JP4852412B2 - マイクロスケール装置の集積 - Google Patents
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Description
本発明は、それらのそれぞれが、その中に固定化アフィニティーリガンドを持つ固相を含有する微小反応空間(reaction microcavity)がある、一つもしくはそれ以上のマイクロチャネル構造を保持する、一つもしくはそれ以上の微小流体装置(microfluidic device)の集積(collection)に関する。
用語“微小流体装置”とは、装置のマイクロチャネル構造の中でいろいろな種類の反応物、試料、緩衝液等を輸送するために液流が使用されることを意味する。
本明細書中で引用される特許出版物は、全体的な出典明示により本明細書の一部とする。
WO 02075312(Gyros AB)は、相手をアフィニティー反応物に露出する固相にアフィニティー反応物を結合することによるかもしくはアフィニティー反応物およびそのアフィニティー相手の間に固定化アフィニティー複合体を含む、固相からアフィニティー反応物を放出することによる反応変数の特性化のためのアフィニティーアッセイに焦点を当てている。種々の固定化技法、例えば、共有結合、物理的吸着、ストレプトアビジン−ビオチンを含むバイオアフィニティー結合、等が提案されている。
もし同一のまたは同様の標準手順が、種々のアッセイ範囲および/もしくは分離プロトコル、数多くの濃度範囲、種々のアナライト範囲等を意図する微小流体装置の製造のために使用できるとすれば、大きい経済的利益を持つであろう。これは、少容積試料の中で低いならびに高い活性および/もしくは濃度、例えば、μl−試料中のナノモル範囲の濃度、のアナライトの測定を可能にする微小流体装置を提供することが重要であることを含む。この文脈において、ナノモル範囲は≦1,000×10−9Mを包含して、≦1,000×10−12Mのピコモル範囲を含む。μl−試料は≦1,000μlを包含して、≦5,000nlのnl−試料を含む。
第一の主要目的は、上で議論した問題を解決する、改良された微小流体装置を提供することである。これは、装置の製造および使用のための方法を提供することを含む。
図1は、実験の部で利用される微小流体装置のマイクロチャネル構造のサブグループを示す。
我々は、アフィニティー捕獲溶質は、もし捕獲反応物ACS がアフィニティーで固定化されるならば、共有結合的に固定化される場合と比較して固相の中でさらに高濃度のバンドとして現れ得ることを発見した。これは、もしも捕獲がアフィニティーアッセイの一部であるならば、さらに高能率的な捕獲および増加した分析感度を示唆する。
アフィニティー固定化についての増加した分析感度の兆候はまた用量反応グラフから演繹された。
a)捕獲工程の間、即ち固定化複合体ACS−−Sの形成の間、の流動条件
b)固相および/または一つもしくはそれ以上の異なる結合体(conjugate)のB−ACS1、B−ACS2等[ここで、Bは共通のリガンドLの方に向けられた共通の結合剤(固定化結合剤B、例えばビオチン)であって、B−ACS1、B−ACS2等は異なる溶質(S1、S2等)の方に向けられたアフィニティー相手である]に固定化される共通のアフィニティーリガンド(L、例えばストレプトアビジン)に基づく一般的な固定化結合原理
c)結合体に対する(もしくは非結合形において固定化結合剤に対する)固相の結合能力の選択および特定の溶質を捕獲する能力がある結合体での固相の飽和
d)固相物質のマトリックスの選択
e)固相上で溶質の最適な富化のための非拡散制限条件を達成するためにアフィニティー対(ACSおよびS)に関して流動条件(流速および/もしくは滞留時間)を均衡させること
の適切な組合せを用いることにより、高度の正確さで達成され得ることを認識した。
a)溶質(複数を含む)およびアナライト(複数を含む)の種類(複数を含む)
b)溶質/アナライトの濃度範囲、ならびに/もしくは
c)アッセイプロトコル等
を決定するであろう。
本発明の主要な態様は、そのそれぞれがその中で固定化アフィニティーリガンドLを持つ固相がある、微小反応空間(104a〜h)を備える複数のマイクロチャネル構造(101a〜h)を一緒に保持する、一つもしくはそれ以上の微小流体装置の集積である。セットの特色的な特徴は、
i)複数のマイクロチャネル構造は二つもしくはそれ以上の異なるセットのマイクロチャネル構造を備えて、そして
ii)アフィニティーリガンドLはセットから独立して同一の相手(結合剤、B)に向けられていて、そして
iii)セットは、
a)結合剤Bのための微小反応空間(104a〜h)の中で微小反応空間当りの能力および/もしくは固相の単位容積当りの能力、ならびに/または
b)固相物質のベースマトリックス
がセットの間で異なるがそれぞれのセット内では等しい
ことにおいてお互いに異なる、
ことである。
a)溶質S、および
b)(i)結合剤B、および(ii)溶質Sに対するアフィニティー相手ACSを含む、結合体(結合体=B−ACS)
の間のアフィニティー反応を利用する。
溶質Sおよびかくしてまたアフィニティー相手ACSはプロトコルの間で異なり得る。
革新的な集積の微小流体装置は、
a)少なくとも二つの異なるセットのマイクロチャネル構造、および/もしくは
b)唯一つのセットのマイクロチャネル構造
を備える。
選択肢の(b)は、集積の中に二つもしくはそれ以上の微小流体装置がありそしてこれらの二つの装置が上で規定されるような異なるセットを備えるときにのみ当てはまる。
単一の微小流体装置上のセットを表すマイクロチャネル構造の数は典型的には二つ、三つもしくはそれ以上である。
革新的な集積のマイクロチャネル構造のセットの数は、典型的には2、3、4、5、6、7......10もしくはそれ以上である。
アフィニティーリガンドLおよびその相手(=結合剤B)は固定化アフィニティー対と呼ばれる。典型的には、固定化結合対は、望ましいアフィニティーの相互結合を除いて、それらが、使用される条件の間、例えば他の反応物に向かって、他の結合能力を本質的に欠如すべきであるように選択されるべきである。
固相が微小反応空間の内壁である場合には、固相の容積は微小反応空間の容積として取られる。
種々の因子および百分率について同一の間隔は、微小反応空間/床当りの結合能力についてまた当てはまる。
アフィニティー相手ACSはアフィニティーにより溶質Sに結合する能力がある。この種の結合は、(a)静電気的相互作用、(b)疎水性相互作用、(c)電子−供与体受容体相互作用、および/もしくは(d)バイオアフィニティー結合:の少なくとも一つに典型的に基づいている。
バイオアフィニティー結合は、相互作用の組合せを典型的に含むアフィニティー結合のサブグループである。
(a)電気的に荷電されるかまたは荷電可能である、即ち、正に荷電した窒素(例えば、第一級の、第二級の、第三級のもしくは第四級のアンモニウム基、およびアミジニウム基)ならびに/または負に荷電した基(例えば、カルボン酸塩の基、リン酸塩の基、ホスホン酸塩の基、硫酸塩の基およびスルホン酸塩の基)を含む;ならびに/または
(b)一つもしくはそれ以上のヒドロカルビル基および他の疎水性基を含む;ならびに/または
(c)多分水素ならびに/またはsp−、sp2−および/もしくはsp3−混成炭素に連結する、一つもしくはそれ以上のヘテロ原子(O、S、N)を含む;ならびに/または
(d)特性(a)〜(c)の組合せを含む、
ことがあり得る。
用語“結合体”とは主として、化学結合体および組換え的に製造される結合体のような共有結合性結合体(そこでは両方の部分およびまた可能なリンカーはペプチド構造を有する)を指す。この用語はまた、所謂天然の結合体、即ち、お互いに離れて間隔を空けて、アフィニティーを二つの異なる分子要素のほうに向けた二つの結合部位を示すアフィニティー反応物、例えば、分子の一つの側(=部分)上に種およびクラス−特異的決定因子ならびにもう一つの側(=部分)上に抗原/ハプテンの結合部位を含む天然の抗体を、含む。
さらにもう一つの選択肢において、結合体は、他の供給源から、例えば、顧客により合成されて、提供される。
微小反応空間(104a〜h)は、その中に固相が存在するマイクロチャネル構造(101a〜h)の部分として規定される。これは、多孔性床の形の固相について、床の容積および微小反応空間(104a〜h)が合致するであろうしそして同一の容積を有することを意味する。もしも固相がマイクロ導管の内壁であるならば、微小反応空間(104a〜h)は、固相の最上流のおよび最下流の末端の間の容積として規定される。
アフィニティーリガンドLを持つ固相を含有する微小反応空間の幾何学的な形は、セット内では典型的に本質的に同一であるが、セットの間では異なっていても異なっていなくてもよい。
用語“多孔性粒子”は、WO 02075312(Gyros AB)におけると同一の意味を有する。
固相物質は透明であってもなくてもよい。
同一の微小流体装置の上でアフィニティーリガンドLを持つ固相を含有するマイクロチャネル構造の数は、典型的には≧10、例えば≧25もしくは≧90もしくは≧180もしくは≧270もしくは≧360である。上で議論したように、装置のマイクロチャネル構造はグループに分割され得る。それぞれのグループの中のマイクロチャネル構造の数は、装置のマイクロチャネル構造の全数の5〜50%もしくは5〜25%もしくは10〜50%のように、1〜99%の間隔に典型的にある。これは、典型的に、それぞれのグループが3〜15もしくは3〜25もしくは3〜50個のマイクロチャネル構造を備えることを意味する。
それぞれのマイクロチャネル構造は、液体用の少なくとも一つの入口孔および過剰の空気用(通気口)のおよび多分また液体用の少なくとも一つの出口孔を有する。
内部表面の付着活性および親水性は、応用に関して均衡させるべきである。例えば、WO 01047637(Gyros AB)を参照されたい。
接触角とは、使用温度、典型的には+25℃、での値を指して、静的でありそしてWO 00056808(Gyros AB)およびWO 01047637(Gyros AB)に示される方法により測定される。
微小流体装置は異なる微小反応空間へ充填済みの固相と共に顧客に典型的に配達される。それぞれの微小反応空間の中の固相物質は、湿った状態であってもよいが、好ましくは顧客による将来の再構成のための乾燥状態(脱水状態をまた含む)である。乾燥状態の固相物質は、可能な凍結乾燥、乾燥、保管および再構成の間の損傷から固相物質をそれ自体で安定化させるならびに/もしくはアフィニティーリガンドLを安定化させる、一つまたはそれ以上の薬剤(冷凍安定化剤、溶解安定化剤、安定化剤等を含む床の保存剤)を典型的に含む。SE 03008232、US SN 60/466376および本出願と平行して出願された相当する国際特許出願(“充填済みのマイクロスケール装置”)(Gyros AB)ならびにArakawa et al (Advanced Drug Delivery Reviews 46 (2001) 307-326)を参照されたい。床の保存剤の重要な変形体は、マイクロキャビティの密着剤である。この種の薬剤は、物質およびマイクロキャビティの内部表面の間のおよび/もしくは、もし物質が粒子形にあるならば、粒子の間の密着を増加させることにより固相物質をマイクロキャビティの中に保留することを促進する化合物または化合物の混合物を含む。マイクロキャビティの密着剤は典型的には炭水化物のもしくはポリマーの構造を含む。
この態様は、特に特定の溶質Sおよびそのアフィニティー相手ACSとの間の反応と共に平行して、特定のプロトコルの複数の作業を行うための方法を含む。この方法の工程は:
(i)画期的な集積の中で適切なセットを選択すること、および
(ii)選択されたセットのマイクロチャネル構造を備える微小流体装置を選択すること、
(iii)結合体B−ACSおよび溶質Sを含有する液体を提供すること、
(iv)選択された微小流体装置上のセットのマイクロチャネル構造の少なくとも一つのグループの微小反応空間の中で固相を工程(iii)で提供される結合体で感作すること、
(v)溶質Sとの間のアフィニティー反応を、サブグループのマイクロキャビティを通して液体のアリコートを輸送することにより、好ましくはプロトコルの他の工程をまた含むこと、即ち、完全なプロトコルを実施すること、により、実施すること、
である。
固定化アフィニティー相手ACSおよび溶質Sとの間の相互作用は、静的なもしくは流動の条件下に、即ち、微小反応空間を通って通過する液流による溶質の輸送の有無で、起こり得る。我々は、静的な条件下より流動の条件下で、さらに多くの情報が獲得され得ることを以前に見出した(WO 02075312(Gyros AB))。流速および/もしくは滞留時間は、固相に結合される溶質の量が、拡散による最少の摂動(非拡散制限条件)をもって、固定化アフィニティー反応物および溶質の間の実際の反応速度もしくはアフィニティーを反映するであろうように、例えば調整され得る。これはまた本発明に当てはまるが、主な興味が結合される/捕獲される溶質の全量である、応用については、拡散制限のもしくは非拡散制限の条件のいずれかを利用する流動条件または静的な条件の下で捕獲することが使用され得ることを除外しない。多孔性床を通る適切な流速は、多数の因子、例えば、固定化反応物および溶質ならびにそれらのサイズ、微小反応空間の容積、固相物質を含む多孔性床等、に依存する。典型的には、流速は、典型的に1時間以下のような2時間以下である上限をもって、≧0.050秒もしくは≧0.1秒のような≧0.010秒の滞留時間を与えるべきである。例示的な流速は、0.01〜100nl/秒およびさらに典型的には0.1〜10nl/秒のような、0.01〜1000nl/秒以内にある。これらの流速の間隔は、1〜50nlもしくは1〜25nlのような、1〜200nlの範囲の床容積に有用であり得る。滞留時間とは、液体アリコートが微小反応空間の中で固相と接触するためにそれが取る時間を指す。
溶質Sおよびそのアフィニティー相手ACSとの間のアフィニティー反応は、序言の部で特定された種類のアッセイプロトコルもしくは分離プロトコルの一部であり得る。最も典型的な場合では、アフィニティー反応は、一つもしくはそれ以上の反応変数の特性化のためのアッセイの一部である。
典型的なプロトコルにおいて、試料のアナライトの非特性化量は、少なくともアナライトおよびアナライトに対するアフィニティー相手(抗−アナライト)を含むアフィニティー複合体を形成することを可能にする。使用されるプロトコルに依存して、さらに別のアフィニティー反応物を使用し得て、多分複合体の中にまた組み込み得る。反応物の量および型は、関与するアフィニティー反応が、試料中のアナライトの真の結合能力および/もしくは量を反映するであろうアフィニティー複合体の量をもたらすであろうように、選択される。例えば、WO 02075312(Gyros AB)を参照されたい。
微小流体装置の画期的な集積に応用され得る二種類のアッセイプロトコルが主にある。
これらのプロトコルにおいて、アナライトおよびアナライト類似体は、限定量の抗−アナライトに結合するためにお互いに競合しつつある。抗−アナライトは、
(a)もしアナライト類似体が可溶性でありかつ分析的に検出可能であるならば、固定化されるかまたは固定化可能で、そして
(b)もしアナライト類似体が固定化されるかもしくは固定化可能であるならば、分析的に検出可能で、
あり得る。
これらのプロトコルは典型的に、アナライトに対する一つもしくはそれ以上のアフィニティー相手の非限定量を利用する。
用語“分析的に検出可能な”により、測定されるべき複合体の形成に関与する他のアフィニティー反応物から分析的に区別され得るアフィニティー反応物が意図される。検出性は、反応物の生来の性質、例えば、酵素の酵素活性もしくは種々のIg−クラスおよびサブクラスのFc−受容体結合活性のような生来の生物学的機能、または別に導入される官能性、例えば、ビオチン(=アフィニティー標識)、酵素、色素原、蛍光原、蛍光体、化学発光基、放射性基等のような、分析的に検出可能なタグもしくは標識での標識化、から誘導され得る。
形成された複合体はそれ自体で、例えば、溶液の、表面の等の光学的性質を変化することにより、検出可能でまたあり得る。
実験に使用される微小流体装置は円形であって、従来のCD(コンパクトディスク)と同一の寸法を持っていた。この微小流体装置はさらに続けてCDと呼ばれるであろう。CDは、周辺部の近くにそれぞれのグループ(100)について共通の廃液チャネル(112)を持つディスクの中心(回転軸)の周りの環状ゾーンに配置される8個のマイクロチャネル構造(101a〜h)の14個のグループ(100)を含有した。8個のマイクロチャネル構造のグループは図1に示されていて、そして(WO 02075312、Gyros AB)の図1〜2ならびにWO 03024548(US 20030054563)(Gyros AB)およびWO 03024598(US 20030053934)(Gyros AB)の相当する図に図示されているサブグループに似ていて、それと同一な様式で機能する。寸法は、これらの初期の特許出願にあるのと同一のサイズを本質的に持つ。
計器装備
免疫アッセイは自動化システムの中で実施される。システム(レーザー誘起蛍光(LIF)モジュールを備えるGyrolabワークステーション2型試作機器、Gyros AB, Uppsala, Sweden)を、CD−スピナー、微量定量プレート(MTP)用の保持器および5個のシリンジポンプ、2および2、に接続される10個の毛管用の保持器を持つロボットのアームで装備した。毛管の二つは、全ての試薬および緩衝液をMTPからCDの中の二つの共通の入口(105a〜b)のいずれかへ移送した。他の八つの毛管は、個別の試料をMTPからCDの中の別個の個別の入口(107a〜h)へ移送した。
例えば、固体のポリスチレン(PS)粒子(15μm、Dynal Biotech, Oslo, Norway)を固相のために選択した。ビーズをフェニルデキストラン(PheDex)の受動的吸着により修飾して、親水性表面を創製し、そしてストレプトアビジン(免疫純度のストレプトアビジン、Pierce, Perbio Science UK Limited, Cheshire, United Kingdom)とCDAP化学(Kohn & Wilchek, Biochem. Biophys. Res. Commun. 107 (1982), 878-884)を用いて引き続き共有結合的に結合した。多孔性粒子(ビーズ)の形の固相物質は、Superose[登録商標]、Superdex[登録商標]ペプチド(Superdex[登録商標]P)およびSepharose[登録商標]HP(Amersham Biosciences, Uppsala, Sweden)であって、そしてそれらはストレプトアビジンとCDAP化学(フェニルデキストラン被膜無しで)を用いてまた共有結合的に結合させた。ポリスチレン粒子は固体であって非膨潤可能であり、そしてSuperose[登録商標]、Superdex[登録商標]ペプチドおよびSepharose[登録商標]HPは多くのアフィニティー反応物に対して多孔性であって、使用される液体の中で膨潤可能である。
我々のミオグロビンアッセイの捕獲抗体、モノクローナル抗−ミオグロビン8E11.1(LabAS, Tartu, Estonia)をSulfo−NHS−LC−ビオチン(Pierce, prod # 21335, Perbio Science UK Limited, Cheshire, United Kingdom)を用いてビオチン化した。モノクローナル抗ミオグロビン8E11.1のタンパク質濃度は1〜10mg/mlであった。抗−ミオグロビン8E11.1を0.15M NaClを添加した15mMのPBS中でビオチン化試薬の3倍モル過剰と室温で1時間インキュベートした後、反応混合液をNAP−5カラム(Amersham Biosciences, Uppsala, Sweden)もしくはタンパク質脱塩スピンカラム(Protein Desalting Spin Column)(Pierce, # 89849-P, Perbio Science UK Limited, Cheshire, United Kingdom)のいずれかを通してゲルろ過した。ビオチン化抗体を持ってストレプトアビジンで固定化した粒子を装填するために、抗体の0.2〜2mg/mlの濃度(どれだけのストレプトアビジンが充填されたカラムにあるかに依存して)での溶液を、入口(105a〜b)を介して共通の分布チャネルの中に分布して、遠心力により構造を通して移動した。カラムを通る流速を回転速度により制御した(回転流動1)。捕獲抗体をカラムに取り付けた後に、それらを、共通の分布チャネル(入口105aもしくはb)へのPBS(0.01%のTween[登録商標]20を添加した)の添加により一回洗浄して、引き続いて回転工程を行った。
結果
図2bは、異なるベースマトリックスを含む固相を使用することができたことを図示する。使用される濃度について逸脱する唯一のベースマトリックスはPS−PheDexである。
図3は、同一のベースマトリックスであるが異なる濃度の固定化アフィニティーリガンドL(この場合にはストレプトアビジン)と共に含む固相物質を使用することができたことを図示する。さらに大きい結合能力を含む固相を、さらに低い濃度のアナライトが測定されるべきときに一時的に使用する(さらに高い感度)。(グラフ3)について主要ピークの下流に現れる不要に結合した物質を、もし水性イソプロパノール(IPA)での洗浄がプロトコルに含まれていたならば、除去することができた。
本発明の特定の革新的な態様は、付属の請求項にさらに詳細に規定されている。本発明およびその有利性は詳細に記述されてきているけれども、種々の変化、置換および変更が
付属の請求項に規定されているような本発明の精神および範囲から逸脱すること無しに本明細書中でなされ得ることを理解するべきである。さらに、本出願の範囲は、本明細書中で記載されている加工法、機械、製造、物質の成分、手段、方法および工程の特定の実施態様に限定されることを意図していない。当業者は本発明の開示から容易に認識するであろうので、本明細書中で記載されている相当する実施態様と実質的に同一の機能を実施するかもしくは実質的に同一の結果を達成する、現存するかまたは後で開発されるべき、加工法、機械、製造、物質の成分、手段、方法もしくは工程は、本発明にしたがって利用され得る。したがって、付属の請求項は、そのような加工法、機械、製造、物質の成分、手段、方法もしくは工程をそれらの範囲内に含むことを意図する。
Claims (17)
- 複数のマイクロチャネル構造(101a〜h)を一緒に保持する、一つもしくはそれ以上の微小流体装置の集積の使用であって、該マイクロチャネル構造がそれぞれ微小反応空間(104a〜h)を備え、該微小反応空間中には固定化アフィニティーリガンドLを持つ固相があり、該微小反応空間(104a〜h)および固相が複数の極性官能基を露出しているために、その表面が親水性であり、
(i)複数のマイクロチャネル構造が二つもしくはそれ以上の異なるセットのマイクロチャネル構造を備えて、そして
(ii)アフィニティーリガンドLが結合剤Bに向けられていて、結合剤BがリガンドLに対するアフィニティー相手であり、結合剤Bはセットから独立して同一であり、そして
(iii)セットが、
a)微小反応空間当りのリガンドLに対する結合剤Bのアフィニティー結合能力および/もしくは微小反応空間中の固相の単位容積当りの能力、ならびに/または
b)固相のベースマトリックス
に関してセットの間で異なるがそれぞれのセット内では等しい集積の、関与する反応物および/もしくは反応物の添加順ならびに/または反応物が使用される濃度範囲に関して異なる一つもしくはそれ以上のアフィニティープロトコルを別個に実施するための使用;
ここで、当該異なるプロトコルのそれぞれは、(1)溶質S、および(2)(イ)結合剤Bおよび(ロ)溶質Sに対するアフィニティー相手ACSを含む結合体の間のアフィニティー反応を利用するものであり、アフィニティーリガンドLおよび結合剤Bの間の複合体L−−Bの形成におけるアフィニティー定数KL−−B、即ちKL−−B=[L][B]/[L−−B]が最大10−10mole/lである。 - 複合体L−−Bの形成におけるアフィニティー定数KL−−Bが、最大10−11mole/lである、請求項1に記載の集積の使用。
- 請求項1または2に記載の集積の使用であって、
a)少なくとも一つの装置が少なくとも二つのセットのマイクロチャネル構造を備える、および/または
b)少なくとも一つの装置が唯一のセットのマイクロチャネル構造を備え、かつ、集積が、装置が有するセットの種類に関して異なる二つもしくはそれ以上の装置を備えている
ことを特徴とする、集積の使用。 - Lがビオチン結合化合物およびストレプトアビジン結合化合物の中から選択されることを特徴とする、請求項1〜3のいずれか1項に記載の集積の使用。
- Lが二つもしくはそれ以上のBに対する結合部位を有することを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の集積の使用。
- 請求項1〜5のいずれか1項に記載の集積の使用であって、
(a)装置上のそれぞれのセットが流体的に同等なマイクロチャネル構造の一つもしくはそれ以上のグループの中にグループ分けされること、および
(b)それぞれのグループが装置の特定の小区域に位置していること
を特徴とする、集積の使用。 - 請求項1〜6のいずれか1項に記載の集積の使用であって、上流方向の少なくとも一つの当該マイクロチャネル構造(101a〜h)の中の当該微小反応空間(104a〜h)が、容積計量ユニット(106a〜h、108a〜h)に接続されていることを特徴とする、集積の使用。
- 請求項7に記載の集積の使用であって、上流方向の全ての当該マイクロチャネル構造(101a〜h)の中の当該微小反応空間(104a〜h)が、容積計量ユニット(106a〜h、108a〜h)に接続されていることを特徴とする、集積の使用。
- 当該容積計量ユニット(106a〜h、108a〜h)が液体用の入り口装置(102、103a〜h)の部分であることを特徴とする、請求項7〜8のいずれか1項に記載の集積の使用。
- 請求項7〜9のいずれか1項に記載の集積の使用であって、少なくとも一つの当該グループ(複数を含む)(100)内の当該容積計量ユニット(106a〜h、108a〜h)が、グループの微小反応空間(104a〜h)に液体を分布するための分布マニホールドの部分であり、当該少なくとも一つのグループ(100)がそれぞれ、二つもしくはそれ以上のマイクロチャネル構造(101a〜h)を備えることを特徴とする、集積の使用。
- 請求項7〜10のいずれか1項に記載の集積の使用であって、それぞれの当該容積計量ユニット(106a〜h、108a〜h)の内壁が、一旦水性の液体がユニット、およびその出口末端におけるバルブ(109a〜h、110a〜h)に入ったならば毛管現象により当該ユニットが満たされるのに十分な親水性を有することを特徴とする、集積の使用。
- 出口末端におけるバルブ(109a〜h、110a〜h)が、受動性バルブである、請求項11に記載の集積の使用。
- 請求項4〜12のいずれか1項に記載の集積の使用であって、少なくとも一つの結合剤BおよびリガンドLがポリ/オリゴペプチド構造を含むペプチド構造およびタンパク質構造、炭水化物構造、ステロイド構造を含む脂質構造、核酸構造を含むヌクレオチド構造、ならびにポリマー構造の中で選択される構造を含むことを特徴とする、集積の使用。
- 当該固相が乾燥状態にあることを特徴とする、請求項1〜13のいずれか1項に記載の集積の使用。
- 当該固相が一つもしくはそれ以上の床の保存剤を含む、請求項14のいずれか1項に記載の集積の使用。
- 当該一つもしくはそれ以上の床の保存剤の少なくとも一つがマイクロキャビティの密着剤であることを特徴とする、請求項15に記載の集積の使用。
- 水性の試料と接触するマイクロチャネル構造の表面が、複数の極性官能基を露出し、その結果、当該表面は親水性である、請求項1〜16の何れか1項に記載の集積の使用。
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