌の原理と腫瘍学の実際）Ｖ．Ｔ．Ｄｅｖｉｔａ ａｎｄ Ｓ．Ｈｅｌｌｍａｎ（ｅｄｉｔｏｒｓ），６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１年２月１５日），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）に見出し得る。当業者はどの薬剤との組合せが有用であるかについて、関係する薬物とがんの特性に基づいて、明確に認識し得よう。かかる薬剤は以下のとおりである：エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞傷害剤／細胞増殖抑制剤、抗増殖剤、プレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビター、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビター及び他の血管新生インヒビター、ＨＩＶプロテアーゼインヒビター、逆転写酵素インヒビター、細胞増殖及び生存シグナル伝達のインヒビター、ビスホスホネート、アロマターゼインヒビター、ｓｉＲＮＡ治療剤、γ−セクレターゼインヒビター、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に干渉する薬剤及び細胞周期チェックポイントに干渉する薬剤。本発明化合物は放射線療法と同時投与の場合に特に有用である。

「エストロゲン受容体モジュレーター」とは、メカニズムの如何を問わず、その受容体に対するエストロゲンの結合を干渉又は阻害する化合物をいう。エストロゲン受容体モジュレーターの例は、限定されるものではないが、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン（ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ）、フルベストラント（ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］−フェニル−２，２−ジメチルプロパノアート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニル−ヒドラゾン、及びＳＨ６４６などである。

「アンドロゲン受容体モジュレーター」とは、メカニズムの如何を問わず、その受容体に対するアンドロゲンの結合を干渉又は阻害する化合物をいう。アンドロゲン受容体モジュレーターの例は、フィナステリドと他の５α−リダクターゼ・インヒビター、ニルタミド（ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ）、フルタミド（ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）、ビカルタミド（ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）、リアロゾール（ｌｉａｒｏｚｏｌｅ）及び酢酸アビラテロン（ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ）などである。

「レチノイド受容体モジュレーター」とは、メカニズムの如何を問わず、その受容体に対するレチノイドの結合を干渉又は阻害する化合物をいう。かかるレチノイド受容体モジュレーターの例は、ベキサロテン（ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ）、トレチノイン（ｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）、１３−シス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−（４’−ヒドロキシフェニル）レチナミド、及びＮ−４−カルボキシフェニルレチナミドなどである。

「細胞傷害剤／細胞増殖抑制剤」とは、細胞死を惹き起こすか、又は細胞の機能化に直接干渉して細胞増殖を主として阻害するか、又は細胞の減数分裂を阻害又は干渉する化合物をいい、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、インターカレート剤、低酸素活性化化合物、微小管インヒビター／微小管安定化剤、有糸分裂キネシンインヒビター、ヒストンデアセチラーゼインヒビター、有糸分裂進行に関与するキナーゼのインヒビター、増殖因子及びサイトカインシグナル伝達経路に関与するキナーゼのインヒビター、代謝拮抗剤、生物応答修飾因子、ホルモン／抗ホルモン治療剤、造血成長因子、モノクローナル抗体標的化治療剤、トポイソメラーゼインヒビター、プロテオソームインヒビター、ユビキチンリガーゼインヒビター、及びオーロラキナーゼインヒビターを包含する。

細胞傷害剤／細胞増殖抑制剤の例は、限定されるものではないが、セルテネフ（ｓｅｒｔｅｎｅｆ）、カケクチン、イホスファミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、プレドニムスチン（ｐｒｅｄｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）、ジブロモズルシトール、ラニムスチン、フォテムスチン（ｆｏｔｅｍｕｓｔｉｎｅ）、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモゾロミド（ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、ヘプタプラチン、エストラムスチン（ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ）、イムプロスルファン・トシレート（ｉｍｐｒｏｓｕｌｆａｎ ｔｏｓｉｌａｔｅ）、トロホスファミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム、プミテパ（ｐｕｍｉｔｅｐａ）、ロバプラチン、サトラプラチン、プロフィロマイシン、シスプラチン、イロフルベン、デキシフォスファミド、シス−アミンジクロロ（２−メチル−ピリジン）白金、ベンジルグアニン、グルホスファミド、ＧＰＸ１００、（トランス、トランス、トランス）−ビス−ｍｕ−（ヘキサン−１，６−ジアミン）−ｍｕ−［ジアミン−白金（ＩＩ）］ビス［ジアミン（クロロ）白金（ＩＩ）］テトラクロリド、ジアリジジニルスペルミン（ｄｉａｒｉｚｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）、三酸化砒素、１−（１１−ドデシルアミノ−１０−ヒドロキシウンデシル）−３，７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビサントレン、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピナフィド、バルルビシン、アムルビシン、アンチネオプラストン、３’−デアミノ−３’−モルホリノ−１３−デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アンナマイシン、ガラルビシン、エリナフィド、ＭＥＮ１０７５５、４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニル−ダウノルビシン（参照ＷＯ００／５００３２）、Ｒａｆキナーゼインヒビター（Ｂａｙ４３−９００６など）及びｍＴＯＲインヒビター（Ｗｙｅｔｈ ＣＣＩ−７７９）である。

低酸素活性化化合物の例は、チラパザミン（ｔｉｒａｐａｚａｍｉｎｅ）である。
プロテオソームインヒビターの例は、限定されるものではないが、ラクタシスチン（ｌａｃｔａｃｙｓｔｉｎ）及びＭＬＮ−３４１（ベルケード；Ｖｅｌｃａｄｅ）である。
微小管インヒビター／微小管安定化剤の例は、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−８’−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソール、リゾキシン、ドラスタチン、ミボブリンイセチオネート（ｍｉｖｏｂｕｌｉｎ ｉｓｅｔｈｉｏｎａｔｅ）、オーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）、セマドチン（ｃｅｍａｄｏｔｉｎ）、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン、２，３，４，５，６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、アンヒドロビンブラスチン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８、エポチロン類（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅｓ）（参照例：ＵＳＰ６，２８４，７８１及び６，２８８，２３７）及びＢＭＳ１８８７９７などである。一部実施態様において、エポチロン類は微小管インヒビター／微小管安定化剤には含まれない。

トポイソメラーゼインヒビターの一部の例は、トポテカン、ハイカプタミン（ｈｙｃａｐｔａｍｉｎｅ）、イリノテカン、ルビテカン、６−エトキシプロピオニル−３’，４’−Ｏ−エキソ−ベンジリデン−チャートロイシン、９−メトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ［３，４，５−ｋｌ］アクリジン−２−（６Ｈ）プロパナミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：ｂ，７］−インドリジノ［１，２ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）ジオン、ラートテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）、７−［２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル］−（２０Ｓ）カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２’−ジメチルアミノ−２’−デオキシ−エトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−９−ヒドロキシ−５，６−ジメチル−６Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクリン、（５ａ，５ａＢ，８ａａ，９ｂ）−９−［２−［Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−５−［４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル］−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキソヒドロフロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６−オン、２，３−（メチレンジオキシ）−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ［ｃ］−フェナンスリジニウム、６，９−ビス［（２−アミノエチル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソギノリン−５，１０−ジオン、５−（３−アミノプロピルアミノ）−７，１０−ジヒドロキシ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ［４，５，１−ｄｅ］アクリジン−６−オン、Ｎ−［１−［２（ジエチルアミノ）エチルアミノ］−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］ホルムアミド、Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）アクリジン−４−カルボキサミド、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オン、及びジメスナ（ｄｉｍｅｓｎａ）などである。

有糸分裂キネシン、とりわけヒトの有糸分裂キネシンＫＳＰのインヒビターの例は、公開公報ＷＯ０３／０３９４６０、ＷＯ０３／０５００６４、ＷＯ０３／０５０１２２、ＷＯ０３／０４９５２７、ＷＯ０３／０４９６７９、ＷＯ０３／０４９６７８、ＷＯ０４／０３９７７４、ＷＯ０３／０７９９７３、ＷＯ０３／０９９２１１、ＷＯ０３／１０５８５５、ＷＯ０３／１０６４１７、ＷＯ０４／０３７１７１、ＷＯ０４／０５８１４８、ＷＯ０４／０５８７００、ＷＯ０４／１２６６９９、ＷＯ０５／０１８６３８、ＷＯ０５／０１９２０６、ＷＯ０５／０１９２０５、ＷＯ０５／０１８５４７、ＷＯ０５／０１７１９０、ＵＳ２００５／０１７６７７６に記載されている。一実施態様において、有糸分裂キネシンのインヒビターは、限定されるものではないが、ＫＳＰのインヒビター、ＭＫＬＰ１のインヒビター、ＣＥＮＰ−Ｅのインヒビター、ＭＣＡＫのインヒビター及びＲａｂ６−ＫＩＦＬのインヒビターである。

「ヒストン・デアセチラーゼ・インヒビター」の例は、限定されるものではないが、ＳＡＨＡ、ＴＳＡ、オキサムフラチン（ｏｘａｍｆｌａｔｉｎ）、ＰＸＤ１０１、ＭＧ９８及びスクリプタイド（ｓｃｒｉｐｔａｉｄ）である。その他のヒストン・デアセチラーゼ・インヒビターに関しては、さらに、以下の文献：Ｍｉｌｌｅｒ，Ｔ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６（２４）：５０９７−５１１６（２００３）に見出し得る。
「有糸分裂進行に関与するキナーゼのインヒビター」は、限定されるものではないが、オーロラキナーゼのインヒビター、ポロ様キナーゼ（ＰＬＫ）のインヒビター（とりわけＰＬＫ−１のインヒビター）、バブ−１のインヒビター及びバブ−Ｒ１のインヒビターを包含する。「オーロラキナーゼのインヒビター」の例はＶＸ−６８０である。

「抗増殖剤」は、アンチセンスＲＮＡ及びＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えば、Ｇ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１、及びＩＮＸ３００１、及び代謝拮抗剤、例えば、エノシタビン、カルモフル、テガフル、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキセート（ｔｒｉｍｅｔｒｅｘａｔｅ）、フルダラビン（ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ）、カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、ガロシタビン（ｇａｌｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、シタラビン・オクホスフェート（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ ｏｃｆｏｓｆａｔｅ）、ホステアビン（ｆｏｓｔｅａｂｉｎｅ）ナトリウム水和物、ラルチトレキセド、パルチトレキシド、エミテフル、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド、ペメトレキセド、ネルザラビン（ｎｅｌｚａｒａｂｉｎｅ）、２’−デオキシ−２’−メチリデンシチジン、２’−フルオロメチレン−２’−デオキシシチジン、Ｎ−［５−（２，３−ジヒドロ−ベンゾフリル）スルホニル］−Ｎ’−（３，４−ジクロロフェニル）尿素、Ｎ６−［４−デオキシ−４−［Ｎ２−［２（Ｅ），４（Ｅ）−テトラデカジエノイル］グリシルアミノ］−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノ−ヘプトピラノシル］アデニン、アプリジン、エクテイナサイジン（ｅｃｔｅｉｎａｓｃｉｄｉｎ）、トロキサシタビン（ｔｒｏｘａｃｉｔａｂｉｎｅ）、４−［２−アミノ−４−オキソ−４，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ［５，４−ｂ］［１，４］チアジン−６−イル−（Ｓ）−エチル］−２，５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−（カルバモイルオキシメチル）−４−ホルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１，１１−ジアザテトラシクロ（７．４．１．０．０）−テトラデカ−２，４，６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スワインソニン（ｓｗａｉｎｓｏｎｉｎｅ）、ロメトレキソール、デキスラゾキサン（ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ）、メチオニナーゼ、２’−シアノ−２’−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、３−アミノピリジン−２−カルボキサルデヒド・チオセミカルバゾン及びトラスツズマブなどである。

モノクローナル抗体標的化治療剤の例は、がん細胞特異的又は標的細胞特異的モノクローナル抗体に結合した細胞傷害剤又は放射性同位体を有する治療剤である。その例はベクサール（Ｂｅｘｘａｒ）である。

「ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビター」は、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−ＣｏＡリダクターゼのインヒビターをいう。使用し得るＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビターの例は、限定されるものではないが、ロバスタチン（メバコール（ＭＥＶＡＣＯＲ；登録商標）；参照ＵＳＰ４，２３１，９３８、４，２９４，９２６及び４，３１９，０３９）、シンバスタチン（ゾコール（ＺＯＣＯＲ；登録商標）；参照ＵＳＰ４，４４４，７８４、４，８２０，８５０及び４，９１６，２３９）、プラバスタチン（プラバコール（ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ；登録商標）；参照ＵＳＰ４，３４６，２２７、４，５３７，８５９、４，４１０，６２９、５，０３０，４４７及び５，１８０，５８９）、フルバスタチン（レスコール（ＬＥＳＣＯＬ；登録商標）；参照ＵＳＰ５，３５４，７７２、４，９１１，１６５、４，９２９，４３７、５，１８９，１６４、５，１１８，８５３、５，２９０，９４６及び５，３５６，８９６）、アトルバスタチン（リピトール（ＬＩＰＩＴＯＲ；登録商標）；参照ＵＳＰ５，２７３，９９５、４，６８１，８９３、５，４８９，６９１及び５，３４２，９５２）及びセリヴァスタチン（ｃｅｒｉｖａｓｔａｔｉｎ）リバスタチン（ｒｉｖａｓｔａｔｉｎ）及びベイコール（ＢＡＹＣＨＯＬ；登録商標）としても知られる；参照ＵＳＰ５，１７７，０８０）を包含する。本方法に使用し得るこれらのＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビター及びさらなるインヒビターの構造式については、文献（Ｍ．Ｙａｌｐａｎｉ，“Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ Ｌｏｗｅｒｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ（コレステロール低下剤）”，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，ｐｐ．８５−８９（１９９６年２月５日））の８７ページ及びＵＳＰ４，７８２，０８４及び４，８８５，３１４に記載がある。本明細書にて使用する場合の用語ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビターとは、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害活性を有する化合物の医薬的に許容され得るラクトン及び開環酸型（すなわち、ラクトン環が開いて遊離の酸を形成する場合）のもの、並びに塩及びエステル型のものを包含し、したがって、かかる塩、エステル、開環酸及びラクトン型の使用が本発明の範囲に包含される。

「プレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビター」は、１種類の又は組合わせたプレニル−タンパク質トランスフェラーゼ酵素を阻害する化合物をいい、該酵素はファルネシル−タンパク質トランスフェラーゼ（ＦＰＴアーゼ）、ゲラニルゲラニル−タンパク質トランスフェラーゼＩ型（ＧＧＰＴアーゼ−Ｉ）、及びゲラニルゲラニル−タンパク質トランスフェラーゼＩＩ型（ＧＧＰＴアーゼ−ＩＩ、Ｒａｂ ＧＧＰＴアーゼともいう）などである。

プレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビターの例は、以下の公開公報及び特許に見出し得る：ＷＯ９６／３０３４３、ＷＯ９７／１８８１３、ＷＯ９７／２１７０１、ＷＯ９７／２３４７８、ＷＯ９７／３８６６５、ＷＯ９８／２８９８０、ＷＯ９８／２９１１９、ＷＯ９５／３２９８７、ＵＳＰ５，４２０，２４５、ＵＳＰ５，５２３，４３０、ＵＳＰ５，５３２，３５９、ＵＳＰ５，５１０，５１０、ＵＳＰ５，５８９，４８５、ＵＳＰ５，６０２，０９８、欧州特許公開０ ６１８ ２２１、欧州特許公開０ ６７５ １１２、欧州特許公開０ ６０４ １８１、欧州特許公開０ ６９６ ５９３、ＷＯ９４／１９３５７、ＷＯ９５／０８５４２、ＷＯ９５／１１９１７、ＷＯ９５／１２６１２、ＷＯ９５／１２５７２、ＷＯ９５／１０５１４、ＵＳＰ５，６６１，１５２、ＷＯ９５／１０５１５、ＷＯ９５／１０５１６、ＷＯ９５／２４６１２、ＷＯ９５／３４５３５、ＷＯ９５／２５０８６、ＷＯ９６／０５５２９、ＷＯ９６／０６１３８、ＷＯ９６／０６１９３、ＷＯ９６／１６４４３、ＷＯ９６／２１７０１、ＷＯ９６／２１４５６、ＷＯ９６／２２２７８、ＷＯ９６／２４６１１、ＷＯ９６／２４６１２、ＷＯ９６／０５１６８、ＷＯ９６／０５１６９、ＷＯ９６／００７３６、ＵＳＰ５，５７１，７９２、ＷＯ９６／１７８６１、ＷＯ９６／３３１５９、ＷＯ９６／３４８５０、ＷＯ９６／３４８５１、ＷＯ９６／３００１７、ＷＯ９６／３００１８、ＷＯ９６／３０３６２、ＷＯ９６／３０３６３、ＷＯ９６／３１１１１、ＷＯ９６／３１４７７、ＷＯ９６／３１４７８、ＷＯ９６／３１５０１、ＷＯ９７／００２５２、ＷＯ９７／０３０４７、ＷＯ９７／０３０５０、ＷＯ９７／０４７８５、ＷＯ９７／０２９２０、ＷＯ９７／１７０７０、ＷＯ９７／２３４７８、ＷＯ９７／２６２４６、ＷＯ９７／３００５３、ＷＯ９７／４４３５０、ＷＯ９８／０２４３６、及びＵＳＰ５，５３２，３５９。血管新生に対するプレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビターの役割の例については、文献（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．９，ｐｐ．１３９４−１４０１（１９９９））を参照されたい。

「血管新生インヒビター」とは、メカニズムに関係なく、新しい血管の形成を阻害する化合物をいう。血管新生インヒビターの例は、限定されるものではないが、チロシンキナーゼインヒビター、例えば、チロシンキナーゼ受容体Ｆｌｔ−１（ＶＥＧＦＲ１）及びＦｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ２）のインヒビター、表皮由来、線維芽細胞由来若しくは血小板由来増殖因子のインヒビター、ＭＭＰ（マトリックス・メタロプロテアーゼ）インヒビター、インテグリン・ブロッカー、インターフェロン−α、インターロイキン−１２、ペントサンポリ硫酸、シクロオキシゲナーゼインヒビター（アスピリン及びイブプロフェンなどの非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）を含む）並びにセレコキシブ及びロフェコキシブなどの選択的シクロオキシゲナーゼ−２インヒビター（ＰＮＡＳ，Ｖｏｌ．８９，ｐ．７３８４（１９９２）；ＪＮＣＩ，Ｖｏｌ．６９，ｐ．４７５（１９８２）；Ａｒｃｈ．Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ．，Ｖｏｌ．１０８，ｐ．５７３（１９９０）；Ａｎａｔ．Ｒｅｃ．，Ｖｏｌ．２３８，ｐ．６８（１９９４）；ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｖｏｌ．３７２，ｐ．８３（１９９５）；Ｃｌｉｎ，Ｏｒｔｈｏｐ．Ｖｏｌ．３１３，ｐ．７６（１９９５）；Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１６，ｐ．１０７（１９９６）；Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，Ｖｏｌ．７５，ｐ．１０５（１９９７）；Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．５７，ｐ．１６２５（１９９７）；Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．９３，ｐ．７０５（１９９８）；Ｉｎｔｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．２，ｐ．７１５（１９９８）；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２７４，ｐ．９１１６（１９９９））、ステロイド系抗炎症剤（コルチコステロイド、ミネラロコルチコイド、デキサメタゾン、プレドニソン、プレドニソロン、メチルプレッド、ベタメサゾン）、カルボキシアミドトリアゾール、コンブレタスタチンＡ−４、スクアラミン、６−Ｏ−クロロアセチル−カルボニル）−フマギロール、サリドマイド、アンギオスタチン、トロポニン−１、アンギオテンシンＩＩアンタゴニスト（参照Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１０５：１４１−１４５（１９８５））、及びＶＥＧＦに対する抗体（参照Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１７，ｐｐ．９６３−９６８（１９９９年１０月）；Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２，８４１−８４４（１９９３）；ＷＯ００／４４７７７；及びＷＯ００／６１１８６）である。

血管新生を調節又は阻害し、本発明化合物と組合わせて使用し得る他の治療薬は、凝固系及び繊維素溶解系を調節又は阻害する薬剤を含む（参照概説：Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｌａ．Ｍｅｄ．３８：６７９−６９２（２０００））。凝固及び繊維素溶解経路を調節又は阻害するかかる薬剤の例は、限定されるものではないが、ヘパリン（参照：Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８０：１０−２３（１９９８））、低分子量ヘパリン及びカルボキシペプチダーゼＵインヒビター（活性トロンビンを活性化し得る繊維素溶解インヒビター（ＴＡＦＩａ）のインヒビターとしても知られる）（参照：Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ Ｒｅｓ．１０１：３２９−３５４（２００１））などを包含する。ＴＡＦＩａインヒビターはＵＳ出願番号６０／３１０，９２７（２００１年８月８日出願）及び６０／３４９，９２５（２００２年１月１８日出願）に記載されている。

「細胞周期チェックポイントに干渉する薬剤」とは、細胞周期チェックポイントシグナルを伝達するタンパク質キナーゼを阻害し、それによってＤＮＡ傷害剤に対しがん細胞を増感する化合物をいう。かかる薬剤は、ＡＴＲ、ＡＴＭ、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２及びＷｅｅ−１キナーゼのインヒビター、及びｃｄｋとｃｄｃキナーゼインヒビターであり、具体的には７−ヒドロキシスタウロスポリン、フラボピリドール、ＣＹＣ２０２（シクラセル；Ｃｙｃｌａｃｅｌ）及びＢＭＳ−３８７０３２などである。

「受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に干渉する薬剤」とは、ＲＴＫを阻害する化合物、したがって、発がんと腫瘍進行に関与するメカニズムを阻害する化合物をいう。かかる薬剤は、ｃ−Ｋｉｔ、Ｅｐｈ、ＰＤＧＦ、Ｆｌｔ３及びｃ−Ｍｅｔのインヒビターである。さらなる薬剤は文献（Ｂｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ ａｎｄ Ｈｕｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ，４１１：３５５−３６５，２００１）に記載されているＲＴＫのインヒビターである。

「細胞増殖及び生存シグナル伝達経路のインヒビター」とは、細胞表面受容体の下流にあるシグナル伝達カスケードを阻害する化合物をいう。かかる薬剤はセリン／スレオニンキナーゼのインヒビター（限定されるものではないが、以下に記載されているＡｋｔインヒビターを含む：ＷＯ０２／０８３０６４、ＷＯ０２／０８３１３９、ＷＯ０２／０８３１４０、ＵＳ２００４−０１１６４３２、ＷＯ０２／０８３１３８、ＵＳ２００４−０１０２３６０、ＷＯ０３／０８６４０４、ＷＯ０３／０８６２７９、ＷＯ０３／０８６３９４、ＷＯ０３／０８４４７３、ＷＯ０３／０８６４０３、ＷＯ２００４／０４１１６２、ＷＯ２００４／０９６１３１、ＷＯ２００４／０９６１２９、ＷＯ２００４／０９６１３５、ＷＯ２００４／０９６１３０、ＷＯ２００５／１００３５６、ＷＯ２００５／１００３４４、ＵＳ２００５／０２９９４１、ＵＳ２００５／４４２９４、ＵＳ２００５／４３３６１、６０／７３４１８８、６０／６５２７３７、６０／６７０４６９）、Ｒａｆキナーゼのインヒビター（例えば、ＢＡＹ−４３−９００６）、ＭＥＫのインヒビター（例えば、ＣＩ−１０４０及びＰＤ−０９８０５９）、ｍＴＯＲのインヒビター（例えば、ワイスＣＣＩ−７７９）、及びＰＩ３Ｋのインヒビター（例えば、ＬＹ２９４００２）である。

上記のように、ＮＳＡＩＤとの組み合わせでは、強力なＣＯＸ−２阻害剤であるＮＳＡＩＤの使用を目的とする。本明細書の目的上、ＮＳＡＩＤが、細胞若しくはミクロソーム・アッセイにより測定した場合に、１μＭ以下のＣＯＸ−２阻害ＩＣ_５０を有するならは、そのＮＳＡＩＤは活性を有する。

本発明は選択的ＣＯＸ−２インヒビターであるＮＳＡＩＤとの組合わせをも包含する。本明細書の目的上、選択的ＣＯＸ−２インヒビターであるＮＳＡＩＤは、ＣＯＸ−１に対してよりもＣＯＸ−２に対して阻害特異性を有するものであって、細胞又はミクロソームアッセイにより評価した場合に、ＣＯＸ−１のＩＣ_５０に対するＣＯＸ−２のＩＣ_５０の比が少なくとも１００倍あると測定されるものと定義される。かかる化合物は、限定されるものではないが、ＵＳＰ５，４７４，９９５、ＵＳＰ５，８６１，４１９、ＵＳＰ６，００１，８４３、ＵＳＰ６，０２０，３４３、ＵＳＰ５，４０９，９４４、ＵＳＰ５，４３６，２６５、ＵＳＰ５，５３６，７５２、ＵＳＰ５，５５０，１４２、ＵＳＰ５，６０４，２６０、Ｕ．Ｓ．５，６９８，５８４、ＵＳＰ５，７１０，１４０、ＷＯ９４／１５９３２、ＵＳＰ５，３４４，９９１、ＵＳＰ５，１３４，１４２、ＵＳＰ５，３８０，７３８、ＵＳＰ５，３９３，７９０、ＵＳＰ５，４６６，８２３、ＵＳＰ５，６３３，２７２及びＵＳＰ５，９３２，５９８（これらはすべて参照することにより本明細書の一部とする）に開示された化合物である。

本治療方法において特に有用なＣＯＸ−２インヒビターは：３−フェニル−４−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−２−（５Ｈ）−フラノン；及び５−クロロ−３−（４−メチルスルホニル）フェニル−２−（２−メチル−５−ピリジニル）ピリジン；又はその医薬的に許容され得る塩；である。
ＣＯＸ−２の特異的インヒビターとして記載されており、それゆえ、本発明において有用である化合物は、限定されるものではないが、以下のものである：パレコキシブ（ｐａｒｅｃｏｘｉｂ）、アルコキシア（ＡＲＣＯＸＩＡ；登録商標）、ベクストラ（ＢＥＸＴＲＡ；登録商標）及びセレブレックス（ＣＥＬＥＢＲＥＸ；登録商標）又は医薬的に許容され得るその塩。

血管新生インヒビターのその他の例は、限定されるものではないが、エンドスタチン、ウクライン（ｕｋｒａｉｎ）、ランピルナーゼ（ｒａｎｐｉｒｎａｓｅ）、ＩＭ８６２、５−メトキシ−４−［２−メチル−３−（３−メチル−２−ブテニル）オキシラニル］−１−オキサスピロ［２，５］オクタ−６−イル（クロロアセチル）カルバメート、アセチルジナナリン、５−アミノ−１−［［３，５−ジクロロ−４−（４−クロロベンゾイル）フェニル］メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−カルボキサミド、ＣＭ１０１、スクアラミン（ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ）、コンブレタスタチン（ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ）、ＲＰＩ４６１０、ＮＸ３１８３８、硫酸化マンノペンタオースリン酸、７，７−（カルボニル−ビス［イミノ−Ｎ−メチル−４，２−ピロロカルボニルイミノ［Ｎ−メチル−４，２−ピロール］−カルボニルイミノ］−ビス−（１，３−ナフタレンジスルホネート）、及び３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチレン］−２−インドリノン（ＳＵ５４１６）である。

上記で使用される「インテグリン・ブロッカー」とは、生理的リガンドがα_ｖβ_３インテグリンに結合するのを選択的に拮抗、阻害又は反作用する化合物、生理的リガンドがα_ｖβ_５インテグリンに結合するのを選択的に拮抗、阻害又は反作用する化合物、生理的リガンドがα_ｖβ_３インテグリンとα_ｖβ_５インテグリンの両方に結合するのを選択的に拮抗、阻害又は反作用する化合物、及び毛細血管内皮細胞で発現される特定インテグリンの活性を拮抗、阻害又は反作用する化合物をいう。この用語はまたα_ｖβ_６、α_ｖβ_８、α_１β_１、α_２β_１、α_５β_１、α_６β_１及びα_６β_４インテグリンのアンタゴニストをいう。この用語はまたα_ｖβ_３、α_ｖβ_５、α_ｖβ_６、α_ｖβ_８、α_１β_１、α_２β_１、α_５β_１、α_６β_１及びα_６β_４インテグリンのいずれかの組合わせのアンタゴニストをいう。

チロシン・キナーゼインヒビターの一部の具体例は、Ｎ−（トリフルオロメチルフェニル）−５−メチルイソオキサゾール−４−カルボキサミド、３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル）インドリン−２−オン、１７−（アリルアミノ）−１７−デメトキシゲルダナマイシン、４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−［３−（４−モルホリニル）プロポキシル］キナゾリン、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリンアミン、ＢＩＢＸ１３８２、２，３，９，１０，１１，１２−ヘキサヒドロ−１０−（ヒドロキシメチル）−１０−ヒドロキシ−９−メチル−９，１２−エポキシ−１Ｈ−ジインドロ［１，２，３−ｆｇ：３’，２’，１’−ｋｌ］ピロロ［３，４−ｉ］［１，６］ベンゾジアゾシン−１−オン、ＳＨ２６８、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、ＳＴＩ５７１、ＣＥＰ２５６３、４−（３−クロロフェニルアミノ）−５，６−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンメタンスルホネート、４−（３−ブロモ−４−ヒドロキシフェニル）アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン、４−（４’−ヒドロキシフェニル）アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン、ＳＵ６６６８、ＳＴＩ５７１Ａ、Ｎ−４−クロロフェニル−４−（４−ピリジルメチル）−１−フタラジンアミン、及びＥＭＤ１２１９７４である。

抗がん化合物以外の化合物との組合わせもまた本方法に包含される。例えば、本出願の請求項に記載した化合物とＰＰＡＲ−γ（すなわち、ＰＰＡＲ−ガンマ）アゴニスト及びＰＰＡＲ−δ（すなわち、ＰＰＡＲ−デルタ）アゴニストとの組合わせは、ある種の悪性腫瘍の治療に有用である。ＰＰＡＲ−γ及びＰＰＡＲ−δは核ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ及びδである。ＰＰＡＲ−γの内皮細胞における発現及び血管新生におけるその関与については文献（参照：Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９８；３１：９０９−９１３；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９９；２７４：９１１６−９１２１；Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ． Ｓｃｉ．２０００；４１：２３０９−２３１７）に報告されている。つい最近、ＰＰＡＲ−γアゴニストがインビトロでＶＥＧＦに対する血管新生応答を阻害することが示されている；トログリタゾン（ｔｒｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）及びマレイン酸ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ ｍａｌｅａｔｅ）両方が、マウスにおいて網膜新生血管形成の進展を阻害する（Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｍｏｌ．２００１；１１９：７０９−７１７）。ＰＰＡＲ−γアゴニスト及びＰＰＡＲ−γ／αアゴニストの例は、限定されるものではないが、チアゾリジンジオン類（例えば、ＤＲＦ２７２５、ＣＳ−０１１、トログリタゾン（ｔｒｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、及びピオグリタゾン（ｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ））、フェノフィブレート、ゲムフィブロジル（ｇｅｍｆｉｂｒｏｚｉｌ）、クロフィブレート、ＧＷ２５７０、ＳＢ２１９９９４、ＡＲ−Ｈ０３９２４２、ＪＴＴ−５０１、ＭＣＣ−５５５、ＧＷ２３３１、ＧＷ４０９５４４、ＮＮ２３４４、ＫＲＰ２９７、ＮＰ０１１０、ＤＲＦ４１５８、ＮＮ６２２、ＧＩ２６２５７０、ＰＮＵ１８２７１６、ＤＲＦ５５２９２６、２−［（５，７−ジプロピル−３−トリフルオロメチル−１，２−ベンズイソオキサゾール−６−イル）オキシ］−２−メチルプロピオン酸（ＵＳＳＮ０９／７８２，８５６に開示）、及び２（Ｒ）−７−（３−（２−クロロ−４−（４−フルオロフェノキシ）フェノキシ）プロポキシ）−２−エチルクロマン−２−カルボン酸（ＵＳＳＮ６０／２３５，７０８及び６０／２４４，６９７に開示）などを包含する。

本発明の別の実施態様は、がん治療のための遺伝子療法と組合わせて、本明細書に開示した化合物を使用することである。がん治療の遺伝子戦略の概観については：Ｈａｌｌ ｅｔ ａｌ（Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．６１：７８５−７８９，１９９７）及びＫｕｆｅ ｅｔ ａｌ（Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，５ｔｈ Ｅｄ，ｐｐ８７６−８８９，ＢＣ Ｄｅｃｋｅｒ，Ｈａｍｉｌｔｏｎ ２０００）を参照。遺伝子療法は腫瘍抑制遺伝子を送達するために使用することができる。かかる遺伝子の例は、限定されるものではないが、ｐ５３（この遺伝子は組換えウイルス媒介遺伝子伝達を介して送達される）（例えば、ＵＳＰ６，０６９，１３４参照）、ｕＰＡ／ｕＰＡＲアンタゴニスト（“ｕＰＡ／ｕＰＡＲアンタゴニストのアデノウイルス媒介送達は、マウスにおいて血管新生依存性腫瘍増殖及び拡散を抑制する”Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｕｇｕｓｔ １９９８；５（８）：１１０５−１３）、及びインターフェロン−ガンマ（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０００；１６４：２１７−２２２）などを包含する。

本発明化合物はまた生来多剤耐性（ＭＤＲ）であるインヒビター、取分け輸送体タンパク質の高レベル発現と関係するＭＤＲのインヒビターと組合わせて投与し得る。かかるＭＤＲインヒビターはｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）のインヒビター、例えば、ＬＹ３３５９７９、ＸＲ９５７６、ＯＣ１４４−０９３、Ｒ１０１９２２、ＶＸ８５３及びＰＳＣ８３３（バルスポダール（ｖａｌｓｐｏｄａｒ））を包含する。

本発明化合物は、本発明化合物の単独使用又は放射線療法との併用から生じ得る急性、遅延型、後期、及び予測性の嘔吐などの悪心又は嘔吐を治療するために、制吐剤とともに使用し得る。嘔吐の予防又は治療のために、本発明化合物は他の制吐剤、取分け、ニューロキニン−１受容体アンタゴニスト、５ＨＴ３受容体アンタゴニスト、例えば、オンダンセトロン（ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ）、グラニセトロン（ｇｒａｎｉｓｅｔｒｏｎ）、トロピセトロン（ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ）、及びザチセトロン（ｚａｔｉｓｅｔｒｏｎ）など、ＧＡＢＡＢ受容体アゴニスト、例えば、バクロフェンなど、コルチコステロイド、例えば、デカドロン（デキサメタゾン）など、ケナログ（Ｋｅｎａｌｏｇ）、アリストコート（Ａｒｉｓｔｏｃｏｒｔ）、ナサリド（Ｎａｓａｌｉｄｅ）、プレフェリド（Ｐｒｅｆｅｒｉｄ）、ベネコルテン（Ｂｅｎｅｃｏｒｔｅｎ）、又はＵＳＰ２，７８９，１１８、２，９９０，４０１、３，０４８，５８１、３，１２６，３７５、３，９２９，７６８、３，９９６，３５９、３，９２８，３２６及び３，７４９，７１２に開示されたその他のもの、抗ドーパミン作動性薬、例えば、フェノチアジン類（例：プロクロルペラジン、フルフェナジン、チオリダジン及びメソリダジン）、メトクロプラミド又はドロナビノールなどと共に使用し得る。別の実施態様においては、ニューロキニン−１受容体アンタゴニスト、５ＨＴ３受容体アンタゴニスト、及びコルチコステロイドから選択される制吐剤との組合わせ療法が、本発明化合物の投与により生じ得る嘔吐の治療又は予防のために開示される。

本発明化合物と組合わせて使用するニューロキニン−１受容体アンタゴニストについては、例えば、以下に詳しく記載されている：米国特許ＵＳＰ５，１６２，３３９、５，２３２，９２９、５，２４２，９３０、５，３７３，００３、５，３８７，５９５、５，４５９，２７０、５，４９４，９２６、５，４９６，８３３、５，６３７，６９９、５，７１９，１４７；欧州特許公開番号ＥＰ０ ３６０ ３９０、０ ３９４ ９８９、０ ４２８ ４３４、０ ４２９ ３６６、０ ４３０ ７７１、０ ４３６ ３３４、０ ４４３ １３２、０ ４８２ ５３９、０ ４９８ ０６９、０ ４９９ ３１３、０ ５１２ ９０１、０ ５１２ ９０２、０ ５１４ ２７３、０ ５１４ ２７４、０ ５１４ ２７５、０ ５１４ ２７６、０ ５１５ ６８１、０ ５１７ ５８９、０ ５２０ ５５５、０ ５２２ ８０８、０ ５２８ ４９５、０ ５３２ ４５６、０ ５３３ ２８０、０ ５３６ ８１７、０ ５４５ ４７８、０ ５５８ １５６、０ ５７７ ３９４、０ ５８５ ９１３、０ ５９０ １５２、０ ５９９ ５３８、０ ６１０ ７９３、０ ６３４ ４０２、０ ６８６ ６２９、０ ６９３ ４８９、０ ６９４ ５３５、０ ６９９ ６５５、０ ６９９ ６７４、０ ７０７ ００６、０ ７０８ １０１、０ ７０９ ３７５、０ ７０９ ３７６、０ ７１４ ８９１、０ ７２３ ９５９、０ ７３３ ６３２及び０ ７７６ ８９３；ＰＣＴ国際特許公開番号ＷＯ９０／０５５２５、９０／０５７２９、９１／０９８４４、９１／１８８９９、９２／０１６８８、９２／０６０７９、９２／１２１５１、９２／１５５８５、９２／１７４４９、９２／２０６６１、９２／２０６７６、９２／２１６７７、９２／２２５６９、９３／００３３０、９３／００３３１、９３／０１１５９、９３／０１１６５、９３／０１１６９、９３／０１１７０、９３／０６０９９、９３／０９１１６、９３／１００７３、９３／１４０８４、９３／１４１１３、９３／１８０２３、９３／１９０６４、９３／２１１５５、９３／２１１８１、９３／２３３８０、９３／２４４６５、９４／００４４０、９４／０１４０２、９４／０２４６１、９４／０２５９５、９４／０３４２９、９４／０３４４５、９４／０４４９４、９４／０４４９６、９４／０５６２５、９４／０７８４３、９４／０８９９７、９４／１０１６５、９４／１０１６７、９４／１０１６８、９４／１０１７０、９４／１１３６８、９４／１３６３９、９４／１３６６３、９４／１４７６７、９４／１５９０３、９４／１９３２０、９４／１９３２３、９４／２０５００、９４／２６７３５、９４／２６７４０、９４／２９３０９、９５／０２５９５、９５／０４０４０、９５／０４０４２、９５／０６６４５、９５／０７８８６、９５／０７９０８、９５／０８５４９、９５／１１８８０、９５／１４０１７、９５／１５３１１、９５／１６６７９、９５／１７３８２、９５／１８１２４、９５／１８１２９、９５／１９３４４、９５／２０５７５、９５／２１８１９、９５／２２５２５、９５／２３７９８、９５／２６３３８、９５／２８４１８、９５／３０６７４、９５／３０６８７、９５／３３７４４、９６／０５１８１、９６／０５１９３、９６／０５２０３、９６／０６０９４、９６／０７６４９、９６／１０５６２、９６／１６９３９、９６／１８６４３、９６／２０１９７、９６／２１６６１、９６／２９３０４、９６／２９３１７、９６／２９３２６、９６／２９３２８、９６／３１２１４、９６／３２３８５、９６／３７４８９、９７／０１５５３、９７／０１５５４、９７／０３０６６、９７／０８１４４、９７／１４６７１、９７／１７３６２、９７／１８２０６、９７／１９０８４、９７／１９９４２及び９７／２１７０２；及び英国特許公開ＰＢ−Ａ２ ２６６ ５２９、２ ２６８ ９３１、２ ２６９ １７０、２ ２６９ ５９０、２ ２７１ ７７４、２ ２９２ １４４、２ ２９３ １６８、２ ２９３ １６９、及び ２ ３０２ ６８９。かかる化合物の調製については、上記の特許及び出願公開に詳しく記載されている；これらを参照することにより本明細書の一部とする。

一実施態様において、本発明化合物と組合わせて使用されるニューロキニン−１受容体アンタゴニストは、ＵＳＰ５，７１９，１４７に開示されている２−（Ｒ）−（１−（Ｒ）−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）−３−（Ｓ）−（４−フルオロフェニル）−４−（３−（５−オキソ−１Ｈ，４Ｈ−１，２，４−トリアゾロ）メチル）モルホリン、又はその医薬的に許容され得る塩から選択される。

本発明化合物は貧血の治療に有用な薬剤と共にも投与し得る。かかる貧血治療の薬剤は、例えば、連続的赤血球形成受容体活性化因子（エポエチンアルファなど）である。
本発明化合物は好中球減少症の治療に有用な薬剤と共にも投与し得る。かかる好中球減少症治療の薬剤は、例えば、ヒト顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）などの好中球の産生と機能を調節する造血成長因子である。Ｇ−ＣＳＦの例はフィルグラスチム（ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）である。
本発明化合物はまた免疫増強剤、例えば、レバミゾール、イソプリノシン（ｉｓｏｐｒｉｎｏｓｉｎｅ）及びザダキシン（Ｚａｄａｘｉｎ）などと共にも投与し得る。

本発明化合物はＰ４５０インヒビターと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る；かかるインヒビターは、キセノビオティックス、キニジン、チラミン、ケトコナゾール、テストステロン、キニーネ、メチラポン、カフェイン、フェネルジン、ドキソルビシン、トロレアンドマイシン、シクロベンザプリン、エリスロマイシン、コカイン、フラフィリン、シメチジン、デキストロメトルファン、リトナビル、インディナビル、アンプレナビル、ジルチアゼム、テルフェナジン、ベラパミル、コルチゾール、イトラコナゾール、ミベフラジル、ネファゾドン及びネルフィナビルなどである。

本発明化合物はＰｇｐ及び／又はＢＣＲＰインヒビターと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る；かかるインヒビターは、シクロスポリンＡ、ＰＳＣ８３３、ＧＦ１２０９１８、クレモフォアＥＬ（ｃｒｅｍｏｐｈｏｒＥＬ）、フミトレモルギンＣ（ｆｕｍｉｔｒｅｍｏｒｇｉｎ Ｃ）、Ｋｏ１３２、Ｋｏ１３４、イレッサ、メシル酸イマチニブ、ＥＫＩ−７８５、Ｃｌ１０３３、ノボビオシン、ジエチルスチルベステロール、タモキシフェン、レセルピン、ＶＸ−７１０、トリプロスタチンＡ、フラボノイド、リトナビル、サキナビル、ネルフィナビル、オメプラゾール、キニジン、ベラパミル、テルフェナジン、ケトコナゾール、ニフェジピン、ＦＫ５０６、アミダロン、ＸＲ９５７６、インジナビル、アンプレナビル、コルチゾール、テストステロン、ＬＹ３３５９７９、ＯＣ１４４−０９３、エリスロマイシン、ビンクリスチン、ジゴキシン及びタリノロールなどである。

本発明化合物はまたビスホスホネート（ビスホスホネート、ジホスホネート、ビスホスホン酸及びジホスホン酸などを含むと理解される）と組合わせて、骨がんなどのがんの治療又は予防に有用であり得る。ビスホスホネートの例は、限定されるものではないが、エチドロネート（ダイドロネル（Ｄｉｄｒｏｎｅｌ））、パミドロネート（アレジア（Ａｒｅｄｉａ））、アレンドロネート（ホサマックス（Ｆｏｓａｍａｘ））、リセンドロネート（アクトネル（Ａｃｔｏｎｅｌ））、ゾレドロネート（ゾメタ（Ｚｏｍｅｔａ））、イバンドロネート（ボニバ（Ｂｏｎｉｖａ））、インカドロネート（ｉｎｃａｄｒｏｎａｔｅ）若しくはシマドロネート（ｃｉｍａｄｒｏｎａｔｅ）、クロドロネート（ｃｌｏｄｒｏｎａｔｅ）、ＥＢ−１０５３、ミノドロネート（ｍｉｎｏｄｒｏｎａｔｅ）、ネリドロネート（ｎｅｒｉｄｒｏｎａｔｅ）、ピリドロネート（ｐｉｒｉｄｒｏｎａｔｅ）及びチルドロネート（ｔｉｌｕｄｒｏｎａｔｅ）並びにそのいずれかの、及びすべての医薬的に許容され得る塩、誘導体、水和物及びその混合物である。

また、本発明化合物はアロマターゼインヒビターと組合わせて、乳がんの治療又は予防にも有用であり得る。アロマターゼインヒビターの例は、限定されるものではないが、アナストロゾール、レトロゾール及びエクゼメスタンである。
また、本発明化合物はｓｉＲＮＡ療法と組合わせたがんの治療又は予防にも有用であり得る。

本発明化合物はまた、γ−セクレターゼインヒビター及び／又はノッチ（ＮＯＴＣＨ）シグナル伝達インヒビターと組合せて投与してもよい。そのようなインヒビターは以下に記載された化合物である：ＷＯ０１／９００８４、ＷＯ０２／３０９１２、ＷＯ０１／７０６７７、ＷＯ０３／０１３５０６、ＷＯ０２／３６５５５、ＷＯ０３／０９３２５２、ＷＯ０３／０９３２６４、ＷＯ０３／０９３２５１、ＷＯ０３／０９３２５３、ＷＯ２００４／０３９８００、ＷＯ２００４／０３９３７０、ＷＯ２００５／０３０７３１、ＷＯ２００５／０１４５５３、ＵＳＳＮ１０／９５７，２５１、ＷＯ２００４／０８９９１１、ＷＯ０２／０８１４３５、ＷＯ０２／０８１４３３、ＷＯ０３／０１８５４３、ＷＯ２００４／０３１１３７、ＷＯ２００４／０３１１３９、ＷＯ２００４／０３１１３８、ＷＯ２００４／１０１５３８、ＷＯ２００４／１０１５３９及びＷＯ０２／４７６７１（ＬＹ−４５０１３９を含む）。

本発明化合物は、ＰＡＲＰインヒビターと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。
本発明化合物は、カルボプラチン及びタキソールと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。
本発明化合物は、５−ＦＵ及びシスプラチンと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。
本発明化合物は、カペシタビンと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。

本発明化合物は、オキサリプラチンと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。
本発明化合物は、シスプラチンと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。
本発明化合物は、ゲムシタビンと組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。
本発明化合物は、放射線療法と組合わせて、がんを治療又は予防するためにも有用であり得る。

本発明化合物は、以下の治療剤と組合わせて、がんを治療するためにも有用であり得る：アバレリックス（ａｂａｒｅｌｉｘ；プレナキス・デポ：Ｐｌｅｎａｘｉｓ ｄｅｐｏｔ登録商標）；アルデスロイキン（ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ；プロカイン：Ｐｒｏｋｉｎｅ登録商標）；アルデスロイキン（プロロイキン：Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ登録商標）；アルメツズマブ（Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂｂ：カンパス：Ｃａｍｐａｔｈ登録商標）；アリトレチノイン（ａｌｉｔｒｅｔｉｎｏｉｎ；パンレチン：Ｐａｎｒｅｔｉｎ登録商標）；アロプリノール（ジロプリム：Ｚｙｌｏｐｒｉｍ登録商標）；アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ；ヘキサレン：Ｈｅｘａｌｅｎ登録商標）；アミフォスチン（ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ；エチオール（Ｅｔｈｙｏｌ登録商標）；アマストロゾール（ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ；アリミデックス：Ａｒｉｍｉｄｅｘ登録商標）；三酸化砒素（トリセノックス登録商標）；アスパラギナーゼ（エルスパール：Ｅｌｓｐａｒ登録商標）；アザシチジン（ビダザ：Ｖｉｄａｚａ登録商標）；ベバクジマブ（ｂｅｖａｃｕｚｉｍａｂ；アバスチン：Ａｖａｓｔｉｎ登録商標）；ベキサロテン（ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ）カプセル（ターグレチン：Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ登録商標）；ベキサロテン・ゲル（タルグレチン：Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ登録商標）；ブレオマイシン（ブレノキサン：Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ登録商標）；ボルテゾミブ（ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ；ベルケード：Ｖｅｌｃａｄｅ登録商標）；ブスルファン静注（ブスルフェックス；登録商標）；ブスルファン経口（ミレラン：Ｍｙｌｅｒａｎ登録商標）；カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ；メトサルブ：Ｍｅｔｈｏｓａｒｂ登録商標）；カペシタビン（ゼローダ：登録商標）；カルボプラチン（パラプラチン：登録商標）；カルムスチン（ＢＣＮＵ登録商標；ＢｉＣＮＵ登録商標）；カルムスチン（グリアデル登録商標）；カルムスチン及びポリフェプロサン２０インプラント（グリアデル・ウエハー登録商標）；セレコキシブ（セレブレックス登録商標）；セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ；エルビタックス：Ｅｒｂｉｔｕｘ登録商標）；クロランブシル（ロイケラン登録商標）；シスプラチン（プラチノール登録商標）；クラドリビン（ロイスタチン登録商標；２−ＣｄＡ登録商標）；クロファラビン（クロラール登録商標）；シクロホスファミド（シトキサン登録商標；ネオサール登録商標）；シクロホスファミド（シトキサン注射、登録商標）；シクロホスファミド（シトキサン錠、登録商標）；シタラビン（シトサール−Ｕ登録商標）；シタラビン・リポソーム（デポシット登録商標）；

ダカルバジン（ＤＴＩＣ−ドーム、登録商標）；ダクチノマイシン、アクチノマイシンＤ（コスメゲン、登録商標）；ダルベポエチンアルファ（アラネスプ、登録商標）；ダウノルビシン・リポソーム（ダウノキソーム、登録商標）；ダウノルビシン、ダウノマイシン（ダウノルビシン、登録商標）；ダウノルビシン、ダウノマイシン（セルビジン、登録商標）；デニロイキン・ジフィトックス（Ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ ｄｉｆｔｉｔｏｘ；オンタック：Ｏｎｔａｋ登録商標）；デクスラゾキサン（ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ；ジネカード：Ｚｉｎｅｃａｒｄ登録商標）；ドセタキセル（タキソテール、登録商標）；ドキソルビシン（アドリアマイシンＰＦＳ登録商標）；ドキソルビシン（アドリアマイシン、登録商標；ルベックス、登録商標）；ドキソルビシン（アドリアマイシンＰＦＳ注射、登録商標）；ドキソルビシン・リポソーム（ドキシル、登録商標）；プロピオン酸ドロモスタノロン（ドロモスタノロン、登録商標）；プロピオン酸ドロモスタノロン（マステロン注射）；エリオットＢ溶液（エリオットＢ溶液）；エピルビシン（エレンス、登録商標）；エポエチンアルファ（エポゲン、登録商標）；エルロチニブ（タルセバ、登録商標）；エストラムスチン（エムサイト：Ｅｍｃｙｔ登録商標）；リン酸エトポシド（エトポホス、登録商標）；エトポシド、ＶＰ−１６（ベペシド：Ｖｅｐｅｓｉｄ登録商標）；エクゼメスタン（アロマシン、登録商標）；フィルグラスチム（ノイポゲン、登録商標）；フロクスウリジン（動脈内）（ＦＵＤＲ登録商標）；フルダラビン（フルダラ、登録商標）；フルオロウラシル、５−ＦＵ（アドルシル、登録商標）；フルベストラント（ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ；ファスロデックス：Ｆａｓｌｏｄｅｘ登録商標）；ゲフィチニブ（イレッサ、登録商標）；ゲムシタビン（ゲムザール、登録商標）；ゲムツズマブオゾガマイシン（マイロターグ、登録商標）；酢酸ゴセレリン（ゾラデックス・インプラント、登録商標）；酢酸ゴセレリン（ゾラデックス、登録商標）；酢酸ヒストレリン（ヒストレリン・インプラント、登録商標）；ヒドロキシ尿素（ハイドレア、登録商標）；イブリツモマブチウキセタン（Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ Ｔｉｕｘｅｔａｎ；ゼバリン：Ｚｅｖａｌｉｎ登録商標）；イダルビシン（イダマイシン、登録商標）；イフォスファミド（ＩＦＥＸ登録商標）；メシル酸イマチニブ（グリーベック、登録商標）；

インターフェロンアルファ２ａ（ロフェロンＡ、登録商標）；インターフェロンアルファ２ｂ（イントロンＡ、登録商標）；イリノテカン（カンプトサール、登録商標）；レナリドミド（ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ；レブリミド：Ｒｅｖｌｉｍｉｄ登録商標）；レトロゾール（フェマーラ、登録商標）；ロイコボリン（ウエルコボリン、登録商標；ロイコボリン、登録商標）；酢酸ロイプロリド（エリガード、登録商標）；レバミゾール（エルガミソール、登録商標）；ロムスチン、ＣＣＮＵ（ＣｅｅＢＵ登録商標）；メクロレタミン、ナイトロジェンマスタード（マスターゲン、登録商標）；酢酸メゲストロール（ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ ａｃｅｔａｔｅ；メゲース：Ｍｅｇａｃｅ登録商標）；メルファラン、Ｌ−ＰＡＭ（アルケラン、登録商標）；メルカプトプリン、６−ＭＰ（プリネトール、登録商標）；メスナ（メスネックス、登録商標）；メスナ（メスネックス錠、登録商標）；メトトレキセート（メトトレキセート、登録商標）；メトキサレン（ユバデックス、登録商標）；マイトマイシンＣ（ムタマイシン、登録商標）；ミトタン（リソドレン、登録商標）；ミトキサントロン（ノバントロン、登録商標）；フェンプロピオン酸ナンドロロン（デュラボリン−５０、登録商標）；ネララビン（アルラノン、登録商標）；ノフェツモマブ（Ｎｏｆｅｔｕｍｏｍａｂ；ベルルーマ、登録商標）；オプレルベキン（Ｏｐｒｅｌｖｅｋｉｎ；ノイメガ：Ｎｅｕｍｅｇａ登録商標）；オキサリプラチン（エロキサチン、登録商標）；パクリタキセル（パキセン、登録商標）；パクリタキセル（タキソール、登録商標）；パクリタキセル・タンパク結合粒子（アブラキサン、登録商標）；パリフェルミン（ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ；ケピバンス：Ｋｅｐｉｖａｎｃｅ登録商標）；パミドロン酸塩（アレディア、登録商標）；ペガデマーゼ（ｐｅｇａｄｅｍａｓｅ；アダゲン：Ａｄａｇｅｎ （ペガデマーゼ・ウシ）登録商標）；ペガスパルガーゼ（ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ；オンカスパール：Ｏｎｃａｓｐａｒ登録商標）；ペグフィルグラスチム（Ｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ；ノイラスタ：Ｎｅｕｌａｓｔａ登録商標）；ペメトレキセド二ナトリウム（アリムタ、登録商標）；ペントスタチン（ニペント、登録商標）；ピポブロマン（ｐｉｐｏｂｒｏｍａｎ；ベルサイト：Ｖｅｒｃｙｔｅ登録商標）；プリカマイシン（ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ）、ミスラマイシン（ミスラシン、登録商標）；ポルフィマーナトリウム（フォトフリン、登録商標）；プロカルバジン（マツラン：Ｍａｔｕｌａｎｅ登録商標）；キナクリン（ｑｕｉｎａｃｒｉｎｅ；アタブリン：Ａｔａｂｒｉｎｅ登録商標）；ラスブリカーゼ（Ｒａｓｂｕｒｉｃａｓｅ；エリテック、登録商標）；

リツキシマブ（リツキサン、登録商標）；サルグラモスチム（ｓａｒｇｒａｍｏｓｔｉｍ；ロイカイン、登録商標）；サルグラモスチム（プロカイン：Ｐｒｏｋｉｎｅ登録商標）；ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ（ネキサバル：Ｎｅｘａｖａｒ登録商標）；ストレプトゾシン（ザノサール、登録商標）；マレイン酸サニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ ｍａｌｅａｔｅ；スーテント：Ｓｕｔｅｎｔ登録商標）；タルク（スクレロソール：Ｓｃｌｅｒｏｓｏｌ登録商標）；タモキシフェン（ノルバデックス、登録商標）；テモゾロミド（テモダール、登録商標）；テニポシド、ＶＭ−２６（ブモン：Ｖｕｍｏｎ登録商標）；テストラクトン（テスラック、登録商標）；チオグアニン、６−ＴＧ（チオグアニン、登録商標）；チオテパ（チオプレックス、登録商標）；トポテカン（ハイカムチン、登録商標）；トレミフェン（ファレストン、登録商標）；トシツモマブ（Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ；ベクサール：Ｂｅｘｘａｒ登録商標）；トシツモマブ／Ｉ−１３１トシツモマブ（ベクサール、登録商標）；トランスツズマブ（ハーセプチン、登録商標）；トレチノイン、ＡＴＲＡ（ベルサノイド、登録商標）；ウラシルマスタード（ウラシルマスタードカプセル、登録商標）；バルルビシン（バルスター、登録商標）；ビンブラスチン（ベルバン、登録商標）；ビンクリスチン（オンコビン、登録商標）；ビノレルビン（ナベルビン、登録商標）；ゾレドロネート（ｚｏｌｅｄｒｏｎａｔｅ；ゾメタ：Ｚｏｍｅｔａ登録商標）；及びボリノスタット（ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ；ゾリンザ：Ｚｏｌｉｎｚａ登録商標）。

したがって、本発明の範囲は、本出願請求項に記載の化合物と、第二の化合物、すなわち、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞傷害剤／細胞増殖抑制剤、抗増殖剤、プレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビター、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビター、ＨＩＶプロテアーゼインヒビター、逆転写酵素インヒビター、血管新生インヒビター、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−δアゴニスト、生来多剤耐性であるもののインヒビター、制吐剤、貧血の治療に有用な薬剤、好中球減少症の治療に有用な薬剤、免疫増強剤、細胞増殖及び生存シグナル伝達のインヒビター、ビスホスホネート、アロマターゼインヒビター、ｓｉＲＮＡ治療剤、γ−セクレターゼ及び／又はノッチインヒビター、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に干渉する薬剤、細胞周期チェックポイントに干渉する薬剤、及び上記掲載の治療剤のいずれかから選択される化合物とを組合わせて使用することを包含する。

本発明化合物に関連する用語「投与」及びその変形（例えば、化合物を「投与する」）は、該化合物又は該化合物のプロドラッグを、治療を必要とする動物の系に導入することを意味する。本発明化合物又はそのプロドラッグが１種以上の他の活性薬剤（例えば、細胞障害剤など）と組合わせて提供される場合、「投与」及びその変形はそれぞれ該化合物又はそのプロドラッグ及び他の薬剤を同時に、及び連続的に導入することを包含すると理解される。

本明細書にて使用する場合、用語「組成物」とは、特定量の特定成分からなる製品、並びに直接的又は間接的に、特定量の特定成分の組合わせから生じる製品を包含するものとする。
本明細書にて使用する場合、用語「治療有効量」とは、研究者、獣医師、医師又はその他の臨床家が求める、組織、系、動物又はヒトにおける、生物学的又は医薬的応答を生じる活性化合物又は薬剤の量を意味する。
用語「がんを治療する」又は「がんの治療」とは、がんの症状に侵された哺乳動物に投与することをいい、またがん細胞を殺すことによりがんの症状を軽快する作用をいうが、さらにがんの増殖及び／又は転移を阻害する作用をもいう。

一実施態様において、第二の化合物として使用するべき血管新生インヒビターは、チロシンキナーゼインヒビター、上皮由来増殖因子のインヒビター、線維芽細胞由来増殖因子のインヒビター、血小板由来増殖因子のインヒビター、ＭＭＰ（マトリックス・メタロプロテアーゼ）インヒビター、インテグリン・ブロッカー、インターフェロン−α、インターロイキン−１２、ペントサン・ポリ硫酸、シクロオキシゲナーゼ・インヒビター、カルボキシアミドトリアゾール、コンブレタスタチンＡ−４、スクアラミン、６−Ｏ−クロロアセチルカルボニル）フマギロール、サリドマイド、アンギオスタチン、トロポニン−１、又はＶＥＧＦに対する抗体から選択される。一実施態様において、エストロゲン受容体モジュレーターは、タモキシフェン又はラロキシフェンである。

特許請求の範囲には、本発明化合物の治療有効量を、放射線療法との組合わせ及び／又はエストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞傷害剤／細胞増殖抑制剤、抗増殖剤、プレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビター、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビター、ＨＩＶプロテアーゼインヒビター、逆転写酵素インヒビター、血管新生インヒビター、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−δアゴニスト、生来多剤耐性であるもののインヒビター、制吐剤、貧血の治療に有用な薬剤、好中球減少症の治療に有用な薬剤、免疫増強剤、細胞増殖及び生存シグナル伝達のインヒビター、ビスホスホネート、アロマターセインヒビター、ｓｉＲＮＡ治療剤、γ−セクレターゼ及び／又はノッチインヒビター、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に干渉する薬剤、細胞周期チェックポイントに干渉する薬剤及び上記掲載の治療剤のいずれかから選択される第二の化合物とを組み合わせて投与することからなる癌の治療方法が包含される。

また本発明のなお別の実施態様は、本発明化合物の治療有効量を、パクリタキセル又はトラスツズマブと組合わせて投与することからなるがんの治療方法である。
本発明はさらに本発明化合物の治療有効量をＣＯＸ−２インヒビターと組合わせて投与することからなるがんの治療又は予防方法を包含する。

本発明はまた本発明化合物の治療有効量と、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞傷害剤／細胞増殖抑制剤、抗増殖剤、プレニル−タンパク質トランスフェラーゼインヒビター、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼインヒビター、ＨＩＶプロテアーゼインヒビター、逆転写酵素インヒビター、血管新生インヒビター、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−δアゴニスト、細胞増殖及び生存シグナル伝達のインヒビター、ビスホスホネート、アロマターセインヒビター、ｓｉＲＮＡ治療剤、γ−セクレターゼ及び／又はノッチインヒビター、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に干渉する薬剤、細胞周期チェックポイントに干渉する薬剤及び上記掲載の治療剤のいずれかから選択される第二の化合物とを含有してなるがんの治療又は予防に有用な医薬組成物を包含する。

特定した特許、公開公報及び係属中の特許出願はすべて参照することにより本明細書の一部とする。

化学上の記載及び以下の反応工程図に使用し得る略号は以下のとおりである：Ａｃ_２Ｏ（無水酢酸）；ＡｃＯＨ（酢酸）；ＡＥＢＳＦ（フッ化ｐ−アミノエチルベンゼンスルホニル）；ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）；ＢｕＬｉ（ｎ−ブチルリチウム）；ＣＤＣｌ_３（クロロホルム−ｄ）；ＣｕＩ（ヨウ化銅）；ＣｕＳＯ_４（硫酸銅）；ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン）；ＤＣＥ（ジクロロエタン）；ＤＣＭ（ジクロロメタン）；ＤＥＡＤ（アゾジカルボン酸ジエチル）；ＤＩＰＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）；ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）；ＤＭＰ（デス−マーチン・ペルヨーディナン）；ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）；ＤＰＰＡ（アジ化ジフェニルホスホリル）；ＤＴＴ（ジチオスレイトール）；ＥＤＴＡ（エチレン−ジアミン−四酢酸）；ＥＧＴＡ（エチレングリコール−四酢酸）；Ｅｔ_２Ｏ（ジエチルエーテル）；ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）；ＥｔＯＨ（エタノール）；ＨＯＡｃ（酢酸）；ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）；ＨＲＭＳ（高分解質量スペクトル）；ＬＡＨ（水素化アルミニウムリチウム）；ＬＣＭＳ（液体クロマトグラフィー−質量分析計）；ＬＨＭＤＳ（リチウムビス（トリメチルシリル）アミド）；ＬＲＭＳ（低分解質量スペクトル）；ｍＣＰＢＡ（３−クロロペルオキシ安息香酸）；ＭｅＯＨ（メタノール）；ＭＰ−Ｂ（ＣＮ）Ｈ_３（多孔性水素化シアノホウ素）；ＮａＨＣＯ_３（重炭酸ナトリウム）；Ｎａ_２ＳＯ_４（硫酸ナトリウム）；Ｎａ（ＯＡｃ）_３ＢＨ（水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム）；ＮＨ_４ＯＡｃ（酢酸アンモニウム）；ＮＢＳ（Ｎ−ブロモコハク酸イミド）；ＮＭＰ（１−メチル−２−ピロリジノン）；ＮＭＲ（核磁気共鳴）；ＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）；ＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）；Ｐｄ（ｄｐｐｆ）（［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム）；Ｐｄ（Ｐｈ_３）_４（パラジウム（０）テトラキス−トリフェニルホスフィン）；ＰＯＣｌ_３（オキシ塩化リン）；ＰＳ−ＤＩＥＡ（ポリスチレンジイソプロピルエチルアミン）；ＰＳ−ＰＰｈ_３（ポリスチレン−トリフェニルホスフィン）；ＰＴＳＡ（パラ−トルエンスルホン酸）；Ｐｙｒ（ピリジン）；セレクチフルオア（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ）（１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタン ビス（テトラフルオロボレート）；ＲＰ−ＨＰＬＣ（逆相高速液体クロマトグラフィー）；ＴＢＡＦ（フッ化テトラブチルアンモニウム）；ｔ−ＢｕＯＨ（ｔｅｒｔ−ブタノール）；ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；Ｔｆ（トリフルオロメタンスルホニル）；ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；及びＴＭＳＣＨ_２Ｎ_２（トリメチルシリルジアゾメタン）。

本発明化合物は以下の反応工程図に示す反応を用いることにより、またさらに、文献既知であるか、又は実験手順に例示される他の標準的手技に従って、調製することができる。したがって、下記に説明する反応工程図は、掲載された化合物によって、又は説明を目的として使用されるいずれかの特定の置換基によって限定されるものではない。反応工程図に示した置換基の番号付けは、請求項に使用したものと必ずしも相関するものではなく、しばしば明確化のために、上記の式（Ａ）の定義のもとで、複数の置換基が選択肢として可能である化合物についても、１個の置換基を結合させて示している。
本発明化合物を生成させるために使用する反応は、反応工程図Ｉ〜ＶＩＩに示す反応を採用することにより実施する。

反応工程図の概要
反応工程図Ｉに示すように、置換基を有する１−クロロイソキノリン（Ａ−１）は、マイクロ波処理によるエチルカルバゼートとの環化反応を受け、トリアゾロイソキノリン（Ａ−２）を生じる。Ｒ_２＝ハロゲンである場合、化合物（Ａ−２）はさらにスズキカップリング反応を介して、ヘテロ環状ホウ酸／エステルとカップリングして誘導化し、Ａ−３で示される化合物とされる。

反応工程図ＩＩは、置換４−ヒドロキシイソキノリン（Ｂ−１）の相当するＢｏｃ又はフタルイミド保護ブロモアミン（Ｂ−２）でのアルキル化によるアミノエーテル（Ｂ−３）の調製について説明する。エーテル（Ｂ−３）はマイクロ波処理によるエチルカルバゼートとの環化反応、さらに相当する脱保護反応を受けてトリアゾロキノリン（Ｂ−４）を与える。

反応工程図ＩＩＩに示すように、アミノアセトアルデヒドジメチルアセタールによる置換ベンズアルデヒド（Ｃ−１）のポメランズ−フリッチ（Ｐｏｍｅｒａｎｚ−Ｆｒｉｓｔｃｈ）環化反応により、置換イソキノリン（Ｃ−２）（場合によっては異性体混合物として）を生じ得る。選択的臭素化反応はそれらの４−ブロモ誘導体（Ｃ−３）を提供するが、このものはｍＣＰＢＡにより処理して、Ｎ−オキシド（Ｃ−４）に変換することができる。化合物（Ｃ−４）はＰＯＣｌ_３で処理すると、位置選択的転位を受けて、置換１−クロロイソキノリン（Ｃ−５）を生じる；このものはマイクロ波処理環化反応を受けて、ブロモトリアゾロイソキノリン（Ｃ−６）を生じる。化合物（Ｃ−６）とホウ酸エステル（Ｃ−７）とのスズキカップリングは、Ｃ−８で示される化合物を与え得る。さらなる水素化／脱保護が相当するＣ−９及びＣ−１１誘導体を提供し得る。

臭化物（Ｃ−３）が置換基を有していてもよいアザアントラセン（Ｃ−３ａ）である場合、代替経路を使用することができる（反応工程図ＩＩＩａ）。Ｃ−１ａから反応系にて形成したアシル化ピリジンカルボキシアルデヒドに臭化置換亜鉛を付加すると、１，４−様式の付加が起こり、相当するジヒドロピリジン（Ｃ−２ａ）を生じる；このものは還流デカリン中、イオウの作用により脱芳香化、脱アシル化され得る。次いで、生成する混合物をポリリン酸で処理し、所望の環化臭化物（Ｃ−３ａ）を得る。

反応工程図ＩＶは、臭化物（Ｃ−６）とプロパルギルアルコールとの交差カップリングがＤ−１を生じ、これがＤ−２に還元され得ることを説明する。

反応工程図Ｖに示すように、Ｎ−オキシド（Ｃ−４）はアリルアルコールとのヘック（Ｈｅｃｋ）カップリングを受けてアルデヒドＥ−１を生じる；このものは還元的アミノ化条件下でアミン（Ｅ−２）を形成し得る。次いで、反応工程図ＩＩＩに記載するように、転位反応と環化工程を実施し、アミン（Ｅ−３）を得る。

反応工程図ＶＩに示すように、アルデヒド（Ｅ−１）は、エナミン触媒としてＤＬ−プロリンを用い、またフッ素源としてＮＦＳｉを用いるとα−フッ素化を受け得る。得られたα−フルオロアルデヒドは還元的アミノ化条件下にアリルアミンでトラップし、さらにＢｏｃ基で保護して化合物（Ｆ−１）を得る。次いで、反応工程図ＩＩＩに記載したように、転位反応と環化工程を進行させ、Ｆ−２で示される化合物を得る；このものをＤＭＢＡ及び触媒量のＰｄ（０）で処理して脱保護アミンＦ−３を得る。

反応工程図ＶＩＩに示すように、置換アントラニル酸（Ｇ−１）は尿素で環化し、キナゾリノン（Ｇ−２）を生じる。ＰＯＣｌ_３で処理することにより、Ｇ−２をクロル化してジクロロキナゾリン（Ｇ−３）とする。求電子体をエチルカルバゼートと反応させて、式（Ｇ−４）の化合物とする；このものはＤＭＦ中加熱して環化し、トリアゾロキナゾリノン（Ｇ−５）とする。トリアゾロ窒素上で選択的ＢＯＣ保護し、Ｎ−ＢＯＣ−トリアゾロキナゾリノン（Ｇ−６）とする；このものを炭酸セシウムの存在下、様々な臭化物でのアルキル化を可能とし、Ｎ−アルキル化化合物（Ｇ−７）を得る。ＴＦＡによるＢＯＣ基脱保護により、完全合成トリアゾロキナゾリノン（Ｇ−８）を得ることができる。

以下に示す実施例は、本発明のさらなる理解の一助となることを意図する。使用された特定の原料、種類及び条件は、本発明のさらなる説明のためのものであって、その妥当な範囲を制限しようとするものではない。以下の表に描出する化合物の合成に利用する試薬類は、市販品として入手し得るか、又は当業者が容易に調製し得るものである。

９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−４）
９−ブロモ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２）
７−ブロモ−１−クロロイソキノリン（１−１）（７９ｍｇ、０．３２７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びエチルカルバゼート（３４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．０当量）をＥｔＯＨ（１．５ｍＬ）に懸濁した。反応混合物をマイクロ波照射して４０分間１７０℃とした。粗製の混合物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在下）で精製し、９−ブロモ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２６３．９及び２６４．９、要求値２６４．１及び２６５．１。

９−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−４）
４，４，５，５−テトラメチル−２−（１−Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１，３，２−ジオキサボロラン（２９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、２．０当量）、９−ブロモ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（１−２）（２０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＬｉＣｌ（６ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ、２．０当量）及びテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（９ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ、０．１当量）を無水１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）に溶かし、次いで、１Ｍ−Ｎａ_２ＣＯ_３／水（０．２ｍＬ）溶液で処理した。得られた黄色混合物をＮ_２下に一夜１００℃に加熱した。粗製産物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在下）で精製して、純粋生成物（１−４）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．４６（ｓ，１Ｈ），８．１４（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），６．９５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２５２．１、要求値２５２．１。

表１に示す化合物は反応工程図１に従って合成した。これらの化合物はＴＦＡ塩として単離した。

６−（２−アミノエトキシ）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（２−４）
２−［（１−クロロイソキノリン−４−イル）オキシ］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２−３）
１−クロロ−４−ヒドロキシイソキノリン（５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（４５４ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、５．０当量）、及び（２−ブロモエチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２−２）（９４ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、１．５当量）を無水ＤＭＳＯ（２ｍＬ）に懸濁し、室温で攪拌した。ＬＣＭＳが反応の終結を示した時点で、粗製の反応混合物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在下）により精製して、生成物（２−３）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３２３．１，要求値３２３．１。

６−（２−アミノエトキシ）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（２−４）
２−［（１−クロロイソキノリン−４−イル）オキシ］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２−３）（１０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ、１．０当量）及びエチルカルバゼート（１６ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ、５．０当量）をＥｔＯＨ（１．５ｍＬ）に懸濁し、次いで、マイクロ波照射して１７０℃とした。ＬＣＭＳが反応の略完結を示した時点で、反応混合物をＤＭＳＯで希釈し、濾過して逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在下）により精製して、生成物を得た。純粋なフラクションにマイクロ波照射して５分間１５０℃とし、Ｂｏｃ保護基を除去して、生成物（２−４）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），８．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．７２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．２６（ｓ，１Ｈ），４．３９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），３．５４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２４５．１、要求値２４５．１。

表２に示す化合物は反応工程図２に従って合成した。これらの化合物はＴＦＡ塩として単離した。

６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１１）及び６−（３−アミノプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１３）
プロパ−２−イニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−２）
プロパルギルアミン（１．１６ｍＬ、１８．１６ｍｍｏｌ、１．０当量）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶かし、（Ｂｏｃ）_２Ｏ（３．８９ｇ、０．８８ｍｍｏｌ、０．９８当量）により、０℃で処理した。反応混合物は室温まで昇温し、一夜放置した。溶媒を蒸発させ、固形の残渣をヘキサンから再結晶して標題の生成物（３−２）を得た。

（Ｅ）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）エテニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−３）
ボラン−メチルスルフィド複合体（１２７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１．３当量）を、（−）−α−ピネン（４５６ｍｇ、３．３５ｍｍｏｌ、２．６当量）の無水ＴＨＦ（１ｍＬ）中の溶液に、Ｎ_２下、０℃で滴下した。この混合物を０℃で１時間、次いで室温で２時間攪拌した。次いで、混合物を０℃に冷却し、プロパ−２−イニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−２）（２００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、１．０当量）の無水ＴＨＦ（０．８ｍＬ）中の溶液を滴下した。この混合物を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷やし、アセトアルデヒド（６２ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ、１．１当量）を滴下した。室温で５時間攪拌した後、溶媒と過剰のアセトアルデヒドを減圧下に蒸発させた。次いで、この残渣にピナコール（２４４ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ、１．６当量）のヘプタン（３ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。この溶液を水洗（２×１０ｍＬ）し、有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥した後、溶媒を蒸発させ、粗製物（３−２）は精製することなく、３−９から３−１０への反応に使用した。

７−クロロイソキノリン（３−５ａ）
アミノアセトアルデヒド・ジメチルアセタール（１０．５４ｇ、１００．３ｍｍｏｌ、１．５４当量）を３−クロロベンズアルデヒド（９．１３ｇ、６５．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の無水トルエン（１２５ｍＬ）中の溶液に加えた。この混合物をディーン−スターク・トラップを用いて還流し、水を除去した。次いで、溶媒を蒸発させ、得られる粗製混合物を、１４０℃で攪拌するＨ_２ＳＯ_４（４０ｍＬ）にゆっくり加えた。添加の２０分後に、反応混合物を氷上に注いだ。混合物をＤＣＭで抽出し、水層を分離し、ｐＨ＝７に注意しながら中和し、次いで、Ｅｔ_２Ｏで抽出した。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過、濃縮した。粗製の残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝０→１００％）により精製し、７−イソキノリン（３−５ａ）と８−イソキノリン（３−５ｂ）の混合物（ａ／ｂ＝３／２）として生成物を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値１６４．１，要求値１６４．０。

４−ブロモ−７−クロロイソキノリン（３−６）
７−クロロイソキノリン（９ｇ、５５．０ｍｍｏｌ、１．０当量）［７−イソキノリン（３−５ａ）及び８−イソキノリン（３−５ｂ）の混合物（ａ／ｂ＝３／２）］をニトロベンゼン（１８０ｍＬ）に溶かし、１８０℃に加熱した。この暗橙色溶液（３．１１ｍｌ、６０．５ｍｍｏｌ、１．１当量）に臭素を滴下した。この反応混合物を１８０℃で１０時間攪拌した。ＬＣＭＳは略完全に変換したことを示した。反応混合物を室温に冷やし、２Ｍ−ＨＣｌ／Ｅｔ_２Ｏ（３０ｍＬ）を加え、次いで、Ｅｔ_２Ｏとヘキサンで希釈した。沈殿を集め、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に取り込み、飽和のＮａ_２ＣＯ_３で中和し、分離した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過、濃縮した。粗製の残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝０→３０％）により精製し、標題生成物（３−４）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２４２．２，要求値２４１．９。

４−ブロモ−７−クロロイソキノリン＝２−オキシド（３−７）
４−ブロモ−７−クロロイソキノリン（３−６）（１ｇ、４．１２ｍｍｏｌ、１．０当量）を無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（８．２ｍＬ）に溶かし、ｍＣＰＢＡ（１．６２２ｇ、９．４０ｍｍｏｌ、２．３当量）で処理した。反応混合物を室温で攪拌し、３−７を白色沈殿として形成させた。Ｅｔ_２Ｏで希釈した後、固形物を集め、さらに精製することなく次工程で使用した。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２６０．１，要求値２５９．９。

４−ブロモ−１，７−ジクロロイソキノリン（３−８）
４−ブロモ−７−クロロイソキノリン＝２−オキシド（３−７）（１．２ｇ、４．６４ｍｍｏｌ、１．０当量）を無水ＣＨＣｌ_３（２０ｍＬ）に溶かし、オキシ塩化リン（０．６４９ｍＬ、６．９６ｍｍｏｌ、１．５当量）で滴下処理した。反応混合物を６６℃で還流した。ＬＣＭＳは３時間後に単一の生成物を示した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３で洗い、有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過、濃縮した。残渣をヘキサン中で破砕し、濾取して生成物（３−８）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２７７．９，要求値２７７．９。

６−ブロモ−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−９）
３−９は、工程図１において化合物（１−２）を調製する手順と同様の手順で、出発原料として化合物（１−１）の代わりに、４−ブロモ−１，７−ジクロロイソキノリン（３−８）を用いて調製した。（３−９）のＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３００．９，要求値３００．９。

［（２Ｅ）−３−（９−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−１０）
６−ブロモ−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−９）（６０ｍｇ、０．２０１ｍｍｏｌ、１．０当量）及び［（２Ｅ）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−３）（２２８ｍｇ、０．８０４ｍｍｏｌ、４．０当量）を無水１，４−ジオキサン（０．６ｍｌ）及び２Ｍ−Ｋ_２ＣＯ_３水溶液（０．２ｍＬ）に溶かした。反応混合物を１００℃に加熱した。１８時間目のＬＣＭＳは完全な変換を示した。逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ含有）により精製し、標題生成物（３−１０）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３７５．１，要求値３７５．１。

６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１１）
［（２Ｅ）−３−（９−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−１０）を０．１％ＴＦＡ含有ＣＨ_３ＣＮ（１０ｍＬ）に溶かした。得られた溶液をマイクロ波照射して５分間１５０℃とした。ＬＣＭＳは単一の生成物を示した。粗製の混合物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ含有）により精製し、所望の生成物（３−１１）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），７．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．７８−７．６４（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．５Ｈｚ），６．３０（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝１６．５，７．０Ｈｚ），３．８３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２７５．１，要求値２７５．１。

［３−（９−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−１２）
ＥｔＯＨ（４ｍＬ）中、［（２Ｅ）−３−（９−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−１０）（１４ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ（２０％Ｐｄ、１．３ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ、０．０５当量）を加えた。反応混合物を水素大気圧下に室温で１．５時間攪拌した。次いで、触媒を濾去し、濾液を濃縮乾固した。得られる粗製産物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ含有）により精製し、標題生成物（３−１２）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３７７．１，要求値３７７．１。

６−（３−アミノプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１３）
［３−（９−クロロ−３−オキソ−２，３−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−１２）を０．１％ＴＦＡ含有ＣＨ_３ＣＮ（１０ｍＬ）に溶かした。得られる溶液をマイクロ波照射して５分間１５０℃とした。ＬＣＭＳは単一の生成物を示した。粗製物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ含有）により精製し、純粋な生成物（３−１３）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），７．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．７５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０，２．２Ｈｚ），７．５４（ｓ，１Ｈ），３．０９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．９４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．０６（ｐｅｎｔｅｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２７７．１，要求値２７７．１。

表３の以下の化合物は、工程図３について記載した手法の単純な修飾により調製した。これらの化合物はＴＦＡとして単離した。

６−（３−ヒドロキシプロピル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（４−２）
６−（３−ヒドロキシプロパ−１−イン−１−イル）［１，２，４］−トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（４−１）
６−ブロモ−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（３−１４）（４００ｍｇ、１．５１５ｍｍｏｌ、１．０当量）及びプロパルギルアルコール（０．３５４ｍＬ、６．０６ｍｍｏｌ、４．０当量）をピロリジン（５．８３ｍＬ）に溶かし、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（８８ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ、０．０５当量）で処理した。反応混合物を８０℃に４時間加熱した。減圧下に溶媒を蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝０→１００％）により精製し、純粋な生成物（４−１）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２４０．１，要求値２４０．１。

６−（３−ヒドロキシプロピル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（４−２）
６−（３−ヒドロキシプロパ−１−イン−１−イル）［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（４−１）（１００ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ、１．０当量）及び水酸化パラジウム（１１．７４ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ、０．０４当量）をＭｅＯＨ（６ｍｌ）に懸濁した。水素風船をフラスコに取り付けた。反応混合物を室温で攪拌した。ＬＣＭＳは４０分後に単一の生成物を示した。触媒を濾去し、ＭｅＯＨで洗った。濾液を濃縮した。粗製物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在）により精製し、生成物（４−２）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．２７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７３（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，１．４Ｈｚ），７．６２（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，１．４Ｈｚ），７．４７（ｓ，１Ｈ），３．６９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），２．９１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．０３−１．７６（ｍ，２Ｈ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２４４．２，要求値２４４．１。

６−［３−（メチルアミノ）プロピル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−６）
４−ブロモイソキノリン＝２−オキシド（５−２）
化合物（５−２）は、工程図３の化合物（３−７）を調製するための手法と同様の手法により、出発原料として化合物（３−６）の代わりに４−ブロモイソキノリン（５−１）を用いて調製した。（５−２）のＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２２４．９及び２２５．９，要求値２２５．０及び２２６．０。

３−（２−オキシドイソキノリン−４−イル）プロパナール（５−３）
４−ブロモイソキノリン＝２−オキシド（５−２）（５００ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ、１．０当量）、塩化リチウム（９５ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ、１．０当量）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（２０．０４ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ、０．０４当量）を無水ＤＭＦ（８．６ｍＬ）に溶かした。この橙色溶液に、トリエチルアミン（９３３μｌ、６．６９ｍｍｏｌ、３．０当量）及びアリルアルコール（３０８μｌ、４．４６ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。反応混合物を１００℃に１．５時間加熱した。黒色の沈殿が形成された。そして、ＬＣＭＳは出発原料が完全に消費されたことを示した。反応混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、次いで濃縮した。粗製物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ＝０→２０％）により精製し、化合物（５−３）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２０２．１，要求値２０２．２。

Ｎ−メチル−３−（２−オキシドイソキノリン−４−イル）プロパン−１−アミン（５−４）
３−（２−オキシドイソキノリン−４−イル）プロパナール（５−３）（１７０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ、１．０当量）を２．０Ｍメチルアミン／ＴＨＦ溶液（１．２ｍｌ、２．４０ｍｍｏｌ、２．８当量）で処理し、次いで、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム（８６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。反応混合物を室温で攪拌した。ＬＣＭＳが殆ど生成物であることを示した時点で、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗った。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過、濃縮した。粗製物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在）により精製し、生成物（５−４）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２１７．２，要求値２１７．１。

３−（１−クロロイソキノリン−４−イル）−Ｎ−メチルプロパン−１−アミン（５−５）
化合物（５−５）は、工程図３の化合物（３−８）を調製するための手法と同様の手法により、出発原料として化合物（３−７）の代わりにＮ−メチル−３−（２−オキシドイソキノリン−４−イル）プロパン−１−アミン（５−４）を用いて調製した。ＬＲＭＳ（５−５）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２３５．１，要求値２３５．１。

６−［３−（メチルアミノ）プロピル］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（５−６）
化合物（５−６）は、工程図３の化合物（３−９）を調製するための手法と同様の手法により、出発原料として化合物（３−８）の代わりに３−（１−クロロイソキノリン−４−イル）−Ｎ−メチルプロパン−１−アミン（５−５）を用いて調製した。化合物（５−６）について、^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７３（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，１．５Ｈｚ），７．６６（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，１．５Ｈｚ），７．５３（ｓ，１Ｈ），３．１３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．９５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．７２（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｐｅｎｔｅｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２５７．２，要求値２５７．１。

表４に示す化合物は反応工程図及び工程図５に従って合成した。これらの化合物はＴＦＡ塩として単離した。

６−（３−アミノ−２−フルオロプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（６−５）
３−（７−クロロ−２−オキシドイソキノリン−４−イル）プロパナール（６−１）
化合物（６−１）は、工程図５の化合物（５−３）を調製するための手法と同様の手法により、出発原料として化合物（５−２）の代わりに４−ブロモ−７−クロロイソキノリン＝２−オキシド（３−７）を用いて調製した。化合物（６−１）のＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２３６．０，要求値２３６．０。

アリル［３−（７−クロロ−２−オキシドイソキノリン−４−イル）−２−フルオロプロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６−２）
３−（７−クロロ−２−オキシドイソキノリン−４−イル）プロパナール（６−１）（３００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＮ−フルオロベンゼンスルホンイミド（４４２ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ、１．１当量）をＴＨＦ（１１．６ｍＬ）及びイソプロピルアルコール（１．１６ｍＬ）に溶かした。この混合物にＤＬ−プロリン（２９．３ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、０．２当量）を加えた。この反応混合物を室温で一夜攪拌した。ＬＣＭＳは生成物を示した。この反応混合物に、アリルアミン（１９１μｌ、２．５５ｍｍｏｌ、２．０当量）及び水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム（１．０８ｇ、５．０９ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌し、（Ｂｏｃ）_２Ｏ（８３３ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。得られた反応混合物を室温で一夜攪拌した。次いで、反応混合物にＨ_２Ｏを加えて反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過、濃縮した。粗製物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝０→１００％）により精製し、生成物（６−２）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３９５．１，要求値３９５．２。

Ｎ−［３−（１，７−ジクロロイソキノリン−４−イル）−２−フルオロプロピル］プロパ−２−エン−１−アミン（６−３）
化合物（６−３）は、工程図３の化合物（３−８）を調製するための手法と同様の手法により、出発原料として化合物（３−７）の代わりにアリル［３−（７−クロロ−２−オキシドイソキノリン−４−イル）−２−フルオロプロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６−２）を用いて調製した。化合物（６−３）のＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３１３．０，要求値３１３．１。

６−［３−（アリルアミノ）−２−フルオロプロピル］−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（６−４）
化合物（６−４）は、工程図３の化合物（３−９）を調製するための手法と同様の手法により、出発原料として化合物（３−８）の代わりにＮ−［３−（１，７−ジクロロイソキノリン−４−イル）−２−フルオロプロピル］プロパ−２−エン−１−アミン（６−３）を用いて調製した。化合物（６−４）のＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３３５．０，要求値３３５．１。

６−（３−アミノ−２−フルオロプロピル）−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（６−５）
６−［３−（アリルアミノ）−２−フルオロプロピル］−９−クロロ［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（６−４）（１８ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＤＭＢＡ（２５．２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、３．０当量）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３ｍｇ、２．６０μｍｏｌ、０．０５当量）をＣｌＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌ（１ｍＬ）に懸濁した。得られた黄色懸濁液を５０℃に加熱した。ＬＣＭＳは、５時間後に殆どが生成物であることを示した。粗製物を逆相ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在下）により精製し、純粋な生成物（６−５）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ８．２６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），７．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．７２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，２．３Ｈｚ），７．６１（ｓ，１Ｈ），５．１９−４．９４（ｄｍ，１Ｈ，Ｊ＝５０．０Ｈｚ），３．５２−３．３３（ｍ，〜４Ｈ，溶媒ピークと重なる）。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２９５．３，要求値２９５．１。

６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−８）及び６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１０）
４−ベンジル−３−ブロモ−５−ホルミルピリジン−１（４Ｈ）−カルボン酸フェニル（７−２）
無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の、５−ブロモニコチンアルデヒド（７−１）（９３０ｍｇ、５ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を０℃に冷やし、クロロギ酸フェニル（７８３ｍｇ、５ｍｍｏｌ、１当量）で処理した。次いで、反応混合物をこの温度で１時間攪拌し、臭化ベンジル亜鉛（０．５Ｍ／ＴＨＦ、１０ｍｌ、５ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。得られる溶液を０℃でさらに３０分間攪拌し、次いで、室温まで加温し、飽和塩化アンモニウム水溶液に注入した。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機抽出液を乾燥し、濃縮して、標題のジヒドロピリジン（７−２）を得た；このものはさらに精製することなく次工程で使用した。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値３９８．０，４００．０，計算値（Ｍ＋Ｈ）３９８．０，４００．０。

４−ブロモベンゾ［ｇ］イソキノリン（７−３）
デカリン（２０ｍｌ）中、前工程で得た４−ベンジル−３−ブロモ−５−ホルミルピリジン−１（４Ｈ）−カルボン酸フェニル（７−２）及びイオウ（３２１ｍｇ、１０ｍｍｏｌ、２当量）の懸濁液を１５時間還流し、次いで、ポリリン酸（３０ｍｌ）に加えて、１４０℃で攪拌した。反応混合物をこの温度で３０分間攪拌し、次いで、氷／水混合物に注いだ。水層を酢酸エチルで洗い、ｐＨ〜９の塩基性とし、次いで、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた抽出液を乾燥し、濃縮して粗製物（７−３）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値２５８．０，２６０．０，計算値（Ｍ＋Ｈ）２５８．０，２６０．０．１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．６１−７．７１（ｍ，２Ｈ），８．１３−８．１７（ｍ，２Ｈ），８．６（ｓ，１Ｈ），８．６６（ｓ，１Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），９．３７（ｓ，１Ｈ）。

４−ブロモベンゾ［ｇ］イソキノリン＝２−オキシド（７−４）
ジクロロメタン（２５ｍｌ）中、４−ブロモベンゾ［ｇ］イソキノリン（７−３）（３９０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ、１．当量）の溶液をｍＣＰＢＡ（〜７０％、５５９ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ、１．５当量）で処理し、反応混合物を、ＬＣＭＳが完全な変換を示すまで、室温で攪拌した。反応混合物をエーテルで希釈し、沈殿を濾取し、エーテルで洗って乾燥し、標題のＮ−オキシド（７−４）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値２７４．０，２７６．０，計算値（Ｍ＋Ｈ）２７４．０，２７６．０。

４−ブロモ−１−クロロベンゾ［ｇ］イソキノリン（７−５）
４−ブロモベンゾ［ｇ］イソキノリン＝２−オキシド（７−４）（３８０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、１当量）をＰＯＣｌ_３及びクロロホルム（２０ｍｌ）の１／４ｖ／ｖ混合物に取り込み、得られる溶液を５５℃で２時間攪拌した。次いで、反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム水に注意しながら注ぎ、酢酸エチルで抽出し、乾燥、濃縮して、粗製の所望の塩化物（７−５）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値２９４．０，２９２．０，計算値（Ｍ＋Ｈ）２９４．０，２９２．０。

６−ブロモベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−６）
エタノール（２ｍｌ）中、４−ブロモ−１−クロロベンゾ［ｇ］イソキノリン（７−５）（５０ｍｇ、０．１７１ｍｍｏｌ、１当量）及びエチルカルバゼート（５３ｍｇ、０．５１３ｍｍｏｌ、３当量）の懸濁液を封管中、マイクロ波照射下、１７０℃に６０分間加熱した。得られる混合物をＲＰ−ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／水；ＴＦＡ含有）で精製し、所望の縮合生成物（７−６）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値３１４．０，３１６．０，計算値（Ｍ＋Ｈ）３１４．０，３１６．０．１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．６７−７．７１（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），８．０７−８．１０（ｍ，２Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．８２（ｓ，１Ｈ）。

［（２Ｅ）−３−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７−７）
ＴＨＦ（０．５ｍｌ）中、（２Ｅ）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３−３）（３２．５ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ、４当量）及び６−ブロモベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−６）（９．０ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、炭酸セシウム（１８．７ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ、２当量）の水（０．２ｍｌ）中の溶液を加え、得られる混合物を窒素で脱酸素し、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）（１．０ｍｇ、０．００１４ｍｍｏｌ、０．０５当量）で処理した。反応混合物を再度脱酸素し、封管中、マイクロ波照射下、１５０℃に８分間加熱した。得られる懸濁液をセライトのパッドで濾過し、ＤＭＦで洗い、濾液をＲＰ−ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／水；ＴＦＡ含有）で精製して、所望のカップリング生成物（７−７）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値３９１．２，計算値（Ｍ＋Ｈ）３９１．２。

６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−８）
ジクロロメタンとＴＦＡの１／４混合物（１．０ｍｌ）中の［（２Ｅ）−３−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７−７）（３．０ｍｇ、０．００７７ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１５分間攪拌し、濃縮乾固し、脱保護物質（７−８）をＴＦＡ塩として得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値２９１．１，計算値（Ｍ＋Ｈ）２９１．１。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：３．８８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），６．３５（ｄｔ，Ｊ＝６．６，１５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ），７．６５−７．６８（ｍ，２Ｈ），８．０５−８．１１（ｍ，２Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．８４（ｓ，１Ｈ）。

［３−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７−９）
ＭｅＯＨ（１２０ｍｌ）中の６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−８）（８９０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を水酸化パラジウム（ＩＩ）／炭素（２０％、７７ｍｇ、０．１当量）で処理し、水素大気圧下に室温で攪拌した。反応はＬＣＭＳでモニターし、出発原料がすべて消費された後に濾過した。濾液を濃縮し、得られる残渣をＲＰ−ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／水；ＴＦＡ含有）で精製し、標題生成物（７−９）を得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値３９３．２，計算値（Ｍ＋Ｈ）３９３．２。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：１．９６−２．０３（ｍ，２Ｈ），２．９６（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），３．２５−３．２９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｓ，１Ｈ），７．６２−７．６６（ｍ，２Ｈ），８．０５−８．０９（ｍ，２Ｈ），８．３１，（ｓ，１Ｈ），８．８２（ｓ，１Ｈ）。

６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン（７−１０）
１，４−ジオキサン（２０ｍｌ）とメタノール（１０ｍｌ）中の［３−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７−９）（１６２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を濃ＨＣｌ水（２．０ｍｌ）で処理し、反応混合物を室温で２時間攪拌し、濃縮した。得られる残渣を水に溶かし、酢酸エチルで洗い、水層を濃縮して所望の脱保護物（７−１０）をＨＣｌ塩として得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ：実測値２９３．１，計算値（Ｍ＋Ｈ）２９３．１。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ）δ：１．６２−１．７１（ｍ，２Ｈ），２．１３−２．２０（ｍ，２Ｈ），２．９０−２．９７（ｍ，２Ｈ），６．０２（ｓ，１Ｈ），７．１１−７．３３（ｍ，６Ｈ）。

グリニヤール試薬のＴＨＦ溶液（１１．９５ｋｇ、１１６．２ｍｏｌ、２容量）に、１０度で、３，５−ジブロモピリジン（１）のＴＨＦ溶液（２５ｋｇ、１０５．６ｍｏｌ、３．５容量）を温度維持しながら加えた。１０分間の熟成後、出発原料の消費量を確認するために、サンプルを重水素化メタノールで処理した（３，５−ジブロモピリジン、８．３０δ（ｓ，１Ｈ）及び８．６５δ（２Ｈ））。追加のグリニヤール試薬は必要により添加し得る。温度を２０度以下に維持しながらＤＭＦ（３２．５５Ｌ、５２８ｍｏｌ、５当量）を加え、３０分間熟成させ、最後に酢酸水（１４．４Ｌ、２５１．２ｍｏｌ、３ｍｏｌ当量）を加えて反応停止させる。ヘプタン（１５０Ｌ、４容量）を加え、有機相を分離し、希塩化リチウム水で洗い、残留するＤＭＦを除く。微量の酸が次工程に影響を与える可能性があるため、最終的に希重炭酸ナトリウム水で洗浄し、ｐＨがわずかに塩基性となることを確実にした。最後の溶媒をヘプタンに置き換えると、結晶化が始まった（密度の高いアルデヒド生成物が同時的に核生成する前に、種を加えることを推奨する）。生成物を窒素気流下で乾燥し、２を得た。

５０Ｌシリンダー容器に、ＴＨＦ（１３．５Ｌ）及びアルデヒド（２）（１．３５ｋｇ、１当量）を容れ、アルデヒドがすべて溶解するまで攪拌した。攪拌しながら、クロロギ酸フェニル（９６０ｍＬ、１．０５当量）を室温で加え、２時間熟成した。スラリーを−２０℃に冷やし、臭化ベンジル亜鉛を１時間で滴下し（１４．５Ｌ、１．０当量）、次いで、室温で２時間熟成した。反応を停止するために、反応溶液を飽和塩化アンモニウム溶液（１３．５Ｌ、１０容量）と共に５０Ｌの抽出器に移した。生成物をＭＴＢＥ（１３．５Ｌ、１０容量）で抽出した。層分離し、有機層を２５％食塩水溶液（１３．５Ｌ、１０容量）で洗った。得られる有機層（〜４０Ｌ）を硫酸ナトリウム上で一夜乾燥した。有機層を傾斜して、窒素ライン、熱電対、及びバッチ濃縮装置を備えた５０Ｌの四頚丸底フラスコに移した。この溶液を１０〜１５℃、２７〜２８ｉｎＨｇで蒸留した。溶液の容量が１０〜１２Ｌに達したときに、この溶液に２×ＭＴＢＥ（６．７５Ｌ、５容量）流し込み、各添加後に、１０Ｌまで濃縮した。二度目の流入後、反応液をさらに〜５反応容量（〜７Ｌ）まで蒸留した。ヘキサン（１３．５Ｌ、１０容量）を分割して加え、さらに結晶化させた。固形物を濾過により単離し、移動を完全とするために母液を使用した。ケークをヘキサン／ＭＴＢＥ（２：１）（２ｘ３．５Ｌ）で洗い、フィルター上、窒素テント下に１日乾燥した。生成物（３）は黄色結晶性固体として得た。

反応は、窒素導入口、攪拌棒、熱電対、及び加熱コイルを備えた５０Ｌのシリンダー容器にて実施した。ｔＢｕＯＨ（１０容量）と水（ＳＭ総質量に相対的に１０当量）の溶液を１日前に調製した。カルバミン酸エステル（３）（１．７４７ｋｇ／１．６６ｋｇ；アッセイによる）を室温で容器に加えた。ｔＢｕＯＫ（７４０ｇ、１．６当量）を分割添加した（温度が３４℃に上昇した）。淡黄色スラリーが得られた。この溶液を５５℃に加熱し、２時間攪拌した（アッセイは７２％の変換を示した）。さらに０．１５当量（７０ｇ）のｔＢｕＯＫを加え、この溶液をさらに２時間４５分熟成させた；アッセイは９８％の変換を示した。反応液を３０℃に冷却し、水（反応に際し形成される固体沈殿（恐らくＰｈＯＫ）を可溶化するため）及びトルエン（１７．５Ｌ、５容量）で希釈した。この溶液をさらに５℃に冷やし、１．０Ｎ−ＨＣｌ（７．３Ｌ、１．７５当量）をゆっくり加えて反応停止させた；温度は９℃以下に維持した。この溶液を５分間攪拌し、層分離した。水（１０容量）とトルエン（５容量）を加えた（追加のトルエンは二度目の分離を有意に容易にする）。層分離し、有機層はさらに水洗した（３×１７．５Ｌ）（アッセイは４度目の水洗後に残るｔＢｕＯＨを認めなかった；注：生成物がトルエン溶液からわずかに崩壊し始め、ラグ層が観察される）。有機層を２０％ＮａＣｌで洗った（Ｋｆ＝１２８０ｐｐｍ）。後処理後のジヒドロピリジンはトルエン中で安定ではなく、次工程で直ぐに使用すべきである。

トルエン中ジヒドロピリジンの溶液（前工程から）を２℃に冷やし、７０３ｇのＤＤＱを分割添加した。黄色溶液が直ちに暗赤色に変わり、次いでピンクのスラリー（ＤＤＱＨの形成による）に変った。ゆるやかな発熱がＤＤＱの添加ごとに観察され、温度は５℃以下に維持した。反応が完結しなかったので（ＨＰＬＣアッセイにより判定）、追加の０．１当量（７０ｇ）のＤＤＱを加え、次いでさらに０．４当量（２８ｇ）のＤＤＱを加えた。このスラリーをソルカフロック（ｓｏｌｋａ ｆｌｏｃ）のベッドに注ぎ、濾過し、固体が殆ど無色となるまでトルエンで洗った。この溶液をアッセイすると、ピリジン９２２ｇであることを示した。この溶液を一夜室温に維持した。翌日、トルエン中のピリジンを１．０Ｎ−ＮａＯＨ（８．６Ｌ）で２回洗った。有機層を水で１回、２０％ＮａＣｌで１回、次いで、トルエン３容量まで濃縮した。この溶液を一夜室温で保存した。

トルエン中ピリジンの溶液に、室温で酢酸を添加し、次いで硫酸を添加した（Ｈ_２ＳＯ_４の添加に際し、ゆるやかな発熱が観察され、温度が３５℃まで上昇した）。緑色を帯びた褐色溶液を５０℃に加熱し（〜２０分間５９℃まで過熱）、ｔ＝１時間目に種結晶として１１．５ｇの生成物を加えた。澄明な溶液が直ちにスラリーとなり、このスラリーをさらに２時間攪拌した。この溶液を１０℃に冷やし（注意：４℃に冷却した溶液は固化し、濾過し得ず）、濾過した。濾液を１．１Ｌの酢酸で洗い、次いで、３×２Ｌの酢酸エチルで洗った。黄色の結晶性固体を窒素下に一夜乾燥し、ベンゾイソキノリン（４）を得た。

２２Ｌの抽出器に、８００ｍＬの１０Ｎ−ＮａＯＨ、３．２ＬのＧＭＰ水、１０Ｌのジクロロメタン、及び化合物（４）を容れた。４が溶解した後、底部の有機溶液を反応用に収集した。別の５０Ｌフラスコに、８３９ｇのｍ−ＣＰＢＡ及び１０Ｌのジクロロメタンを容れた。ｍ−ＣＰＢＡが溶解した後（温度が１２℃に低下）、１の遊離塩基溶液を１２〜２６℃で１時間かけて添加した（温度調節のために、冷水浴が必要であった）。添加に際し、濃厚なスラリーが形成され、これを室温で１７時間かき混ぜた。ＨＰＬＣが１を示さなくなった後に、スラリーを濾過し（ゆっくりと２時間かけた）、ケークを２Ｌのジクロロメタンですすいだ。黄色の固形生成物を減圧下に室温で乾燥し、１．１１４ｋｇの生成物（５）を得た。

化合物（５）（１０９０ｇ、〜２．５３ｍｏｌ）を５０Ｌのフラスコ中で１８Ｌのアセトニトリルに室温で溶かした。ＰＯＣｌ_３（２５６ｍＬ、２．７９ｍｏｌ）を＜２５℃（水浴を使用した）で３．２５時間かけて加え、得られるスラリーをさらに３時間室温で熟成させた。１８Ｌの０．５Ｍ−Ｋ_２ＨＰＯ_４を１．５時間で加え、反応停止させた。３０分間の熟成の後、スラリーを濾過し、ケークを１８Ｌの飽和Ｎａ_２ＣＯ_３、次いで１８ＬのＧＭＰ水で洗った。黄色の固形生成物を窒素気流下に室温で週末にかけて乾燥し、６７８ｇの生成物（６）を得た。

５０Ｌのフラスコに、化合物（６）（６４４ｇ、〜２．２ｍｏｌ）、ヘプタノール（１９．３Ｌ）、エチルカルバゼート（２５２ｇ、２．４２ｍｏｌ）及びｐ−ＴｓＯＨ−Ｈ_２Ｏ（１０５ｇ、０．５５ｍｏｌ）を容れた。この混合物を１２４℃に２．５時間加熱し、１２０〜１２６℃で１７時間熟成した。得られるスラリーを４時間で３６℃に冷やし、濾過した。ケークはエタノール（２×１．５Ｌ）で洗浄し、次いで、窒素下に室温で乾燥した。生成物（７）を褐色結晶性固体として得た。

５０ＬのＲ．Ｂ．フラスコ中、９−ＢＢＮ／ＴＨＦ２８Ｌを＜１５℃に冷却し、アリルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル２．０ｋｇを添加した。次いで、この溶液を室温に戻し、２時間熟成させた。２時間後に、この溶液を＜１５℃に冷却し、２ＬのＨ_２Ｏを澄明な９−ＢＢＮ溶液に加え、１５分間拡散させて溶液を不活性とし、生じるＨ_２ガスを除いた。次いで、２．０ｋｇのトリアゾール（７）を澄明な９−ＢＢＮ付加体溶液に加え、Ｎ_２を１５分間拡散して再度脱ガスした。該トリアゾールとＨ_２Ｏを９−ＢＢＮ溶液に加える１時間前に、触媒溶液を作製した。４．３ｋｇのＣｓＣＯ_３及び１０ＬのＭｅＣＮを５０ＬのＲ．Ｂ．フラスコに容れ、Ｎ_２を１５分間拡散した。Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（４２ｇ）及びＸ−ホス（Ｘ−Ｐｈｏｓ）（１８１ｇ）を迅速にこのスラリーに加え、生成するスラリーを室温で１時間連続拡散しながら熟成させた。脱気した９−ＢＢＮ付加物とトリアゾールのスラリーを次いで不活性のままの触媒溶液に真空供給した。得られるスラリーを５５℃に加熱し、反応温度が４５℃となるまで拡散を続けた。変換はＨＰＬＣによりモニターした。室温に冷却した後、この溶液をソルカフロック（ｓｏｌｋａ ｆｌｏｋ）によりインライン濾過し、６０ＬのＴＨＦですすぎ、１８０Ｌの抽出器に移した。この溶液を６０Ｌの飽和食塩水及び６０Ｌの１Ｎ−ＨＣｌ／飽和食塩水（１：１）で洗う。得られるＴＨＦスラリーを１００Ｌの抽出器中で４５℃まで加熱し、次いで＜１５℃に冷やした。室温で３０分間熟成した後、スラリーを１００Ｌの抽出器から直接濾過した。次いで、カップリング生成物（８）を７２ＬのＲ．Ｂ．フラスコ中で、６５ＬのＮＭＰに、４０℃に加熱することにより溶解させる。得られる赤色溶液をインラインフィルターにより濾過し、室温に冷やし、次いで３５ＬのＨ_２Ｏで再結晶する。次いで、スラリーを濾過し、ケークを１７．５ＬのＭｅＣＮで洗う。黄白色固体を窒素下に乾燥する。生成物１．８７９ｋｇを綿毛状結晶性固体（＞９９％ＬＣＡＰ及び＜１％脱Ｂｒ）として得た。

Ｎ_２導入口を備えた５０Ｌシリンダー容器に、３２ＬのＥｔＯＨを加えた。中間体（８）（１８１９．３ｇ、４．６ｍｏｌ）を加え、次いで、濃塩酸（３．０Ｌ、１２．１Ｎ）を加えた。得られるスラリーを６６〜７２℃に３時間加熱した。得られるスラリーを１５〜２０℃に冷やし、固形物を濾過により直接単離した。ケークをＥｔＯＨ（２×４Ｌ）で洗い、窒素気流下に一夜乾燥した。粗製の生成物（７−１０）をベージュ色の固体として得た。５０Ｌの丸底フラスコに、粗製物（７−１０）（１４２３．０ｇ、４．４ｍｏｌ）及び発熱物質低減水（２９Ｌ、２０容量）を加えた。激しく攪拌しながら、エコソルブＣ−９４３を加え、混合物を３時間熟成した。スラリーをソルカフロックにより濾過し、水７Ｌ（５容量）をすすぎに用いる。ソルカフロック床を濾液が無色透明となるまで発熱物質低減水で洗った。濾液を５ｕｍインラインフィルターを経由して７２Ｌ丸底フラスコに移した。得られる溶液に、５Ｎ−ＨＣｌを加え（１．８Ｌ、２．０当量）、溶液に種結晶を加えた。この溶液に固体（７−１０）ＨＣｌ塩１０ｇを種結晶として加えた；熟成の後、さらなる沈殿は殆ど見られなかった。この混合物の一部（８００ｍＬ）を採り、さらに５Ｎ−ＨＣｌを加えて濃厚なスラリーを得、これをバッチに戻した。混合物を一夜熟成させ、種床を成長させた。残りのＨＣｌ（５．２Ｌ）を滴下した。固形物はＭＬを用いて濾過により単離し、移行を終了した。ケークをＥｔＯＨ（４Ｌ）で洗い、窒素下に乾燥した。ケークを砕き、メッシュ篩を通して塊をなくした。生成物（７−１０）は灰色がかった白色固体として得た。

以下の表５の化合物は工程図７に示した手法に従い、ＴＦＡ塩として調製した。

６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−８）
ベンゾ［ｇ］キナゾリン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（８−２）
３−アミノ−２−ナフトエ酸（８−１）（１．２ｇ、６．６ｍｍｏｌ、１当量）、尿素（２．０ｇ、３３ｍｍｏｌ、５．０当量）及びフェノール（７．０ｇ、７４ｍｍｏｌ、１１当量）からなる混合物を１６０℃に０．５時間、１８５℃でさらに１．５時間加熱した。反応物を冷却し、メタノール（５０ｍＬ）中で破砕した。固形の沈殿を濾取し、メタノールで洗い、乾燥して、ベンゾ［ｇ］キナゾリン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１−２）をオレンジ色固体として得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２１３．１，要求値２１３．１。

２，４−ジクロロベンゾ［ｇ］キナゾリン（８−３）
オキシ塩化リン（１０ｍＬ）中、ベンゾ［ｇ］キナゾリン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１−２）（１．０ｇ、４．９ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を１２０℃に１２時間加熱した。反応物を冷却し、氷水中に注いだ。沈殿を濾取し、シリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン）により精製して、２，４−ジクロロベンゾ［ｇ］キナゾリン（８−３）を黄色固体として得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２４９．０，要求値２４９．０。

エチル＝２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロベンゾ［ｇ］キナゾリン−４−イル）（８−４）
ＤＭＳＯ（７ｍＬ）中、２，４−ジクロロベンゾ［ｇ］キナゾリン（８−３）（１１０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ、１当量）及びエチルカルバゼート（６９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ、１．５当量）を７０℃に２時間加熱した。反応物を冷却し、氷水中に注いだ。沈殿を濾取し、ｎ−ブタノール（２０ｍＬ）に懸濁し、９０℃に４時間加熱した。得られる沈殿を集め、乾燥してエチル＝２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロベンゾ［ｇ］キナゾリン−４−イル）（８−４）をオレンジ色固体として得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２９９．１，要求値２９９．１。

２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−５）
ＤＭＦ（５ｍＬ）中、エチル＝２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロベンゾ［ｇ］キナゾリン−４−イル）（８−４）（４２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を１５３℃に４時間加熱した。反応物を冷却し、氷水中に注いだ。固形の沈殿を濾取し、乾燥して２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−５）を灰色がかった白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６））δ１２．３０（ｓ，１Ｈ），１１．３６（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５２（ｓ，１Ｈ），７．４６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値２５３．０，要求値２５３．１。

３，５−ジオキソ−５，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−２（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８−６）
ＤＭＦ（３ｍＬ）中、２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−５）（２０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、１当量）及びＢｏｃ_２Ｏ（２０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、１当量）からなる混合物に、２３℃でＤＭＡＰ（１ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えた。３時間後、反応物を濃縮し、残渣をエーテルで洗い、３，５−ジオキソ−５，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−２（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８−６）を白色固体として得た。ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３５３．１，要求値３５３．１。

６−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−３，５−ジオキソ−５，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−２（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８−７）
ＤＭＦ（３ｍＬ）中、３，５−ジオキソ−５，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−２（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８−６）（２８ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ、１当量）、炭酸セシウム（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、３．８当量）、及びＮ−（３−ブロモプロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、２．６当量）からなる混合物を２３℃で１６時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、逆相液体クロマトグラフィー（Ｈ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ勾配／０．１％ＴＦＡ存在下）により精製し、６−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−３，５−ジオキソ−５，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−２（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８−７）を得た。

６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−８）
水及びアセトニトリルの１：１混合物中、６−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−３，５−ジオキソ−５，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−２（３Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８−７）（５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を加え、得られる溶液を４５℃で２時間攪拌した。溶媒を減圧下に蒸発させ、６−（３−アミノプロピル）−２，６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］キナゾリン−３，５−ジオン（８−８）のＴＦＡ塩を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＴＦＡ塩）δ１２．３７（ｓ，１Ｈ），８．６２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），８．００（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９３（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．６３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５２（ｔ，１Ｈ，７．５Ｈｚ），４．２６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．０２（ｍ，２Ｈ），２．０５（ｍ，２Ｈ）．ＬＲＭＳｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）実測値３１０．１，要求値３１０．１。

表６の以下の化合物は工程図８と同様の手法に従って、ＴＦＡ塩として調製した。

実施例１−８
さらに本発明の異なる特徴と利点を説明するために、以下に実施例を提供する。これらの実施例は本発明を実施するための有用な方法論をも説明する。これらの実施例は特許請求されている本発明を制限するものではない。

実施例１：リアルタイムＰＣＲによるＣＨＫ１ｓｖ１の同定
化合物の阻害作用の測定を容易にするためには、ＣＨＫ１をエンコードするエキソン領域の「正常」スプライシングの変異体を同定することが望ましい。特に、ＣＨＫ１のＣ−末端調節ドメインの喪失によって生じる天然に存在するスプライシングの変異を探索した。該Ｃ−末端の欠失はＣＨＫ１に非常に大きなキナーゼ活性を付与する（Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｃｅｌｌ １００：６８１−６９２；Ｋａｔｓｕｒａｇｉ ａｎｄ Ｓａｇａｔａ，２００４，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．１５：１６８０−１６８９）。エキソン２〜８は触媒キナーゼドメインをエンコードし、エキソン９はリンカー領域をエンコードする。ＳＱ及びＣ−末端調節ドメインは、エキソン１０〜１３内に存在する（Ｓａｎｃｈｅｚ ｅｔ ａｌ．，１９９７，２７７：１４９７−１５０１；Ｋａｔｓｕｒａｇｉ ａｎｄ Ｓａｇａｔａ，２００４，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．１５：１６８０−１６８９）。リアルタイムＰＣＲ実験及びＲＴ−ＰＣＲを用いて、ヒトＣＨＫ１ｍＲＮＡの新規スプライス変異体の存在を同定し、確認した。ＣＨＫ１阻害ドメインのＣ−末端切断型をエンコードする天然に存在するスプライス変異体は、化合物の阻害作用の測定に有用なＣＨＫ１キナーゼアッセイに使用するために同定し、クローニングし、発現させ、精製した。

ＲＴ−ＰＣＲ
エキソン８ないし１１に相当する領域のＣＨＫ１ｍＲＮＡの構造は、ヒト精巣から抽出したＲＮＡについて、ＲＴ−ＰＣＲに基づくアッセイにより決定した。ヒト精巣から単離した全ＲＮＡは、ＢＤバイオサイエンス・クロンテック（パロアルト、カリフォルニア）から入手した。ＲＴ−ＰＣＲプライマーはＣＨＫ１の対照エキソンコード配列のエキソン８及びエキソン１１の配列に相補性であるものを選択した（ＮＭ＿００１２７４）。ＣＨＫ１ｍＲＮＡのヌクレオチド配列に基づいて、ＣＨＫ１エキソン８及びエキソン１１プライマーセット（以下、ＣＨＫ１_８−１１プライマーセット）は、「対照」ＣＨＫ１ｍＲＮＡ領域を提示する４７８塩基対アンプリコンを増幅すると期待された。ＣＨＫ１_８−１１プライマーセットは、エキソン９からエキソン１１への選択的スプライシングを保有する転写物の３００塩基対アンプリコンを増幅すると期待された。ＣＨＫ１エキソン８フォワードプライマーは以下の配列を有する：５’ＡＴＣＡＧＣＡＡＧＡＡＴＴＡＣＣＡＴＴＣＣＡＧＡＣＡＴＣ３’（配列番号１）；また、ＣＨＫ１エキソン１１リバースプライマーは以下の配列を有する：５’ＣＡＴＡＣＡＡＣＴＴＴＴＣＴＴＣＣＡＴＴＧＡＴＡＧＣＣＣ３’（配列番号２）。

ヒト精巣からの全ＲＮＡは、キアゲン社（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ．；バレンシア、カリフォルニア）のワンステップＲＴ−ＰＣＲキットにより、以下のサイクル条件を用いて、ワンステップ逆転写ＰＣＲ増幅プロトコールに付した：
１）５０℃、３０分間；
２）９５℃、１５分間；
３）以下を３５サイクル：
９４℃、３０秒間；
６３．５℃、４０秒間；
７２℃、５０秒間；次いで
７２℃、１０分間。

ＲＴ−ＰＣＲ増幅産物（アンプリコン）は２％アガロースゲル上サイズ分画した。選択したフラグメントは２５０ないし３５０塩基対のアンプリコンに相当し、これを手作業でゲルから抽出し、キアゲン（Ｑｉａｇｅｎ）ゲル抽出キットにより精製した。精製したアンプリコンフラグメントはＣＨＫ１_８−１１プライマーセットにより再増幅し、これらのアンプリコンをアガロースゲル上でサイズ分画した。２５０ないし３５０塩基対アンプリコンに相当するフラグメントを手作業でゲルから抽出し、キアゲン（Ｑｉａｇｅｎ）ゲル抽出キットにより精製した。精製したアンプリコンフラグメントをＣＨＫ１_８−１１プライマーセットにより再度再増幅した。アガロースゲル上のサイズフラクションと２５０ないし３５０塩基対アンプリコンの手作業抽出の後、精製したアンプリコンフラグメント（キアゲン・ゲル抽出キット）は、インビトロゲンｐＣＲ２．１ベクターに、ＴＯＰＯ ＴＡクローニングキット（インビトロゲン；カールスバッド、カリフォルニア）に添付されている試薬類及び説明書を用いてクローニングした。クローンは１５枚のプレート上に、１プレートあたり４４０コロニーのプールとして塗布し、全量６６００クローンとした。ＤＮＡは各プレートからプールした４４０コロニーから抽出し、リアルタイムＰＣＲの鋳型として使用した。

リアルタイムＰＣＲ／ＴＡＱマン
ＣＨＫ１対照タンパク質（ＮＰ＿００１２６５）の選択的スプライスのイソ型の存在を決定するために、リアルタイムＰＣＲアッセイを用いた。
ＣＨＫ１ｓｖ１のイソ型を検出するために使用したＴＡＱマンプライマーとプローブは、プリ−セット混合物として設計し、合成した（アプライド・バイオシステムズ；フォスターシティ、カリフォルニア）。ＣＨＫ１対照型（配列番号：３、４及び５）及びＣＨＫ１ｓｖｌイソ型（配列番号：６、７及び８）を検出するために使用したＴＡＱマンプライマーとプローブの配列を表１に示す。スプライスジャンクション特異的プローブは、５’−末端を６−ＦＡＭ発蛍光団で標識し（ＦＡＭ）、３’−末端を非蛍光消光剤で標識した（ＮＦＱ）。リアルタイムＰＣＲはタックマン（ＴａｑＭａｎ）ユニバーサルＰＣＲマスターミックス（アプライド・バイオシステムズ；フォスターシティ、カリフォルニア）を用いて、ヒト精巣ｃＤＮＡについて実施した。ＴＡＱマン反応は以下を含んでいた：

ＴＡＱマン反応は、ＡＢＩプリズム７９００ＨＴ配列検出システム（アプライド・バイオシステムズ；フォスターシティ、カリフォルニア）上で実施した。サーモサイクル条件は、５０℃、２分間；９５℃、１０分間；及び９５℃１５秒と６０℃１分を４０サイクルとした。蛍光発光のデータ解析は、配列検出ソフトウエア（ＳＤＳ）（アプライド・バイオシステムズ；フォスターシティ、カリフォルニア）により実施した。

ＴＡＱマンアッセイの結果は、１５枚のプレートの内、１３枚からプールしたＤＮＡがエキソン９からエキソン１１への選択的スプライスジャンクションに相当するクローンを有すると思われる結果を示した。４４０コロニーに相当するこれらの陽性プールの１つからのＤＮＡは、細菌宿主細胞を形質転換するために使用した。クローンは合計１２枚のプレート上に、プレート１枚あたり５５コロニーとして塗布した。１２枚のプレートそれぞれのコロニーを再びプールし、ＴＡＱマンアッセイに使用した。１２枚のプレートの内、１枚からプールしたＤＮＡがエキソン９からエキソン１１への選択的スプライスジャンクションに相当するクローンを有すると思われた。この陽性プレート上の５５コロニーをＴＡＱマンアッセイにより個々にスクリーニングし、その１クローンが、エキソン９からエキソン１１への選択的スプライスジャンクションを有すると確認した。この陽性クローンにつき、各末端から、ＣＨＫ１エキソン８フォワードプライマー（配列番号１）及び異なるエキソン１１リバースプライマー（配列５’ＴＧＣＡＴＣＣＡＡＴＴＴＧＧＴＡＡＡＧＡＡＴＣＧ３’（配列番号９）を有する）を用いて配列決定した。

このクローンの配列分析は、それがＣＨＫ１異質核ＲＮＡのエキソン９からエキソン１１への選択的スプライシングについて予測される配列にマッチすることを明らかにした；すなわち、エキソン１０のコーディング配列は全く存在しない。

実施例２：ＣＨＫ１ｓｖ１のクローニング
リアルタイムＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ、及び配列決定データは、ＣＨＫ１タンパク質（ＮＰ＿００１２６５）をエンコードする正常のＣＨＫ１対照ｍＲＮＡ配列（ＮＭ＿００１２７４）に加えて、ＣＨＫ１ｍＲＮＡの新規スプライス変異体形状が、精巣組織とＭＯＬＴ−４、及びダウディ（Ｄａｕｄｉ）細胞株にも存在することを示している。

実施例１にて同定されたＣＨＫ１ｓｖ１スプライス変異体を含むヌクレオチド配列を有するクローンは、酵母中での組換え仲介プラスミド構成を用いて単離した。２つのプライマー対のセットを用いて、ＣＨＫ１ｓｖ１の全ｍＲＮＡコーディング配列を増幅し、クローニングした。ＣＨＫ１ｓｖ１の場合、リアルタイム定量的ＰＣＲ分析は、このスプライス変異体形状の転写体が非常に低いレベルで存在していたことを示した。ＣＨＫ１ｓｖ１をクローニングするために、対照ＣＨＫ１のコーディング配列を含むクローン（ＮＭ＿００１２７４）は、所望のエキソン９からエキソン１１へのスプライスジャンクションを創出するように設計した８０塩基対リンカーによる酵母中のさらなる組換え工程により変化させた。

５’「フォワード」プライマー及び３’「リバース」プライマーは、ＣＨＫ１ｓｖ１に相当する完全長クローンの単離のために設計した。５’「フォワード」ＣＨＫ１ｓｖ１プライマーは、５’ＴＴＡＣＴＧＧＣＴＴＡＴＣＧＡＡＡＴＴＡＡＴＡＣＧＡＣＴＣＡＣＴＡＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＴＣＡＴＧＧＣＡＧＴＧＣＣＣＴＴＴＧＴ３’（配列番号１０）のヌクレオチド配列を有するように、またＣＨＫ１ｍＲＮＡ（ＮＭ＿００１２７４）のエキソン２に相補性の配列を有するように設計した。３’「リバース」ＣＨＫ１ｓｖ１プライマーは、５’ＴＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＧＴＣＧＡＧＧＣＴＧＡＴＣＡＧＣＧＧＧＴＴＴＡＡＡＣＴＣＡＴＧＣＡＴＣＣＡＡＴＴＴＧＧＴＡＡＡＧＡＡＴＣＧ３’（配列番号１１）のヌクレオチド配列を有するように、またＣＨＫ１ｍＲＮＡ（ＮＭ＿００１２７４）のエキソン１１に相補性の配列を有するように設計した。イタリック（下線）で示したプライマー配列の５’末端の４０個のヌクレオチドは、ＰＣＲアンプリコンに取り込まれた「尾部」であり、酵母中での引き続くプラスミド組換え事象を促進した。これらのＣＨＫ１ｓｖ１「フォワード」及び「リバース」プライマーは、対照ＣＨＫ１ｍＲＮＡ（ＮＭ＿００１２７４）のコーディング配列を増幅すると期待されるが、このものはＣＨＫ１ｓｖ１−特異的配列を創出するために、引き続く組換えクローニング工程にて使用した。

ＲＴ−ＰＣＲ
ＣＨＫ１ｓｖ１ｃＤＮＡ配列は、逆転写（ＲＴ）とポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）との組み合わせを用いてクローニングした。より具体的には、約２５ｎｇのＭＯＬＴ−４細胞株ｍＲＮＡ（ＢＤバイオサイエンス・クロンテック；パロアルト、カリフォルニア）を、スーパースクリプトＩＩ（ギブコ／インビトロゲン；カールスバッド、カリフォルニア）及びオリゴｄ（Ｔ）プライマー（レスゲン／インビトロゲン；ハンツビル、アラバマ）を用い、スーパースクリプトＩＩ製造業者の説明書に従って、逆転写した。ＰＣＲについては、完結したＲＴ反応物１μｌを、４０μｌの水、５μｌの１０Ｘバッファー、１μｌのｄＮＴＰ及びクロンテック（パロアルト、カリフォルニア）アドバンテージ２ＰＣＲキットからの酵素１μｌに加えた。ＰＣＲはジーンアンプＰＣＲシステム９７００（アップライド・バイオシステムズ；フォスターシティ、カリフォルニア）にて、ＣＨＫ１ｓｖ１（配列番号：１０、１１）用のＣＨＫ１ｓｖ１「フォワード」及び「リバース」プライマーを用いて実施した。最初に９４℃で１分間の変性の後、３５サイクルの増幅を、９４℃での３０秒間の変性、次いで、６３．５℃、４０秒間のアニーリングと７２℃、５０秒間の合成により実施した。３５サイクルのＰＣＲに続いて、７２℃、１０分間の伸張とした。次いで、５０μｌの反応物を４℃に冷やした。得られる反応生成物１０μｌを１％アガロースゲル（インビトロゲン；超高純度）上で走行させ、０．３μｇ／ｍｌの臭化エチジウム（フィッシャーバイオテック；フェアーローン、ニュージャーシー）で染色した。ゲル中の核酸バンドを可視化し、ＵＶ光ボックス上で写真を撮って、ＰＣＲが予測したサイズ（ＣＨＫ１ｍＲＮＡの場合、約１２４３塩基対の産物）の産物を生成したかどうか判定した。ＭＯＬＴ−４細胞からの５０μｌのＰＣＲ反応物の残りは、ＱＩＡクイックゲル抽出キット（キアゲン；バレンシア、カリフォルニア）を用い、キットに添付されているＱＩＡクイックＰＣＲ精製プロトコールに従って精製した。精製プロトコールにより得られた生成物約５０μｌは、ユニバーサルバキュームシステム４００（サバント；ホルブルーク、ニューヨーク）に取り付けたスピードバックプラス（ＳＣ１１０Ａ；サバント）中で、中程度加熱で約３０分間乾燥することにより、約６μｌに濃縮した。

ＣＨＫ１ｓｖ１完全長クローンのクローニングと構築及び酵母形質転換
酵母中、相同組換えクローニングによる完全長ＣＨＫ１ｓｖ１クローンの構築は、レイモンドら（Ｒａｙｍｏｎｄ ｅｔ ａｌ．，２００２，Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１２：１９０−１９７）がすでに記載している図式と同様のシクロヘキシミドに基づく逆選択図式を用いて実施した。

１２４３塩基対ＣＨＫ１アンプリコン（すでに記載したＣＨＫ１ｓｖ１フォワード及びリバース「テイルド」プライマーを用いて作製した）と発現ベクターとの間の相同性組換えによる完全長ＣＨＫ１ｓｖ１完全長クローンの構築は、これらの断片を酵母細胞に同時形質転換することにより実施した。８０塩基対オリゴヌクレオチドリンカーとの引き続く組換え工程は、ＣＨＫ１ｓｖ１エキソン９からエキソン１１へのスプライスジャンクションを創出した。以下のパラグラフに記載する酵母形質転換工程はすべてエレクトロポレーションにより実施した（Ｒａｙｍｏｎｄ ｅｔ ａｌ．，２００２ Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１２：１９０−１９７）。

１２４３塩基対ＣＨＫ１精製アンプリコン１μｇは、酵母株ＣＭＹ１−５（Ｍａｔα、ＵＲＡ３Δ、ＣＹＨ２^Ｒ）１００μｌの同時形質転換により、１００ｎｇのＳｒｆＩ−消化ｐＣＭＲ１１に直接クローニングした。Ｕｒａ^＋、シクロヘキシミド耐性コロニーは、１μｇ／ｍｌのシクロヘキシミドを容れたＵｒａ−欠損培地プレート（シグマ；セントルイス、ミズーリ）上で選択した。標準酵母培地を使用した（Ｓｈｅｒｍａｎ， １９９１， Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１９４：３−２１）。ＣＨＫ１クローン含有酵母細胞培養物からの全ＤＮＡを用い、大腸菌をクロラムフェニコール（シグマ；セントルイス、ミズーリ）耐性に形質転換し、文献（Ｈｏｆｆｍａｎ ａｎｄ Ｗｉｎｓｔｏｎ，１９８７ Ｇｅｎｅ ５７：２６７−７２）記載のように大量の組換えプラスミドを調製した。コロニーをプレートから取り出し、２ｍｌの２×ＬＢ培地に移した。これらの液体培養物を３７℃で一夜インキュベートした。プラスミドＤＮＡは、キアクイック・スピン・ミニプレップ・キット（キアゲン；バレンシア、カリフォルニア）を用いて、これらの培養物から抽出した。

ＣＨＫ１ｓｖ１クローンを構築するために、エキソン９からエキソン１１への選択的スプライシングの領域に及ぶ表３に示した８０塩基対リンカー（配列番号１２、１３）１μｇ、及びＢａｍＨＩ−消化ＣＨＫ１／ｐＣＭＲ１１クローン１００ｎｇを用いて、シクロヘキシミド感受性酵母株１００μｌを同時形質転換した。該リンカーとＣＨＫ１／ｐＣＭＲ１１クローン間の重なり合うＤＮＡは、殆どの酵母形質転換体が正しく集合した構築物を有するであろうことを決定付ける。Ｕｒａ^＋、シクロヘキシミド耐性コロニーは、引き続く大腸菌の調製と形質転換のために選択した。大腸菌から抽出されたプラスミドＤＮＡは、ＣＨＫ１ｓｖ１クローンにおいてエキソン９からエキソン１１への選択的スプライシングの存在を確認するために、制限消化により分析した。８種のＣＨＫ１ｓｖ１クローンの配列を決定して同一性を確認し、適切な配列をもつクローンは多系統におけるタンパク質発現のために使用した。

ＣＨＫ１ｓｖ１ポリヌクレオチドの概要
ＣＨＫ１ｓｖ１ｍＲＮＡのポリヌクレオチドコーディング配列（配列番号１４）は、対照ＣＨＫ１タンパク質（ＮＰ＿００１２６５）に類似のＣＨＫ１ｓｖ１タンパク質（配列番号１５）をエンコードするオープンリーディングフレームを含むが、対照ＣＨＫ１ｍＲＮＡ（ＮＭ＿００１２７４）の完全長コーディング配列のエキソン１０に相当する１７８塩基対領域がエンコードするアミノ酸を欠く。この１７８塩基対領域を欠失すると、タンパク質翻訳読み取り枠が、対照ＣＨＫ１タンパク質読み取り枠に比べてシフトし、ＣＨＫ１ｓｖ１にユニークなカルボキシ末端ペプチド領域を創出する（配列番号１５にイタリックで示す）。フレームシフトはまたエキソン９／エキソン１１スプライスジャンクションの下流に、未熟な終結コドン２９ヌクレオチドをも創出する。したがって、ＣＨＫ１ｓｖ１タンパク質は
エキソン１０がエンコードするアミノ酸領域に相当する内部５９アミノ酸領域を失っており、また対照ＣＨＫ１（ＮＰ＿００１２６５）に比較して、未熟な停止コドンの下流のヌクレオチドがエンコードするアミノ酸を欠いている。エキソン１０はＣＨＫ１のＳＱ／ＴＱドメインをエンコードし、またエキソン１１〜１３は自己抑制的領域をエンコードする（Ｓａｎｃｈｅｚ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７７：１４９７−１５０１；Ｋａｔｓｕｒａｇｉ ａｎｄ Ｓａｇａｔａ，２００４，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．１５：１６８０−１６８９）。自己抑制的領域の欠失がＣＨＫ１キナーゼドメインに構成的活性を付与する一方、ＳＱ／ＴＱドメインが除去されても、ＣＨＫ１酵素活性は低下する（Ｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９：８８０８−８８１９）。

実施例３：ＣＨＫ１ｓｖ１タンパク質の発現
バキュロウイルス遺伝子発現ベクター系は、タンパク質発現昆虫細胞でもよく、この細胞は安価で維持し易い。産生されたタンパク質は哺乳動物細胞によるものと同様の品質である（Ｍｉｌｌｅｒ，１９８８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：４５７−４６５；Ｍｉｌｌｅｒ，１９８９，Ｂｉｏｅｓｓａｙｓ １１：９１−９５）。昆虫細胞においてバキュロウイルス発現ベクターを用いるタンパク質発現方法は、当該技術分野において公知であり、その技法は文献で検討されている：Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒｓ（バキュロウイルス発現ベクター）Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（実験室マニュアル），Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９２ａｎｄ Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒ Ｓｙｓｔｅｍ Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｍａｎｕａｌ（バキュロウイルス発現ベクター取扱説明マニュアル），６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，１９９９。

昆虫細胞発現のためのＣＨＫ１ｓｖ１のクローニング
ＣＨＫ１ｓｖ１／バキュロウイルス転移ベクター構築物を作製するために、ＣＨＫ１ｓｖ１／ｐＣＭＲ１１クローン（実施例２参照）をＰＣＲの鋳型として用い、表５に掲載したプライマー（配列番号１６、１７）を用いて、ＣＨＫ１ｓｖ１のコーディング配列（配列番号１４）を増幅した。配列番号１６により表されるプライマーは、ＡＴＧ開始コドン上流の直前に最適な翻訳開始配列を含み、またアンプリコンに包含されることとなる上流ＥｃｏＲＩ制限部位を含む。配列番号１７により表されるプライマーは、ＣＨＫ１ｓｖ１コーディング配列に対しＣ−末端の６個のヒスチジン残基をエンコードする配列、並びにＣＨＫ１ｓｖ１アンプリコンに包含されることとなるＥａｇＩ制限部位を含む。ＣＨＫ１ｓｖ１アンプリコンを１％アガロースゲル上に流した。期待されるサイズの選択したアンプリコンフラグメント、ＣＨＫ１ｓｖ１の場合は、約９９４塩基対の生成物を手作業でゲルから抽出し、キアゲン・ゲル抽出キットにより精製した。精製したアンプリコンフラグメントをＥｃｏＲＩ及びＥａｇＩで消化した。ＥｃｏＲＩ／ＥａｇＩ−消化したアンプリコンをバキュロウイルス転移ベクターｐＶＬ１３９３（ファーミンゲン；サンディエゴ、カリフォルニア）（本ベクターはＥｃｏＲＩ及びＥａｇＩで消化し、アルカリ性ホスファターゼにより脱リン酸しておいた）に連結した。次いで、ＣＨＫ１ｓｖ１／ｐＶＬ１３９３構築物を大腸菌株ＤＨ５αに形質転換した。アンピシリン耐性コロニーから抽出、選択したプラスミドＤＮＡは配列決定して同一性を確認し、適切な配列を有するクローンを昆虫細胞でのタンパク質発現に使用した。

ＣＨＫ１ｓｖ１の昆虫細胞発現
ＣＨＫ１ｓｖ１／ｐＶＬ１３９３構築物は、線状化ＡｃＮＰＶバキュロゴールドＤＮＡ（ファーミンゲン；サンディエゴ、カリフォルニア）と共に、ＳＦ９昆虫細胞（インビトロゲン；カールスバッド、カリフォルニア）に同時トランスフェクトした。個々の組換えウイルスは、終末点希釈により選択した。ウイルスクローンは高力価原液を得るために増幅した。これらのウイルス保存液は、ＣＨＫ１ｓｖ１組換えタンパク質の産生を立証するために、小規模のＳＦ９培養でタンパク質発現テストに使用した。トランスフェクトしたＳＦ９細胞溶解液は、ＣＨＫ１ｓｖ１タンパク質発現について、ポリアクリルアミドゲル電気泳動により分析した。ＣＨＫ１ｓｖ１タンパク質は、クマシー染色によるか、又は抗−ＣＨＫ１−抗体（Ｇ４抗体；サンタ・クルツ・バイオテクノロジー・インク）を用いるウエスタンブロッティングにより可視化した。発現に基づいて、個々のウイルスは大規模ＣＨＫ１ｓｖ１発現のために選択した。リットル規模での組換えタンパク質発現用に、ＳＦ９懸濁培養物をＥｘ−細胞４０１無血清培地（ＪＲＨサイエンティフィック；レネキサ、カンサス）中、２７℃で増殖し、細胞あたり０．３ウイルスの多様な感染により、組換えウイルス保存液で感染させた。感染させたＳＦ９培養物は、ウイルストランスフェクションの７２時間後に収穫し、遠心分離によりペレット化した。ペレットを−７０℃で保存した。

ＣＨＫ１ｓｖ１組換えタンパク質の精製
昆虫細胞ペレットは、１μＭミクロシスチン（シグマ；セントルイス、ミズーリ）、１０μＭサイパーメトリン（ｃｙｐｅｒｍｅｔｈｒｉｎ）（ＥＭＤバイオサイエンス；サンディエゴ、カリフォルニア）、及びＥＤＴＡ−不含プロテアーゼ・インヒビターカクテル（ロッシュ・ディアグノスティックス；マンハイム、ドイツ）（１錠／５０ｍｌ溶解バッファー）を含有するＢ−ＰＥＲタンパク抽出試薬（ピアース；ロックフォード、イリノイ）で溶解した。タンパク質精製の際の操作はすべて４℃で実施した。細胞を溶解バッファーに再懸濁し、４５分間攪拌した。次いで、ＤＮアーゼＩ（ロッシュ）を加えて最終濃度２００Ｕ／ｍｌとし、この細胞懸濁液をさらに３０分間攪拌した。溶解した細胞懸濁液を３０，０００ｇで３０分間遠心分離した。溶解液上清をデカントし、３０，０００ｇで３０分間遠心分離した。澄明な上清各１０ｍｌについて、１ｍｌの総容量のタロンメタルアフィニティ樹脂（クロンテック；パロアルト、カリフォルニア）を加え、その懸濁液を４５分間攪拌した。アフィニティ樹脂／溶解懸濁液を５０００ｇで３分間遠心し、次いで上清を廃棄した。アフィニティ樹脂は５倍容量の樹脂を用いて、バッファーＡ（５０μＭトリス、ｐＨ８．０；２５０ｍＭ−ＮａＣｌ）で４回洗った。洗浄した樹脂はバッファーＡ中の２×スラリーとして再懸濁し、クロマトグラフィーカラムに詰めた。樹脂を詰めたカラムは６倍総容量のバッファーＡで洗った。ＣＨＫ１ｓｖ１−Ｈｉｓタグ標識タンパク質は、段階的傾斜のイミダゾール／バッファーＡでカラムから溶出する。２倍総容量フラクション中のイミダゾール濃度は、５、１０、２０、３０、４０、５０、及び６０ｍＭとした。溶出フラクションは、アミコン・ウルトラ１５遠心分離フィルター装置、３０，０００ノミナル・モレキュラーウエイト・リミット（ミリポア；ビレリカ、マサチューセッツ）を用いて濃縮した。濃縮酵素フラクションはグリセロール中５０％に希釈し、−２０℃で保存した。フラクションは、ポリアクリルアミドゲル電気泳動と、引き続くクマシー染色及び抗−ＣＨＫ１抗体（Ｇ４抗体；サンタ・クルツ・バイオテクノロジー・インク）を用いるウエスタンブロッティングにより、ＣＨＫ１ｓｖ１−Ｈｉｓ−タグタンパク質の存在について分析した。カラムフラクションのＣＨＫ１ｓｖ１キナーゼ活性は、以下のセクションに記載するキナーゼアッセイ法により測定した。

実施例４：ＣＨＫ１ｓｖ１キナーゼアッセイ
ＣＨＫ１ｓｖ１活性は、合成ペプチド基質を用いて、インビトロでアッセイした。ホスホペプチド産物は均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）アッセイ系（Ｐａｒｋ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６９：９４−１０４）により定量した。反応混合物は、４０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．３；１００ｍＭ−ＮａＣｌ；１０ｍＭ−ＭｇＣｌ_２；２ｍＭジチオスレイトール；０．１％ＢＳＡ；０．１ｍＭ−ＡＴＰ；０．５μＭペプチド基質；及び０．１ｎＭ−ＣＨＫ１ｓｖ１酵素を含み、最終容量は４０μｌであった。ペプチド基質はアミノ末端−ＧＧＲＡＲＴＳＳＦＡＥＰＧ−カルボキシ末端（シンペプ；ダブリン カリフォルニア）（配列番号１８）のアミノ酸配列を有し、Ｎ−末端でビオチン化されている。キナーゼ反応は２２℃で３０分間のインキュベートで実施し、次いで、６０μｌの停止／検出バッファー（４０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．３；１０ｍＭ−ＥＤＴＡ；０．１２５％トリトンＸ−１００；１．２５％ＢＳＡ；２５０ｎＭフィコリンク・ストレプトアビジン−アロフィコシアニン（ＡＰＣ）接合体（プロザイム、サンレアンドロ、カリフォルニア）；及びユーロピウム−キレート（パーキン・エルマー；ボストン、マサチューセッツ）で標識した０．７５ｎＭ−ＧＳＫ３α抗−ホスホセリン抗体（セルシグナリング・テクノロジーズ；ビバリー、マサチューセッツ；カタログ＃９３３８））で停止した。反応は２２℃で２時間平衡化し、ディスカバリープレートリーダー（パッカード・バイオサイエンス）上で比蛍光単位を読み取った。インヒビター化合物は上記の反応でアッセイし、化合物のＩＣ_５０を決定した。ＤＭＳＯに溶かした化合物１μｌは、１ｎＭから１００μＭの範囲を対象とする半対数希釈系列で各４０μＬの反応液に加えた。ＨＴＲＦ蛍光単位として読み取る相対的ホスホ基質形成は、化合物濃度の範囲について測定し、滴定曲線は４パラメータ・シグモイドフィットにより作成した。

本発明の具体的化合物につき、上記のアッセイ法により試験し、基質に対するＩＣ_５０が≦５０μＭであることを見出した。

実施例５：細胞におけるＣＨＫ１自己リン酸化の阻害
インヒビター化合物は、ＤＮＡ損傷に応答するＣＨＫ１自己リン酸化をモニターすることにより、細胞中のＣＨＫ１を阻害するそれらの能力についてアッセイする。Ｈ１２９９細胞（ＡＴＣＣ、マナッサス、バージニア）は培地（１０％ウシ胎仔血清添加ＲＰＭＩ１６４０；１０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ；２ｍＭ−Ｌ−グルタミン；１×非必須アミノ酸；及びペニシリン−ストレプトマイシン）にて増殖させた。Ｔ−７５フラスコからの細胞をプールし、計数し、６穴プレート上、１ウエルあたり２ｍｌ培地に２００，０００個の細胞を播種し、インキュベートした。ＤＭＳＯ中の化合物の段階希釈系列又はＤＭＳＯ対照は、ＤＭＳＯ中の１０００×作業ストックから各ウエルに加え、３７℃で２時間インキュベートした。２時間のインキュベーションの後、１００ｎＭのカンプトテシン（ＥＭＤバイオサイエンス；サンディエゴ、カリフォルニア）を、ＰＢＳ中の２００×作業ストックから、すべての薬物処理細胞（高用量ウエルの１つを除く）及びＤＭＳＯ対照の１ウエルに加える。カンプトテシンとの４時間のインキュベーションの後、各ウエルを氷冷したＰＢＳで１回洗浄し、３００μＬの溶解バッファー（５０ｍＭトリス（ｐＨ８．０）、１５０ｍＭ−ＮａＣｌ、５０ｍＭ−ＮａＦ、１％ＮＰ−４０、０．５％デオキシコール酸、０．１％ＳＤＳ、０．５μＭ−Ｎａ_３ＶＯ_４及び１×プロテアーゼインヒビター・カクテル・コンプリート−ＥＤＴＡなし（ロッシュ・ダイアグノスティックス；マンハイム、ドイツ））を各ウエルに加える。プレートを４℃で１０〜１５分間振盪し、次いで、溶解液を１．５ｍｌの遠心分離用チューブに移し、−８０℃で凍結する。溶解液を氷上で融解し、１５，０００×ｇで２０分間遠心分離して澄明とし、その上清を清潔なチューブに移す。

ゲル電気泳動用のサンプル（２０μＬ）は、５μＬの５×サンプル負荷バッファーを添加し、１００℃に５分間加熱変性することにより調製する。サンプルはトリス／グリシンＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル（１０％）で電気泳動し、タンパク質はＰＶＤＦに移動する。ブロットを次いで３％ＢＳＡ／ＴＢＳで１時間ブロックし、ホスホ−Ｓｅｒ−２９６ＣＨＫ１に対する抗体（セルシグナリング・テクノロジーズ−カタログ＃２３４６）を用いてプローブする。結合した抗体は西洋わさびペルオキシダーゼ結合第二抗体（ヒツジ−抗ウサギ；ジャクソンラボ−カタログ＃１１１−０３５−０４６）と増強化学発光（ＥＣＬ−プラス；アマーシャム；ピスカタウエイ、ニュージャーシー）により可視化する。６２．５ｍＭトリスＨＣｌ（ｐＨ６．７）、２％ＳＤＳ及び１００μＭまでの２−メルカプトエタノール中のインキュベーションにより第一抗体セットを５５℃で３０分間ストリッピングした後、ＣＨＫ１モノクローナル抗体（サンタクルツ・バイオテクノロジー・インク；カタログ＃ＳＣ−８４０８）を用いて、全ＣＨＫ１を再プローブする。ＣＨＫ１モノクローナル抗体は、西洋わさびペルオキシダーゼ結合ヒツジ抗マウスＩｇＧ（アマーシャム・バイオサイエンス；ピスカタウエイ、ニュージャーシー；カタログ＃ＮＡ９３１）と増強化学発光（ＥＣＬ−プラス；アマーシャム）を用いて検出する。ＥＣＬ露光フィルムを走査し、特異バンドの強度をイメージクアント（ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ）ソフトウエアにより定量した。滴定は全ＣＨＫ１に対して標準化したホスホ−ＣＨＫ１（Ｓｅｒ２９６）シグナルのレベルについて評価し、ＩＣ_５０値を計算する。

実施例６：チェックポイント逸脱アッセイにおけるインヒビターの機能活性
ＤＮＡ損傷停止
細胞におけるＣＨＫ１インヒビターの機能活性を測定するために、ＤＮＡ損傷が誘発する細胞周期停止をなくするそれらの能力について化合物をアッセイする。このアッセイはＤＮＡ傷害剤カンプトテシンによりもたらされた細胞周期停止後に、Ｍ期に入る細胞の量の指標として細胞ホスホ−ヌクレオリンレベルを測定する。

Ｈ１２９９細胞（ＡＴＣＣ、マナッサス バージニア）は１０％ウシ胎仔血清添加ＲＰＭＩ６４０媒地に、５０００細胞／ウエルの濃度で播種する。５％ＣＯ_２下、３７℃で２４時間インキュベートした後、カンプトテシンを最終濃度２００ｎＭで加え、１６時間インキュベートした。等容積の増殖培地、及び２００ｎＭカンプトテシン及び３３２ｎＭノコドゾール（最終濃度：５０ｎｇ／ｍｌ）中のテスト化合物段階希釈系列を加え、３７℃でのインキュベーションを８時間続ける。ウエルから培地を除き、５０μＬ溶解液バッファー（２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１５０ｍＭ−ＮａＣｌ、５０ｍＭ−ＮａＦ、１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、１×プロティナーゼインヒビターカクテル（ロッシュ・ダイアグノスティックス、マンハイム、ドイツ）、１μｌ／ｍｌ−ＤＮアーゼＩ（ロッシュ・ダイアグノスティックス）、３００μＭオルトバナジン酸ナトリウム、１μＭミクロシスチン（シグマ；セントルイス、ミズーリ））を加える。溶解バッファーを容れたプレートを４℃で３０分間振盪し、２０分間で凍結（−７０℃）する。細胞溶解液中のホスホヌクレオリンのレベルは、ＩＧＥＮオリゲン法（バイオベリス（ＢｉｏＶｅｒｉｓ）コープ；ゲイサーズバーグ、メリーランド）により測定する。

細胞溶解液中のホスホヌクレオリンの検出
４Ｅ２抗−ヌクレオリン抗体（リサーチ・ダイアグノスティックス・インク；フランダース、ニュージャージー）は、オリゲン・ビオチン−ＬＣ−ＮＨＳ−エステル（バイオベリス・コープ）を用い、製造業者記載のプロトコールに従い、ビオチン化した。ヤギ抗−マウス抗体（ジャクソン・インムノ・リサーチ；ウエストグローブ、ペンシルバニア）はルテニル化キット（バイオベリス・コープ；カタログ＃１１００３４）により、製造業者記載のプロトコールに従い、ルテニル化した。９６穴プレートの各ウエルに、２μｇ／ｍｌのビオチン化４Ｅ２抗−ヌクレオリン抗体及び０．４ｍｇ／ｍｌストレプトアビジン被覆常磁性ダイナビーズ（バイオベリス・コープ）を２５μＬの細胞溶解液（上記）と共に含む２５μＬの抗体バッファー（ホスホ緩衝食塩水ｐＨ７．２、１％ウシ血清アルブミン、０．５％トゥイーン−２０）を加える。抗体及び溶解液を室温で１時間振盪しながらインキュベートする。次に、５０μＬ容量の抗体バッファー（上記）中、抗−ホスホヌクレオリンＴＧ３抗体（アプライド・ニューロソリューション・インク；バーノンヒルズ、イリノイ）５０ｎｇを各ウエルの溶解液混合物に加え、室温で３０分間インキュベーションを続ける。最後に、抗体バッファー中のルテニル化ヤギ抗−マウス抗体の２４０ｎｇ／ｍｌ溶液２５μＬを各ウエルに加え、室温でのインキュベーションを３時間続ける。溶解液抗体混合物はバイオベリスＭ−シリーズＭ８アナライザーで読み取り、ホスファー−ヌクレオリンの増大に依存性の化合物のＥＣ５０を決定する。

実施例７：他の生物学的アッセイ
ＣＨＫ１発現及び精製：組換えヒトＣＨＫ１は、標準的バキュロウイルスベクターと（Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃ；登録商標）昆虫細胞発現系（ＧＩＢＣＯ商標 インビトロゲンから購入）を用いて、アミノ末端（ＧＳＴ−ＣＨＫ１）でグルタチオンＳ−トランスフェラーゼとの融合タンパク質として発現され得る。昆虫細胞中で発現される組換えタンパク質は、グルタチオンセファロース（アマーシャム・バイオテック）を用いて、製造業者記載の標準的手法に従い、精製することができる。

ＣＨＫ１蛍光偏光アッセイ：ＣＨＫ１キナーゼインヒビターは、キナーゼ活性をモニターするために、蛍光偏光を用いて同定することができる。本アッセイでは１０ｎＭ−ＧＳＴ−ＣＨＫ１を利用し、５ｍＭ２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ；ｐＨ６．５）、５ｍＭ塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ_２）、０．０５％トゥイーン（登録商標）−２０、１μＭアデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）、２ｍＭ １，４−ジチオ−ＤＬ−スレイトール（ＤＴＴ）、１μＭペプチド基質（ビオチン−ＩＬＳＲＲＰＳＹＲＫＩＬＮＤ−遊離酸）（配列番号１９）、１０ｎＭペプチド基質トレーサー（フルオレシン−ＧＳＲＲＰ−ｐＳ−ＹＲＫＩ−遊離酸）（ｐＳ＝リン酸化−セリン）（配列番号２０）、６０ｎｇの抗−ホスホ−ＣＲＥＢ（Ｓ１３３）マウス・モノクローナルＩｇＧ（セルシグナリング・テクノロジーズ（ビバリー、マサチューセッツ）から購入した粗製のマウス腹水からプロテインＧセファロース上で精製）、４％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）及び３０μＭインヒビター化合物を含む。反応液を室温で１４０分間インキュベートし、２５ｍＭ−ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を加えて反応停止させる。停止した反応液を室温で１２０分間インキュベートし、モレキュラーディバイス／ＬＪＬバイオシステムズ・アナリスト（商標）ＡＤ（サニーベイル、カリフォルニア）を用い、標準のフルオレシン設定で蛍光偏光値を測定する。

ＣＨＫ１ ＳＰＡ濾過アッセイ：アッセイ系（２５μｌ）は、１０ｎＭ−ＧＳＴ−ＣＨＫ１、１０ｍＭ−ＭＥＳ、２ｍＭ−ＤＴＴ、１０ｍＭ−ＭｇＣｌ_２、０．０２５％トゥイーン（登録商標）−２０、１ｕＭペプチド基質（ビオチン−ＩＬＳＲＲＰＳＹＲＫＩＬＮＤ−遊離酸）（配列番号１９）、１μＭ−ＡＴＰ、０．１μＣｉの^３３Ｐ−γ−ＡＴＰ（ニューイングランド・ヌクレア、ＮＥＮ）を含み、室温で９０分間反応させる。５０ｍＭ−ＥＤＴＡ、６．９ｍＭ−ＡＴＰ、０．５ｍｇのシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）ビーズ（アマーシャム・バイオサイエンス）を含むリン酸緩衝食塩水５５μｌを加えることにより反応を停止させる。ペプチド基質を室温で１０分間ビーズに結合させ、パッカードＧＦ／Ｂユニフィルタープレート上に濾過し、リン酸緩衝食塩水で洗う。乾燥したプレートをトップシール（商標）（ＮＥＮ）でシールし、ペプチド基質に取り込まれた^３３Ｐは^３３Ｐに標準設定したパッカードトップカウント（登録商標）シンチレーションカウンターにより測定する。

ＣＨＫ１フラッシュ・プレート（登録商標）キナーゼアッセイ：アッセイ系（２５μｌ）は、８．７ＧＳＴ−ＣＨＫ１、１０ｍＭ−ＭＥＳ、０．１ｍＭエチレングリコール−ビス（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ、ｐＨ８．０）、２ｍＭ−ＤＴＴ、０．０５％トゥイーン２０、３μＭペプチド基質（ビオチン−ＩＬＳＲＲＰＳＹＲＫＩＬＮＤ−遊離酸）（配列番号１９）、１μＭ−ＡＴＰ、０．４μＣｉ３３Ｐ−γ−ＡＴＰ（ＮＥＮ）及び４％ＤＭＳＯを含む。反応液を室温で３０分間インキュベートし、５０μｌの５０ｍＭ−ＥＤＴＡで反応停止させる。反応液９０μｌをストレプトアビジン被覆フラッシュプレート（登録商標）（ＮＥＮ）に移し、室温で１時間インキュベートする。０．０１％トゥイーン−２０及び１０ｍＭピロリン酸ナトリウムを含有するリン酸緩衝食塩水でプレートを洗う。プレートを乾燥し、トップシール（商標）（ＮＥＮ）でシールし、ペプチド基質に取り込まれた^３３Ｐ量を標準設定したパッカードトップカウント（登録商標）ＮＸＴ（商標）シンチレーションカウンターにより測定する。

ＣＨＫ１デルフィア（ＤＥＬＦＩＡ；登録商標）キナーゼアッセイ：アッセイ（２５μｌ）では、２５ｍＭトリス、ｐＨ８．５、２０％グリセロール、５０ｍＭ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、０．１サーファクト−アンプス２０（Ｓｕｒｆａｃｔ−Ａｍｐｓ；登録商標）、１μＭペプチド基質（ビオチン−ＧＬＹＲＳＰＳＭＰＥＮ−アミド）（配列番号２１）、２ｍＭ−ＤＴＴ、４％ＤＭＳＯ、１２．５μＭ−ＡＴＰ、５ｍＭ−ＭｇＣｌ_２を含む６．４ｍＭ−ＧＳＴ−ＣＨＫ１を利用し、室温で３０分間反応させる。反応は１％ＢＳＡ、１０ｍＭトリス（ｐＨ８．０）、１５０ｍＭ−ＮａＣｌ及び１００ｍＭ−ＥＤＴＡを含有する１００μｌのストップバッファーにより終了させる。停止させた反応液（１００μｌ）を９６穴のニュートラビジンプレート（ピアース）に移し、室温３０分間のインキュベーションでビオチン−ペプチド基質を捕捉する。ウエルを洗い、２１．５ｎｇ／ｍｌの抗−ホスホ−Ｓｅｒ２１６−Ｃｄｃ２５ｃウサギ・ポリクローナル抗体（セルシグナリング・テクノロジー；ビバリー、マサチューセッツから）及び２９２ｎｇ／ｍｌユーロピウム標識抗−ウサギ−ＩｇＧを含む１００μｌのパーキンエルマー・ワラック・アッセイバッファーと室温で１時間反応させる。ウエルを洗い、増強溶液（１００μｌ）（パーキンエルマー・ワラック）を添加して結合した抗体からユーロピウムを放出させ、ワラックビクター２（商標）により、標準の製造業者の設定に従い、検出する。
本発明化合物は、上記のＣＨＫ１フラッシュプレート（登録商標）キナーゼアッセイにより試験し得る。

ＷＳＴアッセイ：ＨＴ２９、ＨＣＴ１１６（５０００細胞／ウエル）又は他の細胞を、９６穴の透明底プレートに、７２時間で直線的増殖曲線を与える濃度で播種する（７５μｌ）。細胞は適切な培地中無菌条件下で培養する；ＨＴ２９及びＨＣＴ１１６については、この培地を１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）含有マッコイの（ＭｃＣｏｙ’ｓ）５Ａとする。細胞の最初の播種の後、細胞を３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートする；１７時間から２４時間の時点で適切なＤＮＡ損傷剤（カンプトテシン、５−フルオロウラシル及びエトポシド）を、４８時間以内に少なくとも８０％の細胞を殺し得る点まで濃度を上げて加える。ＤＮＡ損傷剤と化合物すべての添加の最終容量は２５μｌとする。アッセイ系は最終＜１％のＤＭＳＯを含む。ＤＮＡ損傷剤の添加と同時に、ＣＨＫ１インヒビター化合物を、各ＤＮＡ損傷剤の滴定が細胞死滅の増強を観察する固定濃度で添加する。上記の条件下の細胞生存率／細胞死滅は、製造業者に従い、ＤＮＡ損傷剤とＣＨＫ１インヒビター化合物の添加後、及び３７℃、５％ＣＯ_２で、３．５時間又は２．５時間のインキュベーション後４７時間目に、ＷＳＴ試薬（ロッシュ）を添加することにより、ＯＤ_４５０を測定して決定する。
本発明化合物は上記のアッセイ法により試験し得る。

実施例８：その他の生物学的アッセイ
本発明化合物の生物学的活性を決定するために利用し得るその他のアッセイ法は、以下の公開公報に見出されるアッセイ法である：ＷＯ０４／０８０９７３、ＷＯ０２／０７０４９４、及びＷＯ０３／１０１４４４。

Claims (4)

1. 式（Ｅ）：
   

   

   ［式中、
   ｎは０、１、又は２であり；
   Ｒ^２はヘテロシクリル、ハロゲン、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＣＦ_３、（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル、及びアリールから選択され、当該ヘテロシクリル、アルケニル及びアリールは、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＮＨ_２、ハロゲン、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ヘテロシクリル、及び−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＮＨ_２から選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；
   Ｒ^１は、Ｈ、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ハロゲン、（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル、ヘテロシクリル、及びアリールから選択され、当該アルキル、アルケニル、ヘテロシクリル及びアリールは、ハロゲン、−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ＮＨ_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル−ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ^ｂ）_２−ＣＦ_３、Ｎ（Ｒ^ｂ）_２、ＯＨ、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）ＣＦ_３、及び−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルから選択される１ないし３個の置換基で置換されていてもよく；
   Ｒ^ｂは独立して、Ｈ及び（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルから選択される］
   で示される化合物又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体。
2. ６−［（１Ｅ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）−５．６−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−ピリジン−３−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［４−（アミノメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［４−（モルホリン−４−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（１，２，３，６−テトラヒドロ−４−ピリジニル）−ベンゾ［ｇ］−１，２，４−トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（６−アミノピリジン−３−イル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［３−（モルホリン−４−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［３−（ピペリジン−１−イルメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［３−（アミノメチル）フェニル］ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（２−アミノエチル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−イソキノリン−５−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−キノリン−５−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノフェニル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−ピペリジン−４−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−［４−（３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−６−イル）フェニル］アセトアミド；
   ６−（４−アミノフェニル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−ピリジン−４−イルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）−１０−フルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）−９，１１−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｚ）−３−（１０−メチル−３−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−１０−クロロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［４−（アミノメチル）フェニル］−１０−メチルベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）−１０−クロロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−［（１Ｚ）−３−アミノプロパ−１−エン−１−イル］−９，１０−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；
   ６−（３−アミノプロピル）−９，１０−ジフルオロベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン；及び
   ６−（３−アミノプロピル）−１０−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オン、
   から選択される化合物又はその医薬的に許容され得る塩若しくは立体異性体。
3. ６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オンである化合物又はその医薬的に許容され得る塩。
4. ６−（３−アミノプロピル）ベンゾ［ｇ］［１，２，４］トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリン−３（２Ｈ）−オンである化合物のＨＣｌ塩。