JP4773150B2 - Ｅｓｉ用カチオン化剤及びそれを用いるｓｅｃ／ｅｓｉｍｓ測定方法 - Google Patents

Description

本発明は、ＥＳＩ法（エレクトロスプレーイオン化法）において、合成高分子化合物等の難イオン化物質を、イオン化するために用いられるカチオン化剤に関する。本発明は、さらに、このカチオン化剤を、ＥＳＩ法によるイオン化に用いることを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法、及びそのＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法を実施するためのＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定装置に関する。

ＭＳ法（質量分析法）は、気体状態のイオンをそのイオンの質量（ｍ）と電荷の（ｚ）比（ｍ/ｚ）により分離し検出する方法であり、非常に高感度であり、分子構造や高分子の分子量分布等に関する情報を得ることができる。又、ＭＳ法とＧＰＣ法（ゲル浸透クロマトグラフィー）との結合は、ＭＳ法単独では充分に達成されにくい、高分子化合物の構造や分子量分布等に関するより詳細な情報を得ることができる優れた分析方法として注目されている（Analytical Chemistry, Vol.71, No.21, November 1, 1999； 非特許文献１）。

ＭＳ法では、測定試料を気体のイオンにする必要があり、そのイオン化の方法としては、ＥＳＩ法（エレクトロスプレーイオン化法）が例示される。この方法は、試料を水、メタノール等の極性溶媒に溶解し、エレクトロスプレー現象で生じた帯電微細液滴が乾燥する過程で、試料分子が電荷を帯びた気体のイオンとなることを利用した方法であり、具体的には、高電圧（〜５ＫＶ）を印加した細い管（内径〜０．１ｍｍ）から試料溶液を送り出すことによりエレクトロスプレー現象を起こし、試料をイオン化する。

試料溶液の送り出しが高流量の場合、エレクトロスプレー現象は起きにくい。そこで、このような場合でもエレクトロスプレー現象を起こし、試料をイオン化するために窒素ガスや空気等の補助ガスによる噴霧が利用される場合もある（イオンスプレ−法）。本発明におけるＥＳＩ法には、この補助ガスによる噴霧を利用する場合も含まれる。

一方、ＥＳＩ法では、極性が低い化合物はイオン化されにくい。そこで、このような難イオン化物質（低極性物質）をＥＳＩ法でイオン化する方法として、ＮａＩ等のアルカリ金属塩を、試料溶液中に適量溶解させエレクトロスプレーを行う方法が知られている（非特許文献１）。このＮａＩ等はカチオン化剤と呼ばれている。

ＮａＩ等の添加により、難イオン化物質であるＰＭＭＡ等の合成高分子化合物もＥＳＩ法でイオン化される。その結果、前記のようなＭＳ法とＧＰＣ法とを結合した方法であるＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ法による分析が可能となった。ＮａＩは、ＧＰＣの移動相であるＴＨＦ（テトラヒドロフラン）に可溶であるので、カチオン化剤として広く用いられている。

Analytical Chemistry, Vol.71, No.21, November 1, 1999（非特許文献１）には、ＮａＩをカチオン化剤として用い、ＰＭＭＡについてＧＰＣ/ＥＳＩＭＳ法で測定した結果が示されている（Ｆｉｇｕｒｅ ２）。しかし、この方法では、高分子量成分になるとより高次の多価イオンが生じやすくなり、スペクトルが複雑になるとの問題があった。なお、高次の多価イオンとは、１分子に付加したＮａ等のイオンの数が多いイオン（分子）を言う。

スペクトルが複雑になると、分子量の推定等の解析が困難になる。そこで、ＥＳＩ法において、高分子量成分についても、高次の多価イオンが生じにくいカチオン化剤が望まれるようになった。

又、質量分析を行う質量分析機のイオン源に、ＮａＩ等の不揮発性の化合物を連続的に大量に導入すると、質量分析部への導入細孔が閉塞しやすいとの問題も見出されている。導入細孔が閉塞すると、感度の低下がおこり、さらには測定不能状態となる場合もある。そこで、不揮発性化合物であるカチオン化剤はできる限り少ないことが望まれ、ＮａＩ等の従来のカチオン化剤の場合と同等以下の使用量であっても、難イオン化物質をイオン化するとの効果が充分発揮されるカチオン化剤が望まれていた。
Analytical Chemistry, Vol.71, No.21, November 1, 1999

本発明は、ＥＳＩ法において、合成高分子化合物等の難イオン化物質をイオン化するために用いられるカチオン化剤であって、高分子量成分についても、高次の多価イオンを生じにくく、又少ない使用量であっても、難イオン化物質をイオン化するとの効果が充分発揮される（その結果、質量分析部への導入細孔の閉塞等の問題を生じにくい）カチオン化剤を提供することを課題とする。本発明は、又、このカチオン化剤を用いるＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）／ＥＳＩＭＳ測定方法であって、スペクトルが複雑とならず、高分子量成分まで分子量の推定等の解析が容易であり、かつ質量分析部への導入細孔の閉塞等の問題を生じにくく、耐久性のあるＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法を提供することを課題とする。

本発明者は、合成高分子化合物等の難イオン化物質のＥＳＩ法によるイオン化に用いられる種々のカチオン化剤について鋭意検討した結果、カチオン化剤として、特定の化合物水溶液を用いることにより、前記の課題が達成されることを見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液であることを特徴とするＥＳＩ用カチオン化剤を提供する（請求項１）。カチオン化剤に水を含むことにより、イオン化が安定して起こり、スキャン毎のスペクトルの再現性、感度、定量性が向上する。
本発明は、又、より好ましい態様として、以下の構成からなるＥＳＩ用カチオン化剤を提供する。

前記溶液が、ＫＣｌ及びＫＯＨから選ばれる少なくとも１種の化合物、又はＮａＯＨ、と水との混合溶液であることを特徴とするＥＳＩ用カチオン化剤（請求項２）。前記のＥＳＩ用カチオン化剤において、中でも、ＮａＯＨと水との混合溶液、又はＫＣｌ及び／又はＫＯＨと水との混合溶液を使用した場合は、高次の多価イオンがより生じにくく、さらに良好なスペクトルが得られる。とりわけ、ＮａＯＨ又はＫＯＨと、水との混合溶液のＥＳＩ用カチオン化剤を用いると、カチオン化の際にアニオン部より生じるＯ_２は、バックグランドスペクトルが少なくなり、良好なスペクトルが得られる傾向があり、さらに、ハロゲン化カリウムのカチオン化の際にアニオン部より生じるハロゲン分子よりも質量分析機器の腐食を低減する傾向があることから好ましい。

前記カチオン化剤が、水と任意の割合で混合する有機溶媒をさらに含むことを特徴とするＥＳＩ用カチオン化剤（請求項３）。
ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液における溶媒としては、水に加えて、水と任意の割合で混合する有機溶媒と水との混合溶媒が好ましい。

ここで、水と任意の割合で混合する有機溶媒としては、ＴＨＦ、アセトニトリル、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、２−メトキシエタノール、アセトン、ジオキサン等が例示される。中でも、ＴＨＦ、アセトニトリル及びメタノールが、ＭＳスペクトルへの妨害が少なく好ましい。これらの溶媒の２種以上と水を混合した混合溶媒を用いてもよい。

前記カチオン化剤が、水を１０重量％以上含むことを特徴とするＥＳＩ用カチオン化剤（請求項４）。
ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液に含まれる水の量としては、１０重量％以上が好ましい。１０重量％以上とすることにより、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、ＣｓＯＨを完全に溶解させることが可能で、又、カチオン化剤添加後の移動相中の水分濃度を好ましい範囲とすることができる。

カチオン化剤添加後の移動相中の水分濃度としては、カチオン化剤が充分に溶解し、かつ水相と試料を溶解した相が分離しない程度の範囲が好ましく、通常、２〜２０重量％程度の範囲が好ましい。２重量％以上とすることにより、イオン化が安定して起こり、スキャン毎のスペクトルの再現性、感度、定量性の向上効果がより大きくなる。又、２０重量％以下とすることにより、試料が高分子で極性が低い場合であっても、水相と高分子溶液との相分離がより充分に抑制されるので好ましい。

前記のＥＳＩ用カチオン化剤において、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの合計の濃度、ＮａＯＨの濃度、ＲｂＯＨの濃度、又は、ＣｓＯＨの濃度が、０．１〜１００ｍＭ／ｌであることを特徴とするＥＳＩ用カチオン化剤（請求項５）。
ＥＳＩ用カチオン化剤において、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの合計の濃度、ＮａＯＨの濃度、ＲｂＯＨの濃度、又は、ＣｓＯＨの濃度を、０．１〜１００ｍＭ／ｌの範囲とすることにより、移動相中のハロゲン化カリウム、ＫＯＨ、ＮａＯＨ、ＲｂＯＨ、ＣｓＯＨの濃度の制御が容易になるので好ましい。

本発明は、さらに前記のＥＳＩ用カチオン化剤を用いることを特徴としたＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法を提供する。すなわち、測定試料をカラムに通液してＳＥＣ分離を行い、カラムより溶出後の試料を含む移動相に、前記ＥＳＩ用カチオン化剤を添加した後、ＥＳＩ法により試料をイオン化し、イオン化された試料の質量分析を行うことを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法である（請求項６）。

ＳＥＣは試料を分子の大きさにより篩い分けるクロマトグラフィーであり、その中では、ＧＰＣが代表的なものとして例示される。請求項７は、この態様に該当するものであり、前記のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法であって、ＳＥＣ分離がＧＰＣ分離であることを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法、すなわちＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法を提供するものである。

請求項６又は請求項７の測定方法では、先ず、測定試料は、ＳＥＣ装置（クロマトグラフ）に注入され、ＳＥＣの移動相に溶解され、移動相の溶液としてＳＥＣカラムに通液される。ＧＰＣの場合移動相としては、ＴＨＦ等が用いられる。ＳＥＣカラムやその他の測定条件等は、通常のＳＥＣ測定と同様な条件を採用することができる。ＳＥＣカラムに通液された試料は、通常のＳＥＣ測定と同様ＳＥＣ分離され、移動相の溶液としてカラムより、先ず高分子量側が溶出し、時間の経過とともに低分子量側が溶出される。溶出された試料は、その全部又は一部がＥＳＩ法によりイオン化され、質量分析される。このようにＳＥＣ分離された試料を質量分析することにより、分子量やその分布に関するより詳細かつ正確な情報を得ることができる。

質量分析前に、試料はＥＳＩ法によりイオン化されるが、本発明では、そのイオン化のためのカチオン化剤として、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液（本発明のＥＳＩ用カチオン化剤）を用いることを特徴とする。試料を溶解した移動相が、ＳＥＣカラムより溶出した後、ＥＳＩ法を行うためのＥＳＩ装置に注入される前に、この移動相に、本発明のＥＳＩ用カチオン化剤は添加され、混合される（ポストカラム添加法）。又は、ＥＳＩ装置内に試料を溶解した移動相と、本発明のＥＳＩ用カチオン化剤が同時に注入されて、ＥＳＩ装置内で両者が混合されてもよい。例えば、非特許文献１のＦｉｇｕｒｅ １に記載されているような噴霧部が３重管構造になっている装置を用い、最内管にカラムからの溶出液、中管に前記溶液（カチオン化剤）、最外管に補助ガスを流して、ＥＳＩ装置内に直接噴霧する方法も採用することができる。この方法によれば、本発明のＥＳＩ用カチオン化剤、すなわち、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液、に溶解しにくい試料についても分析が容易となるので好ましい。

質量分析機のイオン源の、ハロゲン化カリウムやＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、ＣｓＯＨによる汚染を最小限にするためには、本発明のＥＳＩ用カチオン化剤と移動相との混合が、移動相中に試料が含まれている時期にのみ行われることが、好ましい。移動相中に試料が含まれる時期は、ＳＥＣカラムに試料が注入された後、ある程度の時間経過後の一時期に限られるので、この時期のみ前記溶液の混合を行うことが好ましい。

移動相中のハロゲン化カリウム及びＫＯＨの合計の濃度、ＮａＯＨの濃度、ＲｂＯＨの濃度、又は、ＣｓＯＨの濃度としては、１μＭ／ｌ〜１０ｍＭ／ｌの範囲が好ましい。１μＭ/ｌ以上とすることにより難イオン性の高分子量成分のイオン化効果が優れたものとなり、又１０ｍＭ/ｌ以下とすることにより質量分析装置の導入細孔の閉塞が抑制される。特に、１０μＭ／ｌ〜１ｍＭ／ｌの範囲では、これらの効果が顕著でありより好ましい。又、ＥＳＩ装置へ注入される移動相の流速としては、０．１〜２．０ｍｌ／分の範囲が好ましく、この範囲で、感度が高くＳ／Ｎの良いデータが得られる。特に０．１〜０．８ｍｌ／分の範囲では、これらの効果が顕著でありより好ましい。請求項８は、この好ましい態様に該当するものであり、前記のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法であって、本発明のＥＳＩ用カチオン化剤、すなわち、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液を添加後の移動相における、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの合計の濃度、ＮａＯＨの濃度、ＲｂＯＨの濃度、又は、ＣｓＯＨの濃度が、１μＭ／ｌ〜１０ｍＭ／ｌであり、かつＥＳＩ法に供せられる試料を含む移動相の流速が０．１〜２．０ｍｌ／分であることを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法を提供するものである。

本発明のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法は、ＳＥＣ分析が可能であり、かつ分子内にＳ及び／又はＯを含む化合物に適用可能であり、分子量３０００未満の化合物についても分析可能であるが、中でも、従来イオン化が困難とされていた、分子内にＳ及び／又はＯを含む分子量３０００〜２０，０００程度の難イオン化物質、とりわけ、モノマーに由来する構造単位を１０〜１６０有する合成高分子化合物の分析に好適に適用される。このような合成高分子化合物としては、ポリエステル、ポリエーテル、ポリスルフィド、ポリスルホン、ポリエーテルケトン、ポリアミド、エポキシ樹脂、フェノール樹脂、シリコン樹脂、アクリル樹脂、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール等が挙げられる。

本発明のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法において用いられる移動相としては、例えば、ヘキサン、ヘプタン、クロロホルムなどの炭化水素類、テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトニトリルなどのニトリル類、メタノール、エタノール、プロパノールなどのアルコール類、酢酸エチルなどのエステル類などが挙げられる（請求項９）。従来、水との混合溶媒として移動相に用いられていたアセトニトリル類、アルコール類にも、本発明のカチオン化剤を用いての測定に適用することができ、さらに、本発明者らは、炭化水素類、エーテル類、エステル類などの水と十分に混合しない移動相も、カチオン化の直前に前記カチオン化剤と混合されるのであるから、適用可能であることを見出したのである。

本発明は、さらに前記の本発明のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法を行うためのＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定装置も提供する。すなわち、測定試料のＳＥＣ分離を行うＳＥＣ分離装置、前記ＥＳＩ用カチオン化剤の貯槽、該貯槽内のカチオン化剤を、前記ＳＥＣ分離装置より溶出した試料と混合するため送液するカチオン化剤送液手段、前記溶液と混合された試料をイオン化するＥＳＩ装置、及びイオン化された試料の質量分析を行う質量分析装置を有することを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定装置である（請求項１０）。

ここで、ＳＥＣ分離装置は、試料を採取するための手段、例えばオートサンプラ、ＴＨＦ等の移動相の貯槽、移動相をカラムに送液するためのポンプ、移動相に溶解した試料を分子の大きさにより篩い分けるためのカラム等を有する。さらに、ＵＶ検出器、ＲＩ検出器等の検出器を有すると、同時にＳＥＣの測定を行うことができる。

カチオン化剤送液手段は、送液ポンプ等であって、貯槽内のカチオン化剤、すなわち、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液を送液し、ＳＥＣ分離装置より溶出した試料を含む移動相と混合させるためのものである。この混合の方法としては、カラムからの溶出後ＥＳＩ装置へ注入前の移動相に添加して、混合する方法や、前記の３重管等を用いて試料とともにＥＳＩ装置内に噴霧される方法等が挙げられる。

質量分析に必要な試料は、ＳＥＣカラムから溶出される試料に比べて、通常、少量でよい。そこで、溶出された試料の一部のみを質量分析に供するように、ＳＥＣカラムの溶出口とＥＳＩ装置への試料の注入口を繋ぐ配管の途中に、分岐部を設けてもよい。

前記のように、試料がＳＥＣカラムより溶出する時期のみに、カチオン化剤、すなわち、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液の添加、混合を行うことにより質量分析機のイオン源の汚染を最小限にすることができる。そこで、カチオン化剤送液手段が、ＳＥＣ分離装置による試料の採取に基づいて作動することが好ましい。すなわち、試料がＳＥＣカラムより溶出する時期は、オートサンプラ等による試料の採取からある時間経過後の一定の時間に限られるので、この一定の時間にのみ、カチオン化剤送液手段が作動して前記溶液の送液がされるように、カチオン化剤送液手段とオートサンプラ等を連動させ、例えば、採取の一定時間後に送液を開始し、さらにその一定時間後に送液を終了するようにされていることが好ましい。請求項１１は、この好ましい態様に該当する。

本発明のＥＳＩ用カチオン化剤、すなわちハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液を用いてＥＳＩ法を行うと、合成高分子化合物等の高分子量成分についても、高次の多価イオンを生じにくい。一方、少ない使用量であっても、難イオン化物質、例えば合成高分子化合物等をイオン化するとの効果は充分発揮される。従って、このＥＳＩ用カチオン化剤を用いて、ＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行うと、高次の多価イオンを生じにくいので、スペクトルが複雑とならず、高分子量成分まで分子量の推定等の解析を容易にする。又、使用量を少なくできるので、質量分析部への導入細孔の閉塞も生じにくい。すなわち、本発明のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法は、スペクトルが複雑とならず、又質量分析部への導入細孔の閉塞も生じにくいとの効果を有するものであり、合成高分子化合物等の難イオン化物質の分子構造や分子量分布の解析に好適に用いられる。

次に本発明を実施するための最良の形態を説明する。なお、本発明はこの形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を損なわない限り、他の形態への変更も可能である。

図１は、本発明のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法の一例の流れを示すフロー図である。図１の例で行われるＳＥＣ法は、ＧＰＣ法である。ＧＰＣ法を行う部分は、移動相であるＴＨＦの貯槽、この貯槽からオートサンプラ部やＧＰＣカラムへＴＨＦを送液するＧＰＣ用ポンプ部、測定試料を自動的に注入するためのオートサンプラ部、ＧＰＣ分離を行うカラム部及びカラムより溶出された移動相中の試料を検出する検出器からなる。

測定試料、例えばＰＭＭＡ等の合成高分子の溶液は、このオートサンプラ部より注入され、移動相であるＴＨＦに溶解される。試料を、手動で注入する場合は、オートサンプラ部は無くても良い。試料の注入量は測定する試料の分子量、分子量分布により最適な値が異なるため、特にその範囲を限定できないが、通常は、試料濃度はおおむね１ｍｇ／ｍｌから１００ｍｇ／ｍｌ程度の範囲であり、注入量は１００μｌ以下である。

測定試料を溶解したＴＨＦは、オートサンプラ部からカラム部へ通液され、ＧＰＣ分離が行われる。カラムを恒温に維持するためのカラム恒温槽を用いても良く、高温ＧＰＣを行う場合は、専用の恒温槽を用いてもよい。用いられるＧＰＣカラムとしては、流速が０．１ｍｌ/分以上流せる疎水性のカラムであればよく特に限定されない。なお、ＧＰＣ法以外のＳＥＣ法の場合は、カラムは疎水性でない場合もある。カラムの本数も測定の目的に応じて、適宜選択される。

図１の例では、カラム部でＧＰＣ分離された試料を含むＴＨＦ溶液は、検出器に通液され、溶出時間に対する試料の溶出量の変化が測定され、ＧＰＣクロマトグラムが得られる。検出器としては、ＵＶ検出器（ＵＶ−ＶＩＳ検出器）やＲＩ検出器が例示され、そのどちらか一方もしくは両方が使用される。図１の例では、ＵＶ検出器とＲＩ検出器の両方が使用されている。分子量分布に関する情報を得るためには、ＲＩ検出器が使用される。なお、本発明のＳＥＣ／ＥＳＩＭＳ測定方法の実施のためには、ＧＰＣクロマトグラムを得る必要は必ずしもないので、検出器を用いなくてもよい。

図１（ａ）に示される例では、検出器より流出した試料を含むＴＨＦ溶液に、ＫＣｌ水溶液（カチオン化剤）が添加、混合され、その後ＥＳＩ装置に供給される。この例では、ＫＣｌ水溶液が用いられているが、代りにＫＯＨ水溶液等を用いても同様である。図１（ａ）に示すように、この例では、ＫＣｌ水溶液の添加前に試料を含むＴＨＦ溶液の流れは分岐され、この流れの一部のみにＫＣｌ水溶液が添加される。例えば、検出器より流出した試料を含むＴＨＦ溶液の流れ（通常、０．１〜２．０ｍｌ／分程度）を分岐し、０．０１ｍｌ／分程度の流れのみにＫＣｌ水溶液を添加し、ＥＳＩ装置に供給してもよい。又、この分岐は、ＫＣｌ水溶液を添加後に行ってもよい。ただし、ＫＣｌ水溶液を添加後に行う場合は、ＫＣｌ水溶液を多量に必要とする。

図１（ｂ）に示される例では、カラムより溶出した試料を含むＴＨＦ溶液は分岐され、一方のみにＫＣｌ水溶液（カチオン化剤）が添加、混合され、その後ＥＳＩ装置に供給され、分岐された残りが、ＵＶ検出器及びＲＩ検出器に通液される。例えば、カラムより溶出した流れ０．１〜２．０ｍｌ／分程度の中の、０．０１ｍｌ／分程度のみにＫＣｌ水溶液を添加し、ＥＳＩ装置に供給してもよい。

図１の例では、ＫＣｌ水溶液（カチオン化剤）を注入する注入部は、試料溶液をＥＳＩ装置に注入する前に設けられている。注入部は、通常ティーブランチ等により構成され、溶出時間等に応じて、カチオン化剤の注入及び注入の停止を、自在にできるようにされている。このような注入部を用いる代りに、３重管等を用いて、試料溶液、補助ガスとともにＫＣｌ水溶液をＥＳＩ装置内に噴射してもよい。

ＫＣｌ水溶液等のカチオン化剤は、カチオン化剤貯槽（ＫＣｌ水溶液貯槽等）に貯められ、カチオン化剤添加用ポンプ（カチオン化剤送液手段）により前記注入部に送液される。図１に示される装置の例では、カチオン化剤貯槽が３つ設けられており、３種のカチオン化剤をあらかじめセットでき、３種中の任意のカチオン化剤を、任意の時間に任意の量送液できるようにされている。従って、３種までは添加する種類を容易に変更できるので、カチオン化剤の種類の検討等を自動的に行うことも可能である。測定条件について予めプログラムを作成しておくことにより、無人で測定することも可能となる。例えば、３種類のカチオン化剤として、ＫＣｌ水溶液又はＫＯＨ水溶液と本発明に該当しない他のカチオン化剤を用い、本発明の効果を比較例と比較することも容易である。又、ＫＣｌ水溶液又はＫＯＨ水溶液の溶媒やＫＣｌ又はＫＯＨ濃度を種々変更した種類の組合せにより、溶媒の比較や濃度の影響も容易に測定できる。

カチオン化剤添加用ポンプとしては、送液量を任意に変動できるものが好ましく用いられる。このようなポンプを用い、測定初期は添加速度を０ｍｌ／分とし、測定中に添加速度を増加させていくことも可能である。

図１の例では、カチオン化剤添加用ポンプは、オートサンプラ部からの信号に基づき制御される。すなわち、カチオン化剤の送液のコントロールは予めプログラムされており、オートサンプラからのスタート信号（トリガー）に同期してプログラムが開始され、添加のタイミング、送液量がコントロールされる。

ＧＰＣによる分析には、通常、数十分以上を要するが、試料が検出される時間はその半分程度であり、カチオン化剤が必要なのは試料の溶出区間のみである。前記のようにカチオン化剤の添加時間と量を制御することにより、質量分析測定の耐久時間（閉塞が起こるまでの時間）を延ばすことが可能であり、好ましい。従って、本発明の測定方法に用いられる装置としては、カチオン化剤の添加時間と量を任意にコントロール可能な装置が好ましい。なお、送液のコントロールの方法は前記の方法の限りではなく、別途コンピュータを用いる方法も可能である。

ＫＣｌ水溶液（カチオン化剤）が混合された試料溶液は、ＥＳＩ装置に注入されイオン化される。又は、３重管等により、試料とＫＣｌ水溶液が同時にＥＳＩ装置に注入されてもよい。ＥＳＩ法を行うＥＳＩ装置やＥＳＩの条件としては、カチオン化剤の種類やその溶媒の種類等の前記の条件を除いては、補助ガスやカチオン化剤を使用した従来のＥＳＩ法と同様な装置や条件を採用できる。

ＥＳＩ法によりイオン化され、気化された試料は、質量分析機によりＭＳ法（質量分析法）に供せられる。ＭＳ法としては、高分解能が達成されるＦＴＭＳ等も好ましく用いることができる。このようにして、測定試料の分子構造や分子量分布についてのより詳細な測定結果を得ることができる。

次に、本発明の実施例及び比較例を示す。本発明の範囲は実施例により限定されない。

実施例１及び比較例１
［測定試料］
以下の５種のポリマーラボラトリー社製ＧＰＣ用標準ＰＭＭＡのＴＨＦ溶液を得て、（１）：（２）：（３）：（４）：（５）＝１：２：１：１：１の比率（容積比）で混合したものを試料とした
（１） ＰＭＭＡ３１００の２．２ｍｇを２ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（２） ＰＭＭＡ６５４０の５．９１ｍｇを１２ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（３） ＰＭＭＡ９４００の４．３８ｍｇを４ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（４） ＰＭＭＡ１２７００の１１．５７ｍｇを１２ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（５） ＰＭＭＡ２９３００の２．４５ｍｇを２．４ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。

［カチオン化剤］
カチオン化剤（ＫＣｌ水溶液）の調整方法
イオン交換水１００ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）１００ｍｌを混合して混合溶媒を得る。和光純薬製の試薬特級ＫＣｌをイオン交換水に溶解し１００ｍＭ／ｌに調整する。この溶液を、２ｍｌエッペンドルフではかりとり、前記の混合溶媒に加える。得られたＫＣｌ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤とした。

カチオン化剤（ＫＯＨ水溶液）の調整方法
イオン交換水１００ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）１００ｍｌを混合して混合溶媒を得る。和光純薬製の試薬特級ＫＯＨをイオン交換水に溶解し１００ｍＭ／ｌに調整する。この溶液を、２ｍｌエッペンドルフではかりとり、前記の混合溶媒に加える。得られたＫＯＨ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤とした。

カチオン化剤（ＫＩ水溶液）の調整方法
林純薬製の試薬特級ＫＩをイオン交換水に溶解し、１００ｍＭ／ｌに調整した。この溶液を、１ｍｌエッペンドルフではかりとり、１００ｍｌのメタノール（ＭＴＡ）に加える。得られたＫＩ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤とした。

カチオン化剤（ＮａＩ水溶液）の調整方法
林純薬製の試薬特級ＮａＩをイオン交換水に溶解し、１００ｍＭ／ｌに調整した。この溶液を、１ｍｌエッペンドルフではかりとり、１００ｍｌのメタノール（ＭＴＡ）に加える。得られたＮａＩ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤とした。

前記で得られた試料について、前記の各カチオン化剤（ＫＯＨ水溶液又はＫＩ水溶液）を用い、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行った（実施例１）。又、本発明の有効性を示すために、前記のカチオン化剤（ＮａＩ水溶液）を用い、同様な条件でＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行った（比較例１）。

［ＧＰＣ測定条件］
装置： Ａｇｉｌｅｎｔ社製 １１００シリーズＬＣ
カラム： ＴＳＫｇｅｌＳｕｐｅｒＨＺ（４０００×３＋３０００＋２５００×２）
６．０ｍｍφ×１５０ｍｍ
移動相： ＴＨＦ
流速 ： ０．２５ｍｌ／分
試料注入量：２５．０μｌ

［ＥＳＩＭＳ測定条件］
装置： ＨＰ社製、ＬＣ／ＭＳＤ
イオン化法： ＥＳＩ＋
スキャンレンジ（ｍ／ｚ）：３００ｔｏ３０００
スキャン時間：約５秒
スキャンモード：Ｆｕｌｌ
Ｖｃａｐ電圧：５０００Ｖ
Ｆｒａｇｍｅｎｔｏｒ（Ｖ）：４００
乾燥ガス：１００℃、１３．０ｌ／分
霧化ガス圧：３０ｐｓｉ
カチオン化剤のポストカラム添加速度：０．０５ｍｌ／分

［測定結果］
ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定は、図１（ａ）のフローに基づき、各カチオン化剤貯槽に前記の３種のカチオン化剤のそれぞれを入れて行った。又、ＧＰＣより溶出した試料の全量（０．２５ｍｌ／分）を、質量分析（ＥＳＩＭＳ法）に供した。

ＧＰＣ法の測定は、それぞれのカチオン化剤について１回、計４回行った。図２に、それぞれの場合についての、２２０ｎｍのＵＶ検出器によるＧＰＣクロマトグラムを示す（横軸は溶出時間（分））。４回のクロマトグラムは、非常に良く一致しておりＧＰＣ測定の再現性は良好である。従って、同一溶出時間には同一成分が溶出していると判断してよい。

図３に、溶出時間５８分〜６０分間の積算平均スペクトルを示す。同一成分が溶出しているにも関わらず、カチオン化剤の異なる各測定で、スペクトルに違いが見られる。ＮａＩ水溶液添加のスペクトル（図３（ａ））は、ｍ／ｚが小さい側のピークが大きく、一方ＫＣｌ水溶液添加のスペクトル（図３（ｃ））及びＫＯＨ水溶液添加のスペクトル（図３（ｄ））は、ｍ／ｚが大きい側のピークが大きく、ＫＩ水溶液添加のスペクトル（図３（ｂ））はその中間である。ｍ（分子量）は、４回ともほぼ同じと考えられるので、ＮａＩ水溶液添加の場合はｚ（価数）が大きいときに大きなピークが得られ、一方、ＫＣｌ水溶液やＫＯＨ水溶液添加の場合はｚ（価数）が小さいときに大きなピークが得られることが明らかである。すなわち、図３の結果は、ＮａＩ水溶液添加の場合は、高次のイオン（多価イオン）が最も生成しやすく、一方ＫＣｌ水溶液やＫＯＨ水溶液添加の場合は、高次のイオン（多価イオン）が最も生成しにくいことを示している。又、ＮａＩ水溶液添加のスペクトル（図３（ａ））は、ＫＣｌ水溶液やＫＯＨ水溶液添加のスペクトル（図３（ｃ）及び図３（ｄ））と比べて複雑であり、解析が困難であることが示されている。

高次のイオンの生成のしやすさを数値的に比較するため、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳの測定結果に基づき、ＰＭＭＡの分子サイズ（ｎ数）と多価イオンの検出強度（ＭＳクロマトグラムの面積）との関係をグラフにしたものが図４である。

図４より明らかなように、ＮａＩ水溶液添加時の２価イオン（図４（ａ））は、ＭＭＡ２５ユニット程度有する分子が最大強度で検出されているのに対して、ＫＣｌ水溶液添加時は３３ユニット程度の時、ＫＯＨ水溶液添加時は３５ユニット程度の時最大となっている。すなわち、ＮａＩ水溶液添加時２価イオンは１２〜１３ユニットに１個割合でＮａ＋が付加しているのに対して、ＫＣｌ水溶液添加時は１６〜１７ユニットに１個の割合で、ＫＯＨ水溶液添加時は１７〜１８ユニットに１個の割合でＫ＋が付加していることになる。

３価イオン（図４（ｂ））についても、ＮａＩ水溶液添加時は、３８ユニット程度で最大になり１２〜１３ユニットに１個付加しており、一方ＫＣｌ水溶液添加時は５９ユニット程度で最大となり、１９〜２０ユニットに１個付加していることになり、又ＫＯＨ水溶液添加時は６５ユニット程度で最大となり、２１〜２２ユニットに１個付加していることになる。この結果より、ＭＭＡを３５ユニット有する分子を考えたとき、ＮａＩ水溶液を添加した場合は、主として３価イオンが検出され、一方ＫＣｌ水溶液やＫＯＨ水溶液を添加した場合は、２価イオンが主として検出されることになる。従って、ＫＣｌやＫＯＨのほうが高次の多価イオンが生じにくく、その結果高分子量成分まで解析容易となることが、実施例、比較例の結果より明らかである。なお、ＫＩについては、ＮａＩとＫＣｌ又はＫＯＨの中間的な性能を示す。

図５に、溶出時間が５１分から５１．５分（高分子量域）の積算平均スペクトルを示す。ＫＣｌ水溶液やＫＯＨ水溶液添加時はピーク強度が大きく、又ピーク間隔のはっきりしたスペクトルが得られている（図５（ｃ）及び図５（ｄ））が、ＮａＩ水溶液添加時は、ピーク強度が小さく（図５（ａ））、このデータからの各種解析は困難である。ＫＩはその中間的な性能を示している（図５（ｂ））。すなわち、ＮａＩ水溶液添加時は、高分子量域では明確なＭＳスペクトルを得ることが困難であるが、ＫＣｌ水溶液やＫＯＨ水溶液添加時はこのような問題がなく、高分子量域においても解析の容易な測定結果が得られる。

実施例２
下記のカチオン化剤を用いた以外は、実施例１と同様な条件でＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行った。その結果得られたトータルイオンクロマトグラフィーを図６に示す。

カチオン化剤１（ＫＣｌ溶液、水：アセトニトリル＝５：９５）の調整方法
イオン交換水４ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）９５ｍｌを混合して混合溶媒を得る。和光純薬製の試薬特級ＫＣｌをイオン交換水に溶解し１００ｍＭ／ｌに調整する。この溶液を、１ｍｌエッペンドルフではかりとり、前記の混合溶媒に加える。得られたＫＣｌ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤１とした。

カチオン化剤２（ＫＣｌ溶液、水：アセトニトリル＝５０：５０）の調整方法
イオン交換水４９ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）５０ｍｌを混合して混合溶媒を得る。その後は、カチオン化剤１の調整方法と同様にして、ＫＣｌ濃度が１ｍＭ／ｌのカチオン化剤２を得た。

カチオン化剤３（ＫＣｌ溶液、水：アセトニトリル＝９５：５）の調整方法
イオン交換水９４ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）５ｍｌを混合して混合溶媒を得る。その後は、カチオン化剤１の調整方法と同様にして、ＫＣｌ濃度が１ｍＭ／ｌのカチオン化剤３を得た。

溶媒中の水の含有量が１０重量％未満であるカチオン化剤１を用いた場合（図６（ａ））と比べて、溶媒中の水の含有量が１０重量％以上であるカチオン化剤２を用いた場合（図６（ｂ））、又はカチオン化剤３を用いた場合（図６（ｃ））は、図６から明らかなように、トータルイオンクロマトグラフィーの感度が高く且つ滑らかであり、スキャン毎のスペクトルの感度、再現性、定量性が優れている。

実施例３及び比較例２
［測定試料］
以下の５種のポリマーラボラトリー社製ＧＰＣ用標準ＰＭＭＡのＴＨＦ溶液を得て、（１）：（２）：（３）：（４）：（５）＝１：１：１：１：１の比率（容積比）で混合したものを試料とした
（１） ＰＭＭＡ３１００の１．２４ｍｇを１．２ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（２） ＰＭＭＡ６５４０の１．０２ｍｇを１．０ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（３） ＰＭＭＡ９４００の１．０７ｍｇを１．１ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（４） ＰＭＭＡ１２７００の１．５９ｍｇを１．６ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。
（５） ＰＭＭＡ２９３００の１．１６ｍｇを１．２ｍｌのＴＨＦに溶解したもの。

［カチオン化剤］
カチオン化剤（ＮａＯＨ水溶液）の調整方法
イオン交換水１００ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）１００ｍｌを混合して混合溶媒を得る。和光純薬製の試薬特級ＮａＯＨをイオン交換水に溶解し１００ｍＭ／ｌに調整する。この溶液を、２ｍｌエッペンドルフではかりとり、前記の混合溶媒に加える。得られたＮａＯＨ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤とした。

カチオン化剤（ＮａＩ水溶液）の調整方法
イオン交換水１００ｍｌとアセトニトリル（ＡＴＮ）１００ｍｌを混合して混合溶媒を得る。和光純薬製の試薬特級ＮａＩをイオン交換水に溶解し１００ｍＭ／ｌに調整する。この溶液を、２ｍｌエッペンドルフではかりとり、前記の混合溶媒に加える。得られたＮａＩ濃度が１ｍＭ／ｌの溶液をカチオン化剤とした。

前記で得られた試料について、前記の各カチオン化剤を用い、以下に示す測定条件で、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行った。
前記で得られた試料について、カチオン化剤（ＮａＯＨ水溶液）を用い、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行った（実施例３）。又、本発明の有効性を示すために、カチオン化剤（ＮａＩ水溶液）を用い、同様な条件でＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定を行った（比較例２）。

［ＧＰＣ測定条件］
カラムを、ＴＳＫｇｅｌＳｕｐｅｒＨＺ ４．６ｍｍφ×１５０ｍｍ（４０００×４＋３０００＋２５００×２）とした以外は、実施例１と同条件。
［ＥＳＩＭＳ測定条件］
Ｖｃａｐ電圧を４５００Ｖとし、カチオン化剤のポストカラム添加速度を０．０５ｍｌ／分とした以外は、実施例１と同条件。

［測定及び測定結果］
ＧＰＣ法の測定は、実施例１と同様に、それぞれのカチオン化剤について１回、計２回行った。図７に、溶出時間５８分〜５９分間の積算平均スペクトルを示す。実施例１の場合と同様に、同一成分が溶出しているにも関わらず、カチオン化剤の異なる各測定で、スペクトルに違いが見られる。ＮａＩ水溶液添加のスペクトル（図７（ａ））は、ｍ／ｚが小さい側のピークが大きく、一方ＮａＯＨ水溶液添加のスペクトル（図７（ｂ））は、ｍ／ｚが大きい側のピークが大きい。ｍ（分子量）は、両測定ともほぼ同じと考えられるので、ＮａＩ水溶液添加の場合はｚ（価数）が大きいときに大きなピークが得られ、一方、ＮａＯＨ水溶液添加の場合はｚ（価数）が小さいときに大きなピークが得られることが明らかである。すなわち、図７の結果は、ＮａＩ水溶液添加の場合は、高次のイオン（多価イオン）が生成しやすく、一方ＮａＯＨ水溶液添加の場合は、高次のイオン（多価イオン）が生成しにくいことを示している。実施例１におけるＮａＩとＫＯＨの関係と同様に、高次のイオンの生成しやすいＮａＩはＮａＯＨに比べて高分子量成分のスペクトルが複雑になり解析が困難になる。

実施例１に倣い、高次のイオンの生成のしやすさを数値的に比較するため、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳの測定結果に基づき、ＰＭＭＡの分子サイズ（ｎ数）と多価イオンの検出強度（ＭＳクロマトグラムの面積）との関係をグラフにしたものが図８である。図８より明らかなように、ＮａＩ水溶液添加時の３価イオン（図８）は、ＭＭＡ４７ユニット程度を有する分子が最大強度で検出されているのに対して、ＮａＯＨ水溶液添加時は５６ユニット程度の時、最大となっている。すなわち、ＮａＩ水溶液添加時３価イオンは１６〜１７ユニットに１個割合でＮａ^＋が付加しているのに対して、ＮａＯＨ水溶液添加時は１８〜１９ユニットに１個の割合で、Ｎａ＋が付加していることになる。

本発明のＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定の流れを示すフロー図である 実施例１、比較例１で得られたＧＰＣクロマトグラムである。 実施例１、比較例１で得られた、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定により得られたＭＳスペクトルである。 分子サイズと多価イオンの検出強度の関係を示すグラフである。 実施例１、比較例１で得られた、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定により得られたＭＳスペクトルである。 実施例２で得られた、トータルイオンクロマトグラムである。 実施例３、比較例２で得られた、ＧＰＣ／ＥＳＩＭＳ測定により得られたＭＳスペクトルである。 実施例３、比較例２における、分子サイズと多価イオンの検出強度の関係を示すグラフである。

Claims (11)

1. 測定試料をカラムに通液してＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）分離を行い、カラムより溶出後の試料を含む移動相に、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液であるＥＳＩ用カチオン化剤を添加した後、ＥＳＩ法により試料をイオン化し、イオン化された試料の質量分析を行うことを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
2. ＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）分離がＧＰＣ分離であることを特徴とする請求項１に記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
3. 前記ＥＳＩ用カチオン化剤を添加した後の移動相における、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの合計の濃度、ＮａＯＨの濃度、ＲｂＯＨの濃度、又は、ＣｓＯＨの濃度が、１μＭ／ｌ〜１０ｍＭ／ｌであり、かつＥＳＩ法に供せられる試料を含む移動相の流速が０．１〜２．０ｍｌ／分であることを特徴とする請求項１又は請求項２に記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
4. 移動相が、炭化水素類、エーテル類、ニトリル類、アルコール類、エステル類からなる群から選ばれる少なくとも１種の溶媒であることを特徴とする請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
5. 前記溶液が、ＫＣｌ及びＫＯＨから選ばれる少なくとも１種の化合物又はＮａＯＨ、と水との混合溶液であることを特徴とする請求項１ないし請求項４のいずれかに記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
6. 前記ＥＳＩ用カチオン化剤が、水と任意の割合で混合する有機溶媒をさらに含むことを特徴とする請求項１ないし請求項５のいずれかに記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
7. 前記ＥＳＩ用カチオン化剤が、水を１０重量％以上含むことを特徴とする請求項１ないし請求項６のいずれかに記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
8. 前記ＥＳＩ用カチオン化剤におけるハロゲン化カリウム及びＫＯＨの合計の濃度、ＮａＯＨの濃度、ＲｂＯＨの濃度、又は、ＣｓＯＨの濃度が、０．１〜１００ｍＭ／ｌであることを特徴とする請求項１ないし請求項７のいずれかに記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
9. 測定試料のＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）分離を行うＳＥＣ分離装置、ハロゲン化カリウム及びＫＯＨの混合物、ハロゲン化カリウム、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＲｂＯＨ、並びにＣｓＯＨからなる群から選ばれる１種と、水との混合溶液であるＥＳＩ用カチオン化剤の貯槽、該貯槽内のカチオン化剤を、前記ＳＥＣ分離装置より溶出した試料と混合するため送液するカチオン化剤送液手段、前記溶液と混合された試料をイオン化するＥＳＩ装置、及びイオン化された試料の質量分析を行う質量分析装置を有することを特徴とするＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
10. カチオン化剤送液手段が、ＳＥＣ分離装置による試料の採取時期に基づいて作動することを特徴とする請求項９に記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法。
11. 請求項１ないし請求項８のいずれかに記載のＳＥＣ／ＥＳＩ質量分析（ＭＳ）測定方法に用いることを特徴とするＥＳＩ用カチオン化剤。

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